BIOLOGIA MOLECULAR ADN - FORENSE

La introduccin de la biologa como ciencia en el proceso de la investigacin policial y la administracin de justicia, ha redefinido el concepto de prueba del delito, pues esta nunca antes haba sido tan clara y consistente a la horade resolver casos criminales.

Entendiendo a la Biologa como la ciencia de la vida. Esto incluye todos los aspectos de forma, funcin, evolucin, conducta, origen y distribucin de plantas y animales (incluida obviamente la especie humana). Diremos que la Biologa Forense es la aplicacin de este conocimiento cientfico a cualquier contexto legal.

EVIDENCIAS BIOLOGICAS MAS FRECUENTES

Sangre Semen Pelos, plumas y fibras Lquido amnitico, meconio, calostro yunto sebceo Secrecin vaginal, orina y restos fecales Secrecin lacrimal, saliva moco y sudor

INSPECCIONES BIO-CRIMINALISTICAS EN LA ESCENA DEL CRIMEN

Tiene por objeto la bsqueda, fijacin, proteccin, coleccin, recojo y embalaje de la evidenciada naturaleza u origen biolgico, hallado en la escena del crimen, con el propsito de descubrir la identidad del criminal y las circunstancias que concurrieron en el hecho delictuoso.
Campo abierto Interior de inmuebles Va Pblica Vehculos
BUSCANDO FIBRAS

EN MUESTRAS
Tiene por objeto, localizar, recuperar y analizar evidencias de naturaleza u origen biolgico, en muestras de diferente ndole, ya sean hematolgicos, espermatolgicos, tricolgicos, ADN, etc.), en :
En armas o cualquier otro objeto utilizado para perpetrar el delito. Prendas de vestir u otras muestras incriminadas.

TRICOLOGA FORENSE Realiza estudios de identificacin y comparacin de fibras y pelos.

FUNCIN DEL BILOGO FORENSE

Examinar toda evidencia de naturaleza u origen biolgico que es abandonado en la escena del crimen. Identificar lo mejor posible la sustancia biolgica de que se trata. Compararlo con otras sustancias biolgicas semejantes y muestras relacionadas con la vctima o el sospechoso. Formular una hiptesis acerca delas circunstancias que originaron su procedencia, con fines reconstructivos. Determinar quin pudo ser el productor de dicha evidencia biolgica.

Identificando el tipo de Evidencia Biolgica.

Antecedentes
El vertiginoso desarrollo de las tcnicas de identificacin molecular, que empezaron a emplearse en el Reino Unido en 1985 en el mbito civil y dos aos despus en el penal, requieren de un continuo flujo de informacin desde los centros de investigaciones en los que se desarrollan e implementan estas nuevas herramientas, hacia los mbitos judiciales en los que tales herramientas pueden ser empleadas.

 En este Servicio fueron realizadas numerosas investigaciones que condujeron a la resolucin de causas civiles y criminales mediante el empleo de tcnicas moleculares de identificacin de individuos, restos humanos y manchas de fluidos biolgicos. Si bien los estudios de filiacin constituyeron los primeros anlisis efectuados por nuestro Servicio, la preponderancia de casos fue desplazada hacia las identificaciones cadavricas, anlisis de violaciones e identificaciones de rastros, que exhiben en su conjunto un mayor nivel de dificultad analtica.

 El incremento de laboratorios dedicados a la identificacin humana determin, por un lado, cambios en las frecuencia de casos solicitados, por otro, la difusin pblica de este tipo de anlisis determin que a partir de 1998 se produjera un notable incremento de los estudios de filiacin en forma particular.

 La Sociedad Mexicana de Bioqumica ha sido fundada aos atrs, el primero de julio de 1957, por doce visionarios de la ciencia mexicana. Sin embargo, entre ese grupo no haba bilogos moleculares, ms que nada porque la disciplina no haba nacido formalmente en los planes de estudio de las universidades, aunque se considera que su inicio fue en 1953, con el reporte de James Watson y Francis Crick sobre la estructura del cido desoxirribonucleico (DNA).

 En 1957, se estaban realizando los primeros estudios relativos a descifrar el cdigo gentico, por Marshall Nirenberg, Severo Ochoa, y H.G. Khorana, y la estructura de los ribosomas y el ARN (cido ribonucleico) ribosomal, mensajero, y de transferencia, por Masayasu Nomura, entre otros muchos; as como las primeras descripciones del modo de replicacin del DNA por Matthew Meselson y Frank Stahl.

A qu se molecular?

denominan

biologa

La biologa molecular nace formalmente en 1953.

En esencia, la biologa molecular busca entender la vida a travs de los complejos mecanismos por los cuales el DNA codifica y expresa las protenas apropiadas, en las cantidades apropiadas, en los tipos celulares apropiados que determinan un fenotipo. Esta visin ha incluido posteriormente el mejor entendimiento de la estructura de las protenas, del DNA, y de los cidos ribonucleicos (ARN) y de su interaccin con otras molculas, ya sean protenas, ARN, o DNA, todo lo cual tambin determina los diferentes fenotipos.

 La biologa molecular provee una visin sobre cmo conceptualizar un fenmeno biolgico, y esta visin ahora se ha extendido al estudio no slo de genes individuales, sino a la mejor comprensin de la organizacin de todo el conjunto de genes de un organismo. En la actualidad, la biologa molecular es de importancia central para el mejor entendimiento de las interacciones que ocurren en poblaciones de organismos, ya sea entre ellos o con el ambiente que les rodea, o ambos.

En que se fundamenta
De especial importancia son las bases de datos de ADN con fines de investigacin criminal, en las que los perfiles de ADN annimos obtenidos de vestigios biolgicos de la escena del delito pueden ser comparados de forma sistemtica entre s, as como con los obtenidos de individuos que son sospechosos o condenados en una causa penal, ofreciendo una herramienta muy eficaz de identificacin humana con una alta potencialidad para reducir el ndice de criminalidad de determinados delitos sin autor conocido y, especialmente, aquellos en los que existe una alta reincidencia.

 La utilizacin de estas bases de datos cobra tambin una vital importancia en los procesos de identificacin de desaparecidos en conflictos blicos o en grandes catstrofes que afectan a un gran nmero de vctimas cuyo estado de conservacin puede limitar, o incluso imposibilitar, la identificacin de los cuerpos por los mtodos forenses convencionales. Los perfiles genticos obtenidos pueden ser comparados de forma sistemtica con un ndice de perfiles de referencia de familiares (saliva o sangre), u obtenidos de muestras ante-mortem de las vctimas (Cepillos de dientes, peines,...).

Qu es un perfil gentico? cmo se obtiene? para qu se utiliza en la investigacin forense? qu fiabilidad tiene la identificacin mediante el ADN? o quin realiza esta prueba en nuestro pas?

 Un perfil gentico no es ms que un patrn de fragmentos cortos de ADN ordenados de acuerdo a su tamao que son caractersticos de cada individuo. Dicho patrn es fcilmente convertible en un sencillo cdigo numrico muy fcil de almacenar y comparar con un alto poder de discriminacin. La mayora de los perfiles de ADN que se obtienen en los laboratorios forenses se basan en el estudio simultneo de un conjunto de 10 a 17 regiones cortas del ADN nuclear, denominadas Short Tandem Repeats (STRs), que estn distribuidas en los distintos cromosomas humanos

Cules son los pasos del anlisis y las tcnicas moleculares empleadas?
En principio se denomina as a todas las tcnicas de laboratorio que se usan para aislar ADN o extraerlo en alta pureza. En la actualidad, habindose realizado ms de 4.000 estudios de identificacin, tanto en el mbito civil como penal, el SHDG aporta a la comunidad forense las bases de datos de referencia para los marcadores genticos ms empleados en la actualidad. Esta contribucin hace posible disponer de datos para las diferentes regiones y provincias de nuestro pas, proporcionando adems informacin relevante potencialmente aplicable en estudios de antropologa molecular.
SHDG: Servicio de huellas digitales Facultad de farmacia y Bioqumica .

 Tras la recogida de las muestras y el envo al laboratorio, los genetistas forenses proceden a la obtencin de los perfiles genticos de las muestras debitadas (sangre, semen, saliva, orina, pelos, tejidos, restos celulares en objetos usados o tocados...) y las muestras de referencia (normalmente una toma bucal mediante hisopo o una muestra de sangre) utilizando los siguientes procedimientos:

 Separacin por electroforesis y deteccin de los segmentos de ADN marcados generados mediante PCR. Comparacin de los perfiles genticos obtenidos e interpretacin de los resultados.

Qu es un polimorfismo de repeticiones cortas en tndem (STR)?

La mayora de nuestro ADN es idntico al de otras personas. Sin embargo, hay regiones heredadas de nuestro ADN que pueden variar de una a otra persona. Las variaciones de la secuencia del ADN entre individuos se denominan "polimorfismos". Como descubriremos en esta Actividad, las secuencias con grado mximo de polimorfismo son muy tiles para el anlisis de ADN en casos de medicina legal y en pruebas de paternidad. Esta Actividad se basa en analizar la herencia de un tipo de polimorfismos de ADN conocido como "repeticiones cortas en tndem" o, de forma abreviada, STR (del ingls Short Tandem Repeats).

 Las STR son secuencias cortas de ADN, normalmente con una longitud de 2 a 5 pares de bases, que se repiten muchas veces de forma consecutiva, cabeza con cola; por ejemplo, la secuencia de 16 pb "gatagatagatagata" representara 4 copias dispuestas cabeza con cola del tetrmero "gata". Los polimorfismos en STR se deben al distinto nmero de copias del elemento repetido que puede aparecer en una poblacin de individuos.

LA TECNICA PCR

La tcnica PCR es el mtodo de deteccin de secuencias de ADN ms sensible conocido hasta la fecha: mediante ella resulta posible identificar un gen a partir de un solo cabello, una clula somtica o un espermatozoide.

Thermus aquaticus: Bacteria termfila , es una bacteria Gramnegativa , aerobia y heterotrofa. Vive elementalmente a 50 y 80 C.

Figura 1. Para lograr la duplicacin de un tramo de ADN, cada ciclo de la tcnica PCR incluye tres etapas: a) desnaturalizacin, durante la cual se separan las dos hebras constituyentes del ADN; b) apareamiento de los "iniciadores" o primers del tramo a replicar; c) extensin de las cadenas de primers gracias a la accin de una enzima ADN polimerasa. La repeticin de los ciclos permite multiplicar geomtricamente los tramos de ADN elegidos. * Posee un error de 1 cada 9.000 nucletidos .

PROBLEMAS DE LA TCNICA PCR

Uno de los problemas ms evidentes que presenta esta tcnica, es cuando se es utilizada como herramienta de diagnstico, es la posible generacin de resultados falsamente positivos. Podra llegar a indicar, por ejemplo, la presencia de secuencias virales en personas no infectadas.

 Esto es consecuencia de la extrema sensibilidad del mtodo. Los falsos positivos pueden generarse por contaminacin de una muestra a partir de una nica molcula de ADN proveniente de otra muestra. Esta molcula ser amplificada en la PCR y aparecer como una banda en el caso de electroforesis en gel o como una respuesta positiva en una hibridacin con una sonda radiactiva. La causa ms frecuente de falsos positivos es el "arrastre" de secuencias de ADN amplificadas en reacciones previas.

 Tales secuencias pueden estar presentes en los equipos de laboratorio y en los reactivos, pudiendo esparcirse por medio de aerosoles. Frente a esto, los expertos recomiendan la realizacin de controles negativos mltiples (reacciones de amplificacin con todos los reactivos, excepto el ADN molde), adems del uso de tcnicas de esterilidad y de micro-pipetas que eviten la generacin de aerosoles como precaucin para prevenir la contaminacin de las muestras.

Ventajas de la Biologa molecular

Una de las grandes ventajas de la Biologa Molecular es que nos permite reconstruir la evolucin de los organismos actuales, las relaciones de unos con otros y con tanto detalle como se quiera; lo nico que hace falta es invertir el dinero y el esfuerzo necesario.

 Es decir, las ventajas de la Biologa Molecular son muchas y una de ellas es que es cuantificable: comparativa entre especies. Y otra es la universalidad, no hay rasgos anatmicos con los que se puedan comparar, por ejemplo, las levaduras, los insectos y los humanos y, sin embargo, con las molculas si se puede hacer. Y la tercera ventaja es la multiplicidad, que hay muchos genes, muchas protenas, miles y, entonces, si uno estudia un gen o una protena para reconstruir un rbol genealgico, una filogenia, y no obtiene la precisin deseada, entonces puede estudiar otro gen ms, etctera, hasta llegar a la resolucin correcta.

 Se realizan exmenes en posibles manchas de sangre y muestras sanguneas, determinando: La naturaleza biolgica? Origen humano? Tipificacin por sistemas de grupos sanguneos? Anlisis de la morfologa y patrones de las manchas sanguneas. Los perfiles de ADN son analizados con sistemas de identificacin gentica de ms alto nivel usando 16 marcadores genticos diferentes en procedimientos de identificacin.

 El anlisis reconstructivo se lleva acabo en base al

estudio de la morfologa de las manchas de sangre anlisis reconstructivo. En: La naturaleza biolgica de manchas? Origen humano? Estudio anormalidades de la morfologa de y otros con fines de identificacin. Tipificacin por antgenos secretores ABO.

Precio y tiempo de entrega de este estudio

Los resultados estarn disponibles dentro de 5 das laborales desde la llegada de las muestras al laboratorio.

La toma de muestra se realiza de un exudado oral y/o una pequea puncin en el dedo pulgar (misma que les aplican en un estudio de glucosa), pues 6 gotas de sangre son suficientes para realizar este tipo de estudio.

 Cantidad y descripcin precio unitario m/n: En paternidad legal y bsqueda de ADN anlisis de morfologa y patrones de las manchas sanguneas, e identificacin de secreciones nasales, salival, sudor, heces y otros. $12,000.00 condiciones.

Por cada muestra extra, el costo aumenta $3,900.00 ms. Condiciones de pago son del 25% al momento de darle es cuestionario y el nombramiento del perito el otro 25% a la protesta del cargo en el juzgado y el 25% restantes en la toma de muestra y el otro 25% a la entrega del peritaje y ratificacin del mismo.

BIBLIOGRAFIA
http://www.bmbq.uma.es/lbbv/index_archivos/presentbiotec/6-PCR-6.pdf http://www.sebbm.es/ES/divulgacion-ciencia-para-todos_10/adn-forense-investigacion-criminal-y-busqueda-de-desaparecidos_604 http://elespiritudelchemin.wordpress.com/2011/08/22/una-de-las-grandes-ventajasde-la-biologia-molecular-es-que-nos-permite-reconstruir-la-evolucion-de-losorganismos-actuales-las-relaciones-de-unos-con-otros-y-con-tanto-detalle-como-sequiera-lo-uni/

http://www.izt.uam.mx/cosmosecm/BIOLOGIA_MOLECULAR.html
http://www.youtube.com/watch?feature=player_embedded&v=Kuy4PDb6bdU http://genmolecular.wordpress.com/principios-de-biologia-molecular/

http://www.cienciahoy.org.ar/hoy23/reaccion.htm
http://www.diariodeciencias.com.ar/?idpost=679&seccion=noticias http://genmolecular.com/tecnicas-de-biologia-molecular/