ESPOL

ENSAYO DE EFICACIA PARA EL CONTROL DE CARACOL Pomacea canaliculata EN EL CULTIVO DE ARROZ BAJO TRANSPLANTE CON EL MOLUSQUICIDA COBRE QUELATADO, EN LA ZONA DE PALESTINA, PROVINCIA DEL GUAYAS. Tcnicos responsables: Agrocalidad: ESPOL: BOECKCORP Imelda Felix Vctor Osorio, Nelson Ramos, Ricardo Gonzlez-Rubio

Junio, 2012

PROTOCOLO PARA ENSAYOS DE EFICACIA DE PLAGUICIDAS ENSAYO DE EFICACIA PARA EL CONTROL DE CARACOL Pomacea canaliculata EN EL CULTIVO DE ARROZ BAJO TRANSPLANTE CON COBRE QUELATADO, EN LA ZONA DE PALESTINA, PROVINCIA DEL GUAYAS. ANTECEDENTES En el Ecuador, anualmente se siembran ms de 300 000 Has de arroz, principalmente en las provincias de Guayas y Los Ros, aunque tambin se lo encuentra en Manab, El Oro, Loja y Caar. La mayora de agricultores arroceros son pequeos ya que siembran menos de 25 Has, le promedio de rendimiento nacional se encuentra alrededor de 4 TN/Ha. Del caracol manzana o simplemente caracol, Pomacea canaliculata, se tienen los primeros reportes en el 2008, hoy se encuentra afectando todas las reas arroceras bajo riego del Ecuador. Sin control el dao causado por esta plaga es muy alto pudiendo reducir el rendimiento en ms del 50%. El momento crtico en que el caracol afecta al cultivo es desde la siembra o trasplante hasta 30 das despus segn la zona debido a que la preparacin de la tierra y de control de la maleza limita la disponibilidad de fuentes alternativas del alimento para este. El caracol, tiene la capacidad de permanecer inactivo (enterrado) cuando las condiciones llegan a ser desfavorables y cuando las parcelas de arroz se drenan antes de cosecha, una proporcin significativa del caracol se entierra en el suelo y la supervivencia hasta la estacin siguiente del arroz puede ser superior al 45%. Para el control de la plaga, en su desesperacin, los agricultores utilizan una serie de plaguicidas y qumicos que pueden ser muy txicos para el ambiente y para las personas. De ah se desprende la importancia de ofrecer a los agricultores alternativas de manejo de la plaga de bajo impacto ambiental y sustentable. Debido a su caracterstica de letalidad para los moluscos, el cobre ha sido uno de los elementos utilizados para controlar esta plaga en otros pases y el sulfato de cobre (Anderson y Taylor, 1926) ha sido el compuesto qumico conteniendo este ion que ms se ha utilizado para el control de caracoles. La eficiencia en el control del caracol utilizando este qumico es altamente variable, y es influenciado por las caractersticas qumicas del agua, la materia orgnica, y la turbiedad. Adicionalmente, el cobre presente en este compuesto se precipita rpidamente y se acumula en el suelo y si el agua contiene una alta concentracin de iones carbonato, los iones de cobre se combinarn con estos y formarn un precipitado insoluble del carbonato de cobre. Este precipitado se hunde al fondo del cuerpo del agua donde forma un limo txico; la formacin de este precipitado adems hace que el cobre sea inasequible para el control del caracol. Para compensar, niveles ms altos del sulfato de cobre se utilizan los que adicionalmente pueden amenazar seriamente la vida acutica. Un alternativa al sulfato de cobre es requerido urgentemente para ofrecer a los agricultores una alternativa que no dae el suelo y que pueda eliminar el caracol y sus huevos. Estudios conducidos para identificar los mollusquicidas eficaces para el control del caracol, y cuantificar su toxicidad y actividad residual a corto plazo bajo condiciones similares a las encontradas en cultivos comerciales del arroz sealaron que quelatos de cobre (compuestos orgnicos conteniendo cobre) pueden ser eficaces en controlar las poblaciones de caracoles a concentraciones que no causen daos al suelo. La quelatacin es la habilidad de un compuesto qumico para formar una estructura en anillo con un ion metlico resultando en un compuesto con propiedades qumicas diferentes a las del metal original. (El quelante impide que el metal siga sus

reacciones qumicas normales). El nombre Quelato (en ingles "Chelate") se deriva de la palabra griega "Chela", que significa Pinza, porque el anillo que se forma entre el quelante y el metal es similar en apariencia a los brazos de un cangrejo con el metal en sus pinzas. Cuando un ligando reemplaza las molculas de agua y rodea un in, las propiedades del in metlico cambian. Cuando molculas de un quelante rodean un in de Cobre Hidratado, ellas reemplazan las molculas de agua y forman anillos quelatados evitando la formacin de Hidrxido Cprico que es insoluble. La Facultad de Ingeniera Martima, Ciencias Biolgicas, Ocenicas y Recursos Naturales (FIMCBOR) de la ESPOL; en alianza con la empresa BOECKCORP comenz, a partir de mayo del presente ao, a realizar estudios tendientes a demostrar la viabilidad de uso de cobre quelatado.

Estudios preliminares Durante el mes de mayo del 2012 se realizaron aplicaciones de quelato de cobre liquido en piscinas de arroz infestadas con caracoles manzana en la hacienda La Esmeralda localizada en la Parroquia Taura en la provincia del Guayas. Los primeros ensayos dieron resultados muy positivos que se describen a continuacin: El quelato causa una severa deshidratacin en el caracol que lo lleva a la muerte (figura 1)

Fig 1. Efecto del quelato en el caracol

El producto fue aplicado un da antes de la siembra utilizando una bomba de fumigacin agrcola en la que se mezclo 2 litros de quelato y 18 litros de agua, (figura 2).

Fig. 2: Aplicacin de quelato, mayo 31 del 2012

Reaccionando a la presencia del producto en el agua, el caracol sali de su refugio en el fondo de la piscina y por efectos del viento fue acumulndose en los muros de la piscina de cultivo. (Figura 3)

Fig. 3: Reaccin del caracol al quelato

Una vez que el caracol se acumul en la orilla de la piscina, fue muy fcil removerlo manualmente utilizando una red de pesca denominada localmente chayo. Figura 4. En este caso fue posible remover aproximadamente mil libras de caracol de una piscina de media hectrea.

Fig. 4: Recoleccin manual de caracol al da siguiente de la aplicacin

Los resultados preliminares obtenidos demostraron claramente la eficacia del quelato de cobre en el control de caracol por los que se requera del desarrollo de un protocolo formal para validarlos. En el mes de junio solicitamos al MAGAP nos incluyera dentro del programa de evaluacin de qumicos para el control del caracol manzana y a inicios del mes de Julio del presente ao, luego de haber sido admitidos programa antes mencionado, contando con el apoyo del productor arrocero Ing. Jacques Carchi y bajo la supervisin de AGROCALIDAD iniciamos experimentos de campo y en laboratorio para determinar la eficacia, dosis y modo de aplicacin de cobre quelatado para el control de los caracoles y de las posturas de huevos de los mismos. Siguiendo el protocolo establecido por AGROALIDAD para estos ensayos, se construyeron 20 parcelas experimentales de 300 metros cuadrados cada una como se muestra a continuacin (figura 5):

Fig. 5: Vista parcial de piscinas experimentales A. CONDICIONES EXPERIMENTALES

1.

Objetivos

Evaluar la eficacia del producto Cobre Quelatado para el control del caracol manzana Pomacea canaliculata en el cultivo de arroz (Oryza sativa) bajo el sistema de siembra por trasplante. Encontrar la dosis adecuada de control del caracol con el producto Cobre Quelatado Evaluar la eficacia del producto en la eliminacin paulatina de la plaga cortando el ciclo de la misma al interrumpir el desarrollo embrionario mediante la aplicacin del producto en los huevos de caracol que se encuentran en los bordes de las piscinas experimentales. Seleccin del cultivo y cultivar

2.

El presente ensayo se realizar en un cultivo de arroz (Oryza sativa) variedad Iniap 14, cultivado bajo sistema de trasplante.

3.

Identificacin de la plaga Mollusca Gastropoda Prosobranchia Mesogastropoda Ampullariidae Pomacea canaliculata (Lamarck, 1822).

Phylum: Clase: Sub clase: Orden: Familia: Gnero: Especia: 4.

Biologa de la plaga

Pomacea canaliculata, conocido como caracol manzana, es originario de Amrica del Sur y fue introducido a Asia como una potencial fuente de alimento para humanos. La invasin de P. canaliculata en toda Asia durante las ltimas dcadas fue intensa (Musman, 2010). Para el control de la plaga en Asia se probaron molusquicidas sintticos como metaldehdos y niclosamidas, desafortunadamente, estas sustancias sintticas contaminan cuerpos de agua causando muerte de peces y vida silvestre. Los avances en control de la plaga consisten en el uso de molusqiuicidas naturales, se han identificado sustancias provenientes de plantas con actividad molusquicida como las saponinas, taninos, alcaloides y flavonoides (Musman, 2010). 4.1 Comportamiento

P. caniculata, puede sobrevivir enterrado en el suelo por varias semanas, sale del suelo solo para alimentarse, reproducirse y ovipositar. Cuando sale del suelo, le es favorable temperaturas ambientales y del agua moderadas, que haya lmina de agua y tejido vegetal tierno y suculento. Las horas en que ms se lo encuentra son entre las 8 y 10 horas del da cuando las temperaturas ambientales y del agua son moderadxas y entre las 17 y 18 horas por la tarde. Es comn tambin encintrarlos en grandes cantidades en los canales de riego y drenaje, especialmente si estos no son debidamente mantenidos libres de malezas. 4.2 Daos

Caracoles jvenes con una concha de 1.5 a 1.6 cm se alimenta de macollos pequeos, los adultos con conchas de 5 cm pueden ingerir de 7 a 24 macollos por da. El nmero de macollos consumidos es proporcional con el tamao de la concha de los caracoles. El dao es proporcional tambin con la densidad poblacional: 0,5 caracoles por m2 causan 6,5% de prdida de golpes; 8,0 caracoles por m2 causan una prdida de 93% de golpes (los golpes estn compuestos por 4 o 6 hebras de arroz trasplantadas en un sitio) (Halwart, 1994). 4.3 Ciclo de vida

Su ciclo de vida consta de tres estados: huevo, pre adulto y adulto. Los huevos son puestos temprano en la maana o al atardecer, son colocados en partes altas dentro o fuera del cultivo, son de color rosa y una hembra puede ovipositar de 1000 a 1200 huevos por vez en forma de agregados. Al eclosionar los caracoles neonatos comen algas pequeas o detritus orgnicos. Cuando su caparazn mide 1,5 cm se empiezan a alimentar de tejidos de arroz. Cuando adultos, los caracoles tienen sexos separados mismos que se diferencian por la curva del oprculo. Las hembras alcanzan madurez sexual entre 60 a 85 das despus de la eclosin y se reproduce a intervalos semanales durante todo el ao (Halwart, 1994). 5. Condiciones del experimento

Se trabaj a campo abierto, en un cultivo de arroz de la variedad Iniap 14, manejado bajo el sistema de trasplante. El ciclo anterior tambin se cultiv arroz en el mismo lugar. Se registr adicionalmente problemas fitosanitarios as como la fertilizacin utilizada y las labores culturales realizadas. 5.1 Caractersticas edficas del sitio del experimento Textura: pH: Materia orgnica: Nitrgeno (NH4): Fsforo: Potasio: Calcio: Magnesio: Cobre Arcillosa 6.6 (Lac) 1, 44% 38 ug/ml 9 ug/ml 213 ug/ml 3142 ug/ml 586 ug/ml 6.6 ug/ml

5.2

Manejo de cultivo 18 a 20 plantas/m2 Lmina permanente de 2 a 4 cm 100 Kg/Ha de sulfato de potasio + 300 Kg/Ha de rea Herbicida pre emergente butaclor, dosis 3 litros/Ha.

Densidad de trasplante: Riegos: Fertilizacin edfica: Control de malezas: 6.

Ubicacin geogrfica y caractersticas agroecolgicas

Los datos correspondientes al sitio mismo del ensayo son lo siguientes: Provincia: Cantn: Sector: 7. Guayas Balzar Santa Mara

Diseo del experimento

Se utiliz un diseo de bloques completos al azar con 5 tratamientos y 4 repeticiones. Para la separacin de medias se utiliz la prueba de Tukey al 5%. 7.1 Tamao de la parcela

El rea total destinada para esta investigacin fue un lote completo (piscina) de 1 Ha, cada unidad experimental tuvo un rea de 300 metros cuadrados debidamente delimitados por muros o parrillas previamente realizadas como se muestra en la figura a continuacin.

Detalle de piscina experimental 7.2 Esquema del anlisis de varianza Grados de libertad (g.l) 4 3 12 19

Fuentes de variacin (F.V) Tratamientos Repeticiones Error Total B.

APLICACIN DE LOS TRATAMIENTOS 1. Producto que se prueba

Nombre comercial: Ingrediente activo Nombre qumico: Frmula emprica: Formulacin: Concentracin: Modo de accin: Mecanismo de accin: Fabricante Importador Pas de origen 2. Ecuador In Cobre Cobre quelatado Cobre quelatado Cobre quelatado 6% del ion cobre Por contacto Intoxicacin or cobre BOECKCORP

Eleccin del producto de referencia

No se utiliz ningn producto de referencia, para verificar el efecto de los tratamientos se utiliz un testigo absoluto.

3.

Modo de aplicacin

La aplicacin del quelato de cobre cumple con dos objetivos: - Primero: eliminar los caracoles para que el arroz sea cultivado con el mnimo de contratiempos y - Segundo; la eliminacin paulatina de la plaga cortando el ciclo de la misma al interrumpir el desarrollo embrionario mediante la aplicacin del producto en los huevos de caracol que generalmente se encuentran en los bordes de las piscinas y canales. Para la eliminacin del caracol en las piscinas de cultivo, el producto fue aplicado en dos fases de la siguiente manera: Primera fase: Utilizando el procedimiento normal de preparacin de la piscina que implica el inundarla para aflojar el suelo se aplic el producto en presencia de una lamina de agua no mayor a 10 cm utilizando para el efecto una bomba de mochila. El producto se dej actuar por 24 horas y luego se procedi a drenar el agua. Segunda fase: Una vez drenada la piscina la accin del producto fue evidente y se observ que los caracoles estaban fuera del lodo o flotando en los charcos y se procedi a realizar la segunda aplicacin, concentrndose en las pozas, reas en donde se observe presencia de caracoles y en el drenaje de las piscinas. El arroz fue sembrado inmediatamente despus de la segunda fase. Debido al hbito de la plaga de enterrarse en el suelo y salir en horas frescas del da a alimentarse y reproducirse en presencia de lmina de agua, el quelato de cobre fue asperjado temprano en la maana; hora en que la actividad de los caracoles es mayor 3.1 Tipo de aplicacin

Le producto cobre quelatado fue asperjado utilizando una bomba manual de 20 litros, con boquilla tipo abanico roja, con una descarga de 40 litros/Ha y dirigiendo la aspersin hacia el suelo. 3.2 Tipo de equipo usado

Bomba de mochila manual de 20 litros con boquilla tipo abanico roja. 3.3 Momento y frecuencia de la aplicacin

Como fuera mencionado anteriormente, la aplicacin del producto se realiza en dos dosis; la primera un da antes del trasplante sobre una lmina de agua constante de mximo 10 cm de profundidad, y la segunda el da del trasplante: Las aplicaciones y evaluaciones de eficacia cumplieron el cronograma citado en el Cuadro 1. Cuadro 1. Cronograma de actividades a realizar en el ensayo Actividades Establecimiento de lmina de agua (10 cm) Aplicacin de primera dosis del producto Aplicacin de segunda dosis del producto y Trasplante Evaluacin caracoles vivos y muertos Evaluacin del nivel de dao sobre el Das respecto al trasplante (trasplante = da 0) -2 -1 0 +3 +10 +20 X X X X X

cultivo Evaluacin del nivel de dao sobre el cultivo 3.4 Dosis y volmenes

Cuadro 2. Dosis de aplicacin del producto cobre quelatado en el presente ensayo Tratamiento 1 2 3 4 5 * PC: producto comercial **i.a.: ingrediente activo Producto a utilizar cobre quelatado cobre quelatado cobre quelatado cobre quelatado Testigo absoluto Dosis de PC* 10 litros/Ha 8 litros/Ha 6 litros/Ha 4 litros/Ha i.a.** 600 g/Ha 480 g/Ha 360 g/Ha 240 g/Ha -

C. 1.

MODO DE EVALUACION, DE REGISTRO DE DATOS Y DE MEDICIONES Mtodo, momento y frecuencia de la evaluacin

1.1 Mtodo De conformidad a lo establecido en el protocolo; el 17 de julio (tres das despus del trasplante) se realiz la evaluacin de los caracoles vivos y muertos presentes en cada una de las piscinas. El procedimiento de muestro fue el siguiente: se construyeron dos cuadrados de 1 metro cuadrado de rea (1m x 1m) los que fueron arrojados aleatoriamente en la piscina muestreada luego de lo cual un operador recolect todos los caracoles presentes tanto en la superficie como en el lodo (escarbando con las manos en este ltimo) en el rea de muestreo. Los caracoles recolectados fueron colocados en fundas plsticas individuales y entregados al tcnico quien bajo la supervisin del delegado de AGROCALIDAD determino los vivos y muertos. En caso de caracoles que no mostraban movimiento y para descartar falsos positivos se mantuvo los organismos en observacin hasta determinar con total certeza su estado. Los resultados obtenidos luego del procedimiento de muestreo se muestran a continuacin: Datos de muestreo de caracol el 17 de julio del 2012 Parcela. Experime ntal P 08 P 09 P 12 P 13 Muerto s 1 0 1 3 5 18% 6 3 0 3 12 41% 2 7 2 2 13 57% 1 3 2 3 9 32%

Tratamiento Control Control Control Control

Total 3 4 11 10 28

Vivos 2 4 10 La unidad experimental tena agua 7 23 82% 2 3 8 4 17 59% 2 1 2 5 10 43% 4 4 8 3 19 68%

P 04 P 05 P 11 P 18

T1 T1 T1 T1

8 6 8 7 29 4 8 4 7 23 5 7 10 6 28

La unidad experimental tena agua

P 06 P 14 P 16 P 19

T2 T2 T2 T2

Caracoles vivos capturados enagua

P 01 P 02 P 15 P 20

T3 T3 T3 T3

P 03 P 07 P 10 P 17

T4 T4 T4 T4

9 3 4 9 25

2 1 0 0 3 12%

7 2 4 9 22 88%

El efecto del producto sobre las poblaciones de caracol en las parcelas experimentales, se evidenci adems con la disminucin de ms del 50% de posturas de huevos en las piscinas tratadas con el quelato (53 en promedio) en comparacin con las piscinas de control (124 en promedio). Los resultados obtenidos luego del conteo de posturas en los muros de las parcelas experimentales y en las plantas cultivadas dentro de estas se muestran a continuacin: Conteo de posturas de huevos en las parcelas experimentales al julio 25 del 2012

Parcela Experime ntal p08 p09 p12 p13 p04 p05 p11 p18 p06 p14 p16 p19 p01 P02 p15 p20 P03 p07 p10 p17

Tratamient o Control Control Control Control T1 T1 T1 T1 T2 T2 T2 T2 T3 T3 T3 T3 T4 T4 T4 T4

Numero de posturas de huevos 63 32 289 112 32 37 63 76

Promedio de Posturas por tratamiento

124

52 31 54 53 59 49 37 77 52 64 58 29 32 82 60 51
Mtodo de evaluacin del cultivo 1.Anlisis estadstico

El anlisis estadstico sobre los datos de mortalidad de los caracoles muestra que: Primero: Se detect diferencias significativas entre los tratamientos al nivel del 5%, (P<0.05). Segundo: La observacin del Tratamiento 1 en el Bloque 3 se la consider como perdida, por la permanencia de agua en la parcela. Por esta razn los grados de libertad del error son nicamente 11. Observando que el coeficiente de variacin es de 53%, aparentemente alto, pero se espera esto en ensayos en los que no se inicia la aplicacin de tratamientos con un nmero similar de organismos. Para determinara las diferencias entre los diferentes tratamientos re realiz adems contrastes ortogonales para diferencias de medias. Para separar las medias se decidi emplear el mtodo de comparaciones ortogonales, en el que se agruparon las dosis altas y las dosis bajas. A continuacin los resultados: En el contraste nmero 1 se compara el testigo con los tratamientos. La diferencia de acuerdo con la prueba de T es estadsticamente significativa al 10%, (P<0.1) En el contraste nmero 2 se compara las dosis altas con las bajas. La diferencia es significativa al 5%, (P<0.05) El contraste numero 3 demuestra que no hay diferencia estadistica entre las dos dosis altas, (P = 0.91) El contraste numero 4 demuestra que no hay diferencia estadistica entre las dos dosis bajas, (P = 0.16) 2. Efecto visual de la plaga sobre el cultivo:

Siguiendo el cronograma (Cuadro 1) a los 10 y 20 das despus del trasplante se evalu el efecto visual de la plaga sobre el cultivo, siguiendo los parmetros establecidos en el Cuadro 3. Cuadro 3. Escala cualitativa de dao de caracol sobre el cultivo de arroz. Nivel de dao 0 1 3 5 7 9 Dao Ninguno Muy bajo Bajo Medio Alto Muy alto Descripcin Sin dao Algunas plantas perdidas casi imperceptibles en reas bajas Se ven reas pequeas sin plantas principalmente en bajos Se ven reas ms grandes sin plantas que ameritan resiembra en toda la parcela. Son visibles algunos caracoles cerca de las plantas. Grandes reas perdidas, resiembra intensa, gran cantidad de caracoles en el cultivo. Prdida total del cultivo, resiembra mayor al 50% del rea.

Los resultados obtenidos mostraron: - Ningn dao a los 10 das y - Dao muy bajo a los 20 das a excepcin de la parcela 13 (control) que para el da 20 mostro dao bajo como de muestra en la foto a continuacin:

3.

Efectos directos sobre el cultivo (fitotoxicidad)

Luego de la aplicacin de los tratamientos con cobre quelatado y del producto de referencia (testigo) a los 10 das despus del trasplante se har una comprobacin del efecto fitotxico que pudiese tener alguno de los tratamientos sobre el cultivo, para lo cual se utilizar la escala descrita en el Cuadro 4. Cuadro 4. Escala de evaluacin de toxicidad en el cultivo de arroz para el presente ensayo. Nivel de dao 0 1 3 5 7 9 Descripcin Ningn dao Toxicidad solo en reas puntuales debido a errores de la aspersin (traslapes) reas donde se fumig normalmente afectadas, 5 al 10% del total Dao entre el 10 a 20% de la parcela. Efectos txicos entre el 20 a 40% de la superficie de la parcela Toxicidad intensa en un rea equivalente al ms del 40% de la parcela

Los resultados obtenidos mostraron ningn dao al cultivo a los 10 y 20 das de evaluacin. 4. Efectos sobre otros organismos no objetos de control y sobre especies benficas En el transcurso de la realizacin del ensayo y del ciclo de cultivo completo se calificar el efecto ambiental de los tratamientos y del testigo (producto de referencia) segn el cuadro siguiente. Cuadro 5. Escala de calificacin del efecto del producto sobre otros organismos y el ambiente. Clase 1 2 3 4 Altamente txico Moderadamente txico Ligerarte txico Prcticamente no txica Categora

Los resultados mostraron una clasificacin de 4 sobre los organismos y el ambiente lo que corrobora la categorizacin de no toxico dado al quelato de cobre en pases como Estados Unidos y Australia.

E.

BIBLIOGRAFA

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