Antibiticos

Antibitico:
Son productos del metabolismo microbiano que son capaces de matar o inhibir el crecimiento de otros microorganismos a bajas concentraciones Son de vital importancia para el tratamiento de enfermedades infecciosas. Son metabolitos secundarios. La mayora de los antibiticos son producidos por hongos filamentosos o bacterias del grupo actinomicetos.

Anti : En contra Biotikos: Dado a la vida

Descripcin

Sustancias medicinales: poder para destruir o detener el crecimiento sustancia qumica producida por un ser vivo o derivada sinttica de l.

organismos infecciosos

- Es bacteriosttico: impide el crecimiento de l grmenes - Bactericida: destruye los grmenes .

1928

Alexander Fleming, descubre la penicilina.

S. XX

Louis Pasteur descubri saprofticas.

algunas bacterias

1939

Ren Bubos aisl la tirotricina, el primer antibitico utilizado en enfermedades humanas

1940

Florey y Chain utilizan por primera vez la penicilina en humanos.

1944

Selmam Waksman, descubre junto a sus colaboradores, la eritromicina

Mecanismos de accin

- inhibicin de la sntesis de la pared celular - inhibicin de la sntesis de protenas - inhibicin del metabolismo bacteriano - inhibicin de la actividad o sntesis del cido nucleico - alteraciones en la permeabilidad de la membrana celular

Mecanismos de resistencia

- Inactivacin del compuesto - Activacin o sobreproduccin del - - blanco antibacteriano - Disminucin de la permeabilidad de la clula al agente - Eliminacin activa del compuesto del interior de la clula

Local: (sobre la piel, ojos, etc.)

Oral: tabletas o caramelos

Administracin

Parenteral: subcutnea , itramuscular,etc .

Produccin

No. de antibiticos Bsqueda de nuevos antibiticos Mejores antibiticos Qumicos Genticos (mutasntesis, fusin de protoplatos, ingeniera gentica) Antibiticos con estructuras bsicas nuevas Screening en nuevos grupos de microorganismos y utilizando nuevos procedimientos de prueba.

Fermentacin 123 Semisentticos 50 Sintticos 3 Cloranfenicol Fosfomicina Pirrolnitrina

Grupo taxonmico Bacterias Actiomicetos Hongos

No. De antibiticos 950 (14%) 4600 (64%) 1600 (22%)

-Lactmicos
Hoy en da, los -lactmicos, especialmente penicilinas y Cephalosporinas, representan a nivel mundial ventas de US$ 15 billones ~ el 65% del mercado mundial de antibiticos. Mejoras en la productividad a partir de: Penicillium chrysogenum Acremonium chrysogenum Cephacremonium alosporium
40-50 g/L de penicilina y 20-25 g /L para cefalosporina.

rendimientos de recuperacin de la penicilina G o penicilina V ahora son> 90%.

La forma tradicional por la que se descubren nuevos antibiticos consiste en el rastro o screening. Se asla de la naturaleza en cultivo axnico.

Produccin de Penicilina

Penicillium notatum

Sir Alexander Fleming, 1952

Descrita por Fleming en 1929 Aislada por Florey y Chain en 1940 Primer ensayo clnico en 1941 Producidas por muchos hongos: Penicillium y Aspergillus Baja toxicidad (0,5-2% de pacientes desarrollan alergias) Inhibidores especficos de la sntesis de peptidoglicano

La penicilina es un cido, y como tal da lugar a la formacin de sales solubles, y poco solubles. a) Solubles: Combinadas con sodio y potasio, son de accin rpida. b) Poco solubles: Combinadas con procana o benzatina. Actan en forma lenta.

La penicilina, al estado seco, inclusive, se deteriora muy rpidamente, debido a su alto poder higroscpico. Las soluciones, una vez preparadas, pierden actividad rpidamente.

 La produccin de penicilina por la cepa aislada por Fleming era de 2 u.i./ml; los procesos actuales producen 85.000 u.i./ml.

Los primeros procesos para la produccin de penicilina implicaban el crecimiento de Penicillium notatum sobre la superficie de un medio lquido (Czapek-Dox-glucosa). El perodo de incubacin era usualmente de 6-12 das y posteriormente la penicilina se extraa con solventes previa separacin del micelio.

Foto original tomada por Fleming

Foto actual

El hongo Penicillium notatum impide el crecimiento de Staphylococcus aureus...

las diferentes variedades de antibiticos son el resultado de reacciones bioqumicas naturales en el microorganismo, as como modificaciones qumicas artificiales

Produccin de Penicilina

5x10-3 esporas/ mL Evitar la formacin de agregados

Proceso fermentativo

Medio definido

Medio complejo

Alimentacin continua del fermentador con :

Rendimiento: 65% 25% 10% Mantenimiento energtico Crecimiento Penicilina

Condiciones de operacin
Fermentacin sumergida en tanques de 40.000 a 200.000 L Velocidad de aireacin: 0,5-1,0 vvm Agitacin: impulsores tipo turbina (120150 rpm) Temperatura ptima: 25-27 C pH: 6,5

 Alimentacin aspticamente en acero inoxidable en reactores de tanque de 30,000-100,000 galones de capacidad. Tiempo aproximado de 200 h. 120 a

Los altos niveles de oxgeno disuelto son crticas, especialmente en el crecimiento. Alrededor del 65% del carbono se metaboliza para mantenimiento celular, 20-25% para el crecimiento y 10-12% en la produccin de penicilina.

Actualmente la extraccin con solventes es la base para la separacin y purificacin de la penicilina.

Separacin del micelio La Penicilina es excretada al medio y menos del 1% permanece unida al micelio

Recuperacin del Penicillium Chrysogenum esporulado y liofilizado. Esta etapa es importante, ya que de ella depende el compactamiento o no del micelio: si el micelio es compacto, disminuyen los rendimientos en la fase de produccin.

El filtrado rico en penicilina es luego enfriado en un intercambiador de calor a 0 a - 4 C con el objeto de disminuir la degradacin enzimtica y qumica durante las etapas de extraccin posteriores.

Las penicilinas G y V son cidos fuertes (pKa entre 2.5 - 3.1). Las formas cidas son solubles. En muchos solventes orgnicos y se pueden extraer con un alto rendimiento en acetato de amilo o de butilo a pH 2.5 - 3.0 La extraccin se puede realizar en operaciones continuas, a contracorriente en extractores centrfugos en etapas mltiples, a temperaturas de 0 - 3 C.

Se debe tener en cuenta que tanto la penicilina G como la V se degradan en medio cido con una cintica de primer orden a una velocidad proporcional a la temperatura y recproca con respecto al pH.
la forma V en tales condiciones es ms estable que la G, si el objetivo es obtener 6-amino penicilnico (6-APA) la produccin de penicilina V es ms aconsejable.

Recuperacin del producto: Se lleva a cabo por medio de dos etapas de extraccin continua en contracorriente del caldo de fermentacin con acetato de amilo o de butilo a 0-3oC y pH: 2,5-3,0

La extraccin de penicilina se puede realizar en una o ms etapas sucesivas, con una acidificacin del caldo filtrado con H2SO4 o H3PO4 al 10% P/V y con el agregado de un agente surfactante (0,003 - 0,1% p/v, en el solvente), realizndose la extraccin y concentracin en extractores centrfugos.

Penicilina + Acetato de Butilo (0-3 C) pH: 2,5-3,0

Despus de la extraccin se procede a la mezcla de la penicilina en una solucin tampn de fosfato a pH 7

Precipitacin fraccionada con una sal en forma slida (cido carboxlico aliftico, sales alcalinas y de potasio ) Precursores Penicilina

Cristalizacin y Precipitacin Los valores crticos: Concentraciones Na+ y K+ Temperatura Concentracin de penicilina pH

En caso de hacerse la cristalizacin a partir de un solvente se requiere tambin un exceso de Na+ o K+ , siendo los cristales recuperados en un filtro rotatorio a vaco. Estos cristales son lavados y presecados con un solvente voltil que tambin separa impurezas coloreadas. El secado definitivo se puede realizar con aire caliente, vaco o calor radiante.

Se est llevando a cabo una intensa investigacin para producir penicilina con clulas inmovilizadas. En un estudio a escala de laboratorio se demostr la ventaja de este enfoque sobre el uso de sistemas discontinuos alimentados, pero esta tcnica no ha sido introducida todava a nivel comercial. La penicilina es excretada al medio y menos del 1% permanece unida al micelio. Cada ao se detectan aproximadamente 300 nuevas sustancias con actividad antibitica, de las que el 30-35% son componentes secundarios de las fermentaciones de antibiticos conocidos. se necesitan alrededor de 8-10 aos para desarrollar un nuevo antibitico con un costo medio de 10x106 - 20x106 dlares (6 12x106 ).

Referencias
Co, M. &. (1975). Patente n 443-458. E.U. Savidge TA (1984) Enzymatic conversion used in the production of penicillins and cephalosporins. In: Vandamme E (ed) Biotechnology of industrial antibiotics. Dekker, New York, pp 19122 Flores, & A. (2008). Penicilina. Recuperado el 20 de septiembre de 2012, de http://www.biologia.edu.ar/microind/producci%C3%B3n_de_penicilina.htm

Strohl WR (1999) Secondary metabolites; antibiotics. In: Flickinger MC, Drew SW (eds) Encyclopedia of bioprocess technology: fermentation, biocatalysis and bioseparations, vol 5. Wiley, New York, pp 23482365