SISTEMUL IMUNITAR

Existena tuturor organismelor vii este condiionat de activitatea unor mecanisme de rezisten i de imunitate, capabile s protejeze individualitatea lor chimic, prin mecanisme de recunoatere i difereniere a substanelor proprii (self) de cele strine (nonself). In mod normal, aceste mecanisme sunt perfect tolerante fa de moleculele self, dar se activeaz i reacioneaz mai mult sau mai puin viguros pentru a ndeprta, a neutraliza sau a distruge substanele nonself. Mecanismele de rezisten i imunitate sunt prezente pe toat scara evolutiv a organismelor, ncepnd cu bacteriile i se complexeaz n evoluie. Celulele bacteriene posed mecanisme de protecie a individualitii genetice, reprezentate de: - fenomenele de restricie mediate de prezena unor sisteme enzimatice specifice (enzime de restricie), care recunosc moleculele strine de ADN, le cliveaz la nivelul unor situsuri specifice, rezultnd fragmente mai mici, sensibile la aciunea exo- i endonucleazelor; - fenomenele de reparaie genetic dependente de activitatea unor sisteme enzimatice care recunosc modificrile ADN induse de mutaii sau de lipsa de fidelitate a mecanismelor de replicare, transcriere i traducere genetic, corectndu-le fie complet (sistemele error free) sau minimaliznd erorile n cazul sistemelor reparatorii predispuse la erori (error prone systems). La plantele superioare, mijloacele de aprare specific, aparent sunt absente, dar exist o gam larg de modaliti de aprare nespecific: - continuitatea i integritatea esuturilor epidermice, acoperite sau impregnate cu substane impermeabile pentru virusuri i microorganisme; - rezistena fiziologic conferit de coninutul nalt de zaharuri reductoare, prezena taninurilor, a diferiilor acizi organici, a pseudoanticorpilor cu activitate hemaglutinant n sucurile vegetale. La protozoare, procesele de recunoatere asigur selecia hranei, identificarea partenerilor pentru conjugare la parameci, iar la cele parazite, procesele de recunoatere mediaz interaciunea cu gazda. MECANISME DE APRARE LA NEVERTEBRATE

Dei nu au sistem limfoid, nevertebratele recunosc i rspund la substanele nonself, la fel de eficient ca i vertebratele. La ele funcioneaz o diversitate de mecanisme, unele fiind inductibile. Rspunsul este de scurt durat i nu are specificitate fa de agentul infecios patogen. Rspunsul imun al nevertebratelor se aseamn calitativ cu cel nscut al vertebratelor mediat de celulele fagocitare i de moleculele neimunoglobulinice. La nevertebrate, aprarea organismului este asigurat de bariere fizico-chimice complexe: secreia mucoas care acoper corpul celenteratelor, anelidelor, molutelor i protocordatelor, omoar potenialii patogeni. Exoscheletul dur al celenteratelor, molutelor, artropodelor, echinodermelor i protocordatelor, formeaz o barier protectoare eficace fa de agenii infecioi. Majoritatea nevertebratelor superioare au sistem circulator cu celule albe, denumite hemocite sau celomocite, n funcie de natura cavitii corpului. Lipsesc hematiile. n mediul intern al nevertebratelor se gsesc fagocite, factori antimicrobieni constitutivi i inductibili cu efect neutralizant i litic, factori de coagulare a macromoleculelor strine. Toate nevertebratele, chiar cele care nu au caviti ale corpului (spongieri, anemone, viermi lai), au fagocite, uneori de mai multe tipuri. Ca i la vertebrate, fagocitele sunt efectorii rspunsului inflamator, sintetizeaz enzime lizosomale i posed mecanisme citocide dependente de superoxid. Reaciile de aprare (repararea tisular, fagocitoza, reacia de ncapsulare)sunt mediate de fagocite i de celulele hemostatice. Ingestia microorganismelor invadatoare este rezultatul aciunii fagocitelor, iar un numr mare de microorganisme i de metazoare parazite este ncapsulat de celulele hemostatice i de tip fagocitar. Endoparazitul care ptrunde n organismul nevertebratelor este fagocitat, sau dac are dimensiuni prea mari, este ncapsulat. Incapsularea este rezultatul unei fagocitoze fruste. Adeseori, endoparazitul ncapsulat, este omort sub aciunea intermediarilor toxici ai unei cascade enzimatice. La nevertebrate lipsesc limfocitele i moleculele de imunoglobuline, dar acestea sunt compensate de o varietate de factori umorali de aprare: aglutinine, lizozim, bactericidine, enzime lizosomale, factori de imobilizare. La insecte s-au detectat peste 15 tipuri de proteine antibacteriene inductibile n cteva ore dup injectarea unui antigen. Nevertebratele nu au proteinele cascadei complementare, dar viermii, insectele, crustaceii conin sistemul profenoloxidazei. Componentele acestui sistem sunt activate de o serie de enzime. La captul cascadei de activare se formeaz enzima activ fenoloxidaza, cu rol esenial n ndeprtarea substanelor nonself. Fig.26. Un mecanism posibil de activare a profenoloxidazei la

fenoloxidaz, la artropode. Activarea este stimulat de leziunile tisulare, de infecia cu microorganisme, de schimbri ale concentraiei ionilor de Ca2+ i ale valorii pH, care pot duce la coagularea plasmei i generarea factorilor care mediaz evenimentele ulterioare ale imunitii (dup Roitt, 1997). Fagocitoza este foarte activ i este stimulat de aglutininele i bactericidinele cu rol de opsonine. Din punct de vedere funcional, aglutininele i bactericidinele sunt similare anticorpilor. Acestea sunt lectine, cu rolul de a lega componenta glucidic a glicoproteinelor de pe suprafaa celulelor nonself, rezultatul fiind aglutinarea. Lectinele sunt molecule care au aprut timpuriu n evoluie i sunt ubicvitare: se gsesc la bacterii, plante, nevertebrate i vertebrate. Ele tapeteaz microorganismele invadatoare i au rolul de a le imobiliza, dar au i rol opsonizant, uurnd fagocitoza. In funcie de specificitatea lor de legare cu glucidele, lectinele sunt foarte diferite. n corpul gras al insectelor superioare s-au caracterizat circa 100 de peptide antimicrobiene, a cror sintez rapid este indus de infecie. Din punct de vedere structural sunt de dou tipuri: - peptide ciclice, care conin puni S-S (de exemplu, drosmycina), active fa de bacteriile Gram pozitive i fa de fungi; - peptide lineare (cecropine bogate n Gly i Pro), active fa de bacteriile Gram negative. Componentele celulare i humorale cu funcii protectoare mediaz reacii de aprare nespecifice (nscute), fr rspuns accelerat la stimularea antigenic secundar.

ORGANIZAREA SISTEMULUI IMUNITAR LA VERTEBRATE

La vertebrate, aprarea este asigurat de mecanisme complicate celulare i humorale, de rezisten i imunitate. Funcia esenial a sistemelor de aprare este protecia fa de agenii patogeni invadatori. Interaciunea permanent cu microorganismele are un rol hotrtor n dobndirea complexitii structurale i funcionale a sistemului imunitar. Dovada o constituie faptul c la animalele germ-free (axenice), numrul limfocitelor B i titrul anticorpilor serici naturali sunt de 5-10 ori mai mici dect la organismele convenionale. Evoluia a generat tipuri celulare specializate, tot mai eficiente funcional, care neutralizeaz, sechestreaz, omoar sau ndeprteaz

agenii infecioi. La vertebrate, reaciile de aprare sunt rezultatul aciunii unor factori humorali nespecifici (complement, substane bactericide) i specifici (anticorpi) i a unor populaii de celule specializate, cu aciune nespecific (fagocite) sau specific (limfocite). Din punct de vedere structural, n concepia modern, sistemul imunitar al organismelor superioare este considerat ca un organ difuz sui-generis, alctuit dintr-un numr foarte mare de molecule i celule, reunite ntr-o reea de interaciuni complexe, a crei funcie este asigurarea integritii i individualitii structurale a organismului. n concepia restrictiv a lui N.K. Jerne, sistemul imunitar este reprezentat n exclusivitate de limfocite, iar ntr-o accepiune mai larg, pe lng limfocite, n alctuirea sistemului imunitar intr o serie de celule accesorii cu rol esenial n declanarea rspunsului imun: macrofagele i o serie de celule nrudite(celulele Lagerhans din tegument, celulele dendritice i cele interdigitate). Se apreciaz c numrul limfocitelor, la adultul normal, este de 10 12, iar al moleculelor de imunoglobuline, de ordinul a 1020. Impreun, aceste componente formeaz organul difuz, cu greutatea de circa 910 g (1-2% din greutatea corpului), a crui existen este adeseori ignorat, datorit caracterului sau difuz, n tot organismul. Celulele i moleculele sistemului imunitar sunt prezente n toate esuturile, dar n unele organe (splin, ganglioni limfatici, plci Peyer, amigdale, timus), componentele celulare au o densitate maxim. Sistemul imunitar este unul din cele mai complexe ale organismului. Complexitatea lui deriv din structura de reea complicat de comunicaii intercelulare, din ubicvitatea sa n organism i din efectele multiple pe care le determin un numr mic de categorii celulare. Sistemul imunitar este considerat un adevrat creier mobil. Din punct de vedere structural i funcional, sistemul de aprare al organismelor superioare prezint numeroase dualiti: - existena unui compartiment al rezistenei nespecifice i neadaptative (nscut) i a unui compartiment cu aciune specific i adaptativ (sistemul imunitar); - prezena a dou populaii nclinate de limfocite (T i B), care mediaz imunitatea celular i respectiv humoral; - activitatea limfocitelor este modulat fie stimulator, fie inhibitor, sub aciunea unor celule i a unor factori humorali; - existena organelor limfoide centrale (primare) i periferice (secundare);

- existena unui rspuns imun primar i a unui rspuns imun secundar; - dualitatea structural (dou perechi de catene polipeptidice) i funcional (bivalena) a moleculei de anticorp; - comportamentul dublu al moleculei de anticorp: molecula de anticorp recunoate epitopul specific i la rndul ei este recunoscut de molecule cu rol receptor. Numrul celulelor sistemului imunitar (cu un ordin de mrime superior neuronilor) i al moleculelor sale nu reflect fidel potenialul de aprare a organismului, deoarece n cursul rspunsului imun are loc proliferarea i amplificarea numeric a limfocitelor, precum i a potenialului de biosintez. La aceasta se adaug o rat nalt de renoire i refacere a rezervelor sale celulare. La om se produc zilnic un miliard de limfocite ce trec n circulaie. Circulnd i recirculnd prin reeaua vaselor sanguine i limfatice, celulele i moleculele sistemului imunitar asigur supravegherea organismului, recunoaterea moleculelor i a celulelor nonself, pentru a le elimina.

Limfocitele
Sistemul imunitar este reprezentat de esuturi derivate din mezoderm, a cror principal component celular este limfocitul. De aici deriv denumirea de sistem limfoid. In ultimul timp se folosete denumirea de limfon, care semnific totalitatea organelor limfoide primare i secundare, precum i celulele componente cu funcia de a recunoate antigenul. Limfocitele sunt celule care n cursul elaborrii rspunsului imun, recunosc specific antigenul i de aceea se mai numesc imunocite. De aici deriv denumirea de sistem imunocitar, echivalent celei de sistem limfoid. Toate celulele acestui sistem poart pe suprafaa lor, molecule cu rol receptor, capabile s recunoasc specific determinanii antigenici strini. Sistemul imunitar funcioneaz pe baza interaciunii dintre semnal (antigen) i receptorul specific limfocitar preformat. n concepia modern, limfocitul este celula central a sistemului imunitar. Ea nu este celula cap de serie aa cum o considerau vechii histologi, ci prezint o extraordinar capacitate de reactivitate i difereniere. Numrul limfocitelor. Copiii au un numr mai mare de limfocite i de aceea vrsta trebuie considerat ca un parametru fiziologic de variaie, n evaluarea numeric a acestor celule. Ele

reprezint 25-33% din totalul leucocitelor, adic circa 2100 celule/mm 3 de snge. Valori mai mici de 1500 limfocite/mm3 semnific starea de limfocitopenie i cel mai adesea semnific un deficit numeric al limfocitelor T. Pn n anii 50, limfocitele erau distinse numai dup dimensiuni: mari, mijlocii i mici. Cele mai multe limfocite circulante au dimensiuni mici: 7-10 m diametru. La microscopul optic, pe frotiul colorat May Grunwald Giemsa, limfocitele se disting de celelalte dup dimensiuni, sunt agranulare i au cel mai mare raport nucleocitoplasmatic. Limfocitele mari au un raport nucleocitoplasmatic mai mic i n citoplasm se gsesc granulaii azurofile. Se numesc limfocite granulare mari (LGL). In vitro, limfocitele sunt neaderente i nu fagociteaz. Astzi, Imunologia are la baz conceptul unei heterogeniti funcionale nelimitate a limfocitelor, care deriv din diversitatea specificitii receptorilor suprafeei lor. Populaia de limfocite care are receptori identici de antigen i recunoate un singur epitop (sau civa nrudii) formeaz o clon. Toate celulele unei clone sunt descendente ale unei singure celule-mam. In consecin, n organism sunt tot attea clone de limfocite, cte tipuri de determinani antigenici exist (teoretic) n natur. Corespondena complementaritii spaiale dintre receptorii limfocitari de antigene i epitopii antigenici asigur posibilitatea elaborrii unui rspuns imun specific, dup contactul limfocitelor cu oricare dintre epitopi. Caracterizarea funcional a limfocitelor este rezultatul cercetrilor ntreprinse dup anul 1960. n raport cu organul limfoid primar n care se produce diferenierea i maturarea, Roitt i col. (1966) au mprit limfocitele n dou categorii distincte; - limfocite T, care se difereniaz i se matureaz n timus; - limfocite B, care se difereniaz i se matureaz n bursa lui Fabricius la psri i n echivalenii ei funcionali, la mamifere. n funcie de capacitatea lor de a interaciona cu antigenul specific, limfocitele sunt: - incompetente (imature), cele care nu recunosc antigenul; - competente (mature), cele care recunosc antigenul specific. Starea de competen este condiionat de prezena receptorilor prin intermediul crora antigenele sunt recunoscute. Pe suprafaa unei celule pot fi pn la 100 000 de molecule receptoare identice, care ateapt ntlnirea cu substanele nonself corespunztoare. Dup ce limfocitul i-a dobndit competena n unul din organele limfoide primare, poate s rmn n repaus, dac organismul nu a recepionat mesajul antigenic

corespunztor. Aceste limfocite sunt neangajate (neinformate sau naive). Cele care au venit n contact cu antigenul specific sunt limfocite angajate (informate). Ele constituie substratul material al memoriei imunologice i ori de cte ori se vor rentlni cu antigenul, vor produce un rspuns imun rapid i amplu. Dup durata vieii, limfocitele sunt: - cu via scurt (efectoare ale rspunsului imun); - cu via lung (de memorie). Ele recircul n organism perioade ndelungate (de ordinul anilor). La om, limfocitele de memorie ar supravieui circa 10 ani, fr s se divid. n raport cu funcia pe care o ndeplinesc, se disting urmtoarele categorii de limfocite: - efectoare, cele care direct sau indirect, prin molecule efectoare, neutralizeaz antigenul; - reglatoare, cele care ralizeaz echilibrul optim al rspunsului imun. Limfocitele B Limfocitele B reprezint 5-15% din totalul limfocitelor circulante i constituie o diviziune funcional major a populaiei limfocitare. Impreun cu descendenii lor difereniai (limfoblastul, plasmocitul), limfocitele B sintetizeaz anticorpi, efectorii rspunsului imun mediat humoral (RIMH). Limfocitul B imunocompetent (matur, neangajat) sintetizeaz cantiti mici de molecule ale unui izotip de imunoglobuline, care rmn legate de membrana limfocitului, avnd rol de receptori de antigen, adevrate antene de detectare a antigenului specific. Sub aspectul specificitii de legare a antigenului, fiecare organism posed milioane de clone de limfocite B, adic mici populaii celulare identice, descendente din aceiai celul mam, care recunosc i leag acelai antigen i produc anticorpi cu aceiai configuraie spaial a situsului de combinare. Dup activare, toi descendenii limfocitului B sintetizeaz imunoglobuline i le secret ca anticorpi, cu aceiai specificitate de legare pe care a avut-o receptorul. Receptorul de antigen al limfocitelor B. Majoritatea limfocitelor B umane din sngele periferic exprim dou izotipuri de imunoglobuline pe suprafaa lor: IgM i IgD sau numai IgD. Situsurile de legare ale celor dou izotipuri sunt identice. Numai 10% dintre limfocitele B au pe suprafaa lor, ca receptor de antigen, molecule de IgG, IgA sau

IgE. Cele care au ca receptor molecule de IgA, sunt localizate n esutul limfoid asociat mucoaselor. Moleculele receptoare de imunoglobulin sunt inclavate cu captul C-terminal n membran. Intre IgM legat de membran (IgMm), cu funcia de receptor de antigen i IgM seric (IgMs), sunt dou deosebiri majore: - IgMm conine o secven C-terminal hidrofob, prin care se ancoreaz n membrana limfocitelor mature neangajate, care nu au venit n contact cu antigenul; - IgMm este monomer, iar IgM seric este pentamer. Secvena C-terminal a IgMm cuprinde 25 de aminoacizi hidrofobi ce formeaz domeniul transmembranar, urmat de o secven cationic Lys-Val-Lys. Ca la toate proteinele ancorate n membran, acest domeniu formeaz un -helix, cu o lungime suficient pentru a strbate membrana. Fiind hidrofob, secvena de aminoacizi are interaciuni strnse cu lipidele membranei. Secvena cationic se extinde n citoplasm, mrind gradul de stabilitate a moleculei n membrana celular. Dup stimularea antigenic, sinteza se comut la IgM seric. Trecerea de la IgMm la IgMs este rezultatul unor diferene ale modului de prelucrare a ARN premesager. Copia de ARN premesager pentru sinteza catenei (H) are dou situsuri poteniale de clivare i ataare a resturilor de poli-A, ce marcheaz captul ARNm. Dup stimularea antigenic, din ARN premesager sunt clivate secvenele codificatoare ale domeniului Cterminal hidrofob i se sintetizeaz molecule de IgM fr secvena C-terminal de aminoacizi hidrofobi. Comutarea IgMm --- IgMs nu modific lanul L al moleculei. Cele dou forme ale IgM au domenii identice VH i VL, adic au aceiai specificitate de legare a antigenului (au acelai idiotip). Limfocitul B are receptori membranari pentru substanele mitogene, pentru complement (C3b), pentru regiunea Fc a imunoglobulinelor, pentru insulin etc. Receptorul pentru C3b funcioneaz i ca receptor pentru virusul Epstein-Barr. Limfocitele B neactivate au receptori de mic afinitate pentru IL-2, dar dup stimularea antigenic, ele exprim rapid, receptori pentru IL-2 de nalt afinitate. Limfocitele B rspund la efectul stimulator al IL-2, prin proliferare rapid i secreia IgM. Pe suprafaa limfocitelor B se gsesc la densitate nalt, moleculele CMH II. Limfocitele T Limfocitele T reprezint pn la 80% din totalul limfocitelor circulante. Valorile normale n snge, pentru limfocitele T sunt cuprinse ntre 1620-4320/mm 3, ntre una i 18 luni de via i ntre 590-3090/mm3, dup 18 luni.

Proporia limfocitelor T se poate determina prin metoda rozetelor cu hematii de berbec sau prin metoda imunofluorescenei cu anticorpi monoclonali fa de receptorul de antigen. Limfocitele T mature exprim markerul* CD4** sau CD8. Aceste molecule aparin suprafamiliei imunoglobulinelor. Celulele CD4 au de obicei funcie helper, iar cele ce exprim markerul CD8 sunt citotoxice. Limfocitele T ndeplinesc funcii complexe, att efectoare ale rspunsului imun mediat celular ct i reglatoare, prin intermediul unor factori humorali pe care-i secret, denumii limfochine. Limfocitele T realizeaz urmtoarele funcii: lizeaz celulele care exprim molecule nonself pe suprafaa lor; regleaz rspunsul imun; mediaz reaciile de hipersensibilitate ntrziat. Aceste funcii sunt rezultatul heterogenitii funcionale i se datoreaz activrii unor subpopulaii distincte de limfocite T: - limfocite Tc (Tcl, citotoxice sau citolitice) exprim pe suprafaa lor markerul T8 (CD8); - limfocite Th (helper) au pe suprafa markerul CD4. Acestea sunt cele mai numeroase, reprezentnd 60-65% din numrul total de limfocite T ale organismului uman; - limfocite Ts (supresoare), purttoare ale markerului CD4; - limfocite TD sau TDH (delayed hypersensitivity) exprim markerul CD8. Funciile limfocitelor Th se realizeaz prin intermediul limfochinelor secretate. In funcie de limfochinele pe care le sintetizeaz, limfocitele Th se clasific n dou subseturi:Th-1 i Th-2. Celulele Th-1 (Th-c) secret IFN gama, IL-2 i TNF beta (citochine de tip 1, stimulatoare ale imunitii mediate celular). Citochinele de tip 1 produc urmtoarele efecte: stimuleaz reacia de citotoxicitate i inflamatorie asociat cu reaciile de hipersensibilitate ntrziat. In esen, limfocitele Th-1 au rol n edificarea unui rspuns imun mediar celular (RIMC). Celulele Th-2 (Th-b) secret citochine de tip 2: IL-4, IL-5, IL-6 i IL-10 (dar nu secret Il-2) i stimuleaz activitatea limfocitelor B de memorie. Citochinele tip 2 (IL-4, IL-5) stimuleaz rspunsul imun humoral fa de paraziii extracelulari (stimuleaz

diferenierea limfocitelor B spre plasmocit) i instalarea strilor alergice prin capacitatea lor de a induce sinteza IgE i de a stimula mastocitele. In esen, limfocitele Th-2 sunt implicate n edificarea rspunsului imun mediat humoral (RIMH). Prin toate aceste efecte, limfocitele Th sunt amplificatoare ale rspunsului imun Limfocitele CD8 (T citototoxice) reprezint 25-35% dintre limfocitele T circulante. Funcia lor const n efectul litic prin contact celular direct asupra celulelor infectate cu virusuri, malignizate sau alogenice. Limfocitele TD sunt mediatoare ale reaciilor de hipersensibilitate ntrziat (delayed) de tip tuberculinic. Ele secret limfochine cu efecte locale asupra macrofagelor i limfocitelor din focarul inflamator. Limfocitele Ts sunt inhibitoare ale amplitudinii rspunsului imun, dup epuizarea antigenului. Ele au rolul de a diminua intensitatea RIMC i RIMH, meninnd n limite fiziologice intensitatea reaciilor imunitare. Se pare c i exercit rolul supresor asupra rspunsului imun, prin inhibarea activitii limfocitelor Th, dar au i efect supresor direct asupra limfocitelor T i B efectoare. Limfocitele Ts au rol important n inducerea strii de toleran fa de antigenele exogene, ca i fa de moleculele self. Deficienele funcionale ale limfocitelor Ts creeaz predispoziii pentru maladiile autoimune. Distincia funcional ntre limfocitele TCD4 i TCD8 nu este totdeauna net. Unele clone de limfocite TCD4 au proprieti citotoxice, iar unele clone TCD8, dup contactul cu antigenul, prolifereaz i secret limfochine, ca i limfocitele TCD4. Receptorul de antigen al limfocitelor T (RCT) Dei moleculele de anticorpi au fost printre primele a cror structur chimic s-a identificat, caracterizarea biochimic a receptorului de antigen al celulelor T s-a fcut foarte greu, deoarece nu a existat un echivalent celular T al tumorilor de mielom. Molecula cu rol de receptor de antigen a limfocitelor T s-a identificat recent, dup ce a fost posibil cultivarea liniilor de hibridom de celule T. Moleculele receptoare de antigen ale limfocitelor T au o larg variaie biochimic, corespunztoare specificitii de legare a spectrului foarte larg de antigene. Ca i n cazul anticorpilor, pentru receptorul de antigen al celulelor T, se folosete termenul de idiotip (Ti), pentru a desemna o molecul a RCT cu un set unic de epitopi asociai, derivai din configuraia sa spaial unic, complementar pentru legarea specific a unui epitop antigenic. Pentru izolarea i identificarea receptorului Ti s-au utilizat anticorpi monoclonali (AMC) anti- Ti, care precipit specific moleculele Ti dintr-un amestec complex de proteine membranare. Examinarea peptidelor n imunoprecipitatele diferitelor clone de

10

celule T, prin metoda electroforezei n SDS-poliacrilamid, a evideniat c RCT este un heterodimer i const dintr-o glicoprotein de 80-90 kD, care n condiii reductoare se disociaz n dou peptide de 40 i respectiv 43 kD. Molecula ntreag const dintr-o pereche de lanuri peptidice, similare ca dimensiuni, legate prin puni S-S.

Lanul Cele dou peptide sunt distincte i s-au notat i . Lanul Lanul are 248 aminoacizi, cu punctul izoelectric la Fig. 27. Structura receptorului de antigen al limfocitului T. Molecula este un heterodimer format din lanurile i , care se pH = 5,0-5,5. Lanul extind prin membrana celular i au scurte poriuni citoplasmatice. are 282 aminoacizi, Complexul T3 este alctuit din 4 subuniti proteice (, i 2 ), iar punctul izoelectric este la pH 6,5-7,0. localizate i dublul strat lipidic i n citoplasm. Fiecare caten are 4 domenii: unul variabil (V , respectiv V ), unul constant (C , respectiv C ), unul transmembranar i unul intracitoplasmatic. Astfel alctuit, molecula RCT face parte din suprafamilia moleculelor imunoglobulinice. Prin dimensiuni se aseamn cu lanul L al imuno-globulinelor: domeniul variabil al fiecrui lan are 110 aminoacizi, dar pentru c se ancoreaz n membran, se aseamn cu lanul H. Domeniile variabile ( i ) sunt extrem de variabile (ca i regiunile variabile ale celor dou catene ale imunoglobulinelor) i particip la formarea situsului de combinare al RCT. Situsul de combinare al RCT este alctuit din regiunile hipervariabile sau regiunile determinante de complementaritate RDC (3 ale catenei i 4 ale catenei ) i este aplatizat, adaptat funciei sale de a lega suprafaa aplatizat a moleculelor CMH. La om, RCT heterodimer este asociat cu molecula T3, o grupare de trei peptide asociate necovalent. Funcia probabil a lui T3 este aceea de transductor al semnalului de activare, de la Ti la citoplasm, constituind, prin modificri conformaionale, un canal de trecere a ionilor de Ca2+ prin membran, dup ce receptorul a legat epitopul specific. S-au identificat dou tipuri de RCT: Fig.28.a. Subseturi majore de celule T

11

Fig. 28.b. Subseturi funcionale de celule T CD4+ Subseturi de limfocite T, n funcie de tipul de RCT (RCT-2, RCT2). Limfocitele RCT-1 au un repertoriu restrns de interaciune cu antigenul, dar nu manifest fenomenul restriciei CMH. Limfocitele RCT-2 exprim CD4 sau CD8, care determin recunoaterea antigenului asociat cu moleculele CMH II sau CMH I. Limfocitele TCR-2+ CD4+ sunt divizate pe baza limfochinelor pe care le secret, n subseturi de celule Th1(stimulatoare ale IMC) i Th2 (stimulatoare ale IMH) (dup Roitt, 1997).

- RCT-2 este heterodimerul format din polipeptidele i , legate prin puni S-S, prezent pe suprafaa a circa 90% dintre limfocitele T; - RCT-1 este asemntor structural cu RCT-2, dar const din polipeptidele i , cu o alt specificitate antigenic, identificat prin intermediul anticorpilor monoclonali. Se gsete pe suprafaa a 0,5-15% dintre limfocitele T circulante umane, dar este mai frecvent pe limfocitele intraepiteliale ale mucoasei intestinale. Limfocitele T / exprim markerul CD3 i recunosc antigenul printr-un mecanism asemntor cu acela al limfocitelor T /, adic recunosc epitopii asociai cu moleculele CMH I i II, dar frecvent par s interacioneze cu molecule CMH neclasice, iar specificitatea interaciunii lor cu epitopii antigenici este limitat. Aceste limfocite pot s recunoasc antigene neconvenionale, ca de exemplu, proteinele de oc termic i antigenele nepeptidice (glucidice). n general, limfocitele cu RCT-1 ( /) sunt negative pentru markerul CD4 i pentru CD8, dei unele exprim nivele sczute ale unuia dintre markeri. Unele studii sugereaz c aceste celule contribuie la rspunsul iniial al gazdei, la diferii ageni infecioi: virusuri, bacterii(n special micobacterii), parazii, dar i la rspunsul anti-tumoral. Ele par s constituie prima linie de aprare. Ipoteza este n acord cu localizarea lor anatomic, la poarta de intrare n organism, n esuturile nelimfoide (tegument, intestin), dar i n situsurile inflamatorii. Limfocitele T / se aglomereaz n focarele inflamatoare cronice(membrana sinovial, leziunile asociate cu lupusul eritematos diseminat). La rumegtoare, 30-80% din totalul limfocitelor T circulante au receptor /, valorile maxime nregistrndu-se la organismele nou-nscute. La alte specii, numrul acestor limfocite T este mic. Abundena lor numeric la rumegtoare este corelat, probabil, cu bacteriemia masiv care nsoete procesul digestiv. n esen, markerii RCT i CD3 sunt definitorii pentru limfocitele T. Limfocitele T au un marker distinctiv pe suprafaa lor, fa de limfocitele B: Thy 1 (CD90). Acest marker poate fi exprimat i pe alte tipuri celulare i lipsete la o mic 12

proporie a limfocitelor T. Celulele NK Celulele NK (natural killer) reprezint circa 15% din totalul limfocitelor sanguine. Ele deriv din mduva osoas i au origine comun (acelai progenitor), ca i celulele T. In vitro, sunt neaderente i nefagocitare, ceea ce le aseamn cu limfocitele. Din punct de vedere morfologic, celulele NK sunt mari, granulare (LGL, large granular lymphocytes), avnd citoplasm mai bogat dect celelalte limfocite, cu granulaii azurofile. Celulele NK nu au nici unul din receptorii de antigen caracteristici limfocitelor T sau B i de aceea au fost denumite celule nule. Celulele NK au pe suprafaa lor unii markeri caracteristici limfocitelor: au receptor pentru Fc de mic afinitate, formeaz rozete E, au receptor de mic afinitate pentru IL2, produc IL-2 i IFN . Au i receptori caracteristici seriei mieloide. n dezvoltarea lor, celulele NK nu sunt dependente de timus. Celulele NK au via scurt i reprezint o linie important, primordial n evoluie, cu rol esenial n mecanismele de aprare nscut a organismului: sunt active n respingerea grefelor i a celulelor modificate sub raport antigenic. Funcia celulelor NK este de a recunoate i de a liza anumite celule tumorale i celule infectate cu virusuri. Celulele NK au lizat celulele liniilor B limfoblastoide transformate de EBV, deficiente n molecule CMH I, dar nu au mai lizat aceste inte dup transfecia cu genele HLA-B sau HLA-C. Mecanismul recunoaterii celulelor purttoare de molecule nonself nu este cunoscut. Se admite c celulele NK recunosc moleculele CMH i se activeaz cnd receptorii lor nu ntlnesc moleculele CMH pe suprafaa celulelor int sau cnd moleculele CMH au o densitate mai mic dect cea normal. Efectul interaciunii este liza celulei int. Aciunea definitorie a celulelor NK este citotoxicitatea. Ele lizeaz fr restricie CMH, celulele tumorale sau pe cele infectate cu virusuri. Activitatea celulelor NK este foarte nalt la oarecele nud (fr timus) sau la oarecii timectomizai neonatal. Dup activare, celulele NK elibereaz IFN . Cel mai studiat receptor membranar al celulelor NK este receptorul de mic afinitate pentru Fc al IgG (CD16). O subpopulaie distinct a celulelor NK o reprezint celulele K (killer). Ele sunt tot LGL, dar spre deosebire de celulele NK, exprim receptorul de mare afinitate pentru Fc . Aciunea lor principal este citotoxicitatea mediat de anticorpi (ADCC), fa de

13

celulele modificate antigenic. In vitro, limfocitele T din snge, sub aciunea stimulatoare a unor citochine (IL-2, IFN ) difereniaz o subpopulaie, care au fost denumite LAK (lymphokine activated killers). In vitro, prin adugarea IL-2 i a antigenului tumoral, devin citotoxice fa de celulele tumorale omologe.

* Markerii de suprafa ai limfocitelor T umane s-au identificat cu dificultate, datorit naturii outbred a populaiei. S-au notat cu literele TCD, urmate de o cifr, n ordinea descoperirii: TCD1, TCD2 etc. Anticorpii monoclonali au constituit instrumentul esenial de lucru. Cel mai cunoscut este markerul TCD4, deoarece funcioneaz ca receptor pentru HIV. Este un glicopeptid cu o regiune extracelular format din 4 domenii, un domeniu transmembranar i unul citoplasmatic, iar CD8 este dimeric i prezint un domediu asemntor cu domeniul variabil al moleculei de imunoglobulin. ** CD (cluster designation) se refer la grupele (cluster) de anticorpi monoclonali utilizai pentru identificarea subpopulaiilor de limfocite. Fiecare grup de AMC are specificitate fa de un anumit marker celular.

<<Pagina anterioar :: Home :: :: Despre autor :: Pagina urmtoare>>

Universitatea din Bucuresti 2003. No part of this text may be reproduced in any form without written permission of the University of Bucharest, except for short quotations with the indication of the website address and the web page. Comments to:Grigore MIHAESCU; Text editor & Web design: Laura POPESCU; Last update: June, 2003

14