PRCTICA N 4 POLARIMETRA (ROTACIN ESPECFICA DE SUSTANCIAS PTICAMENTE ACTIVAS)

4.1 OBJETIVOS Identificar los componentes de un Polarmetro, utilizado para detectar la rotacin especifica de sustancias pticamente activas. Adquirir destreza en la calibracin del Polarmetro, para la posterior eficacia en la toma de lecturas. Determinar el valor de la rotacin especifica de sustancias pticamente activas. Estudiar el efecto que tienen ciertas sustancias sobre la luz polarizada.

4.2 MATERIALES Y REACTIVOS

MATERIALES Polarmetro POLAX-2L Baln aforado de 100 ml Vaso de precipitado de 500 ml Esptula Balanza analtica Papel absorbente

REACTIVOS Soluciones de: glucosa, sacarosa, maltosa. Agua destilada.

4.3 FUNDAMENTOS TERICOS La polarimetra, en su acepcin ms amplia, comprende todas las investigaciones de los fenmenos pticos en que interviene la luz polarizada. Para los fines de este estudio el tema se limita a la medida de la rotacin del plano de polarizacin de la luz cuando esta atraviesa una capa de una sustancia pticamente activa. La estereoqumica, es el estudio de la estructura tridimensional de las molculas. El descubrimiento de la eterioisomera fue uno de los hitos ms importantes de la teora estructural de la qumica orgnica.

Podramos definir a los estereoisomeros, como aquellos que difieren slo en la orientacin espacial de sus tomos, pero que son iguales en cuanto a que los tomos estn unidos entre s. Existen dos tipos principales de isomera: la isomera geomtrica o cis - trans, que se produce cuando la rotacin de un carbono respecto a otro se encuentra impedida por la presencia de un enlace doble o en estructuras cclicas, y la isomera ptica. Los ismeros pticos, tienen las mismas propiedades qumicas y fsicas, excepto en la direccin en que hacen rotar el plano de una luz polarizada. El valor de la rotacin especifica es el mismo, pero en sentido opuesto. Estos compuestos se llaman enantimeros. Para que un compuesto sea pticamente activo, sus molculas deben ser quirales (quiros = manos), es decir que una molcula y su imagen especular no deben ser superponibles. El instrumento utilizado para medir la rotacin especfica de las sustancias pticamente activas es el polarmetro. El polarmetro consta bsicamente de dos elementos polarizantes, uno de los cuales es fijo y el otro gira montado en una escala graduada que permite medir su orientacin respecto al primero; la luz monocromtica de la lmpara de sodio esta paralela al eje del aparato a travs de un colimador y es polarizada por un prisma de Ncol. Existe un prisma auxiliar dispuesto de tal forma que intercepta la mitad del rayo de luz. La radiacin pasa despus a travs de la muestra contenida en un tubo de vidrio de 20 cm de longitud; posteriormente atraviesa el otro prisma de Ncol (analizador) y va al ocular. El primer auxiliar divide el campo en dos porciones semicirculares iguales, la posicin de equilibrio se alcanza girando la escala; entonces una mitad reduce su intensidad luminosa y la otra la aumenta hasta que se consigue que las dos mitades tengan la misma intensidad de luz. Al introducir una sustancia pticamente activa entre los dos prismas de Ncol (polarizador y analizador) se deshace el equilibrio y es necesario mover la escala para restablecerlo. El movimiento de la escala nos da una medida directa de la actividad ptica de la sustancia. Para eliminar posibles errores, es preferible hacer primero una medida con el tubo lleno de disolvente (agua, en el caso de disoluciones acuosas). Es preciso asegurarse de que no haya burbujas de aire en el tubo del polarmetro estas burbujas significaran interferencias en el paso del haz de luz, y por tal razn una medida errnea. Para obtener medidas exactas es preciso tener cuidado en llenar el tubo y asegurarse de que no hay filtraciones de luz por ninguna rendija. Las dos tapas del tubo deben estar cuidadosamente limpias y secas. Antes de realizar medida alguna deber mantenerse encendida la lmpara de vapor de sodio durante 10 a 15 minutos para que, una vez caliente, de su luz caracterstica.

4.4 PROCEDIMIENTO

4.4.1

Calibracin del Polarmetro POLAX-2L:

Para comenzar a desarrollar la siguiente prctica es esencial la calibracin del equipo, debido a la importancia de los resultados que se desean obtener, para lo cual se procede de la siguiente manera: Encender el Polarmetro POLAX-2L, para el cual se enchufa a un toma de corriente de 110 V y se acciona el swiche que se encuentra al lado del cable ubicado en la parte posterior del equipo. Tomar el tubo polarimtrico de 200 mm el cual es el indicado para los lquidos claros, llenarlo con agua destilada hasta rebosar y deslizar el lente de vidrio que trae la tapa del tubo de manera horizontal evitando que queden burbujas de aire dentro del tubo y finalmente colocar la tapa del tubo. Abrir la cubierta del polarmetro y colocar el tubo polarimtrico en el porta tubo del equipo. Cerrar la cubierta del polarmetro. Descripcin del teclado: a) La tecla R de color azul indica el primer campo. b) La tecla L de color azul indica el segundo campo. c) La tecla de color rojo indica la velocidad para ubicar cualquiera de los dos campos. Proceder a buscar los campos a travs de las teclas anteriormente descritas teniendo en cuenta que la tecla roja debe mantenerse siempre oprimida al mismo tiempo en que se manejan ya sean la tecla R o L para una mayor velocidad, visualizndolos de la siguiente forma: Rotacin Derecha (Primer Campo).

Rotacin Izquierda (Segundo Campo).

Despus de ubicar el primer y segundo campo se procede a ubicar el tercer campo devolvindose con una leve rotacin de tal manera que quede ubicado en la mitad de R yL

Esperar hasta que se ilumine un botn de color verde que se encuentra ubicado debajo de la tecla ZERO y se oprime inmediatamente esta tecla. En la pantalla del polarmetro debe aparecer la lectura 0.00 indicando que el equipo ya se encuentra calibrado.

Nota: Despus de calibrar el equipo es indispensable retirar el tubo polarimtrico desocuparlo y lavarlo con agua destilada para continuar con el anlisis de la muestra.

4.4.2

Determinacin de la rotacin especfica:

Para la determinacin de la rotacin especfica, se toman las distintas muestras de sustancias pticamente activas que se desean analizar y se procede de la siguiente manera: Tomar el tubo polarimtrico de 200 mm el cual es el indicado para lquidos claros, se desecha el agua destilada utilizada en la calibracin del equipo y se procede a llenarlo con la muestra a analizar hasta rebosar y deslizar el lente de vidrio que trae la tapa del tubo de manera horizontal evitando que queden burbujas de aire dentro del tubo y finalmente colocar la tapa del tubo. Abrir la cubierta del polarmetro y colocar el tubo polarimtrico en el porta tubo del equipo. Cerrar la cubierta del polarmetro. Proceder a buscar los campos a travs de la teclas anteriormente descritas (R o L), teniendo en cuenta que la tecla roja debe mantenerse siempre oprimida al mismo tiempo en que se manejan ya sea la tecla R o L para una mayor velocidad, visualizndose los diferentes campos.

Campo uno

Campo dos

Despus de ubicar el primer y segundo campo se procede a ubicar el tercer campo devolvindose con una leve rotacin de tal manera que quede ubicado en la mitad de R y L, en este campo se identifica si la muestra es dextrgira o levgira dependiendo de la tecla que se haya utilizado para ubicar este campo: si utilizo la tecla R la sustancia es dextrgira, si utilizo la tecla L la sustancia es levgira. Inmediatamente ubicado el tercer campo se procede a tomar la lectura de la sustancia.

4.4.3

CLCULOS:

4.5 RECOLECCIN DE DATOS Y RESULTADOS

La prctica Polarimetra (Rotacin especfica de sustancias pticamente activas), se realizo en el equipo Polarmetro POLAX-2L. 4.5.1 Preparacin de soluciones:

Se prepararon soluciones de glucosa, sacarosa y maltosa, la glucosa se preparo en el laboratorio para comenzar la prctica, las soluciones de sacarosa y maltosa se prepararon con la finalidad de utilizarlas como muestras problema.

Solucin de Glucosa: se peso en la balanza analtica 10,02 g de glucosa, y se adiciono en un vaso de precipitado de 500 ml, se adiciona un poco de agua destilada hasta dilucin agitando vigorosamente por unos minutos. Una vez diluida la solucin de glucosa se transfiere a un baln de 100 ml y se afora con agua destilada. Se rotula como se observa en la imagen 4-1; Teniendo en cuenta que la concentracin se expresa en (g/100 ml).

Figura 4-1 Solucin de glucosa 10.02 % Las siguientes soluciones fueron preparadas con la finalidad de ser utilizadas como solucin problema. Solucin de Maltosa: se peso en la balanza analtica 1,497 g de Maltosa, y se adiciono en un vaso de precipitado de 500 ml, se adiciona un poco de agua destilada hasta dilucin agitando vigorosamente por unos minutos. Una vez diluida la solucin de Maltosa se transfiere a un baln de 100 ml y se afora con agua destilada.

Solucin de Sacarosa: se peso en la balanza analtica 1,57 g, y se adiciono en un vaso de precipitado de 500 ml, se adiciona un poco de agua destilada hasta dilucin agitando vigorosamente por unos minutos. Una vez diluida la solucin de se transfiere a un baln de 100 ml y se afora con agua destilada.

4.5.2

Determinacin de la rotacin especfica:

Una vez preparadas las soluciones, se procede a comenzar con la realizacin de la prctica. El equipo Polarmetro POLAX-2L se encendi con una anterioridad de 15 minutos antes de comenzar con el desarrollo de la prctica.

Se realiz la calibracin del Polarmetro POLAX-2L, como se indica en el apartado 4.4.1; en el cual se ubicaron los tres campos polarimtricos y se procedi a oprimir la tecla Zero una vez se ilumine el botn de color verde.

Figura 4-2 Tercer campo polarimtrico ubicado.

Figura 4-3 Polarmetro POLAX-2L calibrado. Con el polarmetro calibrado se procede a determinar la rotacin especfica de las diferentes muestras para las cuales se sigue el apartado 4.4.2 (Procedimiento para el anlisis de la muestra). Los datos obtenidos por las distintas muestras se registraron en la tabla 4-1. Sustancia Solucin de glucosa Solucin de maltosa Solucin de sacarosa Concentracin g/100 ml 10,02 % 3,65 % 1,497 % Rotacin observada en el polarmetro 12,20 4,10 4,85 Rotacin Especfica (+) 60,88 (+) 137 (+) 66,37

Tabla 4-1 Datos obtenidos por las diferentes muestras pticamente activas.

Con los datos obtenidos por parte del polarmetro se procede a realizar los diferentes clculos para determinar la rotacin especfica de la solucin de glucosa y los clculos necesarios para determinar las concentraciones de las muestras problema (solucin de maltosa y solucin de sacarosa). Los clculos se realizaron de la siguiente manera: Solucin de glucosa: el tercer campo se ubico oprimiendo la tecla R, por lo que podemos concluir que la muestra es dextrgira, la rotacin reportada por el polarmetro POLAX-2L fue de 12,20 como se puede observar en la figura 4-4.

Figura 4-4 Rotacin reportada para la solucin de glucosa. Con este dato se puede determinar la rotacin especfica de la muestra aplicando la formula de la rotacin especfica:

Teniendo en cuenta la formula de la rotacin especfica se procede a realizar los clculos Longitud del tubo polarimtrico POLAX-2L = 200 mm Longitud del tubo polarimtrico en decmetros = 200 mm * 1dm /100 mm Longitud del tubo polarimtrico en decmetros = 2 dm

12,20 * 100 = 60,88 [] = 10,02g/ 100ml * 2 dm La rotacin especfica de la solucin de glucosa es de (+) 60,88 por lo que podemos decir que la glucosa es dextrgira. Las siguientes dos soluciones fueron las utilizadas como muestras problema dentro del desarrollo de la prctica:

Solucin de sacarosa: el tercer campo se ubico oprimiendo la tecla R, por lo que se pudo concluir que la muestra de sacarosa es dextrgira, la rotacin reportada por el polarmetro POLAX-2L fue de 4,85 como se puede observar en la figura 4-5.

Figura 4-5 Rotacin reportada para la solucin de sacarosa. Se conoce tericamente que la rotacin especfica de la sacarosa a 25 C es de (+) 66,37. Con base en la formula de la rotacin especfica se puede determinar la concentracin de sacarosa en la muestra, para la cual se procedi as: C= * 100 [] * L(dm)

La longitud del tubo polarimtrico en decmetros es de: 2 dm

4,85 * 100 = 3,65 g / 100 ml (+) 66,37 * 2 dm

La concentracin de la solucin de sacarosa es de 3,65 g / 100 ml.

Solucin de Maltosa: el tercer campo se ubico oprimiendo la tecla R, por lo que se pudo concluir que la muestra de maltosa es dextrgira, la rotacin reportada por el polarmetro POLAX-2L fue de 4,10 como se puede observar en la figura 4-6

Figura 4-6 Determinacin de la rotacin especfica de la solucin de maltosa.

Se conoce tericamente que la rotacin especfica de la sacarosa a 25 C es de (+) 137. Con base en la formula de la rotacin especfica se puede determinar la concentracin de sacarosa en la muestra, para la cual se procedi as:

C=

* 100 [] * L(dm)

La longitud del tubo polarimtrico en decmetros es de: 2 dm

4,10 (+) 137 * 2 dm

* 100 = 1,497 g / 100 ml

La concentracin de la solucin de maltosa es de 1,497 g / 100 ml.

4.6 CUESTIONARIO:

1. En que consiste la polarimetra? R/ la polarimetra permite la medida de la rotacin del plano de polarizacin de la luz cuando esta atraviesa una capa de una sustancia pticamente activa, la medida puede ser detectada por medio de un polarmetro. 2. Qu se entiende por una sustancia pticamente activa? R/ una sustancia pticamente activa es la que rota el plano de la luz polarizada. 3. A qu se le llama sustancias dextrgiras y a cules levgiras? R/ se entiende por sustancia dextrgira (+) cuando su ngulo de rotacin se orienta hacia la derecha o en sentido de las manecillas del reloj, son sustancias levgiras (-) si su ngulo de rotacin se orienta en sentido contrario a las manecillas del reloj o hacia la izquierda. 4. Una solucin de 2 g de (+) - gliceraldehido HOCH2-CHOH-CHO en 10 ml de agua, se coloca en un tubo polarimtrico de 100 mm, con el polarmetro se encontr una rotacin de + 1,74 a 25C. calcular la rotacin especifica del (+) gliceraldehido? R/ 2 g /10 ml --------------- 0,2 g/ml concentracin de la solucin de gliceraldehido Luego se transforma la longitud del tubo polarimtrico en dm 100 m x 1dm / 100mm ---------------------- 1 dm Luego se determina la rotacin especfica. 1,74 [] = 0,2 g /ml * 1 dm * 100 = 8,7

La rotacin especfica del gliceraldehido es de 8,7

5. Una solucin de 0,5 g de (-) epinefrina disueltos en 10 ml de HCL diluido se coloc en un tubo polarimtrico de 20 cm. Con el polarmetro, se encontr que la rotacin era de - 5,0 a 25C. calcular la rotacin especifica de la epinefrina? R/ 0,5 g/ml ----------------- 5g/100 ml concentracin de la solucin de epinefrina

Luego se transforma la longitud del tubo polarimtrico en dm 20 cm x 1dm / 10 cm---------------------- 2 dm Luego se determina la rotacin especfica. 5 * 100 = 50,0 [] = 5g / 100ml * 2 dm

La rotacin especfica de la epinefrina es de 50

4.7 REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:

Hobart H. Willard, Lynne L. Merritt, y John A. Dean. Mtodos Instrumentales de Anlisis, Ed. Continental S.A., 4 a edicin, (1972) William F. Pickering. Qumica analtica moderna, Ed. Reverte S.A, 2 (1980)
a

edicin

E. Solano Oria, E. Prez Pardo, F. Toms Alonso, Prcticas de Laboratorio de Qumica Orgnica, Practica # 7 Polarimetra, Universidad de Murcia, Secretariado de publicaciones e intercambio cientfico (1991). L. G. Wade, JR. Qumica Orgnica, Captulo 5, Tema 5.4 Actividad ptica, Editorial Pearson Educacin S.A, Prentice Hall 5 a edicin, (2004) Madrid.