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FACULTE DES SCIENCES AGRONOMIQUES
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DEPARTEMENT DE NUTRITION ET SCIENCES ALIMENTAIRES
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THEME
EVALUATION ET AMÉLIORATION DE LA
TECHNOLOGIE TRADITIONNELLE DE PRODUCTION
DE KPÈTÈ-
KPÈTÈ-KPÈTÈ, UN FERMENT UTILISE POUR LA
FERMENTATION DU TCHOUKOUTOU
THESE
Pour l’obtention du diplôme d’Ingénieur Agronome
Le 19 Décembre 2007
TOPIC
IMPROVEMENT
EVALUATION AND IMPROVEMENT OF THE
KPÈTÈ-
TRADITIONAL PROCESS OF KPÈTÈ -KPÈTÈ: A
STARTER USED FOR THE FERMENTATION OF
TCHOUKOUTOU
THESIS
Submitted to obtain the degree of “Ingenieur Agronome”
Je certifie que le présent travail a été réalisé sous ma supervision par Mênouwesso
Harold HOUNHOUIGAN, à la Faculté des Sciences Agronomiques de l’Université
d’Abomey-Calavi en République du Bénin.
Le superviseur
A Jésus-christ, pour avoir été mon meilleur compagnon tout au long de ce travail.
A mes frères Eric et Cynthia HOUNHOUIGAN, que ce travail suscite en vous la volonté de
réussir dans vos études.
Aux familles ATTONDE et SEBAPO, particulièrement à Akofa SEBAPO qui durant ces
cinq (05) ans m’a soutenu affectivement, moralement et spirituellement. Reçois par ce travail
l’expression de ma profonde gratitude.
A tout les amis étudiants de la Faculté des Sciences Agronomiques pour l’ambiance qui a
prévalu tout au long de ces années d’études.
A tous mes cousins et cousines, que ce travail soit pour vous un exemple et une exhortation à
la persévérance dans vos études.
ii
REMERCIEMENTS
A toutes les personnes qui ont, de près ou de loin, contribué à la réalisation du présent travail,
je dis merci.
Je remercie également le Professeur Joseph D. HOUNHOUIGAN qui m’a donné le goût des
sciences alimentaires et qui durant tout mon cursus m’a inculqué les valeurs du travail bien
fait et de l’esprit critique dans la recherche.
Mes remerciements vont également à tous les enseignants de la Faculté des Sciences
agronomiques en particulier à MM Victor ANIHOUVI, Paulin AZOKPOTA, Joseph
DOSSOU, Noël AKISSOE pour leur appui scientifique.
A Akofa SEBAPO, pour s’être investie avec beaucoup de joie et d’amour dans la réalisation
de ce travail, un sincère merci.
Enfin que tous ceux qui ont contribué d’une manière ou d’une autre à la réalisation de ce
travail, trouvent ici l’expression de ma profonde gratitude.
iii
RESUME
La présente étude s’est proposée d’améliorer, par un essai de stabilisation, la
technologie traditionnelle de production de ferment utilisée pour la fermentation du
tchoukoutou, une bière béninoise à base de céréales.
Pour atteindre cet objectif nous avons fait une enquête de terrain pour identifier les
types de ferments traditionnels et leur mode de production. Ensuite au niveau du laboratoire,
nous avons effectué des analyses microbiologiques et physico-chimiques sur le ferment
humide et sec collectés sur le terrain d’une part, et sur le ferment humide lors de sa
conservation d’autre part. Enfin nous avons fait un essai de stabilisation du ferment humide.
Les travaux réalisés au cours de cette étude ont permis de montrer que :
Les levures et les bactéries lactiques après la stabilisation par voie de séchage
ont conservé quelque peu leur viabilité. Le tchoukoutou produit à partir du
ferment stabilisé présente les propriétés microbiologiques et physico-chimiques
semblables au tchoukoutou traditionnel produit par les productrices.
iv
ABSTRACT
The purpose of the present study was to improve the processing technique of kpètè-
kpètè, a traditional starter used for the fermentation of tchoukoutou, a local cereal beer from
Benin.
To achieve this goal we conducted a field survey to identify the types of starter and
their mode of production. At the laboratory, we performed microbiological and
physicochemical analyses on wet and dry starters collected from the field and on starters
sampled at various interval during storage. Finally we conducted a trial to stabilize the kpètè-
kpètè in view of improving the starter.
The different types of starter used for the fermentation of tchoukoutou are kpètè-
kpètè which can be wet or dried (the product being used wet), the pumpkins
fermentation;
During the storage of kpètè-kpètè, yeast and lactic acid bacteria undergo a
significant reduction especially after three day of preservation;
In terms of physicochemical, acidity, levels of total and reduced sugars and the
degree brix decrease during the conservation of kpètè-kpètè, due to microbial
activity, but also because of the renewal of water;
The yeast and lactic acid bacteria after stabilization through drying somewhat
kept their viability. The tchoukoutou produced from stabilized starter presents
microbiological and physicochemical properties similar to traditional
tchoukoutou produced by the producers.
v
LISTE DES SIGLES ET ABREVIATIONS
aw: Activité de l’eau
vi
LISTE DES TABLEAUX
Tableau 1: Microorganismes associés à la fermentation de quelques bières africaines ......... 14
tchoukoutou .............................................................................................................................. 47
vii
LISTE DES FIGURES
Figure 1: Diagramme de production du tchoukoutou lourd .................................................... 10
.................................................................................................................................................. 41
(avec renouvellement de l’eau tout les vingt quatre (24) heures pendant trois (3) jours ......... 43
Figure 8: Evolution des sucres totaux et des sucres réducteurs au cours de la conservation du
kpètè-kpètè ................................................................................................................................ 45
viii
LISTE DES PLANCHES
Planche 1 : le kpètè-kpètè ........................................................................................................ 33
ix
LISTE DES ANNEXES
Annexe 1: Questionnaire d’enquête ......................................................................................... 58
x
TABLE DES MATIERES
CERTIFICATION ....................................................................................................................... i
DEDICACES ............................................................................................................................. ii
RESUME ................................................................................................................................... iv
ABSTRACT ............................................................................................................................... v
LISTE DES TABLEAUX ........................................................................................................ vii
LISTE DES FIGURES ............................................................................................................ viii
LISTE DES PLANCHES .......................................................................................................... ix
LISTE DES ANNEXES ............................................................................................................. x
INTRODUCTION ...................................................................................................................... 2
1. SYNTHESE BIBLIOGRAPHIQUE ...................................................................................... 6
1.1 Technologie de production des bières traditionnelles en Afrique. ................................... 6
1.2 La production de tchoukoutou au Bénin........................................................................... 8
1.2.1 Technologie de production ........................................................................................ 8
1.2.2 La qualité sanitaire du tchoukoutou......................................................................... 11
1.3 Influence de la fermentation sur les caractéristiques des produits à base de sorgho...... 11
1.3.1 Microorganismes impliqués dans la fermentation des bières locales. .................... 13
1.3.2 Facteurs influençant la performance des ferments traditionnels. ............................ 15
1.3.2.1 Présence de substances nutritives .................................................................... 15
1.3.2.2 L’eau................................................................................................................. 15
1.3.2.3 Le pH ................................................................................................................ 16
1.3.3.4 La température ................................................................................................. 17
1.4 L’interaction bactéries lactiques-levures dans les fermentations. .................................. 19
1.5 Importance de l’utilisation des starters dans la fermentation. ........................................ 19
1.6 Les ferments traditionnels. ............................................................................................ 20
1.7 Les ferments améliorés................................................................................................... 21
2. MATERIELS ET METHODES ........................................................................................... 24
2.1 Enquête de terrain ........................................................................................................... 24
2.2 Analyses de laboratoire .................................................................................................. 24
2.2.1 Matériels .................................................................................................................. 24
2.2.1.1 Collecte d’échantillons pour l’évaluation des caractéristiques du ferment
traditionnel. .................................................................................................................. 24
2.2.1.2 Collecte des échantillons pour l’étude de la dynamique du ferment au cours de
la conservation. ............................................................................................................ 25
2.2.2 Evaluation des caractéristiques physico-chimiques du ferment traditionnel .......... 25
2.2.2.1 Détermination du taux de matière sèche .......................................................... 25
2.2.2.2 Détermination du pH et de l’acidité titrable .................................................... 25
2.2.2.3 Dosage des sucres totaux ................................................................................. 26
2.2.2.4 Dosage des sucres réducteurs .......................................................................... 26
2.2.2.5 Détermination du degré brix ............................................................................ 27
2.2.3 Evaluation des caractéristiques microbiologiques du ferment traditionnel............. 27
2.2.3.1 Préparation des échantillons ........................................................................... 27
2.2.3.2 Dénombrement des germes aérobies mésophiles totaux ................................. 27
2.2.3.3 Dénombrement des bactéries lactiques ............................................................ 27
2.2.3.4 Dénombrement des levures et moisissures ....................................................... 28
2.2.3.5 Dénombrement des entérobactéries ................................................................. 28
2.3 Essai de stabilisation ...................................................................................................... 28
2.4 Analyse statistique.......................................................................................................... 29
3. RESULTATS ET DISCUSSION ......................................................................................... 31
xi
3.1 Analyse de l’enquête ...................................................................................................... 31
3.1.1 Description de la technologie traditionnelle de production de tchoukoutou ........... 31
3.1.2 Les différentes formes de ferment traditionnel ....................................................... 33
3.1.3 Autres facteurs affectant la fermentation ................................................................ 38
3.2 Caractéristique microbiologique du kpètè-kpètè ........................................................... 38
3.3 Caractérisation du kpètè-kpètè au cours de sa conservation par renouvellement d’eau . 40
3.3.1 Dynamique microbiologique du kpètè-kpètè au cours de la conservation .............. 40
3.3.2 Dynamique physico-chimique du kpètè-kpètè ........................................................ 41
3.3.2.1 Evolution du pH et de l’acidité titrable ............................................................ 41
3.3.2.2 Evolution des sucres totaux et réducteurs ........................................................ 43
3.4 Essai de stabilisation du kpètè-kpètè par séchage .......................................................... 45
3.4.1 Effet des traitements technologiques de stabilisation sur la qualité du kpètè-kpètè 45
3.4.2 Effet des ferments sur les propriétés physico-chimiques et microbiologiques du
tchoukoutou ...................................................................................................................... 47
CONCLUSION ET SUGGESTION ........................................................................................ 50
REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES ................................................................................. 51
xii
INTRODUCTION
INTRODUCTION
Le sorgho (Sorghum bicolor (L.) Moench), une plante céréalière appartenant à la
famille des graminées et à la tribu des andropogonés, joue un rôle crucial dans la sécurité
alimentaire des pays en Afrique. En effet la production mondiale de sorgho en 2006 est
d’environ 55 millions de tonnes dont 40% proviennent de l’Afrique. Utilisé comme aliment
de base dans les zones arides d’Afrique et du monde (Kayodé et al, 2005), le sorgho constitue
une source importante d’énergie et de protéines pour les habitants d’Afrique et d’Asie. Au
Bénin, le sorgho représente environ 15,70% de la production céréalière nationale et sert de
matière première pour la fabrication de nombreux aliments (FAO, 1995). Nago et
Hounhouigan (1998) ont recensé trois principaux groupes d’aliments à base de sorgho au
Bénin : les boissons (tchoukoutou, chapkalo), les bouillies (gowé, koko, sorou) et les pâtes
(Ogui, akassa, dibou, foura). Ces différents aliments ont des avantages nutritionnels et
organoleptiques variés selon les opérations unitaires utilisées pour leur production :
augmentation de la teneur en vitamines et en acides aminés, meilleure biodisponibilité des
minéraux et diminution de la concentration de certains facteurs antinutritionnels tels que les
tannins et composés toxiques (Wang et Flields, 1978 ; Kazanas et Flields, 1981 ;
Hounhouigan, 1994; Elhag et al., 2002 ).
2
D’autre part, le faible rendement de la production et les caractéristiques
organoleptiques de cette bière la rendent moins attrayante que la bière occidentale très
appréciée dans les villes africaines.
Les exigences de qualité de plus en plus strictes, notamment au niveau des populations
urbaines nécessitent la mise au point d’une bière africaine standardisée bien conditionnée et
de bonne qualité organoleptique et sanitaire, aussi compétitive que la bière de malt d’orge.
Ainsi des essais d’amélioration de la qualité et de conditionnement des bières locales
africaines ont été réalisées notamment au Nigeria et en Afrique du sud (Odunfa, 1985). Très
peu d’études ont porté sur la caractérisation et l’amélioration du ferment traditionnel utilisé
pour la production de ces bières.
Sanni (1993), Kirmaryo et al. (2000) et Holpzapfel (2002) ont proposé l’approche
starter comme méthode appropriée d’amélioration de la qualité des aliments fermentés
traditionnels en Afrique. Achi (2005) indique à ce titre que cette approche permet la
stabilisation, le contrôle et l’optimisation des fermentations spontanées des produits
traditionnels. Aussi l’isolation, la sélection, la conservation des souches les plus performantes
provenant des processus traditionnels, et la mise au point de starters en prélude à
l’industrialisation sont préconisées.
3
Quand le starter est adapté au substrat, son utilisation améliore le contrôle et
l’optimisation du processus de fermentation et la prédictibilité des produits dérivés
(Holzapfel, 1997). De même, la qualité sanitaire et l’acceptabilité des aliments traditionnels
africains pourraient être améliorées avec l’utilisation de starter adéquat (Gran et al., 2003).
Sanni (1993) et Kirmaryo et al. (2000) remarquent également que l’utilisation des starters
pourrait réduire les variations de caractéristiques organoleptiques et l’instabilité
microbiologique des aliments fermentés africains.
L’utilisation des starters sous forme de cultures pures ou mixtes paraît donc être une
option prometteuse pour la maîtrise de la qualité des bières locales.
Notre étude vise à évaluer le système technique de production du kpètè-kpètè, un
ferment traditionnel utilisé au Bénin pour la fermentation de la bière locale tchoukoutou. Plus
spécifiquement, l’étude vise à capitaliser les savoir-faire endogènes de production et de
conservation du ferment et à le caractériser au plan microbiologique et physico-chimique au
cours de la période normale de conservation.
4
SYNTHESE BIBLIOGRAPHIQUE
1. SYNTHESE BIBLIOGRAPHIQUE
1.1 Technologie de production des bières traditionnelles en Afrique.
Les bières traditionnelles africaines sont des boissons faiblement alcoolisées (2 à 4,5
% v/v) issues de la fermentation d’un moût sucré généralement obtenu à partir du malt de mil,
de maïs ou de sorgho. La durée de conservation de ces produits traditionnels est courte (2 à 3
jours), mais des essais de stabilisation permettent d’envisager une distribution plus large de ce
type de bière.
Les étapes souvent distinguées dans la production des bières africaines sont en général
au nombre de trois. Il s’agit du maltage (trempage, germination, séchage, mouture), du
brassage (première cuisson, acidification, filtration, deuxième cuisson) et de la fermentation.
La fermentation intervient à deux niveaux. Une première fermentation intervient juste après la
première cuisson avec acidification du produit et suivi de la deuxième fermentation mixte
lactique et alcoolique. L’étape d’acidification est une étape durant laquelle il y a production
d’acide par les bactéries lactiques après la seconde cuisson. La seconde fermentation produit
de l’alcool et du dioxyde de carbone. Les bières sont consommées pendant qu’elles sont
chaudes donc en pleine fermentation. Lorsque la bière n’est pas consommée dans les délais de
un à deux jours elle devient insipide, trop acide avec un arôme déplaisant à cause de
l’accumulation de l’acide lactique et est donc rejetée par les consommateurs.
La courte durée de vie des bières africaines crée plusieurs problèmes de production et
de distribution commerciale. Il y a en effet, une grande différence entre les bières de type
européen (lager beer) et les bières africaines. Les bières africaines sont rarement aromatisées
avec des herbes ou des épices. Les bières africaines sont pour la plupart consommées avec les
levures qu’elles contiennent et présentent un aspect opaque dû en partie à ces levures qui
restent en suspension dans la bière. Des granules d’amidon et des petites particules de son ou
de grains de céréales qui sont maintenus en suspension par des bulles de dioxyde de carbone
contribuent également au caractère opaque des bières africaines. Plusieurs consommateurs
sont intéressés par l’apparence de la bière, son arôme et son taux d’alcool. Les bières Sud-
africaines sont décrites comme ayant une acidité comparable à celle du yaourt, avec pour
caractéristique une odeur fruitée. Les taux d’alcool varient entre 1 et 8%, mais des valeurs
comprises entre 2,5-4,5% sont les plus usuelles. Avec une couleur marron rosé, ces bières ont
un pH variant entre 3,3 et 3,6; le taux d’acide lactique est de l’ordre de 0,26% avec un taux de
matière sèche de 6%. Toutefois, il existe de grandes variations dans la composition des bières
traditionnelles africaines (Haggblade et Holzapfel, 1989 ; Harris, 1997 ; Novellie, 1966 ;
Novellie and De Shaepdrijver, 1986). Les bières traditionnelles africaines sont diverses dans
leur dénomination et leurs caractéristiques. Ainsi on distingue le bouza en Egypte, le merissa
au Soudan, le pito au Ghana et le dolo au Burkina Faso qui présentent des caractéristiques
proches du tchoukoutou béninois.
• Le bouza
Le bouza (bouzah, bowza, etc.) est une bière produite en Égypte et au Soudan à partir
du blé, de l’orge ou du mil, utilisant des méthodes qui ressemblent à celles employées par les
anciens Mésopotamiens et Egyptiens (Briggs, 1998; Morcos et al, 1973). Les grains moulus,
mélangés avec un peu de malt sont délayés dans de l’eau et l’on introduit un peu de levure
dans la pâte acide ainsi obtenue. Le mélange est légèrement cuit et commence à se fermenter
spontanément ou après ajout d’une vieille production de bouza. Après une période de
fermentation active le mélange est filtré à travers un tamis de crin.
La boisson est lourde et levurée, jaune clair, acide avec une odeur caractéristique. Le
pH se situe entre 3,5-4 avec un taux d’alcool de 4-5,5g/100g. Elle doit être vite consommée
avant que la détérioration ne commence (Briggs, 1998).
• Le merissa
Au Soudan une bière nommée merissa est produite. Dirar (1978) décrit un schéma
complexe pour la production du merissa. Des grains de sorgho sont maltés, séchés et réduits
en farine. Cette farine est répartie en trois lots, chaque lot subit des traitements différents. Le
premier lot est légèrement cuit. Le second lot est bien cuit et donne une pâte de couleur
marron. Ces deux lots sont mélangés et laissés refroidir. Le troisième lot est mouillé avec la
quantité d’eau nécessaire à une bonne humidification et est laissé pendant trente six (36)
heures jusqu’à ce que la fermentation lactique se produise. La pâte acide obtenue est cuite
dans un récipient, le malaxage est fait jusqu’à ce que l’ensemble prenne une couleur marron
sombre, avec une acidification élevée et un arôme de caramel. Elle est refroidie et mélangée
avec 5% de malt, de l’eau et une production antérieure de merissa. La fermentation s’établit
après 4-5 heures. Ce produit étant trop acide à boire, les deux premiers lots y sont ajoutés.
Après 8 à 10 h de fermentation le mélange est filtré au travers d’un tissu de maille adéquat
pour retenir partiellement les particules solides. Le produit est consommé en pleine
fermentation. Le merissa a un pH de 4 et un taux d’alcool de 5 %.
7
• Le busaa et autres bières
Le tchoukoutou est une boisson opaque, qui est souvent produite à base de sorgho, de
mil ou de maïs. Globalement, il existe deux types de tchoukoutou : le tchoukoutou léger et le
tchoukoutou lourd (Glidja et al., 2006). Ces deux types sont différents l’un de l’autre du point
de vue de la texture. L’un est plus raffiné (tchoukoutou léger) que l’autre (tchoukoutou lourd)
c'est-à-dire qu’il subit une filtration plus poussée. A Cotonou on rencontre le tchoukoutou
lourd tandis qu’à Parakou les deux types coexistent.
Le tchoukoutou est produit par des femmes utilisant diverses opérations unitaires. En
général, comme dans le cas des bières conventionnelles de type lager, la production de cette
bière locale se fait en trois phases: le maltage, le brassage et la fermentation. Une quantité de
27 kg de grains en moyenne est utilisée pour la production. Les grains sont trempés dans l’eau
(9-12h), germés (72-85h), séchés au soleil (7-15h), moulus, délayés dans l’eau puis décantés.
Ensuite on sépare le surnageant du dépôt qui est chauffé graduellement pendant 2 heures.
Après ébullition, le dépôt est mélangé avec le surnageant et ce mélange laissé toute la nuit
pour permettre son acidification. Le mélange est ensuite filtré, bouilli (6-9h) et refroidi pour
8
donner le moût qui est enfin inoculé avec un ferment issu d’une production antérieure de
tchoukoutou (ce ferment est appelé kpètè-kpètè en bariba, dendi et Yoruba). La fermentation
du moût ainsi enclenchée dure toute la nuit (13-14h) (Kayodé 2006).
Le choix du type de sorgho est crucial car il déterminera avec d’autres facteurs la
réussite du brassage de la bière. Les productrices affirment souvent que toutes les variétés de
sorgho ne sont pas appropriées pour la production de la bière. La durée de stockage est un
important critère sur lequel les productrices portent une attention spéciale lors du choix des
grains pour le brassage ; particulièrement pendant la période de septembre à décembre. Les
dommages causés par les insectes, la présence de trou, de poussière constituent un indicateur
efficient de la non convenance des grains au brassage. D’autres facteurs importants de
sélection des grains de sorgho pour le brassage incluent la taille, la couleur et dans une
moindre mesure l’origine des grains (Kayodé et al., 2005).
9
Figure 1: Diagramme de production du tchoukoutou lourd (Cotonou et Parakou)
Source : Glidja et al., (2006)
10
1.2.2 La qualité sanitaire du tchoukoutou.
Le tchoukoutou est une boisson aigre avec un pH de 3,2 (+/- 0,2) et une acidité titrable
s’élevant à 0,8 +/- 0,1 (en pourcentage d’acide lactique) (Kayodé, 2006). Le produit contient
en proportion relativement élevée mais variable des particules solides et des protéines brutes.
La majorité des microorganismes impliqués dans la fermentation de cette boisson sont
essentiellement les bactéries lactiques et les levures. L’activité symbiotique entre les deux
groupes de microorganismes a été mise en évidence. Les bactéries lactiques créent un
environnement acide favorisant la prolifération des levures qui produisent des vitamines et
l’augmentation d’autres facteurs tels que les acides aminés pour les bactéries lactiques
(Muyanja et al., 2003). Les bactéries lactiques produisent l’acide lactique et d’autres acides
organiques qui réduisent le pH des produits de 6,5 à 3,6 (Hounhouigan et al, 1993). Si le pH
des produits alimentaires est en dessous de 4.0, l’augmentation des diarrhées causées par des
bactéries pathogènes est inhibée (Nout et al., 1989; Motarjemi et Nout, 1996). En
conséquence le tchoukoutou ne constitue pas une source de bactéries pathogènes et reste sûr
lorsqu’il est produit dans de bonnes conditions hygiéniques (Kayodé 2006).
Du point de vue qualité sanitaire, les différentes pratiques du procédé de fabrication
peuvent avoir d’importants risques sur la santé des consommateurs de bière de sorgho. La
croissance des moisissures a été observée sur des grains germés après trois jours de
fermentation. Ces champignons peuvent impliquer Aspergillus spp., un genre pouvant
produire des mycotoxines et prédominant dans la zone septentrionale du Bénin (Setamou et
al., 1997). Aspergillus spp. peut produire l’aflatoxine, lequel peut constituer un danger de
santé chez les humains et les animaux (Miller, 1995). Par ailleurs, les aflatoxines sont tout à
fait stables pendant les processus d’ébullition et de fermentation. Ainsi, une quantité
significative de ces toxines pourrait se retrouver dans la bière (Kayodé, 2006).
11
continent (Hounhouigan et al., 1993). La fermentation lactique améliore les caractéristiques
organoleptiques des divers produits en produisant des flaveurs variées (Hounhouigan, 1994).
Dirar (1993) rapporte également que la fermentation confère aux pâtes fermentées
soudanaises une meilleure apparence, notamment plus de brillance et une texture plus
onctueuse. Hounhouigan (1994) a prouvé que les caractéristiques de couleur notamment la
luminance (clarté) du « mawè », une pâte fermentée à base de maïs, s’accroissent et donc
s’améliorent au cours de la fermentation. La texture plus onctueuse des pâtes fermentées est
liée, selon Novellie (1982), à leur acidité. Cette acidité attendrirait les matrices protéiques
autour des granules d’amidon, ce qui pourrait libérer ces granules et accroître la viscosité des
bouillies qui en sont issues après cuisson.
La fermentation, essentiellement lactique, accroît aussi la valeur nutritive ou la
digestibilité du produit de base utilisé (Au et Fields, 1981 ; Chavan et Kadam, 1989 ;
Hounhouigan, 1994). Ainsi, la fermentation, au moyen des souches pures de bactéries
lactiques, réduit les teneurs en sucres réducteurs, mais accroît la teneur en sucres totaux du
sorgho et en acides aminés (Correia et al., 2005). Cependant, ces auteurs ont observé une
augmentation simultanée des sucres réducteurs et des sucres totaux pendant la fermentation
naturelle. Cette augmentation des sucres totaux pourrait résulter de l’hydrolyse de l’amidon
qui libère plus de dextrines en solution lors des fermentations naturelles (Kazanas et Fields,
1981 ; Odunfa et Adéyélé, 1985 ; Hounhouigan, 1994 ; Correia et al., 2005). Hounhouigan
(1994) explique également l’augmentation des sucres dans le milieu de fermentation naturelle
par l’activité des amylases endogènes du produit. A contrario, au cours des fermentations avec
des souches pures, l’utilisation des sucres induit une réduction des sucres réducteurs et totaux
(Hounhouigan, 1994 ; Correia et al., 2005). Les sucres réducteurs sont utilisés dans ces
fermentations comme source d’énergie par les microorganismes introduits (Corréia et al.,
2005).
La fermentation induit aussi une augmentation de la teneur en vitamines surtout du
groupe B dans les céréales fermentées africaines (Dirar, 1993). Certaines de ces vitamines
comme la thiamine sont produites par l’activité microbienne.
De plus, la fermentation améliore la digestibilité des protéines (Chavan et al., 1988 ;
Dirar , 1993) ainsi que celle des acides aminés et pourrait accroître celle des glucides
(Kazanas et Fields, 1981) et la biodisponibilité des minéraux (Khetarpaul et Chauhan, 1989).
Osman (2004) signale à cet effet une augmentation significative de la digestibilité in vitro des
protéines du sorgho. Ceci est le résultat probable d’une réduction de la teneur en acide
phytique et autres facteurs antinutritionnels susceptibles de complexer les protéines et
12
d’affecter leur digestibilité (Mahajan et Chauhan, 1987 ; Abdalla et al., 1998 ; Osman, 2004 ;
El Hag et al. 2002). La fermentation, grâce à la réduction du pH, contribuerait à l’activation
de la phytase dont l’optimum d’activité se situerait à un pH compris entre 4,5 et 5 (Kayodé,
2006). L’amélioration de la biodisponibilité des nutriments pourrait aussi s’expliquer par la
réduction de la teneur en tannins (El Khalil et El Tinay 1994 ; Hasan et El Tinay, 1995 ;
Osman, 2004). Cette réduction des tannins est plus forte quand la fermentation a lieu avec les
lactobacilles (surtout Lactobacillus fermentum) qu’avec les levures. L’activité des
polyphénoloxidases pourrait expliquer cette diminution des polyphénols (Khetarpaul et
Chauhan, 1989). La fermentation permet aussi de diminuer de façon notable le taux de
proanthocyanidines solubles dans l’eau (Bvochora et al., 1999).
En outre, il faut noter que la fermentation lactique inhibe le développement des
bactéries pathogènes nuisibles aux aliments et aux consommateurs (Au et Fields, 1981 ; Nout
et al., 1989).
Plusieurs bières africaines ont fait l’objet d’études microbiologiques. Le tableau ci-
après montre les types de microorganismes associés à la fermentation de ces boissons
alcoolisées.
13
Tableau 1: Microorganismes associés à la fermentation de quelques bières africaines
14
Fermentum,
Lb bifermentans, Lb
fructivorans, Lb viridescens, Lb.
hilgardii, Lb. kandleri et Lb.
casei
Les glucides, plus spécialement les sucres sont généralement utilisés comme sources
d’énergie par les microorganismes mais d’autres sources de carbone telles que les esters, les
alcools, les peptides, les acides aminés, les acides organiques et leurs sels peuvent être
également utilisés ( Frazier, 1958). Les glucides complexes tels que la cellulose, peuvent être
utilisés par peu de microorganismes. L’amidon quant à lui peut être hydrolysé par un nombre
limité de microorganismes. Les microorganismes diffèrent souvent par leur habileté à utiliser
certains sucres solubles. Certains microorganismes sont incapables d’utiliser le lactose (sucre
du lait) et de ce fait sont incapables de s’y développer convenablement. Par exemple le
maltose ne peut être dégradé par les levures. Les bactéries sont souvent identifiées et classées
sur la base de leur habileté ou non à utiliser les différents types de sucres et alcools. Les
bactéries lactiques ont besoin de lactose et d’une gamme large d’acides aminés, de vitamines
et d’autres facteurs pour leur croissance (wood, 1985). Elles peuvent également utiliser
l’éthanol comme substrat et le transformer en acide lactique (Frazier, 1958). En général, les
sucres sont les meilleurs nutriments des levures (Frazier 1958).
1.3.2.2 L’eau
15
- Comme agent chimique des réactions d’hydrolyse, génératrices des monomères
(acides aminés, sucres, acides gras) nécessaires aux synthèses microbiennes et aux
réactions énergétiques.
L’activité de l’eau (aw) indique la disponibilité de l’eau d’un milieu pour des réactions
chimiques, biochimiques, un changement d’état ou un transfert au travers d’une membrane
semi-perméable. Sa valeur est comprise entre 0 et 1.
Elle peut être mesurée par le rapport pression de vapeur de la solution (P) sur pression
de vapeur de l’eau pure (Po) (Nout et al, 1989).
Dans les produits alimentaires à aw faible (de 0,61 à 0,85) on observe le plus souvent
des altérations dues à des champignons, car les bactéries sont peu compétitives. Les levures
osmophiles et les moisissures xérophiles se développent dans la partie basse de cette
fourchette. Un temps de doublement de deux mois à été relevé chez Saccharomyces rouxii
pour une aw de 0,62 à 0,70, ainsi qu’une fermentation perceptible à une aw de 0,70 Beuchat,
1983 (1)). La formation de spores fongiques et la production de mycotoxines exigent une aw
plus élevée que celle requise par la croissance ou la germination au sein d’une même espèce
(Troller, 1980).
Tout abaissement de l’aw affecte le taux de croissance bactérienne; la plupart des
bactéries ont un taux optimum de l’ordre de 0,990-0,995. Pour des valeurs plus basses, la
croissance est ralentie ; ainsi Staphylococcus aureus a un taux de croissance réduit à 10% de
son maximum pour une aw de 0,90 (Beuchat, 1983). La nature du soluté influence les minima
d’aw requis par les bactéries ; ainsi Clostridium perfringens supporte mieux le glycérol que le
glucose ou le NaCl (Strong, 1970) à Aw égale.
1.3.2.3 Le pH
Tous les microorganismes ont besoin d’un pH donné pour bien se développer. En
général, les levures et les moisissures sont plus acido tolérantes que les bactéries (Frazier,
1958)
Les bactéries se développent sur des milieux dont le pH varie de 4,5 à 9, mais avec un
optimum de 6,5 à 7,5. Ils existent des exceptions, telles les bactéries acétiques ou les bactéries
lactiques qui supportent des pH inférieurs à 3,5.
16
Tableau 2: pH limites de croissance de quelques microorganismes (d’après Jay, 1986 ;
Carlier, 1983)
1.3.3.4 La température
C’est un des facteurs les plus importants agissant sur le développement des
microorganismes, et qui a une application presque généralisée dans la conservation des
produits frais et bien sûr congelés.
La majeure partie des microorganismes prolifère à des températures moyennes
supérieures ou égales à 20˚C. On admet généralement que les cellules microbiennes peuvent
croître lorsque les températures sont comprises entre -18˚C et 90˚C. A ces valeurs extrêmes la
prolifération est limitée mais la croissance métabolique peut être significative. Ainsi on décèle
une activité lipasique après quatre (4) jours d’incubation de Pseudomonas fragi à -7˚C et
même après vingt et un (21) jours à -29˚c. On a l’habitude de distinguer l’effet de la
température sur la croissance des cellules microbiennes et sur leur survie.
• Les psychrotrophes :
Ils sont vraiment adaptés au froid ; on les rencontre peu en milieu alimentaire, mais
plutôt dans les régions polaires (Uydess, 1976). Ils se développent à 0˚C et ont un optimum
17
compris entre 15 et 20˚C. Les psychrotrophes sont capables de s’adapter et de se développer
aux températures proches de 0˚C mais ont un optimum de 25 à 35˚C, ce qui les rapproche des
mésophiles. Ils sont caractérisés par un métabolisme lent, et sont peu compétitifs avec les
autres germes quand la température augmente.
Notons que les levures et moisissures sont pour la plupart psychrotrophes.
• Les mésophiles:
• Les thermophiles:
Ils sont capables de proliférer à de hautes températures allant de +45˚C à +65˚C avec
un optimum de +55˚C. Ils se caractérisent par un taux de croissance très élevé et une durée de
croissance courte.
Parmi les thermophiles, on distingue les germes dits thermotrophes qui sont des
mésophiles susceptibles de se développer à des températures élevées. On peut donner
l’exemple des bactéries lactiques telles que Streptococcus thermophilus ou Lactobacillus
bulgaricus qui se multiplient activement à +45˚C.
Lorsqu’on s’intéresse à l’effet de la température sur la résistance des microorganismes,
on est frappé par les valeurs élevées que ces microorganismes peuvent supporter. Les spores
bactériennes sont parmi les plus résistantes avec les spores de certaines moisissures qui
supportent des traitements de plusieurs heures à des températures supérieures à +100˚C.
La thermorésistance n’est pas obligatoirement reliée à la thermophilie. C’est le cas par
exemple des moisissures mésophiles (Byssochlamys, Aspergillus…) et les bactéries sporulées
mésophiles (Bacillus cereus, Bacillus substilis…).
Pour ce qui concerne la résistance des cellules aux basses températures, il est à noter
que la plupart d’entre elles résistent mieux à un traitement de congélation lorsque ce dernier
est effectué très rapidement. Ceci est à relier à la formation de microcristaux intracellulaires
altérant beaucoup moins les cellules que de gros cristaux formés lors d’une congélation lente.
Quel que soit le mode de congélation, il se traduit par des déformations, des lésions,
des destructions des structures cellulaires et il entraîne une plus ou moins forte mortalité des
cellules. En général les bactéries gram + sont plus résistants que les gram - . La survie des
cellules est augmentée si le traitement est appliqué à des cellules en phase stationnaire (Ray et
18
Speck, 1973). Elle est considérablement augmentée pour les formes sporulées des cellules de
clostridium (38% de survie après trois mois de stockage à -18˚C au lieu de 4% pour les
formes végétatives: Strong et coll., 1964).
19
évident que l’usage de starter existe bien dans les communautés traditionnelles. Dans ce
processus, les souches désirées ou non désirées de la fermentation spontanée sont
réintroduites à chaque fermentation pour induire une accélération du processus.
Quand il est adapté au substrat, l’utilisation du starter améliore le contrôle et l’optimisation du
processus de fermentation et la prédictibilité des produits (Holzapfel, 1997). Aussi, la qualité
sanitaire et l’acceptabilité des aliments traditionnels africains pourraient être améliorées (Gran
et al., 2003), Sanni (1993) et Kirmaryo et al. (2002) remarquent également que l’utilisation
des starters pourrait réduire les variations de caractéristiques organoleptiques et la stabilité
microbiologique des aliments fermentés africains.
Cependant, pour qu’une culture pure puisse être introduite dans les systèmes
traditionnels de fermentation à petite échelle, elle doit contribuer significativement à
l’amélioration des conditions de production et à l’amélioration de la qualité des produits. En
particulier, elle doit constituer un processus amélioré et prédictible de fermentation qui permet
une acidification rapide du produit, et une amélioration des caractéristiques sensorielles, de la
qualité sanitaire et hygiénique du produit (Holzapfel, 1997).
Actuellement les starters traditionnels utilisés en Afrique sont mixtes et comportent
des microorganismes variés dont les levures et les bactéries qui confèrent aux produits dérivés
des caractéristiques organoleptiques spécifiques adaptées aux goûts des consommateurs
locaux. Toute amélioration dans le processus de production de ferments traditionnels devrait
donc prendre en compte les préférences des consommateurs pour garantir une acceptabilité du
produit.
Même si à long terme, le génie génétique pourrait favoriser le développement de
souches pures aux propriétés génétiques stables (Achi, 2005) et des avantages nutritionnels et
organoleptiques diverses plus intéressants (Nout, 1985), une option certainement prometteuse
pour préserver les qualités des produits traditionnels est de travailler à améliorer les ferments
traditionnels dans le respect de leur diversité génétique.
20
font usage d’un starter dénommé kpètè-kpètè produit à partir des dépôts d’une production
antérieure du tchoukoutou.
Une fermentation naturelle accélérée de l’aflata à été obtenue par l’inoculation de
bactéries lactiques enrichie avec une pâte (starter), obtenue par un ‘’ Back-slopping’’ (Nche et
al., 1994). En Tanzanie un starter traditionnel est utilisé pour la fermentation du togwa, une
pâte fermentée à base de céréale obtenue par fermentation lactique. Une étude réalisée par
Lorri et Svanberg (1993a) a montré que l’utilisation de ce starter traditionnel était plus
efficace que l’utisation de culture pure de L.b plantarum en termes d’amélioration de la
digestibilité in vitro des protéines des variétés de sorgho à haute teneur en tanin. Banigo et al.
(1974) ont développé un starter traditionnel composé de mélange de culture de Lactobacillus
plantarum, Lactococcus lactis et saccharomyces Rouxii pour la production du ogui.
21
La fermentation avec des souches de bactéries lactiques du sorgho a été suivie à l’aide
des méthodes spectroscopiques (Correia et al., 2005). Une augmentation des acides aminés
libres et du taux de protéines a été constatée. Les sucres réducteurs, les protéines solubles et
l’amidon, par contre, ont diminué au cours de la fermentation.
22
MATERIELS ET METHODES
23
2. MATERIELS ET METHODES
Cette étude s’est déroulée en deux phases à savoir : une phase d’enquête de terrain et
une phase d’analyse au laboratoire.
2.2.1 Matériels
Dans un premier temps nous avons collecté et analysé deux types de ferments
traditionnels (kpètè-kpètè en bariba). Il s’agit du kpètè-kpètè humide et du kpètè-kpètè sec.
Ces échantillons ont été recueillis chez des productrices de Parakou. Ainsi nous avons collecté
cinq (05) échantillons d’environ 250ml de ferment humide et cinq (05) échantillons d’environ
200 g de ferment séchés. Une fois collectés, les échantillons humides ont subi un
renouvellement journalier d’eau pendant une période maximale de cinq (05) jours. A chaque
renouvellement d’eau, 100 ml d’eau de pompe est ajoutée au ferment après retrait du
surnageant de fermentation conformément à la méthode traditionnelle de conservation. Quant
aux échantillons destinés au séchage, il a fallu cinq (05) jours pour qu’ils soient jugés
suffisamment secs par les productrices (vue que l’enquête s’est déroulée en saison pluvieuse).
24
2.2.1.2 Collecte des échantillons pour l’étude la dynamique du ferment au cours de
la conservation.
L’évolution de la flore fermentaire et des caractéristiques physico-chimiques du
ferment pendant la conservation traditionnelle par renouvellement d’eau a été réalisée sur le
kpètè-kpètè humide. Le kpètè-kpètè humide a été produit par deux productrices sur deux sites
différents à raison de deux répétitions par productrice. Au total quatre échantillons de kpètè-
kpètè ont été ainsi collectés chez les deux productrices. Ces échantillons collectés ont été
conservés suivant la méthode de conservation traditionnelle précédemment décrite. Le
renouvellement du surnageant a été effectué toutes les vingt quatre (24) heures pendant 3
jours et les échantillons à analyser ont été prélevés toutes les vingt quatre (24) heures juste
avant le retrait du surnageant.
La teneur en matière sèche des échantillons a été déterminée par séchage à l’étuve à
105˚C suivi de pesée différentielle suivant la méthode AACC 44-15A (AACC, 1984). Le taux
de matière a été calculé suivant la formule ci-après :
P2 − P0
Taux de matière sèche (%) = x100
P1 − P0
25
titration avec du NaOH 0,1N jusqu’à la stabilisation du pH du mélange à 8,2. Les résultats
sont exprimés en % d’acide lactique (base sèche).
Le pourcentage d’acide lactique (b.s) est calculé selon la formule suivante :
V
% d’acide lactique (b.s) = x0,9( g )
M .ms
La méthode de Luff-Schoorl (Lees, 1969) a été utilisée pour doser les sucres totaux.
Après extraction des sucres avec de l’éthanol 40% (v/v), la solution a été déféquée au moyen
des réactifs carrez 1 et carrez 2. L’évaporation de l’éthanol et l’inversion du saccharose
contenu dans la solution déféquée avec de l’acide chlorhydrique ont été suivies de la titration
des sucres totaux avec le thiosulfate de sodium (0,1N). Les résultats sont exprimés en
pourcentage de glucose (base sèche).
(mg glucose dans 25ml x 2 x 10)
% sucres totaux = X 100
(mg échantillon dans 250 ml )
26
2.2.2.5 Détermination du degré brix
La mesure du degré brix a été réalisée à l’aide d’un réfractomètre (Sopelem 9596,
France). On dépose une goutte d’échantillon humide sur la lentille du réfractomètre et la
lecture est fait directement après exposition à la lumière.
Les analyses microbiologiques ont été réalisées dans un premier temps sur dix (10)
échantillons de kpètè-kpètè (dont cinq (05) échantillons humides et cinq (05) échantillons
secs) tous collectés à Parakou. Ensuite pour l’étude de la dynamique microbiologique du
ferment, les échantillons prélevés à différents intervalles de temps (0 à 72 heures) au cours de
la conservation du kpètè-kpètè humide ont été aussi analysés pour leur composition
microbiologique. L’étude a pris en compte le dénombrement des germes aérobiques totaux,
des bactéries lactiques, des levures et des moisissures et enfin des entérobactéries.
Une suspension mère ou solution de travail a été préparée à partir de 10g d’échantillon
de ferment dilué avec 90 ml d’eau peptonée salée (5g peptone, 8,5g NaCl, pH = 7,2±0,2). Le
mélange est homogénéisé à l’aide d’un stomacher (Lab blender 400, London, England). Des
dilutions décimales successives ont été ensuite réalisées et utilisées pour l’incubation des
boîtes.
La flore aérobie mésophile totale à été dénombrée sur le milieu Plate Count Agar
(PCA, oxoid, CM 325, Hampshire, England) après incubation à 30 ºC pendant trois (03) jours.
Les bactéries lactiques ont été dénombrées sur le milieu MRSA ‘’ Man Agar Rogosa
et Sharpe Agar (MRSA, CM 361, Oxoid, Hampshire, England) contenant 0,1% (W/V) de
natamycine (Delvocid, Gist-brocades, Delft, Netherland) après incubation à 30°C pendant
trois (03) à (04) jours.
27
2.2.3.4 Dénombrement des levures et moisissures
Les levures et les moisissures ont été dénombrées suite à une incubation de 1 ml de
chaque dilution sur du MEA agar (Malt Extract Agar) à 25°C pendant trois (03) à cinq (05)
jours.
Les entérobactéries (coliformes totaux) ont été dénombrées sur le milieu VRBG agar
après incubation pendant 24 h à 37°C.
Tous les résultats microbiologiques ont été exprimés en Log10 C.F.U/gramme de
produit.
Dispositif expérimental
Le malt de sorgho fourni par l’entreprise Alitech Industries est transformé en farine au
moyen d’un moulin à cylindre de type Amuda. Cent cinquante grammes (150 g) de cette
farine ont été introduits dans une fiole de 250 ml fermée avec du coton, puis soumis à un
traitement thermique (100˚C pendant 45 minutes) au bain- marie pour détruire la flore
microbienne de contamination du produit. Après traitement, la farine a été refroidie sous
hotte, en conditions stériles pour éviter d’éventuelles contaminations, à une température
comprise entre 30 et 45˚C.
28
L’humidité de la farine a été ajustée 50 % en utilisant la formule ci-dessous :
m (Hf – Hi)
Qe =
M - Hf
Pour l’inoculation de la masse de malt ainsi préparée, 20 g de ferment est utilisé pour
180 grammes de malt. Le mélange bien protégé est laissé pendant 24h pour subir une
fermentation à la température ambiante. Après fermentation le produit est séché pendant 24h à
une température de 45˚C (Dung, 2004).
Ce ferment a été utilisé pour fermenter 500g de tchoukoutou.
Test de fermentation
Les trois types de ferments ainsi obtenus ont été utilisés pour fermenter du moût frais
destiné à la préparation du tchoukoutou. Pour le ferment frais et pour le ferment traditionnel
obtenu par renouvellement d’eau 1,07 g ont été prélevé pour fermenter respectivement 500g
de tchoukoutou et environ 3g de ferment amélioré ont été utilisé pour fermenter la même
quantité de boisson.
29
RESULTATS ET DISCUSSION
3. RESULTATS ET DISCUSSION
3.1 Analyse de l’enquête
31
Farine maltée de
sorgho
Culot
Malaxage (manuel)
Fermentation (13h-14h)
Filtration Son
Moût
Cuisson (6 à 9h)
Refroidissement
Ajout de kpètè-kpètè
Fermentation (13 à 14h)
Tchoukoutou
32
3.1.2 Les différentes formes de ferment traditionnel
Selon 50% des productrices, il existe plusieurs types de ferment à savoir le kpètè-
kpètè, la calebasse de fermentation, les calebasses de production et de vente, le tchoukoutou
fermenté.
• Le kpètè-kpètè, (planche 1) s’obtient directement à partir de la production du
tchoukoutou. Après la fermentation, le ferment se dépose au fond de la marmite et il faut
attendre au moins dix (10) heures de temps pour que la totalité du kpètè-kpètè puisse se
déposer complètement. La productrice ne prélève donc le ferment seulement qu’à la fin de la
journée, moment correspondant à la fin de la vente. Le prélèvement se fait ainsi beaucoup
plus aisément sans risque de mélanger à nouveau le ferment et la boisson. Une fois retiré, le
ferment est conservé dans une calebasse. Le renouvellement de l’eau est obligatoire tous les
jours mais il ne peut dépasser trois (3) jours car il ralentit la fermentation et ne conserve donc
le ferment que pendant cette durée selon les productrices. Cette méthode traditionnelle de
conservation du kpètè-kpètè tend à ralentir la fermentation au point d’augmenter le pH et
diminuer l’acidité du produit. Cette diminution de l’acidité pourrait être une conséquence de
la dilution du substrat de fermentation (Michodjéhoun, 2000), de l’utilisation de l’acide
lactique par les levures (Akinrele, 1970) ou du ralentissement de l’activité bactérienne.
Planche 1 : le kpètè-kpètè
33
quelle boisson non fermentée peut en provoquer la fermentation. La calebasse peut être
réutilisée indéfiniment ; il suffit juste de la sécher après chaque utilisation.
34
Le ferment joue un rôle important dans le processus de fermentation et sa qualité n’est
pas constante durant sa période de conservation qui ne peut excéder 3 jours. C’est ainsi que
73,3% des productrices estiment que la capacité à fermenter le produit diminue avec la durée
de conservation. Dans le cas où l’eau ne serait pas renouvelée, on assiste à une dégradation du
ferment, ce qui constitue l’un des problèmes les plus importants de la production du
tchoukoutou. 63,3% des productrices sont favorables pour adopter et acheter un ferment
amélioré si l’occasion s’en présentait.
Tchoukoutou fermenté
Décantation (24h)
Dépôt de kpètè-kpètè
tchoukoutou
Kpètè-kpètè
humide
Tchoukoutou fermenté
35
Décantation (24h)
Dépôt de kpètè-kpètè
tchoukoutou
Séchage (3jours)
36
Calebasse (forme de
gourde)
Lavage
Séchage au soleil
Calebasse de fermentation
Calebasse de
fermentation séchée
La bière industrielle de type lager est parfois utilisée pour accélérer la fermentation,
ou même la boisson déjà fermentée peut être utilisée comme ferment lors de la préparation du
tchoukoutou. Le sodabi est aussi utilisé, mais apparemment pour augmenter le taux d’alcool
du tchoukoutou. 63,3% des productrices affirment de façon très sûre que la fermentation du
tchoukoutou est provoquée par le kpètè-kpètè issue de la production antérieure ; ceci confirme
les résultats de Kayodé et al (2006). Le kpètè-kpètè provoque et même accélère la
fermentation et devient donc le moyen le plus rapide de fermenter le tchoukoutou. Par contre
20% des productrices enquêtées estiment que la fermentation du tchoukoutou est provoquée
par l’ensemble constitué par le kpètè-kpètè et la calebasse de fermentation. Pour ces dernières,
la fermentation est extrêmement rapide lorsque la calebasse de fermentation est utilisée en
même temps que le kpètè-kpètè. Dans ce cas, la calebasse contenant les pierres et le ferment
est plongée dans le moût à chaque fermentation et y séjourne le temps nécessaire à la
37
fermentation (6-9h) contre 14h de fermentation lorsqu’il s’agit du ferment unique. 46,7% des
enquêtées estiment qu’il est impossible de préparer le tchoukoutou sans faire recours au kpètè-
kpètè. Par contre 53,3% pensent que la fermentation du tchoukoutou peut avoir lieu sans ajout
de ferment et pour ce faire il suffit de laisser le moût pendant une période beaucoup plus
longue pour assister à une fermentation spontanée.
La fermentation du tchoukoutou est une activité qui peut être menée aussi bien par les
femmes que par les hommes même si toutes les productrices enquêtées sont des femmes.
Néanmoins les femmes en menstrues ne sont pas autorisées à produire le tchoukoutou et par
conséquent ne peuvent introduire le ferment dans le moût.
80% des productrices notent la courte conservation du ferment comme le problème
majeur de la production. A cela elles ajoutent le problème de source d’énergie lors de la
production ; en effet, la production de tchoukoutou nécessite beaucoup de bois de chauffe
pour couvrir les différentes cuissons de la production. Il n’existe pas d’autres contraintes en ce
qui concerne la fermentation de la boisson.
Le kpètè-kpètè est donc un matériel de fermentation très indispensable à la production
de tchoukoutou.
L’évaluation du rapport entre la quantité de ferment et la quantité de tchoukoutou a
révélée qu’il faudrait en moyenne 80,12g de ferment (base sèche) pour fermenter 12 Kg de
tchoukoutou (base sèche).
38
Tableau 3: Caractéristiques microbiologiques (Log CFU) du ferment sec et du ferment
humide après six jours de conservation
Germes Bactéries. Acidité titrable
Type de Levures Entérobactéries
totaux (Log lactiques pH (% acide
ferments (Log cfu/g) (Log cfu/g)
cfu/g) (Log cfu/g) lactique b.s)
Kpètè-
kpètè
9,25±1,05a2 8,89±0,20a 8,63±0,31a < 1a 3,56±0,4a 1,81±0,4a
sec
(n=5)1
Kpètè-
kpètè
9,40±1,96a 8,35±0,10a 8,26±0,26a 3,34±0,41b 4,52±0,34a 0,15 ±0,05b
humide
(n=5)1
1
n = nombre d’échantillons analysés
2
moyenne ± écart-type ; les chiffres portant la même lettre dans la même colonne ne sont pas significativement
différents au seuil de 5%
39
La présence simultanée des levures et des bactéries lactiques dans les produits
fermentés a été attribuée à leur activité symbiotique. En effet il existe une interaction entre les
levures et les bactéries lactiques, l’utilisation des glucides par les bactéries lactiques et la
production d’acide lactique et d’acide acétique est fortement influencée par l’association avec
les levures et varie selon les types de sucre (Gobetti, 1998). De plus le développement des
bactéries lactiques est probablement stimulé par la présence des levures qui fournissent des
composés azotés et les substances comme la vitamine B, le pyruvate et les acides aminés. Les
bactéries lactiques créent un environnement acide favorisant le développement des levures
(Nout, 1991).
40
10
nombre de microorganismes
9
8
logufc/g de produit
7
6 Entérobacteries
5 Levures
4 Bactérie
3
2
1
0
0h 24h 48h 72h
Temps
41
autre. Cette augmentation pourrait être expliquée par l’ajout d’eau à chaque heure de
fermentation, ce qui provoque une dilution du milieu le rendant ainsi moins acide. Le fait que
l’acidité titrable du produit diminue journalièrement suite au renouvellement de l’eau
surnageante confirme cette hypothèse de dilution. Un phénomène similaire est observé par
Sossa (2001), lors de l’ajout d’une bouillie chaude au gowé en fermentation.
42
Acidite titrable (% d'acide
3,7 1,9
1,85
3,6
1,8
1,75
3,5
lactique)
1,7 pH
pH
3,4 1,65
1,6 AT
3,3
1,55
1,5
3,2
1,45
3,1 1,4
0h 24h 48h 72h
Temps
La figure 8 montre l’évolution des sucres réducteurs et des sucres totaux pendant la
conservation par voie humide du ferment.
1
0,9
0,8
0,7
% en sucres
0,6
sucre totaux
0,5
sucre reduct.
0,4
0,3
0,2
0,1
0
0h 24h 48h 72h
temps
Figure 8: Evolution des sucres totaux et des sucres réducteurs au cours de la conservation du
ferment par voie humide
43
La figure 8 montre l’évolution des sucres totaux, et des sucres réducteurs du kpètè-
kpètè pendant la conservation du ferment. Au bout de 72 heures de conservation du ferment,
les sucres totaux ont baissés significativement (P<0,01) passant de 0,8 à 0 h à 0,59 à 72 h de
conservation. De même, les sucres réducteurs diminuent significativement (P<0,01) tous les
24 h jusqu’au troisième jour. Cette diminution est certainement due aux pertes de matières
solubles lors du renouvellement de surnageant du ferment et à l’effet de dilution dû à l’ajout
d’eau.
Par ailleurs, il existe une corrélation (P<0,05) entre l’évolution des levures et celle des
sucres réducteurs (R2 = 0,97). Cette corrélation s’observe sur la Figure 9.
10
y = -552,68x 2 + 223,63x - 13,676
8 R2 = 0,9778
6
levures
Levures
4 Polynomial (Levures)
0
0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25
sucres reducteurs en %
En effet les levures étant dépourvues de chlorophylle, elles sont incapables de produire
les composés organiques nécessaires à leur croissance à partir de substrats minéraux. De ce
fait pour leur croissance, les levures ont besoin d’oxygène, de sources organiques de carbone,
d’azote minéral ou organique. Elles sont également capables d’utiliser directement le D-
glucose, le D-fructose et le D-mannose (Bourgeois et al, 1988) qui sont des sucres réducteurs.
Par conséquent la diminution des sucres réducteurs dans le milieu par l’effet de perte observé
lors du changement d’eau affecte également les levures.
La figure 9 présente une corrélation polynomiale, et peut être divisée en deux parties.
En effet, de 0 à 48 h de conservation, la charge en levures passe de 8,9 à 7,8 log cfu/g et de
7,81 à 4,13 (Log cfu/g) après 72h de conservation (Annexe2). La première diminution est
principalement liée à l’appauvrissement du milieu en sucres réducteurs causer par les pertes
en substrats et surtout en sucres, principaux nutriments des levures (Frazier 1958). Néanmoins
cette diminution non significative des levures pourrait s’expliquer par le fait que les levures
sont capables en plus des sucres d’assimiler l’acide lactique pour produire de l’alcool (Nout
et al, 2005). Leur multiplication se poursuit donc. Mais de 48 à 72h, on remarque que la
44
courbe présente une diminution significative (Annexe 2). Ceci indique une forte baisse des
levures toujours dues à la diminution des sucres réducteurs dans le milieu mais également des
bactéries lactiques responsables de la production d’acides organiques utilisables par les
levures. La figure 10 montre l’évolution du degré brix au cours de la conservation
traditionnelle par voie humide du kpètè-kpètè.
Le degré brix correspond à la proportion de matières sèches totales solubles dans le
ferment. Au cours des 72h de conservation, la diminution du degré brix est très nette et
significative (P<0,01). Elle passe de 8,37 pour le ferment fraîchement récolté à 2,25 à 72h.
Cette diminution s’explique également par la perte de matières solubles lors de l’enlèvement
du surnageant du ferment et par l’effet de dilution exercé par le renouvellement de l’eau
pendant la conservation. De plus il existe une corrélation significative (R2 = 0,99 P< 0,05)
entre les levures et le degré brix.
10
9
8
7
degre brix
6
5 degré Brix
4
3
2
1
0
0h 24h 48h 72h
Temps
45
surnageante pendant trois jours) et du ferment amélioré obtenu par incorporation du kpètè-
kpètè dans du malt suivie de séchage.
46
de 25 à 35 ˚C ce qui les rapproche des mésophiles (Frazier, 1958), un séchage de 45˚ C a donc
quelque peu affecter le développement de ces dernières. Toutefois selon l’encyclopédie
Wikipédia la destruction des levures commencent à partir de 52˚C. De même les bactéries
lactiques mésophiles du kpètè-kpètè ont un optimum de 37˚C et sont donc capables de se
développer à 45˚ C, quoiqu’ils ne soient pas à leur optimum.
Sur le plan physico-chimique, l’acidité titrable du ferment humide frais de base est
significativement supérieure (P<0,05) à l’acidité titrable du ferment ayant subi le
renouvellement de l’eau. Ce résultat confirme les résultats précédemment obtenus. Cette
différence significative (P<0,05) est également observée quand on compare le ferment humide
frais de base au ferment amélioré par séchage. Toutefois, l’écart est moins important.
En somme les microorganismes responsables de la fermentation à savoir les levures et
les bactéries lactiques sont toujours viables et mieux représentés dans le ferment amélioré que
dans le ferment conservé par renouvellement d’eau. La technique de stabilisation développée
a donc permis de réduire de façon considérable les pertes en microorganismes fonctionnels du
kpètè-kpètè observées lors la technique traditionnelle de conservation par renouvellement
d’eau.
47
Tableau 5 : Effet des ferments sur les propriétés physicochimiques et microbiologiques du
tchoukoutou
Bactéries Acidité titrable
Levures
lactiques pH (% acide.
(Log cfu/g)
(Logcfu/g) lactique b.s)
48
CONCLUSION ET SUGGESTIONS
CONCLUSION ET SUGGESTION
L’étude que nous avons menée nous a permis de décrire les différentes technologies
traditionnelles de production de ferment pour la production de tchoukoutou, et le rôle des
ferments dans la fermentation de la boisson.
Notre étude nous a permis de distinguer plusieurs types de ferments dont deux ont été
mieux étudiés : les ferments séchés obtenues par séchage au soleil et les ferments humides
dont la conservation se fait par renouvellement d’eau.
Le mode de conservation de ces ferments affecte la viabilité des microorganismes tant sur le
plan quantitatif que qualitatif.
Une analyse physico-chimique du ferment humide utilisant la technologie
traditionnelle révèle une diminution de l’acidité au bout de 3 jours due principalement au
renouvellement d’eau. Cette technologie de conservation permet de préserver le ferment
d’une altération due à l’augmentation de l’acidité du milieu mais réduit fortement son acidité
la rendant moins efficace.
Quelques facteurs pouvant influencer la viabilité des microorganismes ont été
mesurés. C’est ainsi que l’on observe une diminution significative des sucres totaux, des
sucres réducteurs et du degré brix au bout de 72h.
Une analyse microbiologique des deux types de ferment révèle que les bactéries
lactiques et les levures sont les principaux microorganismes responsables de la fermentation.
De plus une étude dynamique au bout de 3 jours révèle que ces microorganismes diminuent
considérablement et seraient donc influencés par le renouvellement d’eau par la perte de
certains nutriments.
En somme cette technologie de conservation du kpètè-kpètè paraît inefficace et
pourrait être l’une des sources de variabilité du tchoukoutou lors de sa production.
Une nouvelle technique de conservation du ferment a été développée. Elle consiste à
mélanger le kpètè-kpètè avec le malt de sorgho et à le sécher à une température de 45˚C
pendant 24h.
L’essai de stabilisation du ferment humide à permis de diminuer les pertes de bactéries
lactiques d’environ 40% et les pertes en levures d’environ 45%. De plus nous remarquons que
le tchoukoutou dérivé de ce ferment à des caractéristiques physico-chimiques et
microbiologiques proche du tchoukoutou localement produit.
Une étude d’optimisation de la production de ferment amélioré pourrait contribuer à
obtenir de meilleurs résultats.
REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES
1. ABDALLA A.A., EL TINAY, MOHAMED B.E and ABDALLA A.H., 1998. Effect of
traditional processes on phytate and mineral content of pearl millet. Food chemistry, vol. 63
(1), 79-84
2. ACHI O.K., 2005. The potential for upgrading fermented foods through biotechnology.
African J.Biotech .vol 4(5), 375-380
3. AKINRELE, I. 1970 Fermentation studies of maize during the preparation of traditional
African starch cake food. J. Sci. Food Agric. 21, 619-625
4. ANNAN N.T., POLI L., SEFA, DEDEH S., PLAHAR and JAKOBSEN M., 2003. Volatile
compounds produced by Lactobacillus fermentum, Saccharomyces cerevisiae and Candida
krusei in single starter culture fermentation of Ghanaian maize dough. J. Applied microbiol.,
94, 462-474
5. AU P.M et FLIEDS M.L., 1981. Nutritive quality of fermented sorghum. J. Food. Sci, 46,
487-652
6. BANWART G.J., 1981 Basic Food Microbiology. Avipublish. Comp. Inc. P80
BANIGO, E.O.I. DE MAN, J.M. DUITSCHAE, C.D 1974 Utilisation of high-lysine corn for
the manufacture of ogi using a new improved processing system. Cereal chemistry 51, 559-
572
7. BEUCHAT L.R., 1983. Influence of Aw on growth, metabolic activities and survival of
yeast and molds. J. Food protect., 46,135
8. BRIGGS, D.E. 1998 Malts and Malting. Aspen Publishing, Inc.Gaithersburg, MD, 796 pp.
9. BOURGEOIS, MESCLE J.F., J.ZUCCA. 1988, Aspect microbiologique, de la sécurité et
de la qualité alimentaire p15-60
10. BVOCHORA J.M., REED J.D., READ J.S. and ZVAUYA R., 1999. Effect of
fermentation processes on proanthocyanidins in sorghum during preparation of ‘’ mahewu’’, a
non alcoholic beverage. Process biochem, 35, 21-25
11. CARLIER V., 1983. Etude de quelques paramètres du pH ultime des viandes de bovins,
R.T.V.A., (3) pp185
12. CHAVAN J.K. and KADAM S.S., 1989. Nutritional improvement of cereals by
fermentation. Crit. Rev. Food Sci. Nutr., 28 (5), 351-400
13. CORREIA I., NUNES A., DUARTE F.I., BARROS A. and DELGADILLO I., 2005.
Sorghum fermentation followed by spectroscopic techniques Food chem., 90, 853-859
51
14. DIRAR, H.A 1978 A microbiological study of Sudanese Merissa brewing J. Food Sci
43,163-168
15. DIRAR H.A., 1993. The indigenous fermented foods of the Sudan: a study in African
Food and Nutrition ab. International, Wallingford, pp.39-159
16. DUNG, 2004. Defined fungal starters granules for purple glutinous rice wine; thèse-
Wageningen University
17. EKUNDAYO, J.A 1969 The production of pito, a Nigerian fermented beverage J. Food
technol 4, 217-225
18. EL HAG M.E., EL TINAY A.H. and YOUSIF N.E. 2002. Effect of fermentation and
dehulling on starch, total polyphenols phytic acid content and in vitro protein digestibility of
pearl millet. Food chem.., 77, 193-196
19. EL KHALIL E.A. I., EL TINAY A.H, MOHAMED B.E. and ELSHEIKH E.A.E., 2001.
Effect of malt pre- treatement on phytic acid and in vitro protein digestibility of sorghum
flour. Foodchem, 72, 29-32
20. FRAZIER 1958, Food Microbiology p 9- 80
21. GLIDJA M., GOUSSANOU J., MADODE Y., DALODE G., DJAPKO O., 2006
Identification des technologies de production de tchoukoutou et leur contraintes à Cotonou et
à Parakou p 16- 21
22. GOBETTI M., 1998. The sourdough microflora: Interactions of lactic acid bacteria and
yeasts. Trends Food Sci. Technology, 9, 267-274
23. GRAN H.M., GADAGA H.T and NARVHUS J.A., 2003. Utilization of various starter
cultures in the product of Amasi, a Zimbabwean naturally fermented raw milk product. Int. J.
Food Microbiol., 88, 19-28
24. HAGGBLADE, S. and HOLZAPFEL, H. 1989 in industrialization of indigenous
fermented foods (STEINKRAUSS, K.H. Ed.) Marcel Dekker Inc. New-york, p.191
25. HANSEN A. and HANSEN B., 1996. Flavour of sourdough wheat crumb. Z. Lebensm.-
Unters.- Forsch., 202,244-249
26. HARRIS, R.N 1997 proc. 6th con. Inst. Of brewing (Central and Southern African Sect.)
Durban, p.89
27. HASAN I.A.G. et EL TINAY A.H., 1995. Effect of fermentation on tannin content and
starch digestibilities of two sorghum cultivars. Food chem.., 53,149-151
28. HOLZAPFEL W. 1997. Use of starter in fermentation on a household scale. Food control,
8, 241-258
52
29. HOLZAPFEL W., 2002. Appropriate starter culture technologies for small-scale
fermentation in developing countries. Int.J. Food microbial., 75, 197-212
30. HOUNHOUIGAN D.J., NOUT M.J.R., NAGO C.M., HOUBEN J.H. and ROMBOUTS
F.M. 1993. Characterisation and frequency distribution of species of lactic acid bacteria
involved in the processing of mawè, a fermented maize dough from Benin. Int. J. Food
microbial., 18, 279-287
31. HOUNHOUIGAN D.J., 1994. Fermentation of maize ( Zea mays L.) meal for mawè
production in Benin. Physical, chemical and microbiological aspects. Ph D. Thesis, Agric.
Wageningen Univ., wageningen, the Netherlands, 99p
32. HOUNHOUIGAN D.J., NOUT M.J.R., NAGO M., HOUBEN J.H. and ROMBOUTS
F.M., 1999. Use of starter cultures of Lactobacilli and yeast in the fermentation of mawè, an
African maize product. Tropical. Sci., 39, 220-226
33. JAY J.M., 1986. Modern food microbiology. 3 éd. Van Nostrand Reinhold company N-Y
34. KAYODE A.P.P., ADEGBIDI A., LINNEMANN A.R., NOUT M.J.R., et
HOUNHOUIGAN D.J., 2005. Quality of farmers varieties of sorghum and derived foods as
perceived by consumers in BENIN. Ecology of food and nutrition, 44: pp 271-294
35. KAYODE A.P.P., NOUT M.J.R., et HOUNHOUIGAN D.J., 2006. Impact of brewing
process operations on phytate, phenolic compounds and in vitro solubility of iron and zinc in
opaque sorghum beer. Article in press Elsevier LWT.
36. KAYODE A.P.P., 2006, Diversity, users’ perception and food processing of sorghum:
Implications for dietary iron and zinc supply, thèse de doctorat, p.152
37. KAZANAS N. and FLIEDS M.L. 1981. Nutritional improvement of sorghum by
fermentation. J. Food Sci., 46,819-821
38. KHETARPAUL N. and CHAUHAN B. M., 1989. Effect of fermentation by pure cultures
of yeast and Lactobacilli on phytic acid and polyphenol content of pearl millet. J. Food Sci,
Vol. 54 (3), 780-781
39. KIRMAYO V. M., MASSAWE G.A., OLASUPO N.A. and HOLZAPFEL W.H., 2002.
The use of a starter culture in the fermentation of cassava for the production of ‘’ Kivunde’’, a
traditional Tanzanian food product. Int.J.Food Microbiol., 56, 179-190
40. LECLERC C.H., IZAARD D. HUSSON U.M., WATTRE P. et JAKUBCZAR E., 1983.
Microbiologie générale. 2 ème edition, Doin Editeur Paris
41. LEES R., 1969. Laboratory handbook of methods of food analysis. Leonard hills, London
53
42. LORRI, W.S.M. and SVANGERG, V. (1993b) Lactic fermented cereal gruels, with
improved in vitro protein digestibility- International Journal of Food Science and Nutrition
44, 29-36
43. LOVELACE, C.E.A and NGATH, C.B (1977) Estimation of fungal toxins, Zearaleone
and aflatoxin containing opaque maize beer in Zambia J. Sci Food Agric 28, 288-292
44. MAHAJAN S. and CHAUHAN B.M., 1987. Phytic acid and extractable phosphorus of
pearl millet flour as affected by natural lactic acid fermentation. J.sci. Food Agric., 41, 381-
386
45. MBUGUA S.K., 1984. Isolation and characterization of lactic acid bacteria during the
traditional fermentation of ‘’Uji’’. Afr. Agr. Forest., 50, 36-43
46. MICHODJEOUN, L. 2000 Syst. Technique et caractérisation du gowé une pâte fermentée
à base de céréale. Thèse d’ingénieur. Université d’abomey calavi FSA (BENIN)
47. MILLER, J.D. (1995) Fungi and mycotoxins in grain: implications for stored product
research. Journal of stored products research 31, 1-16
48. MORCOS, R. S. HEGAZI, S.M and El DAMHOUGHY, ST 1973 Fermented foods in
common use in Egypt 1 Nutritive value of kishi J. Sci Food Agric 24 1152-1156
49. MORTAJEMI, Y., and NOUT, M.J.R. (1996) Food fermentation: a safety and nutritional
assessment, Bulletin of the World Health Organization 74, 553-559
50. MUYANJA C.M.B.K., NARVHUS J.A., TREIMO J. and LANGSRUD T., 2002.
Isolation, Characterisation and identification of lactic acid bacteria from ‘’ bushera’’: a
Ugandan traditional fermented beverage. Int. J. Food Microbiol., 80,201-210
51. NAGO C.M., HOUNHOUIGAN D.J., AKISSOE N., ZANOU E. and MESTRES., 1998.
Characterisation of the beninese traditional “ogui”, a fermented maize slurry: physiological
and microbiological aspects. Int.J. Food Sci. Technol.,33, 301-315
52. NCHE, P.F. (1995), Innovations in the production of kenkey, a traditional fermented
maize product of Ghana. Nutritional, physical and safety aspects. Doctora thesis. Agricultura
University of Wageningen, the Netherlands
53. NOUT M.J.R., 1980 . Upgrading traditional biotechnological processes. IFS/ UNU
workshop on development of indigenous fermented food ingredients on some pathogenic
microorganisms. Int. J. Food Microbiology 8, 351-361.
54. NOUT, M.J.R. (1980) Microbiological aspects of the traditional manufacture of busaa, a
Kenyan opaque maize beer. Chemie Mikrobiologie Technologie der lebensmittel 6, 137-142
54
55. NOUT M.J.R., 1980 . Upgrading traditional biotechnological processes. IFS/ UNU
workshop on development of indigenous fermented food ingredients on some pathogenic
microorganisms. Int. J. Food Microbiology 8, 351-361.
56. NOUT M.J.R, ROMBOUTS F.M. and HAVELAAR A., 1989. Effect of accelerated
natural lactic fermentation of infant good ingredients on some pathogenic microorganism. Int.
J. Food Microbiol., 8, 351-361.
57. NOUT, M.J.R (1980) Microbiological aspects of traditional manufacture of Busaa, a
Kenyan opaque maize beer chem. Mikrobiol Technol Lebensm 6, 137-142
58. NOUT M.J.R., 1991. Ecology of accelerated natural lactic fermentation of sorghum based
infant food formulas. Int. j. Food Microbiol., 12, 217-224
59. NOUT., HOUNHOUIGAN D.J., TINY VAN BOECKEL 2003, Les aliments:
transformation, conservation et qualité Backhuys Publishers, wageningen, pays - bas
60. NOUT, DE VOS, ZWIETERING 2005., Food fermentation, P34-50
61. NOVELLIE, L. (1966) Internat. Brew. Distill., 1 (1), 27.
62. NOVELLIE, L. and DE SCHAEPDRIJVER, P. (1986) in progress in industrial
Microbiology.23. Microorganisms in the production of food. ( Adam, M.R. ed.), Elsevier,
Amsterdam, P73
63. NOVELLIE L., 1982. Fermented porridge. In: Proceedings of the international
symposium on sorghum grain quality. ICRISAT (eds), 29-31 octobre 1981, Pantacheru, India,
pp. 121-128
64. NOVELLIE, L (1968) Kaffir beer brewing ancient and modern industry wallerstein Lab
commun 31. 17-24
65. ODEYEMI, O (1971) OGOGORO industry in Nigeria Paper presented at the symposium
on indigenous foods, Bangkok
66. ODUNFA S.A et ADEYELE S., 1985. Microbiological changes during the traditional
production of ‘’ ogi-baba’’, a west african fermented Sorghum gruel. J. cereal Sci., 3, 173-180
67. O’ROURKE, T. (2001) Brewer internat., 1 (10), 46
68. OSMAN M.A. 2004.Changes in sorghum enzyme inhibitors, phytic acid, tannins and in
vitro protein digestibility occurring during khamir (local bread) fermentation. Food chem..,
88, 129-134
69. RAY and SPECK M.L., 1973. Freeze injury in bacteria critical review in clinical
laboratory science
70. ROSS R.P., MORGAN S. and HILL C., 2002. Preservation and fermentation: Past,
present and future. Int. J. Food Microbiol., 79, 3-16
55
71. SANNI, A. I (1988) Chemical studies on sekete beer Food chem. 33. 187-191
72. SANNI A.I., 1993. The need for process optimization of African fermentation foods and
beverages. Int. J. Food Microbiol., 18, 85-95
73. SANNI, A. I and OSO, B.A (1988) The production of agadagidi – a Nigerian fermented
beverage. Die Nahrung 32, 319-326
74. SETAMOU, M., CARDWELL,K.F.,SCHULTHESS,F., and HELL, K (1997) Aspergillus
flavus infection and aflatoxin contamination of preharvest maize in Benin. Plant disease 81,
1323-1327
75. SPERBER W.H., 1983. Influence of Aw on foodborne bacteria-a review. J. Food protect.,
46, 142
76. STREINKRAUS K. H., CULLEN, R.E., PEDERSON C. S., NELLIS L.F. and GAVITT
B. K., 1983. Handbook of indigenous fermented foods. 1st Ed., Marcel DEKKER Inc., New
york, pp. 189-238
77. STRONG D.H., FOSTER E. M. and DUNCAN C.L., 1970. Influence of Aw on the
growth of clostridium perfringens. Appl. Microbiol., 19, 536-542
78. SUGIHARA, T.F., KLINE, L. et MILLER, M. W. (1971) microorganisms of the san
francisco sour bread process, I. yeast responsible for the leavening action. Appl. Microbiol.21,
456-8
79. TROLLER J.A., 1980. Influence of Aw on microorganisms in food. Food Technol, 34 (5),
76.
80. UYDESS I.L., VISHMAC W.V., 1976. Electron microscopy of antartic soil bacteria.
Extreme environments Academic Press
81. WANG Y.D. and FLIEDS M.L., 1978. Germination of corn and sorghum in the home ti
improve nutritive value. J. Food sci, 43, 1113-1115
82. WOOD, 1985 Microbiology of fermented food p 50-75
83. www.fao.org/
56
ANNEXE
Annexe 1 : Questionnaire d’enquête
Questionnaire d’enquête
1- Identification de la productrice
Nom :
Prénoms :
Age :
58
3- Perception du ferment traditionnel par la productrice
……………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………
59
Etape Opération Durée Equipement Autres Produits
unitaire ingrédients obtenus
Type 1
Type 2
Type 3
60
…………………………………………………………………………….
…………………………………………………………………………….
h) Quand vous avez fini de produire fraîchement le ferment, après combien de temps
est-il prêt à être utilisé ?.............................................................
…………………………………………………………………………...
…………………………………………………………………………...
j) Quelle est la durée minimale de conservation pour avoir une boisson de bonne qualité
organoleptique ?...................................................................
k) Lorsque vous introduisez le ferment dans le moût, combien de temps ça met pour
fermenter la boisson c’est-à-dire pour que la boisson soit prête à être
consommer ?........................................................................................
……………………………………………………………………………………………
………………
61
a) Est-ce que la réussite de la fermentation dépend d’autres facteurs?
................................................................................................................
………………………………………………………………………….
6) Problèmes
10 0,25
%de sucres réducteurs
9
Levures Log (cfu/g)
8 0,2
7
6 0, 15
5
4 0,1
3
2 0, 05
1
0 0
0H 24H 48H 72H Levures
Temps Sucres réducteurs.
62