Biochimie, pentru studenii anului I - STEROLII

SUBSTANE INTERMEDIARE I FINALE DE METABOLISM STEROLII

Biochimie, pentru studenii anului I - STEROLII

CUPRINS

Pg. Introducere .................................................................................................................................. 3 I. Lipide .................................................................................................................................. II. Sterolii .................................................................................................................................. II.1. Alcooli policiclici monohidoxilici - Sterolii ................................................................. II.2. Rolul biologic al sterolilor. Domenii de aplicare ......................................................... 4 5 5 7

III. Drojdiile - surse de steroli ................................................................................................... 10 IV. Sterolii i viaa de zi cu zi ................................................................................................... 17 IV.1. Aplicaii n horticultur ............................................................................................... 17 IV.2. Aplicaii n medicin IV.2.1. Micozele ............................................................................................... 19 ........................................................................................................ 21

IV.2.2. Fototerapia ......................................................................................................... 22 IV.2.3. Rahitismul .......................................................................................................... 23 IV.2.4. Colesterolul ........................................................................................................ 24 Concluzii .................................................................................................................................... 26 Bibliografie ................................................................................................................................. 27

Biochimie, pentru studenii anului I - STEROLII

INTRODUCERE

Biochimia a cunoscut n ultimele decenii o dezvoltare fulminant, descoperirile n acest domeniu gsindu-i aplicaii n aproape toate domeniile lumii vii. Tema ne-a fost propus n cadrul necesitii acumulrii cunotinelor de biochimie i, parcurgnd materialele bibliografice am gasit-o pe ct de complex, pe att de interesant. La nceputul documentrii am avut impresia c nu se pot spune prea multe despre aceast categorie de lipide i am insistat cutnd conexiuni cu alte domenii n care biochimia este la ea acas: microbiologia, fiziologia plantelor, medicina, fizica. Majoritatea materialelor gsite n Internet aveau aspectul repetrii unora i acelorai motive de studiu al sterolilor, anume: posibila confuzie cu steroizii i aplicarea acestora n domaniul culturismului, pentru creterea masei musculare a sportivilor. Asta ne-a determinat s aprofundm cutarea, cu alte filtre, n domeniile conexe. Aa am ajuns la cercetrile recente din farmacologie, protecia plantelor cultivate i mai ales a viei de vie, oenologie, microbiologie, medicin. Prin aceast lucrare considerm c am abordat dintr-o perspectiv mai ampl descrierea sterolilor. ncepnd cu descrierea Lipidelor, categorie de constitueni biochimici din care fac parte sterolii, continund cu descrierea acestora, a rolului lor biologic i a domeniului de aplicare i abordnd drojdiile ca surse de steroli, am ncercat o sistematizare a cunotinelor dobndite. Un capitol important dup prerea noastr este cel al aplicaiilor cunoaterii sterolilor n viaa de zi cu zi. Aici am atins horticultura i medicina, cu detalierea acesteia din urm, n patru subcapitole distincte care trateaz: Micozele, Fototerapia, Rahitismul i Colesterolul. Domeniul este foarte vast i merit mult atenie. Toate cercetrile finalizate cu descoperirea de compui chimici noi trebuie corelate cu ceea ce se cunoate deja. Fr aceast punte nu se poate merge mai departe. O abordare simplist a temei nu ar fi fcut decat s reia tratarea superficial care poate fi gsit printr-un singur click la o cutare prin Internet. Noi am dorim s spunem mai mult. Autorul

Biochimie, pentru studenii anului I - STEROLII

I. L I P I D E Lipidele, numite i grsimi, lipoide, lipoze, lipoine, se gsesc n mod natural acumulate n semine, fructe, esuturi subcutanate, ca rezerve nutritive. Lipidele complexe sunt esteri ai acizilor grai la constituia crora mai particip pe lng alcooli fr azot i aminoalcooli, acidul fosforic, serina, un rest de acid sulfuric, iar n unele cazuri inozitolul, una sau mai multe monoglucide. Ele conin aadar, pe lng C, H, O i P, N sau S. Proporia de lipide complexe este relativ mic n regnul vegetal, ele predominnd n regnul animal. Ele sunt indispensabile organismelor vii. Frunzele, fructele i rdcinile plantelor conin circa 0,1 % lipide complexe; seminele de cereale i leguminoase 1-2 %, iar cele de soia maximum 3 %. Lipidele sunt substane unsuroase la pipit sau ceroase, cu indice de refracie ridicat. n ap formeaz emulsii i sunt solubile n aceton, deosebindu-se n acest fel de lipidele simple. n organismele vii lipidele complexe mai apar asociate cu proteinele, formnd lipoproteine, substane cu rol important n reglarea permeabilitii celulare.[1] 1.1. Clasificarea lipidelor
Monogliceride Gliceride SIMPLE Steride Ceride Etolide LIPIDE Acizi fosfatidici Glicerofosfolipide Fosfatide (fosfolipide) COMPLEXE Inozitolfosfatide Sfingolipide Glicolipide (cerebrozide) Sulfatide Lecitine Cefaline Serinfosfatide Digliceride Trigliceride

dup Neamu, G.; Popescu, Ionela; Lazr, t.; Burnea, I.; Brad, I.; Cmpeanu, Gh.; Galben, T. Chimie i Biochimie vegetal, Editura didactic i pedagogic, Bucureti, 1983 4

Biochimie, pentru studenii anului I - STEROLII II. S T E R O L I I II. 1. ALCOOLI POLICICLICI MONOHIDROXILICI - STEROLII Sterolii sunt alcooli superiori cu structur tetraciclic, derivai de la hidrocarbura policiclic steran, cristalizai (stereos = solid), nucleul de baz fiind de natur ciclopentaperhidrofenantrenic. Aceast structur are 3 hexacicluri, aezate sub form fenantrenic i un pentaciclu. Inelele se noteaz cu literele A, B, C, D, iar numerotarea atomilor de carbon ncepe cu nucleul A. Pe lng aceste inele, sterolii conin n molecul alte elemente constitutive:

la C3 au o grupare hidroxilic (OH) care le confer statutul de alcooli secundari la C17 au fixat o caten lateral, format din 8-10 atomi de carbon, care se termin printrun radical izopropilic la punctele de legtur dintre cicluri, respectiv la C10 i C 13, sunt fixai 2 radicali metil, notai C18 si C 19, aceti substitueni numindu-se metili angulari Ciclurile i catena lateral pot fi complet saturate sau pot conine 1-3 duble legturi Modelul biochimic al steranului

2.1.

dup Wikipedia, http://ro.wikipedia.org/wiki/Sterol, 07.12.2009 Datorit numrului mare de atomi de carbon asimetrici, deci atomi de carbon care pot prezenta activitate optic, sterolii pot forma teoretic un numr mare de izomeri. n mod teoretic n cazul unui sterol cu 8 atomi de carbon se pot obine 28 izomeri, adic 256 izomeri dextrogiri i 256 izomeri levogiri. Practic sterolii naturali prezint izomeri numai carbonilor asimetrici C3 C5 i mai rar C17. Izomerii determinani de carbonii C3 i C5 se stabilesc n funcie de poziia pe care o au urmtorii substitueni. gruparea OH de la C3 hidrogenul de la C5 metilul angular de la C10 5

Biochimie, pentru studenii anului I - STEROLII n mod convenional s-a stabilit c atunci cnd metilul angular de la C 10 este deasupra planului moleculei, poziia se noteaz cu beta, iar cnd metilul este sub planul moleculei se noteaz cu alfa. Dac hidroxilul de la C3 se afl n acelai plan cu metilul de la C
10

(deasupra

planului), se obine un izomer "cis" sau "beta" i care se noteaz cu linie continu ngroat, iar dac hidroxilul este sub planul moleculei se obine un izomer "trans" sau "alfa" i care se reprezint prin linie punctat. De asemenea n funcie de poziia hidrogenului de la C5 fa de metilul angular de la C10 se pot forma de asemenea 2 izomeri: izomerul "cis" sau "beta" va avea atomul de hidrogen de aceeai parte cu metilul angular, iar izomerul "trans" sau "alfa" va avea hidrogenul opus metilului angular, sub planul moleculei.[2] 2.2. Izomerii sterolului

dup Wikipedia http://ro.wikipedia.org/wiki/Sterol, 07.12.2009 Sterolii naturali sunt n majoritatea lor de tip "trans" optic activi, levogiri cu excepia coprosterolului care este dextrogir, fiind izomer "cis". Sterolii au puncte de topire mai ridicate dect ale gliceridelor variind ntre 102 170oC. Sunt solubili n solveni organici i greu solubili n ap. Acei steroli care au n molecul o legtur dubl dau reacii de adiie cu hidrogenul i halogenii. Sterolii se pot recunoate prin reacii de culoare cu acidul sulfuric concentrat, anhidrid acetic, peroxizi n soluie cloroformic. [2] Sterolii se gsesc att liberi ct i esterificai cu acizi alifatici superiori n lipidele tuturor animalelor i plantelor i se izoleaz din poriunea nesaponificabil a acestora. Izolarea n stare

Biochimie, pentru studenii anului I - STEROLII pur a sterolilor, n special a celor de origine vegetal, nu este totdeauna uoar, din cauza tendinei de a forma compui moleculari de adiie i soluii solide cu ali steroli.[2] II.2. ROLUL BIOLOGIC AL STEROLILOR. DOMENII DE APLICARE Lipidele, n special sterolii, joac un rol important n organizarea structural i activitatea vital a tuturor organismelor vii, inclusiv a microorganismelor. Acestea intr n compoziia membranelor celulare i altor structuri organoide.[6] Sterolii sunt rspndii destul de larg n natur fiind parte component al membranelor biologice. Clasificarea sterolilor dup provenien n :

Fitosteroli caracteristici regnului vegetal (sistosterolul i stigmasterolul) Micosteroli caracteristici microorganismelor, ciupercilor, drojdiilor, mucegaiurilor (ergosterolul, fungisterolul, zimosterolul) Zoosteroli caracteristici regnului animal (colesterolul) Steroli marini din burei de mare [7] Sterolii i lipidele, n general, au rolul de a furniza nutrimentele necesare sntii celulei

i pentru eliminarea reziduurilor.[11] Se gsesc n toate uleiurile vegetale. n cantiti mici se gsesc n cereale, nuci, unele frunze ale legumelor. Dei alctuii asemntor colesterolului, consumai cu regularitate reduc nivelul acestuia din snge. [8] Se face adesea confuzia ntre steroli i steroizi. Despre steroizi se cunosc multe aspecte, s-au scris numeroase articole i n linii mari, cam toi cei ce au tangen cu culturismul tiu cte ceva despre efectele pozitive i negative ale acestor compui chimici. Spre deosebire de acetia, despre steroli nu s-a scris prea mult, nu fiindc nu ar exista suficiente studii, ci pentru c nu au reprezentat un punct de interes, datorit efectelor mult mai reduse n ceea ce privete dezvoltarea masei musculare, n comparaie cu steroizii.[8] Exist pe pia suplimente nutritive pe a cror prospect gsim diveri compui din categoria sterolilor. Confuzia ntre steroizi i steroli ridic n mintea multora ntrebarea sunt oare periculoi sterolii? Ar trebui s consumm astfel de suplimente? Sunt ele sigure? Iar dac rspunsul este da, sunt eficiente sau reprezint bani aruncai? [8]

Biochimie, pentru studenii anului I - STEROLII Dup dicionarul medical Stedman, sterolii sunt definii ca steroizi cu 27 sau mai muli atomi de carbon i cu o grupare OH (alcool). Deci sunt steroizi S nu intrm n panic! Da, fac parte din grupul larg al steroizilor, aceste lipide naturale sau sintetice, cu roluri foarte importante n organism. Dar atunci cnd spunem steroizi nu trebuie s ne gndim automat la hormoni sexuali anabolizani i la substane sintetice care se folosesc ca metode doping, ci la o clas de compui chimici care au un nucleu comun, ns formele sub care exist att n regnul animal, ct i cel vegetal sunt foarte diverse. Trebuie s ne gndim i la colesterol, cel care este incriminat pentru formarea aterosclerozei, la acizii biliari, la diveri hormoni cum ar fi aldosteronul, cortizolul, progesteronul, la vitamina D i lista poate continua. Evident, n aceast list se afl i testosteronul mpreun cu toi derivaii lui naturali i sintetici, parte din ei utilizai n terapie, dar i de ctre cei care vor mas muscular n timp scurt. [8] Aadar, sterolii reprezint o subcategorie ce face parte din clasa steroizilor. Diferena de structur fa de steroizii anabolizani atrage dup sine i o important diferen ntre efectele n organism, att pozitive, ct i negative. [8] Un interes deosebit, prezint faptul, c la organismele inferioare componena sterolilor este destul de variat, pe cnd la reprezentanii formelor superioare a lumii animale se reduce la coninutul unui singur tip de steroli. Astfel, celulele animale n cea mai mare parte conin numai colesterol, plantele superioare -sitosterol, iar plantele inferioare, ciupercile i alte microorganisme posed un grup de steroli. [8] Sterolii joac un rol structural i fiziologic important n compoziia protoplastului, formnd mpreun cu proteinele i glucidele macrolegturi complexe. De asemenea, intr n structura membranelor celulare, mitocondrii, microsomi. Pe lng aceasta, n celule sterolii se pot afla n stare liber, n legtur cu eterii i acizii grai nalt moleculari. Acetia, formnd legturi asociative cu diferite substane toxice, adesea inhib aciunea lor negativ asupra activitii funcionale a organismului viu. [8] Cel mai important sterol n organismul vertebratelor este colesterolul. Acesta intr n componena tuturor celulelor i lichidelor organismului, particip la sinteza acizilor biliari, hormonilor suprarenalelor, normalizeaz permeabilitatea membranelor celulare i sub aciunea razelor ultraviolete se transform n piele n vitamina D3 (colecalciferol), care contribuie la formarea unui esut osos de calitate i n lipsa creia apare rahitismul la copii. O parte de colesterol se sintetizeaz n organism de ctre diferite celule ale esuturilor, iar alta ptrunde odat cu hrana. Sunt bogate n colesterol glbenuul de ou, produsele lactate (untul, smntna), carnea de vit i de porc, petele .a. Colesterolul din produse alimentare se dizolv mai greu dect colesterolul endogen. [8] 8

Biochimie, pentru studenii anului I - STEROLII n organism, colesterolul se sintetizeaz din acid acetic (produs intermediar al glucidelor i lipidelor). Excesul de colesterol prezint unele riscuri pentru sntate. Colesterolul se elimin din organism cu bila, prin membrana intestinului gros. Coninutul limitat al colesterolului n raia alimentar face s creasc sinteza lui n organism. Norma zilnic de colesterol este de 0,3-0,6 g. Ali reprezentani ai grupului de steroli sunt fitosterolii, parte component a lipidelor ce intr n structura plantelor i au o compoziie similar cu a colesterolului (diferena const n existena unui grup suplimentar etil). Toate plantele, inclusiv fructele, legumele, cerealele, seminele, conin compui sterolici dintre care cel mai frecvent ntlnii sunt -sitosterolul (C29H50O) i stigmasterolul (C29H48O) - izolai din uleiurile de bumbac i soia, reziduri ale industriei de prelucrare a celulozei, campesterolul (C28H48O) din varz. Fitosterolii se gsesc n plante att n stare liber, ct i n compui cu glucidele i/sau acizii grai. Uleiurile obinute din plante sunt n mod particular bogate n fitosteroli. Toi sterolii se deosebesc ntre ei prin lungimea catenei laterale sau dup gradul de saturare. [8] Interesul pentru fitosteroli a crescut atunci cnd un cercettor din Africa de Sud, Roelof Wilke Liebenburg, dup ce a observat cum anumite leacuri populare dau rezultate n tratamentul cancerului de prostat, a nceput s studieze efectele fitosterolilor. De aici au rezultat medicamente pe baz de steroli, care se folosesc n tratamentul adenomului de prostat (acesta este o hipertrofie benign, deci necanceroas, a prostatei). Mai trziu, medicamentele pe baz de steroli au nceput s fie utilizate n afeciuni ale sistemului imun, astm, diabet, herpes, artrita reumatoid, alergii. Cercetri recente se concentreaz pe efectul sterolilor n fibromialgie, tuberculoz, hepatite i alte afeciuni n care amelioarea sistemului imun ar putea s reduc gravitatea i durata bolii. [8] Cercettorii au artat ca sisterolul poate ajuta la normalizarea funciei limfocitelor T helper i celulelor NK (natural killer), n momente cnd corpul este supus unui stres (n special mbolnvirii). Utilizarea sterolilor vegetali n tratarea hipercolesterolemiei se pare c are toate ansele s reprezinte un rspuns la aceast problem. Existenti mai mult n fistic, sterolii vegetali protejeaz organismul de anumite tipuri de cancer i boli cardiovasculare. Sterolii din plante, ca i uleiul de pin i de soia, se folosesc pentru a produce un tip de margarin vegetal care poate scdea colesterolul LDL cu aproape 10 %. Produsele care conin sterol nu sunt recomandate copiilor, femeilor nsrcinate, sau persoanelor care nu au probleme n privina colesterolului. [8] i n cazul sportivilor sterolii i-au dovedit eficiena. n special dup eforturi intense, cum ar fi participarea la o curs de maraton, organismul are nevoie de susinere. Secreia cortizolului, hormon de stress cu rol catabolizant, poate fi controlat, iar concentraia lui poate fi astfel redus, ceea ce reprezint un beneficiu n sensul protejrii masei musculare. Sterolii din plante au efecte anabolizante reduse, care nu se compar cu efectele hormonilor anabolizani, cu alte 9

Biochimie, pentru studenii anului I - STEROLII cuvinte nu trebuie s existe temerea c la consumarea unor suplimente nutritive ce conin i steroli, ar putea aprea efectele secundare ale steroizilor anabolizani. [8] Pentru culturiti, suplimentele ce conin steroli sunt recomandate pe baza efectelor de reglare a funciilor mai putin evidente, dar extrem de importante i m refer n special la sistemul imunitar i cel hormonal. Chiar dac efectele pro-dezvoltare muscular nu sunt att de intense ca n cazul steroizilor anabolizani, protejarea organismului mpotriva stresului indus de antrenamentele puternice reprezint un element pe care ar trebui s l aiba n vedere fiecare sportiv i antrenor. [8]

III. DROJDIILE SURSE DE STEROLI Din aceast diversitate de steroli, un loc deosebit dup importana sa, l deine ergosterolul drojdiilor. Pentru prima dat, ergosterolul (C28H44O) a fost extras din corn-de-secar (n 1889) de ctre Tanret, mai apoi de Gerard (1895) n ciuperci, iar Nageli a descoperit c cea mai mare cantitate de steroli se afl n drojdii, specific fiind ergosterolul. Ali steroli, care sunt prezeni n celulele drojdiilor, alctuiesc doar o cantitate infim al acestora. Drojdiile, n prezent, reprezint sursa principal pentru obinerea ergosterolului comercial. [9] Extinderea domeniilor de aplicare a diferitor preparate steroide impune nu numai de a majora eficacitatea tehnologiei producerii lor, dar i de a gsi noi surse de materie prim. n ultimii ani tot mai mult atenie se acord microorganismelor ca surse poteniale de steroli. Acest fapt se explic printr-un ir de avantaje, pe care le posed sinteza microbian a sterolilor comparativ cu procedeele de obinere din materia prim de origine vegetal i animal. Cunoaterea mecanismelor de biosintez a sterolilor la microorganisme d posibilitate de a intensifica procesul producerii lor pe cale biotehnologic. [9] Microorganismele eucariote i n deosebi drojdiile, dein cel mai impuntor procent de steroli. S-a constatat, c ergosterolul n drojdii variaz ntre 0,2-4% din masa uscat a drojdiilor, cel mai nalt procent fiind specific drojdiilor genului Saccharomyces. Componentul de baz al fraciilor sterolice la drojdii l reprezint ergosterolul. Coninutul acestuia variaz n limitele 7090% din totalul sterolilor celulei. O serie de tulpini de drojdii se caracterizeaz la fel i prin coninut ridicat de 24(28)-dehidroergosterol, unele acumuleaz i zimosterol. Alte produse ale biosintezei sterolilor de obicei se gsesc n cantiti mici. n total n celulele drojdiilor se pot gsi pn la 20 tipuri de steroli. [5]

10

Biochimie, pentru studenii anului I - STEROLII Cea mai mare cantitate de steroli o posed drojdiile de panificaie i cele de bere. n urma investigrii mai multor tulpini de drojdii s-a confirmat, c cele mai perspective productoare de steroli (ergosterol), sunt tulpinile de drojdii Saccharomyces carlsbergensis. La fel ca Saccharomycetele n calitate de surse perspective de steroli se pot considera i drojdiile genului Candida. Biosinteza sterolilor la drojdiile Candida i Saccharomyces au multe n comun, cu unele deosebiri n stadiile primare ale sterologenezei. Drojdiile genului Candida, datorit particularitilor sistemului lor enzimatic sunt capabile s utilizeze carbohidrai, zaharuri ale hidrolizatelor de natur vegetal i alcooli sintetici, ceea ce d posibilitatea de a obine steroli pe baz de materie prim nealimentar. [5] Actualmente, n multe ri ale lumii (Rusia, SUA, China, Japonia etc.) au fost selectate tulpini de drojdii, care se deosebesc printr-un nivel nalt de sintez a produsului integru, acumulare selectiv i stabilitate genetic. Datorit proprietilor morfo-culturale i fiziologice, acestea ofer posibiliti pentru o aplicare mai larg n biotehnologia obinerii sterolilor din drojdii n calitate de materie prim la producerea unui spectru larg de preparate steroide biologic active. [5] Substanele de natur steroid i gsesc n ultimele decenii o utilizare practic tot mai vast. Hormonii steroizi, glicoalcaloizii, glicozidele cardiace, acizii biliari, preparatele antibacteriale etc. sunt pe larg folosite n medicin. Pentru necesitile agriculturii din steroli se obin insecticide, fungicide, preparate contra roztoarelor i stimulatoare pentru creterea plantelor de cultur. [5] n industria electronic se folosesc cristale lichide pe baz de eteri ai colesterolului. n majoritatea cazurilor aceste produse deriv din materie prim foarte costisitoare i deficitar colesterol (steroli de origine animal) i fitosteroli (-sitosterol, stigmasterol i campesterol). De perspectiv este utilizarea sterolilor naturali n scopul obinerii preparatelor cu activitate hormonal, care const n transformarea microbiologic (de ctre bacteriile genului Rhodococcus) a sterolilor pn la androst-4-en-3,17-diol i androsta-1,4-dien-3,17-diol cu participarea colesteroloxidazei, avnd ca sfrit logic obinerea stigmast-4-en-3-olului i a preparatelor n baza lui, folosite la tratarea unor dereglri de ordin endocrin. Produse de acest fel se pot obine i n urma dezintegrrii catenei laterale de ergosterol, cu ajutorul unei tulpini de Mycobacterium, transformndu-l n androst-4-en-3,17-dion n decurs de 72h. Alte cercetri cu final pozitiv, au fost cele efectuate asupra biotransformrii ergosta-5,7-dien-3-olului i ergosta7,22-dien-3-olului prin implicarea tulpinii de Nocardia erythropolis. [5] Un domeniu relativ nou de aplicare a substanelor de natur steroid l prezint cosmetologia. Este recunoscut faptul, c procesul de mbtrnire a pielii i nrutirea aspectului ei exterior este strns legat de nivelul estrogenilor din organism. Diminuarea coninutului de 11

Biochimie, pentru studenii anului I - STEROLII estrogeni odat cu naintarea n vrst, conduce la schimbri n procesele de sintez a colagenului i acidului gialuronic i prin urmare are loc o modificare brusc a calitii pielii: pierderea elasticitii, apariia ridurilor. n ultima perioad de timp exist o tendin de a scoate pe pia produse cosmetice pe baz de estrogeni. Utilizarea n acest scop a materiei prime de origine animal reprezint o metod nu prea sigur i complicat. Aplicarea n produsele cosmetice a estrogenilor obinui pe cale sintetic este problematic, cauza fiind apariia efectelor secundare nedorite. Astfel, s-a gsit o alternativ de substituire a acestor compui cu cei de natur vegetal (-sitosterolul, campesterolul, stigmasterolul) sau micotic (ergosterolul). Dup structura sa chimic, aceste substane sunt capabile, la nivel local, s imite aciunea estrogenilor endogeni asupra pielii: stimularea proceselor proliferative n epiderm, amplificarea proceselor de formare a colagenului i fibronectinei. [5] Toi sterolii cu sistemul-5,7 posed o potenial activitate D-vitaminic (provitamine) i pot fi folosii pentru obinerea vitaminelor respective. O nsemntate deosebit o au vitaminele grupului D pentru medicina practic, n scopul asigurrii organismului cu calciu. Este bine tiut, c producia cutanat de vitamin D scade odat cu vrsta (la 70 ani aceasta este cu 50 % mai redus dect la 20 de ani), de aici deriv i necesitatea suplimentrii aportului respectiv prin consumul unor produse alimentare de origine animal (untura de pete, produse lactate), produse care nu ntotdeauna acoper necesarul n vitamina D, gsindu-se n cantiti infime (spre exemplu, 100 g lapte de vac conine doar 0,05 mg vitamin D). [5] Vitaminele antirahitice (D2 i D3) joac un rol de baz n asimilarea calciului i fosforului la nivelul intestinului subire cu depozitarea ulterioar n oase i dini, n metabolismul magneziului, fierului. Prezena acestei vitamine n organism este benefic, n sensul c previne instalarea osteomalaciei i osteoporozei senile, evit carierea sever a dinilor, previne apariia unor tulburri nervoase, slbiciune general, sensibilitatea la unele boli infecioase, contribuie la buna funcionare a glandei tiroide, paratiroidei i hipofizei. Vitamina D este indicat n cazurile de tratare a rahitismului la copii, n reumatism, tetanie, graviditate i alptare, consolidarea fracturilor, acnee i eczeme, diferite supuraii, stres, oboseal, fragilitate a oaselor i dinilor, crampe musculare etc. [5] Necesarul zilnic n vitamin D este de circa 120-200 U.I. sau 2,5 mcg, fiind asigurat n mod normal, printr-o alimentaie corespunztoare sau expunerea la lumina solar. La femei, n timpul sarcinii i alptrii cantitatea de vitamin D zilnic se situeaz ntre 600-800 U.I., iar copiilor le este indicat s consume cca 200-500 U.I. Cnd aportul de vitamina D este insuficient, se recomand administrarea preparatelor farmaceutice de vitamina D sau untura de pete. Evalund rezultatele tiinifice relevate n multiple publicaii n domeniu, concluzionm n mod

12

Biochimie, pentru studenii anului I - STEROLII deosebit, c drojdiile genului Saccharomyces sunt acreditate cu un statut aparte printre obiectele biotehnologice, utilizate n prezent pentru obinerea produselor sterolice. [5] Drojdiile utilizate n industria de biosintez manifest diferite cerine de hran i condiii specifice de mediu. n general, orice microorganism are nevoie de o surs de energie, concentraii optime a elementelor nutritive, diferite cerine specifice. mbogirea biomasei cu ergosterol n stadiul fermentativ, n principiu, are loc pe contul mediului nutritiv cu componen specific i regimului de aerare. Unul din factorii de baz ai dirijrii biosintezei sterolilor l reprezint sursa de carbon. Ca surs de energie i carbon pentru drojdii servesc glucidele. Rafinoza, zaharoza i glucoza sporesc coninutul de steroli cu 40-50 %, demonstrnd nemijlocit importana lor n procesele biosintetice a sterolilor. Un coninut sporit al sterolilor n biomas poate fi obinut la cultivarea unor tulpini de drojdii pe mediu cu etanol sau glicerin. Pentru drojdiile care asimileaz -alcanii, cei din urm reprezint cea mai eficient surs de carbon fa de glucide. Este demonstrat, c sinteza ergosterolului se supune represiei glucido-catabolice, n legtur cu care apare problema selectrii dozei acestora. [5] n calitate de regulatori ai creterii i activitii biosintetice a drojdiilor sunt necesari n mediile de cultur i surse de azot, de baz fiind sulfatul de amoniu, fosfatul de amoniu, amoniacul, unii aminoacizi (asparagin). Datele din literatura de specialitate confirm faptul, c azotul nu este necesar pentru biosinteza sterolilor, ci dimpotriv, cantitile mari ale acestuia n mediul nutritiv frneaz n mod considerabil acumularea lor n celule. Dup prerea autorilor, azotul reprezint un factor represiv asupra procesului de biosintez a sterolilor, deoarece o parte din produsele intermediare care se formeaz n urma metabolismului glucidic, necesari pentru sinteza sterolilor, sunt preluai de ctre azotul prezent n mediul de cultur pentru transformarea lor n compui cu azot (proteine, aminoacizi, acizi nucleici). O analiz mai detaliat a influenei concentraiei azotului a demonstrat, c n esen exist o corelaie molar optimal a carbonului i azotului n mediu (C/N=40), meninerea creia contribuie nu numai la creterea numrului de celule levuriene, dar i la acumularea ergosterolului n acestea. [5] Exigenele minerale ale drojdiilor sunt multiple, necesitnd i o suplimetare n fosfor prin folosirea de fosfai, n potasiu (KCl, KHSO4), n magneziu prin administrarea sulfatului de magneziu (MgSO4). [5] Coninutul de steroli crete pe msura mbtrnirii culturii de drojdii i atinge valoarea maximal n idiofaz, cnd are loc includerea metabolismului secundar. Fosforul exogen reprezint unul din factorii de baz ce favorizeaz trecerea culturii din trofofaz n idiofaza de producent a ergosterolului. [5] n afar de elementele nutritive de baz, asupra biosintezei sterolilor pot aciona i alte substane care sunt introduse n mediul nutritiv. Sinteza sterolilor este legat direct de sinteza 13

Biochimie, pentru studenii anului I - STEROLII fosfolipidelor i acizilor grai nesaturai prin precursorul lor comun izoprenul. De aceea, implementarea componenilor cu coninut nalt n grsimi (concentrat lectinic de soia i rapi) stimuleaz biosinteza acestora. [5] Dintre stimulatorii creterii se pot evidenia vitaminele, cu un rol bine definit n procesele biochimice, att n etapa de cretere a biomasei, ct i n cea de elaborare a produselor utile. Acestea reprezint coenzimele sistemelor enzimatice cu activitate precis n metabolismul celular, fapt dovedit de ncadrarea acidului pantotenic, parte component a acetil-KoA, n procesele de sintez a izoprenului (hidrocarbur iniial din care sunt sintetizate vitaminele liposolubile). n general, factorii de cretere sunt necesari n cantiti mici, deoarece ndeplinesc funcii specifice n biosinteze. [5] Un rol aparte n dirijarea proceselor metabolice i de dezvoltare a drojdiilor l dein oligoelementele. n prezent, din cele circa 109 microelemente cunoscute, 30 sunt indispensabile pentru meninerea activitii vitale a organismelor. Cationii bivaleni sunt necesari pentru reglarea sarcinii electrostatice ntre moleculele lipidelor i proteinelor din componena membranelor celulare, astfel mrind stabilitatea acestora. [5] S-a constatat, c din totalitatea enzimelor cunoscute, conin ioni ai unor metale: Fe, Zn, Cu, Mn, Co, Mo, Ni etc. Spre exemplu, ionii de Zn2+ sunt parte component a oxidoreductazelor, hidrolazelor, transferazelor, care la rndul su sunt implicate n metabolismul fosforic, proteic, glucidic. Ionii de Mn2+ catalizeaz activitatea superoxiddismutazei, glicoziltransferazei, acetil CoA-carboxilazei; Fe2+ - catalazei, peroxidazei; ionii de Cu2+ intr n componena nitritreductazei, citocromoxidazei, stimulnd procesele de fotosintez, respiraie, metabolismul hidrailor de carbon, biosinteza lipidelor. [5] Vorbind despre aciunea factorilor externi asupra biosintezei sterolilor, trebuie de menionat i ali factori ca: regimul de aerare, temperatur, pH-ul. Celulele de drojdii sunt facultativ aerobe, iar respiraia aerob intens este o condiie indispensabil pentru generarea de mas celular i la rndul su de sintez a principiilor bioactive. [5] Coninutul de steroli la drojdii sufer schimbri vizibile n urma modificrii condiiilor de cultivare. Cercetrile unor autori au demonstrat, c la o trecere de la condiiile anaerobe la cele aerobe, are loc o acumulare brusc a sterolilor. Se modific i corelaia fraciilor sterolice: coninutul de steroli legai (eteri de steroli) n condiii aerobe ajunge pn la 85-90 % din cantitatea total a sterolilor, pe cnd fraciei de steroli liberi i revine doar 10-15 %. n condiii anaerobe scade cantitatea de steroli legai pn la 70-75 % i respectiv crete coninutul de steroli liberi la 25-30 %.[5] Insuficiena oxigenului n celule conduce la acumularea precursorului aciclic squalenul. S-a stabilit, c oxigenul este necesar n stadiul de epoxidare a squalenului, iar n componena 14

Biochimie, pentru studenii anului I - STEROLII sistemelor enzimatice (monooxigenaze) particip n demetilarea i hidrogenarea precursorilor ciclici. Prin urmare, aerarea intensiv reprezint unul din factorii primordiali n biosinteza sterolilor la drojdii. [5] Temperatura are un rol hotrtor asupra dezvoltrii celulelor de drojdii i n procesul de biosintez a sterolilor. Optimul este situat ntre 25 - 30 oC i coincide cu cea de cretere i nmulire a drojdiilor. Cercetrile au artat, c temperaturile nalte manifest represiune asupra enzimelor de sintez a acidului mevalonic, iar cele sczute conduc la micorarea coninutului sumar al sterolilor n celul. S-a demonstrat, c sterolii se sintetizeaz maximal la 30oC, la temperaturi de peste 35oC biosinteza ncetinete, iar la 40 oC este critic pentru sinteza sterolilor (ncepe o aciune termic de distrugere care crete exponenial cu temperatura). Scderea brusc a temperaturii poate provoca o acumulare sporit a sterolilor n celule. Prin urmare, variaiile temperaturii au efect asupra randamentului de transformare a substratului n produsul dorit, asupra compoziiei biomasei obinute i, nu n ultimul rnd, asupra vitezei de cretere microbian. [5] Valoarea pH-ului este, alturi de temperatur, un parametru important n procesele de biosintez. n general microorganismele au un domeniu optim de pH pentru dezvoltare, n care viteza specific de cretere atinge valoarea maxim. pH-ul mediului de cultivare influeneaz activitatea sistemului enzimatic corespunztor, care se implic nemijlocit n procesele de biosintez a sterolilor. [5] Pentru drojdiile genului Saccharomyces domeniul optim se situeaz ntre valorile de pH 4 5 i prezint avantajul unui risc mai sczut de contaminare bacterian, ceea ce este n mod deosebit de apreciat n cazul unei cultivri la scar industrial. Astfel, optimiznd mediile nutritive i regimul tehnologic de fermentare, se pot activa sistemele metabolice rspunztoare de acumularea sterolilor n celula de drojdie. Sporirea productivitii culturilor de drojdii, utilizate n producia ergosterolului, trebuie s asigure eficacitatea acestuia la maxim. [5] Totaliznd informaiile de ultim or, privitor la biotehnologiile moderne de obinere a produselor sterolice, putem evidenia necesitatea continurii realizrii unor cercetri, destinate elaborrii unor noi modele de cultivare a drojdiilor n direcia obinerii principiilor sterolice n cantiti majorate. Fitosterolii, mai ales cei coninui n fructele de ctin alb, au efecte antitumorale pronunate. [11] 3.1. Ctina alb

dup http://www.naturist-life.ro/forum/viewtopic.php?p=218, 08.12.2009 15

Biochimie, pentru studenii anului I - STEROLII 3.2. Sterolii

dup dr. erban Damian, http://doctor.info.ro/steroli_si_steroizi.html, dr. erban Damian Sterolii sunt de asemenea prezeni n drojdii - Micosterolii. Cel mai des ntlnii sunt ergosterolul i zimosterolul alturi de numeroi ali steroli n cantiti mai mici. Ergosterolul a fost prima dat izolat din ciuperca cornul secarei i din drojdie. Prin iradiere cu raze ultraviolete ergosterolul se transform n vitamina D2 (calciferolul), fiind provitamina vitaminei D2. [11] Sterolii pot aprea liberi sau esterificai cu un acid gras n poziia 3-hidroxi. De asemenea, din drojdii a fost izolat i squalenul, hidrocarbura C30 precursoare a sterolilor. [5]

16

Biochimie, pentru studenii anului I - STEROLII 3.3. Steroli din drojdii: ergosterol (stnga), zimosterol (dreapta)

dup Wikipedia, http://ro.wikipedia.org/wiki/Sterol, 07.12.2009 Sterolii i estrogenii sunt obinui din turba arctic scandinav printr-un proces de extracie ce folosete lichidele supercritice. Rezult "turba alb" cu o concentraie 100 %, pur i lipsit de culoare, o fitoputere concentrat de dou ori, o dat n epoca de ghea i o dat prin tehnologia modern. Turba aceasta este cea mai bun prieten a pielii n lupta mpotriva daunelor provocate de timp, acionnd prin reechilibrarea lipidic i a coninutului de apa din esuturi.[10] Zoosterolii pot fi prezeni n lapte n cantiti foarte mici. Au proprietatea de a ntrzia sau inhiba activitatea lipazei, diminund procesele de oxidare a grsimii. [5] Dintre sterolii animali, ergosterolul se transform n vitamin D n principal n piele sub aciunea energiei solare printr-un proces fotochimic, cu consum mare de energie. [11] IV. STEROLII I VIAA DE ZI CU ZI IV. 1. APLICAII N HORTICULTUR Plantele de cultur sunt n majoritate atacate de ciuperci fitopatogene, care le provoac suferine materializate prin deteriorri ale aparatului foliar sau ale celui de reproducere, n final, fructele sau seminele fiind improprii scopului pentru care s-a nfiinat cultura respectiv. Mana viei de vie (Plasmopara viticola), finarea (Uncinula necator), putregaiul cenuiu (Botrytis cinerea), rapnul, septorioza, antracnoza i o mulime de ali fungi au reclamat o multitudine de cercetri i ncercri n controlu i combaterea lor. Aa au aprut fungicidele, mai nti cele de contact, care acopereau suprafeele de protejat i ciupercile nu mai aveau posibilitatea de a penetra cu organele lor vegetative. Apoi au urmat fungicidele cu dubl aciune, de contact i parial sistemic, dar spectrul lor de aciune era foarte larg. Ulterior s-a dezvoltat o nou dimensiune a combaterii chimice: fungicidele sistemice selective. Acestea ptrund n plante, 17

Biochimie, pentru studenii anului I - STEROLII intr n circuitul sevei, fie apical, fie bazal i transport agentul de protecie sau curativ pn la nivel celular. [4] inta aciunii fungicidelor este constituit de diversele funcii metabolice ale ciupercii. n majoritatea cazurilor procesul const n inhibarea sau inactivarea enzimelor. n cazul fungicidelor de contact, care posed n general o aciune tip "multi-site", adic acioneaz n mai multe puncte, aceste proteine catalitice sunt deseori afectate neselectiv; ca urmare, apariia rezistenei fa de o aciune cu spectru att de larg este foarte puin probabil. Exemple tipice sunt constituite de substanele fungicide anorganice cupru i sulf, de cele organice din clasele ditiocarbamai (mancozeb, propineb), ftalimide (captan) i sulfamide (tolilfluanid). [3] n cazul fungicidelor sistemice, care posed n general o aciune tip "single-site" (o singur int a aciunii fungicide), este afectat numai o singur enzim respectiv o grup de enzime. Printre intele cele mai comune ale aciunii fungicidelor utilizate n prezent se gsete i biosinteza sterolilor. Sterolii reprezint un element important al membranelor celulare. Inhibitorii biosintezei sterolilor acioneaz n diverse puncte ale lanului sintezei din celulele ciupercilor patogene. n timp ce morfolinele inhib dou enzime asemntoare, triazolii (ex. tebuconazol) i imidazolii (ex. imazalil, procloraz) inhib o singur enzim, cu funcie de catalizator al reaciei de descompunere a unei grupe metil. Aceste dou grupe cuprind mare parte din fungicidele utilizate n prezent i acioneaz mpotriva unui spectru larg de patogeni, cu excepia ciupercii manei cartofului, Phytophtora infestans, care nu sintetizeaz steroli. [3] Rolul pozitiv al substanelor fungicide cu efect IBS (Inhibitori ai Biosintezeri Sterolilor) este mult diminuat n condiiile aplicrii lor haotice n programele de protecie a viei de vie, de exemplu. Tratamentele n a doua perioad de vegetaie, mai precis dup intrarea n prg a strugurilor, pot avea efecte nedorite pentru viticultori. Remanena ndelungat a unor fungicide IBS i regsirea reziduurilor din aceste substane n must la nceputul fermentaie alcoolice, poate avea ca efect inhibarea multiplicrii celulare a drojdiilor responsabile de fermentarea natural a mustului. Tocmai productoarea consacrat de steroli, ciuperca Saccharomyces, poate fi grav afectat de substantele fungicide IBS. n timpul fermentaiei alcoolice, levurile existente n mod natural n mustul de struguri i ncep activitatea metaboliznd zaharurile n proporie de 17 g pentru a le transforma n 1 volum alcool etilic. mpiedicarea formrii membranei celulare duce la moartea acestor drojdii i implicit la scderea ratei de nmulire a lor. De aceea putem spune c aceste substane sunt o arm cu dou tiuri: pe de o parte menin plantele sntoase, aprndu-le de fungii fitopatogeni, iar pe de alt parte, pot mpiedica procesele naturale biologice care ar trebui s duc la produsul finit al culturii protejate, respectiv vinul. [4]

18

Biochimie, pentru studenii anului I - STEROLII 4.1. intele fungicidelor n lanul metabolic al ciupercilor

dup Curierul, Bayer CropScienc, pg. 15, nr.1, 2006

IV.2. APLICAII N MEDICIN Drojdiile reprezint productorii specializai n biosinteza sterolilor. Parte component a structurilor membranare ale celulei, sterolii posed o nalt activitate biologic care determin utilizarea lor larg n medicin, n calitate de preparate antibacteriale, hormoni steroizi, glicoalcaloizi, glicozide cardiace, acizi biliari. n industria electronic se folosesc cristalele lichide pe baz de eteri ai colesterolului, iar n agricultur sterolii sunt utilizai ca stimulatori ai creterii plantelor de cultur. [5] Actualmente o atenie deosebit se acord drojdiilor ce aparin genului Saccharomyces pentru performanele n biosinteza sterolilor, n special a ergosterolului. Importana practic a ergosterolului, pe de o parte, este redat de capacitatea lui de a se transforma n vitamina D2 (ergocalciferol) la iradiere cu raze ultraviolete, iar pe de alt parte, acesta este o surs pentru sinteza hormonilor steroizi. Studiile biomedicale recente confirm oportunitatea includerii ergosterolului n compoziia unor remedii medicamentoase noi cu poteniale efecte antirahitice, anti-cancerigene, anti-leucemice, imunomodulatoare, anti-sclerotice, hematopoetice, de

19

Biochimie, pentru studenii anului I - STEROLII meninere a homeostazei celulare, precum i destinate prevenirii unor afeciuni de ordin endocrin i reproductiv. [5] n majoritatea cazurilor, ergosterolul deriv din materie prim foarte costisitoare i deficitar colesterol (steroli de origine animal) i fitosteroli (-sitosterol, stigmasterol i campesterol), de aceea extinderea domeniilor de aplicare a diferitor preparate steroide impune nu numai sporirea eficacitii tehnologiei producerii lor, dar i precutarea de noi surse de materie prim. Producerea ergosterolului este organizat la nivel industrial n diverse ri ale lumii. Investigaiile orientate spre obinerea productorilor cu coninut nalt de steroli, optimizarea mediilor nutritive pentru cultivare, precum i elaborarea procedeelor de obinere a biomasei levuriane cu coninut biochimic valoros i a preparatelor sterolice n baza ei, sunt actuale i pot fi considerate inovative. Realizarea sintezei microbiologice a sterolilor cu utilizarea producenilor specializai n limitele biotehnologiei existente de producere a ergosterolului, va permite diversificarea materiei prime pentru obinerea preparatelor de natur steroid cu divers destinaie i nu n ultimul rnd, va contribui la extinderea irului de preparate ecologic pure. [5] Studierea particularitilor de cultivare dirijat a tulpinilor de drojdii nalt productoare de steroli n vederea elaborrii tehnologiilor de obinere a biomasei levuriene cu coninut biochimic valoros i a preparatelor sterolice n baza ei necesit anumite obiective: * Selectarea unor tulpini de drojdii nalt productoare de steroli i stabilirea caracterelor morfoculturale i fiziologo-biochimice a lor; * Stabilirea exigenelor nutritive, precursorilor i inductorilor specifici ai biosintezei sterolilor pentru tulpinile de drojdii selectate; * Estimarea efectelor undelor milimetrice de intensitate joas asupra activitii biosintetice a drojdiilor cu semnificaie n biotehnologie i elaborarea procedeelor eficiente de obinere a biomasei cu coninut sporit de produse oleogene; [5] * Elaborarea tehnologiilor de obinere a produselor sterolice din biomasa levurian. A fost selectat tulpina de drojdie Saccharomyces carlsbergensis CNMN-Y-15, cu potenial sporit de sintez a ergosterolului i determinate particularitile morfo-culturale i fiziologo-biochimice ale ei (Brevet de invenie MD 3538, 2008). [5] Au fost evideniai nutrienii prefereniali, precursorii i inductorii specifici pentru cultivarea dirijat a tulpinei respective n vederea intensificrii biosintezei sterolilor. [5] A fost demonstrat posibilitatea utilizrii compuilor coordinativi ai Zn(II) i Mn(II) n calitate de reglatori ai productivitii i stimulatori ai sterologenezei. [5] Au fost obinute medii nutritive noi destinate cultivrii tulpinii Saccharomyces carlsbergensis CNMN-Y-15 n dependen de scopul final - posibilitatea sporirii productivitii drojdiei (prin includerea n mediul nutritiv a compuilor coordinativi ai Zn(II) i a melasei) sau 20

Biochimie, pentru studenii anului I - STEROLII obinerea coninutului sporit de steroli (prin suplimentarea mediului nutritiv cu glucoz i acetat de mangan). [5] n premier a fost relevat caracterul de aciune al undelor milimetrice de intensitate joas n dependen de specie, regimul i durata de emitere la tulpinile de drojdii Saccharomyces cerevisiae CNMN-Y-11, Saccharomyces cerevisiae CNMN-Y-16, Saccharomyces carlsbergensis CNMN-Y-15, Rhodotorula gracilis CNMN-Y-03. Datele obinute contribuind la acumularea informaiei asupra interaciunii undelor milimetrice de intensitate joas cu microorganismele, n funcie de fazele de cretere i multiplicare a celulelor de drojdii. A fost elaborat procedeul de sintez orientat a principiilor bioactive oleogene prin utilizarea undelor milimetrice de intensitate joas (Brevet de invenie MD 3516, 2008). [5] Cunoaterea mecanismelor de formare a sterolilor i a modului de aciune a diferitelor substane chimice de sintez a dus la descoperirea unei largi sfere de aplicare a rezultatelor n medicina uman. Vom discuta n continuare o serie de afeciuni ale organismului uman, legate de prezena sterolilor i impactul cunoaterii tiinifice n tratarea lor. [5] IV.2.1. M I C O Z E L E Infeciile cu fungi patogeni (ciuperci) sunt numite micoze. Antifungicele sunt substane folosite i n tratamentul infeciilor cu fungi patogeni ai organismului uman. Ciuperci din genul Candida, de exemplu, pot fi inute sub control cu ajutorul substanelor din grupa azolilor: fluconazol, itraconazol, ketoconazol. Ciuperci din genul Trichomonas pot fi controlate cu ali triazoli: metronidazol, clotrimazol. [12] Fluconazolul este o substan care inhib 14 - dimetilaza, enzim care convertete lanosterolul n dimetillanosterol, inhibnd astfel formarea ergosterolului, component esenial al membranei fungice, care asigur integritatea i creterea fungilor. Inhibarea enzimei are ca rezultat depleia ergosterolului i acumularea n celul a sterolilor 14-metilai. Acest mecanism are ca rezultat stoparea creterii celulare i nu moartea celular, azolii avnd efect fungistatic. [12] Itraconazolul este un agent antifungic triazolic fungistatic in vitro. El mpiedic sinteza ergosterolului n celula fungic prin blocarea enzimei lanosterol C14 - dimetilaza, dependent de citocromul P450. Astfel, are loc scderea ergosterolului i creterea lanosterolului pe membrana celulei fungice, determinnd alterarea permeabilitii i funciei acesteia. [12] Ketoconazolul este primul antifungic cu spectru larg din grupul azolilor, disponibil pentru administrare oral din anul 1980. Este n principal fungistatic. Inhib lanosterol 14 - dimetilaza din citocromul P 450 i consecutiv conversia lanosterolului n ergosterol. Are loc acumularea 21

Biochimie, pentru studenii anului I - STEROLII sterolilor C14 cu depleia membranar de ergosterol. n interiorul celulei fungice se petrece o inhibiie a sintezei de trigliceride i fosfolipide. Sinteza de chitin este de asemenea inhibat. Permeabilitatea i sinteza membranei celulare sunt de asemenea afectate. [12] Alilaminele au un mecanism de aciune diferit de cel al azolilor. Blocheaz sinteza ergosterolului prin inhibiia squalen-epoxidazei fungice, enzim care nu aparine familiei citocromului P450. Aceast inhibiie duce la acumularea intracelular a unor cantiti mari de squalen i scderea sintezei ergosterolului. [12] Morolfinele inhib dou enzime din calea de biosintez a ergosterolului, C-14 sterol reductaza i C-8 sterol izomeraza. Amorolfina aparine acestei noi clase chimice. Efectul su fungistatic sau fungicid se bazeaz pe alterarea membranei celulare fungice, inta primar fiind biosinteza sterolilor. Coninutul n ergosterol scade, odat cu acumularea de steroli atipici, steric non-plani. [12] IV.2.2. F O T O T E R A P I A Sterolii se transform n vitamin D n principal n piele sub aciunea energiei radiante luminoase printr-un proces fotochimic, cu consum mare de energie, aa-numita fototerapie. nelegem prin fototerapie, folosirea energiei radiante luminoase n scop terapeutic. Dup sursa folosit, poate fi: natural sau helioterapeutic (de la soare) i artificial (cnd se folosesc diferite aparate cu energie electric) (lmpi cu ultraviolete sau Solux cu infraroii). Noiuni generale: lumina, cu o viteza de propagare de 300.000 km/sec, se transmite sub dou forme i anume: a) ondulatorie sau electromagnetic, care are la baz radiaia electromagnetic (unde electromagnetice) i b) corpuscular, fotonic sau cuantic. Aceasta teorie explic transmiterea luminii n mod discontinuu, prin particule de energie numite fotoni. Teoriile de mai sus pot explica proprietile fundamentale ale luminii ca: reflectia, refracia, interferena, polarizarea, difracia. De fapt, prima nu poate explica fotoelectricitatea, a doua - interferena i difracia, dar amndou pot explica toate fenomenele luminoase; deci: nu und sau corpuscul, ci und i corpuscul. Spectrul acestor unde electromagnetice cunoscute se ntinde de la radiaii cu lungimi de und de kilometri, pn la lungimi de und de 0,000 01 m, iar frecvena lor ncepe de la 0 pn la ordinul 1022 (adica 10 urmat de 22 zerouri, ca la radiatiile cosmice). [7]

22

Biochimie, pentru studenii anului I - STEROLII Lumina vizibil are o zon foarte limitat, gsindu-se ntre radiaiile ultraviolete (urmate de razele X i apoi de razele cosmice). n concluzie, fototerapia, de care ne interesam aici, cuprinde aceste trei forme: radiaiile luminoase, ultravioletele i infraroiile. [7] IV.2.3. R A H I T I S M U L Una din principalele maladii cauzate de lipsa vitaminei D2 n organismul uman este rahitismul. Rahitismul este o boal a copilriei i adolescenei, care se caracterizeaz prin mineralizarea incomplet a oaselor n condiiile carenei de vitamina D. Aceasta se datoreaz pierderii de calciu din oase, care devin flexibile i se deformeaz. [11] Rahitismul survine cu precdere la copii ntre 3 luni i 2 ani, perioad n care copilul crete cu rapiditate, iar corpul acestuia necesit un nivel crescut de calciu i fosfor. Afeciunea este rar la nou-nscui. [11] Vitamina D2 permite absorbia intestinal de calciu, acionnd asupra mineralizrii oaselor, dar i asupra excreiei de calciu prin urin. Cea mai mare parte a vitaminei D este sintetizat la nivelul epidermei, unde sterolii inactivi sunt activati de ctre razele ultraviolete, prin fototerapie. [11] Cauza principal a rahitismului este carena de vitamina D n timpul copilriei. Vitamina D este o vitamin liposolubil (solubil n grsime), care poate fi absorbit din intestine sau poate fi produs la nivelul epidermei, atunci cnd pielea este expus la lumina soarelui (razele ultraviolete contribuie la sinteza vitaminei D de ctre organism). Vitamina D asimilat este transformat n forma sa activ, funcionnd ca un hormon care regleaz absorbia de calciu din intestine i care regleaz nivelul de calciu i de fosfor din oase. Atunci cnd nivelul acestor minerale din snge este prea sczut, se distruge matricea proteic a oaselor. [11] n cazul rahitismului, un alt mecanism intr n funciune pentru a crete nivelul de calciu din snge. Glanda paratiroid (patru glande secretoare de hormoni localizate n spatele tiroidei) i accelereaz funcionarea, compensnd nivelul sczut de calciu din snge. Pentru a crete nivelul de calciu sanguin, hormonul distruge calciul din oase, ducnd la o pierdere suplimentar de calciu i fosfor din oase. n cazurile severe, se observ formarea unor chisturi la nivelul oaselor. [11] Carena de vitamina D poate avea mai multe cauze, printre care numim * factorii de mediu: expunerea limitat la soare, anotimpul rece, clima temperat, etc. * deficit de vitamina D n alimentaie 23

Biochimie, pentru studenii anului I - STEROLII * malabsorbie intestinal (steatoree) - n care organismul nu poate asimila grsimile, acestea trecnd direct n fecale. Astfel, vitamina D, care este absorbit de obicei odat cu grsimile i calciul sunt insuficient absorbite. * acidoza tubular renal creterea cantitii de acid din lichidele organismului, datorat unei afeciuni renale congenital sau dobndit. [11] Lipsa calciului i a fosforului din alimentaie favorizeaz apariia rahitismului o caren dietetic de vitamina D poate surveni ocazional i la vegetarienii care nu consum produse lactate, sau la persoanele care sufer de intolerana la lactoz. [11] IV.2.4. C O L E S T E R O L U L Colesterolul este un tip de grsime. Organismul uman are nevoie de acesta n mai multe scopuri, cum ar fi sinteza de celule. Dar colesterolul n exces n snge crete riscul pentru infarctele miocardice i accidentele vasculare cerebrale. [11] Colesterolul este procurat din alimentele consumate i din sinteza lui de ctre ficat. Ficatul este cel care sintetizeaz cea mai mare parte din colesterolul de care are nevoie organismul uman:

nivelul sangvin de colesterol adecvat este de 200mg/dl nivelul sangvin de colesterol la limit este ntre 200-239 mg/dl nivelul sangvin de colesterol crescut este peste 240 mg/dl

Hipercolesterolemia este dat de prezena n exces a colesterolului "ru" n organismul uman. Colesterolul (C27H45OH) este un sterol, fiind identificat n membrana celular dar i n esuturile organismului, fiind i transportat n snge. Termenul provine din grecescul chole (bil) i stereos (solis) plus sufixul ol, fiind identificat n calculii colesterolici n anul 1784. De regul el nu se ingereaz prin alimentaie, ci se transform n interiorul oragnismului animal, la nivelul ficatului, mduvei spinrii, a creierului, dar i la nivelul plcii de aterom care conduce la ateroscleroz. El are un rol important n organism, numeroase procese biochimice avnd-ul drept precursor, ns de regul atunci cnd se ntlnete termenul de colesterol se face asocierea cu afeciunile cardiace i cu nivelurile mari de colesterol sanguine. Termenul de colesterol sanguin se refer de fapt la 2 tipuri de lipide: LDL (low density lipoproteine) lipoproteine cu densitate mic aa numitul colesterol ru HDL (high density lipoproteine) lipoproteine cu densitate mare Colesterolul este necesar pentru: 24

Biochimie, pentru studenii anului I - STEROLII mentinerea integritii celulare reglarea vscozitii fluidelor celulare (snge ) datorit gruprii hidroxil interacioneaz cu restul fosfat al membranei celulare, iar steroizii cu molecul mare i lanul hidrocarburic sunt introduse n membran. sinteza bilei (acizi biliari) metabolismul vitaminelor liposolubile: vitamina A, D, K E; este precursor major al vitaminei D. precursor al reaciilor de sintez a - Hormonilor steroidici (cortisol i aldosteron n glandele suprarenale) - Hormonilor sexuali progesteron, estrogen i testosteron mai are rol att la nivelul sinapselor cerebrale ct i n sistemul imunitar, inclusiv mpotriva cancerului. Recent colesterolul a facut obiectul unui studiu desfurat n 2001 de Haines, experiment care a scos la iveal faptul c ar reduce permeabilitatea pentru ionii de sodiu i a protonilor.[11] Colesterolul este aprope insolubil n ap, din aceast cauz transportul su se realizeaz prin intermediul lipoproteinelor (asa numite crui ai colsterolului), care sunt hidrosolubile i transport colesterolul i grsimile n interioriul organismului. Proteinele formate la suprafaa particulelor lipoproteice determin zona de unde colseterolul va fi extras i unde va fi transportat. Prima cale de transport o constituie chilomicronii, nite lipoproteine mari care, ncrcate cu trigliceride i colesterol de la nivelul mucoasei intestinale, se ndreapt ctre ficat. Aici are loc conversia trigliceridelor i a colesterolului n LDL, proteine care transport mai departe trigliceridele i colesterolul ctre alte celule ale corpului. La persoanele sntoase LDL sunt n numr mic, n timp numrul crescut al LDL este asociat cu incipiena ateromatozei arteriale.[11] Nivelurile de LDL sunt considerate n felul urmtor: - optim - mai mic de 100 mg/dl - aproximativ optim - ntre 100-129 mg/dl - la limit - 130-159 mg/dl - ridicat - 160-189 mg/dl - foarte ridicat - 190 i mai mult de 190 mg/dl.[11] 25

Biochimie, pentru studenii anului I - STEROLII Lipoproteinele cu densitate ridicat (HDL) ajut la eliminarea colesterolului ru din snge i prevenirea aterosclerozei. HDL este tipul bun de colesterol. Nivelurile ridicate de HDL (60 sau peste 60 mg/dl) protejeaz mpotriva infarctelor miocardice.[11] HDL sunt particule de transport a colesterolului napoi la ficat pentru excreie, dar sunt numeroase semne de ntrebare asupra capacitii lor de a efectua acest transport. Numrul lor mare este un semn de sntate a organismului, iar numrul lor sczut indic o accentuare a plcii ateromatoase la nivelul arterelor. De asemenea, concentraia lor nu indic i numrul de HDL aflate n organism, la fel cum se ntmpl i n cazul LDL, acest lucru influennd n mod negativ testele de laborator.[11] Nivelurile de HDL sunt considerate n felul urmtor: - dorit sau crescut 60 mg/dl sau mai mult - nedorit sau sczut mai puin de 40 mg/dl Trigliceridele sunt un alt tip de grsime din snge. n cazul n care sunt crescute att nivelurile sangvine de trigliceride ct i de LDL, ansele unui infarct miocardic sunt mai mari. Nivelurile de trigliceride sunt considerate n felul urmtor: - la limit 150-199 mg/dl - ridicat 200 mg/dl i mai mult - foarte ridicat 500 mg/dl i mai mult.[11] CONCLUZII Pe parcursul documentrii acestei lucrri am constatat c tema prezint un real inters n domeniul n care ne pregtim. Utilizarea cu precauie a medicamentelor antifungistatice, a sterolilor n controlul colesterolului sau a fungicidelor IBS constituie o cheie important pentru mbuntirea vieii fr a conturba echilibrele stabilite n mediul care ne nconjoar. Dup ce am parcurs etapele lucrrii i am cumulat datele culese, concluzia c acest domeniu merit n continuare studiat este mai mult dect evident. Ne-a captat n mod deosebit folosirea fungicidelor inhibitori ai biosintezei sterolilor i impactul acestora asupra vinificaiei. Acest domeniu a fost inta celor mai vaste cercetri n

26

Biochimie, pentru studenii anului I - STEROLII ultimii ani, dar motivele economice - productorii de pesticide trebuie s i vnd marfa - au fcut posibil existena unor lacune n publicitatea acestor descoperiri. Oamenii de tiin ns, nu s-au dat btui. Aa a fost posibil descoperirea strobilurinelor, o clas de substane de sintez care imit modul de aciune al unei ciuperci fitoparazite, care penetreaz n frunze substituind ciuperca parazit i mpiedicnd nmulirea acesteia. Noile produse biologice au fost incluse n IPM - Integrated Pest Management schemele de combatere integrat a bolilor i duntorilor i s-a deschis un nou orizont de cercetare. Sperm ca, prin contribuia noastr, s adugm o pietricic la dominoul tiinei.

BIBLIOGRAFIE 1. Ianculov, I. - Biochimie vegetal, Timioara, suport de curs ID 2. Neamu, G.; Popescu, Ionela; Lazr, t.; Burnea, I.; Brad, I.; Cmpeanu, Gh.; Galben, T. Chimie i Biochimie vegetal, Editura didactic i pedagogic, Bucureti, 1983 3. Curierul, Revista Bayer CropScience pentru o agricultur modern, nr. 1, 2006 4. Heizer, Mirela, Cercetri asupra biologiei, ecologiei i combaterii integrate a pianjenului rou comun (Tetranychus urticae Koch) la via de vie cultivat n zona viticol Mini - Mderat, tez de doctorat, USAMVB Timioara, 2003 5. http://www.cnaa.md/files/theses/2009/13723/elena_molodoi_thesis.pdf, 09.12.2009 6. http://ro.wikipedia.org/wiki/Sterol, 07.12.2009 7. http://www.iwostin.ro/dict.php?mode=view&id=745, 07.12.2009 8. http://doctor.info.ro/steroli_si_steroizi.html, dr. erban Damian, 07.12.2009 9. http://ebooks.unibuc.ro/biologie/Drojdiile/capitol6.doc, 08.12.2009 10. http://lumene.ro/index.php?l=ro&t=36, 08.12.2009 11. http://www.naturist-life.ro/forum/viewtopic.php?p=218, 08.12.2009 12. http://www.srd.ro/categorie/revista/romana/sumare-2008/sumare-4-2008/322/docs/9.%20 Consultatii%20privind%20rezistenta.pdf, DermatoVenerol.(Buc)53:259-276, 09.12.2009

27