0

Bebu Andreea Mihaela

Investigaii structurale asupra unor compui moleculari de interes biologic

Rezumatul Tezei de Doctorat

Conductor tiinific
Prof. dr. David Leontin




Cluj-Napoca
2012




UNIVERSITATEA BABE-BOLYAI

FACULTATEA DE FIZIC

1

CUPRINS
INTRODUCERE..............................................................................................................8

1. COMPLECI METALICI DE INTERES BIOLOGIC...............................................15

1.1 Activitatea biologic a metalelor.......................................................................16

1.2 Activitatea biologic a complecilor metalici cu liganzi de interes biologic....19

2. METODE EXPERIMENTALE DE INVESTIGARE A COMPLECILOR
MOLECULARI...........................................................................................................22

2.1 Analiza chimic elemental................................................................................22

2.2 Absorbie atomic de mas.................................................................................25

2.3 Analiza termogravimetric (TG)........................................................................26

2.4 Analiza calorimetric diferenial (DSC)...........................................................27

2.5 Spectroscopie electronic...................................................................................30

2.6 Spectroscopie n infrarou cu transformat Fourier (FT-IR)............36

2.7 Rezonana electronic de spin (RES)................................................................40

2.8 Introducere n tehnicile spectroscopice vibraionale Raman.............................46

3.COMPLECI METALICI CU FENILALANIN CA I LIGAND..........................61

3.1 Introducere.........................................................................................................61

3.2 Sinteza unor compleci metalici cu fenilalanin................................................62

3.3 Metode de investigare a complecilor metalici..................................................64

3.4 Concluzii pariale...............................................................................................75

4. STUDII SPECTROSCOPICE I TEORETICE ASUPRA MOLECULEI DE
AMOXICILIN...............................................................................................................77

4.1 Introducere...................................................................................................................77

4.2 Metode computaionale de investigare a structurii moleculare....................................78

4.3 Rezultate i discuii.......................................................................................................80

4.4 Concluzii pariale..........................................................................................................90

2

Concluzii............................................................................................................................91

Bibliografie........................................................................................................................94



Cuvinte cheie: DFT, FT-IR, FT-Raman, SERS, UV-Vis, Amoxicillin, Phenylalanina
















3

Introducere

Ionii metalici ndeplinesc n organismele vii anumite funcii importante sau au asupra
acestora diferite aciuni. n general, ionii metalici se gsesc n organismele vii sau acioneaz
n cadrul acestora sub form de compleci sau prin formare de compleci, de regul chelai, n
care ionul generator de complex este implicat n formarea unor cicluri chelate. Participarea
ionilor metalici la procesele biologice const n contribuia lor la formarea i ruperea
legturilor chimice, la transferul de sarcin i de oxigen, la fixarea azotului, n fotosintez, la
meninerea balanei osmotice n sistemele multifazice i la reaciile enzimatice.
Principalele metode spectroscopice folosite pentru determinarea modurilor
vibraionale n molecule se bazeaz pe procesele de absorbie infraroie i de mprtiere
Raman.
Cele mai uzuale tehnici de a investiga structura energetic vibraional sunt
spectroscopia de absorbie IR i mprtierea Raman. n absorbia IR substana este iradiat
cu un spectru larg de frecvene din domeniul spectral IR mijlociu, n urma interaciunii cu
moleculele fiind absorbii fotoni ai cror energie corespunde diferenei dintre dou nivele
energetice vibraionale. n cazul mprtierii Raman este folosit radiaie monocromatic, o
surs laser, fotonii suferind ciocniri elastice i neelastice cu moleculele. n spectroscopia
Raman sunt analizate lungimile de und ale fotonilor mprtiai neelastic, acetia oferind
informaii legate de modurile de vibraie ale moleculelor.
Aceste metode se folosesc cu precdere pentru obinerea de informaii despre
structura chimic i forma fizic, pentru identificarea substanelor cu ajutorul spectrelor
caracteristice precum i pentru determinrile cantitative i semicantitative dintr-un eantion
de substan. De asemenea spectroscopia n domeniul infrarou (IR) este o metod potrivit
de identificare a prezenei gruprilor funcionale din structura moleculelor compuilor
organici
Spectroscopia poate fi mprit n mai multe ramuri, n funcie de lungimea de und a
radiaiei electromagnetice din spectrul considerat. Astfel, avem spectroscopie de microunde,
infrarou, vizibil i ultraviolet. n funcie de tipul tranziiei implicate n procesul de emisie
sau absorbie vorbim despre spectroscopie de rotaie, vibraie, electronic i de ionizare.
Exist un tip de spectru care nu implic nici proces de absorbie, nici de emisie. Este vorba
4

despre spectroscopia Raman care studiaz radiaia mprtiat (difuzat) de prob. Sursa
radiaiei poate fi n vizibil, ultraviolet apropiat sau infrarou apropiat.
Efectul SERS a fost accidental descoperit n 1974 n timp ce cercettorii ncercau s
obin semnal Raman pe electrod. Ideea iniial era generarea unei suprafee mari pe un metal
ruguos. Gradual cercettorii au realizat c aria de suprafa nu este punctul cheie n acest
fenomen. Dup o perioad de cutri, progresul a avut loc n 1977 cnd dou grupuri de
cercettori au descoperit c electrodul de argint brut produce un spectru Raman care este de
un milion de ori mai intens dect spectrul Raman normal. Acest semnal enorm de puternic a
debutat cu mprtierea Raman amplificat de suprafa (SERS). n prezent, SERS depete
complet dezavantajul seciunii de mprtiere mici a spectroscopiei Raman, i poate fi folosit
chiar i pentru a obine semnal Raman de la o singur molecul.

1.COMPLECI METALICI DE INTERES BIOLOGIC


Dezvoltarea actual a tiinei i tehnicii se bazeaz n cea mai mare msur pe
posibilitatea obinerii de materiale variate, cu proprieti predestinate care s rspund
diverselor scopuri practice. Aceast posibilitate se bazeaz n special pe corelarea dintre
sinteza i proprietile fizico-chimice ale materialelor.
Analiza structural urmrete formarea unei imagini corecte asupra materiei, n
general, i a substanei, n special, printr-o prezentare unitar a parametrilor structurali care
caracterizeaz substanele chimice, prin indicarea metodelor fizice utilizate n investigarea
structurii substanelor i prin prezentarea legturilor logice dintre parametrii fizici analizai i
metodele de investigare folosite.
Legtura dintre proprietile fizice i chimice ale substanelor i structura lor decurge
din modul i cauzele pentru care substanele interacioneaz ntre ele, precum i cu cmpurile
de radiaii, pe baza structurii atomilor, moleculelor i cristalelor din care sunt formate [1].
Studiul substanelor impune determinarea proprietilor fizice (nsuiri msurabile i
exprimabile numeric), a proprietilor chimice (sau a reaciilor chimice), a compoziiei
calitative i cantitative (natura i proporia elementelor) i a structurii, adic modul de
aranjare al elementelor structurale componente unele fa de altele i anume moleculele,
atomii i ionii.

5

3.COMPLECI METALICI CU FENILALANIN CA I LIGAND

3.1 Introducere
n ultimii ani importana ionilor metalici pentru buna funcionare a organismelor
animale i vegetale, a fost evideniat prin publicarea a numeroase lucrri n domeniul
biofizicii i biochimiei. Ultimele cercetri din aceste domenii se axeaz pe sinteza i
caracterizarea compuilor biologici ce conin ioni metalici, datorit aplicabilitii acestora n
farmacie, medicin, agronomie i nutriie [1].
Procesele biologice implic compui formai de diferitele elemente ale sistemului
periodic cu substratul biologic. Organismele animale i vegetale sunt constituite din substane
chimice cu o compoziie complex, fiind formate att din metale ct i din nemetale.
Elementele chimice care intr n componena materiei vii sunt selectate de ctre natur, dup
anumite principii care nu sunt nc bine elucidate, dar se poate afirma cu certitudine, c
rspndirea lor n mediu, nu este elementul hotrtor.
Complexitatea i diversitatea peptidelor i proteinelor se datoreaz att numrului
mare de alternative de legare a unui numr mic de - aminoacizi n vederea formrii lor, ct
i unor particulariti de conformaie i configuraie a moleculelor acestora. Ele sunt generate
de alternana elementelor rigid plane (legtura poliamidic conjugat) din structur cu
elemente de mobilitate (atomi de carbon hibridizai sp
3
) capabile s genereze chiralitate de
ax. n plus, posibilitatea stabilirii unor legturi (van der Waals, de hidrogen, dipol-dipol,
inducie, dispersie inter i intramoleculare) conduc la stabilizarea unor conformaii ca entiti
bine individualizate.
Alfa aminoacizii formeaz cu metalele tranziionale compleci interni sau chelai
colorai, foarte greu solubili i stabili. Metalele divalente cum sunt: Mn(II), Cu(II) i Ni(II)
pot forma compui coordinativi n care metalul leag dou molecule de aminoacid prin azot i
oxigen realiznd frecvent un numr de coordinare 4 i o configuraie plan-ptrat sau
pseudotetraedrala. Metalele trivalente de tipul Fe(III), Co(III) pot forma sruri complexe cu
trei molecule de aminoacid n care metalul realizeaz numrul de coordinare 6.
3.2 Sinteza unor compleci metalici cu aminoacizi
Sinteza compuilor coordinativi ai metalelor cu Cu(II), Co(II) i Zn(II) cu fenilalanina
are loc n trei etape:
6

a) prepararea soluiei de sare de metal;
b) prepararea soluiei de ligand;
c) sinteza propriu-zis i purificarea compuilor obinui;
Metoda de sintez pe care am ales-o, se bazeaz pe cea propus de Lancashire [104],
i urmrete obinerea unor compleci neutri de tip ML
2
nH
2
O, la un pH ntre 8 i 10, cnd n
prezena unei baze tari se pot realiza condiiile de ionizare ale aminoacidului.

3.2.1 Sinteza complecilor de cupru
Se cntresc 2 mmol de aminoacid (0.320 g L i 0.262g L) i se dizolv ntr-un
volum minim de ap distilat (max.5ml). Se calculeaz volumul de NaOH 6M necesar pentru
a nlocui un proton din fiecare mol de aminoacid (0.33ml) i se adaug n picturi peste
soluia de aminoacid. Se cntrete cantitatea echivalent unui mmol de sare cupric. Dac se
utilizeaz azotat cupric, Cu(NO
3
)
2
3H
2
O, se cntresc 0.241g i se dizolv n 2 ml ap
distilat. Se adaug apoi soluia de sare cupric peste soluia de aminoacid i se agit timp de
cteva minute cu agitatorul magnetic. Precipitatul se filtreaz, se spal cu etanol i se las la
temperatura camerei pentru uscare, dup care se pstreaz n recipiente nchise n vederea
efecturii analizelor necesare.
Tabelul 1.3 Compleci de Cu(II) cu fenilalanin

3.2.2 Sinteza complecilor de cobalt
Se cntresc 2 mmoli de aminoacid (0.330 g L

i 0.286 g L) i se dizolv ntr-un
volum minim de ap distilat (max.5ml). Se calculeaz volumul de NaOH 6M necesar pentru
a nlocui un proton din fiecare mol de aminoacid (0.33ml) i se adaug n picturi peste
soluia de aminoacid. Se cntresc 0.238 sare de cobalt

i se dizolv n 2 ml ap distilat. Se
adaug apoi peste soluia de aminoacid i se agit timp de cteva minute pe agitatorul
magnetic. Precipitatul obinut n cazul complexului Co-L

se filtreaz, se spal cu etanol i se
Compus Simbol Culoare Randament Punct de
topire
Cu(fenilalanina)
2
H
2
O Cu-L

Albastru verzui 98.6% 220
0
C
7

las la temperatura camerei pentru uscare, dup care se pstreaz n recipiente nchise n
vederea efecturii analizelor necesare.

Tabelul 2.3 Compleci de Co(II) cu fenilalanina
Compus Simbol Culoare Randament Punct de
topire
Co(fenilalanina)
2
2H
2
O Co-L

Mov-deschis 54.4% 255
0
C

3.2.3 Sinteza complecilor de zinc
Se cntresc 2 mmoli de aminoacid (0.320 g L

i 0.286 g L) i se dizolv n ap
distilat cald(5ml). Se calculeaz volumul de NaOH 6M necesar pentru a nlocui un proton
din fiecare mol de aminoacid (0.33ml) i se adaug n picturi peste soluia de aminoacid. Se
cntrete cantitatea echivalent unui mmol de sare de zinc ZnSO
4
.7H
2
O (0.287g) i se
dizolva n ap distilat, se adaug apoi peste soluia de aminoacid i se agit timp de cteva
minute pe agitatorul magnetic.
Precipitatul se filtreaz, se spal cu etanol i se las la temperatura camerei pentru
uscare, dup care se pstreaz in recipiente nchise n vederea efecturii analizelor necesare.

Tabel 3.3. Compleci ai Zn cu fenilalanina
Compus Simbol Culoare Randament Punct de topire
Zn(fenilalanina)
2
H
2
O Zn-L

Alb-amorf 94.4% 175
0
C

3.3 Metode de investigare a complecilor metalici
Aceast parte a lucrrii conine capitole de sintez i pregtire a probelor pentru
analiz, precum i diferite metode fizico-chimice, termice i spectroscopice de investigare a
complecilor metalici n vederea determinrii:
o Modul de coordinare al ionului metalic cu liganzii
8

o Schimbarea structurii locale n funcie de ligand
o Schimbarea simetriei locale n jurul ionilor paramagnetici
o Prezena speciilor dimerice
o
Etapele parcurse pn la ora actual pot fi rezumate astfel:
Sinteze


Stabilirea condiiilor de sintez pentru obinerea compuilor
metalici cu diferii aminoacizi ca i liganzi
Caracterizarea
compuilor
de interes biologic
Analiza chimic elementar
Spectroscopie de absorbie atomic
Analiz termic
- Analiza termogravimetric
- Analiza termica diferenial
Studiul spectrelor n domeniul IR
Studiul spectrelor n Ultraviolet (UV) i Vizibil
Studiul spectrelor prin Rezonanta Electronic de Spin (RES)

Dispozitivele experimentale:
Analiza elemental a fost realizat cu ajutorul unui dispozitiv Vario El care permite
determinarea cantitativ a carbonului, azotului, hidrigenului, sulfului i oxigenului n diferite
modaliti de operare CHN, CNS, CN, CHSN, CHNSO.
Msurtorile de absorbtie atomic de mas au fost realizate cu un dispozitiv AAS-1
la lungimea de und = 320 nm. Probele au fost preparate dup cum urmeaz :
- s-a cntrit o cantitate de 0,02g de complex, care a fost dizolvat n civa mililitri de
ap distilat. Au fost adugati 5 ml HCl 35% pentru descompunerea complexului.
Soluia a fost completat pn la 100 ml cu ap distilat, diluia soluiei fiind de 1:2.
Spectrele n ultraviolet i vizibil au fost nregistrate cu un spectrofotometru Jasco- V-530
la lungimi de und cuprinse ntre 190 si 800 nm.
Comportarea termic a complecilor de cupru a fost determinat prin nregistrarea
curbelor de termoliz cu un Derivatograf Q-1500D, n domeniul de temperatur 20
0
C-500
0
C,
9

cu o vitez de nclzire constant de 10
0
C/minut. Probele considerate au avut mase cuprinse
ntre 100-300mg.
Analizele calorimetrice difereniale (DSC) au fost realizate cu un dispozitiv Metler-
Toledo, utiliznd creuzete de aluminiu care conineau probele de investigat a cror mase au
fost cuprinse ntre 1 i 2.5 mg. Msuratorile au avut loc n intervalul 20 -500
0
C, viteza de
ncalzire fiind de 10
0
C/minut.
Spectrele electronice au fost determinate cu un spectrofotometru Jasco V-530, cu lungimi
de und cuprinse ntre 190-800nm. n cazul liganzilor, s-au preparat soluii de concentraii 10
-
4
M prin dizolvarea acestora n ap bidistilat. Au fost preparate soluii cu concentraii 10
-3
M
de compleci prin dizolvarea acestora n ap, metanol sau etanol, n funcie de solubilitatea
fiecruia n aceti solveni. Unele situaii au necesitat diluare, pentru a putea fi vizualizate
mai bine tranziiile din domeniul UV, caracteristice liganzilor. nregistrarea spectrelor n
domeniul infrarosu a fost facut cu ajutorul unui spectrofotometru Perkin-Elmer FTIR 1730
pe pastile de KBr n intervalul 4000-400 cm
-1
.
Spectrele de rezonan electronic de spin au fost nregistrate cu un spectrometru standard
ADANI Portable EPR spectrometer PS8400 la 9.56 GHz pe probe solide sau n soluii
apoase, la temperatura camerei.
3.3.1 Investigarea complecilor metalici cu fenilalanin ca i ligand
Fenilalanina (L) (C
6
H
5
CH
2
CHNH
2
COOH) este un aminoacid aromatic esenial, care
conine un inel benzenic, deci este hidrofobic. Organismul uman transform fenilalanina n
tirozin, un alt aminoacid esenial pentru buna funcionare a creierului, hormonilor tiroidieni,
etc. Deficitul de fenilalanin provoac confuzie, lipsa energiei, capacitate de memorare
redus i pofta de mncare sczut [45]. Exist o boal metabolic, numit fenilcetonurie care
este o boala genetic n care lipsete enzima fenilalaninhidroxilaz sau are un nivel foarte
sczut n snge (PAH). Aceast enzim este necesar pentru convertirea fenilalaninei n alt
aminoacid numit tirozin. Dac PKU nu se trateaz imediat dup natere fenilalanina se
acumuleaz n snge i n esutul cerebral ducnd la retard psihic i afectarea sistemului
nervos central.


Fig.6.3 Formula structural a fenilalaninei
10

3.3.1.1 Analiza chimic elemental i absorbie atomic de mas
Rezultatele analizei elementale i ale absorbiei atomice de mas confirm compoziia 1 :
2 metal : fenilalanin. Datele obinute sunt prezentate n tabelul 4.3.
Tabel 4.3 Rezultatele analizei elementale pentru complecii sintetizai









3.3.1.2 Analiza termogravimetric
Derivatograma complexului de cupru cu fenilalanin (Fig. 7.5) prezint un palier
orizontal pn la 170
0
C, cnd apare un efect endoterm corespunztor unei pierderi masive de
mas de 80.5% (83.7 % teoretic), indicnd ruperea moleculelor de aminoacid. Dup 250
0
C
curba de termoliz prezint o scdere constant, indicnd formarea reziduului de CuO, pentru
care pierderea de mas de pe derivatogram este de 19.5%, iar cea teoretic este de 19.25%.
Descompunerea complexului se face ntr-un interval mic de temperatur, ncepnd de la 350
0
C [46-48].




Complex Greutate
Molec.
% Experimental / calculat
C H N Metal
Cu(L)
2
H
2
O 407.92 53.40
(53.00)
4.72
(4.94)
7.00
(6.86)
15.82
(15.57)
Co(L)
2
2H
2
O 389.4 51.42
(55.46)
8.59
(8.2)
8.28
(7.59)
20.41
(19.17)
Zn(L)
2
H
2
O 395 51.85
(54.69)
9.07
(8.10)
6.57
(7.08)
14.52
(15.25)
11

Tabel 5.3 Rezultatele analizei termogravimetrice








Fig. 7.3 Termograma complexului Cu-L [170]
3.3.1.3 Analiza termic diferenial
n figura de mai sus (Fig.8.5.a) este prezentat curba DSC a standardului de
fenilalanin (L), care prezint ntr-o prim etap o tranziie sticloas, care este un proces
endoterm cu un maxim la 170
0
C [109].
Topirea fenilalaninei are loc cu descompunere, ntre 220
0
C i 260
0
C, cu un maxim
endotermic la 240
0
C, iar arderea complet are loc dup 450
0
C.
Complex Peak
DTG (
0
C)
Pierderea de masa
TG (%)
Atribuirea
Endo Exo Endo Exo
[Cu(L)
2
] H
2
O 105
255
-
-

-
-
320
470

4.39
-
44.46
35.64
15.50
4.45
-
44.52
35.15
15.86
O molecul de ap de
cristalizare
Punct de topire
Rest oganic 2C
7
H
7
2C
2
H
3
NO
2

Reziduu CuO
12















Fig. 8.3 Curbele DSC ale L (a), Cu-L(b), Co-L (c) i Zn-L (d)

Complexul de Cu-L

sufer ntre 100 i 180
0
C un proces de tranziie sticloas urmat
de un proces de descompunere endoterm n dou trepte succesive cu maximele la 230
0
C i
250
0
C. Acest proces se datoreaz formarii unui proces de degradare intermediar. La 300
0
C
este evideniat maximul procesului exoterm de cristalizare, urmat la 450
0
C de piroliza
complexului de cupru [49].
Complexul Zn-L (Fig.8.5.d) are o stabilitate termic mai bun dect ligandul
corespunztor i complexul de cupru. Curba DSC a acestui complex prezint un proces de
topire cu decompunere ntre 295
0
C i 320
0
C urmat de arderea complet dup 450
0
C.


13

3.3.1.4 Spectroscopie FT-IR
Spectrul FT-IR al fenilalaninei (L) (Fig.6.3.a) prezint banda caracteristic vibraiei
de ntindere a legturii N-H, despicat n dou semnale la 3078 cm
-1
, respectiv 3030 cm
-1
.
Aceast band este deplasat la 3320 cm
-1
, respectiv 3256 cm
-1
n spectrul complexului Cu-L,
ceea ce dovedete implicarea gruprii aminice la formarea complexului. n cazului
complecilor de cobalt i zinc aceast band este deplasat la 3220 cm
-1
i 3334 cm
-1
,
respectiv 3256 cm
-1
sugernd de asemenea implicarea gruprii aminice la formarea acestor
compleci [46,50].
Vibraiile de deformare ale gruprii (N-H) apar la 1557 cm
-1
n spectrul ligandului i
sunt deplasate la 1567 cm
-1
pentru Cu-L, 1586 cm
-1

pentru Co-L respectiv 1561 cm
-1
pentru
Zn-L ceea ce explic de asemenea implicarea acestei grupri la formarea legturii cu
metalul [51].
Vibraia de ntindere a (C=O), de care suntem interesai n mod special, apare n
cazul ligandului la 1623 cm
-1
, i este deplasat cu 4 cm
-1
(pentru Cu-L), respectiv 9 cm
-1

(pentru Zn-L) ceea ce demonstreaz implicarea gruprii carboxil la formarea legturii
covalente cu ionul metalic. n cazul complexului de cobalt banda caracteristic (C=O) apare
la 1633 cm
-1
i nu este bine rezolvat , prezena acestei benzi poate fi atribuit formrii
legturii de hidrogen ntre gruprile carboxil i ap sau implicrii n coordinare.
Conform literaturii [52] la 603 cm
-1
i 468 cm
-1
ar trebui s apar benzile
corespunzatoare (COO
-
) aceste benzi neaprnd n spectrul complecilor, ceea ce indic
legarea ionului metalic de gruparea carboxilic, din pacate n spectrele de mai jos nu pot fi
vizualizate aceste benzi daorit limitrii spectrofometrului.
Deoarece structura fenilalaninei are un ciclu benzenic, n spectrul IR vibraiile de
ntindere ale ciclului trebuie s se regseasc n dou domenii de frecvene, la 745 cm
-1
i
1495 cm
-1
. n cazul complecilor metalici avnd ca ligand fenilalanina, benzile caracteristice
ciclului aromatic sunt deplasate nesemnificativ sau deloc.
Banda caracteristic (O-H) apare n spectrul complecilor la 3454 cm
-1
, respectiv
3453 cm
-1
i 3359 cm
-1
ceea ce indic prezena unor molecule de ap de cristalizare [53].


14







Fig.6.3 Spectrul FT-IR al L (a), Cu-L(b), Co-L (c) i Zn-L (d)
Tabel 6.3 Datele spectrale FT-IR (cm
-1
)










3.3.1.5 Spectroscopie UV-VIS
Fenilalanina face parte din categoria aminoacizlor aromatici, alturi de treonin i
tirozin, acesti trei aminoacizi sunt responsabili de proprietile fluorescente ale proteinelor.
Aminoacizii aromatici absorb lumina n apropierea regiunii UV 250-300 nm astfel: treonina
la 280 nm, tirozina la 274 nm i fenilalanina la 257 nm. Absorbtivitatea molar a triptofanului
(N-H) (C=O) (N-H) (O-H ) Compus
3078
3030
1623 1557 - L
3320
3256
1629 1567 3454 Cu- L
3220 1633 1586 3453
3359
Co- L
3334
3256
1614 1561 - Zn- L
15

este de cinci ori mai mare dect a tirozinei i de 50 de ori mai mare dect cea a fenilalaninei
[54].
Este important s menionam c absorbia proteinelor, din intervalul 275-280 nm, se
datoreaz aproape n ntregime acestor trei aminoacizi. n cazul fenilalaninei din studiul
nostru se observ c aceasta prezint la 231 nm o band datorat tranziiei n *
caracteristic gruprii C=O. Aceasta este deplasat n spectrul complecilor la 225 nm (Cu-
L), 235 nm (Co-L) respectiv la 220 nm (Zn-L) confirmnd prezena ligandului n complex i
natura covelent a legturii [55-57].
n spectrul UV (Fig.7.5.a) al fenilalaninei, banda caracteristic tranziiei * apare
la 260 nm i este deplasat n spectrul complecilor cu 15 nm (Cu-L), 20 nm (Co-L) respectiv
7 nm (Zn-L) i este atribuit sistemelor conjugate. n domeniul vizibil ns, spectrul
complexului de cupru prezint la 615 nm banda corespunztoare tranziiei
2
T
2g

2
E
g

specific pentru complecii de cupru cu o simetrie tetragonal distorsionat datorat efectului
Jahn-Teller.Complexul de cobalt prezint n domeniul vizibil o band la 540 nm, care a fost
atribuit tranziie
4
T
1g
(P)
4
T
1g
(F) [58].



Fig. 7.3 Spectrul UV al L (a) i Cu-L(b)





Fig. 8.3 Spectrul VIS al complexului Cu-L n DMF
16

3.3.1.6 Rezonana electronic de spin
Spectrul complexului de cupru (Fig.9.3.a ) realizat la temperatura camerei, pe pulberi
policristaline, este tipic speciilor monomerice pseudotetraedrale. Valorile tensorilor
giromagnetici :g
II
= 2.197, g

= 2.209 corespund unui cromofor CuN

2
O
2.
Spectrul RES al soluiei complexului de Cu-fenilalanina (DMF 10 mg complex/ 0.5
ml DMF) (Fig.9.5.b) conine liniile caracteristice structurii hiperfine izotrope (g
0
= 2.124, A
0
=
82 G) [46,55,56]. Spectrul soluiei este izotrop, observndu-se rezolvarea celor patru semnale
corespunztoare interaciunii hiperfine ntre electronul paramagnetic i nucleul ionului
metalic (I
Cu
= 3/2). Valorile lui A
0
precum i forma specific spectrelor corespund unei
simetrii pseudotetraedrale n jurul ionului metalic [57].
n cazul complexului de cobalt am obinut spectrul RES la temperatura camerei, care
relev prezena unui compus monomeric (g = 2.195), cu simetrie octaedric n jurul ionului
de cobalt.





Fig.9.3 Spectrul RES al complexului 1 sub form de pudr (a) i n DMF (b)
3.3.1.7 Structurile propuse
Au fost sintetizai trei compleci metalici n soluie apoas [Cu(L)
2
] H
2
O, [Cu(L)
2
]
2H
2
O i [Cu(L)
2
] H
2
O i investigai prin metode fizico-chimice, spectroscopice i termice.
Conform datelor obinute putem propune formulele acestor trei compleci, care sunt
prezentai n figura 10.5. Dup cum se observ, complecii de cupru i zinc prezint o
nconjurare pseudotetraedric n jurul ionului metalic, iar complexul de coblt are o simetrie
octaedral n jurul ionului de cobalt.
17


Fig. 10.3 Formulele structurale propuse pentru complecii de fenilalanin
3.4 Concluzii pariale
n aceasta parte a lucrrii s-a studiat capacitatea coordinativ aminoacizilor fa de
unii ioni ai metalelor tranziionale 3d. Au fost sintetizai noi compleci metalici:
[Cu(L)
2
]H
2
O, [Co(L)
2
]2H
2
O i [Zn(L)
2
]H
2
O cu fenilalanin i caracterizai prin metode
fizico-chimice: analiza elemental, spectroscopie de absorbie de mas, termice: analiza
termogravimetric i analiza calorimetric diferenial i spectroscopice : spectroscopie IR,
UV-VIS i RES.
Prepararea complecilor metal-aminoacid 1:2 se bazeaz pe sinteza acestora ntr-un
mediu alcalin i deprotonarea gruprilor carboxil din moleculele liganzilor pentru stabilirea
legturilor covalente i coordinative cu ionul metalic.
Un simplu anion de aminoacid reprezint un potenial ligand bidentat, care poate
coordina la un ion al unui metal de tranziie prin intermediul gruprilor carboxilice i aminice
capabile s doneze electroni, formnd o structur de inel heterociclic.
Analiza elementar i msurtorile de absorbie atomic de mas confirm
stoichiometria rezultnd compleci metalici de tipul [M(L)
2
]XH
2
O (M= Cu(II), Co(II) i
Zn(II) iar X= 1 pentru Cu i Zn i X=2 pentru Co ).
Comportarea termic a complecilor studiai este asemntoare, pornind de la
scderea n greutate prin eliminarea apei de cristalizare, descompunerea complexului n una
sau mai multe etape i formarea oxidului metalic. Procesele care nsoesc pierderile de
molecule de ap de cristalizare sau descompunerea complecilor sunt endoterme, iar cele care
apar la rearanjrii n molecul, formri de noi legturi sau arderi, sunt efecte exoterme.
Prin compararea spectrelor IR ale ligandului cu ale compuilor sintetizai am stabilit
modul de coordinare la centrii metalici, i anume prin atomul de azot din gruparea amino i
prin atomul de oxigen al gruprii carboxil. Deasemenea, analiza benzilor de vibraie de la
aproximativ 3600 cm
-1
a permis stabilirea numrului de molecule de ap care coordineaz la
18

centrul metalic. Au fost identificate i atribuite principalele benzi de vibraie ale unor grupri
moleculare semnificative. Spectrele IR arat caracterul bidentat al ligandului i permit
stabilirea unei geometrii locale pseudotetraedrale n cazul ionilor de Cu(II) si Zn (II) i a
uneia octaedrale n cazul complecilor de Co(II) sintetizai.
Conform datelor termice i a celor obinute din spectroscopiile n ultraviolet i vizibil
putem afirma c simetria local octaedral n cazul ionilor de Co(II) se realizeaz prin
coordinare n poziie axial a dou molecule de ap.
Spectrele RES nregistrate pe pulberi ale complecilor confirm legturile covalente
metal-ligand formate, geometria local pseudotetraedral n jurul ionului metalic de Cu(II) si
Zn(II) i respectiv octaedral pentru ionii de Co(II).

4. STUDII SPECTROSCOPICE I TEORETICE ASUPRA MOLECULEI
DE AMOXICILIN
n aceast capitol sunt raportate studii experimentale i teoretice privind
amoxicilina.Vibraiile moleculare ale amoxicilinei au fost investigate prin FT-IR, FT-Raman
i spectroscopii SERS. n paralel, calcule chimice cuantice bazate pe teoria densitii
funcionale (DFT) sunt utilizate pentru a determina caracteristicile geometrice, energetice i
vibraionale ale moleculei, cu un accent deosebit pus pe interaciunea i geometria adsorbiei
moleculei de pe un coloid de argint, la diferite valori ale pH-ului [66]. Spectrul SERS al
amoxicilinei a fost nregistrat cu ajutorul unui laser de 532 nm i hidroxilamin redus de
argint coloidal ca substrat SERS. Spectrele FT-IR i Raman de amoxicilin au fost atribuite
pe baza calculelor DFT cu B3LYP hibrid de schimb de coresponden funcional, mpreun
cu standardul 6-31G set de baz (d). Potenialul calculat molecular electrostatic a fost utilizat
n combinaie cu date SERS pentru a prezice adsorbia geometric a moleculei pe Ag
coloidal.
4.1. Introducere
Amoxicilina aparine unei clase de antibiotice numite peniciline. Amoxicilina este un
bactericid cu spectru moderat, antibiotic -lactam folosit pentru tratarea infeciilor bacteriene
cauzate de microorganisme sensibile.
Amoxicilina este eficient mpotriva multor bacterii diferite incluznd : H. influenzae,
N. gonorrhoea, E. coli, Pneumococi, Streptococi i anumite tulpini de stafilococi.
19

Este aleas cel mai des din clasa ei de antibiotice pentru c este mai bine absorbit,
dup administrarea oral, dect alte -lactamice. Acioneaz prin inhibarea sintezei pe
peretele celular bacterian. Pereii sunt necesari pentru a proteja bacteriile din mediul lor i de
a pstra coninutul celulei bacteriene mpreun. Bacteriile nu pot supravieui fr peretele
unei celule.
n studiile anterioare, care utilizeaz spectroscopia IR au fost studiate unele modele
tehnologice de amoxicilin trihidrat, inclus n etil-, metil-, metil-i carboxi-metil hidroxietil
celuloz. Interaciuni s-au stabilit numai ntre amoxicilin trihidrat i etilceluloz. Spectrele
de adsorbie IR sugereaz un antibiotic cu legaturi de H cu grupurile hidroxil n molecula
etilceluloz. Diferenele IR spectrale observate nu sunt datorate transformrii polimorfice;
acest lucru a fost dovedit prin difracie pe pulbere cu raze X. Un alt studiu s-a bazat pe
pregtirea de compleci folosind dou metode i caracterizeaz apoi interaciunile dintre
AMOX i originalul -CD. Skimmer i spectroscopia n infrarou (FTIR) au fost folosite
pentru a caracteriza starea solid a sistemului binar. Complexarea de AMOX cu -CD a fost
dovedit prin FTIR, RMN, DSC, i HPLC [68].
Studiul prezint spectrele experimentale i simulate FT-IR i Raman a compusului
investigat. Spectrul de frecvene SERS al amoxicilinei a fost, de asemenea, nregistrat cu
ajutorul unui laser de 532 nm i hidroxilamin pe argint coloidal ca substrat SERS.
Spectrele IR i Raman de amoxicilin au fost atribuite pe baza calculelor DFT cu B3LYP
hibrid de schimb de coresponden funcional, mpreun cu standardul 6-31G set de baz
(d). Potenialul electrostatic molecular calculat a fost utilizat n combinaie cu date SERS
pentru a prezice geometria adsorbiei moleculare pe Ag coloidal. Deplasarea benzilor SERS
este nsoit de o schimbare important n intensitile lor relative.

4.2 Metode computaionale de investigare a structurii moleculare
Spectrele FT-IR ale pudrei de amoxicilin au fost nregistrate la temperatura camerei
cu ajutorul unui spectrometru FTIR Equinox 55 (Bruker Optik GmbH, Ettlingen, Germania),
spectrometru echipat cu un detector de DTGS i o configurare ATR cu cristale de ZnSe.
Spectrele FT-Raman au fost nregistrate ntr-o geometrie backscattering cu un
accesoriu Bruker FRA 106/S Raman echipat cu un detector de Ge rcit cu azot.
Laserul 1064 nm Nd: YAG a fost folosit ca surs de excitare i puterea laser msurat
la poziia eantionului a fost de 300 mW. Toate spectrele au fost nregistrate cu o rezoluie de
4 cm-1 prin adugarea a 32 scanri.
20

Spectrele SERS au fost nregistrate folosind un spectrometru DeltaNu Advantage
(DeltaNu, Laramie, WY), echipat cu o frecven dubl care emite cu laser NdYAG la 532
nm. Puterea laserului a fost de 40 MW i rezoluia spectral ~ 10 cm
Toate substanele utilizate au fost de calitate analitic. Substratul de argint coloidal
SERS a fost pregtit prin reducerea Ag + cu hidroxilamin [69]. Pe scurt, 0.017 g azotat de
argint au fost diluate n 90 ml de ap deionizat. ntr-un recipient separat, 0.017 g de
clorhidrat de hidroxilamin a fost diluat n 10 ml ap, apoi s-au adaugat 0.250 ml de soluie
de hidroxid de sodiu, 2 mol / l (v). Soluia hidroxilamin / hidroxid de sodiu a fost apoi rapid
adugat la soluia de azotat de argint, amestecnd viguros. Dup cteva secunde o soluie
coloidal de culoare gri-maro s-a format i a fost amestecat timp de nc 10 minute.
Valoarea pH-ului coloidului de argint, msurat imediat dup preparare, s-a dovedit a fi 8.5.
Optimizarea geometriei moleculare, potenialul electrostatic molecular (MEP) i
calculele spectrelor vibraionale au fost efectuate cu pachetul de programe Gaussian 03W
[70] folosind metode DTF cu hibridul B3LYP i chitul standard 6-31G. Nu a fost aplicat nici
o restricie de simetrie n timpul optimizrii geometriei.
Frecvenele vibraionale au fost calculate la o geometrie optimizat pentru a se asigura
c nu s-au obtinut frecvene imaginare confirmnd c acesta corespunde unui minim local pe
suprafaa de potenial energetic.
Atribuirea frecvenelor experimentale se bazeaz pe benziile de frecven observate i
modelul de intensitate a spectrului Raman i confirmate prin stabilirea unei corelaii unu la
unu ntre frecvenele observate i cele calculate teoretic.
Activitile calculate Raman (Si) au fost convertite la intensitile relative Raman (II),
folosind urmtoarea relaie [73-75]:
(

|
.
|

\
|

=
kT
hc
S f
I
i
i
i i
i
u
u
u u
exp 1
) (
4
0

Unde u
0
este numarul de und de excitaie
Pentru parcela de spectre Raman simulate au fost folosite forme pure de Lorentzian cu
ntreaga lime si nlimea la jumatate (FWHH) de 15 cm
-1
.
Ultima coloan din tabelul 1 conine propunerile care contribuie cel mai mult la
diferite moduri normale n conformitate cu metoda B3LYP cuplate cu setul de baza 6-31G
(d).
Numerele calculate au fost scalate de 0.9614 aa cum au propus Scott i Radom [76].
21

Pentru ajutor n modul de atribuire ne-am bazat pe o comparaie direct ntre spectrele
experimentale i cele calculate prin luarea n considerare att a secvenei de frecvene i
intensitatea modelului i de comparaii cu spectrele vibraionale de compui similari [77-80].



4.3 Rezultate i discuii
Dup optimizarea geometric, au fost calculate frecvenele vibraionale pentru
amoxicilin. Nici o frecven imaginar nu a fost obinut pentru geometria optimizat dat n
fig 1. i astfel, reprezint un minim adevrat pe suprafaa de energie potenial.


Fig.1. Structura molecular optimizat i sistemul de numerotare al atomiilor de
amoxicilin
.
n Fig.2 sunt date spectrele experimentale i simulate FTIR / ATR ; n Fig.3 sunt date
spectrele experimentale i simulate FT-Raman i SERS, n tabelul 1 sunt selectate benzi
experimentale SERS, FT-Raman i sunt calculate numerele de und ale amoxicilinei , iar n
tabelul 2 sunt benzi experimentale selectionate FTIR/ATR i sunt calculate numerele de und
ale amoxicilinei.
22


Fig.2. Spectre FTIR experimentale i calculate ale amoxicilinei.

Dup cum s-a vzut n Fig.2, principalele caracteristici ale spectrelor experimentale
IR sunt foarte bine prezise de calcule.


23

Tabel 2. Benzi experimentale selecionate FTIR/ATR i numere de und calculate ale
amoxicilinei.
Experimental
wavenumbers (cm
-
1
)
Calculated
wavenumbers (cm
-
1
)
Band assignment
FTIR/ATR B3LYP
3529 3540 (O13H)
3451 3470 (N10H)
3368 3398
as
(N19H
2
)
3034 3046
as
(C21H,C23H)
2969 2963 (C3H)
1773 1793 (C8O14)+(O13H)
1685 1709 (C15O17)+(N10H)
1615 1610 (CC ring2)+(CH ring2)
1578 1585 (CC ring2)+(CH ring2)+(O25H)
1482 1490 (N10C15)+(N10H)+(C5H)
1450 1432
(CC ring2)+(CH
ring2)+(O25H)+(C16H)
1396 1398
s
(CH
3
)
1378 1371 (C3H)+(C8O
2
H)+(C3C8)
1328 1332 (CC ring2)+(CH ring2)+(O25H)
1283 1278
(N1C3)+(N10H)+(N19H
2
)+(CH)+(O13
H)
24


1249 1233 (CH)
1218 1209 (C5C2,C5C4,C3N1)+(N10H)+(CH)
1177 1176 (N10H,N19H
2
)+(CH)
1164 1159 (CH ring2)+(O25H)+(CH)+(N19H
2
)
1120 1111 (O13H)+(CH)+ (C8O
2
H)+(O13C8)
1021 1052
(CC,CN ring1)+(N1C4,C2N1)+(CH)+
(N19H
2
)+(C12H
3
)
986 976 (N19H
2
)+op. bending CH ring2
956 954 (CH)+(C16NH
2
)+(C15C16NH
2
)
939 939
(C8C3HN1)+(C8C3H,C2C5)+(CH)+
(O13H)+(N19H
2
)+(C12H
3
)
922 915 (C15C16H,C2C5)+(N19H
2
)+(C12H
3
)
873 862
ring2 breathing+(CH
ring2)+(CH)+(N19H
2
)
848 846 op. bending CH ring2
834 822 op. bending CH ring2
733 746 (O13H)+(C8O
2
H)+(CH
3
)+(C7C3)
656 663 (O13H)
- stretch,
s
- symmetric stretch,
as
- asymmetric stretch, - in plane bending, - rocking,
-out-of-plane bending, def.-deformation, ip.-in plane, op.-out of plane
ring1: pyrrole ring(N1-C2-S6-C7-C3); ring2: benzene ring(C18-C20-C21-C22-C23-C24)
25

Fig3. Arat spectre FT-Raman, DFT Raman i SERS calculate ale amoxicilinei. Dup
cum se poate observa spectrul teoretic calculat reproduce bine spectrul FT-Raman.

Fig.3. Spectre FT-Raman si SERS experimentale si calculate ale amoxicilinei

FT-Raman: Excitation -1064nm, P=300mW
SERS: Excitation 532nm, P=40mW
26

Table 1. Selected experimental SERS, FT-Raman bands and calculated wavenumbers of
amoxicillin.
Experimental
wavenumbers (cm
-1
)
Calculated
wavenumbers (cm
-
1
)
Band assignment
SERS
FT-
Raman
B3LYP
244 228 221 (NH
2
)+(CH
3
)
280 271 (CNH
2
)+ op. Ring2 deformation
323 303 (CCH
3
)+(CCH
3
)
359 358 (CCH
3
)+(CCH
3
)
387 391
op. ring2, ring1 deformation+op. ring2,
ring1 bending
446 416 ip. ring1 deformation+(COH)
469 461 ip. ring1 deformation+(NH)+(CCH
3
)
506 491 op. ring2 bending+(NH)
553 516
op. ring2, ring1 deformation+op. ring2,
ring1 bending
584 567 (O13H)+(C7S6)+(C7CH
3
)+(CH
3
)
618 616 625 (O13H)+(CH)+(CH
3
)
666 636 648 ip. ring2 deformation+ring2 breathing
734 734 746 (O13H)+(C8O
2
H)+(CH
3
)+(C7C3)
794 803 811 ip. Deformation
827 838 823 op. bending ring2+(CH ring2)
27


Tabelul 1. Numere de und experimentale selectate i numere de und calculate B3LYP/6-
31G(d) (cm
-1
) ale amoxicilinei.
852 864
ring2 breathing+(CH
ring2)+(CH)+(NH
2
)
934 921 915
(NH
2
)+ op. bending
ring1+(CH)+(C8C3)+(OH)
954 958 (CH
3
)+op. bending CH ring2
985 972 (CH)+(C16NH
2
)+(C15C16NH
2
)
1021 1008 (CH
3
)
1046 1052 1069 (C16NH
2
)+(NH
2
)+(CH)
1120 1125 (C12C7C11)+(CH
3
)
1151 1177 1159 (CH)+(OH)+(CH ring2)+(CC ring2)
1196 1209 (CH)+(NH)+ (C5N10)
1238 1257 1259 (C24OH)+(CH ring2)
1311 1304
(CH)+(NH)+(CH ring2)+ip. ring2
deformation
1352 1396 1374 (CH)+(NH
2
)+(NH
2
CH)
1443 1435 1453
as
(CH
3
)
1463 1477
as
(CH
3
)
1617 1618 1610 (CC ring2)+(CH ring2)
- stretch,
s
- symmetric stretch,
as
- asymmetric stretch, - in plane bending, - rocking,
-out-of-plane bending, def.-deformation, ip.-in plane, op.-out of plane
ring1: pyrrole ring(N1-C2-S6-C7-C3); ring2: benzene ring(C18-C20-C21-C22-C23-C24)
28

Tabelul 1 prezint numere de und calculate i alocarea acestora pe baza calculelor
DFT. Benzile FT-Raman i SERS au fost corelate vizual cu spectrele calculate lund n
considerare att valoriile numerelor de und ct i intensitatea relativ, prin urmare atribuirea
spectrelor FT-Raman i SERS a fost efectuat.
Adsorbia amoxicilinei pe suprafaa de argint
n conformitate cu normele suprafeei de selecie [81,82], modurile normale cu o
schimbare n polarizabilitatea componentului perpendicular pe suprafa sunt mbuntite.
Teoretic, interaciunea amoxicilinei cu suprafaa de argint poate fi stabilit prin,
mprumutul de perechi de electroni din atomii de O i N , atomii S sau prin electronii ai
inelelor.
Adsorbia de amoxicilin pe suprafaa de argint se deduce pe baza hrii moleculare
electrostatice i a mai multor benzi de marcaj.
Dup cum se poate observa n figura 4 cea mai mare densitate de electroni este situat
pe atomii de oxigen astfel adsorbia moleculei ar trebui s aib loc prin intermediul
chemisorbiei de atomi de oxigen.
Benzile de marcaj ale inelului de benzen (inelul 2) au fost identificate la 852, 1177 i
1257 cm-1. Aceste benzi sunt mai puin reprezentate n spectrele SERS astfel inelul de
benzen nu se afl n imediata apropiere a suprafeei de argint. Benzi intense n spectrele
SERS sunt observate la 1352 i la 1443 cm
-1
datorit legaturilor C-H de asemenea la 1663
datorit vibraiei de ntindere a legturii C=O.
Astfel s-a dedus adsorbia moleculei precum e prezentat n figura de mai jos:

29

Potenial electrostatic molecular
Potenialele moleculare electrostatice au fost folosite pentru interpretarea i estimarea
comportamentul reactiv de o mare varietate de sisteme chimice n reacii att electrofile cat i
nucleofilice, studiul proceselor biologice de recunoatere i interaciuni ale hidrogenului.
[83,84]. Pentru a prezice locurile reactive ale atacurilor electrofile i nucleofilice ale
moleculei investigate, MEP a fost calculat cu B3LYP/6-31G(d) geometrie optimizat. Figura
4 prezint harta calculat 3d a conturului electrostatic potenial de amoxicilin n [au],
dentitatea de electroni n suprafa fiind 0.02 a.u.



4.4 Concluzii pariale
Calcule DFT au fost realizate pentru optimizarea geometriei i calculul de frecvene
vibraionale al amoxicilinei.
Spectre FT-Raman i FTIR ale amoxicilinei au fost nregistrate i alocarea numerelor
vibrationale a fost realizat cu ajutorul calculelor DFT.
Din regulile SERS de selecie cteva benzi marker i harta potenialului electrostatic
geometria adsorbiei amoxicilinei pe suprafaa de argint a fost dedus.




30

CONCLUZII
Au fost sintetizai trei clase de compleci metalici. Rezultatele obinute n urma
caracterizrii structurale a acestor compleci au fost prezentate la diferite conferine naionale
i au fost concretizate prin publicarea de articole.
Scopul sintetizrii acestor compui este investigarea ulterioar a capacitii lor
antibacteriene, antifungice, anticancerigene i de nlturare a rezidurilor din ap.
Caracterizarea structural a compuilor cu liganzi de interes biomedical s-a realizat
prin tehnicile acesibile, respectiv analiza chimic elemental, absorbie atomic de mas,
msuratori termice, spectroscopie n infrarou cu Transformata Fourier, spectroscopie n
ultraviolet i vizibil, precum i rezonan electronic de spin.
innd cont de bioaplicabilitatea lor au fost sintetizai i caracterizai trei compleci
metalici: [Cu(C
15
H
12
N
7
O
4
)
2
]8H
2
O, [Co(C
15
H
12
N
7
O
4
)
2
]8H
2
O i [Ni(C
15
H
12
N
7
O
4
)
2
]8H
2
O
avnd ca i ligand un azoderivat de tipul C
15
H
12
N
7
O
4
.
Analiza chimic elemental i analiza termic confirm stoichiometria complecilor i
raia molar de M:L:H
2
O = 1:2:8.
Spectroscopiile n infrarosu, ultraviolet i vizibil indic faptul c ligandul organic
actioneaz ca i un compus bidentat, ce implic n coordinarea cu ionul metalic un atom de
azot provenit de la gruparea azo i un atom de oxigen legat de inelul pirazolic.
Spectrele de rezonan electronic de spin confirm simetria pseudotetraedral n jurul
ionilor metalici pentru prima clas de compleci.
Au fost sintetizai i caracterizai din punct de vedere fizico-chimic i spectroscopic
opt noi compleci metalici de tip [M(HL)
n
]xH
2
O unde HL= [C
2
HN
2
S
3
CH
2
COO]
-
i M=
Mn
2+
, Co
2+
, Ni
2+
, Cu
2+
, Zn
2+
, Cr
3+
, Fe
3+
i Ag
+

Microanaliza confirm raportul stoichiometric i puritatea analitic a tuturor celor opt
compleci nou sintetizai.
Spectroscopia FT-IR confirm caracterul bidentat al ligandului i permite stabilirea
modului de coordinare la centrii metalici. Astfel ligandul se comport ca i carboxilai
monoanionici, ce conin o grupare tioamidic protonat n forma sa tionic.
Spectrele electronice i cele de rezonan electronic de spin ale complecilor,
msurate la temperatura camerei, confirm legturile covalente metal-ligand formate,
simetria octaedral sau pseudooctaedral n jurul ionilor metalici. Valorile tensorilor
giromagnetici corespund unor cromofori de tip MO
6
avnd contribuii din partea atomilor de
oxigen provenii de la gruprile carboxilice i de la moleculele de ap.
31

Metodele spectroscopice nu pot oferi suficiente informaii despre modul n care se
leag metalele de proteine, nelegnd natura legturii metalelor de aminoacizi putem obine
informaii extrem de utile despre coordinarea proteinelor cu metalele.
n acest context am sintetizat i caracterizat din punct de vedere fizico-chimic, termic
i spectroscopic noi compleci metalici n soluii apoase de tipul: Cu(L)
2
H
2
O, Co(L)
2
2H
2
O
si Zn(L)
2
H
2
O, unde L= fenilalanin.
Analiza chimic elemental, absorbia atomic de mas i analiza termic confirm
stoichiometria complecilor i raia molar de M:L:H
2
O = 1:2:1 pentru complecii de cupru i
zinc i M:L:H
2
O = 1:2:2 pentru cei de cobalt.
Compararea spectrelor FT-IR ale aminoacizilor i ale compuilor sintetizai au permis
stabilirea modului de coordinare la centrii metalici prin intermediul atomului de azot din
gruparea amino i prin atomul de oxigen al gruprii carboxil. De asemenea, analiza benzilor
de vibraie de la aproximativ 3600 cm
-1
a permis stabilirea numrului de molecule de ap care
coordineaz la centrul metalic. Au fost identificate i atribuite principalele benzi de vibraie
ale unor grupri moleculare semnificative. Spectrele IR arat caracterul bidentat al liganzilor
i permit stabilirea unei geometrii locale pseudotetraedrale n cazul ionilor de Cu(II) si Zn(II)
i a uneia octaedrale n cazul complecilor de Co(II). Simetria local octaedral n cazul
ionilor de Co(II) se realizeaz prin coordinare n poziie axial a dou molecule de ap.
Spectrele electronice i cele de rezonan electronic de spin ale complecilor, sub
form de pulbere msurate la temperatura camerei, confirm legturile covalente metal-
ligand formate, simetria pseudotetraedral n jurul ionilor de cupru i zinc i nconjurarea
octaedral pentru cel de cobalt.
Rezultatele obinute pn n prezent ndreptesc continuarea cercetrilor, att n ceea
ce privete rezolvarea structurilor n stare solid i n soluie, ct i n ceea ce privete
activitatea biologic a acestor compui.





32

MULUMIRI

Sunt muli cei crora vreau s le mulumesc - oameni care m-au ajutat concret sau cu
o vorb de ncurajare, pentru a duce la bun sfrit aceast lucrare. Tuturor le sunt
recunosctoare.
n primul rnd vreau s mulumesc d-lui Prof. Dr. David Leontin, care m-a susinut
permanent i a crezut n mine i n aceast lucrare. Fr s-l am alturi, mi-ar fi fost mult mai
greu.
Sunt recunosctoare colectivului catedrei de Fizic Biomedical i n special
domnului decan Prof. Dr. Onuc Cozar, pentru c mi-a acordat ncrederea i toat susinerea
necesar pentru a finaliza aceast tez.
Am avut o colaborare foarte bun cu membrii acestei catedre care m-au susinut i m-
au ajutat n permanen cu sfaturi i sprijin n redactarea articolelor.
Mulumesc domnului Prof. Dr. Chis Vasile, doamnei Conf. Dr. Simona Pnzaru,
domnului Lect. Dr. Nicolae Leopold, domnului fiz. Dr. Szabo Laci pentru ajutorul constant i
promt de fiecare dat cnd aveam nevoie.
Toat aprecierea mea i gnduri bune pentru prinii mei, Bebu Mihai i Bebu Dorina,
pentru susinerea i ntelegerea manifestat cu generozitate n aceti ani.
Nu n ultimul rnd vreau s mulumesc programului doctoral : Prin tiina spre
Societate, contract POSDRU 6/1.5/S/3 pentru suportul financiar acordat n finalizarea
acestei teze de doctorat.
Aceast lucrare este pentru toi cei care de-a lungul timpului mi-au pus ntrebri, mi-
au cerut ajutorul, m-au ludat sau m-au criticat, stimulndu-m n acest fel s m pregtesc
permanent.









33

BIBLIOGRAFIE SELECTIV

[37] Siebrand W, Zgierski M. Resonance Raman SpectroscopyA Key to Vibronic Coupling,
in Excited State, Lim EC Ed., Academic Press, New York, 1979; 1: 1-36.
[38] Myers AB, Mathies RA. Resonance Raman Intensities: A Probe of Excited State
Structure and Dynamics, in Biological Applications of Raman Spectroscopy, Spiro TG Ed.,
Wiley, New York, 1988; 1: 1-58 .
[39] Fleischmann M, Hendra PJ, McQuillan AJ. Chem. Phys. Lett. 1974; 26: 163.
[40] Jeanmaire DL, Van Duyne RP. J. Electroanal. Chem. 1977; 84: 1.
[41] Albrecht MG, Creighton JA. J. Am. Chem. Soc. 1977; 99: 5215.
[42] Van Duyne RP. in Chemical and Biochemical Applications of Laser, Moore CB Ed.,
Academic Press, New York, 1979; 4.
[43] Furtak TE, Reyes J. Surf. Sci. 1980; 93: 351.
[44] Lee TK, Birman JL. J. Raman Spectrosc. 1981; 10: 140.
[45] Krasser W, Renaouprez AJ. J. Raman Spectrosc. 1981; 11: 425.
[46] Loo BH. J. Chem. Phys. 1981; 75: 5955.
[47] Creighton JA, Eadon DG. J. Chem. Soc, Faraday Trans. 1991; 87: 3881.
[48]Kerker M Ed., Selected Papers on Surface Enhanced Raman Scattering, SPIE Milestone
Series, Washington, 1990; MS 10.
[49] Sequaris JM, Koglin E. Fresenius' Z. Anal. Chem. 1985; 321: 758.
[50] Torres EL, Winefordner JD. Anal. Chem. 1987; 59: 1626.
[51] Munro CH, Smith WE, Armstrong DR, White PC. J. Phys. Chem. 1995; 99: 879.
[52] Moskovits M. J. Chem. Phys. 1982; 77: 4408.
[53] Moskovits M, Suh JS. J. Phys. Chem. 1984; 88: 1293.
[54] Gao X, Davies JP, Weaver MJ. J. Phys. Chem. 1990; 94: 6858.
[55] Cooney RP, Mahoney MR, McQuillan AJ. Advances in Infrared and Raman
spectroscopy, Clark RJH& Hester RE Eds., Heyden, Philadelphia, 1982; 9: 188.
[56] Campion A, Mullins DR. Chem. Phys. Lett. 1983; 94: 576.
[57] Campion A, Mullins DR. Surf. Sci. 1985; 158: 263
[58] Seki H. J. Electron Spectrosc. Relat. Phenom. 1986; 39: 289.
[59] Mrozek MF, Wasileski SA, Weaver MJ. J. Am. Chem. Soc. 2001; 123: 12817.
[60] Chang RK. Ber. Bunsen. Ges. Phys. Chem. 1987; 91: 296.
34

[61] Creighton JA. Spectroscopy of surface, Clark RJH&Hester RE Eds., Wiley, New York,
1988; 37.
[62] Murray CA. Surface Enhanced Raman Scattering, Chang RK&Furtak TE Eds., Plenum,
New York, 1982; 203.
J. Phys. Chem. 1986; 90: 6071.
[64] Chang RK, Laube BL. CRC Crit. Rev. Solid State Mater. Sci. 1984; 12: 1.
[65] Barz F, Gordon II JG, Philpott MR, Weaver MJ. Chem. Phys. Lett. 1982; 91: 291
[66] A. Prnu, V. Chi O. Oniga, N. Leopold, L. Szabo, M. Baias, O. Cozar, Vib.
Spectrosc., 48 (2008) 289296
[67] L.M. Gasheva, G. Kalinkova, E. Minkov

and V. Krestev, Journal of Molecular Structure,
Volume 115, March 1984
[68] Catherine Bisson-Boutelliez, Stephane Fontanay, Chantal Finance and Francine
Kedzierewicz, Preparation and Physicochemical Characterization of Amoxicillin -
cyclodextrin Complexes, AAPS PharmSciTech 2010;11(2):574-81.
[69] N. Leopold, B. Lendl, J. Phys. Chem. B 107 (2003) 5723.
[70] Gaussian 03, Revision E.01, M. J. Frisch, G. W. Trucks, H. B. Schlegel, G. E. Scuseria,
M. A. Robb, J. R. Cheeseman, J. A. Montgomery, Jr., T. Vreven, K. N. Kudin, J. C. Burant,
J. M. Millam, S. S. Iyengar, J. Tomasi, V. Barone, B. Mennucci, M. Cossi, G. Scalmani, N.
Rega, G. A. Petersson, H. Nakatsuji, M. Hada, M. Ehara, K. Toyota, R. Fukuda, J.
Hasegawa, M. Ishida, T. Nakajima, Y. Honda, O. Kitao, H. Nakai, M. Klene, X. Li, J. E.
Knox, H. P. Hratchian, J. B. Cross, V. Bakken, C. Adamo, J. Jaramillo, R. Gomperts, R. E.
Stratmann, O. Yazyev, A. J. Austin, R. Cammi, C. Pomelli, J. W. Ochterski, P. Y. Ayala, K.
Morokuma, G. A. Voth, P. Salvador, J. J. Dannenberg, V. G. Zakrzewski, S. Dapprich, A. D.
Daniels, M. C. Strain, O. Farkas, D. K. Malick, A. D. Rabuck, K. Raghavachari, J. B.
Foresman, J. V. Ortiz, Q. Cui, A. G. Baboul, S. Clifford, J. Cioslowski, B. B. Stefanov, G.
Liu, A. Liashenko, P. Piskorz, I. Komaromi, R. L. Martin, D. J. Fox, T. Keith, M. A. Al-
Laham, C. Y. Peng, A. Nanayakkara, M. Challacombe, P. M. W. Gill, B. Johnson, W. Chen,
M. W. Wong, C. Gonzalez, and J. A. Pople, Gaussian, Inc., Wallingford CT, 2004.
[71] Bebu Andreea - Mihaela, Cozar Ionut - Bogdan, Mogonea Lavinia, Cozma Dorin, Nagy
Csilla, David Ioan Leontin, Spectroscopic Studies of some Metallic Complexes with
Phenylalanine as Ligand, STUDIA UNIVERSITATIS BABES BOLYAI. PHYSICA, Categ
CNCSIS B+, 2, 2009, P.23 - 33V.

35

[72] Szabo Laszlo, Bebu Andreea - Mihaela, Leopold Nicolae, Berindean Catalin - Vasile,
David Ioan Leontin, IR, Raman, SERS and DFT study of amoxicillin,
Science_Citation_Expended, JOURNAL OF MOLECULAR STRUCTURE, 993, 2011, P.52
- 56N.
[73] L. Mogonea, A. Stanila, C. Cosma, Cs. Nagy, A. Bebu, L. David
Synthesis and spectral studies of some transition metal complexes with methionine as ligand
[74] D. Rusu
a
, O. Baban
b
, A. Bebu
c
,

M. Rusu
b
, D. Ilesan
c
, L. David
c

Spectroscopic studies of Polyoxotungstates with dinuclear clusters