Cercetarea criminalistic a microurmelor Analiza acidului acetil salicilic (aspirinei) i a acidului salicilic

Student: Data: .

1 Introducere Importana metodelor cromatografice instrumentale n analizele calitative din domeniul farmaceutic este de necontestat. Prin utilizarea aparaturii moderne se poate asigura att o sensibilitate adecvat, ct i reproductibilitate, prin realizarea unei automatizri a analizelor efectuate. n prezent, cnd zeci de compui sunt testai zilnic pentru a le descoperi potenialul biologic, este important ca acetia s poat fi detectai uor i rapid din fluidele biologice, n vederea stabilirii unor parametri importani, cum ar fi viteza de adsorbie. i n acest caz, metode cum sunt cromatografia de ioni sau cromatografia de nalt performan prezint soluii avantajoase pentru rezolvarea acestor probleme. Se prezint analiza unei probe de aspirin din farmacie, folosind metoda curbei de etalonare n cadrul cromatografiei de nalt performan. COOH
OCO CH3

acid acetil salicilic:

M = 180,16

Ka = 3,210-4

Aspirina poate conine i acid salicilic liber.

COOH OH

acid salicilic:

M = 138

Ka1 = 10-3

Ka2 = 4 10-14

Aspirina este greu solubil n ap. Pentru solubilizare se folosete de obicei mediu hidroalcoolic (alcool etilic). 2 Partea experimental Pentru prepararea soluiilor i a fazei mobile se folosesc reactivi de puritate analitic. Proba de aspirin de analizat poate fi achiziionat din farmacie. Acidul acetil salicilic folosit la prepararea standardelor poate fi sintetizat n laborator. Se folosete pentru analiz un instrument cromatografic HPLC Agilent 1100. Coloana folosit la analiz este de tip C18. Detecia se realizeaz printr-un detector UV-vis. Citirile se vor efectua la lungimea de und de 235 nm. Fazele mobile folosite la analiz - amestec A preparat din 1000 mL ap, 10 mL acetonitril i 0.2% acid tricloracetic. - amestec B preparat din 900 mL acetonitril, 100 mL ap i 0.1% acid tricloracetic. Soluii stoc i standarde Se prepar 2 soluii stoc de concentraie 1000 ppm de acid acetilsalicilic i acid salicilic n acetonitril. Din cele 2 soluii se prepar o soluie mixt de concentraie 100 ppm n fiecare din cei doi componeni, n amestec ap:acetonitril = 70:30 i 0.3% acid fosforic. Din soluia mixt se vor prepara 4 soluii de concentraii 1, 5, 10 i 20 ppm n amestec ap:acetonitril = 70:30 i 0.3% acid fosforic.
MASTER Criminalistic An I, Semestrul II, An Universitar 2011-2012 Lect. Dr. Cecilia Arsene Conf. Dr. Romeo-Iulian Olariu Pag. 1

Cercetarea criminalistic a microurmelor Analiza acidului acetil salicilic (aspirinei) i a acidului salicilic

Student: Data: .

Pentru prepararea soluiei de analizat se mojareaz o pastil de 500 mg acid acetilsalicilic, coninutul pulberiii rezultate se cntrete i se transfer cantitativ la un volum de 50 mL cu amestec ap:acetonitril = 70:30 i 0.3% acid fosforic. Din soluia obinut se msoar 0,25 mL care se aduc la un volum final de 15 mL. Soluia final de analizat se obine prin msurarea a 3 mL din soluia anterioar i aducerea lor la un volum final de 10 mL, astfel nct concentraia final teoretic s fie de 50 ppm. Condiii de operare instrument Att curba de etalonare ct i citirea probelor de analizat se vor realiza la un debit de 1 mL/minut cu o componen a fazei mobile de A:B=70:30. Timpul de nregistrare a unei cromatograme va fi de 10 minute. 3 Prezentarea i interpretarea rezultatelor Curba de etalonare se realizeaz folosind 5 puncte (1, 5, 10, 20 dar i 100 ppm). Datele obinute la nregistrarea cromatogramelor se vor trece n Tabelul 1:
Tabel 1: Rezultatele obinute la investigarea prin HPLC a aspirinei. Nr. det. 1 2 3 4 5 Probe 6 7 8 Conc stand. (ppm) Arie acid acetilsalicilic Arie acid salicilic Observaii

1) Se vor identifica timpii de retenie pentru acid acetilsalicilic i acid salicilic. 2) Se va reprezenta grafic dependena S=f(arie acid acetil salicilic) i S=f(arie acid salicilic). 3) Se vor realiza/justifica valorile obinute pe probe reale prin calcule adecvate. 4 Observaii i concluzii

MASTER Criminalistic An I, Semestrul II, An Universitar 2011-2012

Lect. Dr. Cecilia Arsene Conf. Dr. Romeo-Iulian Olariu Pag. 2