Manual de Prácticas de Evaluación de Fármacos y Medicamentos II..

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA
AUTORES Mara Teresa Griselda Fuentes Lara Esperanza Jimnez Castaeda Juana Rosado Prez Estela Valencia Platas
COLABORADORES
Adrian Flores Barrera Sandy Isabel Hernndez Ortega Guadalupe Nlida Ortega Soto Javier de Jess Pin Ortega
Sptimo Semestre
2012
Manual de Evaluacin de Frmacos y Medicamentos II
Tabla de Contenido
A Manera de Prologo Introduccin Prctica No. 1: Valoracin del Efecto Analgsico Introduccin Objetivos Material, Equipo y Reactivos Metodologa Procedimiento 1 Procedimiento 2 Cuestionario Referencias Prctica No. 2: Bloqueadores de la Placa Neuromuscular Introduccin Objetivos Material, Equipo y Reactivos Metodologa Cuestionario Referencias Prctica No. 3: Anestsicos Locales Introduccin Objetivos Material, Equipo y Reactivos Metodologa Mtodo 1: Uso del Simulador Mtodo 2: Uso de Lombrices de Tierra Cuestionario Referencias Prctica No. 4: Anestsicos Generales Introduccin Objetivos Material, Equipo y Reactivos Metodologa Cuestionario Referencias Prctica No. 5: Valoracin del Efecto Anticonvulsivante Introduccin Objetivos Material, Equipo y Reactivos Metodologa Cuestionario Pgina 3 4 5 6 7 7 8 8 9 10 10 11 12 12 12 13 14 14 15 16 17 17 17 17 18 19 19 20 21 23 23 23 24 24 25 26 27 27 28 29
Tabla de Contenido
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Referencias Prctica No. 6: Frmacos Cardiotnicos Introduccin Objetivos Material, Equipo y Reactivos Metodologa Mtodo 1: Uso del Simulador Mtodo 2: Uso de la Pulga de Agua Cuestionario Referencias Prctica No. 7: Diurticos Introduccin Objetivos Material, Equipo y Reactivos Metodologa Cuestionario Referencias Prctica No. 8: Efecto de los Frmacos Hipoglucemiantes Introduccin Objetivos Material, Equipo y Reactivos Metodologa Cuestionario Referencias Anexos Anexo Prctica No.3: Simulador Anexo Prctica No.6: Simulador Anexo Prctica No.7: Valoracin 29 30 31 32 32 33 33 33 34 34 35 36 38 38 38 40 40 41 42 43 43 44 45 45 46 46 55 63
Tabla de Contenido
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A Manera de Prlogo
Generalmente esta parte la escribe una persona reconocida en el mbito a tratar en el texto, pero a menudo a los lectores, y sobre todo a los estudiantes, esta persona nos parece completamente lejana o ajena a nosotros y sus palabras no llegan a tener gran influencia. Es por esto que decidimos aclarar que tambin somos o fuimos estudiantes de la UNAM, tus compaeros de la FES Zaragoza, que cursamos la materia justo como ests a punto de hacerlo t. El Manual de Prcticas de Laboratorio de Evaluacin de Frmacos y Medicamentos II que ahora tienes en tus manos contiene un acercamiento general a la informacin que como profesionista requerirs y es resultado de la exigencia de cientficos mejor preparados pero con una conciencia ms responsable con el planeta Hoy en da, los cientficos tenemos que estar al da en la legislacin nacional e internacional y en esta se han dado grandes avances conforme al uso y manejo adecuado de animales de experimentacin en donde destaca la Regla de las 3R (Remplazar, Reducir y Refinar). Es por esto que en el presente manual encontrars nuevas tcnicas de experimentacin como simuladores computacionales, manejo de organismos de rdenes menores y lotes experimentales de menor tamao que hoy se emplean con mayor frecuencia en la vida profesional. En cada prctica encontrars una pequea introduccin cuya nica finalidad es guiarte en la bsqueda de informacin. Es fundamental comprender que todo el tiempo necesitars buscar profundizar en el tema lo mayor posible con la idea de que tu educacin depende principalmente de ti y de lo que quieras lograr. De la misma manera recomendamos que tus fuentes de informacin sean lo ms actuales posible ya que la ciencia es un mundo en constante construccin y lo que es cierto hoy puede no serlo del todo maana. Uno de los objetivos primordiales de este manual es que realices toda esa bsqueda de informacin antes de la actividad en el laboratorio para que no trabajes a ciegas, por lo cual se proponen una serie de cuestionarios que junto con la introduccin te guiarn en la informacin bsica que debes conocer del tema. Con toda la nueva filosofa de trabajo y una serie de pensamientos de personajes clebres al inicio de cada prctica se pretende que el estudiante genere una educacin universal y responsable haciendo honor al lema de la UNAM de Jos Vasconcelos POR MI RAZA HABLAR EL ESPRITU recordando que los estudiantes de hoy sern los profesionistas del maana que moldearn al pas y a la sociedad. Sabemos que la carrera es pesada pero, aunque no lo creas, la humanidad depende de ti as que no te rindas. TUS COMPAEROS FES Zaragoza, UNAM Mxico 2012
A Manera de Prologo
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Introduccin
En la presente edicin del Manual de Prcticas de Laboratorio de Evaluacin de Frmacos y Medicamentos II de la carrera de QUMICA FARMACUTICO BIOLGICA, se ha tratado de mantener los criterios que en un inicio tuvieron los profesores del modulo, respetando su valioso trabajo, pero a su vez, se implementaron algunos cambios que, a nuestro criterio, van de acuerdo a la actualidad, sin que con ello el alumno se pierda en un mar de informacin. El principal objetivo de este manual, fue el crear una gua que constituyera una herramienta eficaz para el aprendizaje, para lo cual, se tuvo el cuidado de que en cada prctica se incluyeran los siguientes puntos: Introduccin: Que sustenta los principios bsicos de cada prctica. Objetivos: Proporcionan directrices a los estudiantes sobre lo que deberan saber para desarrollar adecuadamente las prcticas. Metodologa: Clara y precisa que facilita las actividades a realizar. Figuras, Esquemas y Tablas: Que dan un diseo ms didctico y sencillo. Cuestionario: Cuya funcin es indicadora del grado de conocimiento adquiridos previos a la prctica. Referencias: til como gua para la bsqueda de informacin adicional. Anexos: Contienen suplementos de los simuladores computacionales as como el tratamiento de los datos obtenidos. Se ha procurado que todo el manual tenga el mismo formato para un mejor uso del mismo, por todo lo anterior, desde nuestro punto de vista, el manual cumple con su cometido, ser un texto bsico para estudiantes.
Introduccin
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LOS AUTORES FES Zaragoza, UNAM Mxico 2012
Prctica No. 1
LA DUDA NO ES SOLO BALUARTE DE LA CORDURA, SINO HABILIDAD SUTIL DE LA MODESTIA.
Valoracin del Efecto Analgsico
Santiago Ramn y Cajal

Introduccin Al considerar que el trmino Analgesia proviene de los vocablos griegos, An que significa sin y LGESIS dolor, es fcil deducir que un analgsico es cualquier frmaco que administrado de manera adecuada disminuye o calma la Sensacin de Dolor. En general, los analgsicos se pueden dividir en dos grandes categoras, segn su naturaleza qumica, los opioides y los no opioides (o no esteroideos). Los opioides son de exclusiva prescripcin mdica y su uso es ms frecuente en el paciente hospitalizado, un ejemplo es la morfina. El nico de stos que puede ser parte del botiqun es la codena. Dicha sustancia es muy efectiva en dolores agudos de los huesos y las articulaciones, sobre todo despus de una ciruga. Los analgsicos no esteroideos comprenden una amplia lista de sustancias. Estos son los calmantes adecuados para el botiqun por su utilidad en diversos tipos de dolor y la seguridad con que pueden ser usados a las dosis recomendadas. El prototipo de stos es la aspirina, este grupo tambin recibe el nombre de Analgsicos Antiinflamatorios No Esteroideos (AINES).

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DERIVADOS DE:
cido Salicilico p-aminofenol cido actico cido propionico Fenamatos cidos enlicos Alcanonas
Tabla 1.1 Ejemplos de AINES EJEMPLOS

cido acetil-salicilico (aspirina). Acetaminofn. Indometacina, ketorolaco y diclofenaco. Ibuprofeno, naproxn y oxaprozina. cido mefenmico y cido meclofenmico Piroxicam, fenilbutazona y dipirona Nabumetona
La mayora de los AINES, son frmacos que tienen otras propiedades como antiinflamatorios y/o antipirticos (reducen la fiebre). Los analgsicos Opioides incluyen los derivados de los alcaloides, ya sean naturales o sintticos. El prototipo de estos es la Morfina, obtenida a partir de la amapola, tambin se encuentra la Metadona, Meperidina y Propoxifeno (analgsico dbil).

Definicin del Dolor Para poder entender cmo es que actan estos frmacos, es necesario tener una idea de lo significa el Dolor, aunque es muy difcil hacerlo, pues es subjetivo. La definicin ms comnmente aceptada del dolor es la proporcionada por la Asociacin Internacional para el Estudio del Dolor (Internacional Association for the Study of Pain, IASP): "El dolor es una experiencia sensorial y emocional no placentera relacionada con dao potencial o real del tejido, o descripta en trminos de tal dao. El dolor siempre es subjetivo". La cuestin de que el dolor siempre es subjetivo es muy importante y enfatiza que el dolor es una experiencia somatopsquica. Aristteles se refiri a esto cuando describi al dolor como una "pasin del alma". Esto enfatiza que una variedad de factores diversos pueden causar o agravar el dolor, lo cual debe considerarse en la evaluacin y tratamiento. Una definicin clnica ms prctica es: "El dolor es lo que el paciente dice que es. Es lo que el paciente describe y no lo que los dems piensan que debe ser. Por lo que el dolor es una respuesta del organismo ante el dao, leve o severo y se convierte as en un signo de alerta. La sensacin se desencadena cuando, se producen ciertas sustancias llamadas Prostaglandinas estas sustancias a su vez generan la accin de enzimas que actan sobre otros componentes de las clulas. Una de las enzimas que favorece la produccin de prostaglandinas es la llamada Ciclooxigenasa, de las cuales existe la I y la II. La primera se encuentra en todos los tejidos mientras que la segunda solo est en el rion y en los sitios en que ocurre inflamacin y dolor es a este nivel donde actan los AINES. Accin de los Analgsicos Los analgsicos bloquean la produccin de las prostaglandinas necesarias para desencadenar la sensacin del dolor, gracias a que inhiben la accin de las enzimas denominadas ciclooxigenasas Por eso mismo, los analgsicos tienen tambin propiedades antiinflamatorias y antipirticas (controlan la fiebre). El Acetaminofn es el nico cuya forma de accin no afecta las prostaglandinas. El otro mecanismo de accin es mediante la fijacin a los receptores opiceos produciendo analgesia; a nivel del SNC bloqueando y modulando las seales dolorosas a los cordones espinales y cerebro, esta accin es caracterstica del el D-Propoxifeno (dextropropoxifeno) Objetivo Observar y valorar el efecto analgsico del Propoxifeno en ratn, administrado en dosis variadas por va intraperitoneal (I.P.) valorando el efecto a diferentes tiempos. Material, Equipo y Reactivos MATERIAL BIOLGICO Cinco ratones adultos (20-30gramos) MATERIAL Y EQUIPO Una pinza de mosco con mango de hule (tipo caimn) Dos jeringas de 1 mL (tipo insulina) Una balanza granataria con canastilla para pesar animales. Un reloj REACTIVOS

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Analgsico (Propoxifeno u otro similar) Solucin salina
Metodologa El mtodo que se utilizar, se basa en producir dolor experimentalmente en los animales de laboratorio, y medir el tiempo en que tarda en aparecer una conducta o sntoma indicativo del dolor. Este procedimiento se lleva a cabo en ausencia y en presencia del analgsico. Los mecanismos para producir dolor son fsicos (se aplica una pinza sobre la cola del animal, se coloca al animal sobre una placa caliente o bien se sumerge la cola en agua a 50 C), y qumicos (se inyecta un agente qumico al animal). Procedimiento 1 1. Colocar la pinza de mosco (o caimn) a 1 cm de la base de la cola del ratn.

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Imagen 1. Forma correcta de colocar el caimn en la base de la cola del ratn.
2. La respuesta positiva al dolor se caracteriza por vocalizacin y/o movimientos para alcanzar o morder la pinza, en un lapso de 10 segundos. En caso contrario, deseche al anormal y tome otro. 3. Enseguida pese y numere a cada ratn. 4. Administre a cada ratn por I.P. la dosis del frmaco (asignada aleatoriamente) de acuerdo a la siguiente tabla: Tabla 1.2 Dosis de Administracin
RATN
1 2 3
Dosis (mg/Kg)
100 (solucin 10 mg/mL) 70 (solucin 7 mg/mL) 50 (solucin 5 mg/mL) 35 (solucin 3.5 mg/mL) 0.1 mL Solucin Salina/ 10g
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5 Control
Preparar soluciones a partir de la solucin madre de 10 mg/mL, para inyectar 0.1 mL de cada solucin por 10 g de peso. 5. Una vez administrado el frmaco, mida el tiempo.
Imagen 2. Administracin Intraperitoneal en ratn.

6. Aplique nuevamente la pinza arterial de la manera antes descrita, a los 15', 30', 60', y 90', y evale la respuesta de cada ratn. 7. Si muerde la pinza (positivo al dolor) no existe analgesia. 8. Si no muerde la pinza (negativo al dolor) existe analgesia. 9. Anote sus resultados en la siguiente tabla:
RATN 1 2 3 4 5
Tabla 1.3 Resultados por Equipo DOSIS MG/KG VALORACIN DEL EFECTO 15' 30' 60'
90'
10. Los resultados de todos los equipos se anotarn en la tabla 1.4.

Tabla 1.4 Resultados por Grupo DOSIS MG/KG
LOG Dosis
Animales (sin dolor) Animales Probados

15' 30' 60' 90'
% RESPUESTA
15'
30'
60'
90'
100 70 50 35
11. Con los resultados obtenidos construya una curva de tiempo vs efecto para cada dosis. 12. Si los resultados lo permiten, calcule la dosis efectiva media (DE50) con el tiempo de efecto mxime
Procedimiento 2
Existe una variante del mtodo 1, que consiste en lo siguiente: 1. Calentar aproximadamente 100 mL de agua a 50 C. 2. Colocar un ratn dentro de un cono (o algo parecido), de tal manera que la cola salga del mismo. Imagen 3. Ratn en cono con cola saliendo

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3. Introducir la mitad de la cola por 10 segundos en el agua. 4. La respuesta positiva al dolor se caracteriza por vocalizacin y/o movimientos bruscos para extraer la cola del agua o salir del cono. En caso contrario, deseche al

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animal y tome otro. 5. Enseguida pese y numere a cada ratn. 6. Administre a cada ratn por va I.P. la dosis del frmaco (asignada aleatoriamente) de acuerdo a la tabla 1.2. 7. Una vez administrado el frmaco, mida el tiempo. 8. Repita los pasos del 1 al 3 a los 15', 30', 60', y 90', 9. Evale la respuesta de cada ratn. 10. Si su actitud no es agresiva, es decir, si no le afecta el agua caliente, existe analgesia. 11. Anote sus resultados en la tabla 1.3. 12. Los resultados de todos los equipos se anotarn en al tabla 1.4. 13. Con los resultados obtenidos construya una curva de tiempo vs efecto para cada dosis. 14. Si los resultados lo permiten, calcule la dosis efectiva media (DE50) con el tiempo de efecto mximo. Cuestionario 1. Describa el papel que juegan las prostaglandinas en el dolor. 2. Cul es el mecanismo de accin analgsica de la aspirina, naproxeno y piroxicam? 3. Cul es el mecanismo de accin del Propoxifeno? 4. Qu funcin tienen las Ciclo-oxigenasas 1 y 2, y como afectan al organismo? 5. Cules son las teoras del dolor y que dice cada una de ellas? 6. Cul es la norma oficial mexicana que aborda el manejo y sacrificio correcto de los animales empleados en el laboratorio? 7. Realice una gua de manejo y sacrificio para ratas, ratones, conejos y ranas. Referencias 1. Goodman L.S.& Gilman A. 1996. The Pharmacological Basis of Therapeutics. 9a. edicin. McGraw Hill. U.S.A. 2. Barastegui, AC, Esquemas y Prcticas de Farmacologa. Espaxs, Espaa 1976. 3. Bertrand G. Katzung, Farmacologa Bsica y Clnica, 8a ed. Manual Moderno, Mxico 2002. 4. NOM-062-Z00-1999 Especificaciones Tcnicas para la Produccin, Cuidado y Uso de los Animales de Laboratorio. Imagen 4. Ratn en agua caliente
Prctica No. 2
Bloqueadores de la Placa Neuromuscular
LA BELLEZA DE LAS COSAS EXISTE EN LA BELLEZA DE QUIN LAS CONTEMPLA
D. Hume

Introduccin Durante el siglo XVI los exploradores europeos encontraron que los nativos de la cuenca del Amazonas usaban un veneno en la punta de sus flechas que produca la muerte. Despus de muchas investigaciones se encontr que el curare es el extracto crudo activo de varias especies de plantas cuyo principio activo es la D-tubocurarina. El msculo esqueltico voluntario est inervado por neuronas motoras cuyos axones son capaces de conducir potenciales de accin a altas velocidades. Al rea del msculo que yace junto a la terminacin axnica se le conoce como placa motora y a la sinpsis qumica que existe entre ambas como unin neuromuscular. Los frmacos que actan en la unin neuromuscular pertenecen a dos grupos: PRESTNPTICOS: Frmacos que inhiben la sntesis de acetilcolina por ejemplo hemicolinio. Frmacos que inhiben et almacenamiento de la acetilcolina en las vesculas por ejemplo el AH5183. Frmacos que inhiben la liberacin de acetilcolina por ejemplo la estreptomicina. POSTSINPTICOS Frmacos no despolarizantes. Antagonistas competitivos de los receptores nicotnicos de la acetilcolina. Ejemplo la D-tubocurarina' Frmacos despolarizantes. Activan los receptores nicotnicos produciendo una despolarizacin inicial, pero bloquean la accin subsecuente de los receptores. Ejemplo la succinilcolina.

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Estructura de la Succinilcolina
Objetivo Demostrar experimentalmente el efecto de la succinilcolina en la unin neuromuscular de ratones balb/c. Material, Equipo y Reactivos. MATERIAL BIOLGICO 4 ratones balb/c. MATERIAL Y EQUIPO 2 cajas para ratones. 1 rejilla para caja de ratones 4 jeringas de 1mL Vaso de precipitados de 1L

Mechero Bunsen con manguera Tripie Toalla o trapo absorbente Balanza granataria con canastilla para pesar animales Cronometro
REACTIVOS Solucin de succinilcolina Solucin salina Metodologa Prueba de escalada. 1- Por equipo tomar 4 ratones balb/c en una caja con tapa (reja). 2- Pesar cada uno de los ratones en una balanza con canastilla y registrar los valores marcando la cola de cada ratn para su posterior identificacin (del 1 al 4). 3- Inclinar la tapa de la caja de los ratones para que forme un ngulo de 80 con respecto a la mesa y poner a escalar cada uno de los ratones. Prueba de nado. 4- En una segunda caja para ratones colocar agua hasta a mitad. 5- Calentar agua con un mechero bunsen en un tripi y mezclar con el agua de la caja, midiendo la temperatura hasta obtener un valor entre 35C y 38C. 6- Tomar el ratn marcado con el nmero 1, que previamente ya escal la reja, e introducirlo con cuidado al agua para que nade 30 segundos aproximadamente. 7- Sacar de la caja y secar al ratn perfectamente con una toalla, cuidando mantenerlo caliente para evitar que muera por hipotermia. Administracin del frmaco y pruebas. 8- Por medio del peso del ratn y la concentracin de la solucin de succinilcolina hacer el ajuste para administrar al ratn 1 una dosis de 0.7 mg/Kg va intramuscular. 9- Inmediatamente despus repetir la prueba de escalada y registrar el tiempo que tarda el ratn en caer por no poderse sujetar correctamente.
Imagen 1. Prueba de escalada con rejilla a 80 de inclinacin.
Imagen 2. Prueba de nado en caja con agua a 35-38C.
Imagen 3. Administracin intramuscular en ratn.

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10- Sucedido lo anterior repetir la prueba de nado y registrar el tiempo que tarda el ratn en no poder nadar ms. 11- Repetir la prueba de escalada y de nado hasta que el efecto pas y registrar el tiempo transcurrido. 12- Continuar de la misma forma con los ratones 2 a 4 uno tras otro (No realizar las pruebas simultneamente) administrando dosis de 0.9 mg/Kg y 1.1 mg/Kg a los ratones 2 y 3. Al ratn 4 se le administra 0.1 mL/g de peso de solucin salina (Control). 13- Reportar los resultados en la siguiente tabla: Ratn 1 2 3 Control Dosis (mg/kg) Tiempo de latencia Tiempo de duracin del efecto Tiempo de recuperacin

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Cuestionario 1. Haga un esquema de la placa neuromuscular. 2. Cmo se clasifican los frmacos que actan en la unin neuromuscular? Indique cada grupo. 3. Describa el mecanismo de accin d la succinilcolina. 4. Menciona el perfil farmacocintico de la succinilcolina. 5. Usos clnicos y efectos adversos de la succinilcolina. 6. lnvestiga las interacciones farmacolgicas de la succinilcolina. 7. Qu pasa al estimular directamente el msculo?, Por qu? Referencias
1. Goodman, L.S. & Gilman A. 1996. The Pharmacological Basis of Therapeutics. 9a. edition. McGraw HiII. U.S.A. 2. Flores J. 2000. Farmacologa Humana. Masson Barcelona. 3. Rang H, Dale M. y Ritter J. 2000. Farmacologa. 4a. edicin., Harcourt. Espaa 4. Taylor M. y Reide P. 1999. Harcourt. Espaa. 5. Velasc A. 2003. Farmacologa. McGraw Hill. Espaa.
Prctica No. 3
Anestsicos Locales
LAS GRANDES MENTES SIEMPRE HAN ENFRENTADO LA OPOSICIN VIOLENTA DE MENTES MEDIOCRES.
Albert Einstein

Introduccin. Los anestsicos locales son frmacos que previenen o alivian el dolor al interrumpir la conduccin nerviosa. Cuando se aplica de manera local en el tejido nervioso en concentraciones apropiadas, actan en cualquier parte del sistema nervioso en cualquier tipo de fibra nerviosa. Este grupo de frmacos no produce inconciencia y su sitio de accin es la membrana celular de las clulas excitables, como la membrana nerviosa. El uso efectivo y seguro de los anestsicos locales requiere no solo que los frmacos bloqueen la conduccin de algunos nervios, sino tambin que esta accin sea rpida y totalmente reversible y que no tenga efectos txico sistmicos mayores. Mecanismo de accin: El aspecto singularmente mas importante de las acciones de los anestsicos locales es la reduccin del aumento transitorio de la permeabilidad al sodio asociada con la fase de ascenso es decir la despolarizacin- del potencial de accin. Esta reduccin de la permeabilidad al sodio se debe a los efectos de los frmacos sobre los canales de la membrana del sodio sensibles al voltaje. Los anestsicos locales son aminas de pKa que varia entre 8 y 9. Por lo tanto puede existir en solucin como la especie cargada (catinica) o no cargada, y el pH depender del medio, Fig. 3.1. La lidocana (xilocana) y la procana (novocana) se consideran agentes prototipo de los anestsicos locales. La lidocana introducida en 1948, actualmente es uno de los anestsicos locales ms ampliamente utilizados. La estructura se muestra en la Fig. 3.1. se utiliza como anestsico local en procedimientos odontolgicos, en el tratamiento de disritmias ventriculares (especialmente cuando estas se presentan ene le infarto de miocardio o en ciruga cardiaca), atenuacin de la respuesta vaspresora (presin arterial sistmica/presin intracraneana) en la intubacin y en la atenuacin de las fasciculaciones provocadas por succinilcolina.
Anestsicos Locales
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Fig. 3.1. Estructura qumica de un anestsico local

FARMACOCINETICA DE LA LIDOCANA: inicio, rpido: duracin, moderada (60-120 min); T1/2 1.6 h; Vd de 91 L; depuracin, 91 L/min; unin a protena del 65%. Efecto: antiarrtmico. Sedacin, bloqueo nervioso; disminuye la conduccin de los canales de sodio. Su eliminacin es por metabolismo heptico produciendo metabolitos activos y txicos; eliminacin renal (10% sin metabolizar). Toxicidad: los efectos adversos de la lidocana que se observan al aumentar la dosis consisten en vrtigo, convulsiones, desorientacin, bloqueo cardiaco o hipotensin arterial. Concentracin srica teraputica = 1.5 mg/L

Objetivos Por medio del uso de un programa de simulacin que el alumno aprenda el efecto de los anestsicos locales al aplicar un estimulo nervioso. Demostrar el bloqueo del impulso nervioso por la accin de un anestsico local, al aplicar un estmulo en una preparacin citico-gastrocnemio por medio del uso de un programa de simulacin. Que el alumno de manera practica conozca el efecto de los anestsicos locales al aplicar un estimulo nervioso (qumico, fsico o trmico). Material, Equipo y Reactivos. PARTE 1 (1 Sesin) MATERIAL BIOLGICO NO
REACTIVOS NO PARTE 2 (2 Sesin) MATERIAL BIOLGICO Lombrices de tierra. MATERIAL Y EQUIPO Termmetro Mechero Tripi Vaso de precipitados de 600 ml Aguja REACTIVOS Lidocana 2% Acido clorhdrico 0.1 N Metodologa Mtodo 1: Uso del Simulador
Anestsicos Locales
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MATERIAL Y EQUIPO Computadora personal con simulador instalado

1. DETERMINACION DEL ESTIMULO UMBRAL 1.1Seleccionar Fisiologa del impulso nervioso. 1.2Seleccionar en men EXPERIMENTO: Inhibir efecto nervioso. 1.3Fijar el voltaje a 1.0 V. 1.4Pulsar ESTIMULAR. 1.5Aumentar el voltaje en 0.5 V hasta obtener respuesta. 1.6Guardar el valor umbral. INHIBICIN CON LIDOCAINA 2.1Borrar grfica anterior. 2.2Seleccionar gotero con lidocana. 2.3Aplicar lidocana entre los electrodos. 2.4Pulsar ESTIMULAR y guardar. 2.5Presionar el botn LAVAR. 2.6Presionar ESTIMULAR y guardar.
2.
Anestsicos Locales
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REPETIR EL MISMO PROCEDIMIENTO EN EL SIMULADOR CON EL CURARE Y EL ETHER, REGISTRAR Y OBSERVAR LOS CAMBIOS QUE SE EFECTUAN AL ADICIONAR CADA SOLUCION. Mtodo 2: Uso de lombrices de tierra. 3. 3.1EFECTO DE LA LIDOCANA EN LOMBRIZ DE TIERRA. ESTMULO QUIMICO. 3.1.1- Tomar tres lombrices y colocarlas en una caja Petri. 3.1.2- Colocarles tres gotas de HCL 1.0N en la cola de la lombriz (zona ms anillada), observar la reaccin de la lombriz. 3.1.3- Despus de haber observado la reaccin de la lombriz colocarle unas gotas de lidocana dejar reaccionar aproximadamente 5 min. 3.1.4- Pasados los 5 min de efecto de la lidocana adicionar nuevamente unas gotas de HCl 0.1 N observar y registrar los resultados. ESTMULO TRMICO. 3.2.1- Calentar agua a 40C. 3.2.2- Colocar tres lombrices en una caja Petri. 3.2.3- Dejar caer de manera continua y con ayuda de una pipeta pasteur agua previamente calentada a 40 C y observar si reaccionan, de no ser as intentarlo con otras lombrices hasta ver que reaccionen. 3.2.4- Seguir calentando el agua hasta los 50 C. 3.2.5- Colocar unas gotas de lidocana e la cola de las lombrices dejar 5 min a que haga el efecto anestsico. 3.2.6- Pasados los 5 min verter de manera contante un poco de agua previamente calentada a 50 C. 3.2.7- Observar si reaccionan o no y registrarlo.
3.2-

3.3ESTMULO FSICO. 3.3.1- Colocar tres lombrices en una caja Petri. 3.3.2- Picar la cola de la lombriz (la zona ms anillada y mvil) con una aguja, observar la reaccin de la lombriz. 3.3.3- Adicionar unas gotas de lidocana y dejar hacer efecto por un aproximado de 5 min. 3.3.4- Tras pasar los 5 min volver a picar la cola de la lombriz con la misma aguja observar y registrar si hubo o no reaccin.
Referencias 1. William Catterall y Kenneth Mackie. Anestsicos locales. In Goodman and Gilman, las bases farmacolgicas de la teraputica, 9th ed. (Ardian JUL, Limbird LE, Molinoff PB, Rudon RW Eds). Ed. McGrawn-Hill. Inc., New York 1996. 2. Cedric M. Anestsia local y anestsicos locales. In farmacologa, 1. Ed. (Smith, CM., Reynard, AM Eds). Buenso Aires, Argentina, 1993, pp. 219-230 3. Mary J, Myce, Sheldon B, Gertner, Maria Mena Perper. In farmacology, Lippincotts illustrated Reviews. (Harvey RA., Champe PC Eds) J.B. Lippincott Company, 1992.
Anestsicos Locales
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Cuestionario 1. Mencione brevemente el mecanismo de accin de un anestsico local. 2. La estructura qumica de un anestsico local consta de: 3. En la preparacin citico-gastrocnemio, menciona el sitio de accin del anestsico local. 4. Que se observa al colocar los electrodos directamente en el msculo? 5. Usos clnicos de los anestsicos locales. 6. Por qu se tiene que descerebrar y desmedular a la rana en la preparacin citico-gastrocnemio? 7. Defina Umbral de excitacion 8. Al aadir un vasoconstrictor, como la adrenalina a un anestsico loca, la absorcin aumenta o disminuye.
Prctica No. 4 Anestsicos Generales
DIME Y LO OLVIDO, ENSEAME Y LO RECUERDO, INVOLUCRAME Y LO APRENDO.
Benjamin Franklin

Introduccin La definicin de anestesia general ha sufrido pocas modificaciones desde su descubrimiento en 1845, con las experiencias de Wells con xido nitroso y de Morton en 1846 con ter. Clsicamente, se la ha definido como una depresin descendente y controlada de las funciones del SNC inducidas farmacolgicamente. Otra forma ms prctica de definir la anestesia general es en funcin de los objetivos que persigue, como un estado reversible de depresin del SNC, caracterizado por prdida de la conciencia (hipnosis), de la sensibilidad (analgesia), de la actividad refleja (proteccin neurovegetativa) y de la motilidad (relajacin muscular). En la actualidad se habla de estado anestsico, que se define como el resultado de la accin combinada y dinmica de diversos efectos farmacolgicos que pueden aparecer por la activacin de diversos grupos de receptores, dando lugar a hipnosis, analgesia, bloqueo de la unin neuromuscular, amnesia y bloqueo de la respuesta vegetativa al estrs. Dinamismo (cambio de las necesidades de efecto farmacolgico) y sinergia (potenciacin de los efectos) son dos aspectos fundamentales en la combinacin necesaria para mantener este estado anestsico. Al obtener mayor informacin sobre el mecanismo de accin de los anestsicos generales, se han diferenciando dos componentes fundamentales en la representacin grfica del concepto de anestesia moderna. Un componente sera el cortical, que integrara inconsciencia y amnesia, y el segundo o subcortical, que correspondera a la antinocicepcin (analgesia) y la estabilidad motora y autnoma (relajacin muscular y proteccin neuro vegetativa). A pesar de las investigaciones realizadas, an no est claro el mecanismo de accin de los anestsicos generales. Se ha considerado que los agentes anestsicos generales eran frmacos de accin inespecfica que modificaban las propiedades fisicoqumicas de la membrana neuronal. Meyer y Overton postularon la teora de un lugar de accin lipofilo y relacionaron la potencia del anestsico con su solubilidad lipdica. En la actualidad se piensa que los anestsicos generales ejercen su efecto en la transmisin sinptica y no en la conduccin axonal. Actuaran fundamentalmente sobre protenas y no sobre lpidos, de forma que los estudios que se realizan en la actualidad se dirigen a los mecanismos moleculares de la anestesia. Una serie de receptores, canales de iones (Ca2+, K+) dependiente de voltaje, canales de iones dependientes de ligando (GABA, NMDA) y neurotransmisores se han considerado lugares especficos en los que actuaran los anestsicos generales. Coeficiente de particin sangre/gas. El agente inhalatorio pasa desde el alvolo a la sangre para luego llegar al cerebro. Este coeficiente informa de la solubilidad en sangre (agua) del frmaco y es, por lo tanto, inversamente proporcional a la rapidez de su accin. Coeficiente de particin aceite/gas. El tejido cerebral es rico en lpidos. Cuanto ms liposoluble sea el agente, ms se retendr en el SNC. Por lo tanto, es un ndice directamente proporcional a la potencia del agente anestsico.
Anestsicos Generales
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Etapas de la anestesia Perodo I: induccin-analgesia. Abarca desde el inicio de la anestesia hasta la prdida de conciencia. Se comprueba la ausencia de respuesta a las rdenes verbales, no hay prdida de respuesta al dolor, aunque el grado de analgesia depende del tipo de anestsico empleado. Perodo II: excitacin o delirio. La respiracin es irregular, hay retencin de la respiracin, posibilidad de laringospasmo y secreciones. El ritmo cardaco aumenta e incluso puede haber arritmias. La respuesta a estmulos fsicos est aumentada. Es el periodo de mayor peligro para el paciente porque pueden aparecer complicaciones, como obstruccin de las vas respiratorias superiores por relajacin de la musculatura de la faringe, laringospasmo, regurgitacin o aspiracin del contenido gstrico, acumulacin excesiva de secreciones e hipotensin secundaria a una depresin miocrdica o a vasodilatacin perifrica. Los dos primeros perodos constituyen la induccin, que se caracteriza por la prdida rpida de la conciencia y el paso al plano superficial de la anestesia quirrgica. Perodo III: anestesia quirrgica propiamente dicha: En este periodo, que incluye cuatro planos, la respuesta somtica a los estmulos disminuye progresivamente hasta ser nula en la anestesia profunda. Al principio, el ritmo cardaco y la frecuencia respiratoria son regulares, pero sta va deprimindose hasta presentar apnea. La frecuencia cardaca se mantiene estable en cuanto al ritmo, pero se inicia un ligero descenso de la presin arterial; se produce relajacin muscular. Perodo IV: parlisis bulbar. Se produce por depresin de los centros bulbares hasta el paro respiratorio, coma y muerte. Esta situacin puede ocurrir por un accidente anestsico al profundizar la anestesia. Tipos de anestesia general Segn el tipo de frmaco empleado para garantizar la hipnosis, se distinguen los siguientes tipos de anestesia: Monoanestesia. Se empleaba un solo frmaco. Este tipo era caracterstico en las anestesias con ter y cloroformo. Anestesia general balanceada. Generalmente se utiliza un inductor hipntico intravenoso, se mantiene con un agente inhalatorio y se combinan con opioides y relajantes musculares. Anestesia intravenosa total. Se emplea propofol como inductor y en perfusin para el mantenimiento de la hipnosis. Se prescinde por completo de los inhalatorios y se emplean analgsicos y relajantes musculares. Anestesia con induccin y mantenimiento inhalatorio total. Se emplea un agente inhalatorio para la induccin anestsica (generalmente sevoflurano) y se mantiene la hipnosis con l. No se utiliza propofol ni otros hipnticos intravenosos. Se combina con analgsicos centrales y relajantes musculares. Neuroleptoanestesia. Se empleaban neurolepticos (deshidrobenzoperidol) asociados a opiceos. Mayor efecto antiemtico, despertar ms lento. En desuso. Anestesia analgsica. Se basa en el efecto hipntico colateral de los opioides cuando se emplean en dosis muy altas. Muy empleada en ciruga cardaca.
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Anestesia disociativa. Se emplea ketamina como hipntico. No tiene efecto depresor cardiorrespiratorio y proporciona una analgesia eficaz.
Objetivo Demostrar la anestesia general en camarones, producida por frmacos o sustancias con propiedades anestsicas. Identificar las etapas de la anestesia general Identificar el tiempo en que produce su efecto el frmaco, y el tiempo de recuperacin del camarn Material, Equipo y Reactivos
MATERIAL Y EQUIPO Dos Peceras Bomba para oxigenacin Vaso de precipitados 500 mL Jeringas de 1 mL REACTIVOS
Halotano
Metodologa 1. Colocar los camarones en una pecera con oxigenacin, para observar su comportamiento inicial, si es necesario inducir el movimiento con ayuda de una varilla de vidrio, picando en los costados del camarn. 2. En otra pecera colocar 0.25 ml de Halotano en 500 mL de agua. 3. Colocar uno de los camarones en la pecera con halotano y picar de la misma forma con la varilla de vidrio. Registrar el tiempo de latencia. 4. Seguir registrando el tiempo de excitacin (sobrerreaccin al estmulo), hipnosis (movimiento pero no reaccin al estmulo) y anestesia (se voltea completamente de cabeza y se encorva) 5. Cambiar al camarn a la pecera con oxigenacin y registrar el tiempo de recuperacin. Imagen 2. Estimulo con varilla de vidrio.
Imagen 1. Camarn mediano y 3 camarones pequeos en pecera.
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MATERIAL BIOLGICO Cuatro camarones de tamao mediano.

6. A la pecera con halotano agregar otros 0.25 ml de este ANESTESICO y colocar al otro camarn. 7. Realizar el mismo procedimiento que con el primer camarn. Cuestionario 1. Cul es el mecanismo de accin de los anestsicos generales? 2. Mencione las etapas de la anestesia general. 3. Qu otros frmacos adems del halotano existen como anestsicos generales? 4. Qu otras sustancias se administran en conjunto con los anestsicos generales y cmo funcionan? 5. A qu se refiere el CAM de un anestsico general y que representa? 6. Qu es el coeficiente de particin? Referencias 1. Goodman & Gillman's, Las bases Farmacolgicas de La teraputica, 10a ed., Me. Graw Hill, Mxico 2003 2. BertrandG. Katzung, Farmacologa Basica y Clnica, 8a ed., Manual Moderno, Mxico 2002 3. C. Barastegui Almagro. Esquemas y Prcticas de Farmacologa. Editorial Espax, 1976, Barcelona, Espaa.
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Prctica No. 5
Valoracin del Efecto Anticonvulsivante
LA ENFERMEDAD DEL IGNORANTE ES IGNORAR SU PROPIA IGNORANCIA.
Amos Bronson Alcott

Introduccin El trmino epilepsia, es una enfermedad crnica que se refiere a un grupo de sndromes del SNC, caracterizado por accesos de descargas neuronales sincrnicas sostenidas, los cuales son sbitos, transitorios y recurrentes. Afectan los siguientes sistemas: autonmico, psquico, sensitivo y motor, creando gran variedad de signos y sntomas. El trmino convulsin se utiliza como sinnimo de epilepsia. La etiologa es multifactorial (causas metablicas, defectos cerebrales congnitos, prenatales, perinatales (durante el parto), postnatales y convulsiones provocadas por agentes qumicos). Como ejemplos tenemos: hipoglucemia, hidrocefalia, infecciones, dao cerebral por parto prolongado, cisticercosis y las provocadas por pentilentetrazol, etc. Son varios los mecanismos neurofisiolgicos y bioqumicos que intervienen en la enfermedad: cambios bioqumicos locales, isquemia, prdida de sistemas inhibitorios vulnerables, descargas sincrnicas de otras clulas, etc. Las crisis epilpticas se clasifican en: 1- Parciales (focales y locales) a. Parciales simples b. Parciales complejas c. Parciales generalizadas de tipo secundario 2- Crisis Generalizadas Convulsivas o No Convulsivas a. Crisis de ausencia b. Crisis de ausencia atpicas c. Mioclnicas d. Clnicas e. Tnicas f. Tonico clnicas (Gran Mal) status epilptico g. Atnicas Por lo tanto, para tratar la epilepsia se debe descartar si hay un solo tipo de crisis o si se presentan varios tipos ya que de eso depende un buen tratamiento. Los anticonvulsivos se clasifican en varios grupos para tratar los diferentes tipos de crisis: 1- Hidantoinas: hidantoina (Canales de Na+) 2- Iminoestilbenos: carbamazepina (Canales de Na+) 3- Barbitricos: fenobarbital (Mediadores GABA) 4- Desoxibarbitricos: primidona 5- Succimidas: etosuccimida (Canales de Ca2+) 6- Oxazolindionas: parametadiona (Canales de Na+) 7- Benzodiacepinas: diacepam (Mediadores GABA) 8- Otros grupos: cido valproico (Canales de Na+)

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Los ms utilizados para crisis generalizada son las hidantoinas y la carbamazepina y para las ausencias la etosuccimida. Para el estado epilptico el ms recomendable es el Diazepam.
Estructura del Diazepam El mecanismo de accin de los anticonvulsivos (del tipo benzodiacepinas) es disminuir la entrada de calcio por bloqueo de los conductos de sodio (despolarizacin) y potenciar los efectos inhibitorios debido a la estimulacin de vas GABAergicas por aumento de descargas de abertura de los canales de cloro. Para la valoracin de nuevos medicamentos, se utiliza el pentilentetrazol para crear crisis convulsivas. Esto provoca hipoxia por espasmo vascular lo que ocasiona cambios degenerativos en la corteza cerebral debido al antagonismo fisiolgico.
Objetivos Demostrar el efecto anticonvulsivante del diazepam en las convulsiones producidas por el pentilentetrazol, Observar que tipo de convulsiones produce el pentilentetrazol.
Material, Equipo y Reactivos MATERIAL BIOLGICO Dos ratas Wistar MATERIAL Y EQUIPO Dos jeringas para insulina REACTIVOS Solucin de Pentilentetrazol de 65 mg/mL Diazepam de 5 mg/mL

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Metodologa 1. Pesar cada rata y marcarlas, una se usar para probar el efecto preventivo y en la otra el efecto curativo del diazepam. 2. En la rata marcada como 1,administrar diazepam 2mg/kg va intraperitoneal 3. Esperar 20 minutos. 4. Aplicar una dosis de pentilentetrazol 64mg/kg va intraperitoneal. 5. Observar si se presenta algn tipo de convulsin. 6. En caso de que ocurra se anota la latencia del pentilentetrazol y tipo de convulsin. 7. Para observar el efecto curativo del diazepam, administrar a la rata marcada como 2, una dosis de 64mg/kg de pentilentetrazol va intraperitoneal. 8. En cuanto aparezca la convulsin aplicar la dosis de diazepam 2mg/ kg va intraperitoneal. 9. Tomar el tiempo de latencia para el inicio del efecto del diazepam. 10. Realizar el sacrificio de los animales con ayuda de cloroformo. 11. Anote sus resultados en las siguientes tablas Tabla 1: Anlisis del efecto Preventivo Equipo 1 2 3 4 5 6 Tabla 2: Anlisis del efecto Anticonvulsivo Equipo 1 2 3 4 5 6 Tiempo de latencia del Diazepam No Convulsion Tiempo de latencia del Pentilentatrazol No Convulsion

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Cuestionario 1. Defina estado epilptico 2. Escriba la clasificacin de las crisis convulsivas 3. Escriba la clasificacin de los anticonvulsivos 4. Escriba y analice el mecanismo de accin de los anticonvulsivos 5. Cules son los efectos adversos generales de los anticonvulsivantes? 6. Describa la farmacocintica del Diazepam 7. Cules son los efectos adversos del Diazepam? 8. Cules son los usos clnicos del Diazapam y del Pentilentetrazol? 9. Cules son las interacciones del Diazepam? Referencias 1. Hardman, J. Limbird L. Molinof P. Ruddon R. and Goodman A. 1996. Goodman & Gilman. Las Bases Farmacolgicas de la Teraputica. 9 Edicin. Vol. 1. Ed. McGraw Hill Interamericana. E.U. 2. Katzung, B. 2001. Farmacologa Bsica y Clnica. 8 Edicin. Ed. Manual Moderno, Mxico. 3. Smith, C. Reynard A. 1993. Farmacologa. Ed. Mdica Panamericana. Argentina.

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Prctica No. 6
Frmacos Cardiotnicos
UNA COSA ES DEMOSTRAR A ALGUIEN QUE EST EQUIVOCADO Y OTRA MUY DISTINTA, ENSEARLE LA VERDAD
J. Locke

Introduccin Los digitlicos son los cardiotnicos ms antiguos utilizados en el tratamiento de la insuficiencia cardiaca congestiva (lCC). Son sustancias de origen natural, cuya fuente importante de obtencin es la Digitalis purprea o Digitalis lanata y el prototipo es la digoxina, medicamento compuesto por un ncleo esteroidado con un anillo lactona de cinco miembros no saturados en posicin 17 y una serie de azcares unidos al carbono 3 del ncleo, cuya relacin estructura-actividad le confiere las actividades farmacocinticas y farmacodinmicas. Siendo el ncleo esteroide y la lactona responsables de su actividad cardiotnica, los residuos glucosdicos influyen en la absorcin, la vida media y su biotransformacin.
Actividad Farmacocintica Actividad Farmacolgica
Digoxina La digoxina tiene un margen de seguridad muy estrecho, lo que lleva a presentar con facilidad efectos txicos. Su mecanismo de accin molecular lo ejerce inhibiendo la Na+, K+ ATPasa lo que se manifiesta en mltiples efectos cardiovasculares tanto directos como indirectos, asi como modificacin del funcionamiento mecnico y elctrico del corazn lo que se traduce en aumento de la fuerza de contraccin o inotropismo positivo y una disminucin del automatismo y decremento en la velocidad de conduccin del sistema de Purkinje o conotropismo negativo. Los efectos txicos de estas sustancias son en gran medida consecuencia de una manifestacin exagerada de su mecanismo de accin como sera: bradicardia y paro sinusal, bigeminismo, bloqueo aurculo-ventricular de segundo grado y otros tipos de arritmias cardiacas, hasta llegar al paro cardiaco. Todas estas manifestaciones, tienden a ser compensadas o antagonizadas por el Sistema Nervioso Autnomo del organismo como el sistema Simptico y Parasimptico.
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Objetivo Se alcanzar y demostrar el efecto txico de un glucsido cardiaco (digoxina) aplicado al corazn de la pulga de agua Se demostrarn los efectos inotrpicos positivos y cronotrpico negativos de la digoxina aplicada al corazn de la pulga de agua Se compararan los efectos producidos de la digoxina con otras substancias cardiotnicas administradas a la pulga de agua Material, Equipo y Reactivos. PARTE 1 (1 Sesin) MATERIAL BIOLGICO NO MATERIAL Y EQUIPO Computadora personal con simulador instalado REACTIVOS NO PARTE 2 (2 Sesin) MATERIAL BIOLGICO Pulgas de agua (1 bolsa por grupo) MATERIAL Y EQUIPO Microscopio Cronometro 1 Caja de Petri 2 Pipetas Pasteur 6 jeringas de 1 ml 2 Portaobjetos REACTIVOS Digoxina Epinefrina Atropina Pilocarpina Solucin de cloruro de sodio al 2% p/v Solucin de cloruro de potasio al 2% p/v Solucin de cloruro de calcio al 2% p/v
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Metodologa Mtodo 1: Uso del Simulador 1.1.Estimulacin elctrica 1.1.1 Seleccionar el ejercicio de Fisiologa cardiovascular de rana en el men principal 1.1.2 En la barra superior dar click a experimento y seleccionar Estimulacin elctrica 1.1.3 Tomar el electrodo para la estimulacin directa, y colocarlo en el soporte 1.1.4 Observar el ritmo cardiaco basal y proceder a estimular el corazn Ensayar para estimulos simples y mltiples. 1.1.5 Una vez visualizados los efectos proseguir con la estimulacin del nervio vago con el otro electrodo. 1.2. Modificadores de la frecuencia cardiaca 1.2.1 Seleccionar el experimento de frecuencia cardiaca en la barra superior 1.2.1 observar la frecuencia cardiaca y guardar datos 1.2.2 Seleccionar una solucin y aplicar sobre el corazn de la rana 1.2.3 Dejar actuar y guardar datos hasta que el ritmo se marque como estable 1.2.4 Enjuagar con la solucin Ringer a 23C 1.2.5 Ensayar con las otras soluciones y con el efecto de la temperatura Mtodo 2: Uso del Simulador 2.1 Coloque suficiente agua que contenga a las pulgas de agua en una caja de Petri y con una pipeta Pasteur tome una pulga de agua. 2.2 Deposite la pulga de agua sobre un portaobjeto cuidando de no dejar un excedente de agua. 2.3 Enfoque a la pulga de tal manera que pueda observar claramente los latidos del corazn. 2.4 Cuente los latidos durante quince segundos y tmelo como una medida basal; el conteo se realiza entre dos personas, la primera indicara el inicio y fin de los 15 segundos y la segunda Imagen 1. persona contara los latidos. Pulga de agua vista a 10x en el 2.5 Aada una gota de una de las microscopio. En la parte trasera substancias a evaluar, deje que se puede observar fcilmente el acte por un minuto y proceda a corazn.
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contar los latidos por 15 segundos. 2.6 Evale cada substancia con una pulga diferente y registre el efecto presentado en una tabla indicando si el efecto fue positivo o negativo. Substancia Efecto Digoxina Epinefrina Atropina Pilocarpina Calcio Sodio Potasio Cuestionario 1. Qu es un cardiotnico y que un glucsido cardioactivo, anotar ejemplos? 2. Cul es la relacin estructura -actividad de los glucsidos cardioactivos? 3. Qu diferencias farmacocinticas existen entre los digitlicos? 4. Qu parte de la estructura del digitlico le da las propiedades farmacocinticas? 5. Cul es el mecanismo de accin de los glucsidos cardioactivos y como se manifiesta en la funcin cardiaca? 6.Cules son los efectos txicos de los glucsidos cardioactvos? 7.Cules sern los usos o indicaciones de los glucsidos cardioactivos? 8. Haga un esquema de la anatoma de la pulga de agua, localice el corazn e indique cuntos latidos realiza por minuto Referencias 1. Goodman & Gillman's, Las bases Farmacolgicas de La teraputica, 10" ed., Mc. Graw Hill, Mxico 2003 2. Bertrand G. Katzung, Farmacologa Bsica y Clnica, 8a ed., Manual Moderno, Mxico 2002 3. Barastegui, AC, Esquemas y prcticas de Farmacologa. Espaxs, Espaa 1976. Inotropismo Cronotropismo
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Prctica No. 7
Diurticos
TRISTE ES LA OCIOSIDAD, DAOSA LA INTEMPERANCIA, PESADA LA IGNORANCIA.
Filosofa Griega

Introduccin Los diurticos (o salurticos) son frmacos que incrementan la produccin de orina (diuresis) y la excrecin de sodio (Na). Actan principalmente sobre el rin, inhibiendo la reabsorcin de NaCI y agua, aumentando por tanto la excrecin urinaria de estas sustancias. Se utilizan principalmente para el tratamiento del EDEMA. Fisiologa De La Nefrona Los riones controlan el volumen del fluido extracelular ajustando la excrecin de NaCI y H20. Diariamente los riones filtran ms de 22 moles de Na+, los cuales se reabsorben por los tbulos renales, para mantener el equilibrio. El cuerpo mantiene la presin sangunea a expensas del volumen del fluido extracelular. Cuando la ingesta de NaCI es mayor que su eliminacin (p.ej. en falla congestiva cardiaca o falla renal) se desarrolla edema. La reabsorcin de sodio se debe primeramente a la adenosin trifosfatasa (ATPasa) localizada en la parte lateral de la membrana de las clulas epiteliales del nefrn. La bomba de Na+/K+ necesita energa para intercambiar un Na+ por cada dos K+, manteniendo una baja concentracin de Na+ y alta concentracin de K+ en el interior de la clula. En el lado de la luz tubular, existen vas pasivas para el movimiento del Na + electroqumico del lumen a la clula. Esas clulas son las bases fisiolgicas de la accin diurtica. Farmacologa De Los Diurticos. EL primer acierto de los diurticos es la reduccin del edema por reduccin del volumen del fluido extracelular, y para que esto ocurra, la secrecin de Na+ deber exceder a su ingesta. En principio, los diurticos previenen la entrada de Na+ a las clulas tubulares. Una vez que el diurtico entra al fluido tubular, el sitio de la nefrona donde acta determina su efecto. Es decir, el sitio de accin determina tambin que otros electrolitos, adems del Na+, sern afectados. Todos los diurticos, excepto la ESPIRONOLACTONA, ejercen sus efectos en el lado luminal de la nefrona. Por eso deben alcanzar el fluido tubular para tener efecto. Por ejemplo, el manitol lo hace por filtracin en los glomrulos; los dems diurticos, como estn fuertemente enlazados a las protenas, se filtran escasamente, llegando al lumen por secrecin a travs del tbulo proximal (va secretoria de bases y cidos orgnicos). El bajo flujo sanguneo renal o falla renal, disminuyen la eficacia de los diurticos, as como drogas que compiten por la bomba secretoria como el PROBENECID para las drogas cidas, o la CIMETIDINA para drogas bsicas. Diurticos Con Accin En El Tbulo Contorneado Proximal. El tbulo proximal determina el grado de liberacin de Na+ y H20 a zonas ms lejanas de la nefrona. Una amplia variedad de transportadores acoplan el paso del Na+ al interior de la clula, al movimiento de aminocidos, glucosa, fosfato, y otros solutos, MANITOL: ES un diurtico osmtico no metabolizable y es filtrado haca el espacio tubular incrementando la osmolalidad del fluido tubular. Esto trae como consecuencia
Diurticos
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reabsorcin aumentada de fluido resultando en excrecin aumentada de agua acompaada de un poco de Na+. Inhibidores De La Anhidrasa Carbnica (Acetazolamida) El bicarbonato se reabsorbe en el tbulo proximal. El in H+ es secretado al lumen en donde se une con bicarbonato filtrado (HC03+) para formar H2C03 el cual es convertido en H20 y C02 por accin de la anhidrasa carbnica. EL C02 difunde al tbulo proximal en donde se combina con H20 para formar H2C03, el cual a su vez forma H+ y HC03+. Este ltimo sale del tbulo hacia la sangre, mientras H+ es secretado nuevamente a la luz tubular, resultando en reabsorcin de HC03+. Si la actividad de la anhidrasa carbnica se reduce, la reabsorcin de HC03+ tambin disminuye y la sale al tbulo proximal en cantidades mucho ms grandes. Aunque el Na+ es el principal catin que acompaa la salida del HC03+ del tbulo proximal, se reabsorbe ampliamente en el tbulo distal el intercambiado por K+. Por lo tanto, la ACETOLAMIDA causa principalmente un incremento de HC03+\ K+ y H20 urinario. Diurticos De Asa Actan principalmente bloqueando el co-transportador de Na+/K+/Cr en la membrana apical de la rama ascendente del asa de Henle. Como en este sitio se concentra y diluye la orina, los diurticos de asa disminuyen al mximo la concentracin y dilucin urinaria. En esta parte ascendente del asa se reabsorbe Ca++ y Mg++, proceso dependiente de la reabsorcin normal de Na+ y CI-. Por lo tanto los diurticos de asa incrementan la excrecin urinaria de agua, Na+, K+, Ca++ y Mg++. EJEMPLOS: Furosemida, bumetanida y cido etacrinico.
Diurticos De Tbulo Contorneado Distal. Tiazidas y drogas anlogas inhiben el transporte de Na+ y CI- a nivel de tbulo distal. A comparacin de los diurticos de asa, poseen accin diurtica suave o moderada debido a que en esta parte del glomrulo se reabsorbe menos Na+. Adems, si los rangos de filtracin glomerular declinan, menos fluido llegar al tbulo distal y las tiazidas tendrn un impacto mnimo sobre la excrecin de agua y Na+. EL uso de la tiazidas incrementa la reabsorcin de fluidos y solutos en el tbulo proximal. Se manifiesta un incremento de la absorcin de Ca++ y cido rico en el tbulo proximal. Diurticos de Tbulos Colectores. ESPIRONOLACTONA: ES un antagonista competitivo de la aldosterona. Bloquea la reabsorcin de Na estimulada por aldosterona y la excrecin de K+ y H+ en tbulos distal
Diurticos
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y colector. Tambin reduce la amoniognesis estimulada por aldosterona a lo largo del nefrn. AMILORIDE Y TRIAMTERENE: Inhiben el canal de Na+ en la membranas apicales de los tbulos distal y colector. Debido a que en esta zona de la neurona la secrecin de K + y H+ se explican principalmente por los gradientes electroqumicos generados por la reabsorcin de Na+, se reduce el transporte de K+ e H+ haca la orina. El estudio de estos frmacos generalmente se basa en la determinacin de la diuresis y en los electrolitos eliminados al administrar estos frmacos en animales de experimentacin. Para ello se recomienda usar ratas o perros debido a que su patrn de excrecin urinaria es ms regular. Los mtodos que nicamente miden diuresis son cualitativos, como el usado en esta prctica. Existen otros mtodos para estudiar mecanismos y sitio de accin de estos medicamentos (mtodos de aclaracin renal, mtodos de diuresis interrumpida, mtodos de micropuncin y mtodos de microperfusin en segmentos de la nefrona). Objetivo Demostrar la diuresis en ratas producida por frmacos o sustancias con propiedades diurticas.
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Material, Equipo y Reactivos MATERIAL BIOLGIO 1 Rata Wistar de 150-200 gramos de peso, de preferencia del mismo sexo y edad. MATERIAL Y EQUIPO Jaula Metablica Probeta Graduada Balanza Granataria Jeringas de 1 y 5 mL REACTIVOS Solucin fisiolgica (NaCI 0.9 %), que se utiliza como control negativo. Furosemida (Control positivo) Metodologa Pesar e identificar a cada animal de experimentacin. 2. Al grupo control negativo (sin tratamiento) se administra 25 mL/kg de solucin salina va I.P. 3. Al grupo control positivo (con tratamiento) se le administrar por va I.P. 25 mL/kg de solucin salina ms una dosis de furosemida (20 mg/kg de peso).
1.
4. 5. 6. 7. 8.
Se colocan las ratas en jaulas metablicas durante 2.5 horas. Se mide el pH y el volumen de orina excretada cada 15 minutos, durante las 2.5 horas. Se determina la orina acumulada durante las 2.5 horas. Terminado el experimento, se retiran los animales de las jaulas metablicas. Determinar y tabular: pH, densidad y volumen de cada una de las muestras.
CLCULOS: Realizarlos siguientes clculos para cada animal de experimentacin: Excrecin urinaria:
Accin Diurtica:
Diurticos
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Cuestionario
1.
2. 3. 4. 5.
El mtodo usado en este experimento permite determinar la diuresis de diferentes frmacos, es suficiente para evaluar el efecto diurtico? Diga que otro tipo de anlisis realizara y porqu. Qu otros mtodos existen para investigar el mecanismo de accin de los diurticos? La eleccin de la rata como animal de experimentacin, es correcta? Fundamente su respuesta. Esquematice el mecanismo de accin de la furosemida. Indica los factores fisicoqumicos involucrados en la accin de los diurticos en general.
Referencias
1.
2.
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6. 7. 8. 9. 10.
11.
FLISER D, SCHROTER M, NEUNECK M, RITZ E. Coadminis-tration of thiazides increases the efficacy of loop diuretics even in patients with advanced renal faiiure. Kidney int 199;446(2):482-8. SUKI WN, STINEBAUGH BJ, FROMMER JP, EKNOYAN G. Physiology of diuretic action. En: Seldin DN, Giebisch G. eds. The kidney: physiology and pathophysiology. New York: Raven, 1985:2127-62. BYERS J, GOSHORN J. How to manage diuretic therapy. Am J Nurs 1995;95(2):38-43. MELILLO L. Diuretic plants in the paintings of Pompeili. Am J Nephrol 1994;14(4-6):4235. VAN MEYEL JJ. Comparison of the diuretic effect and absorption of a single dose of furosemide and free and the fixed combinations of furosemide and triamterene in hearthy male adults. EUR J CLIN PHARMACOL 1990;39(6):595-7. KANG MJ, YOON WA, KIM ON, LEE MG. Effects of water deprivation for 48 hours on the farmacodynamics of furosemide in rats. J Clin Pharm Ther 1995;20(1): 13-21. Goodman & Gillman's, Las bases Farmacolgicas de La teraputica, 10a ed., Me. Graw Hill, Mxico 2003 BertrandG. Katzung, Farmacologa Basica y Clnica, 8a ed., Manual Moderno, Mxico 2002 C. Barastegui Almagro. Esquemas y Prcticas de Farmacologa. Editorial Espax, 1976, Barcelona, Espaa. Cairo M., Fresneda M.V., Campos D. Determinacin del efecto diurtico de Cymbopogon citratus (DC) Stapf (Caa Santa). Rev. Cubana Plant. Med. 1(3): 1317, sept.-dic. 1996. Nedi, T. ET AL Diuretic effect of the crude extraets of CARISSA EDULIS in rats. Journal of Ethnopharmacology 2004; 95: 57-61
Diurticos
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Prctica No. 8
Efecto de los Frmacos Hipoglucemiantes
NO TENGO NINGN TALENTO ESPECIAL. LO QUE SOY ES APASIONADAMENTE CURIOSO.
Albert Einstein

Introduccin Una de las enfermedades ms importantes a nivel mundial, que es un serio problema de salud publica y que ataca a toda sociedad sin importar su estado de desarrollo de la DIABETES MELLITUS, el 8.2% de la poblacin entre los 20 y 69 aos de edad la padecen y cerca del 30% de estos individuos afectados desconoce si es diabtico. Adems ocupa el tercer lugar de la mortalidad. En condiciones normales el control del metabolismo de los carbohidratos se da por un antagonismo fisiolgico entre dos hormonas: la insulina, que disminuye la glucemia mientras que el glucagn la aumenta. Ambas son secretadas por el pncreas en lugares diferentes, la insulina en las clulas y el glucagn en las clulas de los islotes de Langerhans. La DIABETES MELLITUS TIPO I (Diabetes Juvenil), se desencadena por la destruccin de las clulas produciendo carencia de insulina y por lo tanto hiperglucemia, por lo que, quienes la padecen son candidatos a la administracin de insulina como terapia de sustitucin. La Diabetes Mellitus tipo II se desencadena por factores metablicos incluyendo una funcin deficiente de las clulas beta y la resistencia a la insulina en musculo esqueltico, tejido adiposo e hgado, actualmente se sabe que su origen es gentico. El tratamiento en este caso se sabe que es con el uso de hipoglucemiantes orales con diferentes mecanismos de accin. Secretagogos de insulina: nitaglenida, repaglinida y sulfonilureas (estimulan a las clulas beta del pncreas para incrementar la liberacin de insulina) Antihiperglucemiantes: inhibidores de alfa glucosidasas, (retrasan la absorcin de los carbohidratos en la luz intestinal), las biguadinas y las tiazolidinedionas (aumenta la sensibilidad de la insulina).

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En el caso de la prctica nos enfocaremos a dar las caractersticas generales de la insulina que es el frmaco a evaluar como hipoglucemiante. La insulina es una protena sintetizada en las clulas beta en los islotes de Langerhans en el pncreas y est formada por dos cadenas peptdicas (A con 21 aminocidos, B con 30) unidas por dos puentes disulfuro. Su funcin fisiolgica es promover la captacin de glucosa por las clulas de todos lo rganos, pero los sitios especiales para el almacenamiento de sta, es el hgado, tejido adiposo y musculo esqueltico. Su mecanismo de accin se da cuando se une a un receptor en la membrana celular, desencadenndose una seria de fosforilaciones incluyendo la del transporte de glucosa que al estar fosforilado promueve la captacin de sta al interior de la celular.
Fig.7.1 Mecanismo de accin de la insulina a nivel celular y molecular

Antiguamente se utilizaban insulinas de origen bovino y porcino que hasta ahora ya han desaparecido del mercado. Hoy en da todas las insulinas humanas sintetizadas por ingeniera gentica (DNA reconbinante) por lo que estn purificadas y solo contiene una fraccin proteica de la insulina. El nico factor que las diferencia es la duracin de accin, razn por la cual se adquieren en preparaciones inyectables que retardan la liberacin. Dicho retardo se logra: Mediante la unin a otras protenas (protamina) Mediante una cristalizacin
Dependiendo de cada sistema de retardo de su accin las insulinas pueden ser rpidas, intermedias y lentas. La va de administracin adecuada para pacientes ambulatorios es la subcutnea, solo en coma diabtico se usa la va intravenosa y es recomendable la accin rpida en estos casos. Como una alternativa a un futuro corto, se esta evaluando la administracin por va inhalatoria; ya se estn realizando estudios donde se observa que la tendencia de preferencia de los pacientes varia en un 10% con respecto a la va de administracin convencional.
Objetivo Demostrar el efecto hipoglucemiante de la insulina en ratas hiperglucemicas, determinando la concentracin de glucosa en sangre.
Material, Equipo y Reactivos MATERIAL BIOLGICO 1 Rata MATERIAL Y EQUIPO 3 jeringas de insulina 3 jeringas de 10 mL Reloj Equipo para bao Mara REACTIVOS Tiras reactivas para la medicin de glucosa en sangre.

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Metodologa En este procedimiento la evaluacin del frmaco (insulina) se lleva acabo comparando el efecto hipoglucmico en el animal experimental contra controles, un positivo (previamente cargado de solucin glucosada) y un negativo manipulado igual que el de experimentacin y C+, en vez de solucin glucosada se le administra el mismo volumen de solucin salina. A ningn control se le administra insulina. Esto es con el fin de que se vea el efecto del frmaco administrado exgenamente contra el efecto ms lento que se observar de la insulina endgena previa estimulacin por la carga de glucosa (control (+) ) y el control (-) servir como referencia de la concentracin de glucosa normal y para asegurar que la disminucin de glucosa en sangre del animal experimental se debe al frmaco y no a la manipulacin. 1.- Marcar las ratas del 1 al 4. Tomar una muestra a tiempo cero antes de manipular al animal, para obtener el valor basal de glucosa. La muestra se toma realizando una incisin en la arteria caudal de la cola de la rata. 2.- La rata marcada ser utilizada segn la siguiente indicacin Rata 1 (control -): Administrar por va intraperitoneal 7mL de solucin salina. Rata 2 (control +): Administrar por va intraperitoneal 7mL de solucin glucosada. Rata 3 (experimental): Administrar por va intraperitoneal 7mL de solucin glucosada. Rata 4 (experimental): Administrar por va intraperitoneal 7mL de solucin glucosada. 3.- Tomar muestra cada 10 minutos hasta los treinta minutos. 4.- Para observar la absorcin de glucosa; despus de la ltima toma administrar el volumen correspondiente de solucin salina, insulina o matarique, dependiendo del nmero de rata: Rata 1: Administrar el volumen correspondiente de solucin salina va subcutnea. Rata 2: Administrar el volumen correspondiente de solucin glucosada va subcutnea. Rata 3: Administrar 3 unidades de insulina va subcutnea. Rata 4: Administrar el volumen correspondiente de la infusin de matarique. 5.- Posterior a esta administracin tomar muestras cada 15 minutos hasta los 90 minutos o hasta alcanzar el nivel basal de glucosa. 6.- La determinacin de la concentracin de glucosa se realiza por medio de tiras reactivas (ver las instrucciones para correcta lectura del resultado), la lectura la deber realizar una sola persona. Con los resultados obtenidos construya una grfica de concentracin de glucosa contra el tiempo.

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Nota: conjuntar los resultados de todo el grupo para sacar promedio y graficar como se indica anteriormente. Cuestionario 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. Indica la clasificacin de la Diabetes Mellitus. Qu es la insulina? Qu son los hipoglucemiantes orales? Cules son las vas de administracin de la insulina? Explique el mecanismo de accin de la insulina? Por qu razn la insulina no se administra por va oral A qu se refiere el trmino de antagonismo fisiolgico entre la insulina y el glucagn? 8. Qu importancia tienen los controles utilizados en la prctica? Referencias Tbar Mass F J y Escobar Jimnez F. Diabetes mellitus en la prctica clnica. Argentina; Medica panamericana. 2009. Goodman Luis S y Gilman Alfres. Bases farmacolgicas de la teraputica. 5 ed. Mxico; Interamericana.1978. 1281- 1285 Rang H.P et al. Farmacologa 6 ed. Espaa: Elsevier. 2008. 397- 408

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Anexo Prctica 3: Simulador
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Anexo Prctica 7: Valoracin

Janet Edith Santamara Vquez
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Anexo Prctica 7: Valoracin
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