Sterilizarea

DEFINITII 1.Sterilizarea -distrugerea tuturor microorganismelor patogene/nepatogene de pe o suprafata/din interiorul unor obiecte -se poate face prin: caldura , cu substante chimice , cu radiatii ionizante, prin filtrare 2.Dezinfectia -distrugerea UNOR microorganisme in special patogene -se face prin:caldura,radiatii,substante chimice

3.Asepsia -ansamblul masurilor luate pentru prevenirea contaminarii unor materiale si organisme cu microorganisme. 4.Antisepsie -distrugerea/indepartarea temporara a formelor vegetative microbiene de pe substraturile vii(mucoase,tegumente,plagi)cu ajutorul antisepticelor
5.Antiseptic -substanta chimica netoxica pentru tesuturile vii,cu actiune reversibila ,bacteriostatica asupra microorganismelor

In alegerea metodelor folosite pentru sterilizare trebuie sa se tina cont de:

1.sensibilitatea microorganismelor fata de actiunea unor factori de mediu externi 2.calitatile fizice si chimice ale materialului supus sterilizarii

I.Sterilizare prin caldura : a.uscata 1.incalzire la incandescenta 2.sterilizare cu aer supraincalzit b.umeda 1.sterilizare prin vapori sub presiune(autoclavare)

Metode de sterilizare prin caldura uscata

1.Incalzirea la incandescenta
-mentinerea obiectului in flacara pana devine rosu,dupa care se lasa sa se raceasca la temperatura camerei. -se aplica pentru ANSA BACTERIOLOGICA inainte si dupa fiecare folosire -microorganismele sunt carbonizate 2.Sterilizarea cu aer supraincalzit Se realizeaza- in cuptorul Pasteur (sau Poupinel) - 180C ,1h Determina carbonizarea : -microorganismelor -formelor vegetative /spori

Se aplica pentru obiecte din sticla/ portelan NU se aplica obiectelor cu parti metalice, a celor din cauciuc, lichide

Cuptorul cu aer cald (Poupinel)

Controlul sterilizarii se urmareste prin: -controlul temperaturii interioare cu termonetrul -culoarea hirtiei / dopurilor din vata care trebuie sa fie galbuie.

3.Autoclavarea -cea mai sigura metoda de sterilizare -formele vegetative si sporii sunt distrusi -h=30min,p=1 atm,120C In autoclav se sterilizeaza : -medii de cultura -material infectios -obiecte de cauciuc -casete cu material chirurgical NU se sterilizeaza-lichide alterabile peste 100C

Autoclave

Controlul sterilizarii in autoclav

Se realizeaza prin:- teste chimice - teste biologice -termometre

Testele chimice:
-se folosesc tuburi din sticla ce contin substante sub forma de pulbere cu punct de topire cunoscut in jur de 120C (parachinona, sulf, acid benzoic) -se aseaza in autoclav odata cu obiectele de sterilizat -daca in autoclav s-a ajuns la temp. de topire a acestor substante, dupa deschiderea autoclavului se va observa ca sint solidificate in bloc.

Teste biologice:
-se folosesc culturi sporulate de Bacillus anthracis cu care se impregneaza fire de bumbac -se introduc in tubusoare -daca s-a atins 120C sporii sunt distrusi iar reinsamantarea lor pe medii de cultura nu va fi urmata de o dezvoltare a culturii de bacili carbunosi

II.Filtrarea -metoda de sterilizare la rece -microorganismele sunt retinute de o substanta poroasa -este aplicata solutiilor denaturabile termic -dupa filtrare este obligatoriu controlul sterilitatii solutiei (filtratul este insamantat pe medii de cultura adecvate ,este termostatat si poate ficonsiderat steril daca in 24-48 de ore nu se dezvolta nici o colonie)

A typical set-up in a microbiology laboratory for filtration sterilization of medium components that would be denatured or changed by heats sterilization of medium components

Controlul calitatii

-insamantari din filtrat pe medii de cultura adecvate -daca in 3-4 zile de mentinere la termostat nu se dezvolta microorganisme,filtratul este steril

Sterilizarea cu substante chimice

Substantele folosite pot fi: Glutaraldehida Peroxid de hidrogen stabilizat Acid peracetic Timpul de contact al substantei cu substratul tratat difera in functie de produs :vor trebui respectate recomandarile producatorului privitoare la conditiile de lucru atat pentru o sterilizare corecta cat si pentru evitgarea accidentelor

Sterilizarea cu oxid de etilena se foloseste numai cand nu exista alt mijloc de sterilizare adecvat -metoda este delicata iar erorile de procedura pot sa conduca fie la o sterilizare ineficienta fie la accidente(toxice)

Sterilizarea prin radiatii ionizante

-razele gama sunt cele mai penetrante Razele gama pot fi obtinute dintr-o sursa de cobalt 60 cesiu 137 Este o metoda de sterilizare la rece folosita pentru medicamente ,instrumentar confectionat din material degradabil termic

Dezinfectia

se poate face prin :caldura uscata(flambarea),caldura umeda(fierberea,pasteurizarea tindalizarea ) ,radiatii , substante chimice

Dezinfectia prin caldura uscata

Flambarea
-trecerea repetata,rapida a obiectelor sau a unor parti a obiectelor prin flacara -se sterilizeazapipete -orificiul baloanelor,eprubetelor -inainte si dupa utilizare NU se flambeaza obiecte de metal

Metode de dezinfectie prin caldura umeda

Fierberea - sterilizare incompleta deoarece nu actioneaza asupra tuturor sporilor

-timpul de sterilizare =minimum 30 min., din momentul inceperii fierberii -se foloseste pentru sterilizarea instrumentelor ce se utilizeaza imediat.

PASTEURIZAREA -sterilizare partiala (sunt distruse doar formele vegetative prin coagularea proteinelor la temp.<100C)

-incalzirea se face in baia de apa 60-65C timp de 30 min. 70-75C timp de 15 min. 85-90C timp de citeva secunde urmata de racirea brusca la 4C.
Aceasta metoda:

-reduce nr. microorganismelor - opreste trecerea sporilor in forme vegetative -se utilizeaza in special pt conservarea unor produse alimentare ( produse lactate, alcoolice).

Equipment for the high-temperature short-time pasteurization of milk.

Tindalizarea -sterilizare fractionata/discontinua -solutia se incalzeste in baia de apa 1-3 pe zi,3-8 zile consecutiviar intre incalziri se pastreaza la temperatura laboratorului(21C); -dupa ultima incalzire se raceste brusc la 4C. -la temperatura laboratorului sporii(eventual prezenti)fermineaza iar formele vegetattive vor fi distruse de o noua incalzire Aceasta metoda:

- este aplicata in special pt lichidele care peste 100C se altereaza ( unele medii de cultura).

Dezinfectia cu radiatii ultraviolete:este indicata pentru suprafetele de lucru ,aerul din boxele de lucru Este o metoda complementara masurilor de curatenie si dezinfectie chimica Sunt folosite lampi fixe sau mobile ,cu tuburi de UV intre 15-30W

DEZINFECTIA CHIMICA
Poate fi clasificata in : dezinfectie de nivel inalt - dezinfectie de nivel mediu - dezinfectie de nivel scazut

Dezinfectia de nivel inalt

Distruge toate microorganismele cu exceptia unui numar redus de spori bacterieni Timpul de contact trebuie sa fie de cel putin 20 minute Substantele utilizate sunt : glutaraldehida peroxidul de hidrogen stabilizat acidul peracetic

Dezinfectia de nivel mediu

Distruge Mycobacterium tuberculosis ,forme vegetative ale bacteriilor ,fungi,virusuri. NU distruge sporii bacterieni Tipul de contact necesar este de 10 minute Substantele utilizate sunt:fenolii,iodofori,alcooli,compusi pe baza de clor

Dezinfectia de nivel scazut

Distruge majoritatea bacteriilor in forma vegetativa ,unele virusuri si unii fungi NU distruge sporii bacterieni NU distruge Mycobacterium tuberculosis Substante utilizabile:fenoli,iodofori,hipoclorit de sodiu

AGENTI CHIMICI

Substatele antiseptice si dezinfectante: -au actiune antimicrobiana neselectiva -antisepticele sunt utilizate pe tegumente si mucoase -dezinfectantele sunt utilizate numai pe structuri inerte
Aceiasi substanta chimica in raport cu concentratia poate fi antiseptic sau dezinfectant In functie de mecanismul de actiune antisepticele si dezinfectantele se clasifica in substante care: a.Denatureaza proteinele(efect bactericid):acizi,baze alcooli b.Oxideaza gruparile chimice libere ale enzimelor:hipermanganat de potasiu,peroxid de hidrogen c.Blocheaza gruparile chimice libere ale enzimelor:azotat de Ag,oxid de etilen d.Lezeaza membranele celulare:clorhexidina,detergenti e.Altereaza acizii nucleici:rivanol,violet de gentiana,albastru de metil,fucsina bazica