CALEA PENTOZ-FOSFAILOR

Calea pentoz-fosfailor (numit i untul hexoz-monofosfailor) este o cale de metabolizare a glucozei care constituie o alternativ la degradarea acestui compus prin glicoliz. n majoritatea esuturilor, soarta principal a glucozo-6-fosfatului este degradarea prin glicoliz la piruvat, urmat de degradarea n continuare a acestuia, cu generare de ATP. n unele esuturi, are o importan particular metabolizarea glucozei pe calea pentoz-fosfailor, care are roluri complet diferite de cele ale glicolizei. Acest proces are loc n citoplasm i cuprinde 2 faze: faza oxidativ (ireversibil) faza neoxidativ (reversibil). I. Faza oxidativ (transformarea hexoz-P n pentoz-P) (#2) ncepe cu o reacie de dehidrogenare a glucozo-6-fosfatului n prezen de NADP+, cu formare de 6-fosfo-gluconolacton i NADPH + H+, sub aciunea catalitic a glucozo-6-fosfat dehidrogenazei. Glucono-lactonaza catalizeaz apoi hidroliza lactonei, cu formare de acid 6-fosfogluconic. Urmeaz o nou dehidrogenare NADP+-dependent urmat imediat de decarboxilare, ntr-o reacie catalizat de 6-P-gluconat dehidrogenaza, cu generarea unei noi molecule de NADPH + H+ i a unei pentoze: ribuloz-5-fosfat. Ribulozo-5-P se poate transforma n alte dou pentoze prin dou reacii de izomerizare: (#3) - prin epimerizare sub aciunea fosfopentoz-epimeraze se transform n xiluloz-5-P (care conine o inversiune la C3); - printr-o izomerizare cetoz-aldoz sub aciunea fosfopentoz-izomerazei se tranform n riboz-5-P. Ecuaia global a primei etape a cii pentoz-fosfailor este: Glucoz-6-P + 2 NADP+ + H2O Riboz-5-P + CO2 + 2 NADPH + 2 H+ II. Faza neoxidativ (transformarea pentoz-P n hexoz-P) (#4,5) n aceast faz au loc o serie de rearanjri ale scheletelor de C ale pentozelor fosforilate formate n prima etap, care vor realiza reciclarea pentoz-fosfailor la hexoz-fosfai, permind astfel oxidarea continu a glucozo-6-P. Mai nti, transcetolaza catalizeaz transferul unui fragment cu 2 C de la un donor cetozic (xiluloz-5-P) la un acceptor aldozic (riboz-5-P), cu formare de sedoheptuloz-7-P i gliceraldehid-3-P. Enzima necesit participarea tiamin pirofosfatului (forma activ a vitaminei B1) n calitate de coenzim: TPP joac rolul de transportor al fragmentului de 2 C ntre cele dou pentoze fosforilate. Apoi, transaldolaza catalizeaz transferul unui fragment de 3 C de la sedoheptuloz-7-P la gliceraldehid-3-P, formndu-se fructoz-6-P i eritroz-4-P (o aldo-tetroz). Urmeaz o nou intervenie a transcetolazei, care catalizeaz transferul unui fragment de 2 C de la o nou molecul de xiluloz-5-P la eritroz-4-P, cu formare de fructoz-6-P i gliceraldehid-3-P. Produii fazei neoxidative a untului pentoz-fosfailor, fructozo-6-P i gliceraldehida-3-P, pot urma n continuare dou ci: (#6,7,9) - prin parcurgerea ctorva etape din gluconeogenez, se pot transforma n glucoz-6-P, aceasta putndu-se angaja din nou n faza oxidativ a cii pentoz-P; - prin angajare n procesul glicolizei, cei doi compui sunt degradai la piruvat sau lactat. 1

 Bilanul global al celor dou faze ale cii pentoz-fosfailor const n degradarea a 3 molecule de glucoz-6-P la dou molecule de fructoz-6-P i o molecul de gliceraldehid-3-P. Multiplicnd cu 2, se ajunge la urmtoarea ecuaie global (avnd n vedere c una din cele dou molecule de gliceraldehid-3-P se poate izomeriza la dihidroxiaceton-P, iar cele dou trioze formeaz mpreun o molecul de fructoz-1,6-P2, care apoi se transform n fructoz-6-P): (#8) 6 G-6-P + 12 NADP+ + 7 H2O 5 F-6-P + 6 CO2 + 12 NADPH + 12 H+ + Pi 5 G-6-P Bilanul net const, deci, n oxidarea total a unei molecule de glucoz-6-P la 6 CO2: Glucoz-6-P + 12 NADP+ + 7 H2O 6 CO2 + 12 NADPH + 12 H+ + Pi IMPORTANA CII PENTOZ-FOSFAILOR Calea pentoz-fosfailor nu prezint importan din punct de vedere energetic, ci rolurile sale constau n producerea a doi compui cu roluri eseniale n celule: NADPH i riboz-5-fosfat. 1. Producerea de NADPH - utilizat ca donor de echivaleni reductori pentru urmtoarele scopuri: Procesele de biosintez reductiv: biosinteza de acizi grai, colesterol, hormoni steroizi; astfel, untul este activ n esuturile n care au loc asemenea procese: ficat, esut adipos, glanda mamar n lactaie, glandele corticosuprarenale i gonade. Detoxifierea xenobioticelor (substane strine organismului: medicamente sau substane toxice) la nivel hepatic. Acest proces presupune, ntr-o prim etap, hidroxilarea compuilor respectivi sub aciunea unui sistem monooxigenazic, cu participarea oxigenului molecular, a NADPH i a citocomului P450: RH + O2 + NADPH + H+ ROH + NADP+ + H2O Reducerea glutationului oxidat, cu meninerea n celul a unor rezerve adecvate de glutation redus (GSH, un tripeptid: -glutamil-cisteinil-glicina); reacia este catalizat de glutation reductaz. La rndul su, GSH este implicat n descompunerea peroxidului de hidrogen sub aciunea glutation peroxidazei (enzim ce necesit seleniu n calitate de cofactor). H2O2 este un agent oxidant puternic, care poate ataca membranele celulare, ducnd la lezarea acestora. Contracarnd aciunea peroxidului de hidrogen, GSH este unul din componentele importante ale echipamentului de aprare anti-oxidant al celulelor, avnd efect protector asupra membranelor celulare. (#10) Calea pentoz-P are o importan particular n eritrocit, unde reprezint singura surs de NADPH (n alte esuturi mai exist alte dou posibiliti de sintez a NADPH: reacia malicenzimei i reacia izocitrat dehidrogenazei NADP+-dependente). n cazul unui deficit genetic al glucozo-6-P dehidrogenazei, scade generarea de NADPH n eritrocit, ceea ce afecteaz negativ activitatea glutation reductazei i duce la scderea rezervelor de glutation redus. Ca urmare, scade capacitatea de descompunere a peroxidului de hidrogen, iar acumularea acestuia determin lezarea oxidativ a membranei plasmatice a eritrocitului (hemoliz); reducerea duratei de via a hematiilor se manifest sub forma anemiei hemolitice. (#11) 2. Sinteza de riboz-5-P - precursor utilizat n biosinteza de nucletide. Acestea, la rndul lor, reprezint unitile structurale ale acizilor nucleici, intr n componena unor coenzime (NAD+, FAD, coenzima A) i a nucleotidelor macroergice implicate n stocarea i transferul energiei libere (ATP, GTP, UTP, CTP).

Reglarea activitii cii pentoz-fosfailor: (#12) 1. Glucozo-6-P dehidrogenaza este inhibat de NADPH, produs al reaciei. 2. Insulina determin inducia celor dou dehidrogenaze NADP+-dependente care acioneaz n faza oxidativ a untului. Glucozo-6-P are dou posibiliti de metabolizare: glicoliza i calea pentoz-fosfa ilor. Alegerea uneia sau a alteia din cele dou ci, la un moment dat, depinde de necesitile de ATP, respectiv NADPH n acel esut: - Atunci cnd esutul folosete activ NADPH n procesele de biosintez reductiv, se menine o concentraie ridicat a NADP+ n celul aceasta permite funcionarea optim a G-6-P dehidrogenazei; pe de alt parte, scderea concentraiei NADPH duce la eliberarea G-6-P dehidrogenazei de sub aciunea sa inhibitorie. Ca urmare, va crete viteza de desfurare a untului. - Atunci cnd NADPH se formeaz mai rapid dect este utilizat, va crete n celul concentraia NADPH acesta inhib G-6-P dehidrogenaza, ceea ce va duce la scderea vitezei de desfurare a untului. n aceste condiii, glucozo-6-fosfatul se va angaja preponderent n procesul glicolizei. Modul n care se desfoar calea pentoz-fosfa ilor n diverse esuturi depinde de necesitile relative de NADPH i riboz-5-P n esutul respectiv. Astfel, sunt posibile trei situaii distincte: n esuturile n care necesarul de NADPH i cel de riboz-5-P sunt relativ egale (cum este ficatul) untul se poate opri la finalul fazei oxidative, izomeraza transformnd ribulozo-5-P n riboz-5-P, iar faza neoxidativ nu se mai desfoar. Dac necesarul de NADPH este mai mare dect necesarul de riboz-5-P (cum se ntmpl, de exemplu, n esutul adipos) faza oxidativ este activ i produce NADPH n cele dou reacii de dehidrogenare, iar ribozo-5-P este ndeprtat prin angajare n faza a doua a untului. Fructozo-6P i gliceraldehida-3-P formate la finalul acestei faze sunt transformate n glucoz-6-P, care intr din nou n faza oxidativ, genernd cantiti suplimentare de NADPH; alternativ, produii fazei neoxidative se pot angaja n glicoliz n vederea degradrii. Deci ntr-un asemenea esut sunt active ambele faze ale cii pentoz-P. Dac necesarul de riboz-5-P este mai mare dect cel de NADPH (ntr-un esut precum muchiul) dei faza I a untului are activitate foarte redus, este posibil, totui, sinteza de riboz-5-P pornind de la fructoz-6-P i gliceraldehid-3-P (care sunt obinui din glicoliz), prin parcurgerea n sens invers a fazei neoxidative a untului (care are caracter reversibil). Ca urmare, nu este necesar s existe o cale a pentoz-fosfailor complet funcional pentru ca un esut s poat sintetiza riboz-5-P.

METABOLISMUL GLICOGENULUI
Glicogenul reprezint forma de depozitare a glucozei n organismele animale. Cele mai importante depozite de glicogen se gsesc n: - ficat - glicogenul poate reprezenta pn la 10% din greutatea organului (aprox. 100 g); - muchi - glicogenul poate reprezenta pn la 1-2% din greutatea esutului (n jur de 400 g). Motivul pentru care glucoza este depozitat sub form de glicogen const n faptul c acesta reprezint o form de stocare din care glucoza poate fi rapid mobilizat, pentru a asigura necesarul de glucoz al esuturilor gluco-dependente, n perioadele n care lipsete aportul exogen sau cnd crete substanial necesarul de glucoz ca surs de energie, cum se ntmpl n cursul exerciiului fizic. O alt rezerv de energie o reprezint trigliceridele depozitate n esutul adipos; dei nsumeaz aprox. 130.000 kcal (fa de aprox. 800 kcal, ct reprezint rezervele de glicogen), depozitarea energiei sub form de lipide are dou inconveniente fa de depozitarea sa ca glicogen: - trigliceridele nu pot fi utilizate ca surs de energie n absena oxigenului; - acizii grai din componena trigliceridelor nu pot fi transformai n glucoz (absolut necesar pentru esuturile gluco-dependente). Depozitarea glucozei se face sub form de glicogen i nu sub form de glucoz liber deoarece glucoza este o substan osmotic activ dac ntr-o celul s-ar acumula acelai numr de molecule de glucoz sub form liber, presiunea osmotic intra-celular ar crete foarte mult apa atras din mediul extra-celular ar determina liza osmotic a celulei (o concentraie a glicogenului de 0,01 M este echivalent cu o concentraie a glucozei de 0,4 M). Structura glicogenului Glicogenul este un polimer de glucoz cu structur ramificat: (#14) - poriunile liniare sunt formate din molecule de glucoz unite prin legturi (1-4)glicozidice; - ramificaiile sunt create prin formarea de legturi (1-6)-glicozidice. Ramificaiile sunt situate la distan de 4 resturi glucozil (n interiorul moleculei), fiind mai rare spre periferia moleculei; fiecare lan liniar conine 12-14 molecule de glucoz, iar pe fiecare lan sunt ataate dou ramificaii. Molecula glicogenului conine un singur capt reductor (C-1 al unei molecule de glucoz, ce poart gruparea hidroxil glicozidic), toate celelalte capete ale lanurilor de glicogen fiind nereductoare (au liber gruparea hidroxil de la C-4). Structura ramificat a glicogenului prezint un mare avantaj: permite sinteza i degradarea sa rapid, enzimele implicate putnd aciona simultan la nivelul capetelor nereductoare de pe mai multe lanuri. I. SINTEZA GLICOGENULUI (GLICOGENOGENEZA) Pentru a putea fi ncorporat n molecula glicogenului, glucoza trebuie s fie activat cu un nucleotid, sub form de UDP-glucoz. (#16) - Pentru aceasta, glucoza este mai nti fosforilat la glucoz-6-fosfat sub aciunea hexokinazei sau a glucokinazei, dup care este izomerizat la glucoz-1-fosfat sub aciunea fosfogluco-mutazei. - Glucozo-1-fosfat uridil transferaza (UDP-glucoz-pirofosforilaza) catalizeaz apoi transferul unui radical uridil (UMP) din UTP pe glucoz-1-fosfat, cu formare de UDP-glucoz; aceasta reprezint o form activ a glucozei: o parte din energia legturii fosfoanhidridice din UTP care se scindeaz este nmagazinat n molecula UDP-glucozei, crescnd astfel coninutul de energie liber al moleculei i fcnd posibil participarea sa la reacia de sintez a glicogenului.

- Pirofosfatul eliberat n aceast reacie este hidrolizat sub aciunea pirofosfatazei anorganice; aceasta menine concentraia pirofosfatului la un nivel redus echilibrul reaciei catalizate de uridil transferaz este net favorizat n sensul formrii UDP-glucozei. UDP-glucoza este donorul de grupare glucozil pentru sinteza glicogenului: restul glucozil este transferat, sub aciunea glicogen sintazei, la captul nereductor al unei molecule mici de glicogen deja existent, care funcioneaz ca primer pentru sinteza glicogenului. (#17) ntruct glicogen sintaza nu poate iniia sinteza de glicogen pornind de la o molecul de glucoz, este necesar s existe deja acest primer de glicogen (care s amorseze sinteza glicogenului); primerul poate fi: - un lan scurt de glicogen rmas din procese de degradare ale glicogenului anterioare (cu minimum 4 resturi de glucoz); - glicogenina: este o protein pe care sunt asamblate, la nivelul unei grupri OH dintr-un rest de tirozin, primele cteva molecule de glucoz (provenite din UDP-glucoz, sub aciunea glucozil-transferazic a proteinei); glicogenina rmne legat la singurul capt reductor al moleculei de glicogen. (#18) Glicogen sintaza poate realiza numai legturi (1-4)-glicozidice. Pentru formarea legturilor (1-6)-glicozidice (care creeaz puncte de ramifiere), atunci cnd lanul s-a alungit cu 11 resturi de glucoz intervine o alt enzim: enzima de ramifiere [amilo(1-4)(1-6) transglicozilaza]: aceasta transfer un fragment cu aproximativ 6 resturi glucozil de la captul nereductor al unui lan la atomul C6 al unui rest de glucoz din acelai lan sau dintr-un lan diferit. Prin formarea unei legturi (1-6)-glicozidice, se creeaz un punct de ramifiere. Ulterior intervine glicogen sintaza, care va aduga noi molecule de glucoz prin legturi (1-4)-glicozidice i va alungi ramificaia. (#19) Ca urmare a modului de aciune al glicogen sintazei, molecula de glicogen conine un singur capt reductor i o multitudine de capete nereductoare: acesta constituie un avantaj, ntruct creeaz numeroase situsuri de aciune pentru enzimele implicate n sinteza i degradarea glicogenului, ceea ce asigur o eficien sporit a acestor procese. Ecuaia global a alungirii moleculei de glicogen cu un rest de glucoz: Glucoz + ATP + UTP + (Glucoz)n + H2O (Glucoz)n+1 + ADP + UDP + 2 Pi Sinteza glicogenului este un proces consumator de energie: pentru fiecare molecul de glucoz adugat se consum 2 legturi macroergice. II. DEGRADAREA GLICOGENULUI (GLICOGENOLIZA) Are loc printr-un proces de fosforoliz: scindarea legturilor (1-4)-glicozidice de la captul nereductor al unui lan de glicogen cu ajutorul fosfatului anorganic eliberarea glucozei terminale sub form de glucoz-1-fosfat. Acest proces este catalizat de glicogen fosforilaz, enzim care necesit prezena piridoxal-fosfatului (forma activ a vitaminei B6) n calitate de cofactor esenial. (#21) Glicogen fosforilaza acioneaz repetitiv pn cnd ajunge la o distan de 4 resturi glucozil fa de un punct de ramifiere, moment n care se oprete. La nivelul ramificaiilor moleculei de glicogen acioneaz o alt enzim numit enzima de deramifiere, care are activitate dubl: (#22) - prin activitatea oligo-(1-4)(1-4) glucan transferazic, ea transfer un grup de 3 resturi glucozil de pe lanul care a fost scurtat pe un alt lan, unde leag acest fragment prin legtur (1-4) glicozidic; 5

- prin activitatea (1-6) glicozidazic, enzima scindeaz hidrolitic restul de glucoz care a rmas la punctul de ramifiere (legat (1-6)-glicozidic) ndeprteaz aceast molecul de glucoz sub form de glucoz liber. Dup ce ramificaia a fost ndeprtat, asupra lanului liniar de glicogen va aciona n continuare glicogen fosforilaza. Aadar, produii degradrii glicogenului sunt: - n principal glucoz-1-P, care rezult n urma procesului de fosforoliz catalizat de glicogen fosforilaz; - o cantitate mic de glucoz liber, rezultat de la nivelul punctelor de ramifiere, n urma procesului de hidroliz catalizat de enzima de deramifiere. Glucozo-1-P rezultat din glicogenoliz se va transforma n glucoz-6-P sub aciunea fosfogluco-mutazei. Ulterior, soarta glucozo-6-fosfatului este diferit n ficat fa de muchi: - n ficat, glucozo-6-P este hidrolizat sub aciunea glucozo-6-fosfatazei, cu formare de glucoz liber aceasta este eliberat n snge cu ajutorul transportorului GLUT2 situat n membrana plasmatic a celulelor hepatice din snge, glucoza va fi captat de ctre esuturile gluco-dependente, n vederea satisfacerii necesitilor energetice; (#23) - n muchi, glucozo-6-fosfataza este absent (deci glucozo-6-P nu poate fi transformat n glucoz liber), iar glucoza fosforilat nu poate prsi celula => glucozo-6-P va fi utilizat n glicoliz, pentru generare de ATP necesar contraciei musculare. Glicogenul din ficat i cel din muchi au roluri diferite: (#24) n ficat, glicogenul - se sintetizeaz n condiiile abundenei de glucoz (postprandial); - se epuizeaz dup 12-20 ore de post. Rolul glicogenului hepatic este acela de a contribui la meninerea constant a glicemiei n intervalele dintre prnzuri (ntruct ficatul poate elibera n snge glucoza rezultat din degradarea glicogenului, ca urmare a existenei glucozo-6-fosfatazei). Glicogenul hepatic este prima surs endogen de glucoz la care se apeleaz pentru a menine nivelul glucozei sanguine n perioadele interprandiale. Glicogenul hepatic ofer o surs rapid mobilizabil de glucoz plasmatic, ce poate fi utilizat n absena aportului exogen de glucide, sau n cursul exerciiului fizic susinut, dup epuizarea rezervelor de glicogen muscular, pentru a asigura necesarul crescut de glucoz al muchiului. n muchi, glicogenul - se epuizeaz dup efortul susinut (n aproximativ o or); - se sintetizeaz dup ce muchiul a revenit la starea de repaus, pentru refacerea depozitelor. (glicogenul muscular nu este afectat de perioade de post de cteva zile i scade doar moderat n cursul postului prelungit). Glicogenul muscular nu poate contribui la meninerea constant a glicemiei ntre prnzuri: nu poate furniza glucoz sngelui, datorit absenei glucozo-6-fosfatazei. Rolul glicogenului muscular este acela de a constitui o rezerv de glucoz utilizabil pentru satisfacerea necesitilor energetice proprii ale muchiului. REGLAREA METABOLISMULUI GLICOGENULUI I. Reglarea glicogenogenezei (#27) Glicogen sintaza este supus controlului metabolic prin intermediul reglrii covalente i al reglrii alosterice. 6

1. Reglarea covalent Enzima poate exista sub dou forme: - glicogen sintaza a - este forma activ, defosforilat - glicogen sintaza b - este forma inactiv, fosforilat Fosforilarea glicogen sintazei se realizeaz la mai multe resturi de serin, prin transferul de grupri fosfat din ATP, sub aciunea mai multor protein kinaze diferite, principala fiind protein kinaza A. Aceasta este activat de AMP ciclic, care se formeaz din ATP sub aciunea adenilat ciclazei, iar aceasta la rndul su este activat n urma cuplrii unor hormoni cu receptorii lor membranari. AMPc este, deci, mesagerul secund prin intermediul cruia acioneaz aceti hormoni i anume: - glucagonul - acioneaz asupra glicogenului din ficat; - adrenalina - acioneaz asupra glicogenului din ficat i din muchi; activarea adenilat ciclazei se realizeaz ca urmare a cuplrii adrenalinei cu receptori -adrenergici. Defosforilarea glicogen sintazei se realizeaz prin ndeprtarea hidrolitic a fosfatului sub aciunea protein fosfatazei-1, enzim care este activat de ctre insulin. 2. Reglarea alosteric Glucozo-6-fosfatul acioneaz ca modulator alosteric pozitiv pentru glicogen sintaza b: el se leag la un situs alosteric de pe suprafaa enzimei i determin o modificare conformaional, care favorizeaz aciunea protein fosfatazei-1 defosforilarea glicogen sintazei b activarea sa (trecerea la forma a). Acest efect al glucozo-6-P se exercit dup prnzurile glucidice, cnd concentraia sa n celule crete. II. Reglarea glicogenolizei (#28) Glicogen fosforilaza sufer dou tipuri de reglare: covalent i alosteric. 1. Reglarea covalent Enzima poate exista sub dou forme: - fosforilaza a - activ, este forma fosforilat - fosforilaza b - inactiv, defosforilat. Fosforilarea glicogen fosforilazei este catalizat de fosforilaz kinaz aceast enzim este reglat, la rndul su, covalent: - fosforilaz kinaza a este forma activ, fosforilat; fosforilarea sa se realizeaz sub aciunea protein kinazei A, activat de glucagon i adrenalin (prin receptori -adrenergici); - fosforilaz kinaza b este forma inactiv, defosforilat; defosforilarea se realizeaz sub aciunea protein fosfatazei-1, activat de insulin. Defosforilarea glicogen fosforilazei este catalizat de protein fosfataza-1, activat de insulin. Adrenalina stimuleaz glicogenoliza hepatic i pe o alt cale, activat n urma aciunii pe receptori 1-adrenergici: prin intermediul proteinei Gq, are loc activarea fosfolipazei C membranare, care hidrolizeaz fosfatidil-inozitol difosfatul n diacilglicerol i inozitol trifosfat (IP3). Acesta din urm stimuleaz eliberarea Ca2+ din reticului endoplasmic, ceea ce duce la creterea concentraiei calciului citosolic. Ionii de Ca2+ se leag la calmodulin, care este una din subunitile fosforilaz kinazei (aceast enzim este alctuit din 4 subuniti: i conin resturile de serin care sunt fosforilate de ctre protein kinaza A, conine situsul catalitic, iar este calmodulina); legarea Ca2+ la aceast subunitate determin modificarea conformaiei sale, iar complexul calciu-calmodulin va activa fosforilaz kinaza (totui activarea maxim a acestei enzime necesit att fosforilarea ct i legarea Ca2+). Fosforilaza kinaza activeaz apoi, prin fosforilare, glicogen fosforilaza. (#29) 2. Reglarea alosteric 7

Se realizeaz diferit n ficat fa de muchi (exist dou izoenzime ale glicogen fosforilazei n cele dou esuturi, care sunt codificate de gene diferite). a) n ficat: glicogen fosforilaza este supus controlului alosteric prin intermediul glucozei. Atunci cnd glicemia crete dup un prnz glucidic, glucoza intr n hepatocit i se leag la un situs alosteric inhibitor de pe suprafaa glicogen fosforilazei a determin o modificare conformaional, care va duce la expunerea restului de serin fosforilat este favorizat astfel aciunea protein fosfatazei-1 aceasta va cataliza defosforilarea i, deci, inactivarea glicogen fosforilazei. Astfel, acest situs alosteric reprezint un senzor pentru glucoz cu ajutorul cruia glicogen fosforilaza hepatic poate rspunde adecvat la modificri ale nivelului glucozei plasmatice. b) n muchi: degradarea glicogenului este influenat prin dou mecanisme de control alosterice. Calciul sincronizeaz activarea fosforilazei cu contracia muscular (n timpul contraciei musculare, exist o nevoie urgent de ATP, care este sintetizat pe seama energiei eliberate prin degradarea glucozo-6-P provenit din glicogenoliza muscular). Impulsul nervos determin depolarizarea membranei celulei musculare eliberarea Ca2+ din reticulul sarcoplasmic creterea concentraiei Ca2+ citosolic Ca2+ are dou efecte: (#30) - declaneaz contracia muscular; - n urma legrii la calmodulin, activeaz fosforilaz kinaza prin mecanismul descris mai sus, iar fosforilaz kinaza catalizeaz fosforilarea glicogen fosforilazei, ducnd la activarea acesteia. AMP se acumuleaz n muchiul aflat n contracie viguroas ca rezultat al degradrii ATP (creterea [AMP] este un semnal de scdere a rezervelor de ATP) AMP se leag la fosforilaza b i o activeaz accelerarea degradrii glicogenului se elibereaz astfel glucoza necesar pentru generarea de ATP prin degradare glicolitic. AMP activeaz alosteric i enzima reglatorie a glicolizei (fosfofructokinaza-1), sincroniznd astfel stimularea glicogenolizei cu cea a glicolizei. Acest control alosteric al glicogen fosforilazei musculare, prin intermediul Ca2+ i al AMP, reflect rolul acestei enzime de a asigura necesarul de glucoz, deci de ATP pentru contracia muscular. Reglarea coordonat, reciproc a sintezei i degradrii glicogenului n ficat (#31) Sinteza i degradarea glicogenului la nivel hepatic nu funcioneaz simultan cu viteze egale, astfel nct se evit formarea unui ciclu cu rezultat nul i consumator de ATP (ataarea unui rest de glucoz la molecula glicogenului consum 2 legturi macroergice, iar detaarea unui rest de glucoz nu produce nici o molecul de ATP). Cele dou procese sunt reglate coordonat i reciproc: activarea unuia are loc concomitent cu inactivarea celuilalt i viceversa (n funcie de circumstanele de moment n care se afl organismul). Aceast reglare reciproc este posibil datorit faptului c glicogen sintaza i glicogen fosforilaza sunt: - fosforilate sub aciunea aceleiai enzime (protein kinaza A); - defosforilate sub aciunea aceleiai enzime (protein fosfataza-1). Dup prnzurile glucidice: crete nivelul insulinei n snge aceasta activeaz protein fosfataza-1 defosforilarea - glicogen sintazei activarea sa - glicogen fosforilazei inactivarea sa. Deci n aceste perioade - este accelerat sinteza de glicogen - este ncetinit degradarea glicogenului. Astfel, n perioadele n care nivelul glicemiei este crescut, este favorizat depozitarea unei pri din glucoza plasmatic sub form de glicogen n ficat.

 ntre prnzuri i n strile de post: crete nivelul glucagonului n snge acesta activeaz protein kinaza A (prin intermediul AMPc) fosforilarea - glicogen fosforilazei activarea sa - glicogen sintazei inactivarea sa. Deci n aceste perioade - este accelerat degradarea glicogenului - este ncetinit sinteza de glicogen. Astfel, n perioadele de absen a aportului exogen de glucoz, nivelul glicemiei este meninut pe seama glucozei eliberate prin degradarea glicogenului gepatic. Glicogenoze (boli de stocare a glicogenului) Reprezint un grup de boli cu caracter genetic cauzate de deficite ale enzimelor implicate n metabolismul glicogenului. Ele se caracterizeaz prin acumularea n esuturi a unor cantiti excesive de glicogen sau a unui glicogen cu structur anormal. Exist mai multe tipuri de glicogenoze; cteva dintre acestea sunt: - Deficitul glucozo-6-fosfatazei (boala von Gierke sau tipul I de glicogenoz) - se caracterizeaz prin depozitarea de cantiti excesive de glicogen cu structur normal n ficat, cu mrirea de volum a acestuia (hepatomegalie); de asemenea, boala se manifest prin hipoglicemie, datorit incapacitii de eliberare a glucozei din glucoz-6-fosfat. - Deficitul enzimei de deramifiere (boala Cori-Forbes sau tipul III) - se caracterizeaz prin acumularea n ficat i muchi a unui glicogen cu structur anormal (un polizaharid ramificat). - Deficitul glicogen fosforilazei musculare (boala McArdle sau tipul V) - se caracterizeaz prin acumularea de cantiti excesive de glicogen n muchi i toleran sczut la efortul muscular (crampe musculare). - Deficitul glicogen fosforilazei hepatice (boala Hers sau tipul VI) - se caracterizeaz prin creterea coninutului de glicogen n ficat, cu hepatomegalie i tendin spre hipoglicemie.

CALEA ACIDULUI GLUCURONIC

Este o cale de metabolizare a glucozei care duce la sinteza acidului UDP-glucuronic. (#33) Procesul implic fosforilarea glucozei la glucoz-6-P, urmat de izomerizarea acesteia la glucoz-1-P sub aciunea fosfogluco-mutazei. Glucozo-1-P reacioneaz apoi cu UTP sub aciunea glucozo-1-P uridil transferazei: are loc transferul unui rest uridil din UTP pe glucoz-1-P, cu formare de UDP-glucoz (aceste prime etape sunt comune cu cele din procesul glicogenogenezei). UDP-glucoza este oxidat n dou etape la C6 sub aciunea UDP-glucoz-dehidrogenazei, n prezena a 2 molecule de NAD+, cu formare de acid UDP-glucuronic (forma activ a glucuronatului). De remarcat c UDP-glucoza este intermediar comun n sinteza de glicogen i n sinteza acidului UDP-glucuronic. (#36) Rolurile acidului UDP-glucuronic: (#34) 1. Particip la procesul de conjugare al unor compui endogeni (bilirubina, unii hormoni liposolubili) i exogeni (unele medicamente i substane toxice), la nivelul ficatului. Prin ncorporarea acidului glucuronic (compus cu caracter polar) n compuii respectivi, crete hidrosolubilitatea acestora; n consecin: (#33) - compuii conjugai se elimin mai uor din organism prin bil sau prin urin; - ei nu mai pot ptrunde n celule (de ex. n celulele cerebrale) pentru a exercita efecte toxice. Aadar, conjugarea cu acidul glucuronic are ca efect scderea toxicitii compuilor respectivi. 2. Acidul UDP-glucuronic particip la sinteza glicozaminoglicanilor. Acetia sunt polizaharide neramificate alctuite din uniti dizaharidice repetitive, compuse dintr-un acid uronic (acidul glucuronic sau epimerul su la C5, acidul iduronic) i o hexozamin (glucozamina sau galactozamina, de obicei acetilate). Prin ataarea covalent a glicozaminoglicanilor la o parte proteic se formeaz proteoglicanii, care sunt componente importante ale matricei extracelulare. Exemple de glicozaminoglicani: acidul hialuronic, condroitin sulfat, keratan sulfat, heparan sulfat, dermatan sulfat. Cu excepia acidului hialuronic, ceilali glicozaminoglicani conin ataate grupri sulfat. (#35)

10

SINTEZ A METABOLISMULUI GLUCIDIC

Caracteristici ale glucozei ca surs de energie: Glucoza este o surs de energie pentru toate esuturile. Unele esuturi sunt gluco-dependente: creier, eritrocit, muchi scheletic n activitate intens. Glucoza este singurul combustibil care poate genera ATP n anaerobioz (prin fosforilare la nivel de substrat): - aport insuficient de oxigen n raport cu necesitile de ATP (de ex. muchiul scheletic n activitate intens, stri de hipoxie tisular); - celule fr mitocondrii (eritrocit). Alte substrate energogene (provenite din lipide: acizi grai, corpi cetonici, precum i aminoacizii) pot genera ATP numai n aerobioz, prin fosforilare oxidativ. Cei doi hormoni pancreatici - insulina i glucagonul - regleaz procesele din cadrul metabolismului glucidic, realiznd adaptarea la necesitile de moment; ei acioneaz asupra enzimelor-cheie din cile metabolice prin 2 mecanisme: - influenarea reglrii covalente (prin fosforilare-defosforilare) a activitii enzimatice; - modificarea cantitii enzimelor prin inducie-represie. I. Dup prnzurile glucidice (abunden de glucoz) Glicemia crete stimuleaz secreia de insulin raport insulin/glucagon crescut. Ci metabolice active: - toate esuturile utilizeaz glucoza ca surs de energie, prin glicoliz - n ficat i muchi are loc depozitarea glucozei sub form de glicogen - n unele esuturi are loc metabolizarea glucozei pe calea pentoz-fosfailor sintez de NADPH i riboz-5-fosfat. Efectele insulinei: - activeaz procesele care utilizeaz glucoza plasmatic - glicoliza - sinteza de glicogen - inhib procesele care produc glucoz - gluconeogeneza - degradarea glicogenului Mecanisme: captarea glucozei n esuturi (n special muscular i adipos) - prin nr. de transportori membranari pentru glucoz (GLUT-4) cantitatea de fructoz-2,6-difosfat (n ficat) - (+) fosfofructokinaza-1 => glicoliza - () fructozo-1,6-disfosfataza => gluconeogeneza inducia enzimelor-cheie ale glicolizei (n special glucokinaza) represia enzimelor-cheie ale gluconeogenezei (+) protein fosfataza-1 defosforilarea: 11

- glicogen sintazei (+) => glicogenogeneza - glicogen fosforilazei () => glicogenoliza Rezultatul acestor aciuni ale insulinei este scderea glicemiei readucerea sa la normal (la aproximativ 2 ore dup prnzul glucidic). II. Inter-prandial i n strile de post (depleie de glucoz) Glicemia scade este stimulat secreia de glucagon raport insulin/glucagon sczut. Ci metabolice active: - glucoza este consumat, ca surs de energie, numai de ctre esuturile gluco-dependente - ficatul produce glucoz prin - degradarea glicogenului - gluconeogenez - glucoza produs este eliberat n snge captat de esuturile gluco-dependente. Efectele glucagonului: - activeaz procesele hepatice care produc glucoz - gluconeogeneza - degradarea glicogenului - inhib procesele care utilizeaz glucoza plasmatic - glicoliza - sinteza de glicogen Mecanisme: cantitatea de fructoz-2,6-difosfat (n ficat) - (+) fructozo-1,6-disfosfataza => gluconeogeneza - () fosfofructokinaza-1 => glicoliza inducia enzimelor-cheie ale gluconeogenezei cantitatea de AMPc n celulele hepatice activarea protein kinazei A fosforilarea: - glicogen fosforilazei (prin intermediul fosforilaz kinazei) (+) => glicogenoliza - glicogen sintazei () => glicogenogeneza Rezultatul acestor aciuni ale glucagonului este creterea glicemiei meninerea sa la un nivel constant n condiiile lipsei aportului exogen de glucoz. Proces metabolic Glicoliza Gluconeogeneza Glicogenogeneza Glicogenoliza INSULINA Mecanism (+) fosfofructokinaza-1 inducia enzimelor-cheie () fructozo-1,6-disfosfataza represia enzimelor-cheie (+) glicogen sintaza () glicogen fosforilaza GLUCAGONUL Mecanism () fosfofructokinaza-1 (+) fructozo-1,6-disfosfataza inducia enzimelor-cheie () glicogen sintaza (+) glicogen fosforilaza

Efec t

Efec t

12