Analiza microbiologica a apei

Indicatorii bacteriologici au un rol important in aprecierea calitii apei. Aprecierea strii de igiena a apei presupune: determinarea numrului total de germeni si a bacteriilor coliforme. 1. Determinarea numrului total de germeni Numrul total de germeni reprezint numrul de colonii care se dezvolta in urma insamantarii de 1cm3 de apa in mediu de cultura, dup 48 ore de termostatare la 37C. n cazul in care se consider c apa reprezint un grad ridicat de contaminare mai mare se fac nsmnri din diluii (schema I) coloniilor se face din plcile cu 30-300 colonii.

2. Determinarea bacteriilor coliforme Sursa cea mai important de poluare bacterian a apei o constituie reziduurile, excrementele umane i animale, care pot conine germeni patogeni. Metoda pentru determinarea bacteriilor coliforme include teste prezumtive, de confirmare, bazate in primul rnd pe capacitatea bacteriilor de a fermenta lactoza cu producere de acid lactic, CO2, H2, n timp de 48 ore la 35C. Testul prezumtiv const n inocularea probei n mediu nutritiv cu, mediu de mbogire favorabil nmulirii att a bacteriilor coliforme, ct i a altor bacterii care folosesc lactoza ca surs de carbon. Testul de confirmare, const n inocularea culturilor din eprubetele pozitive ale testului prezumtiv pe medii selective, care inhib dezvoltarea bacteriilor nsoitoare i asigur nmulirea bacteriilor coliforme. Din grupul coliform, cel mai frecvent este ntlnit genul Escherichia, cu specia Escherichia coli, care indic o contaminare fecal recent. Tehnica de lucru. Din prob i diluii succesive de inoculeaz cte 1 ml n cte 3 eprubete cu BCLP. Se termostateaz la 370C timp de 24-48 ore. Se nregistreaz eprubetele pozitive (mediu tulbure, bule de gaz n plutitor, pH acid), iar eprubetele negative sunt din nou termostatate timp de 24 ore i se nregistreaz din nou eprubetele pozitive. Pentru confirmare, din eprubetele pozitive se recolteaz cte o ans i se inoculeaz eprubete cu BBLVP; dup incubare la 370C timp de 48 ore, n condiiile n care se produc din nou gaze n plutitor, tulburare, virajul culorii indicatorului verde briliant de la verde la galben, nseamn c n ap sunt prezente bacteriile coliforme. Calcul i interpretare Folosind, metoda titrului, n funcie de numrul eprubetelor pozitiv,e se stabilete cifra caracteristic i din tabelul lui Mac Crady, corespunztor cifrei caracteristice, se noteaz numrul probabil de coliformi. Pentru a calcula numrul probabil de coliformi/cm 3 produs analizat, valoarea din tabel se nmulete cu factorul de diluie corespunztor primei cifre din cifra caracteristic. Numrul de coliformi admii n 100 ml ap, conform SR EN ISO 9308-1/2004, este 0.

Tabel Mac Crady ( metoda celor 3 tuburi)

Cifra caracteristic 000 001 010 011 020 100 101 102 110 111 120 121 130 200 201 202 210 211 212 220 221 Nr. de microorganisme 0.0 0.3 0.3 0.6 0.6 0.4 0.7 1.1 0.7 1.1 1.1 1.5 1.6 0.9 1.4 2.0 1.5 2.0 3.0 2.0 3.0 Cifra caracteristic 222 223 230 231 232 300 301 302 310 311 312 313 320 321 322 323 330 331 332 333 Nr. de microorganisme 3.5 4.0 3.0 3.5 4.0 2.5 4.0 6.5 4.5 7.5 11.5 16.0 9.5 15.0 20.0 30.0 25.0 45.0 110 140

Schema I Determinarea numrului total de germeni

Schema II Determinarea bacteriilor coliforme