INFECIA. PROCESUL INFECIOS.

REZISTENA NESPECIFIC A MACROORGANISMULUI

INFECIA totalitatea proceselor biologice care se produc n ma/o n urma penetrrii mi/o patogene sau potenial patogene (PP). PROCESUL INFECIOS interaciunea dintre mi/o i ma/o n diverse condiii ale mediului ambiant. Manifestarea lui poate fi inaparent / asimptomatic (stare de portaj sntos, eliminarea rapid a mi/o) sau simptomatic. MALADIA INFECIOAS manifestarea suprem a procesului infecios, se caracterizeaz prin diferite simptome, determinate de efectele metaboliilor microbieni (toxine, enzime, etc) sau de reacia imun a gazdei la prezena bacteriei.

1.
2.

3.

4. 5.

Particularitile bolii infecioase Sunt provocate de ageni patogeni Contagiozitate (capacitatea de a se transmite de la o surs la o persoan receptiv) Specificitate (un agent provoac o infecie, ex.: Clostridium tetani este agentul tetanosului, etc.) Evoluie clinic stadial Imunitate la reinfecie (durat variabil)

Apariia maladiei depinde de multipli factori, n special de capacitatea agentului cauzal de a provoca maladia i de gradul de rezisten al gazdei la aceast invazie

ROLUL MICROORGANISMULUI N PROCESUL INFECIOS. PATOGENITATEA I VIRULENA Relaiile dintre mi/o i ma/o gazd: 1. Comensalism (flora bucal, intestinal, etc) 2. Parazitism (prezena mi/o este nociv pentru ma/o) Orice mi/o parazit capabil s provoace o infecie (n condiii adecvate) este considerat p a t o g e n. Exist 2 tipuri de mi/o patogene: 1. Obligat (cert) patogene, care infecteaz persoane imunocompetente cu doze mici 2. Potenial patogene (oportuniste), care pot cauza infecie numai cu doze mari sau la persoane imunocompromise (deseori fac parte din flora normal a organismului) Mi/o patogene pot fi gzduite uneori fr a provoca maladia, astfel de persoane sunt numite purttori sntoi de germeni

Microorganismele patogene se caracterizeaz prin: Patogenitate capacitatea unei bacterii de a declana infecia. Este un caracter de specie determinat genetic (cromozom, plasmide, bacteriofagi). n cadrul unei specii patogene pot exista tulpini cu manifestare variat a patogenitii de la absena total pn la foarte nalt. Virulen gradul de patogenitate al unei tulpini (msur cantitativ a patogenitii). Se apreciaz prin infectarea animalelor de laborator cu cantiti diferite de mi/o.

Unitile de virulen: - DLM numrul de bacterii necesar pentru a ucide 80% din animalele infectate - DL50 50% letalitate - DCL 100% letalitate - DI50/DI provoac boala la 50% / 80% animale Modificarea virulenei: - Amplificarea prin transfer i recombinare genetic, condiii optime pentru cretere - Reducerea (atenuarea) prin meninerea bacteriilor n condiii nefavorabile (t, factori chimici, etc), mutaii

Bacteria patogen trebuie: 1. S fie capabil de a se transmite ntre gazde 2. S penetreze n organismul-gazd 3. S se rspndeasc prin organism 4. S se multiplice i s persiste (evitnd sau distrugnd sistemul imun al gazdei) 5. S produc leziuni Aceste capaciti sunt asigurate de factorii de patogenitate.

I.
1.

2. 3. 4. 5. 6.

7.
8.

Factorii de patogenitate ai bacteriilor Factori structurali (somatici) Adezine - fimbriile, glicocalixul, proteine de adeziune ale peretelui celular. Asigur aderarea bacteriilor la receptorii de pe suprafaa celulelor-int sau la proteine matriciale extracelulare (colagen, fibronectin, laminin, elastin, etc) Proteine ale sistemelor de secreie (tipuri I-IV) Capsula antifagocitar, anti-complement Antigenul O - antifagocitar Peptidoglicanul (adeziune, agresie tisular) Acizii teichoici/lipoteichoici (adeziune, toxicitate) Proteina A la stafilococi (aciune antifagocitar prin fixarea Fc a IgG) Proteina M la streptococi (adeziune, a/fagocitar)

II. Enzime de patogenitate (responsabile de persisten, diseminare i producerea leziunilor) - Plasmocoagulaza (formarea trombilor septiciefect antifagocitar, propagare n organism) - Fibrinolizina (eliberarea bacteriilor din trombi) - Hialuronidaza (diseminare, leziuni tisulare) - Colagenaza (identic) - Neuraminidaza (lichefierea mucusului) - Proteaze (ex.: distrugerea Ig A secretorii) - Dezaminaze - Decarboxilaze - Fosfataze, etc

III. Toxine bacteriene (responsabile de leziuni) - Exotoxine (proteice, secretate n mediul extracelular) - Endotoxine (LPZ, legate de celula bacterian) Caracteristica exotoxinelor: Proteine produse de bacterii G+/GPot fi secretate n mediul extern, eliberate n spaiul periplasmic sau fixate pe suprafaa celulei Termolabile (excepie enterotoxina stafilococic i TS (toxina termostabil) a E. coli) Hidrosolubile i acioneaz la distan Efectul se instaleaz dup o perioad de incubaie Manifest tropism (specificitate de aciune)

Toxicitate nalt (DLM de ordinul ng/kg) Exotoxinele sunt imunogene (induc sinteza anticorpilor - antitoxine) Antitoxinele neutralizeaz activitatea exotoxinei (faza de fixare pe receptorii celulari) Exotoxinele tratate cu formol 0,4% i meninute la 39-40C timp de 3-4 sptmni se transform n anatoxine. Ele sunt lipsite de toxicitate dar pstreaz imunogenitatea (utilizate n calitate de vaccin).

Suportul genetic al exotoxinelor: cromozom (dizenteric, ), plasmide (toxina antraxului, toxina tetanic), profagi (toxina difteric, botulinic). Tipurile de exotoxine: I. Toxine citolitice Deregleaz membranele celulare prin aciune enzimatic (fosfolipaza /lecitinaza, sfingomielinaza) sau prin formarea porilor (streptolizina O, -toxina/hemolizina S.aureus, leucocidina)

II. Toxine citotoxice, de tip A-B (acioneaz n interiorul celulei). Ex.: toxina difteric, botulinic, tetanic, holeric, etc Au structur bipartit: fracia polipeptidic B (cell binding) este responsabil de legarea de receptorii specifici din membrana celulei-int, fracia polipeptidic A (active) ptrunde n celul (prin endocitoz sau translocare) i determin activitatea toxic.

Fiecare citotoxin acioneaz strict specific: toxina difteric inhib sinteza proteinelor, - toxina botulinic i tetanic sunt neurotoxine, inhib eliberarea neurotransmitorilor, - toxina holeric i pertusic activeaz adenilat-ciclaza membranar, etc

Obinerea exotoxinelor bacteriene

-

Cultivarea tulpinii toxigene n mediu lichid Filtrarea culturii pentru separarea toxinei Purificarea toxinei Concentrarea toxinei Determinarea activitii toxinei (se msoar in uniti de floculare Lf )

Caracteristica endotoxinei bacteriene Reprezint complexe LPZ din peretele celular G- (cel mai toxic component este lipidul A). Este eliberat n urma lizei bacteriilor (sub influena sistemului imun al gazdei sau a unor AB). Termostabil Ne-imunogen Nu poate fi transformat n anatoxin DLM de ordinul mg/kg Efectul se manifest imediat Determin efecte generale, indiferent de provenien

Mecanismul de aciune al endotoxinei :

LPZ induce secreia unor substane biologic active (citokine pro-inflamatoare: IL-1, IL-6, IL-8, IL-12, TNF-a) de ctre macrofage i alte celule. Iniial LPZ se leag de o protein seric (LPS-binding protein), ulterior acest complex interacioneaz cu un receptor de pe membrana macrofagului, CD 14. Exist i molecule solubile de CD 14, astfel endotoxina poate s acioneze asupra altor celule, de ex.: celulele epiteliale. Un alt receptor macrofagic poate interaciona cu LPZ receptorul toll-like (TLR4).

n doze mari citokinele pot provoca ocul endotoxinic (septic), comun pentru toate bacteriile G-: - Febr (eliberarea pirogenilor IL-1, TNF de ctre celulele care au captat endotoxina) - Leucopenie, urmat de leucocitoz - Tulburri de coagulare (activarea factorului XII formarea fibrinei i obstrucia capilarelor sanguine coagulare intravenoas diseminat) - Hemoragii (consumarea factorilor de coagulare) n diverse organe (rinichi, suprarenale, plmni, creier) - Vazodilatare, urmat de colaps vascular (sechestrarea periferic a sngelui, hipovolemie, acidoz metabolic, scderea brusc a presiunii sanguine)

n consecin au loc leziuni hemoragice i necroz n diverse organe (rinichi, suprarenale, plmni, creier...). Pronosticul este foarte sever. Ali factori ce asigur persistena mi/o: - Variaii antigenice - Mimicria antigenic

IV. Moduline i invazine

Injectate la suprafaa sau direct n interiorul celulei-int - Induce penetrarea (internalizarea) i propagarea bacterian Se ntlnesc la Yersinia, Shigella, Salmonella, Escherichia
-

P A T O G E N E Z A BOLII INFECIOASE Ptrunderea i rspndirea mi/o n ma/o Sursa de infecie: omul bolnav, reconvalescent, purttor sntos (infecii antroponoze) sau animalele (infecii zooantroponoze) Mecanismele de transmitere 1. Prin contact (direct, indirect) 2. Fecal-oral (alimentar, hidric, etc) 3. Aerogen (aer-praf, aer-picturi) 4. Transmisiv (prin intermediul vectorilor) 5. Vertical (transplacentar)

Microbii penetreaz prin tegument, mucoase sau direct n snge (pori de intrare). Un microb poate avea una sau mai multe pori de intrare. Doza critic ex.: dizenterie 102 mi/o, febr tifoid 105 , holer 109 . La poarta de intrare bacteria ader la celule (adeziunea) i se multiplic local (colonizarea), formnd focarul primar de infecie. Infecia poate rmne localizat sau poate s se rspndeasc (invazia) pe cale limfatic, sanguin, pe calea nervilor sau prin continuitate (din aproape n aproape). n esutul afectat mi/o se multiplic i provoac leziuni direct prin intermediul enzimelor sau toxinelor sau indirect, via mecanisme imune. Mi/o se elimin cu diferite secrete sau excrete ale ma/o, prin care are loc contaminarea altor gazde sau obiecte

Dinamica evoluiei bolii infecioase I. Perioada de incubaie (de la penetrarea mi/o pn la apariia primelor simptome). Durata variabil (ore ani). Microbul se adapteaz, se multiplic, produce toxine, enzime, etc. II. Perioada de invazie (prodromal, de debut). Apar primele semne clinice, nespecifice (febr, frison, inapeten, astenie, etc). Durata 2-3 zile. III. Perioada de stare (a manifestrilor clinice specifice). Durata variabil. IV. Perioada terminal (convalescen i vindecare, sau cronicizare, sau stare de portaj, sau deces)

Criteriile de apreciere a rolului etiologic al agentului cauzal n survenirea infeciilor specifice (postulatele lui Koch) 1. Bacteria trebuie s fie prezent la toate persoanele bolnave 2. Bacteria trebuie s fie izolat de la bolnav i meninut n cultur pur 3. Cultura pur inoculat la un voluntar sau la un animal experimental trebuie s reproduc simptomele bolii 4. Aceeai bacterie trebuie s fie reizolat de la voluntarul sau animalul infectat Actualmente se insist pe genomul bacterian (prezena

genelor de patogenitate)

 Rolul

mediului ambiant i social n infecie (condiiile economice, condiiile de via, catastrofe ecologice sau naturale, progresul n igiena public, etc). Maladii sociale: tuberculoza, pediculoza (tifosul exantematic), sifilisul, etc.

Rolul macroorganismului n procesul infecios. Rezistena nespecific a ma/o. Pentru meninerea coerenei celulelor i esuturilor i pstrarea integritii sale ma/o pune n joc 2 categorii de procese aprute succesiv n cursul evoluiei: - Rezistena nespecific, nnscut dezvoltat filogenetic, asigurat de factori constituionali. Rspuns maxim imediat, nespecific, antigenindependent - Imunitatea (rezistena specific) s-a dezvoltat ontogenetic, antigen-dependent i antigenspecific, rspuns maxim peste cteva zile de la agresie, se caracterizeaz prin memorie imunologic.

Rezistena nespecific
Rezistena nespecific este asigurat de factori tisulari (de barier), factori celulari i umorali. Factori tisulari (de barier) - Tegumentul (barier mecanic - integritatea, descuamarea stratului cornos; barier biologic flora normal, chimic - pH acid al tegumentului) - Mucoasele (barier mecanic - integritatea, micarea cililor, scurgerea secretelor; chimic secreiile digestive, pH acid al urinei; biologic flora normal; barier enzimatic enzimele din secreiile mucoaselor, ex.: lizozimul, lactoferina)

Dac barierele au fost depite, atunci organismul dispune de ali factori de rezisten nespecific: factori celulari i umorali. Factori celulari de rezisten nespecific - Reacia inflamatoare. mpiedic multiplicarea i rspndirea microbilor i asigur distrugerea lor. Fagocitoza (component al reaciei inflamatoare). Asigur captarea i distrugerea substanelor strine, inclusiv a mi/o, celulelor infectate, celulelor tumorale. Celulele fagocitare (fagocitele) 1 - Leucocitele PMN 2 Macrofagele (monocite n snge, macrofage fixe cel. Kupffer, macrofage alveolare, osteoclaste, microglia, macrofage din splin i ganglioni limfatici).

Pentru a interveni, fagocitele trebuie s recunoasc bacteriile ca particule strine. Exist molecule solubile i membranare care pot recunoate componente bacteriene: 1. Solubile - lectinele care se pot lega de manoza din peretele celular bacterian; proteine plasmatice ce leag LPS bacterian 2. Membranare pe macrofage exist receptori de manoz, receptorul CD 14 pentru LPZ, receptori Toll-like (TLR). TLR pot recunoate diferite molecule bacteriene: LPZ, peptidoglicanul, lipoproteine, acizi lipoteichoici, flagelina. Ali receptori: receptori pentru Fc al IgG, pentru complement (CR1, CR3, CR4), pentru interferon, limfokine, lectine, fibronectin, .a.

FAZELE FAGOCITOZEI I. Chemotaxisul (atractani proteine bacteriene, fragmente de perete celular, capsule, endotoxina, chemokine, etc) III. Adeziunea mi/o la fagocit (fagocitul recunoate molecule strine de pe suprafaa bacteriilor monomeri de PG, acizi teichoici, LPZ, acid micolic, ADN bacterian, ARNd.c. viral, manoza, glicani din fungi, etc ) Inhibitori capsula, antigenul O, proteina M, proteina A, plasmo-coagulaza, etc. Bacteriile patogene care nu pot fi fagocitate se numesc extracelulare.

Stimulatori cationi de Ca2+, proteina C -

reactiv, opsonine (fracii de complement (C3b), fibronectina, unii anticorpi). Datorit receptorilor opsoninele acoper suprafaa bacteriilor (opsonizare). Fagocitele de asemenea posed receptori pentru opsonine i astfel faciliteaz adeziunea i ingestia mi/o. IV. Ingestia (nglobarea) i formarea fagosomei.

III. Distrugerea (digestia) intracitoplasmatic Fagosoma fuzioneaz cu lizosoma, n interiorul fagolizosomei formate mi/o va fi omort sub aciunea enzimelor, anionilor superoxizi, H2O2, pH acid, apoi digerat de enzimele hidrolitice. Produsele degradate pot fi eliminate din celul (PMN, macrofagele) sau dup o selecie i pregtire prealabil (processing) unele peptide vor fi expuse

pe membrana macrofagelor n asociaie cu molecule ale CMH. Ele vor contribui la stimularea

imunitii prin interaciunea cu receptorul pentru Ag de pe limfocitele T. Aceasta este fagocitoza complet.

Fagocitoza incomplet agentul persist i se

multiplic n fagocit (micobacterii, gonococi). Cauze: inhibiia formrii fagolizosomei, eliminarea bacteriei din fagosom nainte de fuziunea cu lizosoma, etc). Acetia sunt patogeni facultativ intracelulari.


1. 2.

Aprecierea strii funcionale a fagocitelor Procentul fagocitelor active (N - 30-60%) ponderea fagocitelor care au nglobat cel puin un mi/o Numrul fagocitar (N - 4 - 24) nr de mi/o nglobate n mediu de un fagocit

Alte celule cu activitate nespecific: celulele K i NK Factori umorali de rezisten nespecific Reactivi de faz acut organismul supus unei agresiuni reacioneaz prin sinteza i secreia crescut a unor proteine plasmatice: inhibitori de proteaze, proteine ale sistemului complement i ale coagulrii, proteina C reactiv, protrombina, fibrinogenul, etc. Acestea mresc rezistena gazdei, limiteaz leziunile tisulare i favorizeaz vindecarea

Complementul reprezint un sistem complex de proteine

Exist peste 30 de fracii ale C. C1-C9 sunt solubile, celelalte au rol de receptori membranari. Fraciile C1-C9 circul n ser sub form inactiv, care n procesul activrii capt proprieti enzimatice. Activitatea biologic a complementului: Opsonizarea bacteriilor Aciune citolitic Activitate anafilactic stimuleaz chimiotaxisul i activeaz neutrofilele, degranularea mastocitelor i bazofilelor Activarea limfocitelor B

termolabile solubile i membranare. Se ntlnesc n plasma sangvin, limf i exsudate. Nu se detecteaz n saliv, lacrimi, urin, transsudate.

2. Properdina proteine serice care particip la activarea complementului pe cale alternativ. 3. -lizinele proteine serice termostabile (63 grade) cu activitate antimicrobian asupra bacteriilor G+ n special 4. X lizina, protein seric termostabil (70-100 grade), produce liza bacteriilor G 5. Lizozimul prezent n lacrimi, saliv, ser sanguin, favorizeaz liza bacteriilor 6. Anticorpii normali 7. Interferonii (glicoproteine cu aciune antiviral, antiproliferativ i imunomodulatoare)