DIVIZIUNEA CELULAR Reproducerea organismului are la baza sa reproducerea celular.

Perioada ce se deruleaz ntre dou diviziuni mitotice alctuiete ciclul celular (din gr. kyklos - cerc). Ciclul celular cuprinde interfaza i diviziunea celulei (fig.1).

Fig. 1. Schema ciclului celular: G1 perioada presintetic; S perioada sintetic; G2 perioada postsintetic; M mitoza. Interfaza (din gr. inter ntre i gr. phasis aspect) reprezint intervalul dintre dou mitoze consecutive. n interfaz, celula se pregtete de diviziune, aceasta ns nu nseamn c ea se afl n stare de repaus, dimpotriv, este cea mai activ din punct de vedere metabolic n ciclul celular, n care au loc o serie de procese eseniale pentru declanarea diviziunii celulare. n aceast etap a ciclului celular, nucleul reprezint o structur optic uniform, cromozomii sunt despiralizai, vizibili fiind doar nucleolii. Interfaza este format din trei perioade (subfaze), iar fiecare dintre ele se caracterizeaz printr-o serie de particulariti. 1. Perioada G1 (presintetic) (din eng. G-gop gol). n perioada G1 nu se produce sinteza ADN-ului (cantitatea de ADN este 2n (2c)), dar se sintetizeaz intensiv ARNm, proteinele, enzimele. n afar de aceasta, n celul se acumuleaz ATP, iar numrul de organite celulare crete. Perioada G1 constituie 25-50% din timpul interfazei (4-10 ore). La o serie de celule (celulele maligne), plasmodiul mixomicetei (Fusarium) poate lipsi.

2. Perioada S (sintetic) (din eng. S-synthesis sintez). n aceast perioad are loc reduplicarea ADN-ului, cantitatea lui variind ntre 2c i 4c (dup numrul de cromatide). Paralel cu sinteza ARNr continu sinteza ARNm. Perioada S ocup 35-40% (5-8 ore) din interfaz. Ea nu poate lipsi n ciclul celular. 3. Perioada G2 (postsintetic). n aceast perioad continu sinteza ARN-ului i a proteinelor. Se sintetizeaz n cantiti mari tubulinele, actina i miozina, acestea fiind necesare dividerii celulare. Perioada G2 are o durat de 20-35% (3-5 ore) din interfaz. Dup interfaz celula se divide. Reproducerea celulelor asigur creterea, multiplicarea, diferenierea i regenerarea esuturilor, iar, n cele din urm, continuitatea vieii. Celulele procariote se reproduc ca rezultat al dividerii simple, fie prin strangulaie (bacteriile gramnegative), lamel median (bacteriile grampozitive), sau prin nmugurire (la rizobii). n prealabil, n celula iniial are loc reduplicarea moleculei de ADN cu participarea nemijlocit a plasmalemei, astfel celulele-fiice primesc aceeai informaie ereditar localizat n nucleoid. Celulele eucariote se reproduc pe dou ci: 1. prin diviziunea direct (amitoz); 2. prin diviziunea indirect (cariochinez i citochinez). Diviziunea direct reprezint o simpl scindare a nucleului i a citoplasmei, iar diviziunea indirect are loc n urma unor schimbri ale substanei nucleare. Diviziunea indirect poate fi: a. tipic sau ecvaional (mitoza); b. alotipic sau reducional (meioza); Amitoza (din gr. a fr, mitos fir, filament) reprezint diviziunea direct a celulei al crei nucleu se afl n interfaz. Amitoza a fost descoperit naintea mitozei. Ea se ntlnete la majoritatea organismelor eucariote: protozoare, metazoare, plante i este tipic att pentru animalele nevertebrate, ct i pentru plantele unicelulare. Amitoza se caracterizeaz printr-o serie de particulariti:

n aceast diviziune nu are loc condensarea cromozomilor; nu are loc formarea fusului de diviziune; iniial se multiplic nucleolii; dividerea nucleului are loc prin strangulare; dup dividerea nucleului nu este obligatorie i dividerea citoplasmei (ca rezultat se obin celule polinucleare).

Diviziunea amitotic este mai frecvent n celulele din esuturile patologice sau n celulele btrne, care i-au redus capacitatea de difereniere. n condiii normale, prin amitoz se multiplic unele dintre foiele embrionare ale animalelor, celulele foliculare ale ovarului, celulele glandelor endocrine i ale ficatului, iar la plante celulele ovarului, parenchima tuberculelor, edospermul. Mitoza (din gr. mitos - filament) reprezint diviziunea indirect a celulelor somatice cu dublarea prealabil i repartizarea uniform a numrului de cromozomi (materialul ereditar) n celulele-fiice. Mitoza are loc n celulele ce se afl n plin cretere: esutul embrionar i esuturile meristematice ale plantelor, organele hematopoetice i esuturile epidermice ale animalelor etc. Aceast diviziune asigur nmulirea celulelor, creterea i diferenierea individual, continuitatea genotipului. Mitoza a fost descoperit pentru prima dat de W. Fleming n 1879. Diviziunea mitotic are loc n celulele-mam diploide (cu 2n cromozomi sau 2c). n urma diviziunii mitotice, celula se dubleaz, genernd dou celule-fiice identice cu celula-mam (cu 2n cromozomi sau 2c). Ea ocup circa 10% din ciclul celular. n funcie de specia din care fac parte celulele ce se divid, mitoza poate dura ntre cteva minute i cteva ore. Mitoza este alctuit din 4 faze succesive: 1. Profaza perioada n care cromozomii devin vizibili n rezultatul spiralizrii i condensrii. Fiecare cromozom este dublat longitudinal i se evideniaz cele dou cromatide rsucite una n jurul celeilalte i unite n regiunea centromerului. Spre sfritul profazei, apar centrii mitotici, nucleolii devin mai mici i chiar dispar complet, degradeaz membrana nuclear. n concluzie: profaza mitozei se caracterizeaz prin urmtoarele procese:
o o o o o o

dublarea centriolilor (nc n interfaz) i migrarea lor spre polii celulei; condensarea cromatinei i evidenierea cromozomilor; degradarea nucleolilor; degradarea membranei nucleare (i, ca rezultat, a unei pri din reticulul endoplasmatic rugos); formarea fusului de diviziune (n celulele animale fusul de diviziune este radial, n celulele vegetale el este aranjat ntr-un singur plan); amestecul carioplasmei i hialoplasmei (fig. 2a).

Profaza ocup circa 50% (30 min) din mitoz. 2. Metafaza etapa n care cromozomii sunt delimitai i se aranjeaz n regiunea ecuatorului unde formeaz placa metafazic. Metafaza este stadiul n care se pot stabili, cu deosebit precizie, numrul, forma, mrimea cromozomilor specifici fiecrei specii. Cromozomii se ataeaz de centromer cu fibrele fusului de diviziune (pe fiecare fibr cte un cromozom). Cele dou cromatide ale fiecrui cromozom sunt aezate una lng alta i sunt unite n regiunea centromerului. Cnd metafaza se apropie de sfrit, centromerii ncep s se divid, iar de fiecare jumtate rmne prins cte o cromatid.

n metafaz poate s continuie degradarea membranei nucleare. Aadar, particularitile metafazei sunt urmtoarele:
o o o o

aranjarea cromozomilor la ecuatorul celulei; formarea plcii metafazice; aranjarea cromozomilor n form de stea (cu centromerul spre centru); fixarea cromozomilor prin intermediul fusului de diviziune (fusul de diviziune este alctuit din fibrele centriolo-cromozomiale i fibrele centriolo-centriolare) (fig. 2b).

Metafaza alctuiete circa 13% (8 min) din mitoz. 3. Anafaza const n clivarea longitudinal a cromozomilor i deplasarea lor (fiecare cromozom este monocromatidic) spre polii opui ai celulei. Astfel, la polii celulei se formeaz dou seturi de cromozomi cu aceeai constituie genetic ca i nucleul celulei-mam. Anafaza dureaz circa 7% (4 min) din timpul mitozei i se caracterizeaz prin:
o o

deplasarea cromatidelor fiecrui cromozom spre polii celulei (viteza deplasrii este de 0,2-5,0 m/min); aranjarea cromatidelor n timpul deplasrii n conformitate cu poziia centromerului (fig. 2c).

Fig 2. Diviziunea mitotic n celula animal: a) profaza; b) metafaza; c) anafaza; d) telofaza. Exist diferite opinii referitoare la natura forelor care mobilizeaz cromozomii monocromatidici (cromatidele) spre polii celulei.

Conform ipotezei biochimice, deplasarea cromozomilor, la desprinderea lor de centromer, are loc datorit polimerizrii n apropierea centriolilor a tubulinei (protein contractil) fusului de diviziune i depolimerizrii n regiunea centromerilor (chinetocorului). Conform ipotezei fiziologice, deplasarea cromatidelor este rezultatul contraciilor proteinelor contractile ale microtubulilor (actina i miozina). Ambele ipoteze merit atenie, mai ales c unele celule (celulele plantelor superioare) nu au centrioli. 4. Telofaza se caracterizeaz prin formarea la fiecare pol al celulei a cte un nucleu separat, care, dup despiralizarea cromozomilor, devine optic omogen. Spre sfritul telofazei apar nucleolii. Coninutul nucleolilor este similar cu cel al celulei-mam. n concluzie: telofaza se caracterizeaz prin:
o o o o o o

decondensarea cromozomilor; formarea unei noi membrane nucleare; formarea nucleolilor; degradarea fusului de diviziune; formarea centrului celular; citochineza i formarea a dou celule-fiice identice cu celula-mam (fig.2d).

Citochineza (din gr. kytos cavitate, kinesis micare) reprezint dividerea citoplasmei cu tot ansamblul de constituieni citoplasmatici i ai membranei celulare. Organitele celulare se repartizeaz ntr-o msur mai mare sau mai mic ntre celulele-fiice. Mecanismul citochinezei difer la plante i animale. La plante citocheneza are loc prin formarea fragmoplastului (a lamelei mediane) n regiunea ecuatorului, cu extinderea ulterioar spre periferie (se presupune c fragmoplastul deriv din tubulii fusului de diviziune i decurge cu participarea aparatului Golgi), iar la animale prin strangulare (de regul, n regiunea central i orientat spre centru). n rezultatul mitozei, dintr-o celul somatic (diploid-2n) se formeaz dou celule-fiice, n mare msur asemntoare ntre ele i cu celula-mam (sunt de asemenea diploide-2n). Dup gradul de asemnare dintre celulele-fiice i celula-mam, deosebim urmtoarele forme de mitoz: 1. mitoza homotipic celulele-fiice se aseamn ntre ele, dar sunt mai mature ca celula-mam (este caracteristic celulelor n difereniere); 2. mitoza homoheterotipic (sau asimetric) o celul-fiic se aseamn cu celulamam, iar cealalt difer; 3. mitoza de difereniere (sau ntinerire) celulele-fiice sunt mai tinere dect celulamam (este caracteristic limfocitelor). Celulelor somatice le sunt caracteristice urmtoarele variaii ale mitozei: 1. Ortomitoza centrul de formare a microtubulilor se afl n citoplasm. La rndul su, ortomitoza se poate diviza n: a. ortomitoz deschis (sau mitoz obinuit);

2.

3. 4. 5. 6. 7. 8.

b. ortomitoz semideschis se pstreaz membrana nuclear, cu excepia zonelor polare (este caracteristic unor alge roii, brune, verzi, unor ciuperci); c. ortomitoza nchis membrana nuclear se pstreaz intact. Fusul de diviziune se formeaz n nucleu. Se ntlnete la unele infuzorii (dividerea micronucleelor). Pleuromitoza nu se distruge membrana nuclear, iar la formarea fusului de diviziune nu particip centriolii, ci structurile din partea intern a membranei nucleare (plcile centriolare). Se ntlnete la protozoare, la unele ciuperci (hitridiomicete, oomicete, zigomicete, ascomicete). Criptomitoza nu se formeaz placa metafazic. Se ntlnete la unele ciuperci inferioare, la protozoare. Criptopleuromitoza form intermediar cu trsturi caracteristice de criptomitoz i pleuromitoz. Mitoza euglenoidal nu se formeaz fusul de diviziune. Mitoza infuzorial macronucleul se divide amitotic, iar micronucleul mitotic. Endomitoza are loc mrirea cantitii de ADN, ca urmare a condensrii mitotice a cromozomilor i a poliploidizrii. Cauza endomitozei este dereglarea activitii fusului de diviziune. Se ntlnete la pduchii de ap. Politenia are loc mrirea dimensiunilor cromozomilor (cromozomii politenici) interfazici ca rezultat al replicrii ADN-ului n perioada S. Cromozomii nu sunt supui condensrii mitotice (nu particip la mitoz). Politenia poate fi observat n celulele glandelor salivare ale dipterelor, n sinergidele cepei, n antipodele grului.

Asupra mitozei acioneaz o serie de factori: 1. intracelulari ce reprezint raportul nucleo-plasmatic. Odat cu creterea volumului celulei are loc dividerea nucleului i a citoplasmei. Procesul depinde de amplificarea genelor; 2. intercelulari ce reprezint factorii cei mai importani i sunt rezultatul interdependenei diverselor tipuri de celule (btrne i tinere) din esut; 3. generali ce reprezint factorii externi (temperatura, lumina), substanele chimice (vitamine, hormoni). Semnificaia biologic a mitozei este urmtoarea: 1. asigur constana numrului de cromozomi (a materialului ereditar) n procesul de dividere a celulelor somatice; 2. asigur integritatea structural a esuturilor n caz de pierdere a celulelor (substituirea eritrocitelor, a celulelor din epiteliul intestinului etc.); 3. asigur creterea i dezvoltarea organismului pluricelular; 4. asigur regenerarea esuturilor i a organelor. Meioza (din gr. meion mai mic ) reprezint diviziunea indirect a celulelor germinale (ovocitul i spermatocitul de ordinul I) n zona de maturizare ce formeaz celulele sexuale (gamei). Meioza a fost descoperit de E. van Beneden n 1883 la Parascaris equorum. Formarea gameilor este precedat de dou diviziuni succesive deosebite: 1. diviziunea reducional (sau primar, heterotipic, meioza I); 2. diviziunea ecuaional (sau secundar, homotipic, meioza II).

Ca rezultat al primei diviziuni, dintr-o celul diploid (2n) se obin dou celule haploide (n). A doua diviziune este echivalent celei mitotice, iar din cele dou celule haploide se obin 4. n urma unor procese, aceste celule dau natere gameilor. Meioza este precedat de interfaz, n care are loc reduplicarea moleculelor de ADN (4c). ntre diviziunea I i II poate exista o perioad de trecere interchineza , dar fr sinteza suplimentar de ADN. Fiecare diviziune este format din 4 faze succesive (profaza, metafaza, anafaza, telofaza) cu trsturile lor specifice (fig. 3.1 i 3.2). Profaza I se caracterizeaz prin schimbri profunde cu semnificaie genetic deosebit. n mod obinuit, are o durat mult mai mare dect cea a mitozei. La plante, profaza poate dura pn la cteva zile, iar la animale, ea poate dura sptmni sau chiar ani de zile (la unele mamifere). Acestei faze a meiozei i sunt caracteristice o serie de modificri ale cromozomilor. Profaza I este alctuit din cinci stadii succesive: leptoten, zigoten, pachiten, diploten, diachinez. n leptoten (din gr. leptos fin, subire; teino a ntinde) se evideniaz cromozomii subiri, formai din 2 cromatide, fr clivaj longitudinal. Ei se mpletesc ntr-o reea numit spirem. n zigoten (din gr. zigon cuplu) are loc mperecherea cromozomilor omologi (unul matern i unul patern) pe axul longitudinal n procesul sinapsei. Perechile de cromozomi omologi formeaz bivalenii descoperii de T. H. Montgomery (1901) i W.S. Sutton (1902). Conjugarea cromozomilor are loc treptat dintr-un anumit punct i se extinde asemenea unui fermoar. n acest caz, locii omologi corespund. Dac cei doi cromozomi din bivalent nu sunt identici, conjugarea are loc doar ntre poriunile omoloage. Se presupune c forele care determin conjugarea sunt de natur electrostatic sau hidrodinamic. Formarea sinapsei este caracteristic numai meiozei. n zigoten are loc nceputul sinapsei, care degradeaz n diploten. Complexul sinaptonemal (sinaptonul) este o structur axial tripartit: a. un element central (10-40 nm) situat de-a lungul celor doi cromozomi omologi conjugai; b. dou elemente laterale (30-40 nm), cte unul pentru fiecare cromozom omolog; c. zona central (de 60-120 nm). Sinaptonul are o mrime de 120-240 nm, iar la suprafa este nconjurat de fibre radiare care contacteaz cu membrana nuclear.

Fig. 3.1. Meioza. Diviziunea reducional: a) profaza I; b) metafaza I; c) anafaza I; d) telofaza I. Funcia sinaptonului este de a menine cromozomii conjugai i de a asigura formarea chiasmelor (punctul de contact dintre cromozomii omologi) i a crossing-overului. n zigoten se sintetizeaz o mic cantitate de ADN (0,3% z-ADN). n pachiten (din gr. pachys gros) are loc condensarea i spiralizarea cromozomilor n procesul sinapsei. Cei doi cromozomi omologi formeaz o figur tetracromatidic, numit tetrad. ntre cromatidele omoloage nesurori se evideniaz punctele de contact (chiasmele), considerate drept expresie citologic a crossing-overului. Crossing-overul reprezint schimbul de segmente dintre cromatidele nefiice ale cromozomilor omologi.

Fig. 3.2. Meioza. Diviziunea ecuaional: a) profaza II; b) metafaza II; c) anafaza II; d) telofaza II. n pachiten continu sinteza unei cantiti mici de ADN (0,1% p-ADN). De asemenea, poate avea loc activizarea capacitii de transcriere a cromozomilor i formarea cromozomilor perie de lamp. n diploten (din gr. diploos dublu) are loc clivajul cromozomilor pe toat lungimea lor i respingerea cromatidelor cromozomilor omologi. Acest proces ncepe n regiunea centromerului. Cromozomii omologi (formai din 4 cromatide 4 c) mai sunt unii prin chiasme. Prezena chiasmelor este dovada crossing-overul. Spre sfritul diplotenului, sinaptonul se descompune, iar nucleolii se reduc n dimensiuni. n diachinez (din gr. de prin, de-a curmeziul; kinesis micare) ngroarea cromozomilor este maxim. Cromozomii sunt unii doar prin cteva chiasme. Spre sfritul diachinezii, nucleolii i membrana nuclear dispar, ncepe fusul de diviziune. Metafaza I se caracterizeaz prin dispariia membranei nucleare i formarea fusului de diviziune. Cromozomii bivaleni se ndreapt spre ecuatorul celulei formnd placa metafazic. Cromozomii din perechi au o poziie simetric: unul este orientat spre un pol, iar altul spre cellalt pol. Fibrele fusului de diviziune se fixeaz de cromozomii din bivalent. ntre cei doi

centromeri ai bivalentului are loc o respingere activ ceea ce duce la ndeprtarea cromozomilor omologi. Anafaza I se caracterizeaz prin deplasarea spre polii celulei a cte un cromozom (din dou cromatide) din fiecare bivalent. Cromatidele cromozomului se deplaseaz perechi, deoarece nu s-a produs diviziunea centromerului. n rezultat, la polii celulei are loc reducerea numrului de cromozomi de la 2n la n (de la 4c la 2c). Telofaza I se caracterizeaz prin formarea a dou nuclee haploide (n), iar fiecare cromozom conine dou cromatide (2c). Nucleele i restabilesc structura, apare membrana nuclear, urmeaz citochineza. n rezultat, se obine o diad (dou celule-fiice). Dup telofaza I urmeaz interfaza (interchineza), dar ea nu este obligatorie (la unele organisme poate s lipseasc chiar i telofaza I, anafaza I fiind urmat de a doua diviziune meiotic). Dup interchinez (n care numrul de cromozomi nu se schimb) urmeaz a doua diviziune meiotic diviziunea ecuaional sau homotipic. Diviziunea ecuaional se aseamn cu cea mitotic, ns se divid dou celule haploide (fiecare cromozom const din dou cromatide 2c), care formeaz 4 celule haploide, cromozomii fiind alctuii dintr-o cromatid 1c. Aceast diviziune se deruleaz, de asemenea, n 4 faze: profaza II, metafaza II, anafaza II, telofaza II. n profaza II are loc condensarea cromozomilor, degradarea nucleolilor i a membranei nucleare. ncepe fusul de diviziune. Aceast faz lipsete la organismele care nu au trecut prin telofaza I i prin interchinez. n metafaza II se termin formarea fusului de diviziune. Cromozomii se aranjeaz la ecuator, formnd placa metafazic. Ei sunt fixai de fibrele fusului de diviziune n regiunea centromerului. n anafaza II cromatidele-surori ale fiecrui cromozom se despart i se ndreapt spre polii celulei. n telofaza II cromozomii, ajuni la cei doi poli, se despiralizeaz. Pe parcursul acestei faze se restabilesc nucleele, apare membrana celular i patru celule haploide (numrul de cromozomi monocromatidici este de dou ori mai mic dect n celula-mam). Aceste patru celule alctuiesc o tetrad i sunt precursorii gameilor. La animale ele se numesc spermatide (la masculi) i megaspori (la femele). Celulele obinute n rezultatul meiozei au o evoluie diferit. La masculi, toate cele patru celule vor deveni gamei-masculi sau spori n consecina procesului de spermatogenez (sau microsporogenez). La femele, trei dintre cele patru celule avorteaz, transformndu-se n nuclee polare, iar cea de-a patra celul se transform n gamet-femel.

La plante, dou dintre celulele tetradei (uneori toate patru) particip la formarea sacului embrionar, n care are loc formarea ovulului, a sinergidelor, a celulelor-antipod i a celulelor diploide centrale. n concluzie: diferitor grupe de organisme le sunt caracteristice diverse tipuri de meioz: 1. meioza gametic (sau terminal) n rezultatul meiozei apar spermatozoizi i ovule care nu se divizeaz ulterior i sunt apte de fecundaie (se ntlnesc la animalele superioare); 2. meioza zigotic (sau iniial) n rezultatul meiozei apar celule vegetale cu un numr haploid de cromozomi (se ntlnete la alge i ciuperci); 3. meioza sporal (sau intermediar) n rezultatul meiozei se formeaz mega- sau microspori haploizi, la dividerea ulterioar a crora se formeaz gamei. Este o parte component a procesului general de sporogenez (se ntlnete la plantele superioare). Din cele menionate anterior se impune concluzia c meioza i mitoza se deosebesc esenial (urmrii tabelul 1). Semnificaia biologic a meiozei este urmtoarea: 1. Asigur constana numrului de cromozomi n cadrul reproducerii sexuate, micornd de dou ori numrul lor n celulele sexuale. n urma fecundaiei, n zigot, se restabilete de fiecare dat numrul diploid de cromozomi. n lipsa acestui proces, ar fi pus n pericol nsi existena speciei. De exemplu, la cstoria unei femei cu un brbat (ambii avnd cte 46 de cromozomi) copiii ar avea cte 92 de cromozomi, iar nepoii cte 184 .a.m.d. pn se va ajunge la infinit? i invers, n acest caz prinii tinerilor cstorii ar fi trebuit s aib cte 23 de cromozomi fiecare, iar buneii cte 12,5 cromozomi...? E bine cunoscut ns faptul c numrul de cromozomi este stabil pentru fiecare specie, aceast nsuire fiind determinat anume de meioz. 2. Asigur diversitatea (heterogenitatea) genetic ca rezultat al crossing-overului. Astfel, populaiile organismelor devin mai heterogene i, evident, se pot adapta mai uor la condiiile mediului. Tabelul 1: Deosebirile dintre mitoz i meioz Mitoza Meioza 1. Este caracteristic celulelor somatice. Este caracteristic celulelor germinale. n rezultatul dividerii se obin dou celule n consecina dividerii se obin patru celule 2. diploide. haploide. 3. Este compus dintr-o singur diviziune. Este compus din dou diviziuni succesive. Profaza are o durat lung (n comparaie cu 4. Profaza este de scurt durat. cea a mitozei) i este alctuit din 5 stadii succesive. Cromozomii omologi nu formeaz organizat Cromozomii omologi n profaza I formeaz 5. bivaleni. bivaleni. Nu se formeaz sinapsa (complexul 6. n profaza I se formeaz sinaptonul. sinaptonemal). De regul, nu apar chiasme i nu are loc n profaza I are loc (cu o frecven destul de 7. crossing-overul. nalt) crossing-overul.

8. 9.

n profaz nu se sintetizeaz suplimentar ADN. n anafaz spre poli migreaz cte o cromatid din fiecare cromozom.

n profaz se poate sintetiza suplimentar o mic cantitate de ADN (0,3% z ADN i 0,1% p ADN). n anafaza I spre poli migreaz cte un cromozom din fiecare bivalent.