Sngele: structura i funciile celulelor sangvine

Sngele este un esut conjunctiv lichid alctuit din celule, fibre extracelulare (poteniale) i substan amorf extracelular (plasma). - Celulele sngelui sunt produse de mduva osoas i constau din eritrocite, leucocite i trombocite. - Fibrele extracelulare poteniale din snge sunt fibre de fibrinogen ce se transform n fibrin n momentul formrii cheagului de snge. Sngele coagulat este un esut conjunctiv semisolid care oprete repede sngerarea i furnizeaz celulele necesare vindecrii rnii. Funciile principale ale sngelui - Sngele are rol n transportul oxigenului i nutrienilor spre celule precum i a rezidurilor de la nivelul celulelor spre rinichi i plmni. - Menine homeostazia organismului. -Citologia i chimia sngelui au rol n definirea i stabilirea strii de sntate a organismului. Celulele sagvine la om

ERITROCITELE Distribuie. Eritrocitele (globule roii sau hematii) reprezint cca 45 % din volumul total al sngelui. Sunt celulele predominante din sngele periferic (volumul total al acestuia fiind n medie 5 l). Un individ prezint n sngele periferic 25 trilioane de eritrocite. Structur. Au forma unor discuri biconcave i dei suprafaa lor este redus (aproximativ 130 m2) suprafaa total a eritrocitelor din sngele periferic este de 2000 ori mai mare dect suprafaa pielii. Imensa capacitate a eritrocitelor de a transporta gazele este parial datorat acestui fapt. Forma eritrocitelor este un compromis ntre suprafaa maxim pentru absorbia oxigenului i volumul maxim pentru stocarea hemoglobinei (Fig. 1).

Fig. 1. a) Forma aplatizat, optim pentru schimbul de gaze; b) forma sferic, optim pentru stocarea unei cantiti maxime de hemoglobin; c) form biconcav, un compromis ntre cele dou forme menionate anterior.

Aproximativ 1/3 din masa eritrocitelor este hemoglobin, o protein compus din 4 lanuri de globin i grupare hem (o porfirin ce conine fier, cu o mare capacitate de fixare a oxigenului). Hemoglobina A care predomin n sngele unui adult conine dou perechi de lanuri de - globin i dou de - globin. Eritrocitele nu conin organite celulare. Funcii. Eritrocitele transport O2 de la alveolele pulmonare spre esuturile periferice i CO2 de la esuturi spre alveole. Au o durata medie de via de cca 120 zile. Distrugerea eritrocitelor are loc la nivelul splinei, ficatului i mduvei osoase. LEUCOCITELE Au form sferic sau ovoidal i pot emite pseudopode, cu ajutorul crora se deplaseaz i fagociteaz. Sngele periferic conine dou tipuri de leucocite: granulocite i agranulocite. Denumirea de granulocite provine de la granulele (lizozomi) din citoplasma acestor celule. Granulocitele se mai numesc i polimorfonucleare din cauza nucleului care prezint mai muli lobi. In funcie de tipul coloranilor cu care se coloreaz granulele, granulocitele se mpart n: Neutrofile, Eozinofile (Acidofile) i Bazofile. Agranulocitele (nu conin granule) se numesc i mononucleare (au nucleu fr lobi) i includ: Limfocite i Monocite. Neutrofilele

Distribuie: Reprezint 40-60% din leucocitele sngelui. 1 mm 3 de snge conine 4500 neutrofile. Structur. Nucleul prezint 3-5 lobi, este predominant heterocromatic i nu conine nucleoli. Citoplasma este moderat acidofil, se coloreaz roz pal i prezint dou tipuri de granule. a) granule azurofile (primare) se coloreaz albastru i sunt n numr redus n celulele mature. b) granule specifice (secundare) se coloreaz n nuane de brun. Funcii. n fagocitoz i distrugerea bacteriilor. Eozinofilele Distribuie. Reprezint 1% din leucocitele sngelui. 1mm3 de snge conine 200 eozinofile. Structur. Sunt celule mobile cu rol n fagocitoz i au dimensiuni similare cu neutrofilele (12-15 m). Conin multe granule mari ce se coloreaz rou sau orange cu eozin. Nucleul are doi lobi (uneori trei). Funcii. Omoar larvele parazite din sngele periferic sau din lamina propria* a intestinului. Persoanele infestate cu parazii pot avea foarte multe eozinofile (90 % din totalul leucocitelor). Intervin i n coagularea sngelui; au rol antihistaminic etc. Bazofilele Distribuie. Sunt cele mai rare leucocite. 1mm3 de snge conine 50 bazofile. Structur. Sunt un pic mai mici dect celelalte granulocite (9-11 m). Nucleul prezint trei lobi (uneori doi). Citoplasma conine multe granule ce se coloreaz albastru-violet nchis. Funcii. Intervin n strile inflamatorii de oc i stress. Se pot deplasa n esuturi prin micri amoeboidale (emit pseudopode). Limfocitele Distribuie. Sunt cele mai comune agranulocite. 1mm3 de snge conine 2 500 limfocite.

*lamina propria: un strat subire de esut conjunctiv lax aflat sub epiteliul tractusului respirator,
digestiv sau urinar i care mpreun cu epiteliul formeaz mucoasa.

Structur. Au dimensiune variabil (5-15 m), existnd limfocite mari i limfocite mici. Nucleul este rotund, nu prezint lobi i ocup aproape ntreaga celul; se coloreaz albastru nchis (ca o pat de cerneal) datorit faptului c este heterocromatic. Citoplasma nu conine granule specifice. Funcii. Se deplaseaz ca i granulocitele emind pseudopode, dar nu prezint fenomenul de fagocitoz, ele fiind implicate n sinteza de anticorpi. Sunt celulele cheie din sistemul imunitar. Monocitele Distribuie. 1 mm3 de snge conine 300 monocite. Structur. Sunt cele mai mari leucocite (12-18 m). Nucleul este rotund, cu o scobitur lateral (ca o potcoav sau reniform) i prezint att heterocromatin ct i eucromatin, deci se coloreaz ambicromatic (albastru nchis i deschis). Citoplasma nu conine granule specifice. Funcii. Sunt precursoarele macrofagelor, fiind formele lor circulante. Se deplaseaz ca i granulocitele emind pseudopode, ele fiind implicate n fagocitarea structurilor mari (celule bacteriene, celule ntregi, virusuri, corpuri strine anorganice). Monocitele ce trec din snge n plmni pentru nlturarea prafului, funinginei de la fumtori etc. se numesc macrofage alveolare. Cele ce intr n esutul conjunctiv pentru a fagocita se numesc histocite.

Fig. 2. Frotiu din snge uman: a) eritrocite; b) neutrofil; c) eozinofil; d) limfocit 4

TROMBOCITELE Distribuie. 1 mm3 de snge conine 200 000 - 400 000 trombocite. Structur. Sunt fragmente de celule i au un granulomer central ce se coloreaz purpuriu i un hialomer periferic ce se coloreaz slab. Pot forma aglomeraii. Funcii. Conin granule cu serotonin sau factori de coagulare, fiind importante n coagularea sngelui. Cnd sunt expuse la substane rezultate n urma tierii vaselor sangvine (ex. colagen) se alipesc una de cealalt i de fibrin. Masa de trombocite i fibrin rezultat formeaz cheagul de snge.

Celulele sangvine la broasc

Spre deosebire de eritrocitele de la mamifere care sunt biconcave i fr nucleu, cele de la broasc au o form oval i prezint un nucleu. Aceeai form i structur au i eritrocitele de la peti, psri i reptile. Sngele de broasc nu conine trombocite, iar eritrocitele i leucocitele sunt similare ca dimensiune (Fig. 3)

eritrocit

leucocit

Fig. 3. Frotiu din snge de broasc

Realizarea i colorarea frotiului sangvin. Mod de lucru

1. Recoltarea. Recoltarea sngelui uman se poate face din pulpa degetului. Se dezinfecteaz degetul cu alcool, se las s se usuce i se neap pielea rapid cu un ac nou, de unic folosin. Se terge prima pictur, iar urmtoarele se recolteaz fr a presa degetul (pentru a nu dilua astfel sngele cu limf). La obolan se recolteaz snge din vena codal. Pentru aceasta, se ine coada timp de 5 minute n ap cald pentru dilatarea vaselor sangvine. Se terge coada cu pnz curat, iar vrful cozii se dezinfecteaz cu alcool. Cu un foarfece se reteaz vrful cozii i se recolteaz snge (maxim 0,5 ml). 2. Pstrarea sngelui recoltat. Dac sngele nu este folosit imediat, acesta trebuie recoltat cu anticoagulant i pstrat n frigider. Ca anticoagulant se folosete heparina (o pictur de soluie la 5 ml snge). Noi vom folosi soluie de EDTA ce se repartizeaz n prealabil n tuburile de recoltare (0,2 ml) i se usuc. 3. Realizarea frotiului. 3.1. Pe o lam degresat se pune la o extremitate o pictur mic de snge. Cu captul altei lame se atinge pictura care se ntinde prin capilaritate la marginea de contact dintre lame. 3.2. Se deplaseaz a doua lam ncet n lungul primeia innd-o sub un unghi de 30, obinndu-se astfel un frotiu. 3.3. Se agit frotiul n aer pentru uscare. 4. Fixarea. 4.1. Lamele se aeaz pe cele dou baghete de sticl deasupra tvii. 4.2. Fixarea se face prin acoperirea lamei cu alcool metilic (2 min.). 5. Colorarea. 5.1. Se acoper complet suprafaa lamei cu soluie May-Grnwald diluat (2 min.). 5.2. Se vars soluia May-Grnwald i fr s se spele, lamele se acoper cu soluie diluat Giemsa (20-30 min.). Pentru colorarea trombocitelor se coloreaz timp de 45 min. 5.3. Lamele se spal cu ap de robinet i se las s se usuce n poziie vertical. 6. Frotiul se examineaz la microscop cu obiectiv 40 X sau 100 X cu imersie.

Prepararea soluiilor 1.Soluie EDTA (etilendiaminotetraacetat de Na): 1% EDTA n NaCl 0,9 % 2.Soluie May-Grnwald diluat: 1- 4 picturi la 1ml ap distilat. 3.Soluie Giemsa diluat: Giemsa cu ap distilat tamponat, 1:10. 4.Ap distilat tamponat: tampon fosfat cu ap distilat, 1:9. 5.Tampon fosfat: KH2PO4 M/15 cu Na2HPO4 M/15, 1:1. 6