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PRACTICA PROTOCOLO PARA LA FIJACION RAPIDAS DE LAS BRANQUIAS I.

INTRODUCCION

La presencia del virus del Punto Blanco en Centro Amrica es preocupante pero no necesariamente alarmante. Las mortalidades que se presentaron en Asia no tienen porque repetirse. A diferencia de ellos nosotros sabemos de antemano que este virus existe, sabemos como se transmite y tenemos las herramientas para detectarlo a niveles muy bajos, lo que nos permite implementar medidas de prevencin que minimizarn l impacto de la enfermedad. El virus recibi el nombre de los signos externos que produca cuando apareci. Sin embargo, estos signos no siempre estn presentes, o pueden presentarse sin la presencia del virus. Los puntos blancos, son depsitos de calcio que tambin pueden ser provocados por causas ambientales relacionadas con la concentracin de Ca++ y el pH del estanque. Para verlos ms fcilmente, se arranca la cutcula de la cabeza y con la ua del pulgar se rasca hasta retirar la epidermis. Los productores deben tomar conciencia de la amenaza que supone esta enfermedad. Est en sus manos el poder controlarla y reducir el impacto econmico que pudiera tener. Todo el procedimiento de las branquias se realiza en un tubo de eppendorf u orto contenedor para el ahorro de qumicos Esto ha motivado la elaboracin del presente informe con el fin de la preparacin rpida para la fijacin de branquias en el langostino, y a travs de ello de detectar la enfermedad de la mancha blanca (wssv).

II.- OBJETIVOS: Coloracin de branquias para el diagnostico wssv. Reconocer si el Penaeus se encuentra en buen estado o si presenta wssv. Observar la apariencia de las branquias y otros apndices del langostino.

III.- MATERIAL Y/O EQUIPOS:

Microscopio placa petri

estuche de diseccin

Tubo de eppendorf penaeus vannamei

IV. PROCEDIMIENTOS: Observar las branquias y apndices corporales: Es una tcnica sencilla de emplear, consiste en aislar las branquias y los apndices corporales del camarn vivo y luego observar al microscopio, para finalmente determinar si se est produciendo la enfermedad.
Luego se aplica la tcnica del protocolo para la fijacin rpida de branquias.

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se toma una muestra de branquias y se coloca en el tubo de eppendorf con fijador davidson-hcl (se sustituye el acido acetico glacial) durante una hora. se tiene con hematoxiina y eosina. se lava con agua corriente en movimiento durante 15 min.(se cubre la boca del tubo con una gasa para que el tejido no flote y se sumerja en el tubo). Se vaca. se aade etanol al 100 % durante 1 min. Se vaca y se repite 2 veces ms. se aade etanol 95% durante 1min. Se vaca y se repite 2 veces ms. se lava con agua corriente en movimiento durante 10 min. se aade hematoxilina durante 10 min. Y se vaca.

8. se lava con agua corriente en movimiento durante 15 min. 9. se aade eosina durante 2 min. Y se vaca. 10. se aade etanol 95% durante 1min. Se vaca y se repite 2 veces ms. 11. se aade etanol100% durante 1 min. se vaca y se repite 2 veces ms. 12. aadir xileno durante 30segundos, se vaca y se repite 2 veces mas. 13. montarlo en una placa microscpica y cubrir. Una vez preparado se observa al microscopio y pueden detectarse los cuerpos de inclusin caractersticos producidos por una infeccin del virus del punto blanco.

Procedimiento de la prctica

Se coloco en una placa petri para luego ser observada en el microscopio y detectar el cuerpo de inclusin V. RESULTADOS Los resultados para el diagnostico del WSSV. En el langostino no se detect ya que el langostino estuvo en buen estado.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS: o Conroy, D y Conroy, Gina. Manual de Patologa de Camarones Peneidos. Aportado de Correo N 406. 1era Edicin. Maracay, Venezuela, Julio de 1996.

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