STUDIUL TRANSMISIEI NEUROMUSCULARE I AL CONTRACIEI MUSCULARE

Materiale i echipamente necesare generator de impulsuri rectangulare Grass SD9K set de electrozi de stimulare pentru nerv (crlige inox) platform pentru disecie (din plut) suport tripod reglabil traductor de for rezistiv n punte Grass FT03E amplificator pentru instrumente de msur AC/DC Grass CP122 osciloscop Tektronix TDS 210 inscriptor pe band de hrtie cu 2 canale Cole-Parmer 202 instrumentar de disecie (ace spinalizare, foarfece, pense, baghete de sticl, etc.)

Mod de lucru Se spinalizeaz o broasc prin introducerea unui ac pe canalul vertebral, urmat de extensia membrelor inferioare. Se plaseaz pe platforma de plut, cu faa dorsal n sus. Se izoleaz m. triceps sural, pe faa posterioar a gambei, prin secionarea tegumentului i a fasciei de acoperire, urmat de izolarea corpului muscular i secionarea tendonului lui Ahile. Prin tendon se nfige un crlig, care ulterior se va cupla la traductorul de for FT03E. Se izoleaz poriunea proximal a nervului sciatic de aceeai parte: se ndeprteaz tegumentul n regiunea lombo-sacral; cu foarfecele se efectueaz dou incizii sagitale paramediane urmate de nlturarea segmentului inferior al coloanei vertebrale. Astfel se pun n eviden plexurile lombo-sacrale; plexul ipsilateral va fi agat cu perechea de crlige care constituie electrozii de stimulare, cuplai la ieirea generatorului de impulsuri rectangulare SD9K. Tot de la aceast ieire se realizeaz conexiuni pe canalul 2 al osciloscopului i pe unul din canalele inscriptorului cu band. Extremitatea proximal a muchiului (la nivelul genunchiului) se fixeaz cu ace pe platforma de plut, cu grij pentru a nu leza nervul aferent. Captul distal al muchiului (cu crlig) se ataeaz traductorului de for FT03E, care se poziioneaz astfel nct muchiul s fie amplasat vertical i n uoar tensiune. Se pornesc stimulatorul, amplificatorul, osciloscopul i inscriptorul (de fapt, pentru o acuratee maxim a msurtorilor, este bine ca aparatura s fie pornit cu h nainte de efectuarea experimentului, pentru a atinge un regim stabil de disipaie termic). Se calibreaz traductorul de for FT03E astfel: - se aleg urmtoarele setri ale amplificatorului CP122: INPUT SELECTION = DC CAL / USE = CAL BALANCE VOLTAGE Ten-turn dial =0

X.1/X1/X20 switch = X.1 AMPLIFICATION X1000 = 2 -6dB HI FILTER = 100 Hz LINE FILTER = OUT - se ine apsat butonul SET OUTPUT i se ajusteaz poteniometrul OUTPUT ADJUST pn cnd display-ul indic ) 0.00 - se comut switch-ul CAL / USE pe poziia USE; apoi, din poteniometrul cu zece ture BALANCE VOLTAGE, se readuce indicaia display-ului la valoarea 0.00 - se mrete amplificarea la 10000 (10 X 1000) i eventual se reajusteaz BALANCE VOLTAGE pentru a reechilibra puntea traductorului de for FT03E. Se aleg valorile adecvate de timp i amplitudine pentru canalele osciloscopului i ale nregistratorului. n continuare se aplic stimuli unici cu generatorul de impulsuri rectangulare SD9K (regular, single) i se nregistreaz secusele musculare. Teme de studiu propuse 1. Legea excitabilitii (Lapique) Se pornete de la o durat minim a stimulilor (0.2 ms) i se determin amplitudinea prag care produce un rspuns (contracie muscular). Se mrete treptat durata stimulului i, pentru fiecare valoare, se caut amplitudinea prag. Valorile duratei i amplitudinii prag a stimulului se noteaz ntr-un tabel i se reprezint grafic. Ce funcie se obine i cum poate fi explicat? 2. Dependena forei de contracie de amplitudinea stimulului Se aplic stimuli unici de o anumit durat i amplitudini progresiv cresctoare. Se reprezint grafic amplitudinea contraciei n funcie de amplitudinea stimulului. De ce de la o anumit amplitudine se atinge saturaia? 3. Dependena forei de contracie de gradul de ntindere a muchiului Se pornete de la o ntindere iniial 0. Se aplic un stimul unic i se msoar amplitudinea maxim a forei musculare pe parcursul secusei. Se crete progresiv gradul de tensionare a muchiului prin repoziionarea fin pe vertical a traductorului FT03E. Dup fiecare repoziionare, se determin valoarea tensiunii mecanice, apoi se reechilibreaz puntea traductorului din poteniometrul BALANCE VOLTAGE. La fiecare grad de ntindere, se aplic stimuli unici i se determin amplitudinea maxim a forei. Se reprezint grafic fora de contracie n funcie de tensiunea iniial n muchi. Dac ai lucrat corect, funcia respectiv crete pn cnd atinge un maxim, apoi scade. Care este explicaia (reamintii-v ultrastructura fibrei musculare).

4. Stimuli repetitivi. Tetanus incomplet i complet. Se aplic stimuli repetitivi prin apsarea n sus a comutatorului MODE al stimulatorului (pe REPEAT n loc de SINGLE). Ce se ntmpl cu muchiul? Ce form ia platoul atunci cnd cretem frecvena stimulilor?