Prin transferul e- (cu potenial energetic ridicat) de la Cla680 680 la acceptorului primar de e-, are loc transformarea energiei

luminoase n energie chimic potenial, adic etapa fotochimic. n membrana tilacoidal se gsesc, pe lng pigmeni, i molecule ce aparin altor substane (chinone, proteine, acid ascorbic, fenilhidrazin etc.), unele funcionnd ca acceptori primari de e- i nu n ultimul rnd enzime (citocromoxidaze, dehidrogenaze, NADP-reductaza etc.) care particip activ la reaciile fotochimice. SF I (NADPH2 producing photosystem). Electronii, cu potenial energetic ridicat, preluai de Pq, sunt transmii la CR-ul SF I (ca prim depozit de energie), prin intermediul unui lan transportor de e. Astfel, ei sunt nti sunt transferai comlexului de citocromi b6f iar apoi unei alte molecule transportoare - plastocianina (Pc) care i transfer mai departe Cla din CR a lui SF I. n acelai timp, protonii de H, culei din strom, sunt pompai n lumen. n CR-ul lui SF I, un foton energizeaz moleculele de Cla, pregtind transferul celor 2 e la o substan acceptoare de e de aceast dat - feredoxina (Fd) - o protein cu Fe - care se reduce (Fd+H Fd 2).

Prin transferul e, oxidantului Cla700, Fdei, ei se creaz un gol energetic, completat continuu cu electroni ce vin de la SF II, prin lanul transportor de e. Electronii, preluai de Fd, sunt transferai prin intermediul unei flavoproteine (Fp), la NADP+. Transferul se soldeaz cu reducerea NADP+-ului la NADPH2. reacie catalizat de enzima NADPreductaza. ntreg transportul de electroni se realizeaz prin membrana tilacoidelor granale. n concluzie, faza de lumin a fotosintezei este interpretat ca un ansamblu de procese de oxido-reducere.

Lumina

REACIILE FAZEI DE LUMIN

Ciclul Calvin 2H+

Stroma
Cla+700
2 e- Aceptor tr L primar de ans an de e el po ec rt tro or ni Fp

(glucoz)

Cla+680 Energia electronilor

Aceptor primar de e 2

La
e-

n tra

Membrana tiocoidlui

Fotoliza apei cu eliminare de oxigen

rto rd e Complex de el ec citocromi

ns po

reductaza
2

H2 Pq

tro

ni

2 Lumina

CR
Cla700

Lumina

Cla680

Spre ciclul Calvin Faza obscur

Electroni care produc energie pentru sinteza chemiosmotic de

CA

Sistem fotochimic I

Sistem fotochimic II Lumen Reaciile fazei de lumin ale fotosintezei fotofosforilarea aciclic

Fixarea energiei chimice poteniale n produi stabili cu legturi fosforice macroergice (etapa biochimic). Se mai numete i fotofosforilare. Cele 2 SF-uri sunt legate n serie prin intermediul lanului transportor de e, producnd energia chimic pe care cloroplastul o folosete pentru sinteza de ATP (din ADP+ + Pa) i NADPH2 (din NADP+ + 2H+). Ambele sinteze au loc n stroma cloroplastului. La animale cea mai mare parte a energiei este produs din sinteza ATP in procesul de fosforilare oxidativ, care are loc la nivelul mitocondriilor. La plante verzi fotoautotrofe exist, pe lang fosforilarea oxidativ din mitocondrii i procese de sintez a ATP prin fosforilarea fotosintetic (fotofosforilare) (Ruben - 1943 - formarea unui compus fosforilat). n consecin: o parte din energia luminoas, transformat n energie chimic, este stocat n ATP, care pe parcursul procesului de fotosintez se afl nt-o continu sintez i hidroliz; o alt parte din energia chimic este nmagazinat n NADPH2. Aceti adevrai acumulatori de energie vor determina, ulterior, n faza de obscur a fotosintezei, reducerea CO2 i transmiterea energiei lor metaboliilor organici, care se sintetizeaz i n care se gsete inmagazinat energia luminoas sub form de energie chimic.

Fotofosforilarea ciclic
+

+2

Membrana tilacoidului

Procesul de fotofosforilare are loc pe 2 ci: aciclic ciclic. a. Calea aciclic se realizeaz cu degajare de O2. Sub efectul fluxului de protoni de H+ transportai, are loc sinteza de ATP n stroma cloroplaselor. Pentru fiecare pereche de e transportai, de la moleculele de H2O la NADP+, se formeaz cte o molecul de ATP (din ADP + Pa). Fiecare legtur macroergic a ATP-ului nmagazineaz o energie echivalent cu 30 Kj. Ca urmare pentru biosinteza glucidelor este necesar mai mult ATP, dect NADPH2.

Fotofosforilarea ciclic
Cla+700
Aceptor primar de e

Aceptor primar de e

Fd

Fd
NADP+ reductaza

Pq
Complex de citocromi 2e

NADP+ NADPH2

Pc

Energie pentru sinteza chemiosmotic a Sistem fotochimic I

Sistem fotochimic II

b. Calea ciclic se realizeaz fr degajare de O2. Pe aceast cale e, cu nivel energetic ridicat, venii din SF I sunt returnai la Pc, cu formare de ATP (din ADP+ + Pa). In procesul de fosforilare ciclic nu se produce NADPH2, ceea ce explic faptul c, n fotosintez raportul ATP / NADPH2 este subunitar.

Faza de lumin a fotosintzei poate fi redat sumar prin formula general a lui Daniel Israel Arnon (1954): h . 2 H2O + 2 NADP+ + nADP + nPa Cla 2 NADPH+2H+ + nATP + O2 (NADPH2) Bilanul energetic al fazei de lumin a fotosintezei Pentru fixarea unei molecule de CO2 (n faza obscur) se consum: 10 cuante de lumin; 3 molecule de de ATP; 2 molecule de NADPH2.

II. Faza obscur a fotosintetezei (faza Blackman) nc din anul 1905, biochimistul englez Felix Frost Blackman a intuit existena n cadrul fotosintezei a unor reacii fotochimice i termochimice. Faza obscur a fotosintezei cuprinde reacii biochimice, independente de lumin dar dependente de temperatur. n aceste reacii intervin enzime din stroma nepigmantat a cloroplastului. Cunotinele referitoare la ansamblul reaciilor care au loc n faza obscur le datorm cercetrilor efectuate de biochimitii englezi: Melvin Calvin, Andrew Benson i James Basshan, ncepnd cu anul 1946. Cercetrile lor s-au axat pe problematica stabilirii substanei acceptoare de CO2 i a primului produs fotosintetizat. Pentru cercetrile sale Melvin Calvin a primit premiul Nobel pentru chimie n 1961, iar ansamblul de reacii care au loc n aceast faz a primit numele de ciclul Calvin (Calvin-Benson). Este numit ciclu pentru c acceptorul primar de CO2 (provenit din atmosfer) se regenereaz la firecare final de ciclu, iar n ansamblul reaciilor, care au loc n ciclul Calvin, la orice reluare de ciclu sunt regenerate: - materia prim; - substanele primare. formndu-se produi de reacie.

Materia prim a ciclului Calvin este reprezentat prin C4 (rezultat din CO2 atmosferic) i energia chimic acumulat n ATP i NADPH2 (ambele sintetizate n faza de lumin prin fotofosforilare sintetic). Pricipalele reacii referitoare la faza obscur a fotosintezei se deruleaz n 2 etape distincte: 1. Fixarea CO2 pe o substan acceptoare, prin carboxilare, i ansamblul de reacii care duc la regenerarea acceptorului de CO2. 2. Reducerea CO2 de ctre puterea reductoare a celulei reprezentat prin ATP i NADPH2). n aceast etap au loc: - cedarea energiei chimice ncorporat n ATP i NADPH2; - formarea substanelor organice primare, care reprezint primii produi fotosintetizai, cu refacerea acceptorului de CO2; - polimerizarea substanelor organice complexe: glucide, proteine, acizi nucleici etc. Dup natura acceptorului iniial al CO2 atmosferic care determin specificul primului produs fotosintetizat se cunosc 3 ci principale de asimilaie fotosintetic: calea fotosintetic C3; calea fotosintetic C4; calea metabolismului acid al crasulaceelor (C.A.M.).

I. CALEA FOTOSINTETIC C3
n cadrul cii fotosintetice C3, fixarea i apoi reducerea CO2 atmosferic are loc n cadrul ciclului Calvin. Plantele cu cale fotosintetic C3 se numesc plante tip C3. n aceast categorie intr: algeleverzi i majoritatea cormofitelor. Acceptorul iniial care fixeaz CO2 este o molecul organic cu 5 atomi de C 1,5 -ribulozodifosfat (RuDP) - iar primul produs fotosintetizat este o substan cu 3 atomi de C n molecula sa acidul fosfogliceric (APG). Toate procesele complexe din cele 2 etape se deruleaz n 3 faze: carboxilativ; generativ reductiv;
.

1. Faza carboxilativ
CO2 atmosf. + 1 molec. H2O este repede ncorporat

carboxilare primar ( carboxilare) RuDP-carboxilaza (carboxidismutaza)

n RuDP;

RuDP- caboxilaza este enzima fundamental a tuturor carboxilrilor la plantele autotrofe. RuDP (n scurt timp) produs intermediar cu 6 atomi n molecul;
(neidentificat)

produs intermediar

se hidrolizeaz cu 1 molec. H2O

2 mol. acid fosfogliceric (APG);

Acidul fosfogliceric (APG) este primul produs fotosintetizat n cadrul fotosintezei a crui grupare carboxilic conine CO2 atmosferic fixat de 1,5- ribulozodifosfat Numai 1 atom de O2, din molecula de H2O, este ncorporat n APG, cellalt este convertit n H2O (ca ion OH-).

2. Faza reductiv
acidul fosfogliceric (APG) redus de NADPH2 aldehida 3 fosfogliceric (PGA) (fosfogliceraldehid)
(trioz fosforilat)

In aceast reducere intervine i energia chimic furnizat de ATP, deoarece potenialul redox al NADPH2 (-32 eV) nu este suficient pentru reducerea moleculei de CO2, care necesit un potenial redox de -40 eV. n general s-a stabilit c pentru 1 molecul de CO2 sunt necesare: 2 molecule de NADPH2; 3 molecule de ATP.

3. Faza generativ
Din PGA + un derivat al su - 3 fosfodihidroxiacetona (DAB)

fosfotriozoizomeraza

primele oze sintetizate: fructoza 1,6 difosfat (F1,6 DP); Din F1,6 DP fructoza 6 fosfat (F 6 P);

fructoza 6 fosfat (F 6 P) trece imediat in glucoza 6 fosfat (G 6 P)

izomerizare

glucoza 6 fosfat (G 6 P); glucoza 1 fosfat (G 1 P); (glucoza fosforilat)

glucoza 1 fosfat

descompunere

glucoz + H2PO4 conform reaciei: C6H12O6 + 2H2PO4

(glucoz) (acid fosforic)

2C3H5O3-H2PO4 + 4H+ + E
(glucoza fosforilat)

Astfel se formeaz glucoza, prima glucid sintetizat n cadrul procesului de fotosintez. In consecin, fructozele fosforilate reprezint punctul de plecare ctre formarea altor glucide. n acest mod se formeaz primele molecule de oze libere (nefosforilate), cum sunt: glucoza, zaharoza, manoza, galactoza, dar i ozide: celuloza, hemiceluloza etc. Astfel, glucoza, odat format, nu poate rmne n totalitate n celule: - o parte rmne chiar n celulele n care s-a format, fiind consumat de acestea; - o alt parte trece n celulele unde are loc asimilaia clorofilian, fiind consumat de acestea;

Restul de glucide se condenseaz (2-n mol. de acelai fel se combin i formeaz o substan nou, reacia fiind nsoit, de obicei, de eliminarea H2O sau a altor molecule mai mici), formnd amidonul, conform reaciei: n(C6H12O6) C6H10O5 + nH2O Amidonul format se depoziteaz ca amidon de rezerv n diferite organe ale corpului plantelor: bulbi, tuberculi, rozomi, semine, rdcini etc. Amidonul de rezerv nu rmne n aceast stre mult timp cu se transform din nou, prin hidroliz (procesul de scindare a unor molecule mari, n molecule mai mici, cu fixarea concomitent a unei molecule de ap la nivelul legturilor scindate), n glucoz, care va fi trimis n diferite pri ale corpului plantei unde va fi consumat. n acelai timp se formeaz i substane intermediare, cu rol n sinteza a protidelor, lipidelor etc. Dintre produii intermediari care apar n sinteza glucidelor se formeaz lipidele i protidele. Astfel: Acidul piruvic (PIR), aprut ca produs intermediar Acidul acetic lipide.
reducere

acid acetic;

acizi grai i alcooli, care se combin ntre ei vor forma

Tot din acid piruvic (PIR), prin reducerea srurilor cu azot (absorbite din sol), se formeaz aminoacizii (a.a). Ex.: acid piruvic + NH3 alanina. Din acidul piruvic se formeaz i acidul oxalo acetic (AOA) care, combinat cu NH3, va forma acidul aspartic. Odat formai amino acizii se combin ntre ei, dnd natere la protide (substane fundamentale n structura protoplastului). Prin polimerizare enzimatic din aminoacizi iau natere substanele proteice etc. n concluzie, ciclul Calvin reprezint, d.p.d.v. cantitativ, cea mai important cale de reducere a CO2 n procesul de fotosintez i are loc cu regenerarea continu a acceptorului iniial de CO2 1,5 RuDP. Aceast regenerare este un proces foarte complex care implic numeroase reacii chimice, n care intervin: trioze, tetroze, pentoze, hexoze, sedoheptuloze, toate activate (fosforilate). Fiecare dintre reaciile ciclului Calvin este catalizat de enzime specifice care se gsesc n stroma cloroplastelor. n acest sens s-au evideniat: carboxidismutaza, transcelulaza, aldoze, fosfataza etc.

3CO2 atmosferic + 1 mol. H2O

Carboxilare (RuDP- carboxilaza)

CICLUL CALVIN LA PLANTELE C3

1. Faza carboxilativ

3RuDP (5C)

3PI (6C) hidroliz 6ATP

3ATP 6APG (3C) 6NADPH2 5PGA (3C) 6PGA (3C) + 6 Pa

2. Faza reductiv

1PGA + 1DAB
(fosfotriozoizomeraza)

Produi intermediari: acidul piruvic (PIR) acidul acetic

reducere

Fructoza 1,6 difosfat Fructoza 6 fosfat

+
NH3

acidul oxalo-acetic (AOA)

3. Faza generatiiv

izomerizare

+
NH3

Glucoza 1 fosfat
descompunere

Glucoz + 2H3PO4
conden condensare

acizi + alcooli grai

lipide alanina (a.a.)

+
acid aspartic polimerizare enzimatic

PROTIDE SUBSTANE PROTEICE

Amidon
hidroliz

Glucoz

Bilanul ciclului Calvin. Din ciclul Calvin rezult: De ex.: pentru fixarea a 3 molecule de CO2 sunt necesare 3 molecule de RuDP, din care se formeaz 6 molecule de APG. Din cele 6 molecule de APG PGA 5 molecule PGA sunt utilizate pentru regenerarea RuDP (ca acceptor de CO2); 1 molecul prsete ciclul, reprezentnd sursa principal din care se sintetizeaz substane organice rezultate din fixarea CO2 atmosferic n faza obscur a fotosintezei). Pe parcursul reaciilor mai ies din ciclu i ali compui, utilizai la sinteze cum sunt: - hidrai de carbon; care, la rndul lor, servesc altor substane organice - aminoacizi; complexe necesare nutriiei plantelor - lipide. Fora motoare a ciclului Cavin este potenialul electro-chimic ridicat al protonilor de H+, produi prin fotoliza apei (n faza de lumin a fotosintezei).

Cloroplast

Energetica fotosintezei

membran extern membran untern

Energie luminoas
Pa +

CO2 ADP CICLUL CALVIN

ATP

H++ NADP+
NADPH2

2H+ + O2

glucid

Reaciile de fixare i reducere Reaciile fotochimice a CO2 (strom) (membrana tilacoidelor granale)

Reprezentarea general a faza de lumin i de ntuneric a fotosintezei

Membrana extern Membrana intern

Granum

Tilacoid Lumenul tilocoidului SFII lumin CA

Stroma

SFI Lan transp. de e lumin CA NADP reductaza

NADPH2

Peste 90% dintre plante utilizeaz calea fotosintetic C3 comparativ cu 3% care o folosesc pe cea C4 Randamentul material al procesului de fotosintez este impresionant. Se apreciaz c se fixeaz anual 1.300 miliarde tone de CO2 ceea ce nseamn 80 miliarde tone de glucide, sintetizate de plante.

Ciclul Calvin

Stroma tilacoidului

Sinteza de ATP

Fotorespiraia RuDP poate fi uneori foarte ineficient n anumite condiii. Astfel: La concentraii ridicate de O2 i sczute de CO2, RuDP are tendina de a capta i introduce O2 n ciclul Calvin, n loc de CO2. Acast lucru duce la scindarea produsului intermediar (6C) in molecule cu 3 atomi de C (APG), dar fr a se produce ATP. Acest proces este cunoscut sub numele de fotorespiraie. Procesul apare in zilele toride cnd frunzele i nchid stomatele. In acest timp scade concentraia de CO2 i crete cea de O2 ceea ce faciliteaz producerea procesului de fotorespiraie. Probabil acest lucru se datoreaz cantitii sczute de O2 din atmosfer, unde procesul de fotosinteza se desfoar cu intensitate sczut. Pentru a evita aceast proces plantele si-au dezvoltat 2 tipuri de strategii prin care aceast ineficient este evitat: calea fotosintetic C4; calea fotosintetic C.A.M.