Sunteți pe pagina 1din 12

Membrana celular

I. Compoziia chimic a membranelor A. Lipidele (colesterol, fosfolipide, sfingolipide) 1. Structura chimic 2. Distribuia lipidelor n membranele biologice 9 Diferene mari n compoziia lipidic ntre diferite tipuri de membrane (raportul fosfolipide colesterol) 9 Diferene mari de structur n cadrul aceleiai clase de lipide 9 Diferene mari ntre gruprile acil ale lipidelor din diferite membrane

B. Proteinele membranare 1. Clasificarea operaional (bazat pe modalitatea de rspuns la tratamente specifice) 9 Proteine extrinseci: pot fi ndeprtate din structura membranei sau solubilizate prin tratamente uoare (ex. agitarea ntr-o soluie salin diluat). 9 Proteine intrinseci: pot fi ndeprtate numai prin tratamente care distrug structura membranei (ex. dizolvarea cu detergent)

9 9 9 9

2. Rolul proteinelor membranare: Catalitic: enzimele Receptori pentru diferite semnale (ex. hormoni) Transport Structural: determin proprietile mecanice ale membranei forma celulei (ex. eritrocitul)

C. Glucidele membranare (carbohidrai) glicoproteine, glicolipide 1. Structura chimic: glucoz, galactoz, manoz, fucoza, N-acetilate (N-acetilglucozamin, N-acetilgalactozamin, acid N-acetilneuraminic) II. Structura membranei a) Proprietile amfopatice ale fosfolipidelor i sfingolipidelor sunt datorate structurii chimice: 1. Gruparea hidrofil (capul), purttoare de sarcini electrice 9 Sarcinile electrice sunt responsabile de hidrofilia gruprii 9 Toate lipidele sunt purttoare de sarcini negative sau sunt neutre

2. Lanurile sunt hidrofobe 3. Fosfolipidele suspendate ntr-un mediu apos formeaz spontan structuri ordonate: 9 Micele 9 Bistraturi 9 Lipozomi 4. Proprietile fosfolipidelor n soluii apoase determin anumite tipuri de micare n interiorul bistratului lipidic. 9 9 9 9 Rotaie Difuzie lateral Flexia gruprilor acil Micri transversale (flip-flop) ntre cele dou fee ale bistratului B. Modele membranare: modelul mozaicului fluid. 1. Bistrat lipidic compus din fosfolipide i colesterol 2. Proteine: extrinseci, intrinseci 3. Asimetria membranar (intern-extern) 9 Diferene n compoziia lipidic ntre cele dou fee ale membranei 9 Diferene n compoziia proteic 9 Glucidele se gsesc n special pe faa extern (glicoproteine glicocalix) 4. Proprietatea principal : fluiditatea

III. Fenomene de transport prin membran b) Transportul pasiv (difuzia simpl) 1. tipuri de molecule care pot traversa membrana prin difuzie simpl 9 Apa, compui organici lipofili cu greutate molecular mic

9 Moleculele mari (ex. proteinele) i cele purttoare de sarcini electrice nu pot traversa membrana prin bistratul lipidic. 2. direcia transportului prin difuzie simpl 9 n orice direcie (intern extern sau extern intern), conform gradientului de concentraie (de la concentraie mare la concentraie mic)

B. Transportori : caracteristici 1. Terminologie 9 carriers, pomps, porters, translocases, transport systems; 9 9 9 9 2. Proprietile transportorilor Recunoaterea : leag specific substanele transportate Translocarea: transportul substanei de pe o parte pe alta a membranei Eliberarea substanei pe partea opus a membranei Revenirea la starea iniial din care este capabil s nceap un nou ciclu de transport 3. Proprietile enzimatice (nu sunt enzime i nu catalizeaz reacii chimice) Specificitate Constant de disociere pentru substanele transportate (analogie cu Km enzime) Inhibare cu inhibitori specifici Saturare (analogie cu enzimele)

9 9 9 9

4. Mecanismul de transport 9 Modificarea conformaiei proteice n timpul procesului de transport 5. Numrul de substane transportate 9 Uniport: o singura specie molecular transportat ntr-o singur direcie 9 Simport: dou specii moleculare transportate simultan n aceeai direcie 9 Antiport: dou specii moleculare transportate simultan n direcii opuse

C. Difuzia facilitat 9 9 9 9 9 1. Caracteristicile transportorilor (carriers) Transport mai rapid dect prin difuzie simpl Transport numai n sensul gradientului de concentraie Nu consum energie metabolic (energia este furnizat de gradientul de concentraie) Specificitate pentru substana transportat, saturare, inhibare specific Ex. : transportul glucozei D. Transportul activ 9 9 9 9 1. Caracteristicile transportorilor Transport substane mpotriva gradientului de concentraie Consum energie metabolic Transport unidirecional Specificitate pentru substana transportat, saturare, inhibare specific

2. Sursele de energie 9 Hidroliza ATP utilizare direct 9 Hidroliza ATP (sursa primar) utilizare indirect: energia gradientului de concentraie a Na+ meninut cu consum de energie (mecanismele simport) 3. Exemplu de sistem uniport: pompa de Ca++ 9 n reticulul sarcoplasmatic contracia muscular (striat, miocardic, neted) 9 Membrana plasmatic expulzia Ca++ n relaxarea miocardic 9 9 9 9 9 4. Exemplu de sistem antiport: pompa de Na+ - K+ Ubiquitar: rol de meninere a gradientelor de Na i K Electrogen: raportul de sarcini : 3 Na+ / 2 K+ Specificitate: absolut pentru Na, relativ pentru K Structura: tetrameric 2 2 Inhibare specific: ouabaina 5. Exemplu de sistem simport: Na+ - glucoz

Potenialul de repaus
I. Potenialul de echilibru (E)
9 9 9 9 9 A. Exemplu potenialul de echilibru pentru K (EK) Gradientul de concentraie: Ki >> Ko Membrana este permeabil numai la un ion, n acest caz K difuzia K prin canalele de K genereaz o ncrcare (+) n exteriorul membranei lipidice i (-) n interior, deoarece anionii (ex. Cl-) snt atrai ctre (+) dar nu pot difuza prin canalele de K sau prin bistratul lipidic membranar difuzia continu pn cnd acumularea de sarcini (+) n exterior se opune unei difuzii nete a K conform gradientului su de concentraie separarea sarcinilor de ctre membrana lipidic genereaz astfel o diferen de potenial (EK)

B. Condiiile la echilibru 9 membrana este permeabil numai la un tip de ion 9 asupra ionului nu acioneaza nici o for net (Fe = -Fc), unde Fe = fora electrostatic i Fc = fora chimic ce acioneaz asupra ionului datorat gradientului de concentraie 9 n acest caz influxul = efluxul, neexistnd un flux net ionic C. Calcularea potenialului de echilibru (msurat intracelular; potenialul extracelular = 0) 9 aproximare: E Co / Ci cnd Co > Ci ; E Ci / Co cnd Ci > Co; ( Ci i Co concentraiile in interior i exterior) E este pozitiv sau negativ , funcie de tipu de sarcini (positive sau negative) care se opun difuziei ionului conform gradientului su de concentraie (ex. ECl < 0, deoarece ncrcarea negativ intracelular se opune influxului de Cl-)

9 ecuaia Nernst (37oC): E = (60 mV/z) log Co/Ci, unde z = valena ionului o EK = -60 mV log (Ki / Ko); ex. EK = -92 mV (n muchiul mamiferelor) o ENa = 60 mV log (Nao / Nai); ex. ENa = +63 mV (n muchiul mamiferelor) 9 Potenialul de echilibru pentru Cl- este ECl = potenialul de repaus dac Cl- transportat activ.

II. Potenialul de repaus (PR) A. Definiie 9 condiiile bazale n care curentul net (I) prin membrana celulara este zero (IK + INa= 0) 9 "potenialul de difuzie" este generat de difuzia constant a K and Na conform gradientului lor de concentraie (de asemeni Cl dac acest ion este transportat activ extracelular) B. Depinde de urmtorii factori: 9 potenialele de echilibru (i deci gradientele de concentraie) a ionilor: EK and ENa (de asemeni ECl dac Cl- este dac acest ion este transportat activ extracelular) 9 conductanele membranare relative (g) ale ionilor: gNa/gK, care este dependenta de numrul relativ de canale ionice de K i Na din membrana celular C. Calcularea potenialului de repaus (presupunnd c Cl- nu este transportat activ) 9 ecuaia circuitului electric echivalent: PR = [gK/(gK + gNa)]EK + [gNa/(gK + gNa)]ENa 9 ecuaia Goldman-Hodgkin-Katz (GHK): RP = -60 log {[Ki + aNai]/[Ko + aNao]}, unde = PNa/PK

D. PR (ex. -70 mV) este mai apropiat de EK dect de ENa deoarece gK >> gNa E. Fora electrochimic (V - E), unde V este potenialul i E este potenialul de echilibru, arat ct de departe este un ion de potenialul de echilibru 9 la potenialul de repaus, fora electrochimic pentru K: PR - EK = +22 mV 9 la potenialul de repaus, fora electrochimic pentru Na: PR - ENa = -133 mV 9 la potenialul de repaus, V - ENa >> V - EK III. Pompa de Na-K A. Proprietile Na i K la PR 9 nici Na i nici K nu snt la echilibru, deoarece exist un efflux net de K i un influx net de Na la PR 9 Fc Fe: Fc > Fe for K; Fc i Fe au ambele aceeai direcie (ctre interior) pentru Na B. Pompa se opune gradientelor de concentraie ale Na and K (INa, pump = -INa, diffusion; IK, pump =-IK, diffusion) C. Este electrogen (generatoare de potenial): 9 scoate 3 ioni de Na+ pentru fiecare 2 ioni de K+ pe care i transport intracelular; astfel, efluxul net de sarcini (+) face ca PR s fie cu -2 pn la -4 mV mai negativ (ex. -73 mV fa de -70 mV)

D. Pompa menine dar nu genereaz PR E. Este stimulat de creterea concentraiei intracelulare de Na F. Este inhibat de scderea ATP (hipoxie sau ischemie) i de glicozidele cardiace (ex. digitala)

Potenialul de aciune
I. Bazele ionice ale potenialelor de aciune
A. Forele n timpul potenialului de repausl (PR) = PR - E, unde E = potenialul de echilibru 9 fora K = PR - EK 9 fora Na = PR - ENa 9 la potenialul de repaus, fora Na >> fora K B. Curenii de Na i K (INa i IK) 9 INa = gNa(Vm - ENa ), unde Vm este potenialul transmembranar iar gNa = conductana pentru Na 9 IK = gK(Vm - EK ), unde Vm este potenialul transmembranar iar gK = conductana pentru K 9 9 9 9 C. Potenialul membranar poate fi: potenial de repaus, nu exist un curent net (IK = INa) hiperpolarizare, curentul net de ieire (IK > INa) (potenialul membranar este mai negativ dect PR) depolarizare, curentul net de ieire (IK < INa) (potenialul membranar este mai puin negativ dect PR) repolarizare (revenirea PR dupa o depolarizare)

D. Deplasarea ionilor prin canalele ionice conform gradientului lor de concentraie 9 influxul de Na determin apropierea Vm de ENa (depolarizare) 9 efluxul de K determin apropierea Vm de EK (hiperpolarizare sau repolarizare) E. Caracteristicile canalelor ionice voltaj dependente depolarizarea deschide canalele ionice("activare") repolarizarea inchide canalele ionice ("dezactivare") depolarizarea determin de asemeni anumite canale ionice s trac in starea inactiv/nchis ("inactivare") repolarizarea pn la nivelul potenialului de repaus stopeaz aceast inactivare

9 9 9 9

F. Proprietile canalelor de Na i K voltaj dependente 9 la nceputul depolarizrii se deschid canalele de Na i K voltaj dependente (. gNa and . gK) 9 la sfritul depolarizrii se inactiveaz canalele de Na voltaj dependente ( gNa) dar nu i canalele de K voltaj dependente "delayed rectifier" G. Fazele potenialului de aciune

9 1. potenial de prag: potenial instabil la care curentul net este nc zero (INa = IK) 9 2. depolarizarea rapid o duce la un influx masiv de Na (INa > IK) o mecanism: depolarizare deschiderea canalelelor de Na voltaj dependente influx de Na (. INa) continuarea depolarizarii deschiderea mai multor canale de Na voltaj dependente creterea influxului de Na (. INa); acest process este regenerativ (process feed-back pozitiv) 9 3. vrf: potenial instabil la care curentul net este pentru moment zero (INa = IK) o potenialul membranar incepe s scad datorit efluxului de K (INa < IK) o mecanism: la sfritul depolarizrii se inactiveaz canalele de Na voltaj dependente ce se aflau n stare deschis ( gNa) dar, cu o anumit ntrziere, depolarizarea deschide, de asemeni, canalele de K voltaj dependente "delayed rectifier" (. IK); 9 e. hiperpolarizarea postpotenial o hiperpolarizare tranzitorie datorat curentului net (INa > IK) o mecanism: canalele de K voltaj dependente "delayed rectifier" nc deschise, nchizndu-se la sfritul repolarizrii 9 f. rolul pompei de Na-K n generarea potenialului de aciune : nu are rol direct, dar reface gradientele de concentraie dup potenialul de aciune

II. Caracteristicile potenialului de aciune A. Pragul n mod obinuit 10 - 15 mV deasupra PR cureni hiperpolarizani rspunsuri "pasive" (canalele voltaj dependente nu snt deschise) cureni depolarizani rspunsuri pasive sau active (canalele voltaj dependente snt deschise), depind de cit de apropiat este Vm fa de prag rspunsuri sub prag: cnd IK > INa rspunsuri supraliminale (poteniale de aciune): cnd INa > IK stimuli depolarizani fiziologici: o sumarea potenialelor excitatorii postsinaptice n neuroni o potenialele de plac motorie la fibrele musculare o potenialele de receptor la receptorii senzoriali

9 9 9 9 9

B. Legea "totul sau nimic" 9 totul: amplitudinea, forma i durata potenialului de aciune nu se modific indiferent de intensitatea stimulului, deoarece odata atins pragul, potenialui de aciune se autogenereaz (vezi mecanismul mai sus) 9 nimic: dac stimulul nu aduce potenialul membranar deasupra pragului, nu va fi generat potenialul de aciune deoarece (INa < IK) C. Perioadele refractare 9 absolut: perioad n care, indiferent de intensitatea stimulului, nu va putea fi generat un alt potenial de aciune 9 relativ: perioad n care poate fi generat un alt potenial de aciune, dar deoarece pragul este lai mare, intensitatea stimulului trebuie s fie mai mare