Quim. Nova, Vol. 29, No.

5, 950-955, 2006 MTODO MULTIRRESDUO PARA MONITORAMENTO DE CONTAMINAO AMBIENTAL DE PESTICIDAS NA REGIO DE BAURU (SP) USANDO MEL COMO BIO-INDICADOR

Artigo

Sandra Regina Rissato* e Mrio Srgio Galhiane Departamento de Qumica, Universidade Estadual Paulista, CP 473, 17033-360 Bauru - SP, Brasil Ftima do Rosrio Naschenveng Knoll Departamento de Biologia, Universidade Estadual Paulista, 17033-360 Bauru - SP, Brasil Rita Mickaela Barros de Andrade Centro Federal de Educao Tecnolgica do Cear, 60040-531 Fortaleza - CE, Brasil Marcos Vincius de Almeida Departamento de Bioengenharia, Universidade de So Paulo, 13566-590 So Carlos - SP, Brasil Recebido em 9/6/05; aceito em 2/12/05; publicado na web em 14/6/06

MULTIRESIDUE METHOD FOR MONITORING ENVIRONMENTAL CONTAMINATION BY PESTICIDES IN THE BAURU REGION (SP) USING HONEY AS BIOINDICATOR. The presence of residues of the major groups of pesticides (organohalogen, organophosphorous, pyrethroids and organonitrogen) in representative samples of honey produced in Bauru (state of So Paulo, Brazil) was investigated from 1999 through2004. A multiresidue method was applied to honey samples to determine 48 pesticides with recoveries ranging from 76 to 95%. The limits of detection found were lower than 10 g/kg for GC-MS-SIM. The results indicated that most pesticides found in the samples belonged to the organohalogen and organonitrogen groups. Residues of malathion were detected in almost all of the samples in high concentration. Keywords: multiresidue pesticide; honey; environmental contamination.

INTRODUO No Brasil, segundo dados da APACAME (Associao Paulista de Apicultores, Criadores de Abelhas Melficas Europias) as estatsticas sobre a cadeia apcola revelam que, em 2003, existiam 80.000 apicultores, dos quais 85% eram considerados pequenos (10 a 20 colmias) e praticavam a apicultura fixa e os 15% restantes eram considerados apicultores profissionais (mdia de 400 colmias) e praticavam a apicultura migratria. As 1.600.000 colmias habitadas pelas abelhas africanizadas produziam 35.000 t de mel/ano; no entanto, o potencial de produo estimado em 200.000 t de mel/ano. Atualmente, as exportaes brasileiras de mel triplicaram e o mercado atual dos produtos apcolas no pas de US$ 360 milhes, valor muito aqum do potencial, avaliado em US$ 1 bilho1,2. As abelhas domsticas (Apis mellifera) executam a tarefa vital de polinizao das colheitas agrcolas e das espcies nativas, e so importantes para a produo comercial do mel e de produtos apcolas. A cada dia, de 10.000 a 25.000 abelhas operrias fazem uma mdia de 10 viagens para explorar aproximadamente 7 km2 nas reas que cercam seu habitat, recolhendo o nctar, a gua e o plen das flores. Durante este processo, diversos microorganismos, produtos qumicos e partculas suspensas no ar so interceptados por estas trabalhadoras e ficam retidos nos pelos superficiais de seu corpo ou so inalados e unidos em seu aparelho respiratrio. Devido a estes fatores, as abelhas podem ser usadas como bioindicadores para monitoramento de impacto ambiental causado por fatores biolgicos, qumicos e fsicos, tais como parasitas, contaminaes industriais ou pesticidas3,4. Alm disso, quase todos os

setores ambientais (solo, vegetao, gua, ar) so explorados pelas abelhas produtoras de mel, fornecendo numerosos indicadores para cada estao3 (Figura 1).

Figura 1. Representao da difuso de substncias poluentes no ambiente

*e-mail: srissato@fc.unesp.br

A produo de mel oriundo de floradas silvestres est se tornando cada vez mais escassa no Brasil e no mundo. Por esse motivo, atualmente o desenvolvimento da apicultura est cada vez mais dependente das culturas agrcolas e florestais nas quais, em alguns casos, so utilizados pesticidas de maneira inadequada4. O monitoramento de resduos de pesticidas no mel auxilia na avaliao do potencial de risco destes produtos sade do consumidor e fornece informaes sobre o uso de pesticidas nos campos de colheita e em suas vizinhanas. A concentrao mxima de resduos de pesticidas permitida legalmente no mel, LMR, foi estabelecida por regulamentos de diferentes pases. Alemanha, Itlia, e Sua ajustaram o LMR para

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amitraz, bromopropilato, coumafs, ciamizol, flumetrina e fluvalinato, que oscilaram entre 0,01 e 0,1 mg/kg na Alemanha, 5 e 500 mg/kg na Sua, e 10 mg/kg na Itlia5. At agora, os limites mximos de resduos de pesticidas no mel no foram includos no Codex Alimentarius6. A legislao da unio europia (EU) regulou o LMR para trs acaricidas, amitraz, coumafs e ciamizol, em 0,2, 0,1, e 1 mg/kg, respectivamente7, e a agncia de proteo ambiental dos EUA8 estabeleceu LMR para amitraz (1 mg/kg), coumafs (0,1 mg/kg) e fluvalinato (0,05 mg/kg). Os programas de determinao de resduos dos pesticidas para monitoramento de mel so concentrados na determinao dos resduos de acaricidas que so usados para controlar o Varroa jacobsoni, um caro parastico que afeta as colnias da abelha domstica9-11. Somente alguns estudos foram focalizados nos pesticidas usados para a proteo de plantaes e introduzidos em colmias pelas abelhas e por cera contaminada12-14. Um mtodo multirresduo capaz de detectar e quantificar os pesticidas, em um perodo de tempo relativamente curto, compreendendo etapas mnimas de extrao e de clean-up crucial para um programa de monitoramento eficiente15. Os pesticidas no mel so geralmente extrados com um solvente orgnico16,17, ou em fase-slida pela passagem atravs de cartuchos de octadecilsilano18,19, aps a diluio da amostra do mel em gua. O clean-up necessrio na pr-concentrao da amostra, o qual reduz o limite de quantificao do mtodo e/ou evita interferncias da matriz. O clean-up extensivo dos extratos pode resultar na perda parcial de alguns compostos e aumentar as demandas de trabalho e de custo. O clean-up inadequado pode conduzir aos efeitos adversos relacionados qualidade dos dados gerados, tais como co-eluio de componentes da matriz com picos do analito de interesse, ocorrncia de picos falsos e quantificao incorreta. Os interferentes mais comuns que atualmente esto presentes em extratos apcolas so lipdios, pigmentos e carboidratos. As tcnicas de clean-up da amostra mais convenientes para o processo incluem cromatografia de permeao em gel20, partio lquido-lquido21, extrao em faseslida (SPE)22,23 e cromatografia de adsoro (usando slica, florisil, carvo ativo, alumina, slica gel/carvo ativo)24. Este trabalho apresenta um rpido e simples mtodo multirresduo para determinar e confirmar simultaneamente 48 pesticidas de diferentes classes: organoclorados, organofosforados, organonitrogenados e piretrides em amostras de mel. O apirio produtor do mel em estudo est localizado em reserva ecolgica na cidade de Bauru (estado de So Paulo, Brasil), a qual circundada por intensa rea de agricultura. Pelo programa de monitoramento executado, observou-se a tendncia temporal da contaminao por pesticidas em amostras de mel. Abelhas domsticas (Apis mellifera) foram utilizadas como indicadores da contaminao ambiental ocorrida durante 6 anos (perodo de 1999/2004). PARTE EXPERIMENTAL Reagentes Todos os solventes utilizados foram Mallinkrodt (Merck) grau pesticida. A gua deionizada foi de grau Milli-Q (Millipore, Bedford, MA, USA), produzida a 18,5 M cm-1. As solues estoque foram preparadas a partir dos padres de referncia certificados (pureza 98%, todos Dr. Ehrenstorfer, Alemanha) dissolvidos em acetona na concentrao de 1 mg/L e as solues de trabalho foram obtidas a partir da diluio da soluo estoque para os estudo de fortificao das amostras. Para a extrao em fase slida (SPE) foram utilizados cartuchos Florisil 500 mg (J. T. Baker).

Amostras Uma amostra no contaminada de mel foi selecionada para utilizao nos experimentos de validao. As amostras de mel foram coletadas em um apirio em Bauru durante a safra (setembro e dezembro) de 1999 a 2004. As amostras de mel, de 500 a 1000 g, foram coletadas em frascos de vidro, estocadas em geladeira a 10 C e armazenadas at o momento da extrao. Extrao Em trabalho prvio, um mtodo multirresduo para anlise de pesticidas em mel foi desenvolvido e mostrou boa eficincia na separao de 32 compostos de diferentes classes25. No presente trabalho, este mtodo foi ampliado com a insero de mais 15 compostos, visando expandir o intervalo de aplicabilidade ou screening multirresduo em amostras de mel. A extrao dos pesticidas de diferentes classes foi realizada a partir de uma poro de 10 g de mel, a qual foi fortificada nos estudos de recuperao pipetando-se volumes apropriados da soluo de trabalho contendo 48 pesticidas estudados, para atingir a concentrao final de 100 g/kg. A amostra de mel foi misturada e homogeneizada com 5 mL de gua, com o objetivo de diminuir sua viscosidade e facilitar o manuseio. Em seguida, 50 mL de acetato de etila foram adicionados amostra e a mistura foi submetida agitao constante, por 20 min. A fase orgnica foi separada por centrifugao a 2500 rpm, por 10 min, e ento coletada. A amostra foi re-extrada com 40 mL de acetato de etila e o procedimento foi repetido. Os extratos obtidos foram combinados e concentrados em rotaevaporador sob presso reduzida a 60 C sendo, em seguida, o solvente remanescente evaporado sob fluxo de nitrognio. O resduo obtido foi solubilizado em 5 mL de acetato de etila, filtrado em PTFE 0,50 m e submetido etapa de limpeza. Limpeza A limpeza das amostras foi realizada em um sistema Supelco usando cartuchos de Florisil, os quais foram condicionados com aproximadamente 5 mL de acetona. A eluio dos 48 pesticidas de diferentes classes foi realizada por gravidade com duas pores de 10 mL de hexano/acetato de etila (50:50, v/v). O extrato obtido foi submetido concentrao sob fluxo de nitrognio, o resduo solubilizado em 1 mL de acetato de etila e submetido anlise por GC/MS. GC/MS Os extratos obtidos foram submetidos anlise por cromatografia gs em Cromatgrafo HP 5890 Series II equipado com um detector seletivo de massas (quadrupolo) HP 5972, operado em modo on seletivo (SIM). A coluna utilizada para as anlises foi a LM-5 (slica fundida) metil silicone com 5% de grupos fenila (35 m x 0,25 mm d.i., espessura do filme 0,25 m) e o gs de arraste foi He, com vazo constante de 1,0 mL/min. A programao de temperatura do forno foi 60 oC (1 min), 25 C/min, 150 C, 3 C/ min, 200C, 8 C/min, 290 C (8 min), temperatura do detector 300 C, temperatura do injetor 250 C, operado no modo splitless e volume de injeo de 1 L. Os parmetros de espectrometria de massa foram impacto de eltrons a 70 eV, temperatura da fonte 250 C, linha de transferncia 290 C, eletromultiplicador a 1200 V, velocidade de varredura 1,5 scan/s, no intervalo de massa 40-600 m/z.

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Com o objetivo de determinar a sensitividade da tcnica e sua convenincia para o estudo de monitoramento de poluio ambiental, os limites de deteco (LD) das anlises GC-MS e os limites de quantificao (LQ) foram calculados para os pesticidas estudados em amostras de mel fortificadas. RESULTADOS E DISCUSSO Validao do mtodo Os resultados obtidos para os estudos de recuperao esto relacionados na Tabela 1. A preciso do mtodo foi avaliada com relao repetibilidade pela determinao do desvio padro relativo (DPR), mediante o estudo das amostras fortificadas em quintuplicata. Os resultados de recuperao mostraram valores que variaram de 76 a 95% e DPR menores que 7% para os 48 pesticidas estudados. Os limites de deteco e de quantificao determinados para os pesticidas estudados no mtodo proposto encontram-se relacionados na Tabela 1. O LD foi calculado como o menor nvel de concentrao no qual o pesticida foi consistentemente identificado com uma razo sinal-rudo (S/N)3,5. O LQ foi calculado como o menor nvel de concentrao onde os compostos estudados foram quantificados com grande margem de confiabilidade e razo sinal/ rudo (S/N)10, sendo o coeficiente de variao 10% (n=5). Todos os resultados foram calculados baseados em determinaes realizadas atravs da resposta do detector e pelo monitoramento dos respectivos fragmentos inicos de cada composto (m/z) no modo SIM (Tabela 1). O LQ apresentou resultados entre 0,8 e 8 g/kg para a maioria dos pesticidas estudados, exceto para alacloro, atrazina, metolacloro, prometrina, pirimifs-metlico e pirazofs, onde os valores variaram de 12 a 20 g/kg. Visando estudar o efeito de matriz frente aos pesticidas avaliados, foi realizada uma comparao entre curvas de calibrao obtidas em solvente e pela adio do padro matriz solubilizada em acetato de etila. Os resultados mostraram que a resposta relativa para a curva de calibrao obtida na presena da matriz e somente com solvente foi significativamente maior, provavelmente devido presena de traos de acares e/ou outros interferentes provenientes da amostra. A quantificao dos pesticidas foi realizada pelo mtodo do padro externo, sendo que a resposta do detector foi linear no intervalo estudado, apresentando coeficiente de correlao maior que 0,997 para todos os compostos (Tabela 1). Novas curvas de calibrao foram criadas antes de cada evento de anlise do mel, assim como amostras do branco fortificadas no nvel 100 g/kg foram analisadas simultaneamente, visando verificar a eficincia e a repetibilidade dos processos de extrao. Com o objetivo de verificar a calibrao geral dos equipamentos e possveis contaminaes, um branco do solvente e uma soluo padro contendo todos os pesticidas estudados foram submetidos a todo o procedimento analtico no incio de cada estudo. Aplicao do mtodo desenvolvido em amostras reais A aplicao do mtodo desenvolvido foi realizada em amostras de mel, provenientes de uma reserva ecolgica prxima a uma extensa rea de horticultura em Bauru. Toda a metodologia, desde a obteno da colmia, manuteno da sade bioqumica da mesma e eliminao de interferentes naturais (fungos, bactrias e insetos), foi realizada por uma equipe especializada de bilogos. O controle das condies das colmias foi de grande importncia no programa de monitoramento do uso de

pesticidas por pequenos e mdios agricultores e horticultores da regio, por um perodo de 6 anos, compreendido entre 1999 a 2004, para que o mel coletado das colmias pudesse ser utilizado como bio-indicador. A maior parte das amostras estudadas apresentou resduos de organoalogenados (endosulfan sulfato, hexaclorobenzeno e tetradifom) e organonitrogenados (atrazina, simazina e tebuconazol), sendo que as maiores concentraes destes pesticidas foram encontradas em amostras coletadas nos anos de 2003 e 2004 (Tabela 2). A presena de resduos de alguns desses compostos pode ser atribuda a aplicaes arbitrrias em reas de intensa agricultura, que se localizam nas proximidades do apirio. A Figura 2 apresenta o cromatograma obtido de uma amostra de mel coletada no apirio, em 2004.

Figura 2. Cromatograma GC-MS-SIM de uma amostra de mel coletada no apirio localizado na reserva ecolgica em Bauru, em 2004 (ver condies na parte experimental): 1- diclorvos; 2- linuron; 3- trifluralina; 4hexaclorobenzeno; 5- simazina; 6- atrazina; 7- lindano; 8- terbutilazina; 9diazinona; 10- clorotalonil; 11- metribuzina; 12- paration metlico; 13alacloro; 14- prometrina; 15-dicofol; 16-fenitrotion; 17- pirimifs-metlico; 18- aldrin; 19- malation; 20- metolacloro; 21- fention; 22- clorpirifs; 23triadimefon; 24- imazalil; 25- pendimatalina; 26- fentoato; 27- procimidona; 28- metidation; 29- endosulfan alfa; 30- profenofs; 31- ciproconazol; 32endosulfan beta; 33- etion; 34- benalaxil; 35- endosulfan sulfato;36hexazinona; 37- bromopropilato; 38- propiconazol; 39- -cialotrina; 40pirazofs; 41- tebuconazol; 42- procloraz; 43, 44, 45- ciflutrina; 46metoxicloro; 47- tetradifom; 48, 49, 50-cipermetrina; 51,52- fluvalinato

Apesar do uso intensivo de organofosforados na agricultura, resduos dessa classe no foram encontrados nas amostras estudadas. Entretanto, altas concentraes de malation foram detectadas em amostras de mel, a partir de 2001. Este fato pode estar relacionado intensa aplicao deste pesticida em aplicaes que ocorreram, durante o perodo estudado, para controle do mosquito transmissor da dengue (Aedes aegypti). Pelos resultados obtidos foi possvel constatar que a contaminao das reas vizinhas ao apirio, as quais distam cerca de 3 km, determinaram o tipo e a concentrao de pesticidas encontrados nas amostras do mel estudado. Esse trabalho mostra o potencial do mel como bio-indicador, podendo o presente estudo ser aplicado a qualquer outra regio e fontes de poluio.

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Tabela 1. Tempos de reteno (tR), limites de deteco (LD, g/kg), limites de quantificao (LQ, g /kg), ons monitorados (m/z), recuperao (%) (desvio padro relativo (%), (n=5)) e coeficientes de correlao para os pesticidas estudados Pesticidas Organoalogenados Aldrim Bromopropilato Clorotalonil Dicofol Endosulfan Alfa Endosulfan Beta Endosulfan Sulfato Hexaclorobenzeno Lindano Metoxicloro Tetradifom Organonitrogenados Alacloro Atrazina Benalaxil Ciproconazol Hexazinona Imazalil Linurom Metolacloro Metribuzina Pendimetalina Procloraz Procimidona Prometrina Propiconazol Simazina Tebuconazol Terbutilazina Triadimefom Trifluralina Organofosforados Clorpirifs Diazinona Diclorvos Etion Fenitrotion Fention Malation Metidation Paration Metlico Fentoato Pirimifs Metlico Profenofs Pirazofs Piretrides -cialotrina Ciflutrina 31,24 33,90 34,25 34,82 37,12 37,53 38,01 41,46 41,98 1,5 1,2 5,0 4,0 181; 197; 199 163; 206; 226 92 (4,1) 83 (5,8) 0,998 0,999 22,83 16,18 9,02 27,93 20,08 22,45 21,36 25,61 18,25 24,72 20,44 26,39 32,46 0,8 0,2 1,0 0,2 1,0 0,8 0,2 0,2 1,0 0,6 5,0 0,8 4,0 3,0 1,0 4,0 0,8 4,0 3,0 1,0 0,8 3,5 2,5 20,0 3,0 15,0 97; 197; 314 88; 179; 304 109; 185; 220 231; 384; 153 277; 125; 109 278; 125; 109 173; 127; 125 145; 85; 302 263; 125; 109 274; 246; 125 276; 305; 290 208; 339; 139 221; 232; 373 91 86 90 78 77 84 92 93 86 76 93 81 84 (6,6) (6,2) (5,0) (4,2) (5,9) (3,6) (4,7) (5,2) (7,0) (6,6) (4,1) (3,8) (5,9) 0,997 0,999 0,998 0,999 0,997 0,997 0,998 1,000 0,999 0,998 1,000 0,997 0,998 18,73 14,71 28,35 26,96 29,37 23,81 9,86 21,84 17,52 24,28 33,54 25,19 19,22 30,57 14,23 32,91 15,79 23,25 12,88 4,0 5,0 0,2 0,2 0,5 0,5 0,2 5,0 0,3 0,5 1,0 1,0 4,0 0,2 1,5 0,2 1,3 0,5 1,0 15,0 18,0 1,0 1,0 1,5 1,5 10,0 18,0 1,2 1,5 3,0 4,0 12,0 1,0 5,0 1,0 4,5 2,2 4,0 160; 188; 143 215; 200; 173 148; 206; 91 222; 139; 73 171; 128; 83 173; 215; 296 61; 160; 248 162; 211; 238 198; 144; 182 252; 281; 220 180; 266; 308 283; 285; 96 241; 184; 226 173; 221; 259 201; 186; 173 125; 250; 307 214; 229; 173 57; 208; 293 160; 188; 143 91 93 86 95 92 82 94 89 81 83 93 86 89 79 80 91 87 85 88 (6,2) (5,8) (4,1) (3,7) (6,0) (5,5) (5,9) (6,8) (5,7) (5,3) (5,9) (4,7) (3,5) (4,1) (5,6) (4,9) (3,9) (3,8) (6,2) 0,999 0,997 0,997 0,999 0,998 0,997 0,999 0,997 0,998 0,998 0,999 0,997 1,000 0,999 0,997 1,000 0,999 0,998 0,999 20,91 30,03 17,13 19,63 26,11 27,31 28,74 13,67 15,19 35,62 36,20 2,0 0,5 1,6 1,0 0,4 1,5 2,0 1,5 1,5 1,5 0,5 8,0 1,5 5,0 4,0 1,5 5,0 8,0 6,0 5,0 6,0 2,0 263; 149; 263; 111; 237; 214; 181; 227; 159; 263; 149; 293; 167; 293; 139; 265; 249; 183; 274; 229; 293; 167; 329 279 329 251 339 284 109 374 356 329 279 82 80 91 76 92 93 88 84 90 77 78 (6,3) (4,5) (3,9) (6,8) (4,6) (5,2) (5,8) (7,0) (6,3) (3,7) (4,4) 1,000 0,999 0,997 0,999 0,998 0,999 0,998 0,997 0,998 1,000 0,998 tR (min) LD (g/kg) LQ (g/kg) ons monitorados (m/z) Recuperao (%) (DPR) Coeficiente de Correlao

Cipermetrina

1,8

6,0

163; 181; 209

85 (4,9)

0,997

Fluvalinato

2,5

8,0

250; 181; 252

88 (6,3)

1,000

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Tabela 2. Resduos dos pesticidas estudados (g/kg) encontrados em amostras de mel da reserva ecolgica de Bauru (SP) no perodo de 1999 a 2004 Pesticidas 1999 Organoalogenados Aldrim Bromopropilato Clorotalonil Dicofol Endosulfan Alfa Endosulfan Beta Endosulfan Sulfato Hexaclorobenzeno Lindano Metoxicloro Tetradifom Organonitrogenados Alacloro Atrazina Benalaxil Ciproconazol Hexazinona Imazalil Linurom Metolacloro Metribuzina Pendimetalina Procloraz Procimidona Prometrina Propiconazol Simazina Tebuconazol Terbutilazina Triadimefom Trifluralina Organofosforados Clorpirifs Diazinona Diclorvos Etion Fenitrotion Fention Malation Metidation Paration Metlico Fentoato Pirimifs Metlico Profenofs Pirazofs Piretrides -cialotrina Ciflutrina* Cipermetrina* Fluvalinato* ND ND ND ND ND ND 32,0 ND ND ND 21,0 ND ND ND 24,0 ND ND ND ND ND ND ND 92,0 ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND 22,0 ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND 51,0 ND ND ND ND ND ND 11,0 ND ND ND ND ND 73,0 ND ND ND ND ND ND 12,0 ND ND ND ND ND 243,0 ND ND ND ND ND ND 15,0 ND ND ND ND ND 209,0 ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND <1,0 ND ND ND ND ND ND ND ND ND <1,0 ND ND ND ND ND ND ND ND 1,2 ND ND ND ND 50,0 ND ND ND ND <1,0 ND ND ND ND ND ND ND ND 20,0 ND ND ND ND 70,0 ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND 21,0 ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND 17,0 3,0 ND ND ND ND 81,0 ND ND ND ND ND ND ND ND 4,0 ND ND <1,0 15,0 <1,0 ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND 21,0 ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND 5,0 ND ND <5,0 ND ND ND 20,0 ND ND ND <2,0 <8,0 ND ND ND 2,0 ND 24,0 ND ND ND 20,0 ND ND 8,0 <4,0 ND ND 27,0 18,0 ND ND 8,0 21,0 ND <5,0 8,0 <1,5 ND 24,0 16,0 ND ND 12,0 2000 Resduo (g/kg) 2001 2002 2003 2004

*Quantificao realizada a partir da soma das reas dos picos dos ismeros. ND - no detectado

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CONCLUSO O mtodo multirresduo para determinao e confirmao simultnea de 48 pesticidas de diferentes classes apresentou nveis de recuperao acima de 76% para as amostras de mel e tima repetibilidade, com resultados de coeficiente de variao menores que 7%. As principais vantagens do mtodo desenvolvido no presente trabalho so facilidade no tratamento da amostra, rapidez na realizao das mesmas e, principalmente, a possibilidade de identificao de um grande nmero de molculas de diferentes pesticidas, de maneira concomitante. A metodologia analtica desenvolvida para amostras de mel pode ser largamente utilizada com diferentes objetivos como controle de qualidade do mesmo para consumo humano ou como bio-indicador de possvel contaminao regional para uma rea de at 30 km2. AGRADECIMENTOS Fundao de Amparo a Pesquisa do Estado de So Paulo pelo auxlio financeiro. REFERNCIAS
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