LABORATORIO N 3 1. TEMA: MONTAJE DE PREPARACIONES FRESCAS Y TEMPORALES 2. OBJETIVOS: 2.1. OBJETIVOS GENERALES Aprender a montar preparaciones frescas y temporales.

. Identificar cada una de las estructuras en cada placa. 2.2. OBJETIVOS ESPECFICOS Observar los microorganismos existentes en las muestras realizadas. Analizar si existe vida en muestras de agua estancada. Aprender a realizar una preparacin temporal, til en la observacin de diversos tipos de muestras.

3. MARCO TERICO: Para realizar una preparacin microscpica, la muestra se coloca sobre un portaobjetos, al que habremos aadido el medio de montaje adecuado, y sobre ella se dispone el cubreobjetos. Los medios de montaje pueden ser lquidos (agua, agua-glicerina) o slidos (blsamo de Canad: resina de Abies balsmica; gelatina-glicerinada; resinas sintticas: entellan). (Siurana, Rosell, & Garca, 2004) Existen dos tipos de preparaciones microscpicas, stas corresponden a las preparaciones permanentes y a las preparaciones temporales. Ambas deben ser lo ms delgadas posible para dejar pasar la luz a travs de l y as lograr una buena observacin Preparaciones temporales Los preparados temporales se realizan generalmente con agua destilada, glicerina o simplemente agua corriente (un medio liquido), la utilidad es simple observar alguna estructura u organismo "in vivo", por ejemplo para observar los protozoos que habitan en cuerpos de agua dulce se utiliza estos preparados; solo se toma una gota de agua de ese cuerpo de agua, se la coloca entre porta y cubreobjetos y se la mira al microscopio, tienen una duracin limitada. Las preparaciones temporales corresponden a cortes frescos del material a observar, los que se realizan en el momento y tienen una corta duracin. Una vez realizados los cortes, se coloca una gota de agua en un portaobjetos, y en ella se ubica un trozo del material a observar, el que debe quedar completamente cubierto por el agua. Sobre esta preparacin se coloca cuidadosamente un cubreobjetos, evitando la formacin de burbujas que interfieren en la observacin microscpica. Finalmente, se elimina exceso de agua, y la preparacin puede teirse para ser observada. Preparaciones fijas

Los preparados definitivos requieren de un medio de montaje, como alguna resina, que se endurezca, (por ejemplo utilizar Hoyer) que depende del tipo de preparado que ests realizando y del organismos con el que ests trabajando. Se utilizan para observar en detalle estructuras que de otro modo no pueden ser vistas (puede ser porque requieren de inmersin) o porque se requiere de tinciones o cortes muy finos. Tambin se utilizan para albergar organismos en colecciones permanentes. Las preparaciones permanentes son aquellas que se han sometido a un proceso largo de preparacin, el que permite que se mantengan en buenas condiciones para su observacin por periodos prolongados de tiempo. La preparacin de estas muestras incluye etapas de fijacin del material, deshidratacin, inclusin en parafina, corte de la muestra en capas muy finas con un micrtomo, colocacin de estas capas que contienen la muestra en un portaobjetos, disolucin de la parafina, tincin de la muestra para contrastar las diferentes estructuras celulares y colocacin de un cubre objetos para proteger la preparacin. Existen numerosas tinciones que se utilizan en microscopa y permiten una mejor observacin de las estructuras celulares al contrastar en forma selectiva molculas determinadas. Generalmente se usan diferentes colorantes, algunos ejemplos de ellos son el lugol que tie los granos de almidn de color azul-morado, la floroglucina que tie de rojo violeta las paredes celulares lignificadas, el azul de metileno que tie el protoplasma y las paredes celulares celulsicas, etc. 4. PARTE EXPERIMENTAL 4.1 MATERIALES Y REACTIVOS: Microscopio Porta y cubreobjetos Cotonete Barniz de uas Solucin fisiolgica Aguja de diseccin Agua de charco Moho de pan o de fruta 4.2 PROCEDIMIENTO

MONTAJE DE PREPARACIONES FRESCAS Y TEMPORALES

PARA PREPARACIONES FRESCAS COLOCAR

Una gota de agua de charco.

O
Una muestra pequea de moho.

SI EL MATERIAL ES EL MOHO 1 2

COLOCAR sobre la muestra una gota de suero fisiolgico.

CUBRIR la muestra con el cubreobjetos

Dejar caer suavemente para que no se formen burbujas. 1 hora

Duracin

PARA PREPARACIONES TEMPORALES 1 Duracin

Un mes o mas COLOCAR una muestra sobre el portaobjetos y aadir agua o colorante.

dependiendo de la

CUBRIR la muestra con el cubreobjetos

CUBRIR los 4 lados del cubreobjetos con el barniz de uas.

Dejar secar

4.3

OBSERVACIONES Y GRFICOS

4.4

CONCLUSIONES

Identificamos cada una de las estructuras en cada placa ya que en ellas contenan organismos vivos con diferentes formas de vida. Observamos los microorganismos existentes en las muestras realizadas, su forma verdadera. Analizamos y concluimos que si existe vida en las muestras de agua estancada.

5. Bibliografa
Bez Pacheco, J. W. (2008). Preparacin de placas histolgicas. En Laboratorio de Histologa. Scribd. (23 de 01 de 2012). Obtenido de es.scribd.com/doc/79141257/5/Preparacionestemporales Siurana, P. S., Rosell, J., & Garca, F. (2004). Tecnicas Histolgicas: La preparacin microscpica.Microtomo de congelacin. En P. Suirana, Practicas de Biologa y Botanica. Valencia: Universidad Politecnica de Valencia.

6. CUESTIONARIO 1. Qu tipos de asociaciones biolgicas existen? Existen dos tipos asociaciones intraespecficas e interespecficas: Las asociaciones intraespecficas se da entre los organismos de la misma especie. En esta asociacin tienden a reunirse para facilitar la reproduccin y disponer de ms territorio y alimentos. Pueden ser: Familiares relaciones de reproduccin y cuidado. Gregarias sin relaciones de parentesco, pero con objetos de proteccin mutua frente a los depredadores y la bsqueda de alimento. Estatales divisin del trabajo entre los individuos que integran la poblacin. Coloniales la poblacin de individuos unidos fsicamente entre si forman un organismo comun.

Territoriales inclinacin que tiene cada individuo de la poblacin a ocupar un espacio y defenderlo de los dems individuos de su especie.

Las asociaciones interespecficas, se da entre organismos de distinta especie, que pueden realizarse en diversos grados, se distinguen, en orden creciente, el comensalismo, el inquilinismo, la simbiosis y el parasitismo. En el comensalismo, el comensal vive sobre el cuerpo o bien en el interior del husped, alimentndose de los desechos de ste, como hacen las bacterias que viven en las heces intestinales. En el inquilinismo, el inquilino busca guarida o proteccin, como es el caso del pez aguja, Fierasfer acus, que se aloja al menor peligro dentro de las holoturias, y los cangrejos que buscan refugio dentro de los mejillones. La simbiosis consiste en la asociacin de dos organismos con beneficio mutuo, como sucede en los lquenes, formados por la unin de un alga verde y un hongo; el alga sintetiza materia orgnica que pasa al hongo, mientras que ste proporciona al alga humedad y sales. 2. Utilidad de las preparaciones frescas, temporales y definitivas, ventajas y desventajas de cada una de ellas Preparaciones frescas: en las preparaciones frescas se utilizan una porcin del material vivo, ya sea animal o vegetal, o una gota con microorganismos. Las desventajas son ms que las ventajas entre las desventajas figura que su tiempo de duracin no es mayor de una hora puesto que el calor desprendido por la fuente de iluminacin evapora rpidamente la muestra. Preparaciones temporales: se realizan generalmente con agua destilada, glicerina o simplemente agua corriente (un medio liquido), la ventaja es simple observar alguna estructura u organismo "en vivo", por ejemplo para observar los protozoos que habitan en cuerpos de agua dulce se utiliza estos preparados; solo se toma una gota de agua de ese cuerpo de agua, se la coloca entre porta y cubreobjetos y se la mira al microscopio, la desventaja es que tienen una duracin limitada y si no se cubre cuidadosamente con el cubreobjetos se forman burbujas lo que impide alcanzar el xito de la observacin. Preparaciones definitivas: los preparados definitivos requieren de un medio de montaje, como alguna resina, que se endurezca, (por ejemplo utilizar Hoyer) que depende del tipo de preparado que ests realizando y del organismos con el que ests trabajando. Como ventaja nos permite observar en detalle estructuras que de otro modo no pueden ser vistas (puede ser porque requieren de inmersin) o porque se requiere de tinciones o cortes muy finos. Tambin se utilizan para albergar organismos en colecciones permanentes. El tiempo de duracin es ms largo que en las preparaciones temporales. La desventaja es que para realizarla se necesita que las muestras sean lo ms delgadas caso contrario no se logra una buena observacin.