Sunteți pe pagina 1din 26

Biosinteza Glicerol Carbonatului din Bio-Glicerol

1. INTRODUCERE Trim o era dominat de necesitatea descoperirii de noi surse regenerabile de energie a cror utilizare s nu aduc un prejudiciu mediului nconjurtor ci, chiar mai mult, s permit crearea unui parteneriat ntre producia de energie i Chimia Verde [1] {1- art. romn}. n acest context, biomasa, sursa regenerabil de carbon, are un loc important in noul portofoliu al surselor de energie pentru un viitor previzibil. Un exemplu n acest sens este biomasa produs n industria alimentar care, dei constitue reziduu n procesul de fabricare al alimentelor, este considerat hran pentru industria energetic. Astfel, uleiul rezidual generat de fast-food-uri poate fi reutilizat pentru generare de energie prin transformarea acestuia n biodiesel [2] {2 - art. romn}. Uleiul vegetal crud (nerafinat) ct i anumite tipuri de plante sunt, deasemenea, biocarburani n fabricarea biodiesel-ului. n prezent exist o strategie politic la nivel European care ncurajeaz utilizarea biocarburanilor pentru industria energetic. Acelai proces biodiesel, face ca sursa de energie s produc i bio-glicerol ca produs secundar, utilizat ca precursor pentru obinerea unor produse chimice valoroase i folosite pe scar larg, intitulate generic produse de biorafinarie. Biorafinaria este un nou concept al zilelor noastre analog rafinariei petrolului (carburan i i produse petroliere). n domeniul biorafinariei sunt inclui carburanii, energia i chimicalele generate n urma procesului de conversie a biomasei. Astfel, industria biorafinariei este identificat ca o ramura de viitor a industriei care se bazeaz pe bio-resurse. Toate acestea sunt doar cteva aspecte din realitatea cotidiana n care conceptul de energie este strns legat de conceptul de biomas i biorafinarie. Astfel, s-a lansat ideea valorificrii bio-glicerolului avnd rol de precursor al unui produs de biorafinarie, glicerol carbonatul. Din punct de vedere practic, n prezentul proiect am urmrit prepararea de bio-catalizatori pe baz de enzim-lipaz (biocatalizatori-lipaz) cu aplicabilitate n procesul de transesterificare bio-catalitic a glicerolului cu dimetil carbonat (DMC) pentru a obine glicerol carbonat.

-1-

2. BIOGLICEROLUL

Glicerolul, este o molecul organic izolat nc din anii 2800 .e.n. prin nclzirea grsimilor n amestec cu cenu (n procesul producerii spunului) i reprezint o substan chimic industrial cu zeci de aplicaii (Fig. 1) [3] {art. 1}.

Fig. 1 Piaa glicerolului (volume i uz industrial).

Glicerolul (1,2,3- propantriol sau glicerin) este un alcool trihidric. Este un lichid siropos, incolor, inodor i dulceag la gust. Se topete la 17.8C, firbe cu descompunere la 290C i este miscibil cu apa i etanolul [4] {art. 2}. Formula chimic pentru glicerol este: OH-CH 2 -CH (OH)-CH 2 -OH Glicerolul este i higroscopic (absoarbe umididatea din aer) proprietate ce-l face valoros ca i umidificator n industria cosmetic. Este prezent n forma esterilor si (gliceride) n toate grsimile i uleiurile animale i respectiv vegetale [4] {art. 2}. ncepnd cu sfritul anilor 1940 e.n., n urma descoperirii substanelor tensioactive sintetice, glicerolul a fost obinut din epiclorohidrin (obinut la rndul su din propilen deci din petrol) i pentru o bun perioad de timp a fost sintetizat n cantiti mari, deoarece marile companii chimice prevzuzer o criz de glicerol i au iniiat astfel producia sintetic a acestuia [3] {art. 1}.
-2-

ntre timp costrngerile economice au fcut ca interesul pentru producerea glicerolului la scar mare s scad. n zilele noastre, preocuprile legate de mediul nconjurtor precum i cele politice genereaz un interes din ce n ce mai crescut asupra generrii de com bustibili alternativi, regenerabili, cum ar fi producerea de bio-diesel din uleiuri vegetale prin transesterificare. nainte de recenta cretere a preului petrolului, costurile de producie mari, faceau bio-combustibilii neprofitabili fr sucvenii din partea guvernelor respective. n ultima decad ns, bio-diesel-ul a devenit un combustibil viabil precum i un nlocuitor al sulfului ca aditiv n combustibilii fosili, al crui coninut este sczut progresiv n conformitate cu legislaia mediului nconjurtor ce este din ce n ce mai restrictiv n aceast privin [3] {art. 1}. Astfel, productia bio-diesel-ului la nivel mondial a cunoscut o cretere exploziv i n acest context, bio-glicerolul este cel mai important produs secundar n producia bio-dieselului din biomas [5] {3 - art. romn}.

-3-

3. UTILIZAREA BIOGLICEROLULUI N SINTEZA FIN

n ultimii ani s-a dezvoltat un interes crescnd pentru utilizarea rezervelor de hran regenerebile [6] {1 art. 7} i grsimile i uleiurile obinute fr a concura cu cele necesare industriei alimentare pot devenii nite factori importani n industria chimic pentru viitorul apropiat.

Schema 1. Civa derivai ai glicerolului de interes industrial.

-4-

Costurile competitive, disponibilitatea la nivel mondial i funcionalitatea intrinsec face ca acestea s fie foarte atractive pentru un numr mare de aplicaii comerciale. Una dintre aplicaii este i producerea bio-diesel-ului prin transesterificare cu metanol sau etanol [7] {art. 7}. Producia de bio-combustibili i bio-lubrifiani din biomas este n cretere (i va continua s creasc) i astfel la fel se ntmpl i cu producerea de bi o-glicerolul, ceea ce-i confer acestuia un rol crucial n viitorul bio-rafinriilor [8] {7 art. 1}. Glicerolul se produce prin diverse precese cum ar fi transesterificarea gliceridelor, alcooliz, separare hidrolitic sub presiune i saponificare cu ajutorul substanelor alcaline. Mai este produs de asemena prin procese dedicate cum ar fi sintetizarea acesteia din propan sau din fermentarea zaharurilor simple [9] {art. 6}. Pe msur ce derivaii si (Schema 1) [9] i gsesc ntrebuinare n diverse sectoare precum industria producerii de combustibili, chimic, de producere a automobilelor, farmaceutic, de producere a detergenilor i cea a construciilor (Fig. 2) [3] {art. 1}, glicerolul devie produsul secundar cu cel mai mare impact economic in industria oleochimic modern.

Fig. 2. Chimia glicerolului va juca un rol crucial n viitorul bio -rafinriilor, unde materialele i energia vor fi produse din materii prime regenerabile.

-5-

Glicerolul este un produs de sintez intermediar n prepararea unui numr mare de compui prin oxidare, eterificare, esterificare, transesterificare, polimerizare, etc. Astfel, nu este de mirare c s-a depus un efort mare n ultimii ani pentru connversia glicerolului n produi chimici cu valoare adugat mare [7] {art. 7}. O selecie de produi chimici ce pot fi obinui folosind glicerolul ca substrat de reacie sunt ilustrai n schema 2 [3] {art. 1}:

Schema 2: Glicerolul ca i platform pentru substane chimice funcionale

Producia bio-diesel-ului a crescut dramatic n ultima jumtate de decad, n special n Statele Unite al Americii (de la 1609 tone aual n 1999 la peste 225 000 tone n 2005) [10] {2 art. 2}, precum i n Europa ce a raportat o producie aual n 2009 ce a depit 20 900 de tone [11] {4 art. Romn}. Pentru fiecare 9 kg de bio-diesel produs, se formeaz n jur de 1 kg de glicerol crud [12] {1 art. 2}. Astfel, raportat la producia de bio-diesel, a aprut i o co-producere foarte mare de bio-glicerol. Glicerolul crud derivat din producia de bio-6-

diesel are o valoare foarte sczut datorit impuritilor i astfel catitatea mare produs impune totui nite piedici tehico-economice considerabile n valorificarea acestuia [4]. Rafinarea n cotinuare a glicerolului crud va depide de economia nivelului de producie i/sau de disponibilitatea accesului la un centru de purificare a glicerolului. Productorii de bio-diesel la o scar mai mare i rafineaz siguri glicerolul crud produs i apoi l plaseaz pe diferite piee economice n alte ramuri idustriale. n general este tratat i rafiat prin filtrare, adiii chimice i distilare fracional n vid petru a sintetiza produi fiali cu diferite caliti comerciale. Petru un produs ce va fi folosit n industria alimentar, cosmetic, sau farmaceutic, sunt necesare purificri adiionale cum ar fi nnalbirea, parfumarea i schimb ionic pentru a nltura oricare alte proprieti nedorite rmase. Purificarea pn la acel nivel este ns foarte scump i n general peste nivelul de compatibilitate economic pentru productorii mici i medii. Cu ct din ce n ce mai mult glicerol crud este generat continuu de ctre idustria bio-diesel-ului, cu att este mai important explorarea unor modaliti economice noi de a utiliza glicerolul inferior calitativ spre a uura mai departe costurile producerii de bio-diesel pe piaa economic Global [4]. Ideea producerii unei cantiti enorme de bio-glicerol este automat asociat unor pierderi enorme de energie i resurse materiale. Mai mult, o hiperproducie de glicerol poate genera o scdere semnificativ a preului acestuia. n baza acestor perspective, n 2008 Bryan Sims, editor la 2 dintre cele mai cunoscute publicaii internaionale din domeniul biorafinriei, Biodiesel Magazine i Biorefining, trage un semnal de alarm n Biodiesel Magazin: n ciuda cerinei continue de glicerol crud pe piaa de export, n special n China i America, productorii implicai n domeniul produciei de bio-diesel trebuie s gseasc alternative de utilizare a produsului secundar bio-glicerol, cu preponderen acolo unde nu este necesar purificarea glicerolului, aceasta fiind o procedur foarte costisitoare. n sprijinul acestei idei, se incearc exploatarea de metode alternative n cadrul activitii de cercetare pentru descoperirea de noi domenii de utilizare a glicerolului crud [13] {5 art. Romn}. Riscul ca o cantitate mare de glicerol s fie produs i acumulat ca i deeuri chimice a grbit att cercetarea industrial ct i cea academic spre identificarea de noi oportuniti de folosire a acestui produs secundar, fie direct (ca i combustibil chiar n aceleai uzine de producie a bio-diesel-ului), fie prin convertirea acestuia n derivai folositori [14] {6 art. 6}. A doua opiune gsete mai multe aplicaii noi pentru producerea de imbuntitori asupra cifrei octanice (aditivi la combustibilii diesel: cum ar fi terbutil eter de glicerol) [15] {7 art. 6} sau intermediari n producerea de substane chimice fine (ex.: dihidroxiaceton, acid
-7-

gliceric, acid piruvic i 1,3-propandiol), fie prin fermentare [16-18] {8-10 art. 6} ori prin metode chimice [19] {11 art. 6}, prezentai anterior n schema 1. n acest context activitatea de cercetare a fost deja directionat ctre noi aplicaii ale bio-glicerolului, ca surs ieftin, n concordan cu politica Chimiei Verzi i tehnologiilor corespunzatoare. Astfel, s-a lansat ideea producerii unor derivai funcionali ca produi de baz sau ca precursori n sintezele organice fine [20] {6 art. romn}. Ca exemple concrete pot fi amintite bateriile calculatoarelor de tip laptop i iPod, ct i soluiile de antigel care n curnd vor conine bio-glicerol. De asemenea, numeroase articole publicate n jurnalul Biodiesel Magazine descriu studii de cercetare recente care pun n eviden posibilitile multiple de valorificare a bio-glicerolului prin conversie n hidrogen, lapte mbuntit, etanol, produse din plastic i lubrifiani (Biodiesel Magazine 2005-2008) [21] {7 art. romn}. Toate aceste aspecte demonstreaz faptul c un rol crucial n domeniul biorafinariei l joaca chimia bio-glicerolului [22] {8 art. romn}, ceea ce motiveaz interesul cercettorilor n domeniul valorificrii bio-glicerolului.

-8-

4. GLICEROL CARBONATUL

Glicerol carbonatul (4-hidroximetil-1,3-dioxolan-2-on), schemele 1 i 2, este unul dintre derivaii glicerolului care atrage din ce n ce mai mult interes tiinific i industrial datorit aplicaiilor poteniale n care ar putea fi folosit. Glicerol carbonatul este un material relativ nou introdus n industria chimic dar cu un potenial larg de utilizare: component a membranelor de separare n faza gazoas, solvent nevolatil pentru mai multe tipuri de materiale (ex. colorani, lacuri, medicamente, detergeni, adezivi i produse cosmetice), precursor n aplicaii biomedicale, etc. Este, de asemenea, considerat un bun biolubrifiant datorit faptului c ader uor la suprafee metalice i rezist la presiuni ridicate ct i la aciunea unor ageni de oxidare sau hidroliz [23] {9 art. romn}. Mai mult, glicerol carbonatul este utilizat ca materie prim n sinteza materialelor polimerice de tip glicidol precursor important al industriei polimerice [24] {10 art. romn}, schema 3.

Schema 3. Glicidolul se formeaz cu uurin din glicerol carbonat, sub influena catalizatorului zeolit A (sau g alumin) la presiune sczut

Unul dintre furnizorii importani pe piaa European ai polimerilor de tip glicidol este compania german Hyperpolymers [25] {12 art. romn}. nafar de faptul c este unul dintre componentele de calitate superioar n producia de rini epoxi i poliuretane, glicidolul poate fi polimerizat ntr-un polieter poliol umit poliglicerol [26] {34 art. 1}. Funcionalitatea sa ridicat, mpreun cu reactivitatea versatil i foarte bine documentat a funciilor sale hidroxi, st la baza unei mari varietate de derivai chimici [27] {35 art. 1}.
-9-

ntr-adevr, o mare varietate de poligliceroli au fost pn la urm comercializai pentru aplicaii vaste ce variaz de la producerea de cosmetice pna la cea a medicamentelor eliberate numai pe baz de reet [28] {11 art. romn}. n plus, glicerol carbonatul prezint o toxicitate sczut, biodegradabilitate bun i un punct de fierbere ridicat. Pentru toate aceste proprieti gsete mai multe aplicaii n diferite sectoare industriale, n special ca solvent polar ce fierbe la temperaturi nalte sau ca produs intermediar n sinteza organic (ex.: monomer n sinteza policarbonatelor i a altor materiale polimerice n domeniul plasticelor [29] {12 art. 6}), ca precursor n diverse aplicaii biomedicale i ca grup de protecie n chimia carbohidrailor [9].

- 10 -

5. METODE DE SINTEZ PENTRU GLICEROL CARBONAT

Cutarea de modaliti pentru a produce cu succes ntr-un mod eficient glicerol carbonat din materii prime regenerabile reprezint una din preocuprile cheie pentru diferite ramuri de producie deoarece acestea ar putea concura cu i chiar nlocui materiile derivate din industria petrolului [30-32] {8-10 art. 3}. Principalele metode de producere a GC s-au bazat de-a lungul timpului pe reacia glicerolului cu o surs de carbonat (fosgen, dialchil carbonat sau alchilen carbonat), uree i monoxid de carbon i oxigen [1114 art. 8]. n mod tradiional, carbonaii ciclici au fost preparai prin reacia glicolilor cu fosgenul [15 art. 6], dar datorit toxicitii mari i a naturii corozive a fosgenului s-au explorat ci alternative pentru obinerea carbonailor ciclici cum ar fi reacia de transesterificare a dialchil [10 art. 7] sau alchilen carbonailor [16 a ,b art. 6]. De exemplu, etilen carbonatul, un produs comercial cu proprieti fizice interesante (toxicitate sczut, rat de evaporare sczut, biodegradabilitate, solvabilitate ridicat, etc.) a fost folosit la scar larg ca i surs pentru producerea GC. Transesterificarea dintre glicerol i etilen carbonat (EC) pentru a produce GC se realizeaz cu ajutorul unei baze alcaline. De exemplu, folosind bicarbonat de sodiu la 130C, randamentul de GC a ajuns la 81% dup 30 min. [11 art. 7]. Totui, principala problem asociat cu aceti catalizatori o reprezint necesitatea unui pas final de neutralizare. Pentru realizarea acestui lucru, la sfritul reaciei, un acid mineral (acid fosforic, acid sulfuric, acid benzensulfonic, etc.) este adugat n sistem pentru a neutraliza catalizatorul, urmat de distilarea sub presiune sczut pentru recuperarea GC din amestecul reaciei, ce conine reactani, sruri i produi [art. 7]. Catalizatorii bazici heterogeni ar trebui s permit o separare uoar precum i reciclarea catalizatorului prin filtrare, evitnd astfel pasul de neutralizare i implicit formarea de deeuri, totui exist puine exemple pentru sintetizarea GC prin transesterificarea EC i glicerolului n prezena catalizatorilor solizi. Astfel, Sugita et al. [12 art. 7] a realizat reacia de transesterificare n prezena oxidului de aluminiu ca i catalizator. Cnd reacia s -a desfurat la 135-140C la presiune sczut cu eliminarea progresiv de etilen glicol, GC s-a obinut cu un radament de 99%.

- 11 -

GC a mai fost produs direct prin carbonilarea oxidativ a glicerolului prin reactarea glicerolului cu un amestec gazos de monoxid de carbon i oxigen. Astfel, Teles el al. au descris un proces ce utilizeaz sruri ai grupurilor de elemnte Ib, IIb i VIIb (cupru, argint, mercur, cobalt, etc) ca i catalizatori. Mai specific, reacia are loc ntr-un solvent inert cum ar fi nitrobenzen la 130C, cu un amestec gazos de CO/O2 (95:5%) la 8 bari n prezena clorurii de cupru(I) ca i catalizator. Sub aceste condiii de reacie i dup 20 h, s-a obiut GC cu un randament de 96% [19 art. 7]. n 1996 a fost patentat un proces pentru prepararea GC prin transesterificarea EC cu glicerol n prezena unei rii macroporoase anionic bicabonat sau hidroxilat (Amberlist A26) i a zeoliilor n forma bazic (Y, X, A) [13 art. 7]. Astfel, Mouloungui et al. a realizat sinteza glicerol carbonatului pri reacia glicerolului pe un carbonat organic ciclic n prezea unui catalizator solid format dintr-o rin macroporoas anionic, bi-carbonat sau hidroxilat, sau un zeolit alcalin de tip X- sau Y-. Aceast reacie produce glicol ca i produs secundar cu o selictivitate de aproape 15-30%. Cnd reacia de transesterificare s-a realizat n prezena zeolitului bazic KX ntr-un raport molar EC/glicerol de 2, la 80C, s-a obinut GC cu un randament de 81% dup 2 h de reacie. Cnd s-a folosit i un reactant ce permite distilarea etilen glicolului format, randamentul pentru GC a crescut la 99% [11 art. 5] {1996}. ntr-un alt studiu, mpreun cu echipa sa, Mouloungui et al. a investigat posibilitatea obinerii GC prin carbonatarea direct a glicerolului n CO2 supercritic, n prezena zeoliilor i a rinilor ionice [33] {art. 9}. Astfel, a descris utilizarea unui carbonat organic ca i coreactant. Etilen carbonatul a fost selectat pentru experimente. Reacia este prezentat n schema 2.

Schema 2

Astfel, s-a artat c GC poate fi sitetizat din glicerol ntr-un mediu de CO2 supercritic (SC), fiind totui necesar folosirea unui carbonat organic (etilen carbonatul) ca i material de
- 12 -

pornire n condiiile folosite n experiment. A fost posibil mbuntirea carbonatrii glicerolului n prezena etilen carbonatului cu CO2 ca i co -surs a carbonatului pentru sintetizarea glicerol carbonatului. Zeolitul Purosiv sau 13X precum i rina puternic bazic precum Amberlist A26 n forma hidroxil, ca i catalizatori, au mbuntit eficient reactivitatea glicerolului absorbit n catalizatorul solid precum i a etilen carbonatului dizolvat n CO2 SC [art 9]. Modalitile prezentate mai sus de obiere a clicerolului carbonat prin metode sintetice au produs cantiti moderate al acestui produs, ns au fost nevoie de condiii de reacie dure i n plus a fost necesar de nc un pas de purificare folosind distilarea [9 art. 10]. n aceste condiii, s-a formulat ipoteza comform creia carbonatarea direct a glicerolului folosind CO2 ar putea fi o oportunitate bun spre a fi exploatat, deoarece aceste dou resurse disponibile din abunden ar putea genera un produs valoros, proces ce n condiii favorabile poate avea o eficien de 87% [art. 8]. Ideea de a produce esteri carbonici ciclici folosind CO2 a fost pus n practic de Tomishige et al., acetia producnd carbonat ciclic din diolul corespunztor folosind catalizatori bazai pe oxizi de ceriu [18 art. 8] {2 2004}. Mai recent, s-a descoperit carboxilarea direct a glicerolului cu CO2 [17 a {2006}, b {2009}, c {2009} art. 6], o reacie interesant ce convertete dou deeuri ntr-un produs cu valoare adugat (schema 7). Dar pentru gsirea unei aplicaii practice pentru aceast reacie, s-a necesitat investigarea unui catalizator cu proprieti chimice mbuntite.

Schema 7

- 13 -

Astfel, Aresta et al. a raportat carboxilarea direct a gllicerolului cu CO2 folosind complexe de staniu (n-Bu2Sn(OCH3)2, n-Bu2SnO and Sn(OMe)2) ca i catalizatori. Astfel, glicerol carbonatul poate fi obinut printr-o reacie de transesterificare a dimetil carbonatului (DMC) cu glicerol folosind catalizatori omogeni cum ar fi n-Bu2Sn(OCH3)2, rezultnd ntr-o conversie de 65% dup 15 ore [7 art. 5] {2006}. Munshi et al. au realizat producerea selectiv de 1,2-glicerol carbonat asistat prin metanol din CO2 folosind nBu2SnO ca i catalizator [art. 8]. Astfel au artat formarea de 1,2glicerol carbonat prin insria direct de CO2 n glicerol folosind o substan att ieftin ct i uor dispoibil pe pia, di(n-butil) oxid de staniu(IV) (1), n cantiti catalitice n prezen de metanol (Schema 1).

n plus autorii au evaluat i mecanica cii de sintetizare a carbonat glicerolului prin identificarea intermediarilor cu ajutorul spectroscopiei. Aceast sintetizare a fost catalogat drept primul exemplu de formare a glicerol carbonatului ntr-un mod cu adevrat catalitic din glicerol i CO2. Calea catalitic plauzibil este prezentat n schema 6. Rezultatele studiului au artat c directa carbonatare a glicerolului (sau 1,2 diol) folosind CO2 prin dibutil oxid de staniu(IV) (nBu2SnO) (1), ar putea duce la formarea catalitic de carbonat ciclic corespunztor n prezena metanolului. Cu toate acestea, procesul necesit eliminarea continu de ap pentru a scpa de limitrile termodinamice pentru a avea un randament mai bun.

- 14 -

Schema 6. Calea plauzibil pentru reacia de formare a GC

S-a observat c rata de reacie depinde de cantitatea de catalizatori i de metanol folosite. n timpul reaciei s-au putut capta intermediarii i identificai cu ajutorul NMR C 13, IR i spectroscopia de mas a amestecurilor reaciei. Reacia a continuat n urma activrii substanei 1 prin formarea de ctre metanol a dibutil-staniu-dimetoxidei urmat de dibutilstaniu-gliceratului, ce a suferit inserie de CO2 pentru a produce complexul non-izolabil de 7 membrii glicerolcarbonato-staniu care n cele din urm a produs glicerol carbonat [art. 8]. O alt metod alternativ pentru obinerea glicerol carbonatului este gliceroliza ureei (Schema 3), o reacie ce a fost descris recent n lieratura tiinific [18] i cea de patentare [19-21].

- 15 -

Schema 3. Sintetizarea GC prin gliceroliza ureei

Gliceroliza ureei joac un rol important n conversia glicerolului n glicerol carbonat deoarece este un proces fr utilizare de fosgen care utilizeaz materii prime uor disponibile i ieftine ce au o toxicitate sczut. -Zirconiu fosfat (-ZrP Fig.2) prezint o activitate bun ca i catalizator pentru c permite 80% din conversia glicerolului n condiii de reacie mai blnde. Catalizatorul este uor recuperabil i reutilizabil n cicluri succesive de reacie.

- 16 -

Figura 2. Trsturi structurale eseniale ale -ZrP

Gliceroliza ureei reprezint o procedur sintetic interesant petru glicerol carbonat ce poate avea o aplicare industrial. Conversia bun de glicerol (80%), selectivitatea mare (100% n condiii controlate), separarea uoar a catalizatorului i recuperarea n totalitate a acestuia, recuperarea de NH3 i separarea continu a carbonatului face metodologia descris mai sus foarte promitoare. Cunotiinele dobndite despre influena spaiului parametrilor asupra produsului reaciei i a selectivitii, precum i posibilitatea lucrului n diferite condiii de reacie (ex.: eantioane sau curgere continu, presiune sczut sau ambiental) face ca aceast tehnologie s fie de o potenial aplicare industrial [art. 6]. Referitor la prepararea GC din uree i glicerol, Mouloungui et al. au patentat un proces pentru prepararea GC folosind sruri metalice sau orgaometalice, sau compui metalici tolerai. Cele mai bune rezultate (randament de GC de 80%) au fost obiute cnd s-a folosit ZnSO4 calcinat ca i catalizator cu un raport molar glicerol/uree de 1, la 150C i 40 mbar., n acelai timp eliminnd amoniacul format n timpul reaciei [15 art. 7].

- 17 -

Catalizatori pe baz de zinc, Zn(CH3C6H4-SO3)2, au fost folosii i de Yoo et al. pentru a sintetiza glicerol carbonat din glicerol i uree. n acest caz, s-a realizat o conversie de 85% dup o or de reacie [8 art. 5]. mbuntirea compatibilitii economice i a mediului nconjurtor pentru sinteza de glicerol carbonat (ex.: prin reducerea de pai necesari i a deeurilor produse) presupune obinerea unei metode directe optimizate pentru producerea acestuia. Exist puine referiri n literatura specializat n ceea ce privete producia de glicerol carbonat folosind metodologii simplificate [art. 5]. Non-toxicitatea, biodegradabilitatea i procesul de producie mai curat al alchil carbonailor, cum ar fi dimetil sau dietil carbonatul (DMC sau DEC, respectiv), i face ageni ai chimiei verzi ce previn poluarea de la surs n timpul sintetizrii [9]. Mai mult, deoarece DEC include grupri etoxi i carbonil, poate fi folosit ca i agent eficient n carbonilare i etilare, precum ca i materia prim pentru producerea policarbonailor [10]. Folosirea de solizi bazici (hidrotalcit comercial Mg/Al Macrosorb CT 100) ca i catalizatori heterogeni pentru conversia glicerolului a fost patentat o singur dat. Aceast reacie produce un amestec de oligomeri ce conin numai 23% glicerol carbonat [12 art. 5] Pornind de la acest studiu, Alvarez ae al. au sintetizat glicerol carbonat i glanseicerol dicarbonat ca i produi cu valoare adugat ai glicerolului printr-o reacie de trasesterificare folosind DEC ca i co-substrat. Acest proces verde, eficient i selectiv a implicat cataliza cu dierii compui de tip hidroalcit coninnd un raport molar Mg/Al de 4, ce au fost activai prin calcinare i prin calcinare urmat de rehidratare sub ultrasunete. S-a investigat corelarea dintre proprietile de baz ale catalizatorului solid i activitatea n reacia de gliceroliz [art. 5]. Sinteza obinuit folosete ca i catalizator cantiti mari de o baz Brnsted, K2CO3, pentru a produce fie glicerol carbonat, glicerol dicarbonat sau diglicerol tricarbonat, n funcie de temeratura reaciei i/sau de cantitatea de DMC adugat [3]. Cantrell et al. au artat c sitele bazice Brnsted de hidrotalcii Mg-Al rehidratai reprezint catalizatori eficieni pentru transesterificarea tribulirinului cu metanol, cu o rat crescut proporional cu coninutul de Mg n hidrotalciii Mg-Al [19]. n concluzie, autorii au produs o metod eficient, folosind cataliza heterogen, pentru a obine glicerol carbonat i glicerol dicarbonat din glicerol (schema 2).

- 18 -

Schema 2. Reacie de transesterificare consecutiv catalizat de hidrotalcii a glicerolului cu DEC

Rezultatele experimentale au artat c tipul centrului bazic are o influen mare asupra activitii n reacia heterogen de glicoliz. n plus, capacitatea de absorpie a catalizatorului heterogen Brnsted favorizeaz transesterificarea respectiv a glicerol carbonatului. Htr4 s-a dovedit a fi cel mai bun catalizator i a putut fi reciclat de cteva ori. Astfel s-a concluzionat c amestecul de oxizi Mg/Al ca i catalizatori precum i catalizatorii rehidratai reprezint candidai promitori pentru reacia de transesterificare i ar putea nlocui cataliza omogen ce are o activitate similar. Totui s-a observat c structura fazei active meixnerit se pierde dup reacie, ceea ce sugereaz c solidul se dehidrateaz pe timpul reaciei. Acest lucru deschide o cale ctre posibila stabilizare a activitii catalitice [art. 5]. Corma et al. au studiat posibilitatea preparrii glicerol carbonatului cu randament i selectivitate mari folosind catalizatori solizi cu perechi acid-baze adecvate. n consecin, s-a ales reacia de transcarbonizare a glicerolului cu etilen carbonat i carbonizarea glicerolului tot cu uree [art. 7]. Okutsu and Kitsuki [16 art. 7] au produs GC prin reactarea glicerolului cu uree i cu un oxid metalic precum ZnO n prezena unui agent de deshidratare cum ar fi MgSO4 deshidratat. Astfel un amestec de de glicerol i sulfat de magneziu deshidratat s-a nclzit la 120C n prezena nitrogenului. Dup 2 h, s-au adugat uree i oxid de zinc. Dupz 6 h de reacie, conversia glicerolului a fost de 62-65 cu o selectivitate de 92%. Rezultate mai bune au fost raportate de ctre aceeai autori folosind ZnSO4 ca i catalizator. Realiznd reacia la 130C, s-a obinut GC cu un randament de 90% dup 10 h de timp de reacie [17 art. 7].
- 19 -

Totui, cnd reacia s-a realizat folosimdu-se MgSO4 ca i catalizator i n prezena dietilenglicol-dietil-eterului ca i solvent s-a produs GC la un randament de doar 58% dup un timp de reacie de 24 h [18 art. 7]. Corma et al. au pornit de la faptul c trasesterificarea catalitic a carbonatului ciclic cu un alcool presupune doi pai de echilibrare, ceea ce n general generaz un hidroxil alchil carbonat (compusul A, schema 1) ca i intermediar de reacie. Adugarea unei a doua molecule de alcool (n acest caz grupul hidroxil secundar al glicerolului) la produsul intermediar (A) a rezultat n formarea de glicerol carbonat i etilenglicol. Aceti doi pai de reacie de echilibrare sunt prezentai n schema 1.

Schema 1

Sinteza glicerol carbonatului s-a realizat prin transesterificarea etilen carbonatului cu glicerol catalizat prin oxizi bazici (MgO i CaO) i oxizi mixti (Al/Mg, Al/Li) derivai din hidrotalcii. Rezultatele au artat c cel mai optim catalizator din punct de vedere al activitii chimice i al selectivitii oxidul mixt puternic bazic Al/Ca (AlCaMO) care poate cataliza reacia la temperaturi sczute (35C) i ncrcare catalitic mic (0.5% din greutatea total a reaciei) rezultnd In conversii masive de glicerol co o selectivitate de 98% ctre glicerol carbonat [art. 7]. O alt rut interesant pentru producerea glicerol carbonatului este reacia dintre glicerol i uree. Principalul avantaj al acestei metode este faptul c ureea este un reactat

- 20 -

dissponibil cu uurin i ieftin. n plus, amoniacul format poate fi uor convertit n uree deoarece sintetizarea ureei se realizeaz din amoniac i CO2 [art. 7]. Mecanismul acceptat pentru reacia ureei cu alcooli implic doi pai [27] i n cazul specific al glicerolului acetia sunt: primul pas este carbamoilarea glicerolului n glicerol carbamat elibernd un mol de amoniac; acest pas se realizeaz la o rat mai mare de reacie dect cel de-al doilea pas, reprezentat respectiv de carbonilarea glicerol uretanei n glicerol carboat cu eliminarea unui al doilea mol de amoniac (schema 2).

Schema 2

Rezultatele au artat c acei catalizatori acid-baz bifuncional echilibrai, unde acidul Lewis activeaz carbonilul din uree i sita bazic conjugat activeaz grupul hidroxil al glicerolului, au fost cei mai activi chimic i selectivi dintre catalizatori. Astfel, pentru a evita formarea de prodii secundari, reacia de transesterificare dintre etilen glicol i glicerol pentru a produce glicerol carbonat trebuie s fie realizat la temperaturi ct mai sczute. Hidrotalciii calcinai cu pKa > 14 [36 art. 7] ce sunt capabili s extrag un proton din glicerol reprezint materiale potrivite pentru realizarea transesterificrii rezultnd n randamente nalte de glicerol carbonat. Pe de alt parte, hidrotalcitul regenerat prin bazitate Brnsted produce o selectivitate mai redus datorat unei producii mai mari de glicidol. Crescnd bazitatea Lewis al oxizilor Mg-Al mixti derivai din hidrotalcii prin substituirea Mg de ctre Li permite lucrul la temperaturi i ncrcare cu catalizator mult mai sczute dect cu oxizi mixti Mg-Al. (35C fa de 50C, 0.5 fa de 7 % din greutatea reaciei). n plus adugarea oxidului mixt obinut prin calcinarea unui amestec de CaCO3 + Al (OH)3 a rezultat n cel mai eficient catalizator pentru reacia de transesterificare dnd glicerol carbonatului selectiviti de 98% [art. 7].
- 21 -

Carbonilarea glicerolului cu uree este realizat mai bine prin catalizatori solizi cu acid-baza echilibrat, unde acidul Lewis activeaz carbonilul din uree i sita bazic conjugat activeaz grupul hidroxil al glicerolului. n timp ce ZnO s-a raportat a fi un catalizator cu o pereche acid-baz adecvat, n acest caz s-a observat c dac se crete bazitatea bazei conjugate ZnO prin prepararea unui oxid mixt Zn-Al cu o putere mai mare a bazei perechii conjugate dect cea a ZnO, selectivitatea reaciei i randamentul final de glicerol carbonat cresc semificativ, lucrnd cu un raport uree fa de glicerol de 1 mol mol^(-1). Deci este permis substituirea catalizatorului solubil i greu de reciclat ZnO cu hidrotalcitul heterogen Zn-Al. Park et al. au sintetizat GC din EC i G folosind lichid ionic imobilizat ca i catalizator [art. 5]. Folosirea lichidelor ionice, ca i mediu benign raportat la mediul nconjurtor, n procesele catalitice sau n extracia chimic a devenit larg recunoscut i acceptat [12 art. 4] {1999}. Lichidele ionice sunt sruri cu punct de topire sczut (<100 0C), n stare lichid la temperatura ambiant sau apropiat de aceasta, nevolatile (un avantaj major fa de solvenii organici i anorganici convenionali), cu o capacitate ridicat de a dizolva compui chimici cu structuri variate i ce prezint uurin de creare de sisteme bi-fazice cu solveni organici. Aceste proprieti fac din lichidele ionice o alternativ atractiv la solvenii organici n special n reaciile de biocataliz enzimatic [13 art. romn]. Cercetrile realizate n aceast direcie au artat c n multe reacii enzimele prezint activitate catalitic i selectivitate (regio-/enanio-selectivitate) mai ridicat n lichid ionic dect n solvent organic [14 art. romn]. De asemenea, stabilitatea termic i operaional a enzimei poate fi mbuntit n mediu de lichid ionic [13 d, 15 art. romn]. n ultima decad, s-a nregistrat o folosire crescnd a lichidelor ionice ce coin imidazoliu i contra-anionii si n multe cmpuri de cercetare precum medii de reacie alternative, tiina separrilor i a sintezelor materiale [12,13 art. 4 {2002}]. Astfel, Park et al. au folosit lichide ionice imobilizate pe un strat mezoporos MCM41, fiind preparate i testate ca i catalizatori n sinteza glicerol carbonatului prin transesterificarea etilen carbonatului cu glicerol. Lichidele ioice au fost generate pe MCM41 (CPMCM41), funcionalizate cu clorofil prin imobilizarea de trialchilalmine. Lichidul ionic cuarterar sare imobilizat pe MCM41 (RNX-MCM41) a fost caracterizat folosindu-se un

- 22 -

numr de msurtori fizico-chimice inclusiv XRD, BET, 13C i 29Si MAS-NMR. Performanele lor catalitice au fost testate n eantioane ntr-un reactor cu [art. 4]. S-a investigat influena structurii srii de amoniu cuarternar i parametrii reaciei precum temperatura i timpul de reacie. Astfel, RNX-MCM41 cu un lan alkil mai lung a artat o activitate catalitic mult mai bun. Temperatura nalt i un timp de reacie mai ndelungat sunt mai favorabile pentru reactivitatea RNX-MCM41. Catalizatorul poate fi refolosit pentru reacie pn la trei utilizri cosecutive fr o pierdere considerbil a activitii sale iniiale [art. 4]. Astfel, n sinteza glicerolului carbonat din transesterificarea etilen glicolului i glicerolului, lichidele ionice imobilizate pe MCM-41 au artat o activitate catalitic bun fr utilizarea vreunui solvent. S-a gsit c RNX-MCM41 cu un lan alchil mai lung a artat o activitate catalitic mult mai bun datorat mai bunei sale abiliti de activare a anionului. Temperatura nalt i un timp de reacie lung au crescut de asemenea activitatea catalitic [art. 4]. Marcos et al., au utilizat nanoparticule de oxid de cobalt (40-50 nm), ce au fost dispersate ierarhic pe microparticule de ZnO (0.2 1 m) folosidu-se o metod cu energie sczut de amestec uscat, rezultndu-se astfel o interaciune Zn-Co ce stabilizeaz locaiile de Co2+. Spectroscopia Raman este folosit pentru a evidenia natura reaciei interfaz dintre particulele ZnO i Co3O4. Sistemul evolueaz ctre formarea fazei spinel, ZnCo2O4, cu continuarea tratamentului termal la 400C [art. 3]. Activitatea catalitic a acestor materiale a fost testat n producerea de materiale regenerabile prin carbonilarea glicerolului de ctre uree. Aceast lucrare prezint prepararea de sisteme catalitice de Co3O4/ZnO ierarhizate la scar nanometric folosidu-se ca metod de sintez foarte rapid, uoar i prietenoas mediului nconjurtor, cea de nanodispersie uscat (fr solvent, fr surfactant i fr reziduri). Aceast metod de preparare la temperatura camerei rezult ntr-o interaciune clar ntre oxizii Co3O4 i ZnO, oferindu -le o activitate chimic ridicat (69% rat de conversie i aproape 100% selectivitate) pentru transformarea n materiale regenerabile pe msur ce se realizeaz carbonilarea glicerolul ui de ctre uree n condiii de reacie moderate (140C/4 h). Metodologia propus ofer o viziune de nepreuit asupra structurii catalizatorilor i asupra producerii lor n mas datorit simplicitii sale [art. 3].

- 23 -

6. METODA NOASTR

n prezentul proiect am urmrit prepararea de bio-catalizatori pe baz de enzimlipaz (biocatalizatori-lipaz) cu aplicabilitate n procesul de transesterificare bio-catalitic a glicerolului cu dimetil carbonat (DMC) pentru a obine glicerol carbonat. Implicarea Enzimologiei n procesele biotehnologice la scar industrial a constituit un progres important al industriei conducnd la utilizarea enzimelor la nivel modial. Astzi, exist o gama variat de enzime folosite cu succes n procese biotehnologice industriale. Acestea fac parte cu preponderen din clasa enzimelor hidrolitice (ex. proteaze, amulaze, amilaze, esteraze i lipaze). Dintre acestea, lipazele constitue n prezent enzima-cheie care permite o dezvoltare rapid a Biotehnologiei n aplicaii industriale multiple cum ar fi producerea detergenilor, prelucrarea produselor alimentare, farmaceutice, cosmetice, textile, piele i n industria hrtiei. Lipazele sunt folosite i n procese de biotransformare i tratare a deeurilor, n bioremediere. De asemenea, ele au aplicaii medicale fiind componente ale sistemelor de biosenzori sau de sintez a medicamentelor [1 art. romn II]. Lipazele sunt enzime-catalizator pentru reaciile de hidroliz a triacilglicerolilor n medii apoase. n micro-medii apoase, lipazele au caracteristica unic de a cataliza reacii reversibile de tipul esterificare, alcoliz i acidoliz. Posednd capacitate catalitic dual (activitate lipolitic i esterolitic), pot interaciona cu o gama diversificat de substraturi. De asemenea, lipazele-catalizator prezint specificitate ridicat cum ar fi chemo-, regio- i enanioselectivitate
[2]

[2 art. romna II]. O alt caracteristic unic a acestor enzime este

conservarea i uneori amplificarea activitii catalitice n medii organice (solveni organici). Forma catalitic-activ a lipazelor nu necesit prezena unui cofactor ceea ce exclude apariia reaciilor secundare. Aceste enzime pot fi produse n cantiti mari cu costuri aferente reduse n medii biologice cum ar fi microorganisme microbiene, ciuperci sau bacterii. Cunoaterea mecanismului de secreie al lipazelor a permis n prezent elaborarea unor strategii la nivelul ingineriei genetice care s genereze lipaze modificate genetic cu caracteristice catalitice mbuntite n funcie de cerinele biotehnologice. Toate aceste avantaje au transformat lipazele n biocatalizatorii cei mai utilizai la nivel industrial. Acest fapt este confirmat de numeroasele articole review care descriu aspecte diferite evideniind caracterului versatil al biocatalizatorilor de tip lipaz, cum ar fi procese biochimice, metode de analiz, aspecte din biologia molecular, metode de purificare i aplicaii biotehnologice [3 art. romn II].

- 24 -

nlocuirea catalizatorilor anorganici bazici cu catalizatori enzimatici atrage dup sine cteva avantaje majore pentru sinteza invocat, i anume: condiiile de reacie nu sunt surse de poluare pentru mediul nconjurtor (temperatur i presiune la valori apropiate de cele ambientale), reactanii i catalizatorul utilizai nu sunt toxici iar cantitile de reziduri generate n urma reaciei enzimatice sunt mult mai mici dect cele obinute n cazul sintezelor utilizate pn n prezent. Lipazele utilizate n mod fregvent corespunzatoare tulpinilor: Candida antarctica, Mucormiehei, Candica rugosa, Pseudomonas fluorescence, Candida cylindracea, Aspergillus niger, Pseudomonas cepacia, etc. Enzimele supuse investigaiei pot fi caracterizate n sisteme omogene i heterogene. n sistemele omogene, enzima catalizator este solubilizat n mediul de reacie, n timp ce sistemele heterogene implic imobilizarea enzimei pe suporturi solide. Ar mai fi de menionat c activitatea catalitic a lipazelor este preponderent influenat de caracteristicile mediului de reacie. Acest fapt se datoreaz interdependenei dintre mecanismului catalitic i structura moleculei de lipaz. Molecula lipazei prezint o zon ce acioneaza ca un capac pentru centrul catalitic activ al enzimei, restricionnd accesul substratului n funcie de condiiile experimentale. Un mediu de reacie hidrofobic sau chiar molecule-substrat cu caracter hidrofobic induce o modificare conformaional genernd forma activa a enzimei (orienteaz capacul in poziia deschis i permite accesul substratului la centrul catalitic). Prezena interaciilor hidrofilice duce la nchiderea accesului ctre centrul catalitic activ al enzimei [8 -art. romn II]. Complexitatea mecanismului catalitic al lipazelor ngreuneaz modelarea i controlul procesului biocatalitic corespunztor att n laboratorul de cercetare ct i la scar industrial [7b art. romn II]. ntr-un studiu recent, asemntor cu ceea ce am urmrit n prezenta lucrare, Keun Sonk et al. au propus sinteza pe baz de catalizatori de tip lipaz a glicerol carbonatului din materiale regenerabile cum ar fi glicerol i dimetil carbonat prin transesterificare [art. 10]. Sinteza enzimatic de glicerol carbonat din materii prime regenerabile (glicerol i dimetil carbonat) a fost realizat cu succes cu ajutorul lipazei imobilizate din Candida antarctica (CALB, Novozim 435) [art. 10]. Adiia de site moleculare pentru ndeprtarea metanolului, ce a fost generat din dimetil carbonat n timpul reaciei, a accelerat rata de reacie. Dup optimizare, folosirea echimolara de glicerol i dimetil carbonat n reacia catalizat de ctre Novozim 435, a produs glicerol carbonat cu un randament aproape cantitativ [schema 1].

- 25 -

Schema 1. Sinteza de glicerol carbonatului printr-un catalizator de tip lipaz.

n prezentul studiu, sinteza enzimatic de glicerol carbonat din materii prime regenerabile (glicerol i dimetil carbonat) s-a realizat cu ajutorul lipazei imobilizate din Aspergillius niger. Enzima supus investigaiei a fost caracterizat n sisteme omogene i solubilizat n mediul de reacie. Reacia s-a realizat n condiii blnde, temperatur: 60C, presiune atmosferic, reactivi: netoxici, timp de reacie: 4h i a utilizat dimetil carbonat ca i solvent, agent de esterificare i reactant. spectrometrie de mas (GC-MS). Caracterizrile cantitative i calitative asupra produilor de sintez s-au realizat pe baza tehnicilor cromatografie pe baz de gaz cuplat cu

- 26 -