Sunteți pe pagina 1din 6

Bacteriofagul T4

nc de la nceputul existenei sale, organismul uman intr n contact cu variai factori de mediu (fizici, chimici i biologici) care acioneaz asupra lui, n diferite moduri, de cele mai multe ori ns acestea avnd doar efecte negative. Asemenea influene nocive se pot exercita nc din timpul existenei sale intrauterine, determinnd ample tulburri de organogenez i modificri evolutive (malformaii congenitale) sau chiar moartea sa. Dup natere ns, ntre organismul uman i microorganismele din jurul su se stabilesc variate raporturi de interaciune. Astfel, de cele mai multe ori, omul vine numai incidental n contact cu cea mai mare parte a acestor microorganisme, dar, cu unele dintre ele poate stabili chiar strnse relaii de interaciune i, uneori, de convieuire. n mod normal, imediat dup natere, epiteliul cutanat i mucoasele majoritii organelor interne ale omului sunt invadate treptat de o mulime de microorganisme care alctuiesc microflora normal a organismului uman, a crei conservare constant n limitele unui anumit mediu, asigur sntatea acestuia. Asemenea relaie de simbioz poate, uneori, deveni folositoare pentru ambii parteneri (ca n cazul sintezei unor vitamine eseniale de ctre unii coli intestinali) dar, deseori, ea poate dobndi aspecte de comensualism prin care microorganismele componente ale microflorei normale depind, din punct de vedere nutriional, de gazda care le adpostete, fr ai aduce prejudicii. Aceast convieuire se bazeaz ns pe un echilibru destul de instabil de fore astfel nct, att factori externi (environmentali), ct i interni (ce in de organismul gazd) pot modifica relaiile de interdependen n sensul transformrii acestora n microorganisme condiionat patogene care, profitnd de orice locus minoris resistentiae, ptrund spre esuturile sensibile, provocnd adevrate traume fiziologice. Dac, ns, asemenea microorganisme nu se pot dezvolta dect n organismul omului sau al unor animale, afectndu-le sntatea, atunci ntre cei doi membri ai ecuaiei se stabilete o relaie de parazitism. Microorganismele care ptrund i invadeaz esuturile organismului - gazd, unde se multiplic i determin tulburri morfologice sau / i funcionale, sunt considerate microorganisme patogene, iar aciunea lor patogen depinde numai de posibilitatea de a gsi cea mai convenabil poart de intrare spre structurile fragile ale organismului uman. Dimpotriv, simpla lor prezen pe suprafeele epiteliale ale organismului gazd, fr ca ele s se multiplice, caracterizeaz numai starea de contaminare. Pentru realizarea strii de infecie este necesar ptrunderea i multiplicarea microorganismelor patogene n esuturile organismului gazd, iar dac interaciunea dintre microorganismul patogen i gazda uman pe care acesta paraziteaz se materializeaz prin leziuni manifeste i contra-reacii din partea gazdei, atunci rezult starea de boal (clinic sau subclinic). Virusurile reprezint o categorie specific de ageni infecioi, structural i fiziologic fundamental diferii de oricare dintre microorganismele cunoscute (Zarnea G., 1983). Morfologia virusurilor Din punct de vedere morfologic virusurile pot aparine urmtoarelor tipuri principale: -form cilindric-alungit sau de bastona (virusul mozaicului tutunului); -form sferic (izometric), sferoidal (virusul gripal)

- form paralelipipedic (virusul variolei) - form de cartu sau obuz (virusul piticirii galbene la cartof) - form de mormoloc, spermatozoid sau cirea cu coad (unii bacteriofagi). Dimensiunile virusurilor 17 nm - 2500 nm. Dei diferitele virusuri se deosebesc mult ca form i dimensiuni ele sunt constituite dup principii comune. Particula viral matur (virionul) este alctuit din dou componente eseniale: genomul viral i capsida, precum i un constituient accesoriu, nveliul extern. Genomul viral este reprezentat n mod obinuit printr-o molecul de acid nucleic (ADN sau ARN, niciodat ambele). Genomul viral poart informaia genetic necesar replicrii n sensul sintezei constituienilor virali i a precursorilor lor. Capsida viral (gr. "Kapsa" = cutie), acoper genomul fiind alctuit din subuniti proteice denumite capsomere. Capsomerele sunt constituite din molecule proteice aezate n mod regulat, formnd n ansamblu structura specific a virusului. Capsida protejeaz materialul genetic. Capsida i genomul viral formeaz nucleocapsida. La unele virusuri nucleocapsida este acoperit de o alt structur numit nveliul extern sau peplosul (gr. peplos = manta). Bacteriofagul este virusul specific pentru bacterii: mancator debacterii. Este adaptat parazitarii celulelor bacteriene si numai pe acesteale paraziteaza (au specific de specie). Ex: bacteriofagul T4 (Escherichia coli): - are o structura morfologica complexa, cu cap si coada. - lungimea vitala este egala cu 200 nm, adica 1/5 m. - este de 5 ori mai mic decat cea mai mica bacterie (nu poate fivazut la microscopul optic). Bacteriofagii sunt virusuri adaptate la viaa parazitar n celulele bacteriene i care prin multiplicare produc liza acestora. n anul 1915 Twort, descoper fenomenul de liz transmisibil, dar nu poate explica cu exactitate cauza acesteia. D'Herelle (1917) demonstreaz natura particular a fagului i l consider, ca virus, determinndu-l bacteriofag (mnctor de bacterii). n anul 1940, ia fiin un grup de cercettori, denumit "grupul fag", condus de Delbrck, sistemul bacterie-bacteriofag fiind folosit ca model experimental pentru cele mai importante studii de genetic molecular. Structura fagilor difer de la un grup la altul, n majoritate, acetia ncadrndu-se n dou tipuri de baz i anume: - tipul icosaedric (poliedric); - tipul filamentos. Structura morfologica a bacteriofagului: a) Capul: contine genomul (informatia genetica), cu un ADN dublucircular, ce este protejat de o CAPSIDA formata din CAPSOMERE;are forma icosaedrica (ca un cristal). b) Coada: este formata din proteine si prezinta tub cilindric de 80-100nm, numit CILINDRU AXIAL, protejat de un manson proteic, cunoscut sub denumirea de teaca cozii. Proteinele, pe langa faptul ca protejeaza aceasta parte a bacteriofagului, au si proprietati contractile (sunt aranjate helicoidal), reducand lungimea la jumatate (40-50 nm); prezinta: un guler in partea proximala a tecii (ce are forma de disc hexagonal), o placa bazala in partea distala a tecii. La capetele placii bazale exista crosete, care sunt unitati proteice cu rol de fixare pe bacterii. Pe langa crosete se afla fibre (filamente proteice) cu diametrul de 2 nm si lungimea de 130 nm, cu

care se prinde pentru o siguranta mai mare; functii: de protectie, de atasare de bacterii, de penetrare a genomului viral al bacteriei. Mecanismul de infectare al bacteriofagului obliga bacteria sa sintetizeze bacteriofagi. Acestia nu contin apa. Bacteriofagii sunt sensibili la agenti fizici (radiatii UV, X), chimici (formol, cloroform) si pot fi supusi operatiei de dezinfectie. Se multiplica, deci sunt vii. Nu au structura celulara. O specie de bacteriofag infecteaza numai o specie de bacterii. Exista tulpini sensibile la diferite tipuri de bacteriofagi si se numesc LIZOTIPI (analiza = lizotipie, se foloseste bacteriofagul). Relatia dintre bacteriofag si bacterie: Exista doua tipuri de cicluri: a)ciclu productiv (litic) b)ciclul reductiv (lizogen) a)In ciclul litic, bacteriofagul se multiplica in celula gazda. Acesta se realizeaza in etape: Adsorbtia bacteriofagului pe suprafata bacteriei: muramidaza,unica enzima a bacteriofagului, lizeaza mureina din peretele bacterian. Astfel, cilindrul axial poate penetra bacteria, teaca cozii secontracta (datorita ATP-ului si ionilor de Ca2+) si AND-ul viral este injectat in interiorul corpului bacterian. Multiplicarea bacteriofagului: dupa patrunderea ADN-ului bacteriofagului, AND-ul bacterian este blocat, primul preluand comanda, multiplicandu-se si formand propriile componente. Maturarea bacteriofagului: componentele aparute in sinteza in celula bacteriei formeaza ansamblul bacteriofagului matur, virulent pentru celula gazda. Eliberarea bacteriofagului: bacteria isi inceteaza metabolismul(moare), elibereaza fagii in mediu, datorita endolinizei. b)In ciclul lizogen, fagul patrunde in bacterie, aceasta se apara, secretand o substanta represiva pentru virulenta bacteriofagului si inhiba multiplicarea. Astfel, AND-ul viral nu se preia. Apare o integrarea unei noi gene in cromozomul bacterian. Bacteria se dezvolta normal, dar transmite descendentilor gena. Fagul este, insa, nevirulent, cunoscut drept FAG TEMPERAT sau FAG LATENT. Prin integrarea materialului genetic al fagului, materialul genetic al bacteriei este modificat, rezultand variabilitatea genetica. Profagul redevine virulent: spontan (in cazul lizei celulei gadza) sau indus. Raporturi intre celulele bacteriei si bacteriofag: Celula bacteriana poate fi: Lizosensibila: are receptori pentru bacteriofagi si permite multiplicarea lui, rezultand lizarea bacteriei. Lizogena: poarta bacteriofagul sub forma de profag in interiorul ei, il transmite descendentilor si sintetizeaza exotoxine. Lizorezistenta: nu are receptori pentru bacteriofagi (nu se pot fixape ea) si rezista atacului bacteriofagului. Bacteriile lizogene pot deveni lizorezistente, pentru a nu mai fi atacate de alti bacterifagi de acelasi fel (omologi). Proprietatile bacteriei lizogene: Rezistenta specifica, cunoscuta drept imunitatea bacteriei. Bacteria lizogena este o bacterie lizorezistenta (ex: variola, tetanus au o rezistenta lunga, spre deosebire de holera, care are o rezistenta scurta). Inductibilitatea: sunt produsi fagi maturi, virulenti: dupa actiunea agentilor inductori (radiatii UV, temperaturi mai mari de 40 C, agenti chimici, antibiotice) sau spontan.

Agentii blocheaza substantele bacteriene represoare, fagul redevenind virulent . Fagul devine defectiv, nu se mai activeaza. Fagul devine recombinant genetic. Datele cele mai numeroase cunoscute n prezent sunt cele referitoare la fagii din seria T, ndeosebi la fagi T-par (T2, T4, T6). Particula viral matur a fagilor T-par cu g.m. 2,2 x 1010 este alctuit din ADN i protein i din punct de vedere anatomic prezint urmtoarele componente: cap, guler, coad, plac bazal i fibrele cozii. Capul fagului, la microscop prezint o form poliedric iar n seciune are o form hexagonal, cu o lungime de 100 nm i o lime de 65 nm. Acesta este constituit din capsomere cu de 4 nm, dar nu este cunoscut nc, numrul i modul de aezare al acestora. n interiorul capului, se gsete genomul, alctuit dintr-o molecul de ADN d.c., liniar, cu lungimea de 50 m, ce cuprinde 200 gene, fiind mpachetat foarte strns. n partea bazal a capului, la locul de prindere al cozii se afl un dop proteic, cu rol de articulare mecanic. ntre acest dop i placa bazal se gsete un tub lung de 120 nm, reprezentat de cilindrul axial al cozii. El are un de 7,5 nm i un canal central cu de 2 nm, prin care trece ADN-ul n momentul introducerii n celula bacterian. Bacteriofagii sunt virusuri care paraziteaz bacteriile i din punct de vedere al ciclului de via pot fi: litici (viruleni) T4 i/sau lizogeni (temperai) . Bacteriofagii au fie genom constituit dintr-o molecul de ADN dublucatenar sau monocatenar linear, fie genom ARN. Din punct de vedere al ciclului de via bacteriofagii pot fi litici i/ sau lizogeni (temperai). Din punct de vedere structural fagii au fost clasificai n trei tipuri: icosaedrici (X174), icosaedrici cu coad (T4) i filamentoi (29, M13). Bacteriofagii pot fi viruleni (litici) (T4) sau temperai (lizogeni) (80, ). Structura bacteriofagului T4 este urmtoarea: cap, coad, plac bazal, fibrele cozii. Bacteriofagii viruleni i "injecteaz" materialul genetic (genomul, cromosomul viral) n citoplasma celulei gazd, care este replicat independent de cromosomul bacterian, are loc transcrierea, se sintetizeaz proteinele virale i componentele structurale ale bacteriofagului, se asambleaz particulele virale i n final celulele bacteriene sunt lizate. Bacteriofagii temperai dup ce-i introduc genomul n celula gazd, acesta se integreaz n cromosomul bacterian devenind profag i se replic odat cu cromosomul celulei gazd, iar genele virale n marea lor majoritate nu se exprim. Integrarea se realizeaz la nivelul unor situsuri specifice (genomul fagului se integreaz ntre operonii gal i bio) sau la ntmplare n diferite regiuni ale cromosomului bacterian. Starea de lizogenie poate fi perpetuat de-a lungul mai multor generaii bacteriene, dar n anumite condiii genomul viral poate fi excizat din cromosomul celulei gazd i eliberat n citoplasm, evolund spre ciclul litic. Acesta este fenomenul induciei fagice (induciei litice). Integrarea genomului fagilor lizogeni n cromosomul bacterian se realizeaz cu ajutorul unei enzime numite integraz codificat de gena int. Excizia profagului care apare n cazul induciei fagice a unei tulpini lizogene este determinat de enzima excizionaza codificat de gena xis. Starea de lizogenie determin unele modificri la nivelul membranei externe a celulelor bacteriene, care duc la alterarea situsurilor de legare, astfel c bacteria este protejat de atacul altor bacteriofagi viruleni nrudii cu fagul temperat.

Inducia litic se datoreaz faptului c proteinele virale represoare, care determin inhibarea exprimrii genelor virale sunt inactivate. Inducerea ciclului litic depinde de cantitatea relativ a proteinelor represoare Cro (care inhib sinteza represorului cI i permite transcrierea genelor virale implicate n multiplicarea i morfogeneza fagului, determinnd excizia profagului din cromosomul bacterian i deci evoluia litic) i cI (care inhib exprimarea majoritii genelor virale, determinnd starea de lizogenie). Inducia fagic poate fi declanat spontan sau poate fi stimulat de factori fizici (radiaii ionizante (X), neionizante (UV), temperatur) sau chimici (antibiotice - mitomicina C n cazul tulpinilor de Streptomyces productoare de streptomicin). Bacteriofagul T4 poate nmagazina cteva mii de instruciuni cu ajutorul lanului de ADN. Se cunoate deja faptul c, n general, parazii sunt mai numeroi dect gazdele lor; o specie-gazd poate fi parazitat de mai multe specii de parazii. Pornind de aici oamenii de tiin s-au gndit c ar putea exista o specie care s paraziteze i bacteria Pelagibacter ubique, iar aceast specie de parazit - nu bacteria - ar fi cea mai rspndit form de via de pe Pmnt.

Bibliografie:
Ordeanu V. Curs de microbiologie generala si farmaceutica UMF,FF an II, 2009 (nepublicat). Zala C. R., 2008 Atlas fitopatologic. Ed. Didactica si Pedagogica, Bucuresti.