Mtodos generales de extraccin y purificacin de principios activos de drogas vegetales

Pasos que se siguen para una buena investigacin: 1. 2. 3. 4. Muestra bibliogrfica del material a estudiar. Recoleccin del material vegetal. Identificacin botnica. Seleccin de la parte vegetal a extraer en funcin de un anlisis qumico preliminar (marcha qumica para identificar distintas familias de compuestos qumicos) 5. Desecado del material vegetal. 6. Fragmentacin, molienda y/o almacenamiento. 7. Aislamiento de compuestos qumicos a partir del material vegetal: preparacin de extractos crudos. 8. Estudio farmacolgico preliminar de extractos crudos. 9. Separacin y purificacin de PAs: fraccionamiento qumico de extractos crudos. 10. Identificacin de PAs: dilucidacin estructural de sustancias qumicas aisladas. Mtodos de extraccin: Para dilucidar la estructura qumica de un PA y establecer los efectos biolgicos que posee se debe aislar el vegetal para luego purificarlo. Mtodos de extraccin de los slidos: Consiste en poner en contacto una droga cruda con un disolvente por lo general se obtiene una mezcla de sustancias disueltas en el disolvente utilizado llamado extracto crudo. Al finalizar el proceso de extraccin se obtiene un material vegetal agotado, llamado marco o residuo por un lado y por otro, el extracto. Esquema de clasificacin de mtodos de extraccin de los slidos:

Maceracin Frio Lixiviacin Discontinuos Digestin Reflujo . Caliente Infusin Decoccin

En frio Continuos En caliente .

Aparato de Soxhlet

destilacin por arrastre con vapor de agua

Continuo: Cuando funciona en forma interrumpida con el mismo volumen de disolvente. Discontinuo: Necesitan ser repetidos con un nuevo volumen de disolvente porque este se satura y es necesario extraer todo el PA. Mtodos de extraccin discontinuos en frio: El disolvente se extrae a temperatura ambiente. Mtodos de extraccin discontinuos en caliente: El disolvente extrae a una temperatura por encima del ambiente.

A) Maceracin: se coloca la droga fragmentada en un frasco con tapa y se contacta con el solvente adecuado. La extraccin se realiza a temperatura ambiente de 2 a 14 das con agitacin espordica. Luego el extracto obtenido se filtra B) Lixiviacin o percloracin: la droga debe estar desecada y molida, colocando en un tubo llamada perclorado o lixiviador haciendo pasar el disolvente por la droga recuperando el menstruo con los PA disuelto en extremo inferior y perclorar dicho de un lquido moverse a travs de un medio poroso C) Digestin: es igual a la maceracin con la diferencia que este se lo realiza a temperaturas de 35 y 65 C durante el tiempo necesario para extraer los componentes solubles en el solvente D) Infusin: se obtiene por accin del agregado de agua a temperatura de ebullicin sobre el material vegetal fragmentado durante 20 minutos. La droga no est sujeta a ebullicin con el agua. Es una tcnica de extraccin a temperatura descendente. E) Decoccin: la droga fragmentada es sometida a ebullicin con el agua el tiempo suficiente para extraer el PA, exponindose directo al calor. F) Reflujo: consiste en colocar la droga cruda fragmentada en un baln de calentamiento con un volumen de disolvente hasta cubrir la droga. Se adosa un refrigerante, ya que la temperatura de extraccin e la temperatura de ebullicin del solvente. Se utiliza cuando el solvente es voltil y/o toxico. G) Aparato de Soxhlet: en la cmara de soxhlet se coloca la droga cruda fragmentada dentro de un cartucho de papel. El refrigerante se conecta al agua corriente. El disolvente se calienta y sus vapores suben por el tubo lateral ms grueso y al encontrar la superficie fra se condensa. El disolvente se acumula en la cmara, macerando la muestra y extrayendo el principio activo. Cuando el disolvente con el principio activo disuelto alcanza la altura del tubo sifn produce el sifonamiento y cae al baln el disolvente se evapora continuamente es un mtodo continuo y es en frio porque el disolvente cae frio sobre la muestra.

H) Destilacin por arrastre con vapor de agua: compuesto por un Erlenmeyer, en un cartucho donde se coloca la droga fresca fragmentada. Consiste en hacer llegar una corriente de gaseosa de vapores de agua a un recipiente contiene el marial vegetal de esta manera los componentes voltiles de la droga son arrastrados por los vapores del agua, los cuales al llegar al dedo frio se condensan y caen por el tubo graduado donde se acumulan y separan del agua porque son insolubles en ella, formando dos fases que se separan por decantacin al abrir el robinete. I) Particin: se define como la solubilidad diferencial de un soluto entre dos lquidos inmiscibles entre si transferir un soluto desde un solvente inicial hacia un segundo solvente con la caracterstica de disolver solo el soluto que nos interesa extraer en mayor proporcin. El coeficiente de particin se define como es cociente entre la concentracin de un soluto A en un solvente C y su concentracin en otro solvente B. la particin se puede realizar con un apoyo de decantacin con un extracto lquido. Disolver la muestra en un primer solvente, generalmente agua. Esta solucin se trasvasa a una ampolla de decantacin, a la cual se agrega un segundo solvente inmiscible con el primero disuelve en mayor proporcin al soluto que se desea extraer. Se agita y se espera hasta alcanzar el equilibrio. Existe dos tipos de extractores lquidos segn la densidad del solvente utilizado respecto del agua. Solvente orgnico ms denso que el agua se coloca en el Erlenmeyer en el extractor se adiciona en primer lugar el solvente y luego el extracto acuoso el solvente se calienta y sus vapores se calientan y sus vapores ascienden hasta encontrar el refrigerante se condensan y caen sobre el extracto acuoso que est en la cmara del extractor solvente es ms denso que

el agua desciende por el extracto acuoso, disolviendo el PA. Cuando el solvente PA disuelto alcanza el nivel suficiente en el tubo lateral del extracto cae al Erlenmeyer. El solvente se evapora el extracto acuoso se coloca dentro de la cmara del extracto contiene una bombilla de vidrio el solvente orgnico menos denso se coloca en el Erlenmeyer. El solvente se calienta y sus vapores ascienden, se condensan en el refrigerante y caen dentro de la bombilla, se acumula dentro de la misma forma una columna de solvente que ejerce presin el extracto acuoso aumenta la altura del solvente en la bombilla. Aumenta la presin al punto que logra desalojar el extracto acuoso .cuando la presin de esta columna de solvente es mayor a la presin del extracto acuoso el solvente sale por los orificios el solvente asciende por el extracto acuoso disolviendo PA y se acumula por encima del extracto acuoso. Cuando el solvente con el PA disuelto alcanza el nivel suficiente al Erlenmeyer .el solvente se evapora continuamente en forma pura por lo que es un mtodo continuo.

Aislamiento de familia de compuestos qumicos a partir del material vegetal: Preparacin de extractos crudos: Esquema tradicional de aislamiento Material vegetal hexano

Ext.hexanico Marco A Diclorometano(DCM)

grasas, ceras, lpido, pigmentos liposolubles

Ext.DCM Marco B Acetato de etilo

fenoles metoxilados terpenoides

Ext.AcOEt

glicosidos o heterosidos

Marco C Etanol (EtOH)

Ext.EtOH Marco D Agua

saponinas,fenoles,glicosidos

Residuo

Ext. Acuoso

Polisacridos, polifenoles, azucares