OBTENCION, PREPARACION Y CONSEVACION DE SANGRE

REACCIONES A LA DONACION DE SANGRE

Reacciones adversas a la donacin ocurren en 4 % de los donantes pero no son serias; se da con ms frecuencia en gente joven, solteros, que por primera vez donan o que lo hacen infrecuentemente. Tienen antes de la donacin taquicardia y disminucin de la presin diastlica, las ms comunes son debilidad, piel fra, diaforesis; otras, pero todava moderadas son desvanecimiento, hipertensin, bradicardia. La ms severas: prdida de la conciencia, convulsiones, relajacin de esfnteres considerados como reaccin vagal ms que hipovolemia. Otras reacciones ms raras incluyen nuseas y vmitos; hiperventilacin, hematomas en el sitio de la puntura, serias dificultades cardacas o dolor por pinchazo del nervio braquial. Los donantes deben ser avisados de beber fluidos extra para reemplazar la sangre perdida y evitar hacer ejercicios extremos por el resto del da.

RECOLECCIN DE SANGRE TOTAL

* Material e instrumentos * Equipos de donacin: bolsas colectoras * Preparacin del sitio de la venopuntura * Flebotoma La coleccin de una bolsa de 450 ml. debe realizarse en 7 minutos ( < 10 minutos ), y se mezclan con 63 70 ml. de CPDA, que es el anticoagulante comnmente usado y que ha superado al ACD y CPD y tiene una duracin de 35 das y se guardan en refrigeracin a 4oC .
Los G.R. pueden ser almacenados en un plasma residual o en soluciones aditivas tales como AS-1, una solucin que contiene glucosa, adenina y manitol. Tambin pueden ser congelados despus de la adicin de agentes crioprotectores, tales como el glicerol, y pueden ser almacenados por aos. Una variedad de sustitutos sanguneos basados ya sea en la hemoglobina o perflurocarbonos han sido sealados pero no se ha encontrado ser clnicamente tiles.

BOLSAS PARA SANGRE

COMPONENTES
1.

Unidad principal con solucin anticoagulante y bolsas para transfusin Tubuladura de extraccin con aguja Unidades de transferencia para plasma

2. 3.

4.
5.

Unidad especial para plaquetas

Tubuladuras de conexin

BOLSAS PARA SANGRE

CONDICIONES

Hermticas
Atxicas Fcil almacenamiento y transporte

Esterilizables

Translcidas

BOLSAS PARA SANGRE

MATERIALES PLASTICOS PARA ELABORACION

Pelcula para la bolsa

Compuesto de PVC atxico plastificado con Ftalatos o Mellitatos

Tubuladura

COMPUESTO DE PVC

Resina
Policloruro de vinilo ( PVC )

Plastificantes
Di etil hexil Ftalato ( DEHP ) Tri octil tri Mellitato ( TOTM )

Estabilizantes
Estearatos de Calcio y Zinc Aceite de soja epoxidado

Lubricantes
Etilendiaminas

CONTROL DE CALIDAD
Las Bolsas para sangre deben cumplir con:

Condiciones Generales
Condiciones especficas Ensayos fsicos Ensayos qumicos Ensayos biolgicos

CONDICIONES GENERALES
1.

Pelcula plstica flexible, transparente e incolora No liberar componentes definidos de la pelcula plstica en cantidades superiores a las permitidas Pelcula plstica impermeable a los microoorganismos

2.

3.

CONDICIONES GENERALES
4.

Solucin anticoagulante incolora, libre de partculas visibles, estril y libre de pirgenos Ser esterilizada terminalmente en autoclaves con vapor a presin superior a la normal Poseer un nmero de lote legible e indeleble que permita la trazabilidad del proceso de produccin y una fecha de vencimiento para el uso

5.

6.

CONDICIONES GENERALES
7.

Formato adecuado para permitir la recoleccin y procesamiento de la sangre

Mnimo contenido de aire Aguja de extraccin firmemente unida al tubo de extraccin , protegida con un protector sellado a prueba de violacin que mantenga la esterilidad de la bolsa y se retire con facilidad

8. 9.

CONDICIONES GENERALES
10.

Una o mas bocas de salida provistas de una membrana perforable que permita una conexin hermtica con el equipo de administracin y con una proteccin que provea un cierre inviolable que mantenga la esterilidad
Tubos de transferencia sellados a las bolsas satlites para permitir la separacin de hemocomponentes en circuito cerrado Asa de suspensin adecuada

11.

12.

CONDICIONES GENERALES
13.

Tubuladura de extraccin unida firmemente a la aguja y a la bolsa y llena con solucin anticoagulante Impresin o etiqueta con descripcin de solucin, fabricante,instrucciones para el uso y espacio para identificar dador y caractersticas de la sangre
Envase externo individual que evite la prdida de agua por evaporacin y mantenga la esterilidad de la bolsa

14.

15.

CONDICIONES ESPECIFICAS

Las bolsas para sangre deben cumplir con Ensayos fsicos Ensayos qumicos Ensayos biolgicos Indicados en : Farmacopea Europea Farmacopea de EE-UU Norma ISO 3826 . Norma IRAM 9028/1-2

ENSAYOS FISICOS
1 - Dimensiones de las bolsas

Tamao aproximado +/- 5% Ancho: 120 mm. Altura: 185 mm Espesor de la pelcula: 300 - 400 micrones Tubuladura +/- 5% Dimetro interno 3,0 mm . Pared 0,5 mm

2 - Permeabilidad al vapor de agua almacenadas

No mayor de 5% de agua de la solucin anticoagulante en dos aos a 23+/-2C y 50% de Humedad relativa

ENSAYOS FISICOS
3 - Transparencia y coloracin

Coloracin natural sin agregado de pigmentos Permitir observacin de hemlisis, lechosidad por grasas, separacin de componentes

4 - Unin a tubos de extraccin y transferencia

Resistencia a una traccin de 2 Kg por 15 segundos Resistencia al nudo: traccin de 4 kg

ENSAYOS FISICOS
5 - Aguja de puncin venosa
3.1 - Medidas
Dimetro: 1,50 a 1,65 mm
Pared: 0,1 mm

3.2 Resistencia unin con el cono

No se debe separar bajo una traccin de 2 kg durante 15 segundos

ENSAYOS FISICOS

6 - Resistencia del asa de suspensin

Resistir traccin de 2 kg durante 60 minutos Llenado con una solucin de viscosidad semejante a la sangre (sacarosa 33,5%) a 37C con una presin de 0,1 kg/cm2 en 8 minutos

7 - Velocidad de llenado

8 - Resistencia a la esterilizacin

Someter a 121C durante 20 minutos, no se debe producir deformacin ni contraccin mayor al 5%

ENSAYOS FISICOS
9 - Estabilidad trmica

24 hs a 80C y luego 20 minutos a 50C. No se deben producir roturas y deben aprobar las pruebas de centrifugacin, resistencia a la presin y velocidad de llenado

10 - Resistencia a la presin

Llenadas con agua, deben soportar una compresin de 0.1 kg/cm2 durante 10 minutos sin prdidas

ENSAYOS FISICOS
11 - Resistencia a la centrifugacin

Llenadas con agua sometidas a 5000 G durante 10 - 30 minutos. No se deben observar prdidas

12 - Permeabilidad al vapor de agua

Llenadas con solucin de Cloruro de sodio al 0,9 %, mantener a 5C +/- 1 C en atmsfera de 45% - 55% de humedad por 42 das. No perdern mas de 1% del peso

ENSAYOS FISICOS
11 - Resistencia a la centrifugacin

Llenadas con agua sometidas a 5000 G durante 10 - 30 minutos. No se deben observar prdidas

12 - Permeabilidad al vapor de agua

Llenadas con solucin de Cloruro de sodio al 0,9 %, mantener a 5C +/- 1 C en atmsfera de 45% - 55% de humedad por 42 das. No perdern mas de 1% del peso

EXTRACCIONES
EXTRACCION DE SANGRE MATERIALES Recipientes Identificacin Preparacin del sitio de Venipuntura Flebotoma y extraccin de muestra.

CUIDADO POST - EXTRA

Aplicar presin firme con gasa estril Dar instrucciones donante Ingerir lquidos Agradecer al donador Anotar las reacciones

Extracciones
EXTRACCION DE SANGRE
Atencin

Reacciones Adversas Sncope (desvanecimiento o Snd. Vasovagal) Hipotensin prolongada

REACCIONES ADVERS
Sncope Hiperventilacin Desmayo Nuseas y vmitos Espasmos musculares Hematoma Convulsiones Dificultades cardacas serias Registrar

PREPARACION DE COMPONENTES
SISTEMAS

DE

BOLSAS PLASTICAS PARA LA RECOLECCION CENTRIFUGAS DE ALTA VELOCIDAD

DONACION

BOLSAS COLECTORAS
ACD

21DIAS CPD 28 DIAS CPD-A 35 DIAS CPD-A SAGM 42 DIAS

Todas las soluciones usadas bajo esta denominacion -con la excepcin de la heparina y el citrato de sodio-, ejercen el doble papel de prevenir la coagulacin y de preservar y mantener la funcin celular Este tipo de soluciones se caracterizan por poseer grandes cantidades de glucosa como material energtico y citrato de sodio que previene la coagulacin de la sangre

SOLUCIONES ANTICOAGULANTES PRESERVADORAS

ACD (Acido-citrato-dextrosa)

CPD (Citrato-fosfato-dextrosa)

CPDA-1 (Citrato-fosfato-dextrosaadenina)

1961 se reemplaz ACD por CPD (citrato-fosfato dextrosa)

aument el tiempo de almacenamiento por 49 das con una sobrevida media eritrocitaria de 73,6% en cambio, los glbulos rojos concentrados duran 42 das pero su sobrevida es de 77,9 8,1%.

Mantiene el nivel de 2,3 DPG en el eritrocito Libera 02 por OXIHB.

80 aparecen soluciones con aditivos (solucin salina, adenina y dextrosa a altas concentraciones, tambin puede contener manitol que acta como agente estabilizador de la membrana eritrocitaria).

70 se adicion ADENINA (rejuvenece los eritrocitos y aumenta Prod. ATP) A LOS ANTICOAGULANTES

Aument el tiempo mximo de almacenamiento de 21 das a 35 das de 2 a 6 C.

PRESERVACION DE LA SANGRE
Durante su almacenamiento los G.R. sufren cambios que producen prdida de su viabilidad, disminucin de su capacidad de transporte de oxgeno. Cuando los G.R. son reinfundidos en la circulacin, algunos mueren dentro de pocas horas, pero el resto parece retornar a un estado enteramente normal.
Los G.R. almacenados desarrollan mltiples y complejos cambios en la estructura de su membrana. Despus de su reinfusin necesitan funcionar apropiadamente suministrando el oxgeno a los tejidos. La prdida del 2,3 DPG durante el almacenamiento resulta en un incremento de la afinidad por el oxgeno que puede comprometer la habilidad para suministrar el oxgeno a los tejidos. Despus de la reinfusin, los niveles del 2,3 DPG retornan a la mitad de lo normal dentro de las 4 horas, y a lo normal a las 24 horas.

PRESERVACION DE LA SANGRE

Idealmente las soluciones preservantes de los G.R. deben asegurar una viabilidad lo ms largamente posible y un ptimo suministro de oxgeno. Desafortunadamente, con las soluciones preservantes comnmente usadas condicionan un ptimo almacenamiento para dos de los componentes crticos, ya sea el 2,3 DPG y ATP pero usualmente producen efectos adversos sobre los otros. La concentracin del ATP en los G.R. cae gradualmente durante el almacenamiento; cuando su concentracin cae a 0.4 mM o menos la capacidad del ATP para fosforilar la glucosa est daada y pierde su viabilidad.

PRESERVACION DE LA SANGRE

El nivel del 2,3 DPG cambia rpidamente en la sangre con ACD perdindose hasta un 40 % a la primera semana del almacenamiento resultando en un significativo incremento de la afinidad por el oxgeno; despus de 2 semanas casi todo el 2,3 DPG ha desaparecido. Cuando se almacena con CPD la prdida ocurre ms lentamente a causa de su mayor pH: durante la primera semana permanece casi normal y luego cae rpidamente. La adicin de adenina no previene la prdida de 2,3 DPG y puede hasta deplecionarlo ligeramente. En cuanto al ATP previene su prdida a causa de que puede servir como sustrato para la sntesis de nucletidos de adenina. La prdida de deformabilidad correlaciona en alguna extensin con la prdida de ATP. La sangre coleccionada en ACD o CPD tiene un 70 % de sobrevida de sus G.R a las 24 h. de transfundidas.

CAMBIOS BIOQUIMICOS EN LA SANGRE CONSERVADA EN CPD y CPDA-1

CPD
0 das 21 das Periodo de conservacin (das) % de sobrevida, 24 horas postransfusion pH del plasma

CPDA-1
Sangre completa Concentrad o globular

--100 7.2

21
80 6.8

35
79 ---

35
71 ---

ATP (% del valor inicial)

2,3 DPG (% del valor inicial) K en plasma (mEq/L) Hb en plasma (mg/dl)

100
100 3.9 1.7

86
44 21 19.1

57
4 27.3 46.0

45
3 78.5 658.0

 Expiracion

de globulos rojos: Por sistema cerrado una expiracion de 35 dias(CPDA) 42 dias (ADSOL) Por sistema abierto una expiracion de 24 horas

SANGRE FRESCA
El pedido de sangre fresca usualmente est justificado por el conocimiento que hay una prdida relativamente rpida de plaquetas, leucocitos y algunos factores de la coagulacin, as como un incremento progresivo de productos indeseables como potasio, amonio, iones hidrgeno. Sangre almacenada a 4oC durante 48 horas usando ACD, CPD o derivados conteniendo adenina est depletado de plaquetas viables; el Factor V permanece en un niveles adecuados ( > 80 % ) al menos por cinco das; Factor VIII, permanece a un 80 % de su valor original por 1 a 2 das; y, la actividad del Factor XI cae a un 20 % de su valor original dentro de las primeras semanas de su almacenamiento. Todos los otros factores de la coagulacin parecen mantenerse estables.

SANGRE FRESCA
La trombocitopenia y la disminucin de los niveles de los factores lbiles de la coagulacin ocurre cuando ms del volumen de sangre del paciente ( 12 a 14 unidades ) es reemplazada por sangre de banco dentro del perodo de 24 horas. En tales casos, clulas rojas empaquetadas, plasma fresco congelado, concentrados de plaquetas es superior a la sangre total fresca .

Sangre total < de 5 a 7 das puede estar indicada cuando cambios en la sangre almacenada, tales como aumento del potasio y amonio y disminucin del Ph deben evitarse como en pacientes con enfermedad renal avanzada o enfermedades hepticas o recin nacidos en quienes se realiza exsanguneo transfusin.

SANGRE FRESCA En pacientes seriamente enfermos, transfusin masiva de sangre de 2 a 3 semanas de almacenamiento, la disminucin del 2,3 DPG puede comprometer la oxigenacin tisular, aunque el 2,3 DPG se regenera dentro del 1er da es prudente administrar una proporcin significativa de sangre en CPD de menos de 5 das o en ACD menor de 2 das.

Es tambin apropiado proporcionar al paciente con anemia refractaria, G.R. de memos de 10 das para evitar la infusin de clulas no viables que agreguen al paciente innecesariamente una carga de hierro.

COLECCIN DE SANGRE PARA AFERESIS

Los componentes sanguneos pueden ser obtenidos por afresis en vez de recolectarse de una unidad de sangre total. En afresis la sangre total anticoagulada del donante pasa atravs de un instrumento en el que separa los G.R., leucocitos, plaquetas, clulas madres de la sangre perifrica, plasma; todos stos usan centrifugacin para separar los componentes sanguneos. Algunos procedimientos abarcan dos venipunturas con flujo continuo de sangre del donante atravs del separador sanguneos; otros, pueden acompaarse de una sola venipuntura con detencin intermitente de la sangre y retorno.

Afresis puede ser usada para obtener 2 unidades de G.R. o varias coombinaciones de componentes

EQUIPO PARA AFERESIS

PLAQUETAFERESIS Se requieren 90 minutos durante el cual aproximadamente 4,000 a 5,000 ml. de sangre del donante es procesada a travs del separador de clulas sanguneas. El proceso resulta en un concentrado de plaquetas de un volumen de 200 ml. y contienen aproximadamente 4.0 x 1011 y menos de 0.5 ml. de G.R. y 5.0 x 106 leucocitos y por lo tanto puede ser considerado como depletado de leucocitos. Despus de la plaquetafresis la cantidad de plaquetas del donante declina aproximadamente en un 30 % y no retorna a niveles previos aproximadamente en 4 das. Cuando se obtienen por plaquetafresis manual de una bolsa de sangre de 450 ml. Se obtienen menos de 5.5 x 1010 en un volumen de 50 ml. de plasma

COLECCIN DE G.R. POR AFERESIS

La carencia crnica de G.R. del grupo O en los bancos de sangre estimula el inters por el uso de afresis para coleccionar 2 unidades de G.R. de algunos donantes especialmente del grupo O . El procedimiento es similar a otras afresis solo que los G.R. son retenidos ms que retornar al donante. Los G.R. tienen usualmente un hematocrito elevado cuando son retirados del equipo, pero se incorporan en solucin aditiva y pueden ser almacenados usualmente por 42 das. Los donanates solo pueden volver a donar cada 4 meses.

PLASMAFERESIS Plasmafresis usando un set de mltiples bolsas no se usa ms.

Plasmafresis puede ser realizada en 30 minutos y se obtiene 750 ml. de plasma, contiene pocos G.R. y puede repetirse hasta dos veces por semana por lo que un donanate tericamente puede proporcionar 50 litros al ao.
La industria del plasma est separada del sistema del Banco de Sangre. El plasma puede ser sujeto a un fraccionamiento que produce varios productos mdicos de valor referidos como derivados del plasma: albmina, concentrados de factores de coagulacin, globulinas sricas inmunes y otras 19 ms productos. Ver Tabla

SELECCIN Y REACCION DEL DONANTE POR AFERESIS

La seleccin de donantes para afresis usa los mismos criterios que para la donacin de sangre total. Solo algunos requerimientos adicionales son necesarios: es importante un buen acceso venoso. Los donantes pueden ser sometidos a plaquetafresis cada 48 horas.
Los donantes pueden expresar las mismas reacciones que los donanates de sangre total. Adicionalmente experimentan una alta incidencia de parestesias, probablemente a causa de la infusin del citrato que est en el separador. Esto se corrige lentificando el flujo del instrumento el cual lentifica la proporcin del citrato infundido.