Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Mure LP3
EXAMENUL MICROSCOPIC
I. Preparatul nativ (umed, ntre lam i lamel) Permite studierea: mobilitii germenilor morfologiei bacteriene Tehnica de lucru: se realizeaz o suspensie de germeni vii ntre lam i lamel Examinarea se face cu: microscopul optic, cu obiective uscate, condensator cobort. microscopul cu fond ntunecat microscop cu contrast de faz
II. Coloraia negativ (metoda Burri) Permite studierea: germenilor greu colorabili (Leptospira, Treponema) germenilor cu capsul (Klebsiella, S. pneumoniae) Colorani: suspensii coloidale (colargol, tu de China, tu de India) Tehnica de lucru: germenii se suspensioneaz intr-o pictur de colorant, care se ntinde cu o alt lam pe toat lama uscare la temperatura camerei examinare: cu microscopul optic, cu imersie. Se coloreaz fondul preparatului, bacteriile rmn necolorate III. Preparate colorate Permit studierea: morfologiei germenilor dispoziiei germenilor afinitii tinctoriale (colorabilitatea) Baza preparatelor colorate const n efectuarea unui frotiu. Etapele realizrii frotiurilor: etalarea ntinderea pp. pe lam (s nu ating marginile) uscarea la temperatura camerei fixarea (la flacr sau chimic) se denatureaz proteinele bacteriene -> moartea microbilor; asigur adeziunea preparatului de lam.
-1-
Tipuri de preparate colorate: 1. coloraii simple se folosete un singur colorant (1-2 min) nlturarea colorantului n exces splare, uscare examinare la microscop cu obiectiv de imersie 2. coloraii compuse a. Coloraia Gram Difereniaz bacteriile Gram pozitive (colorate n albastru-violet) de cele negative (colorate n rou) Etape colorare cu violet de geniana 2 min. Gram + albastru Gram albastru
albastru
decolorate
albastru
rou
splare cu ap de robinet uscare examinare la microscop cu obiectiv de imersie Exemple de bacterii Gram pozitive i Gram negative: Gram + coci Staphylococcus spp, Streptococcus spp. cocobacili S. pneumoniae, Enterococcus spp. bacili Clostridium spp., Bacillus spp., Corynebacterium spp.
Gram Neisseria spp. Klebsiella spp., Haemophilus spp., Acinetobacter spp. E. coli, Salmonella spp., Shigella spp., Proteus spp. , Pseudomonas spp.
-2-
b. coloraia Ziehl-Neelsen Se utilizeaz pentru evidenierea germenilor acido-alcoolo-rezisteni (BAAR); ex: Mycobacterium tuberculosis pe fondul albastru al frotiului se observ bacili acido-alcoolo-rezisteni Etape colorare cu fucsina fenicat (carbol fucsina) 2 min
3. Coloraii speciale a. Coloraia Neisser Se evideniaz corpusculii metacromatici Babe-Ernst la Corynebacterium spp. Se observ bacili cu corp bacterian colorat n galben, cu corpusculi colorai albastru i cu dispoziie caracteristic Etape colorare cu amestec de colorani preparat extemporaneu timp de 8 - 10 minute 2 pri colorant Neisser A (albastru de metilen) l parte colorant Neisser B (cristal violet) splare cu ap distilat colorare cu crizoidin 5 -10 secunde
-3-