Sunteți pe pagina 1din 6

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.

Mure LP13

Flora normal a organismului


Flora normal: totalitatea germenilor care se gsesc n mod permanent (rezideni) sau tranzitoriu pe suprafaa corpului sau n diferite caviti, fr a cauza mbolnviri la persoane imunocompetente. Flora tegumentelor i a prului variaz n funcie de vrst o nou-nscut: flor tranzient alctuit din flora vaginal a mamei o sugar: influenat de flora mamei, flora intestinal a copilului o copii: determinat de flora colectivitii din care fac parte o aduli: determinat de flora ambiental a cminului i a locului de munc tegumentele sunt populate de: bacili aerobi din aer, Micrococcus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus capitis, corinebacterii; ncheieturile sunt colonizate de germenii anaerobi: Propionibacterium spp, Peptostreptococcus spp., tegumentele din regiunea anal, perineal: enterobacterii, S. saprophyticus, clostridii La persoanele care lucreaz n brutrii, cofetrii: Candida Dintre patogeni pot fi ntlnii tranzitoriu: Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes. S. aureus poate fi rezident la persoanele care lucreaz n mediu spitalicesc. Rolul florei normale: mpiedicarea colonizrii cu germeni patogeni. Flora normal a ochilor Conjunctiva poate fi populat de: Micrococcus, corinebacterii, Aspergillus, Candida, Penicillium, Rhodotorula. Flora tranzient: Haemophilus spp., Neisseria spp., streptococi alfa-hemolitici. Factori de aprare local: lacrima are efect de splare, lizozimul are activitate antibacterian Cei mai frecveni patogeni (n cazul unor leziuni pot cauza infecii): S. aureus, S. epidermidis, S. haemolyticus, Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Chlamydia trachomatis, Moraxella spp., Klebsiella spp, Enterobacter spp. Ulceraii datorate lentilelor de contact: Bacillus cereus, Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter, Acanthamoeba spp. Flora normal a cilor respiratorii urechea medie, sinusurile paranazale, bronhiolele, plmnii, pleura sunt sterile Flora rezident a cilor respiratorii superioare: streptococi alfa hemolitici, neisserii saprofite., corinebacterii, Fusobacterii, spirochete, .a. Pe mucoase intacte pot fi prezente tranzient: S. aureus, S. pyogenes, N. meningitidis; Haemophilus influenzae . a. Nu se produce infecie: o dac nr. de germeni este redus, o dac germenii au un defect de patogenitate (lipsa capsulei), o dac nu exist locus minoris resistentiae sau o dac exist imunitate fa de serotipul respectiv. Starea de purttor al unui germen patogen: prezena permanent sau tranzitorie a unui patogen obligat (S. aureus, S. pyogenes, S. pneumoniae, N. meningitidis) n flora normal a cilor respiratorii superioare, fr a produce mbolnvire. !focar de epidemii n colectiviti, spitale
-1-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP13

Cavitatea bucal variaz n funcie de vrst biotopuri diferite: palatul, suprafaa limbii, buzele, suprafaa dinilor, fisuri ale dinilor, gingiile, saliva Flora rezident: streptococii din grupul viridans (bacteriile dominante S. salivarius 98%, S. mutans), neisserii saprofite, anaerobii Veillonella, Actinomyces, Fusobacterium, Bacteroides spp., Prevotella spp., Porphyromonas spp.; lactobacili, spirochete Tranzitoriu: stafilococi coagulazo-negativi Esofagul, stomacul n esofag bacterii provenite din alimente i saliv n stomac nu exist flor rezident Rar se izoleaz: lactobacili, alte bacterii Intestinele Intestinul subire: flor tranzient, nr. mic de germeni (E. faecalis, lactobacili) Flora colonului: o 95-99% germeni anaerobi: Bifidobacterium bifidum , Bacteroides fragilis (1011/g materii fecale) o germeni facultativ aerobi: E. coli (109/g materii fecale), Enterococcus faecalis (103/g materii fecale). o germeni tranzieni: Klebsiella, Proteus, Enterobacter, o la sugari alimentai o natural: predomin Lactobacillus bifidus o artificial: apar germeni facultativ aerobi i Bacteroides fragilis. Cile urinare sunt sterile orificiul uretral extern poate fi colonizat cu germeni provenii de pe tegumente, din materiile fecale, din mediu, din cavitatea bucal la ambele sexe legat de activitatea sexual, la femei din flora vaginal, vulvar: S. epidermidis, E. faecalis, E. coli, Proteus spp., streptococi alfa-hemolitici. germeni rezideni (n nr. redus): Bacteroides, Fusobacterium, corinebacterii, neisserii nepatogene, enterobacterii, enterococi, mycoplasme, streptococi din grupul viridans, Mycobacterium smegmatis. tranzitoriu: clostridii, hemofili, coci anaerobi Flora vaginal variaz n funcie de statusul hormonal nainte de apariia ciclurilor menstruale este paucibacilar, datorit mecanismelor de aprare nespecifice - n cazul unei igiene deficitare pot predomina enterobacteriile la femei fr activitate sexual: o predomin lactobacilii (flora Dderlein); + mycoplasme nepatogene, stafilococi, enterococi, streptococi alfa hemolitici, Candida, coci Gram pozitivi anaerobi, Bacteroides spp. o flora tranzient: clostridii, enterobacterii, stafilococii aurii i streptococi piogeni
-2-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP13

femei cu activitate sexual: extrem de variabil, depinde de igiena personal, obiceiuri sexuale, flora partenerilor, intensitatea vieii sexuale, metode anticoncepionale, cantitatea de glicogen, tratamente cu antibiotice, flora toaletei de acas i de la locul de munc. flora vaginal: unic - perturbarea echilibrului florei vaginale poate duce la infecii endogene, pe cnd flora echilibrat poate masca timp ndelungat o infecie exogen.

Exsudatul faringian
se recolteaz pentru: diagnosticul faringitelor i anginelor streptococice confirmarea diagnosticului de difterie diagnosticul altor angine bacteriene i fungice depistarea unui portaj (Streptococ grup A, Corynebacterium diphtheriae) Transportul i examinarea se face n maximum trei ore de la recoltare, altfel trebuie folosit un mediu de transport Examen direct microscopic se efectueaz doar din false membrane (difterie, angin fusospirilar) se efectueaz 3 frotiuri colorate Gram, Neisser, Giemsa nsmnare se descarc tamponul pe mediu i se epuizeaz cu ansa pe geloz snge - pentru streptococ n suspiciunea de difterie, se folosesc mediile: OCST, Loffler, Tinsdale, geloza snge Incubarea se face 18-24 de ore la 37oC, n atmosfer de CO2 (24-48 de ore) Identificare pe geloz snge se va urmri prezena coloniilor mici, de tip S, de 0,5-1 mm, transparente sau opace, cu zon larg de hemoliz beta, care ridic suspiciunea de streptococ beta hemolitic i se continu identificarea pentru identificarea genului, prin frotiu identificarea grupei, prin testarea sensibilitii la bacitracin (pentru grupul A) i latexaglutinare (pentru ncadrarea n celelalte grupe) se efectueaz antibiogram pentru streptococi beta hemolitici n caz de alergie a pacientului fa de penicilin prezena de colonii mari, de tip S, de 2-3 mm, pigmentate, beta hemolitice (Staphylococcus aureus), a coloniilor mari, de tip M (Klebsiella pneumoniae), a coloniilor mici, de tip S, albe-cenuii, cu sau fr hemoliz (enterobacterii), a fenomenului de crare (Proteus), sau a coloniilor cu luciu metalic, beta hemolitice cu miros aromat (Pseudomonas) semnific o disbacterioz orofaringian i nu are relevan clinic.

-3-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP13

Secreia nazal
Se recolteaz pentru determinarea portajului de S. aureus

Recoltarea Cu tampon steril umectat cu ser fiziologic steril Se terg pe rnd ambele caviti nazale anterioare, prin micri de rotaie nsmnarea Pe mediu de mbogire pentru stafilococi Pe mediu Chapman i/sau mediu cromogen pentru identificare MRSA

Incubare se face 18-24 de ore la 37oC, n aerobioz Identificare pe mediul Chapman: se urmresc coloniile manito-pozitive acestea se identific, n caz de confirmarea speciei S. aureus se efectueaz antibiogram

Secreia nazofaringian
Se recolteaz pentru diagnosticul infeciilor cilor respiratorii superioare, uneori a sinuzitelor (n lipsa punciei sinusale) Se caut: S. pyogenes, S. pneumoniae, Haemophilus spp., Moraxella spp.

Recoltarea Cu tampon nazofaringian cu tij flexibil Se introduce recoltorul printr-o nar pan atinge peretele posterior al faringelui. Se rotete de cteva ori pentru a se ncrca cu secreie. Produsul recoltat se trece pe medii de transport nsmnarea Pe geloz snge: pentru S. pneumoniae, Moraxella Pe geloz chocolat: pentru S. pneumoniae, Haemophilus influenzae

Incubare se face la 37oC, n atmosfer de CO2 (24-48 de ore) Identificare - S. pneumoniae: se urmresc coloniile alfa hemolitice crateriforme caracteristice pe mediul geloza snge pentru confirmare se testeaz sensibilitatea fa de optochin, bil; se efectueaz antibiogram - Moraxella catarrhalis: pe geloz snge apar colonii oxidazo-pozitive, care alunec pe suprafaa mediului; sunt tulpini productoare de DN-az; se testeaz producerea de beta-lactamaz

-4-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP13

Haemophilus influenzae: colonii ca pictura de rou pe geloz chocolat, lipsa creterii acestora pe geloz snge, fenomenul de satelitism; stabilirea speciei pe baza necesitii factorilor X,V; se testeaz producerea de beta-lactamaz, se poate efectua antibiogram

Sputa
Se recolteaz pentru o diagnosticul infeciilor cilor respiratorii inferioare (pneumonii, bronite, broniolite), tuberculoz pulmonar o monitorizarea tratamentului (tuberculostatic n special) Recoltarea o Se face dimineaa pe nemncate, naintea toaletei cavitii bucale o Dac exist proteze dentare, acestea se nltur o Se cltete gura cu ser fiziologic steril o Se inspir profund i se tuete forat pentru eliminarea sputei. ! Pacientul trebuie s fie instruit, astfel nct s ne ofere sput i nu saliv ! o Pentru stimularea expectoraiei se poate efectua tapaj toracal ascendent sau instilaie cu aerosoli. o Alte posibiliti de recoltare a secreiilor cilor respiratorii inferioare lavaj sau aspiraie traheal, bronic - se evit contaminarea cu germeni aparinnd florei normale - metodele se folosesc la pacieni tarai sau incontieni, intubai aspiraie transtraheal o transfer pe medii de transport n unele cazuri (S. pneumonie, Haemophilus influenzae)

Examen microscopic: frotiu colorat Gram obligatoriu! o evaluarea calitii produsului patologic: prezena leucocitelor, absena celulelor epiteliale indic faptul, c produsul patologic provine ntr-adevr din cile respiratorii inferioare; prezena celulelor epiteliale (25 cel/cmp microscopic examinat cu obiectiv de 10x) reflect contaminarea pp cu flora cilor respiratorii superioare, a cavitii bucale o se continu prelucrarea bacteriologic, numai n situaia n care pp este de calitate bun! altfel se obin rezultate eronate o se noteaz morfotipurile bacteriene prezente pe frotiu Cultivare o Geloz snge: S. pneumoniae, Moraxella catarrhalis, S. aureus, etc. o Geloz chocolat: Haemophilus influenzae o MacConkey enterobacterii, Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter spp. o Lowenstein-Jensen: Mycobacterium tuberculosis o Sabouraud: fungi

Incubare se face la 37oC, n atmosfer de CO2 (24-48 de ore)

-5-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP13

Identificare - S. pneumoniae: se urmresc coloniile alfa hemolitice crateriforme caracteristice pe mediul geloza snge pentru confirmare se testeaz sensibilitatea fa de optochin, bil; se efectuaez antibiogram - Moraxella catarrhalis: pe geloz snge apar colonii oxidazo-pozitive, care alunec pe suprafaa mediului; sunt tulpini productoare de DN-az; se testeaz producerea de beta-lactamaz - Haemophilus influenzae: colonii ca pictura de rou pe geloz chocolat, lipsa creterii acestora pe geloz snge, fenomenul de satelitism; stabilirea speciei pe baza necesitii factorilor X,V; se testeaz producerea de beta-lactamaz, se poate efectua antibiogram - Pseudomonas aeruginosa: colonii lucioase, lactozo-negative pe mediul MacConkey, oxidazo-pozitive, pigmentate; se identific prin creterea pe mediul cu cetrimid, creterea la 44C, producerea de pigment - Staphylococcus aureus colonii mari, cremoase cu hemoliz beta, manito-pozitive - enterobacterii, Acinetobacter spp. pe mediul MacConkey: colonii lactozopozitive sau -negative (nu sunt patogeni respiratorii obligai, se identific numai n cazul n care cresc n cultur pur i exist corelaie cu examenul microscopic) - fungi: prezena ctorva colonii de Candida se ignor (colonizare); se prelucreaz numai dac predomin sau este n cultur pur i rezultatul culturii coreleaz cu rezultatul examenului microscopic fungii filamentoi prezeni n orice cantitate se vor identifica

-6-