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Laboratorio de Microbiología I- Materiales de Laboratorio: Reconocimiento, Utilidad y Limpieza

I.- OBJETIVOS

 Que el alumno conozca parte del material necesario en un laboratorio de


microbiología y parasitología.
 Que el alumno aprenda a manejar el material utilizado en un laboratorio de
microbiología y parasitología.

II.- MARCO TEORICO

Algunos de los instrumentos más utilizados en los laboratorios, son elaborados de


vidrio resistente a altas temperaturas, por su alto contenido de dióxido de silicio, bajo
álcali, óxido bórico y vestigios de otros óxidos, lo que condiciona su escaso coeficiente
de dilatación, teniendo una gran aplicación en la fabricación de materiales de
laboratorio, uno de los mas conocidos es .el vidrio PYREX. Así como los elaborados
de distintos metales pesados como platino,' mercurio, aluminio, cobre que les otorgan
características como buenos conductores del calor o por que al medio ambiente son
muy manejables sin alterar su composición.

Instrumentos de vidrio como la probeta, la pipeta o el tubo de ensayo, y otros como el


mechero Bunsen, son de los más comunes en la mayoría de los laboratorios
científicos.
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• MATERIAL DE VIDRIO

Constituye una de las principales herramientas para los fines que se persigue en el
laboratorio. Los requisitos necesarios para que un material sea un "buen material",
son:
1. Ser de buena calidad; es decir que no sean fácil de quebrarse.
2. Ser de color neutro.
3. Poseer resistencia a las acciones mecánicas y a las variaciones de
temperatura así como también a los álcali-libre (no se raje).
4. Poseer bajo coeficiente de dilatación (que no pierda su forma).

Tubos de Ensayo:
Se emplean como recipientes de medios de cultivo.
- Tubos de prueba
Deben ser de vidrio neutro, paredes gruesas y equilibradas, de preferencia sin
rebordes para facilitar el taponamiento.
De 16 x 150 mm
De 15 x 125 mm
De 13 x 100 mm para estudio de fermentación –trabajos mecánicos
De 10 x 75 mm pruebas, estudios serologicos.
- Tubos de Roux
Con escotadura de 4 cm. de fondo, de 25 x 200 mm para
- Tubos de centrífuga
De vidrio, pueden ser cónicos o cilíndricos, siempre de paredes gruesas,
De paredes gruesas, por estar inmersos rotando a alta velocidad.
De polietileno, se utiliza para centrifugaciones a altas velocidades, de medidas
semejantes a los anteriores.
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Cápsulas o Placas Petri:


Cajas cilíndricas, se emplean como recipientes de medios de cultivo para el
cultivo y aislamiento de microorganismos. Las más usadas son las de 10, 15 ó
20 mm x 100 mm.

Cultivos bacterianos
Colonias de bacterias Escherichia coli (más grande, rosa) y Proteus vulgaris (más
pequeña, de color castaño) que crecen juntas en una placa Petri. En circunstancias
normales estas bacterias son inofensivas y habitan en el intestino humano
favoreciendo la digestión, si bien pueden convertirse en patógenas y producir
infecciones del tracto urinario. Los científicos y médicos llevan a cabo cultivos
bacterianos y estudian sus características con el fin de adquirir conocimientos
respecto a las enfermedades bacterianas y su prevención.

Placas Brewer:
Para el cultivo y aislamiento de microorganismos anaeróbicos. Son idénticas a
las anteriores, con excepción de las tapas que además de ser mas pesadas
están adaptadas para crear anaerobiosis.

Pipetas:
Tubos cilíndricos delgados terminados en punta, graduados al décimo o al
centésimo de mI. Se emplean en la medición de pequeñas cantidades de
líquidos. Pueden ser:

Serológicas: son terminales y con capacidad de 0.1 a 25 ml.

Volumétricas, se reconocen por presentar una dilatación bulbosa central con


unas marcas de aforamiento conocida, en el extremo proximal angosto de la
pipeta, se les llama también pipetas de bola, las medidas más conocidas son
de 10, 25, 50 y 100 ml.

Pipetas Pasteur:
Confeccionados de varillas de vidrio de diámetro de 4 x 20mm de 30 ó 40cm de
longitud. La calidad de vidrio debe facilitar reblandamientos a la acción directa
de la llama del mechero, para conseguir por estiramiento la capilaridad
deseada. Se emplea para la toma de pequeños inóculos de siembra.
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Matraces y Erlenmeyers:
Recipientes de forma cónica y cuello corto, volumétricos útiles para la
preparación y almacenamiento de soluciones, colorantes, reactivos, medios de
cultivos, etc.

Matraces Aforados o Fiolas:


Recipientes de forma esférica y base plana. Están calibr4ados a medidas
exactas mediante un foro en la parte media del cuello del recipiente en el que
se indica la medida. Se emplean para la preparación de reactivos de
preferencia solución buffer.

Los matraces Erlenmeyer son recipientes de vidrio de forma troncocónica que


se utilizan en el laboratorio para medir o contener líquidos.

Kitasato:
Son frascos muy parecidos a los Erlenmeyers, se caracterizan por sus paredes
gruesas y por una tubuladura lateral en el cuello, la misma que sirve de
tabulación lateral para hacer el vacío. Se utiliza
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Probetas:
Recipientes graduados de forma cilíndrica y capacidad variable, con base para
la esterilidad. Pueden estar graduada.

Vasos de Precipitación o Beacker:


Recipientes cilíndricos y cortos, con una depresión en el margen de la
bocadura. Su utilidad es amplia. El vidrio debe ser resistente al calor.

Frascos viales para Hemocultivos, vacunas, Cultivos de Tejido:


Son de vidrio neutro, resistentes al calor, transparentes y con tapas de rosca,
Con capacidad para 50ml y 100ml blancos o de color ámbar pueden utilizarse
para la reserva de soluciones y medios de cultivo en stock, previamente
taponados con algodón esterilizados,

Perlas de Vidrio Neutro:


Se emplean para desfibrilar sangre y para recoger cosechas microbianas en la
preparación de antígenos, De 4 a 6 mm.
Varilla: de Vidrio Macizo

• MATERIAL DE OTRA NATURALEZA

Vástago de metal con una cubierta de ebonita aislante del calor y en el extremo
proximal una tuerca para insertar el alambre de plástico o necron,

Asa de Kolle
Varillas metálicas o de vidrio que llevan en un extremo alambre de platino;
cuando el alambre es recto se llama Necrón y cuando el alambre forma un
anillo de diámetro variable en su extremidad toma el nombre de asa.

Espátulas de Metal con mango de madera


Estuches cilíndricos o Cubículares
Mecheros de Bunsen
Canastillas o Cestos de Metal
Soportes Universales
Trípodes
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• EQUIPOS DE LABORATORIO

Potenciómetro:
Miden el pH de los medios de cultivo y de las solucione buffer. Constituido de
un par de electrodos sensible a concentraciones de hidrogeniones, conectados
a un potenciómetro que indique las mediciones, Los potenciómetros emplean
un electrodo de vidrio, unido a un electrodo de calomel como estándar.

Centrífugas:
Se utiliza en la separación de sólidos suspendidos en líquidos. Hay centrífugas
de tamaño y velocidades variables, la velocidad, se mide en revoluciones por
minuto, La velocidad a la cual sedimentaran las partículas en un líquido
dependen de varios factores:

Tamaño de la partícula.
El peso de la partícula.
La viscosidad del líquido.
La fuerza gravitacional.

Ultra centrifugación; para obtener alteraciones elevadas (mayor o igual a 100


000 g), pueden ser:
Ultracentrifugación analítica: para determinación de características físicas de
proteínas o de ácido nucleicos.
Ultracentrifugación preparativa: permite la separación de organelos
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(mitocondrias, etc.), la separación se debe efectuar en gradiente de densidad.


Incubadoras y Hornos
Los hornos son capaces de mantener t° mas de 100°c y las incubadoras
menos de 100° c .Los hornos no tienen salida de aire, las incubadoras si.

Baños de agua
También llamados BAÑO MARIA tienen salida de aire presentan un termostato
que regula la temperatura del agua presenta un piso para colocar los
materiales que se desea.
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Refrigeradoras y congeladoras
Son incubadoras de temperatura fría menor de cero grados y los frigideres de
dos a siete grados.

Filtración
Sirve para separar materiales líquidos de sólidos un ejemplo los FITROS DE
MEMBRANA.

Espectrofotómetro
Se puede observar los colores de los alimentos con una intensidad que el
aparto brinda.
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Autoclave
Funciona por las presiones que se dará a una mayor temperatura logrando su
esterilización como por ejemplo las conservas.

Horno Pasteur
Es como una mufla que tiene tres paredes y la cubierta es de asbesto sirve
para la esterilización por el calor seco.

Estufas de aire caliente


Al igual que el anterior es utilizado en la esterilización por el calor seco. Tienen
solo dos paredes y son de forma cúbica.

Aparato de arnolo koch


Es un tipo de esterilizador con calor húmedo de forma cilíndrica.
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III.-MATEIAL PARA LA PRÁCTICA

 Pipetas de diferentes graduaciones.


 Asas Bacteriológicas de aro y punta.
 Caja de Petri.
 Tubos de ensayo con tapón de rosca y tapón de algodón.
 Probeta.
 Matraz Erlenmeyer.
 Vaso de precipitado.
 Mechero Bunsen.
 Torundas de algodón.

IV. EXPERIMENTO

Siga cada uno de los pasos como lo indica su Profesor, Técnico o instructor.
1. Encienda el Mechero.
2. Esterilice su asa en el mechero hasta que este al rojo vivo y enfríe en el área
de seguridad.
3. Abra su caja de Petri dentro del área de esterilidad hasta que aprenda a
hacerla correctamente.
4. Tome una pipeta estéril, ábrala y pipetee la cantidad exacta de agua de
acuerdo a la graduación de la pipeta.
5. Tome un tubo de ensayo de rosca o liso y ábralo dentro del campo de
esterilidad hasta que aprenda a hacerla correctamente.
6. Tome la probeta y vierta un poco de agua hasta alguna cantidad exacta.
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V.- RESULTADO

Obviamente, hay unos ciertos tipos de experimentaciones que realizamos o


determinamos con mas frecuencia que otras. Sin embargo, el personal del Laboratorio
esta siempre dispuesto a considerar nuevos retos. No pretendemos ser capaces de
realizar cualquier tipo de determinación, pero prometemos considerar, desde nuestra
experiencia, todas las posibles alternativas es por eso lo imprescindible de reconocer
todos los materiales, su utilidad y su debida limpiezapara cumplir con nuestros
propósitos.
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VI.- CONCLUSIONES

• Es muy importante haber reconocido todos los materiales a utilizar en el


laboratorio y saber su utilidad para la práctica.

• También era necesario para prevenir cualquier accidente no provocado y no


lamentar consecuencias.

• Una de las conclusiones es haber reconocido algunos reactivos que se debe


tener cuidado y cogerlo con los guantes para prevenir algún tipo de
contaminación.

• Haber reconocido los equipos a utilizar como la centrifuga, el potenciómetro y


la estufa de aire caliente.

• Conocer la calidad de las principales herramientas a utilizar como los tubos de


ensayo, las pipetas, las placas petri, los matraces, etc.

• Saber desinfectar las placas cuando se encuentren con algunas bacterias u


hongos o ácidos, también saber desinfectar las manos y los materiales a
utilizar.

VII.- RECOMENDACIONES

• Tener el mandil siempre puesto para evitar contaminación en la ropa


cuando se encuentre en el laboratorio.

• Cuando se utilice la pipeta utilizar la bombilla para prevenir cualquier


accidente a menos que se utilice agua en ese instante.

• Tener los guantes puestos cuando se trabaje en cultivos de hongos o


bacterias en las placas o tubos a utilizar.

• Antes de empezar cualquier experimento desinfectar la zona donde se


trabajara.

• No poner cuadernos grandes sobre la zona donde se trabaje ni meter los


lapiceros en la boca para prevenir algún tipo de infección.
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VIII.- CUESTIONARIO

1. ¿Para que sirve una caja de Petri?


Son utilizadas en bioquímica para llevar a cabo cultivos de microorganismos.

2. ¿Cuál es la finalidad de utilizar materiales estériles en el laboratorio?

El propósito del proceso de esterilización es destruir la contaminación microbiana de


los productos no estériles. La destrucción microbiana mediante agentes físicos o
químicos sigue una ley exponencial, que nos permite calcular la probabilidad de
supervivencia de un microorganismo a partir de la dosis suministrada en el
tratamiento. La probabilidad de supervivencia está en función del número y tipos de
microorganismos (carga biológica), de la letalidad del proceso de esterilización y en
algunos casos, del medio ambiente en el que se encuentren los microorganismos
durante la esterilización.

3. ¿De que esta formada el asa bacteriológica?


Son varillas metálicas o de vidrio que llevan de un extremo alambre de platino; cuando
El alambre es recto se llama aguja y cuando el alambre forma un anillo de diámetro
variable en su extremidad tómale nombre de asa.

4.- ¿Utilidad del mechero Bunsen?

Dispositivo que se utiliza mucho en los laboratorios debido a que proporciona una
llama caliente, constante y sin humo. Debe su nombre a Robert Bunsen el que lo creo.

Los mecheros Bunsen constan de un tubo vertical, enroscado en su parte baja a un


pie por donde entra el gas.Mediante un aro metálico móvil se regula la entrada de aire.
La mezcla se enciende por la parte superior.
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 Biblioteca de consulta Encarta 2004.

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