Curso Bsico Asistente de Laboratorio Nivel (I)

Evaluaciones: Quiz de la clase anterior a la entrada. 20%/ 4pts Exmenes 2 y un recuperativo de ser el caso. 50% /10pts. Evaluacin prctica continua, asistencias, intervenciones. 30% /6 pts = 20 pts

Generalidades de un Laboratorio Clnico El laboratorio clnico Herramienta primordial para el rea mdica Prevencin, Diagnstico y Tratamiento

Espacio fsico Anlisis clnico Resultados

Normativas Generales del Lab. Clnico Coordinador de laboratorio Jefe de Servicio Licenciado en ejercicio del rea (responsabilidad).

asignada

Funciones, procedimientos, hora de entrega de los Anlisis realizados. Equipos, instrumental y material (ptimas condiciones, riesgo). Normativas Generales del Lab. Clnico rea de atencin al pblico rea de toma de muestras (personal autorizado) Eficiencia tcnica, funcionalidad administrativa (entrega de resultados, pagos, factura). Preparacin de materiales. Verificar si el paciente cumple con las condiciones necesarias para realizarle la toma de muestra. ANAMNESIS DEL PACIENTE Recoleccin de productos destinados al anlisis (envases adecuados, identificacin del producto-etiquetasrotulado). Personal actualizado. Dominar los tipos de exmenes solicitados por el medico expresados en la orden mdica para realizar un buen diagnstico. El recipiente para descontaminar especmenes deber contar con tapa de seguridad para todo traslado fuera del lugar de trabajo. En ese caso el exterior de recipiente deber mantenerse libre de toda contaminacin con sangre usando solucin descontaminante.

Una vez usados los guantes latex debern ser colocados dentro del recipiente con solucin descontaminante Lavar las manos con jabn (liquido o solido suspendido) y agua inmediatamente despus que el trabajo haya sido terminado. Informe inmediatamente a su superior de cualquier accidente ocasionado con elementos del laboratorio.

Cumplir con las normas de bioseguridad. Normas de Bioseguridad Conjunto de normas para prevenir accidentes en el rea de trabajo.

Bioproteccin Medidas de proteccin de la institucin y del personal para reducir el riesgo a patgenos, toxinas etc.

Riesgo Probabilidad que tiene un individuo de sufrir una lesin, enfermedad, complicacin de la misma o muerte como consecuencia de la exposicin a un factor riesgo. Riesgo biolgico Riesgos qumicos Riesgo mecnico y fsico Riesgo incendio explosiones Riesgo incendio explosiones Riesgo quemaduras Riesgos elctricos

 Riesgos por radiaciones Riesgos por ruido Riesgos Biolgicos Derrame de material infeccioso Cortadura con material de vidrio contaminado Pinchazo con jeringas contaminadas Inhalacin de aerosoles Riesgos Qumicos Reactivos venenosos, corrosivos y custicos Externos: exposicin de reactivos en la piel (cara, mano, etc.), ojos. Internas: inhalacin o ingestin de productos qumicos Riesgos Mecnicos y Fsicos Pisos resbalantes Iluminacin inadecuada Manejo de material vidrio roto Equipo con parte movibles no protegidas Riesgo Incendio y Explosiones Mecheros Equipos elctricos Almacenamiento de qumicos: solventes inflamables ( alcohol, ter, tolueno, xilol). Riesgo quemaduras Objetos calientes Contactos con vapor Riesgos Elctricos

Manejo de equipos con manos mojadas Reparacin de aparatos sin desconectar Conexiones mal hechas

Riesgo por radiaciones Riesgos por ruido Distracciones y fatiga

Normas de bioseguridad Las puertas del laboratorio debern estar cerradas el acceso al mismo deber estar restringido mientras se lleva a cabo el trabajo. El laboratorio deber mantenerse limpio ordenado y libre de materiales extraos No se permitir comer, beber, fumar, almacenar comidas as como el uso de cualquier otro item personal. Limitar el uso de celular. Usar bata, uniforme dentro del laboratorio. Esta ropa protectora deber ser quitada inmediatamente antes de abandonar el rea de trabajo. Antes de iniciar la tarea diaria asegrese que la piel de sus manos no presente cortes, raspones y otras lastimaduras, en caso que as sea cubrir la herida de manera conveniente antes de colocarse los guantes. Usa guantes latex de buena calidad para todo manejo de material biolgico o donde exista aunque sea de manera potencial el riesgo de exposicin a sangre o fluidos corporales

 Cambiar los guantes latex toda vez que hayan sido contaminados, lavarse las manos y ponerse guantes limpios. No tocas los ojos, nariz o piel con las manos enguantadas. No abandonar el laboratorio o caminar fuera del lugar de trabajo con los guantes puestos El uso de agujas, jeringas o cualquier otro instrumento similar deber ser restringido a su uso indispensable. Las agujas y otros elementos punzantes debern ser descartados en un recipiente resistente. Se debern evitar los intentos de reintroducir las agujas descartadas en capuchones o de romperlas o doblarlas ya que esta conducta produce aumento de la posibilidad de accidentes por pinchazos y salpicaduras. Todos los procedimientos debern ser realizados de manera tal que sea nula la creacin de aerosoles, gotas, salpicaduras, etc. Evitar pipetear sustancia alguna con la boca, para ello se usan propipetas y pipetiadores automticos. Las superficies del rea de trabajo debern ser descontaminados cuando se termine la tarea diaria. Usando para tal efecto una solucin de hipoclorito de sodio en concentracin adecuada.

Transporte de muestras Cualquier muestra a analizar deber ser transportada de manera segura, utilizando envases o recipientes que garanticen esta seguridad y debern estar debidamente identificados. Cualquier contenedor primario contaminado debe ser transportado en un segundo contenedor. Cuando las muestras llegan al laboratorio deben ser examinadas para confirmar su perfecto estado antes de sacarlas del contenedor secundario.

Normativas Generales del Lab. Clnico Cumplir con la bioseguridad implica: 1. Conocer los agentes de riesgo Qumicos Txicos y nocivos, inflamables e irritantes y sustancias cancergenas. Fsicos Temperaturas, presiones, ruidos y vibraciones y radiaciones). Biolgicos Microorganismos y sus productos, animales de laboratorio, toxinas.

2. Buenas prcticas y tcnicas de laboratorio Capacitacin (disciplina), uso de aparatos y otros elementos 3. Uso de aparatos y otros elementos Centrifuga Mezcladores y agitadores Autoclaves Nevera y congeladoras Centrifuga Nunca deben ser operadas con la tapa abierta No detenerla manualmente Los tubos deben estar tapados para evitar la formacin de aerosoles

En caso de rotura de tubos dentro de la centrifuga, antes de abrirla, esperar asentamiento de aerosoles.

Mezcladores Usarse en campanas de extraccin Seguir las instrucciones del licenciado Autoclaves Al abrirlo debe estar seguros que la temperatura y presin est en niveles normales Usar guantes resistentes al calor, para colocar o extraer material. Aflojar las tapas de los envases para evitar explosiones Nunca colocar solventes en el autoclave Neveras y Congeladores Al guardar y retirar material se debe usar guantes El material debe estar rotulado El material debe estar cerrado y limpio por fuera Prohibido almacenar alimentos, sustancias toxicas, venenosas o explosivas

reas de estudio en laboratorio Clnico rea de hematologa rea de bioqumica clnica o qumica sangunea rea de parasitologa rea de bacteriologa reas especiales

Tema II Cristalera, instrumentos y equipos de laboratorio Material metlico y de madera. Instrumental de vidrio. Instrumental para volumetra. Instrumental de. Instrumental de porcelana plstico. Otros instrumentos. Manejo de material de vidrio Equipos y instrumentos en reas de laboratorio clnico.

Material metlico y de madera Trpodes: Se emplean en el calentamiento de fiolas, vasos precipitados, matraces, etc. Rejillas metlicas: Generalmente se colocan sobre anillos o trpodes cuando van a calentarse recipientes que no deben recibir calor directo. Su parte central esta incrustada de AMIANTO ( rejilla de amianto), este material distribuye el calor de manera uniforme. Esptulas: Sirven para tomar cantidades pequeas de muestras slidas para ser pesadas o transferidas de un espacio a otro. Pinzas: las hay de varios tipos: Pinza para soporte, pinza para cristales, pinza de mohr, pinza de hoffman, pinza para tubos de ensayo.

Gradillas: Es un soporte especial de metal, madera o plstico empleado para colocar tubos de ensayo.

Instrumental de vidrio Vaso precipitado o beacker : Se utiliza para disolver compuestos o sustancias , calentar, recoger filtrados, obtener precipitados. Baln: Se usa preferiblemente inflamables. para calentar lquidos

Matraz: Es til para hacer disoluciones, contener lquidos, calentar soluciones. Tubo de ensayo: Son de utilidad para hacer experimentos a pequea escala y para hervir mnimas cantidades de lquidos, generalmente de 1 a 10 ml. Tubo de centrifuga: Su forma similar a la de un tubo de ensayo, pero pose un fondo agudo , se utiliza para centrifugar soluciones o suspensiones. Liquido de terceros espacios Varilla de vidrio: Sirve como agitador de soluciones y para verter las suspensiones sobre el papel filtro.

Instrumental de volumetra Cilindros Graduados: Tambin es Llamado probetas, se usan para medir lquidos cuando se requiere cierta exactitud. Estn graduados en mL. Matraz aforado: Tambin es llamado matraz volumtrico, es un recipiente en forma de baln con un CUELLO LARGO Y ESTRECHO en el cual hay una seal de AFORO que indica el volumen para el cual fue construido. La temperatura de calibracin generalmente de 20 OC est impresa en l. Se emplea para PREPARAR SOLUCIONES DE CONCENTRACION CONOCIDA. Pipetas: Se emplean para medir o trasvasar cantidades precisas de lquidos. Podemos considerar dos tipos: Pipetas volumtricas: Son tubos de vidrio con una parte central ensanchada en forma de bulbo, son de una sola capacidad y generalmente de un solo aforo. Mide en forma precisa un solo y determinado volumen de lquidos. Pipetas graduadas: Se utilizan para medir con precisin volmenes variables de lquidos y pueden ser de dos tipos : Pipeta graduada de entrega total : O de un solo aforo terminal, el volumen est indicado por la pipeta y se comprende entre el cero y la punta Pipeta de entrega parcial : O doble aforo , el aforo superior corresponde a cero y el inferior a la divisin que indica la capacidad total de la pipeta.

 Bureta: Se emplea para titular soluciones. Instrumental de porcelana Capsulas: Se utilizan para calentar sustancias, evaporar lquidos y realizar reacciones qumicas. Crisoles: Se usan para calcinar sustancias ya que altas temperaturas. resisten

Morteros y pistilos: Se construyen frecuentemente de porcelana, los hay de vidrio, madera. Se usan para pulverizar y triturar sustancias. Instrumental de plstico Piseta: O frasco lavador, es un recipiente utilizado para rociar precipitados o otras utilidad.

Otros instrumentos Estufas: Poseen termorreguladores que permiten el calentamiento hasta aproximadamente 300 oC la lectura de la temperatura se hace con un termmetro colocado en la parte externa .se usa en microbiologa y muchas otras reas.

 Mecheros: El de gas est constituido por un tubo de metal en el cual la mezcla de gases combustible y comburente forma una llama, cuya temperatura no es muy elevada. Tambin los hay de alcohol.

Manejo de material de vidrio El vidrio ms utilizado es de borosilicato ( pyrex o kimax) quienes presentan alta resistencia al ataque de sustancias qumicas y a cambios de temperatura. Lavado de material de vidrio El vidrio no es un material completamente inerte por ello antes y despus de cada ensayo es necesario lavarlo minuciosamente. Se utiliza detergente con sus respectivas esponjas, cepillos adecuados, enjuagarlos con agua corriente y luego con abundante agua destilada. Cuando el material de vidrio est impregnado de grasa u otra sustancia orgnica se debe lavar previamente con solucin limpiador como: mezcla sulfocromica o potasa alcohlica. Curado del material Cuando una bureta u otro material no est seco y se desea emplear, se procede a curarlo enjuagando tres veces con porciones del mismo lquido o solucin que desea medir. Calentamiento de sustancias en recipientes de vidrio fondo plano Evite colocar objetos calientes de vidrio sobre superficies fras o mojadas.

Calentamiento de sustancias en tubo de ensayo Al calentar en tubos de ensayo, use una pinza adecuada y evite concentrar calor en un rea determinada. Desplace el tubo lentamente sobre la extremidad de las llamas varias veces.

Tema III rea Qumica Sangunea

Sangre

Plasma suero

La sangre est constituida 92 % agua y 8 % slidos y gases Solidos: Sustancias proteicas Albumina Globulina Fibringeno Sustancias orgnicas no proteicas Sustancias nitrogenadas. Componentes glucosidicos. Componentes lipdicos. Productos del metabolismo intermedio. Minerales.

Gases Oxigeno Dixido de carbono

Cmo separar el plasma de las clulas? Con anticoagulante 55% Plasma 45% Hematcrito Sin anticoagulante Suero

Tcnica adecuada para la obtencin de muestra de suero Extraccin sangunea. La muestra debe ir en un tubo seco (sin anticoagulante preferiblemente). Esperar que el espcimen se coagule y posteriormente centrifugar a 1500 rpm por 10 minutos.

Muestra de suero Es la muestra ptima para las pruebas clnica de rutina y de serologa. de bioqumica

No desprender el coagulo con un aplicador ya que puede causar hemolisis y contamina el suero. Traspasar el suero a otro tubo lo ms pronto posible.

QUIMICA SANGUINEA Perfil general (perfil 20) Hematologa completa Glicemia Urea Creatinina colesterol Triglicridos cido rico Orina Heces V.D.R.L

Perfil preoperatorio Hematologa completa Glicemia Urea Creatinina Tp y Tpt HIV y VDRL

Perfil embarazo Hematologa completa Grupo sanguneo Glicemia Creatinina cido rico Test toxoplasmosis

 HIV VDRL Uroanalisis

Perfil heptico: Hematologa completa Transaminasas Bilirrubina T y F. Fosfatasa alcalina ( ALT) Protenas T y F.

Perfil renal: Hematologa completa Glucosa Creatinina Urea Uroanalisis Protenas T y F. Perfil lipdico: Triglicridos Colesterol Total Colesterol-HDL Colesterol LDl Colesterol -VLDL

ANALITOS EVALUADOS EN QUIMICA SANGUINEA cido rico Bilirrubina total y fraccionada Colesterol total Colesterol fraccionado Creatinina Curva de tolerancia a la glucosa Glicemia en ayunas Glicemia postsobrecarga Hemoglobina glicosilada Protenas totales y fraccionadas Triglicridos Urea Colesterol LDL oxidasa Lipoprotena a (Lpa) Homocisteina Marcadores de inflamacin ( protena c reactiva -pcr-Us ). Fibringeno Citocinas (CIT) ,interleucina 6( IL6) Mieloperoxidasa. En la qumica de la sangre podemos incluir electrolitos y enzimas Electrolitos: Calcio srico Cloro Fosforo srico Hierro srico Magnesio srico Potasio Sodio

Enzimas: Aldolasa Amilasa Ck, Ck MB, Ck TOTAL, Ck MM Colinesterasa Deshidrogenasa lctica Fosfatasa acida Fosfatasa acida prosttica Fosfatasa acida total Fosfatasa alcalina Gamma glutamil transferasa Lipasa Transaminasas GOT (GTP) Y AST ( ALT)

Perfil lipdico: Triglicridos Colesterol Total Colesterol-HDL Colesterol LDl Colesterol -VLDL

Perfil Lipdico Razones

Deteccin de hiperlipidemias y hiperproteinemias asociada a

sntomas especficos.

Evaluacin de riesgo de enfermedad cardiaca coronaria Seguimiento de pacientes que reciben terapia diettica
farmacolgica por las razones anteriores

QUIMICA SANGUINEA Perfil lipdico Condiciones ptimas No haber variado los hbitos alimenticios en las ltimas 3 semanas. Peso corporal estable. Ayuna: 12 horas. TAG aumenta 2 horas luego de la ingesta con pico a las 4 a 6 horas. Evitar ingesta de etanol ( 36-72 h previas ) aumenta el TAG pero es transitorio. Obtencin del espcimen Estandarizarse: sentado /erguido. Aumenta el volumen de plasma y disminuyen sus componentes. Retirar torniquete antes de la extraccin (aumenta los lpidos). Evitar estrs emocional y fsico. Muestra

Eleccin

de plasma: Plasma obtenido con EDTA, suero, FLOURURO, OXALATO, CITRATO: produce salida de agua del eritrocito y disminuye nivel de triglicrido.

Heparina: Disminuye colesterol. Centrifugar y separar rpidamente

de los elementos celulares como los glbulos rojos o eritrocitos. Evitar hidrolisis de triglicridos.

Lipoprotenas Se dividen en: Quilomicrones ,VLDL,LDL y HDL. Son partculas encargadas del transporte de triglicridos, colesterol, fosfolpidos, steres de colesterol . Valores: 30-/65 mg/ dL HDL Menos a 140 mg/dL LDL Colesterol hasta 250 mg/dL Triglicridos hasta 200 mg/dL Otros exmenes especiales de perfil lipdico: LDL oxidasa Lipoprotena a Hemocisteina Protena c reactiva Fibringeno Citocinas Mieloperoxidasa Marcadores cardiovasculares Marcadores enzimticos y no enzimticos Marcadores enzimticos Creatinkinasas o isoenzimas Ck Deshidrogenasa lactica e isoenszimas ( LDH) Aspartato aminotransferasa ( AST/TGO) Marcadores cardiovasculares no enzimticos Mioglobina Troponinas

Marcadores cardiovasculares enzimaticos Creatinkinasas o isoenzimas Ck Ck total: Est formado por tres isoenzimas Ck MB, Ck BB , Ck MM Se usa para cardiologia la Ck MB por encontrarse musculo cardiaco Y corresponde al 20 % de la Ck total. en

Determinacin: Muestra Suero es la muestra de eleccin, plasma (solo heparina). Inhibida fcilmente por EDTA, citrato y fluoruro. Separacin inmediata (hay interferencia con la enzima adenilato kinasa eritrocitaria ). Es inestable. No usar muestras hemolizadas Tener en cuenta tiempos de recoleccin: aumenta tras ejercicio fsico, ciruga. Marcadores cardiovasculares no enzimticos Myoglobina Se libera rpidamente a circulacin en procesos necrticos de fibras estriadas o miocrdicas. Determinacin: Muestra de eleccin: suero libre de hemolisis y lipemia Preservacin 20 grados centgrados til en seguimientos de trastornos musculares. Igual hora en la medicin a distintos das : pues tiene variacin circadiana

Es inespecfico a nivel cardiovascular por valorar dao de musculo esqueltico y miocrdico. Troponina Protena de gran tamao. En ausencia de dao miocrdico estn ausentes en circulacin. Cuando hay necrosis (IAM) rompe integridad de la membrana y difunde a microcirculacin. Existen tres isoformas de (Tn) : Troponina C Troponina I (especifica segn mdicos) Troponina t Muestra: Depende del mtodo elegido, mayormente las condiciones son recomendadas por el fabricante Plasma y suero adecuados Estar pendiente con la centrifugacin pues la suspensin puede dar un resultado falsamente positivo. Succionar bien el suero o plasma. Perfil renal Hematologa completa Glucosa Creatinina Urea Uroanalisis Proteinas t y f. En caso de patologas se incluye: electrolitos

Urea Es el principal producto de desecho del metabolismo de protenas, tanto endgenas como exgenas. Los valores de urea estn condicionados por la ingesta, el catabolismo proteico y el volumen de orina. Niveles sricos dependen de la ingesta, del catabolismo proteico, de la funcin heptica y la funcin renal. Determinacin: Muestra: Suero, plasma heparinizado, el citrato y el fluoruro inhiben la ureasa. Susceptibilidad a la degradacin bacterias temperatura optima 2 -8 grados centgrados. El nitrgeno ureico en la sangre (BUN) (Blood urea nitrgeno, por sus siglas en ingls) es la cantidad de nitrgeno circulando en forma de urea en el torrente sanguneo. Creatinina Es el anhidro de la creatina el cual se forma en el hgado. Producto final del metabolismo muscular. Creatina es la precursora del fosfato de creatina, a travs de la creatinfosfoquinasa. La creatina resulta de la ciclacin irreversible de la fosfocreatina . La creatinina una vez que pasa a sangre no vuelve a ser utilizada y se excreta de manera constantemente por la orina. La creatina es reabsorbida por los tbulos renales y su excrecin es casi nula. Se producen 2 creatinina por cada 100 creatinina

Determinacin: Suero, plasma heparinizado, orina, lquido amnitico Es estable 7 a 4 grados centgrados. Los hemates interfieren en el cromgeno de la reaccin Protenas Son macromolculas formadas por cadenas lineales de aminocidos. Las funciones ms importante de una protena: Estructural. (Ej: colgeno). Inmunolgica (anticuerpos). Enzimtica (Ej: sacarasa y pepsina). Contrctil (actina y miosina). Homeosttica: colaboran en el mantenimiento del pH (ya que actan como un tampn qumico). Transduccin de seales (Ej: rodopsina). Protectora o defensiva (Ej: trombina y fibringeno). Protenas En el plasma se encuentran las protenas sanguneas. Albmina 54%, globulinas 38%, fibringeno 7 % y otras en un 1 %. Las tres clases principales de compuestos: albminas (54 %), globulinas (38 %) y fibringenos (7%), son fundamentales para la vida. Protenas totales sanguneas

Las protenas totales son la suma de los niveles de albmina y globulinas en sangre. Protenas plasmticas totales 6 a 8 gr/dL Albumina 3.2 a 5 g/ dL Globulina 1.5 -2.5 g/Dl Relacin ALBUMINA GLOBULINA (1.2 A 1.8 g/ Dl) Fibringeno 200 A 400 mg /dL Proteinuria Es presencia de protenas en la orina. Puede aparecer por ejercicio intenso, procesos febriles o tensin emocional. Glucosuria Presencia de glucosa en la orina. Muestra para determinacin de protenas : Puede ser orina Y suero sanguneo. Pruebas renales especiales: Clearence de creatinina Es una prueba especial para medir el ndice de filtracin glomerular. Es la cantidad de plasma liberado de una sustancia determinado por el rin en un minuto. Aclaramiento o depuracin es el nombre alternativo

Formula de depuracin o aclaramiento de creatinina es : TFG = concentracin de creatinina en orina por volumen de orina entre la concentracin de creatinina en el plasma. Determinacin: Muestra: Orina de 24 horas exactas y muestra de sangre en ayunas. Los valores son: 70/130 ml / minuto (mujeres) 75-140 mil / minuto (hombres).

Perfil heptico Hematologa completa Transaminasas Bilirrubina t y f. Fosfatasa alcalina ( alt Protenas T y F. Marcadores enzimticos LDH,AST,ALT,GGT,ALP,5NT,LAP.

Hgado Funciones hepticas generales Metablicas metabolismo glucosidico, metabolismo pigmentario Metabolismo proteico.

Metabolismo lipdico y actividad enzimtica. Funciones antitxicas. Funciones excretoras. Funcione hemticas. Funciones de almacenamiento. Protenas Sistema retculo endotelial de los hepatocitos Estimulada: GH (hormona de crecimiento). Testosterona Durante el embarazo Transaminasas AST/TGO ALT/TGP Transfieren grupos amino desde un metabolito a otro, generalmente aminocidos. Son marcadores hepticos. Participa en las reacciones qumicas. Participan en la formacin de piruvato. Tanto la AST y ALT estn presentes en el suero en concentraciones inferiores a 30-40 Ul/l, pero si el hgado est daado, la permeabilidad de la membrana celular aumenta y estas enzimas son liberadas a la sangre en grandes cantidades, hecho que no siempre requiere la necrosis de los hepatocitos. De hecho, hay escasa correlacin entre el dao celular heptico y el grado de elevacin de las transaminasas. Prcticamente cualquier enfermedad heptica que comporte un dao necroinflamatorio puede ser la causa.

Bilirrubina Bilirrubina no conjugada (indirecta) Resultante de la degradacin del hemo por macrfagos del sistema retculo endotelial (bazo).Migra asociada a la albumina. Es captada por el hgado en donde se conjuga. Esta aumenta en enfermedades hemolticas y enfermedades del metabolismo de la bilirrubina 0 a 0.8 mg/dL son los valores Bilirrubina conjugada (directa) La bilirrubina se conjuga con dos molculas de cido glucoronico y se elimina activamente por la bilis . En plasma los valores son muy bajos 0 a 0.003 mg / Dl . Aumenta considerablemente en la colestasis intra y extrahepatica. La bilirrubina total srica por lo general no debe superar 1 mg/ dL y aproximadamente un 5 % es la que esta conjugada. Muestra Suero preferiblemente y cuando hay valores altos el suero esta ictrico.

Pruebas pancreticas Glicemia en ayunas 12 horas Prueba de curva tolerancia a la glucosa, prueba oral de tolerancia a la glucosa o sobrecarga oral de glucosa Est basada en obtener la respuesta del organismo frente a

una sobrecarga de carbohidratos en un periodo de tiempo determinado. La sobrecarga de glucosa va ser absorbida a nivel intestinal, pasando luego a ser metabolizada por accin de la insulina y posteriormente sufrira su excrecin si llegase a sobrepasar el umbral renal. Mide absorcin, metabolismo y excrecin de glucosa. Obtener una muestra en ayuna de sangre y orina para determinar la glucosa plasmtica y glucosuria basal (menos de 140 mg / dL) Administrar por va oral una dosis de 75 gramos de glucosa disuelta en 375 ml de agua (adultos) den nios 1,75 gramos / kg llevando a una concentracin de 20 g /% con agua y en mujeres embarazadas 75 gramos en 400 ml de agua. Una vez finalizada la ingesta de solucin glucosada determinar a los tiempos correspondientes la glucosa plasmtica y Glucosuria inclusive. Glicemia postpandrial Es medir la glicemia basal y luego de transcurrido cierto tiempo generalmente 2 horas medir la glucosa nuevamente. Para el examen en vez de carga glucosada se ingiere comida. Valores de referencia 75 a 100 mg/ dl Criterios para diabetes: mayor de 126 mg)/ dL Postcarga de glucosa mayor de 200 mg /dl Normalmente aumenta en diabetes triglicridos, predominio del LDL diminucin del HDL c y el LDL colesterol puede estar normal. Por tanto son factores de riesgo cardiovascular los pacientes diabticos. Triada Polifagia, polidipsia, poliuria

Pruebas pancreticas especiales Pncreas endocrino : Insulina (peptido c), glucagn, polipeptido pancretico, somatostatina Pncreas exocrino Enzimas proteolticas: Tripsina Carbohidratos; amilasa Lpidos; Lipasa ,lectinasa Las pruebas especiales pancreticas de pncreas exocrinos poseen las siguientes caractersticas: Marcadores de pancreatitis (enfermedad inflamatoria del pncreas). La amilasa puede aumentar en lesin de la glndulas salivales ( paperas, parotiditis) y en pancreatitis inclusive. Muestra: suero preferiblemente .La mayora de las enzimas no deben medirse en plasma. Pruebas sistema seo o Resorcin y formacin sea o Minerales o Hormonas reguladoras Marcadores de formacin sea Producto de actividad de osteoblastos Fosfatasa alcalina sea Osteocalcina

Marcadores de resorcin sea: Producto de la sntesis de osteoclastos Hidroxiprolina Marcadores de metabolismo mineral Electrolitos como: Calcio Fosforo Magnesio Marcadores de elementos reguladores Parathormona Calcitonina Vitamina D Pruebas sistema artomuscular Marcadores de funcin muscular Aldolasa Creatina cido lctico Myoglobina Marcadores de funcin articular: cido rico (producto de desecho del metabolismo de nitrgeno en el cuerpo humano). La GOTA Factor reumatoide (utilidad clnica en diagnstico de artritis reumatoide).tiene varias formas de realizarse en plaquitas por aglutinacin se corresponde a inmunologa mayormente.

Tema IV Uroanalisis
Orina Es la filtracin del plasma por los glomrulos, el filtrado tiene una composicin qumica similar a la del plasma, diferencindose de ste, en cuanto al contenido de protenas, clulas y sustancias unidas a protenas (medicamentos). Los riones conservan nutrientes esenciales para la fisiologa del organismo, tales como : glucosa y protenas Orina Cantidad de orina eliminada diariamente varia de 600 a 200 mL /24 horas con un promedio que puede variar entre 1200 a 1500 ml. El volumen de orina emitido va depender de la ingesta de slidos y lquidos. Uroanalisis Anlisis de la orina. oFase pre analtica: Durante esta etapa se deben cuidar los aspectos relacionados con la preparacin del paciente, recoleccin del espcimen y transporte del mismo. Educacin, preparacin del paciente, recoleccin transporte del espcimen, personal debe disponer por escrito de instrucciones claras y concretas para suminstralas al paciente en forma verbal o escrita en una leguaje sencillo. oFase analtica: Procedimientos

oFase post analtica : Abarca los procedimientos y polticas que afectan el reporte e interpretacin de los resultados Orina Tipos de especmenes Espcimen de primera hora de la maana Presenta pH cido y elevada concentracin Miccin de segunda orina de la maana Espcimen al azar Recolectada en cualquier momento del da. Este influenciado por la hidratacin, la ingesta alimenticia y actividad fsica (ejercicios antes de la recoleccin). Controlar tales condiciones. Espcimen en ayunas Se utiliza para investigacin de glucosuria, adquiriendo gran importancia en el control de los diabticos. Espcimen post pandrial de dos horas Para el control de pacientes insulino dependientes. Indicaciones: El paciente debe vaciar su vejiga antes de consumir su alimentacin de costumbre y desechar dicha miccin. Recogiendo la orina eliminada durante el periodo de dos horas posteriores a la ingesta antes sealada.

Instrucciones para recoleccin de orina El da anterior a la recoleccin del espcimen, el paciente debe adquirir un envase. El envase es un recolector de orina limpio, seco, estril y de material plstico inerte, es decir que no reacciones con la orina, desechable, de paredes incoloras, de boca ancha, por lo menos de 4 a 5 cm de dimetro, con tapa de rosca, la cual pueda colocarse y removerse con facilidad y asegurar cierre hermtico que evite el derrame durante su transporte y manejo en el laboratorio. En sus paredes se debe colocar una etiqueta para identificacin, debe adherirse a estas y contener datos exigidos por el laboratorio. Actualmente se rotula con marcador. Debe resistir humedad y mantenerse la identificacin mientras se refrigera o se evala la orina, recomendable identificar la tapa. Antes de iniciar la recoleccin, el paciente debe lavarse las manos con suficiente jabn, eliminar cualquier residuo del mismo con abundante agua y secarse con una toalla limpia y seca. Para evitar la contaminacin del espcimen, es indispensable el aseo de los genitales. Gnero masculino : en caso de pacientes no circundados es necesario retirar la piel ( prepucio) que cubre el glande para exponerlo, se procede a su limpieza con bastante agua y jabn , luego se seca con una toalla limpia y seca. Gnero femenino: se lavan los genitales con abundante agua y jabn, sin dejar restos de este, luego se enjuagan con abundante agua y se secan con toalla limpia y seca, posteriormente se separan los labios mayores y menores y mantener la separacin de los mismos durante la recoleccin.

Evitar contaminacin de la orina con detritus, pelo pbico, secreciones genitales, o cualquier otro tipo de material extrao como es el caso de los unguientos, talcos, lociones entre otros. Tanto el gnero masculino como el femenino la primera miccin debe desecharse, usando el envase adecuado y sin contaminarlo ( para ello , el paciente no debe tocar su interior con las manos, ni ponerlo en contacto con el rea perineal), se recoge la parte media de la miccin , cuando se haya recolectado cantidad suficiente de orina se retira el recolector y se desecha la porcin final de la miccin. En el gnero femenino la obtencin del espcimen debe realizarse en das retirados al periodo menstrual. Cuando es necesario realizar el estudio durante dicho periodo, es conveniente indicar a la paciente que se coloque un tampn antes de colectar el espcimen. Debe anotarse y comunicarlo al bioanalista en ejercicio. No son vlidos aquellos especmenes recolectados luego de las relaciones sexuales, ya que los mismos pueden contaminarse con tales secreciones. Cuando se trata de recin nacidos y pacientes peditricos , se deben utilizar bolsas especficas para la recolecciones. De inmediato debe anotarse la hora de la miccin. El espcimen recolectado debe llevarse al laboratorio, el envase debe cerrarse hermticamente, para evitar derrames, colocarlo en bolsa plstica y transportarlo rpidamente protegido de luz, el calor y la agitacin. En caso de que surgan retardos en el transporte, es conveniente llevar el espcimen, contenido en el recolector primario, en un segundo envase con hielo.

Partes del uroanalisis

4 partes: Evaluacin del espcimen. Examen macroscpico o fsico. Examen qumico. Examen microscpico o estudio del sedimento urinario.

Evaluacin del espcimen

Criterios para rechazar el espcimen: Que no exista correlacin entre el nombre del paciente en la solicitud del estudio y en el envase que contiene el espcimen. Volumen insuficiente para la ejecucin del estudio. Tipo de espcimen o recoleccin inapropiada. Tipo de recolector. Contaminacin visible (materia fecal, restos de papel, u otro material visible). Tiempo transcurrido entre la recoleccin del espcimen y la recepcin del mismo por parte del laboratorio. Transporte inadecuado.

Una ves rechazado El paciente debe recibir explicacin convincente acerca de la causa por la cual el espcimen fue rechazado. Solicitar nuevo espcimen, para ello debe orientar al paciente de la nueva recoleccin y transporte de la muestra Una ves aceptado Se debe interrogar al paciente en relacin a : Ingestin de medicamento, vitaminas, dieta, actividad fsica, enfermedad que padece.

Examen macroscpico o fsico

Color aspecto Olor Densidad Lo ideal es que el uroanalisis se ejecute en un periodo no mayor de 2 horas luego de colectado el espcimen, ya que luego de su emisin la misma pierde temperatura corporal y sufre enfriamentiento, lo cual influye en algunos parmetros tanto del estudio fsico como qumico y microscpico. En el examen fsico se requiere mezclar suavemente la muestra de orina con la finalidad de homogenizar. Se debe utilizar una buena fuente de luz para realizar el estudio. Si el recolector no tiene paredes transparentes , se transfiere el volumen estandarizado por el laboratorio a un tubo centrifuga , preferiblemente cnico, graduado y de

paredes transparentes para estudiar el aspecto y el color, el cual debe identificarse correctamente , posteriormente puede ser utilizado para el sedimento urinario. El laboratorio debe establecer los criterios de los resultados del estudio macroscpico. Color Variaciones fisiolgicas Variaciones patolgicas Variaciones fisiolgicas Actividad fsica excesiva, ingestin de algunos alimentos y medicamentos, restriccin en la ingesta de lquidos etc.

Incolora a amarillo plido (ingestin elevada de lquidos, diurticos como caf, alcohol). Amarillo naranja (ingestin de complejos vitamnicos , colorantes comestibles). Amarilla oscura a mbar( orinas concentradas, dietas con bajo contenido hdrico , luego de actividad fsica excesiva o estrs, primera orina de la maana ). Roja (contaminacin con sangre menstrual, ingestin de algunos alimentos como la remolacha).

Variaciones patolgicas En algunas enfermedades o anormalidades metablicas.

Amarillo plido o incolora (diabetes inspida por poliuria, debido a la eliminacin de grandes volmenes de orina, diabetes mellitus). Rosada o roja por presencia de eritrocitos; eliminacin de hemoglobina, mioglobina se asocia con pH acido, excrecin de algunas sustancias como antipirina , piramidona , antibiticos se asocian a pH bsico, prueba de exploracin renal fenolsufontaleina ( rojo de fenol). Marrn o rojizo (cuando la orina tiene eritrocitos y se deja por un tiempo prolongado a temperatura ambiente, las clulas se desintegran liberan hemoglobina y se oxida a metahemoglobina y el color de la orina varia a marrn o pardusco). Sucede tanto en vitro como en vivo (vejiga) . Esto se corrobora con sedimento urinario. Castao amarillento a verde amarillento (excrecin de pigmentos biliares como la bilirrubina gracias a la luz es oxidada a biliverdina). DIFERENCIAR. Naranja a marrn (urobilinogeno se oxida a urobilina). Cuando el espcimen se agita, la urobilina no colorea la espuma formada. No se realiza en orina de miccin reciente.

Roja a purpura (Alteracin en el metabolismo de la porfirinas) Hb. Marrn oscura a negra (eliminacin de melanogeno, alcaptonuria). Azul (sndrome de los paales azules) Aspecto

Variaciones fisiolgicas Orina normal de miccin reciente: Clara, lmpido transparente. Si una orina se mantiene en cierto tiempo de reposo puede presentar turbidez por la precipitacin de sustancias amorfas entre ellos fosfatos y carbonatos amorfos en orinas alcalinas, producen un precipitado blanco que se disuelve con cido actico y en las orinas acidas uratos amorfos, cido rico se redisuelve al calentar la orina a 60OC. Cuando se eliminan por la orina sustancias, clulas, elementos biolgicos que alteran el aspecto de la misma, entre estos podramos sealar: Clulas epiteliales, leucocitos, eritrocitos, bacterias, lpidos. Importante saber qu cantidades ALTAS DE PROTEINAS Y GLUCOSA NO ALTERAN EL ASPECTO DE LA MISMA. POR LO TANTO, EL ASPECTO TANTO DE LA ORINA NORMAL COMO PATOLOGICA PUEDE SER: Claro, lmpido o transparente. Ligeramente turbia (moco generado en procesos inflamatorios de vas urinarias bajas como tracto genital. Turbia (el material impreso no puede ver a travs de la orina) se corresponde normalmente a bacterias o exceso de clulas epiteliales, eritrocitos, leucocitos. Opalescente o lechosa (presencia de grasa o linfa) Olor Dependiendo si la orina est concentrada o diluida. Varia por: Ingestin de alimentos o medicamentos.

 Mala recoleccin, manejo o conservacin del espcimen. Patolgicas. OLOR CARCATERISCO Y OLOR NO CARACTERISTICO

Densidad Para medir orinas concentrada y diluidas Densitmetro o urinometro Refractmetro Tiras reactivas

Examen qumico
Tiras reactivas El reporte de los resultados depende del material empleado, el mismo se puede informar de la siguiente manera: Si el analito es detectado=positivo, si no es detectado = negativo o normal En unidades de concentracin Como pequea, moderada o grandes cantidades En cruces 1 + 2+ 3 + 4+

Examen qumico pH Protenas Glucosa Cuerpos cetonicos Bilirrubina Urobilinogeno Leucocitos Nitritos Sangre pH La primera orina de la maana es acida, porque el sueo disminuye la ventilacin pulmonar y produce acidosis respiratoria. Durante o despus de la ingesta alimenticia se torna menos acida y ms alcalina por el fenmeno marea alcalina . Tipo de alimentacin; Dieta rica en protenas de animales la orina tiende a ser acida mientras una alimentacin rica en vegetales favorece la excrecin de orinas con tendencia a la alcalinidad. Durante ejercicio intenso se produce orinas acidas debido a la eliminacin de lactato y piruvato .

Proteinuria Proteinuria fisiolgica ( mucoproteina de tamm- horsfall ) sintetizada por clulas de los tbulos interviene en la formacin de cilindros normales. Mide funcin renal.

REACCION DE ROBERT Es una prueba para semicuantificar protenas se utiliza 1 parte cido ntrico concentrado y cinco partes de una solucin saturada de sulfato de magnesio este ltimo evita la precipitacin de la mucina. SU PRESENCIA ES ATRAVES DE LA FORMACION DE UNILLO BLANCO en el tubo de ensayo el cual es reportado en cruces mayormente. PROTEINAS BENCE JONES Para medir mieloma mltiple por electroforesis de orina. Glucosuria oCondicin prerenal : hiperglucemia

aumento de glucosa en sangre ,

oCondicin renal : Falla de reabsorcin tubular glucosuria sin hiperglucemia oGlucosuria fisiolgica en la orina de algunas gestantes Prueba de benedict En medio alcalino en presencia de calor actua sobre el sulfato de cobre reducindolo a oxido cuproso causando un cambio de color EL CUAL VIRA DEL AZUL A VERDE , NARANJA HASTA ROJO LADRILLO DEPENDIENDO DE LA CANTIDAD DE GLUCOSA Y SUSTANCIAS REDUCTORAS PRESENTES. Cetonuria El organismo usa como fuente energa principal los carbohidratos. El metabolismo defectuoso de ellos en el organismo requiere de la obtencin de energa necesaria incrementando el metabolismo de las grasas y como consecuencia se producen cantidades elevadas de acetil coenzima A (AcetiCoA) se activa la cetogenesis y se libera al torrente circulatorio una mayor cantidad de cuerpos

cetonicos ( cetogenia). Sangre Su positividad indica hematuria (hemates en orina), hemoglobinuria ( presencia de hemoglobina en orina). Bilirrubina y urobilinogeno Recomendacin proteger el espcimen de la luz para evitar la oxidacin a biliverdina de color verde y dar un falso resultado. La oxidacin del urobilinogeno a urobilina se incrementa cuando el espcimen poseen pH acido por eso es conveniente la primera orina de la maana. Nitritos Los nitratos que consumimos son eliminados por la orina en forma de nitrito. ESPCIMEN A VALORAR PRIMERAS HORAS DE LA MAANA. Las bacterias que contienen la enzima reductora de nitrato (nitrato reductasa ) y de esta manera los microorganismos realizan su proliferacin . Proteus, escherichia coli, enterobacter, klebsiella. Este examen no sustituye el urocultivo ya que no es especfico. Esterasa leucocitaria Cuando existe un elevada nmero de leucocitos y se acompaa con estudio microscpico de sedimento urinario para corroborar.

Examen microscpico o estudio del sedimento urinario

Sedimento urinario Es el producto de la sedimentacin de los elementos presentes en la orina en forma de suspensin. Esta sedimentacin se realiza con la ayuda de una centrifugacin mecnica y luego este sedimento se observa al microscopio Espcimen: La orina recomendada es la de la primera hora de la maana. El anlisis de sedimento urinario confirma, relaciona y complementa los resultados obtenidos en el anlisis fsico, qumico. Permite distinguir los elementos formes provenientes de cualquier parte del tracto urinario. Tcnica urinario adecuada para la obtencin de sedimento

Mtodo estandarizado: Se mezcla la orina en el recolector por inmersin Se vierten 10 a 12 ml de la orina mezclada en el tubo de ensayo. Centrifugar a 2000 rpm, durante 5 minutos. Se pipetea o decanta suave y rpidamente 9 u 11 ml de sobrenadante. Procurando no agitar, debe quedar 1 ml de orina del cual corresponde una parte al botn del sedimento y otra al sobrenadante . Luego de extraer el sobrenadante , el tubo se golpea suavemente contra la palma de la mano hasta que el

sedimento se suelta y se mezcla uniformemente. Se coloca sobre el portaobjeto 20 a 40 microlitros de sobrenadante aproximadamente ( micropipeta) mayormente se realiza al tanteo y se cubre con un cubreobjeto. Luego se coloca en el microscopio se enfoca con objetivo 10x y se observa con el de 40x para la identificacin de cada estructura y conteo de los elementos.

Qu vamos a observar en el examen microscpico de orina? Leucocitos Eritrocitos Piocitos Clulas epiteliales Clulas renales Muscina Hongos (Candida albicans principalmente), se observan levaduras. Bacterias Parsitos (Trichomonas vaginalis, Enterovius vermicularis).

Cristales Normales Cristales de orinas alcalinas oFosfato amorfo oFosfato triple oFosfato de calcio oBiurato de amonio Cristales de orinas acidas ocido rico oUratos amorfos

oOxalato de calcio Anormales o Cristal de bilirrubina o Colesterol o Cistina o Leucina o Tirosina Cilindros hialinos,creos,celulares(leucocitarios,eritrocitarios),granulare s,grasos,con microorganismo,pigmentados(bilirrubina,hemoglobina),mixto( granular,hialino),con morfologa especial ( cilindroides ). Contaminantes o Espermatozoides, talco. o o Medio ambiente esporas de algunos hongos como Alternara etc.

Del laboratorio : Cristal de almidn Fragmento de vidrio, grietas de cubreobjeto o portaobjeto .

Tema V rea hematologa

Hematologa LA HEMATOLOGIA ES LA RAMA DE LA MEDICINA ENCARGADA DEL ESTUDIO DEL TEJIDO SANGUINEO EN CUANTO A SU ETIOLOGIA, DIAGNOSTICO, TRATAMIENTO Y PRONOSTICO.

La obtencin de sangre para la realizacin de exmenes hematolgicos puede hacerse mediante: Puncin venosa Puncin capilar Puncin venosa La sangre es obtenida generalmente de las venas del antebrazo, de la mediana baslica y la mediana ceflica por ser las menos doloras y frecuentemente las ms visibles. Puncin capilar: La sangre capilar se obtiene por puncin del dedo con lancetas desechables. La puncin se hace generalmente en el pulpejo de unos de los dedos de la mano. En nios pequeos se punza la piel del dedo gordo del pie o el taln para obtener mayor volumen de sangre

En los nios pequeos y personas obesas, a veces es difcil localizar la vena, por lo tanto, se requiere la puncin capilar siempre que los exmenes requeridos lo permitan. TECNICA DE PUNCION CAPILAR Preparacin del dedo: El sitio de la puncin no debe estar edematoso, ciantico o frio. Se procede a hacer la limpieza de la piel con algodn o gasa empapado en alcohol y se deja secar o se seca con una gasa estril. Puncin del dedo: Debe hacerse en forma rpida, enrgica y efectiva. Tome el dedo del que va punzar sujetndolo fuertemente de manera que el paciente no pueda retirar la mano y disminuir as la sensacin dolorosa, la puncin es en sentido perpendicular a los surcos de las huellas digitales. DESECHAR LA PRIMERA GOTA DE SANGRE YA QUE VIENE MEZCLADA CON LQUIDO TISULAR. Para cada toma de muestra haga salir una nueva gota de sangre. Una vez tomada la cantidad de sangre requerida se coloca un pedazo de algodn estril en el sitio de la puncin por unos minutos hasta que cese la salida de sangre. Con muestras de sangre capilar se puede realizar gran parte de los exmenes hematolgicos que requieren pequeas cantidades de sangre.

Causas que pueden provocar hematoma o equimosis Por repetidas punciones a una misma vena Por retirar la aguja antes de quitar el torniquete Por no ejercer la presin

Una hematologa completa (H.C.) abarca el estudio de la serie blanca y de la serie roja. Adems abarca la cuenta de plaquetas y sus ndices de distribucin. Depende del laboratorio se puede incluir velocidad de sedimentacin globular (VSG), descripcin de frotis de sangre perifrica, grupo sanguneo y factor Rh. El estudio de la serie blanca incluye: Contaje de los glbulos blancos Formula leucocitaria Observacin de alteracin que pueden encontrarse en los glbulos blancos (vacuolas, granulaciones toxicas, hipersegmentacion de ncleos, etc.) El estudio de la serie roja incluye:

Contaje de glbulos rojos Dosificacin de hemoglobina Determinacin del valor de hematocrito ndices hematimetricos Observacin de la morfologa, tamao,
inclusiones de los glbulos rojos (Frotis). Adems se debe observar en un frotis

color, e

el aspecto o

morfologa de las plaquetas y estimar el nmero de ellas, es decir, si estn normales, aumentadas o disminuidas. VSG PUEDE INCLUIRSE EN EL ESTUDIO.

Eritrocitos Factores nutricionales para la produccin de eritrocitos cido flico Hierro Cianocobalamina o Vit. B12 Propiedades de los eritrocitos VSG Velocidad de sedimentacin globular Factores que afectan la velocidad de sedimentacin Factores patolgicos sedimentacin que afectan la velocidad de

Hematocrito Volumen de G.R /100cc de sangre.

Hemoglobina (Hb) Es conocida como heteroprotena de la sangre, de color rojo caracterstico, que transporta el oxgeno desde los rganos respiratorios hasta los tejidos, en mamferos, ovparos y otros animales. ES TRANSPORTADA POR LOS VASOS SANGUINEOS. Sntesis de la hemoglobina Funcin de la hemoglobina Tipos de hemoglobina Destruccin del eritrocito Frotis de sangre perifrica ndices hematimetricos

Leucocitos Las clulas sanguneas, efectores celulares de la respuesta inmune, se denominan glbulos blancos, ellos intervienen en la defensa del organismo contra sustancias extraas o agentes infecciosos (antgenos). Se pueden distinguir dos grupos de leucocitos: uno formado por los linfocitos y los monocitos y otro formado por los segmentados.

Plaquetas Participa en la hemostasia: Conjunto de mecanismos fisiolgicos y bioqumicos disponibles en el organismo para prevenir la prdida de sangre Niveles normales (150.000-300.000 celulas /mm3) Las plaquetas participan en la coagulacin sangunea al igual que protrombina, trombina, fibrina, fibringeno y factores de coagulacin solo que estos se encuentran en plasma sanguneo, son protenas, enzimas y no son clulas sanguneas. De all entonces se habla de los tiempos con el cual coagula la sangre ( TP y TPT) para medir esos tiempos de coagulacin se usa el CITRATO DE SODIO. Retraccin del coagulo y tiempo de sangra es muy antiguo .

Grupos sanguneos Antgeno:(Aglutingeno) Sustancia externa capaz de despertar sistema inmunolgico y crear Anticuerpos. Sustancia que reacciona con los productos de una respuesta inmune especifica. Anticuerpo: (Aglutinina) Sustancia que es elaborada por consecuencia de la aparicin de un antgeno especifico. ERITROBLASTOSIS FETAL

Anticoagulantes Son sustancias que inhiben o no permiten la coagulacin de la sangre. Los ms usados en hematologa son:

oHeparina oSales EDTA oCitrato de sodio

Heparina Impide el proceso de coagulacin Y produce alteracin en los glbulos rojos por lo que no se recomienda para estudiar la morfologa celular. Se usa en concentracin de 0.1 -0.2 mg/ ml de sangre. Aplicacin: Pueden ser tomadas con este anticoagulante las muestras para: VSG, Hto, Hb, cuenta de rojos y blancos, grupos sanguneos etc. Sales de EDTA cido etilendiamino tetracetico. EDTA se combina con los iones de calcio para evitar la coagulacin. 1-2 mg/ ml sangre. 0,5 ml de la solucin EDTA dipotasico o disodico al 1 % para 5 ml de sangre. Una gota debe contener 5 mg de EDTA y debe hacer incoagulable 5 ml de sangre. Aplicacin: Se utiliza en cuenta de blancos y rojos, plaquetas, hemoglobina, hematocrito, grupos sanguneos.

Citrato de sodio Se une al calcio inico de la sangre formando sales insolubles de calcio impidiendo que la sangre se coagule. Aplicacin: Se utiliza con preferencia en estudios de coagulacin ( Tp y Tpt) en la dilucin 1:10 una parte de anticoagulante y 9 partes de sangre.

Coloraciones de frotis sanguneos Coloracin de Wright Coloracin de Giemsa. Coloracin de wright Coloque las laminillas con el frotis hacia arriba sobre tapones de gomas invertidos en una bandeja de coloracin. Cubra las laminillas con solucin colorante de Wright y dejar actuar por 1 o 2 minutos. Aadir una cantidad igual de solucin amortiguadora evitando que la mezcla se derrame, soplar suavemente y deje actuar por 2 o 3 minutos. Debe aparecer brillo metlico sobre la superficie mezcla colorante. Lavar con agua e inclinar la laminilla para escurrir, secar al aire y limpiar el dorso de restos de colorante. Montar el extendido coloreado sobre una lmina con una gota de aceite de inmersin de tal manera que el extendido quede entre lmina y laminilla.

Tcnica de Coloracin de Giemsa Cubra los extendidos con alcohol metlico durante 3 a 5 minutos, no dejando que el alcohol se evapore. Incline el extendido y descarte el metanol Cubrir con solucin de giemsa diluida en proporcin 1:10 con agua destilada y dejar actuar por 20 minutos, Lavar con agua destilada y secar al aire libre Limpiar dorso de restos de colorantes Montar preparacin sobre una lmina con una gota de aceite de inmersin de manera que el extendido quede entre lamina y laminilla

DIFERENCIAS: Wright Nos sirve para la tincin de elementos de la sangre: Glbulos blancos, glbulos rojos, plaquetas. Giemsa Esta coloracin es til para descubrir parsitos de la sangre y otros protozoarios adems de teir los elementos de la sangre.