14

MICROBIOLOGIE

BIOFILMUL MICROBIAN CA FORM DE ORGANIZARE I COMUNICARE SUPERIOAR A BACTERIILOR

Microbial biofilm as a form of bacteria high organization and communication
Drd. Flavius St. Stnescu, Conf. Dr. Gabriela Bncescu, Conf. Dr. Marian Vladimir Constantinescu, Dr. Biol. Carmen Defta Facultatea de Medicin Dentar, Universitatea de Medicin i Farmacie Carol Davila, Bucureti

REZUMAT
Biolmul microbian este un agregat de microorganisme care se poate forma pe suprafee vii sau non-vii, i poate rspndit pretutindeni n natur. Procesele infecioase comune n care au fost implicate biolme includ infeciile tractului urinar, infecii la nivelul urechii medii, n formarea plcii dentare, a gingivitei, pe suprafeele inerte ale dispozitivelor implantate (catetere, valve cardiace protetice, implanturi dentare i dispozitive intrauterine). n prezenta lucrare, autorii fac o aducere la zi asupra cunotinelor actuale privind aspectele teoretice ale mecanismelor celulare care afecteaz ziologia i patologia microbian, iar buna nelegere a proceselor din biolmul microbian ar trebui s conduc la strategii eciente asupra controlului biolmului i la mbuntirea managementului pacientului. Cuvinte cheie: biolm microbian, formarea biolmului, antibiorezisten, prolaxia infeciilor, managementul pacientului

ABSTRACT
Microbial biolm is an aggregate of microorganisms which can be formed on living or non-living surfaces and can be spread everywhere in nature. Common infectious processes involving biolms include urinary tract infections, middle ear infections, dental plaque, gingivitis, inert surfaces of implanted devices (catheters, prosthetic heart valves, dental implants and intrauterine devices). In this paper the authors have done an update of the current knowledge of the theoretical aspects of cellular mechanisms that affect microbial physiology and pathology; hence a better understanding of the microbial biolm processes resulting in effective strategies of the control of biolm and improvement of patient management. Key words: microbial biolm, biolm formation, antibiotic resistant bacteria, infection prevention, patient management

INTRODUCERE
Biolmul microbian este un agregat de microorganisme n care celulele ader mpreun pe o suprafa, ind ncorporate ntr-o matrice sintetizat din substana polimeric extracelular (EPS). Biolmele se pot forma pe suprafee vii sau non-vii, i pot rspndite pretutindeni n natur (1,2). Micro-

organismele aparinnd biolmului sunt distincte ziologic fa de bacteriile care pot pluti sau se pot deplasa n mediu lichid numite planctonice, celule individuale din acelai sistem. Microorganismele care formeaz biolmul rspund la muli factori, care pot include: recunoaterea celular a situsurilor de ataare specice sau nonspecice pe o suprafa, indici nutriionali sau n

Adres de coresponden: Dr. Biol.Carmen Defta, Universitatea de Medicin i Farmacie Carol Davila, Str. Dionisie Lupu Nr. 37, Bucureti e-mail: carmendefta@yahoo.co.uk

284

REVISTA ROMN DE STOMATOLOGIE VOLUMUL LVIII, NR. 4, AN 2012

REVISTA ROMN DE STOMATOLOGIE VOLUMUL LVIII, NR. 4, AN 2012

285

unele cazuri de expunere a celulelor planctonice la concentraiile subinhibitorii de antibiotice (3,4). Cnd o celul trece la modul de cretere tip biolm, ea trece printr-o schimbare fenotipic n care garnitura de gene este reglat n mod difereniat (5).

MATRICEA EXTRACELULAR
Biolmul este susinut i protejat de o matrice de compui polimerici sintetizai de componentele proprii (EPS). EPS este o abreviere pentru toate substanele extracelulare polimerizate sau exopolizaharide. Aceast matrice protejeaz celulele din cadrul acestuia i faciliteaz comunicarea ntre ele prin semnale biochimice. S-au gsit unele biolme care conin canale de ap, ce ajut distribuia de substane nutritive i molecule de semnalizare. Aceast matrice este sucient de puternic pentru c, n anumite condiii, biolmul poate deveni fosilizat. Bacteriile care triesc ntr-un biolm au de obicei proprieti semnicativ diferite de bacteriile liber-plutitoare din aceeai specie, protejate de mediul dens al biolmului ce le permite s coopereze i s interacioneze n moduri diferite. Un beneciu al acestui mediu este rezistena crescut la detergeni i antibiotice, matricea dens extracelular i stratul exterior de celule protejeaz interiorul comunitii. n unele cazuri, rezistena la antibiotice poate crescut de o mie de ori (15). Transferul lateral de gene este mult facilitat n biolme i conduce la o structur mai stabil a acestora (16). Cu toate acestea, biolmele nu sunt ntotdeauna mai rezistente la antibiotice. Aceast rezisten la antibiotice, n ambele faze de celule staionare i biolm, poate cauzat de prezena celulelor persister (17). Biolmele sunt omniprezente; aproape ecare specie de microorganisme are mecanismele prin care acestea pot adera la suprafee i ntre ele. Biolmele se pot forma pe aproape orice suprafa imobil ntr-un mediu apos nesteril (sau foarte umed). Biolmele sunt prezente pe dinii celor mai multe animale, n formarea plcii dentare, caz n care pot produce carii i boli gingivale. Biolmele au fost gsite a implicate ntr-o mare varietate de infecii microbiene n organism, estimnd 80% din totalul infeciilor (18). Procesele infecioase comune n care au fost implicate biolme includ infeciile tractului urinar, infecii de cateter, infecii la nivelul urechii medii, n formarea plcii dentare, a gingivitei (19); cele date de lentile de contact (20) sunt implicate mai puin frecvent, n procese mult mai letale, cum ar endocardita, infeciile din broza chistic i infecii ale dispozitivelor permanente, cum sunt protezele comune, valvele cardiace i implanturi dentare (21,22,23). Mai recent, s-a constatat c biolmele bacteriene pot afecta vindecarea rnilor cutanate i reduc eciena n tratarea antibacterian a rnilor infectate ale pielii (24) .

FORMAREA BIOFILMULUI
Mecanismul de formare a biolmului microbian (Fig. 1) se deruleaz pe parcursul a mai multor etape (6). Fixarea iniial: ncepe cu o ataare reversibil de o suprafa a bacteriilor liber-plutitoare. Aceti primi coloniti ader slab la suprafa, legndu-se prin fore Van der Waals. Ataarea ireversibil: dac colonitii nu sunt ndeprtai imediat de pe suprafa, ei se pot ancora mai ferm folosindu-se de structurile de adeziune celular, cum sunt pilii. Maturizarea I. Primii coloniti faciliteaz sosirea altor celule prin furnizarea diverselor situsuri de adeziune, prin nceperea construciei matricei care ine unit biolmul. Cteva specii nu sunt capabile s se ataeze prin suprafeele lor, dar adesea sunt capabile s se ancoreze la matrice sau direct la primii coloniti. n timpul colonizrii aceste celule sunt capabile s comunice prin molecule semnal quorum sensing (Fig. 2) sau folosind produi ca lactonele homoserin acilate (AHL). Maturizarea a II-a. Odat iniiat colonizarea, biolmul crete prin combinaia dintre diviziunea celular i recrutarea de noi celule. Etapa nal a formrii biolmelor este cunoscut sub numele de dezvoltare, reprezentnd stadiul n care biolmul este stabil i se poate modica numai n form i dimensiune. Dezvoltarea unei colonii de celule agregate sub forma biolmului poate permite s e din ce n ce mai rezistent la antibiotice. Dispersia de celule din colonia biolmului. Aceasta etap permite biolmelor s se rspndeasc i s colonizeze noi suprafee, constituind o etap esenial a ciclului de via a biolmelor. Enzimele care degradeaz matricea extracelular a biolmului sunt dispersin B (DspB) i deoxyribonucleazele, cu rol n dispersia acestora (7,8). Enzimele de degradare a matricii biolmelor pot utilizate ca ageni anti-biolm (9,10). Dovezi recente au artat c un mesager de acid gras, acidul cis-2-decenoic, este capabil s determine inhibarea dispersiei i creterea coloniilor biolmului. S-a demonstrat, de asemenea, c la concentraii subtoxice, oxidul de azot declaneaz dispersia biolmelor (12,13). Oxidul nitric poate potenial folosit pentru tratamentul pacienilor care sufer de infecii cronice care au la baz biolmele (14).

286

REVISTA ROMN DE STOMATOLOGIE VOLUMUL LVIII, NR. 4, AN 2012

FIGURA 1. Mecanismul de formare a biolmului microbian (dup Finkel, J.S., Mitchell, A.P. Nature Reviews Microbiology, 2011, 9, 109-118)

FIGURA 2. Celula de comunicare molecula semnal (quorum sensing) i comunicarea cu diferite bacterii n formarea biolmelor

Recent a fost demonstrat c biolmele sunt prezente pe esutul eliminat de la 80% dintre pacienii care au suferit intervenii chirurgicale n sinuzita cronic (25). Biolme au fost, de asemenea, menionate pe dou din 10 probe de la pacienii sntoi. Biolmele se pot forma pe suprafeele inerte ale dispozitivelor implantate, cum ar catetere, valve cardiace protetice i dispozitive intrauterine (26).

COMUNICAREA BACTERIAN N BIOFILM

Bacteriile comunic intens unele cu altele i utilizeaz o abordare comun pentru a facilita supravieuirea n medii ostile. O ierarhie de ci de semnalizare de la celul la celul regleaz dezvoltarea bacteriilor, metabolismul, formarea biolmelor, expresia virulenei i o multitudine de alte

funcii eseniale n populaiile de bacterii. Noiunea c bacteriile pot comunica reciproc i pot coordona modelele proprii de asalt mpotriva gazdelor sensibile este bine cunoscut. Aceste reele de semnalizare reprezint o strategie de supravieuire, prin care agenii patogeni se sustrag de la aprarea antimicrobian i copleesc gazda. Aceste semnale de comunicare pot depi barierele de specie i chiar barierele de regn. Moleculele comunicrii prin semnale pot regla programele de transcripie ale genomului uman n avantajul agentului patogen. Hormonii de stres umani i citokinele pot detectai de ctre sistemele sensibile a comunicrii prin semnale. Prin acest mecanism, agentul patogen poate detecta starea ziologic a gazdei, oferind posibilitatea de a invada atunci cnd pacientul este cel mai vulnerabil. Aceste sisteme microbiene de

REVISTA ROMN DE STOMATOLOGIE VOLUMUL LVIII, NR. 4, AN 2012

287

comunicare destul de sosticate, pot dovedite a datorate agenilor patogeni, conducnd la obiective convenabile pentru intervenia terapeutic n lupta noastr continu de a controla agenii patogeni microbieni (27).

COMUNICAREA PRIN SEMNALE QS

Cnd se confrunt pentru prima dat cu o nou gazd, ecare agent microbian cu potenial patogen prezint trei opiuni posibile. Microorganismele se pot stabili i pot avea rol de colonizare i stabilizare a biolmelor, sau se pot sustrage i rula o colonizarea tranzitorie, e s achiziioneze elemente nutritive, i apoi s cute o alt gazd. Alternativ, agentul patogen ar putea emite o und de avertisment, exprimnd complet toi factorii de virulen, urmat de invadarea gazdei. Acest fapt poate surprinde gazda, decizie care de cele mai multe ori nu este fcut n faza de bacterie izolat. Ideea c o bacterie supravieuiete ca un soldat singuratic al crui succes sau eec ar depinde de simpla ntmplare, a fost pn acum singura viziune mai complex i nuanat a patogenezei microbiene. Invadarea cu succes a gazdei este acum neles ca ind un proces colectiv, bazat pe schimbul de informaie microbian i colaborare activ. (1,2,28,29) Factorii patogeni folosesc o serie de semnale chimice i sisteme de senzori, care se angajeaz n folosul comunitilor bacteriene pentru a rspunde genetic, n acord cu condiiile specice din micromediul existent. Un domeniu n curs de dezvoltare, numit sociomicrobiologie, ncepe s descopere avantajele evolutive, ecologice, funcionale i ale traiului n comun ntre populaiile bacteriene. O component central a comunicrii bacteriene este cunoscut sub numele de comunicare prin semnale (QS). Aceasta este denit ca ind capacitatea de a detecta extracelular, micromoleculele de semnal i de a modica expresia genelor, ca rspuns la densitatea populaiei bacteriene. Elemente ale aparatului bacterian de comunicare prin semnale QS sunt cunoscute c servesc unei mari varieti de funcii, dincolo de o simpl estimare a densitii de celule (3,4,30,31). Bacteriile utilizeaz semnale QS pentru a coordona expresia genelor lor. Mai mult dect att, aceste semnale sensibile sunt utilizate pentru a inhiba sau activa programe de transcripie printre tulpinile bacteriene concurente i alte specii existente n cadrul aceluiai micromediu (5,32). Comunicarea poate trece chiar i de graniele regnului, moleculele efectoare bacteriene ale sistemului QS, pot modica programele de transcripie gsite

n celulele eucariote epiteliale i celulele imune efectoare (4,6,31,33). Ageni microbieni potenial patogeni se confrunt cu decalaje largi n ncercarea de a invada cu succes o gazd uman. Un repertoriu impresionant al aprarii antibacteriene ntmpin orice microorganism care traverseaz bariera epitelil uman (7-9,34,35,36). Ca rspuns, o multitudine de arme defensive i ofensive destul de ingenioase sunt exprimate de ctre invadatorii microbieni. Un agent patogen trebuie s se sustrag rspunsurilor celulare i umorale nnscute i dobndite ale sistemului imunitar ale gazdei, replicarea la o rat sucient pentru a coplei mecanisme de eliminare ale gazdei, provoac un prejudiciu esuturilor. Printr-o scurt trecere n revist vor discutate mecanismele prin care bacteriile comunic, dar i modul n care aceast capacitate este exploatat de ctre agenii patogeni astfel nct s invadeze cu succes gazda.

SISTEMUL DE COMUNICARE PRIN SISTEME QS LA PATOGENII MICROBIENI

Muli ageni patogeni, inclusiv Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Bacteroides, Yersinia, Burkholderia i Enterococcus spp., i ali ageni patogeni importani clinic, cum sunt stalococii i streptococii, conin gene QS. Comunicarea de la celul la celul prin intermediul sistemelor QS ar putea contribui la reglarea global a mai multor gene bacteriene, inclusiv genele de virulen, n condiiile specice de mediu i de cretere. Pn la 15% din cadrele de citire deschise la bacterii sunt controlate de molecule QS (4,31). Moleculele de semnal QS pot promova creterea tulpinilor bacteriene i pot inhiba simultan creterea altor bacterii (15, 42), sau chiar fungi, organisme care concureaz pentru aceeai ni ecologic (6,16,33,43). Produsul genei QS regleaz o multitudine de programe de transcripie la bacterii in vitro i probabil, in vivo. Sistemul QS controleaz formarea biolmelor (17-28, 44-54), potenialul de cretere, sporulaia, expresie rezistenei la antibiotice, transferul de ADN, expresia virulenei, autoliza, tolerana la stres oxidativ, activitatea metabolic, mobilitatea, sinteza antibioticelor de ctre bacteriile productoare de antibiotice, comportamentul sesil fa de cel planctonic i, cel mai important, factorii genetici determinani de virulen (1-3, 11-14, 28-30, 3741). Agenii patogeni posed o serie de gene cu valoare n patogenitate, ce sunt diseminate sub form de insule n cromozom, n plasmide i bacterio-

288

REVISTA ROMN DE STOMATOLOGIE VOLUMUL LVIII, NR. 4, AN 2012

fagii lizogenici, care funcioneaz mpreun pentru a media virulena microbian (29,30,55,56). Acest complex total de gene ale virulenei este menionat ca virulom (31,57). Reglarea global a virulomului se realizeaz prin mecanisme QS.

COMUNICAREA PRIN SEMNALE (QS) N BIOFILME I N VIAA COMUN A BACTERIILOR

QS este gndit s joace un rol n producia de biolme sntoase i pe deplin dezvoltate. Aceste complexe microbiene deriv, denind structuri multistraticate arhitectural i formnd comuniti relativ stabile bacteriene care triesc n sesile ntr-un mediu protejat (2,11,47-50,29,38,71-74). Prezena pe scar larg a biolmelor de pe corpuri strine (de exemplu, infecii de dispozitive protetice, implanturi etc.) sau suprafee gazd (suprafee epiteliale i endovasculare) atest avantajele oferite de supravieuirea biolmelor bacteriene (47,51,71,75). Ritmul lent al metabolismului i locaia zic a acestora n cadrul structurilor de biolm exocapsular protejeaz bacteriile mpotriva efectului bactericid al antibioticelor i mecanismul de clearance al gazdei prin opsonine i neutrole (28,54). Consecinele clinice ale infeciei asociate cu biolmele mature sunt semnicative. Tratamentul prelungit cu antibiotice este adesea necesar pentru eradicarea acestor infecii (osteomielita, endocardita etc.); din pcate, chiar i aceast strategie de multe ori eueaz, necesitnd excizia chirurgical a biolmului contaminant (1,18,50,52,28,45,74,76). Formarea biolmelor este un proces cu mai multe etape ind o ataare microbian la suprafa, agregare de tip celule la celule i proliferarea lor, producia de matrice exopolizaharidic, creterea, maturizarea i, n cele din urm, detaarea sau degradarea biolmelor (3,20,49,50,30,47,73,74). Sistemele QS par s e implicate n toate etapele de formare a biolmelor. Ele regleaz densitatea populaiei i activitatea metabolic n biolmul matur pentru a se potrivi cu cerinele nutriionale i resursele disponibile. Bacteriile care locuiesc n biolme au programe semnicativ diferite de transcripie fa de bacteriile planctonice vii libere ale aceleiai tulpini. Dovezi recente n Streptococcus pneumoniae indic faptul c organismele existente ntr-o stare sesil (sesil organism bentonic xat permanent sau temporar de substrat prin baza sa

sau prin structuri speciale) n biolm sunt mai n msur s stabileasc infecii localizate, de exemplu n esutul pulmonar, dect organismele izogenice ntr-o stare planctonic ziologic (47,71). Reversul a fost gsit n modele experimentale de bacteriemii primare. Organisme vii libere planctonice au fost semnicativ mai virulente n infeciile bacteriene dect acelai organism crescut din biolme (47,71). Reelele QS, de asemenea, par a utile n eliberarea de bacterii din matricea extracelular a biolmelor. Sanctuarul furnizez protecia biolmului i constituie o problem n evadarea din matricea extracelular a bacteriilor care locuiesc aici. Atunci cnd densitatea populaiei din biolme devine mai mare, unele dovezi sugereaz c ar putea utiliza semnale AI-2 pentru a reduce producerea de adeziv, polizaharidul intercelular, astfel permind bacteriilor s scape din biolm (20,31,47,57). Peptidele scurte, cu caliti de detergent, se a sub controlul desfurat de QS pentru a elibera bacterii din biolm atunci cnd densitatea de celule este mare. Bacteriile sesile din biolm ofer o surs continu de bacterii planctonice, extinznd populaia de bacterii. Acest lucru este clar demonstrat de eliberarea n continuare a bacteriilor n uxul sanguin la pacienii cu endocardit din biolme endovasculare n vegetaie (50,74). Biolmul ca mod comun de via se poate extinde chiar i la populaiile microbiene care locuiesc n spaiul intracelular. Comunitile bacteriene intracelulare au fost identicate n celulele epiteliale la unii pacieni cu infecii aparent necomplicate ale tractului urinar. Rosen i colab. au raportat recent detectarea de comuniti bacteriene intracelulare, la 18% dintre femeile tinere, active sexual, cu cistite E. coli (53,77). Pn la 41% din probele de urin de la femeile cu cistit au prezentat forme lamentoase bacteriene, o caracteristic a comunitilor sesile bacteriene. Dovezi citologice bacteriene intracelular n cadrul comunitilor de celulele epiteliale exfoliate ale cilor urinare sunt uor demonstrabile la femeile cu cistit acut. Se pare c unele E. coli uropatogene au evoluat i au capacitatea de a invada garnituri de celulele epiteliale n cazul, n care acestea locuiesc n comuniti cvasistabile intracelulare, evitnd supravegherea sistemului imunitar i a mecanismelor de clearance urinar (53,54,77, 78,27).

REVISTA ROMN DE STOMATOLOGIE VOLUMUL LVIII, NR. 4, AN 2012 BIBLIOGRAFIE

1. Hall-Stoodley L., Costerton J.W., Stoodley P. Bacterial biolms: from the natural environment to infectious diseases. Nat Rev Microbiol. 2004 Feb; 2(2):95-108. 2. Lear G., Lewis G.D. Microbial Biolms : Current Research and Applications. Norfolk: Caister Academic Press, 2012. 3. Karatan E., Watnick P. Signals, regulatory networks, and materials that build and break bacterial biolms Microbiol Mol Biol Rev. 2009 Jun; 73(2):310-47. 4. Hoffman L.R., DArgenio D.A., MacCoss M.J., etc. Aminoglycoside antibiotics induce bacterial biolm formation. Nature. 2005 Aug 25; 436(7054):1171-5. 5. An D., Parsek M.R. The promise and peril of transcriptional proling in biolm communities. Curr Opin Microbiol. 2007 Jun; 10(3):292-6. 6. Finkel J.S., Mitchell A.P. Genetic control of Candida albicans biolm development. Nature Reviews Microbiology, 2011, 9, 109-118 7. Kaplan J.B., Ragunath C., Ramasubbu N., Fine D.H. Detachment of Actinobacillus actinomycetemcomitans biolm cells by an endogenous beta-hexosaminidase activity. J Bacteriol. 2003 Aug; 185(16):4693-8.. 8. Izano E.A., Amarante M.A., Kher W.B., Kaplan J.B. Differential roles of poly-N-acetylglucosamine surface polysaccharide and extracellular DNA in Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis biolms. Appl Environ Microbiol. 2008 Jan; 74(2):470-6. 9. Kaplan J.B., Ragunath C., Velliyagounder K., et al. Enzymatic detachment of Staphylococcus epidermidis biolms. Antimicrob Agents Chemother. 2004 Jul; 48(7):2633-6. 10. Xavier J.B., Picioreanu C., Rani S.A., et al. Biolm-control strategies based on enzymic disruption of the extracellular polymeric substance matrix--a modelling study. Microbiology. 2005 Dec; 151(Pt 12):3817-32. 11. Davies D.G., Marques C.N. A fatty acid messenger is responsible for inducing dispersion in microbial biolms. J Bacteriol. 2009 Mar; 191(5):1393-403. 12. Barraud N., Hassett D.J., Hwang S.H., et al. Involvement of nitric oxide in biolm dispersal of Pseudomonas aeruginosa. J Bacteriol. 2006 Nov; 188(21):7344-53.. 13. Barraud N., Storey M.V., Moore Z.P., et al. Nitric oxide-mediated dispersal in single- and multi-species biolms of clinically and industrially relevant microorganisms. Microb Biotechnol. 2009 May; 2(3):370-8. 14. Dispersal of Biolm in Cystic Fibrosis using Low Dose Nitric Oxide. University of Southampton 2008-2011. http://www.southampton.ac.uk/ biosci/research/projects/dispersal_of_biolms_in_cystic_brosis.page 15. Stewart P.S., Costerton J.W. Antibiotic resistance of bacteria in biolms. Lancet. 2001 Jul 14; 358(9276):135-8. 16. Molin S., Tolker-Nielsen T. Gene transfer occurs with enhanced efciency in biolms and induces enhanced stabilisation of the biolm structure. Curr Opin Biotechnol. 2003 Jun; 14(3):255-61. 17. Spoering A.L., Lewis K. Biolms and planktonic cells of Pseudomonas aeruginosa have similar resistance to killing by antimicrobials. J Bacteriol. 2001 Dec; 183(23):6746-51. 18. Research on microbial biolms (PA-03-047). NIH, National Heart, Lung, and Blood Institute. 2002-2005. http://grants.nih.gov/grants/guide/ pa-les/PA-03-047.html/. 19. Rogers A.H. Molecular Oral Microbiology. Norfolk: Caister Academic Press, 2008: 65-108. 20. Imamura Y., Chandra J., Mukherjee P.K., et al. Fusarium and Candida albicans biolms on soft contact lenses: model development, inuence of lens type, and susceptibility to lens care solutions. Antimicrob Agents Chemother. 2008 Jan; 52(1):171-82. 21. Lewis K. Riddle of biolm resistance. Antimicrob Agents Chemother. 2001 Apr; 45(4):999-1007. 22. Parsek M.R., Singh P.K. Bacterial biolms: an emerging link to disease pathogenesis. Annu Rev Microbiol. 2003;57:677-701. 23. Busscher H.J., Rinastiti M., Siswomihardjo W., van der Mei H.C. Biolm formation on dental restorative and implant materials. J Dent Res. 2010 Jul; 89(7):657-65. 24. Davis S.C., Ricotti C., Cazzaniga A., et al. Microscopic and physiologic evidence for biolm-associated wound colonization in vivo. Wound Repair Regen. 2008 Jan-Feb; 16(1):23-9. 25. Sanclement J., Webster P., Thomas J., Ramadan H.H. Bacterial biolms in surgical specimens of patients with chronic rhinosinusitis. Laryngoscope. 2005 Apr; 115(4):578-82.

289

26. Auler M.E., Morreira D., Rodrigues F.F., et al. Biolm formation on intrauterine devices in patients with recurrent vulvovaginal candidiasis. Med Mycol. 2010 Feb; 48(1):211-6. 27. Shadaba Asad and Steven M. Opal Bench-to-bedside review: Quorum sensing and the role of cell-to-cell communication during invasive bacterial infection. Crit Care. 2008;12(6):236. 28. Miller M.B., Bassler B.L. Quorum sensing in bacteria. Annu Rev Microbiol 2001, 55:165-199. 29. Greenberg E.P. Bacterial communication and group behavior. J Clin Invest 2003, 112:1288-1290. 30. Cmara M., Williams P., Hardman A. Controlling infection by tuning in and turning down volume of bacterial small-talk. Lancet Infect Dis 2002, 2:667-676. 31. Williams P. Quorum sensing, communication and cross-kingdom signaling in the bacterial world. Microbiology 2007, 153:3923-3928. 32. Bassler B.L. Small talk. Cell-to-cell communication in bacteria. Cell 2002, 109:421-424. 33. Shiner E.K., Rumbaugh K.P., Williams S.C. Inter-kingdom signaling: deciphering the language of acyl homoserine lactones. FEMS Microbiol Rev 2005, 29:935-947. 34. Akira S., Uematsu S., Takeuchi O. Pathogen recognition and innate immunity. Cell 2006, 124:783-801. 35. Beutler B., Jiang Z., Georgel P., Crozat K., Croker B., Rutschmann S., Du X., Hoebe K. Genetic analysis of host resistance: Toll-like receptor signaling and immunity at large. Annu Rev Immunol 2006, 24:353-389 36. Hermann C. Variability of hostpathogen interaction. J Endotoxin Res 2007, 13:199-218. 37. Nealson K.H., Platt T., Hastings J.W. Cellular control of the synthesis and activity of the bacterial luminescence system. J Bacteriol 1970, 104:313-322. 38. Fuqua C., Greenberg E.P. Listening in on bacteria: acyl-homoserine lactone signaling. Nat Rev Mol Cell Biol 2002, 3:685-695. 39. Parsek M.R., Greenberg E.P. Sociomicrobiology: the connections between quorum sensing and biolms. Trends Microbiol 2005, 13:27-33. 40. Antunes L.C.M., Ferreira L.Q., Ferreira E.O., et al. Bacteroides species produce Vibrio harveyi autoinducer 2-related molecules. Anaerobe 2005, 11:295-301. 41. Keller L., Surette M.G. Communication in bacteria: an ecological and evolutionary perspective. Nat Rev Microbiol 2006, 4:249-258. 42. Qazi S., Middleton B., Muharram S.H., et al. N-acyl homoserine lactones antagonize virulence gene expression and quorum sensing in Staphylococcus aureus. Infect Immun 2006, 74:910-919. 43. Parsek M.R., Greenberg E.P. Acyl-homoserine lactone quorum sensing in Gram-negative bacteria: a signaling mechanism involved in associations with higher organisms. Proc Natl Acad Sci USA 2000, 97:8789-8793. 44. Kendall M.M., Sperandio V. Quorum sensing by enteric pathogens. Curr Opin Gastroenterol 2007, 23:10-15. 45. Kirisits M.J., Parsek M.R. Does Pseudomonas aeruginosa use intercellular signaling to build biolm communities? Cell Microbiol 2006, 8:1841-1849. 46. Duan K., Dammel C., Stein J., et al. Modulation of Pseudomonas aeruginosa gene expression by host microora through interspecies communication. Mol Microbiol 2003, 50:1477-1491. 47. Yarwood J.M., Schlievert P.M. Quorum sensing in Staphylococcus infections. J Clin Invest 2003, 112:1620-1625. 48. Mack D., Davies A.P., Harris L.G., et al. Microbial interactions in Staphylococcus epidermidis biolms. Anal Bioanal Chem 2007, 387:399-408. 49. Conway B.A., Venu V., Speert D.P. Biolm formation and acyl homoserine lactone production in the Burkholderia cepacia complex. J Bacteriol 2002, 184:5678-5685. 50. Giacometti A., Cirioni O., Gov Y., et al. RNA III inhibiting peptide inhibits in vivo biolm formation by drug-resistant Staphylococcus aureus. Antimicrob Agents Chemother 2003, 47:1979-1983. 51. Tateda K., Standiford T.J., Pechere J.E., Yamaguchi K. Regulatory effects of macrolides on bacterial virulence: potential role as quorumsensing inhibitors. Curr Pharm Des 2004, 10:3055-3065 52. Kong K.F., Vuong C., Otto M. Staphylococcus quorum sensing in biolm formation and infection. Int J Med Microbiol 2006, 296:133-139.

290

REVISTA ROMN DE STOMATOLOGIE VOLUMUL LVIII, NR. 4, AN 2012

epinephrine in a luxS mutant of enterohemorrhagic Escherichia coli. Infect Immun 2007, 75:4875-4884. 67. Walters M., Sperandio V. Autoinducer 3 and epinephrine signaling in the kinetics of locus of enterocyte effacement gene expression in enterohemorrhagic Escherichia coli. Infect Immun 2006, 74:5445-5455. 68. Alverdy J., Zaborina O., Wu L. The impact of stress and nutrition on bacterial-host interactions at the intestinal epithelial surface. Curr Opin Clin Nutr Metab Care 2005, 8:205-209. 69. Gov Y., Borovok I., Korem M., et al. Quorum sensing in staphylococci is regulated via phosphorylation of three conserved histidine residues. J Biol Chem 2004, 279:14665-14672. 70. Mylonakis E., Engelbert M., Qin X., et al. The Enterococcus faecalis fsrB gene, a key component of the fsr quorum-sensing system, is associated with virulence in the rabbit endophthalmitis model. Infect Immun 2002, 70:4678-4681. 71. Oggioni M.R., Trappetti C., Kadioglu A., et al. Switch from planktonic to sessile life: a major event in pneumococcal pathogenesis. Mol Microbiol 2006, 61:1196-1210. 72. Balaban N., Giacometti A., Cirioni O., et al. Use of the quorumsensing inhibitor RNAIII inhibiting peptide to prevent biolm formation in vivo by drug-resistant Staphylococcus epidermidis. J Infect Dis 2003, 187:625-630. 73. OToole G., Kaplan H.D., Kolter R. Biolm formation as microbial development. Ann Rev Microbiol 2000, 54:81-127. 74. Wolcott R.D., Ehrlich G.D. Biolms and chronic infections. JAMA 2008, 299:2682-2684. 75. Smith R.S., Iglewski B.H. P. aeruginosa quorum-sensing systems and virulence. Curr Opin Microbiol 2003, 6:56-60. 76. DellAcqua G., Giacometti A., Cirioni O., et al. Suppression of drug-resistant staphylococcal infections by the quorum-sensing inhibitor RNAIII-inhibiting peptide. J Infect Dis 2004, 190:318-320. 77. Rosen D.A., Hooton T.M., Stamm W.E., et al. Detection of intracellular bacterial communities in human urinary tract infection. PLoS Med 2007, 4:e329 78. Mysorekar I.U., Hultgren S.J. Mechanisms of uropathogenic Escherichia coli persistence and eradication from the urinary tract. Proc Natl Acad Sci USA. 2006 Sep 19;103(38):14170-5.

53. Costerton W., Veeh R., Shirtliff M., Pasmore M., Post C., Ehrlich G. The application of biolm science to the study and control of chronic bacterial infections. J Clin Invest 2003, 112:1466-1477. 54. Cerca N., Jefferson K.K., Oliveira R., Pier G.B., Azeredo J. Comparative antibody-mediated phagocytosis of Staphylococcus epidermidis cells grown in a biolm or in the planktonic state. Infect Immun 2006, 74:4849-4855. 55. Hacker J., Kaper J.B. Pathogenicity islands and the evolution of microbes. Annu Rev Microbiol 2000, 54:641-679. 56. Jenner R.G., Young R.A. Insights into host responses against pathogens from transcriptional proling. Nat Rev Microbiol 2005, 3:281-294. 57. Novick R.P. Autoinduction and signal transduction in the regulation of staphylococcal virulence. Mol Microbiol 2003, 48:1429-1449. 58. Wagner V.E., Li L.L., Isabella V.M., Iglewski B.H. Analysis of the hierarchy of quorum-sensing regulation in Pseudomonas aeruginosa. Anal Bioanal Chem 2007, 387:469-479. 59. Ahmer B.M.M. Cell-to cell signaling on Escherichia coli and Salmonella enterica. Mol Microbiol 2004, 52:933-945. 60. Wen Z.T., Burne R.A. LuxS-mediated signaling in Streptococcus mutans is involved in regulation of acid and oxidative stress tolerance and biolm formation. J Bacteriol 2004, 186:2682-2691. 61. Winzer K., Hardie K.R., Burgess N., et al. LuxS: its role in central metabolism and the in vitro synthesis of 4-hydroxy-5-methyl-3 (2H) furanone. Microbiology 2002, 148:909-922. 62. Hardie K.R., Cooksley C., Green A.D., Winzer K. Auto-inducer 2 activity in Escherichia coli. Culture supernatants can be actively reduced despite maintenance of an active synthase LuxS. Microbiology 2003, 149:715-728. 63. Sztajer H., Lemme A., Vilchez R., et al. Autoinducer-2-regulated genes of Streptococcus mutans UA 159 and global metabolic effect of the LuxS mutation. J Bacteriol 2008, 190:401-415. 64. De Keersmaecker S.C.J., Sonck K., Vanderleyden J. Let LuxS speak up in AI-2 signaling. Trends Microbiol 2006, 14:114-119. 65. Li M., Villaruz A.E., Vadyvaloo V., et al. AI-2-dependent gene regulation in Staphylococcus epidermidis. BMC Microbiol 2008, 8:4. 66. Kendall M.M., Rasko D.A., Sperandio V. Global effects of the cell-to-cell signaling molecules autoinducer-2, autoinducer-3, and