Chimie Analitica

PREFAA
n ultimele decenii, metodele analitice de separare, identificare i dozare au cunoscut o ampl dezvoltare datorate elaborrii unor concepte, instrumente i metodologii experimentale de mare finee i performan, bazate pe interrelaia proprietate fizic-compoziie chimic. Principiile directoare care au stat la baza elaborrii acestui curs reflect necesitatea asamblrii i corelrii noilor concepte si achiziii tiinifice din domeniul chimiei analitice cerinelor actuale de pregtire n profil a studenilor. Conform acestor principii, s-a urmrit ca prin structura i organizarea materialului prezentat, cursul de chimie analitic s ndeplineasc scopul formativ i informativ pe care l implic actuala pregtire a studenilor. n contextul acestui demers, cursul abordeaz ntr-o viziune sintetic aspecte referitoare att la metodele clasice ale chimiei analitice ct i la metode fizico-chimice de analiz. Sub aspect didactic si operaional, structura cursului este conceput n trei pri. Prima parte abordeaz conceptele fundamentale cu care opereaz chimia analitic, si anume cele referitoare la reactivi si reacii analitice. n cadrul acestui demers s-a urmrit necesitatea asigurrii unui fundament teoretic indispensabil asimilrii cunotinelor asociate obiectivelor i metodelor chimiei analitice. Partea a doua a lucrrii trateaz metodele chimice de analiz calitativ i cantitativ , un spaiu mai larg fiind acordat principiilor fundamentale ale volumetriei datorit aplicabilitii mai largi a acesteia n laboratoarele de profil. Ultima parte a cursului cuprinde conceptele fundamentale ale metodelor fizico-chimice de analiz necesare nelegerii fenomenelor i principiilor de funcionare a aparaturii respective. Astfel, sunt prezentate metodele optice si electrochimice de analiz , precum i aspecte referitoare la metode de separare i caracterizare (cromatografia i electroforeza). n ansamblul lucrrii, conceptele, principiile si noiunile expuse sunt ilustrate prin exemple referitoare i la aspecte biochimice , clinice i de mediu nconjurtor, aspecte necesare orientrii corecte a unui specialist n selecionarea materialului i metodei analitice corespunztoare scopului propus.
Cursul de chimie analitic se adreseaz , n principal, studenilor de la Colegiul de Igien i Laborator Veterinar din Universitile de tiine Agronomice i Medicin Veterinar, precum i studenilor de la facultile de Chimie, Biochimie, Biologie, Farmacie, Medicin, Ecologie, Biotehnologie etc precum i celor crora noiunile de chimie analitic le sunt necesare pentru nelegerea i aprofundarea altor domenii conexe. Autoarea exprim mulumiri Acad. Praf. Dr. Doc. M. erban pentru sugestiile i discuiile utile referitoare la organizarea i definitivarea textului acestui curs de chimie analitic.
CUPRINS
Noiuni introductive de chimie analitic 1. Clasificarea metodelor analitice 1.1.Erori 2. Reaetfi i reactivi analitici 2.1. Clasificarea reactivilor analitici 2.2. Sensibilitatea reactivilor analitici ...
9 11 12
13 13 14 15 15 16 16 17 17 18 19 19 20 21 22 22 24 24 24 25 26 26 29 31 33 33 34 34
3. Reversibilitatea reaciilor analitice. 3.t. Legea echilibrului chimic (legea aciunii m a s e l o r ) . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2. Deplasarea echilibrului chimic, . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2.1. Influena concentraiei... . . . 3.2.2. Influena temperaturii 3.2.3. Influena presiunii 3.3. Echilibre chimice n sisteme eterogene.. 3.4. Echilibre lente sau metastabile 3.5. Aplicaii ale conceptului de echilibru 3.5.1. Echilibre n soluii de electrolii. Constant de ionizare 3.5.2. Echilibre n sisteme redox.. 3.5.3. Echilibre de complexare 3.5.4. Echilibre solid-lichid. Produs de solubHitate. 4. Metode chimice de analiz 4.1. Analiza chimic calitativ. 4.1.1. Clasificarea cationilorn grupe analitice 4.1.1.1. Grupa cationilor fr reactiv de grup 4.1.1.2. Grupa carbonatului de amoniu... 4.1.1.3. Grupa sulfurii de amoniu. . . ..... 4.1.1.4. Grupa hidrogenului sulfurat.. . 4.1.1.5. Grupa acidului clorhidric 4.1.2. Clasificarea anionilor n grupe analitice . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.1.2.1. Reacii de identificare pentru ionul carbonat. 4.1.2.2. Reacii de identificare pentru ionul acetat 4.1.2.3. Reacii de identificare pentru ionul azotit (nitrit).. .
CHIMIE ANALITIC
4.1.2.4. Reacii de identificare pentru ionul azotat (nitrat) 4.1.2.5. Reacii de identificare pentru ionul fosfat 4.1.2.6. Reacii de identificare pentru ionul sulfura . 4.1.2.7. Reacii de identificare pentru ionul sulfit 4.1.2.8. Reacii de identificare pentru ionul sulfat 4.1.2.9. Reacii de identificare pentru ionul fluoruri . 4.1.2.10. Reacii de identificare pentru ionul clorur. . . . . 4.1.2.11. Reacii de identificare pentru Ionul bromur. . .-, 4.1.2.12. Reacii de identificare pentru ionul iodur . . .... 4.2. Analiza chimic cantitativ...... 4.2.1. Analiza volumetric.. I . . . . . . . . ... . ..... ..... . . , . 4.2.1.1. Clasificarea metodelor volumetrice de analiz 4.2.1.2. Volumetria bazat pe reacii de neutralizare 4.2.1.2.1. A l c a l i m e t r i a . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ... . .... 4.2.1.2.2. Acidimetria. . . . . . ...';<; . . . . .'. ........ . . 4.2.1.2.3. Dozarea volumetric a acizilor i bazelor polifuncionale.. . . . . 4.2.1.2.4. Metode vizuale de determinare a punctului de echivalen.... 4.2.1.2.5. Titrri acido-bazice n soluii neapoase. . . . . . . . . . . . . . . 4.2.1.3. Volumetria bazat pe reacii de oxido-reducere. . . . . . . . . . . . . 4.2.1.3.1. Substane cu caracter oxidant i reductor utilizate ca reactivi de dozare n volumetria . . . . . . ., ... . 4.2.1.3.1.1. Substane cu caracter oxidant.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.2.1.3.1.2. Substane cu caracter reductor. . . . . . . . . .. . . . . . . . 4.2.1.3.2. Metode vizuale de determinare a punctului de echivalen . . . . 4.2.1.4. Volumetria bazat pe reacii cu formare de combinaii complexe (compleci). . ...... . . .... . . . 4.2.1.4.1. Structura combinaiilor complexe .. , , . . . . . . . . . . . . . . . . 4.2.1.4.2. Reactivi de titrare utilizai n volumetria bazat pe reacii cu formare de compleci . , . 4.2.1.4.3. Metode vizuale de determinare a punctului de echivalen .. . . 4.2.1.5. Volumetria bazat pe reacii de precipitare. . . . . . . , . . .... . . . 4.2.1.5.1. Dozri volumetrice bazate pe reacii de p r e c i p i t a r e . . . . . . . . . 4.2.1.5.2. Metode de determinare a punctului de echivalen. . . . . . . . . 4.2.2. Analiza gravimetric. 5. Metode fizico-chimice de analiz.. 5.1. Clasificarea metodelor fizico-chimice de analiz 5.1.1. Metode optice de analiz. Spectroscopia. .... ... 5.1.1.1. Spectroscopia n ultraviolet i vizibil (fotometria).. . . . . . . . . . . . 5.1.1.1.1. Absorbia molecular n ultraviolet i v i z i b i l . . . . . . . . . . . . . . 5.1.1.1.2. Legea Lambert-Beer. . . . . .... . ...... . . ...... 5.1.1.1.3. Aplicaiile spectroscopiei moleculare n ultraviolet i vizibil . . . . 5.1.1.2. Spectroscopia de absorbie atomic.. . . . . . ". . . . . . . . . . . . . 5.1.1.3. Spectroscopia de emisie atomic. . .... 5.1.1.4. Spectroscopia de fluorescent atomic.. . . . . ... . . . . . . . . . . . 5.1.2. Metode electrochimice de analiz. . . . . 5.1.2.1. Metode poteniometrice ( p o t e n i o m e t r i a ) . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.1.2.1.1. Determinarea pH-ului . . .. 5.1.2.1.2. Determinarea punctului de echivalen tn volumetria
V3* 3* 35 35 35 35 36 36 36 36 37 37 38 40 42 43 45 46 47 47 51 52 52 52 54 58 59 60 62 66 68 68 69 71 71 72 74 76 77 79 80 80 81 83
CUPRINS
... ... ... ... ... ... ... . ... ... ... ... ... ... ... . . . . . . . . . . . . . . . .
34 34 34 35 35 35 35 36 36 36 36 37 37 38 40 42 43 45 46 47 47 51 52
5.1.2.1.3. Electrozi ton-setectfv 5.1.2.2. Analiza conductometric (conductometria) 5.1.2.2.1. AplicaHlecontluctometrlei. . 5.1.2.3. Biosenzori 5.1.3. Metode analitice de separare 5.1.3.1. Cromatografia 5.1.3.1.1. Cromatografia de adsorble 5.1.3.1.2. Cromatografia de partiie 5.1.3.1.3. Cromatografia de schimb Ionic 5.1.3.1.4. Cromatografia de excludere molecular 5.1.3.1.5. Cromatografia de afinitate 5.1.3.1.6. Gaz - cromatografia 5.1.3.2. Electroforeza 5.1.3.2.1. Bazele fizice ale etectroforezel. 5.1.3.2.2. Suporturi eletroforetice 5.1.3.2.3. Analiza i interpretarea eiectroforegramelor. Bibliografie
85 89 90 90 92 93 93 94 95 95 97 98 101 101 104 105 107
. . 52 . . 52 . . . . . . . . . . . . 54 58 59 60 62 66 68 68 69 71 71 72 74 76 77 79 80 80 81 83
. . . . ... . . . . . . ... ... . . . . . . .
NOIUNI INTRODUCTIVE DE CHIMIE ANALITIC

Chimia analitic este ramura Chimiei care se ocup cu studiul metodelor de separare, identificare i determinare a compoziiei i structurii substanelor. Totali tatea acestor metode constituie analiza chimic, care poate fi: - calitativ, care are drept scop determinarea constituenilor (elementelor, ioni lor, gruprilor) din substana de studiat i - cantitativ, care are drept scop determinarea compoziiei cantitative a sub stanelor, adic stabilete raportul cantitativ dintre componenii si. Importana chimiei analitice. Chimia analitic este cunoscut din cele mai vechi timpuri, ca opus sintezei chimice; ea a contribuit la transformarea chimiei magice i a alchimiei n chimie tiinific. Dezvoltarea chimiei pe baze tiinifice a nceput n momentul folosirii balanei, cnd s-au descompus substanele - prin analiza canti tativ - i s-a cercetat comportarea lor chimic. Analiza chimic a permis emiterea legilor proporiilor definite i multiple, precum t emiterea legii lui Dalton. Ulterior, dezvoltarea vertiginoas a chimiei s-a realizat cu ajutorul chimiei anali tice i a metodelor sale de analiz. Chimia analitic i domeniile nrudite Pn nu demult, chimia a fost mprit n cinci clase: analitic, biochimic, anorganic, organic i fizic. n prezent, o astfel de delimitare este arbitrar, datorit ntreptrunderii acestor domenii. Chimia analitic, la fel ca i alte ramuri ale chimiei a suferit o evoluie rapid. n prezent, noi discipline, cum ar fi: chimia fizic biofizica, biologia molecular etc, afla te ntr-o continu dezvoltare, i datoreaz succesele chimiei analitice. Importana chimiei analitice, privit prin prisma legturilor cu domeniile tiinifice nrudite, poate fi ilustrat prin contribuia sa nsemnat la dezvoltarea metodelor apli cate n analizele chimice, n cercetrile farmaceutice, n controlul de calitate, precum i n analizele privind mediul nconjurtor. Analizele chimice. n trecut, analizele medicale erau preponderent calitative i, de aceea, majoritatea diagnosticelor erau bazate pe simptome i/sau pe examinri radiologice, dei era cunoscut c multe boli erau nsoite de schimbri chimice n lichidele biologice. Uneori erau utilizate teste pentru detectarea componenilor normali sau anor mali n diferite probe recoltate pentru analiz. Aceste teste au fost transformate n procedee prin intermediul crora a devenit posibil determinarea cantitativ a corn-
CHIMIE ANALITICA
portanilor. Pe msur ce precizia a crescut i au fost stabilite proporiile normale, a deveni clar c rezultatele de laborator pot fi folosite n scopul precizrii diagnosticului. Majoritatea acestor teste se execut pe probe de snge i urin i includ deter minarea cantitativ a unor componente organice i anorganice (glucoza, proteine lipide, acid uric, CI , Na*, Ca 2 ', Petc). Analizele clinice nu se limiteaz numai la aceste determinri generale, deoa rece cu ajutorul lor se pot evalua i boli metabolice specifice. De exemplu, la unul O 10.000 de nou-nscui este absent enzima fenilalanilhidroxilaza. Acest fapt conduce la un metabolism secundar care, dac nu este corectat n stadiul timpuriu al vieii, determin o dezvoltare insuficient a creierului i napoieri mintale severe. Unul d.n rezultatele metabolismului viciat este fenilpiruvatul prezent n urin. Aadar, detecta rea fenilpiruvatului n urin constituie un test clinic important, efectuat n mod curen la nou-nscui, prin tratarea unei probe de urin cu FeCI3. Analiza produselor de origine animal Alimentele, indiferent de originea lor (animal sau vegetal), din punct de vede re biochimic sunt constituite din substane anorganice (apa i srurile minerale) i din substane organice (glucide, lipide, protide, vitamine etc). Pentru a prezenta garania unei valori alimentare corespunztoare, este nece sar ca alimentele s fie supuse unui control sanitar veterinar care urmreasc aprecierea integritii, salubritii i strii de prospeime. Aceste caracteristici ale alimentelor se stabilesc prin analize chimice calitative i cantitative. n urma acestor analize se determin componente naturale existente n alimen te (glucoza, cazeina, vitamina C etc), precum i substane toxice naturale (alcaloizi glicoizi etc.) i substane toxice depoluare (pesticide, detergeni, ioni metalici: Hg2*, Pb2*, hidrocarburi aromatice policiclice). Analiza farmaceutic. In industria farmaceutic, calitatea medicamentelor tre buie s fie controlat atent i cu mult exactitate. Uoare modificri n compoziia sau n puritatea medicamentului pot afecta valoarea terapeutic. Pentru stabilirea propor iei de administrare a unui medicament este necesar s se determine produii meta bolici rezultai i toxicitatea lor. Analiza mediului nconjurtor. Apa, aerul, solul pot suferi modificri de natur fizic, chimic sau biologic. Analiza acestora precizeaz msura n care aceste transformri au fost provocate de oameni, cum i n ce condiii aplicarea tiinei i tehnologiei poate controla i ameliora calitatea mediului nconjurtor. Dezvoltarea metodelor analitice de separare, identificare i dozare a furnizat informaii preioase privind prezena n aer, ap i sol a unor particule poluante ca: var, praf de ciment, oxizi de fier, fluoruri, negru de fum, solveni, detergeni, alcooli etc.
io
1. CLASIFICAREA METODELOR ANALITICE

Analiza unei substane sau a unor amestecuri de substane presupune stabi lirea naturii componenilor (atomi, Ioni, molecule, grupe funcionale), precum i deter minarea proporiei n care se gsesc componenii n substana de analizat. La efec tuarea analizelor chimice apar deci dou etape distincte: analiza calitativ, prin care se deceleaz componenii materialului de analiz i analiza cantitativ, prin care se stabilete coninutul cantitativ al componenilor n materialul de analizat. Totalitatea metodelor necesare determinrii compoziiei calitative i cantitative a materialului de analizat constituie analiza chimic. Metodele utilizate n efectuarea analizei chimice calitative i cantitative pot fi clasificate astfel: a) Metode chimice de analiz b) Metode fizico-chimice de analiz (metode instrumentale) Metodele chimice de analiz folosesc pentru determinarea calitativ i cantita tiv a componentului de analizat, unele proprieti chimice caracteristice i utilizeaz sticlria uzual din laborator. Metodele fizico-chimice de analiz permit determinarea calitativ i cantitativ a componentului de analizat, n mod indirect, prin evaluarea cu ajutorul unor aparate a unor mrimi fizice ca: absorbia luminii, conductibilitatea electric a soluiilor, indicele de refracie etc. O dat cu dezvoltarea tehnicilor de lucru au nceput s fie utilizate cantiti tot mai mici de substan pentru efectuarea analizelor. Dac alchimitii foloseau n anali zele lor cantiti de substan de ordinul kilogramelor, n a doua jumtate a secolului al XlX-lea pentru o analiz chimic erau utilizate cantiti de substan de ordinul gramelor. n secolul nostru metodele chimiei analitice au evoluat foarte mult, s-au pus la punct aparate performante care permit decelarea componenilor care se afl n canti ti extrem de mici, adic determinarea urmelor. Dup cantitatea de substan (material) utilizat n lucru se disting patru tehnici de analiz: a) Macroanaliza (analiza clasic) folosete cantiti relativ mari de substan (0,5-1 g substan solid, 20-50 ml soluie), reaciile se efectueaz n eprubete sau baloane de sticl, iar precipitatele se separ cu ajutorul hrtiei de filtru. b) Semimlcroanaliza utilizeaz cantiti de ordinul miligramelor (* 50 mg) pentru substane solide i aproximativ 1 ml de soluie. n cazul acestei metode reactivii i substanele de analizat sunt utilizai n pic turi, de aici i denumirea de metoda picturii. Metoda semimicro este o metod rapi-
CHIMIE ANALITIC
d, economic i are la baz reacii de culoare (colorimetria) i poate fi utilizat cu succes n laboratoarele de teren. c) Microanaliza folosete n analiz aproximativ 1 mg de substan solid. Aceast tehnic utilizeaz pentru analiza calitativ reacii chimice care conduc la for marea unor precipitate cristaline, uor identificatile ia microscop. Bazele microanalizei calitative au fost puse de chimistul rus M. V. Lomonosov, care a utilizat pentru prima dat n chimie microscopul n anul 1744. Pentru efectuarea analizelor cantitative prin aceast tehnic se utilizeaz apa rate speciale. d) Ultramicroanaliza studiaz cantiti de substan mai mici de 1 mg. Pentru efectuarea analizelor sunt utilizate aparate speciale i tehnici de lucru strict specifice. 1.1. ERORI Fiecare metod de analiz constituie un ansamblu de operaii, pentru efectua rea crora se folosete o anumit tehnic de lucru, o anumit aparatur i anumii reactivi analitici. Asupra acestor factori intervin o serie de erori care influeneaz exactitatea i precizia rezultatelor. n funcie de cauzele care le produc erorile se divid n: erori sistematice i erori ntmpltoare. Erorile sistematice depind de metoda sau tehnica de analiz utilizat, de gradul de performan al aparatelor i de modul de manipulare a acestora, de gradul de puritate al reactivilor i de modul de conservare al lor, de calitatea vaselor i usten silelor de laborator. Aceste erori pot fi permanente sau repetabile dar, odat sesizate, se pot diminua sau chiar evita. Erori ntmpltoare, intervin datorit condiiilor n care se execut determinrile: fluctuaii de temperatur, presiune, umiditate, imperfeciunea organelor senzoriale, impurificri accidentale, neatenia n timpul lucrului. De mrimea acestor erori depin de reproductibititatea rezultatelor unei analize chimice.
12
2. REACII l REACTIVI ANALITICI

Reaciile'analiticesunt reaciile care permit identificarea, separarea sau doza rea componenilor de analizat. Reactivii analitici sunt substanele cu ajutorul crora se efectueaz reaciile analitice. n chimia analitic, respectiv analiza chimic, nu se pot folosi toate reaciile chi mice, ci numai acelea care ndeplinesc o serie de condiii, dintre care menionm: - s fie practic totale i instantanee; - s fie ct mai sensibile i caracteristice pentru o anumit substan sau pen tru un grup restrns de substane; - s i se cunoasc mecanismul i condiiile de realizare; - s fie uor perceptibil cu simurile noastre; - s fie uor de efectuat; Deasemenea, reactivii analitici trebuie s ndeplineasc anumite condiii, dintre care menionm: - s conduc la reacii analitice totale sau practic totale; - s formeze compui greu solubili, puin disociai sau colorai; - s permit decelarea unei cantiti ct mai mici din componentul de analizat (s fie sensibil}; - s reacioneze cu un numr ct mai mic de componeni sau cu un singur component din sistemul de analizat.
2 . 1 . CLASIFICAREA REACTIVILOR ANALITICI Dup numrul de componeni cu care reacioneaz, reactivii analitici se pot clasifica astfel: reactivi specifici, reactivi selectivi i reactivi de grup. Reactivul specific reacioneaz, n anumite condiii de lucru cu un singur com ponent. De exemplu, a-dimetilglioxima n soluie amoniacal reacioneaz numai cu ionul Ni2*. Reactivul selectiv reacioneaz, n condiii de lucru strict determinate, cu un nu mr ct mai mic de componeni. De exemplu, ionul fosfat formeaz precipitate cu Ionii Al3*, Bi3* i Mg 24 . Reactivii de grup reacioneaz asemntor cu un grup de componeni, uneori destul de mare. Dintre reactivii de grup se menioneaz: - hidrogenul sulfurat- precipit la pH puternic acid (* 0,5) ionii: Hg a \ Pb?+, Bi3',
CHIMIE ANALITIC
Cu *, As (III), As (V), Sb (III), Sb (V), Sn (II), Sn (IV). - sulfura de amoniu - precipit la pH 9 ionii: Ni2*, Co2*, Mn2*, Fe2*, Fe3*, Zn2*, 3 Cr *, Al3*. - cantonatul de amoniu - precipit la pH * 9 Ionii: Ba2*, Sr2*, Ca2*. - acidul clorhidric - precipit tonii: Pb2*, Hg2*, Ag*.
2.2. SENSIBILITATEA R E A C T I V I L O R ANALITICI Se spune despre un reactiv analitic c este cu att mai sensibil cu ct permite identificarea sau determinarea unor cantiti ct mai mici din componentul de ana lizat. O noiune important pentru aprecierea sensibilitii unui reactiv este limita de recunoatere (de decelare, de percepere) sau de sensibilitate a acestuia. Limita de recunoatere a fost definit de Feigl drept cea mai mic cantitate dintr-un component care poate fi pus n eviden n mod sigur printr-o reacie ana litic. Limita de recunoatere a unui reactiv analitic este de ordinul milionimilor de gram i de aceea se exprim In ig (1 ng = 1CT6 g). Limita de recunoatere a unui reactiv este corelat cu limita de diluie a reactivului. Urnita de diluie reprezint concentraia minim a reactivului pentru care deter minarea componentului de analizat este sigur. Pentru determinarea limite) de diluie se efectueaz o serie de reacii n care se dilueaz progresiv reactivul analitic meninnd constant concentraia componentului de analizat. In acest mod se stabilete concentraia minim a reactivului pentru care determinarea este sigur.
I4
3. REVERSIBILITATEA REACIILOR ANALITICE

Majoritatea reaciilor analitice decurg n ambele sensuri, astfel nct reactivii nu se transform integrat n produi de reacie. Dac produii de reacie au tendina de a reaciona ntre ei pentru a reface reactanii, se va iniia imediat o reacie invers. Atunci cnd viteza reaciei directe devine egal cu viteza reaciei inverse se sta bilete starea de echilibru chimic. Unele reacii chimice decurg astfel nct reactivii "par" c se transform complet n produi de reacie. Aceste reacii se numesc reacii ireversibile sau reacii totale, echilibrul chimic fiind deplasat "aproape" complet spre produii de reacie. Reaciile totale sunt n special reaciile chimice care decurg cu degajare de gaze, cu formare de compui greu solubili sau greu di sociabili. 3 . 1 . LEGEA ECHILIBRULUI C H I M I C (LEGEA ACIUNII M A S E L O R ) n 1862, Berthelot, studiind reacia de esterificare dintre acidul acetic i alcoo lul etilic a constatat influena variaiei concentraiilor reactanilor asupra echilibrului chimic. Aceste observaii au permis lui Quldberg i Waage (1867) s stabileasc legea echilibrului chimic, potrivit creia raportul dintre produsul concentraiilor produilor de reacie i produsul concentraiilor reactanilor, la puteri egale cu coeficienii stoechtometrici, este o constant. Pentru a demonstra legea echilibrului chimic se poate considera reacia: i aA + bB =s=S: cC+dD Viteza reaciei directe (v,) i viteza reaciei inverse (v2) se exprim prin relaiile: v,=k,[A]v[Bh v a =k a [C] n [D] n unde, k, i kg reprezint constantele de vitez, n nb, nc, nd, ordinele de reacie (pentru reacii simple ordinele de reacie sunt egale cu coeficienii stoechiometrici) i [A], [B], [C], [D] concentraiile molare. n momentul atingerii strii de echilibru viteza reaciei directe devine egal cu viteza reaciei inverse (v, = v 2 ) i respectiv:
v
CHIMIE ANAI I1ICA
k,[A]"- \BP =k,[C]"|D|" Din relaia (1) se obine: k2 [A) n '"[B] n '
(1)
Pentru aceast n
(2)
Raportul constantelor de vitez reprezint o constant care se noteaz cu K i se numete constant de echilibru. nlocuirea n relaia (2) a raportului k,/k2 cu K conduce la expresia constantei de echilibru: K=
[C]"< [A]"-
[D]"
[B]^
La adugarea m cNmic se va deplasa aacie (C i D) aste 1 De exemplu, o m m unei soluii de htcrae aofcjii care conine oi Reacia iodutu ai l + 2 K 0 H ==a
-
Pentru reaciile chimice simple ordinele de reacie sunt egale cu coeficienii stoechiometrici i astfel pentru constanta de echilibru se obine urmtoarea expresie:
,. 1
- [A]"
[B]0
Expresia obinut este reprezentarea matematic a legii echilibrului chimic enunat de Guldberg i Waage: la echilibru, raportul dintre produsul concen traiilor produi/or de reacie i produsul concentraiilor reactanilor, la exponeni egali cu coeficienii stoechiometrici, este o constant.
Prin adugare* mediul de reacie ur eantraiei ionilor MC Cantiti suplimentar* i rinnd recolorarea 3.2.2. INFLL: Sensul n czr~ determinat de lege* totem aflat n ec ne temperaturi i De exemplu 2 NO,
rou-brun
3.2. D E P L A S A R E A E C H I L I B R U L U I C H I M I C Starea de echilibru chimic este rezultatul a dou procese care se desfoar cu viteze egale dar in sensuri opuse, aceast proprietate reflectnd caracterul dinamic al strii de echilibru. Deplasarea echilibrului chimic se produce atunci cnd se exercit o aciune asupra sistemului, aciune care influeneaz n mod inegal viteza reaciei directe i viteza reaciei inverse. Putem concluziona deci c modificarea egalitii vitezelor de reacie este responsabil de trecerea sistemului ntr-o nou stare de echilibru, cnd vitezele celor dou reacii vor fi din nou egale, dar diferite de cele iniiale. n urma aciunii unor factori externi (concentraie, temperatur, presiune) echili brul chimic se poate deplasa spre formarea unei cantiti suplimentare de produi de reacie sau spre formarea reactanilor. Efectul schimbrilor de concentraie, temperatur i presiune asupra echilibrului chimic este cuprins n principiul foarte general enunat n 1884 de ctre Le Chtelier: un sistem chimic aflat fn echilibru sub aciunea unei fore exterioare va suferi acea deplasare care va tinde s micoreze efectul aciunii exterioare.
Scderea tec crtMbrului cfwrac r temporaturii cono^c* I reaciei eno-ir-
3.2.3. INF Presiunea (cel puin) este tel volum. tn cazul acestor I chimic In senaU fcrte determina deptasa/eai
3.2.1. INFLUENA CONCENTRAIEI Pentru a explica influena concentraiei asupra echilibrului chimic se consider urmtoarea reacie:
A + B
mare.
C+D
Astfel, reacia tei cu modificare de VOM<
16
REVERSIBILITATEA REACIILOR ANALITICE
Pentru aceast reacie expresia constantei de echilibru este:
La adugarea unei cantiti suplimentare dintr-un reactant (A sau B) echilibrul chimic se va deplasa Tn sensul formrii unei cantiti suplimentare de produi de reacie (C i O) astfel nct valoarea K s nu se modifice. De exemplu, o soluie de I, se decoloreaz ta adugarea, picturi cu pictur, a unei soluii de Mdroxid de potasiu i revine la culoarea Iniial prin adugarea unei soluii care conine ioni Mg2*. Reacia Iodului cu hidroxidul de potasiu are loc conform ecuaiei: L. + 2 K 0 H ss=S KI + MO + H.0 Prin adugarea srii de Mg**, tona de magneziu formeaz cu tonii de HO" din mediul de reacie un precipitat greu solubil de Mg(OH)2 determinnd scderea con centraiei ionilor HO" i deci deplasarea echilibrului chimic n sensul formrii unei cantiti suplimentare de KOH i Implicit a unei cantiti suplimentare de l* deter minnd recotorarea soluiei. 3.2.2. INFLUENA TEMPERATURII Sensul n care se deplaseaz echilibrul chimic sub aciunea temperaturii este determinat de legea lui va n't Hoff care se enun astfel: creterea temperaturii unui sistem aflat n echilibru deplaseaz echilibrul n sensul reaciei endoterme, tor scde rea temperaturii deplaseaz echilibrul chimic in sensul reaciei exoterme. De exemplu, reacia de dimerizare a Wpoazotidei are loc conform ecuaiei:
REXOTERMA
2NOt
rou-brun
*-N,04Se,5fcj
RENDCTERMA
incolor
Scderea temperaturii determin dispariia culorii rou-brun datorit deplasrii echilibrului chimic n sensul reaciei exoterme (cu formare de N e 0 4 ), iar creterea temperaturii conduce la intensificarea culorii datorit deplasrii echilibrului chimic n sensul reaciei endoterme (cu formare de N0 2 ). 3.2.3. INPUJENA PRESIUNII Presiunea influeneaz numai echilibrele reaciilor n care un participant la reac ie (ost puin) este n faz gazoas, reaciile chimice avnd toc cu modificare de volum. n cazul acestor reacii creterea presiunii va determina deplasarea echilibrului chimic n sensul formrii componentelor cu volum mic, tor scderea presiunii va determina deplasarea echilibrului chimic n sensul formari) componentelor cu volum mare. Astfel, reacia de sintez a amoniacului este o reacie de echilibru care decurge cu modificare de volum:
17
CHIMIE ANALITICA
N2 + 3 H 2
4 volume
2NH3
2 volume
La creterea presiunii echilibrul se va deplasa n sensul formrii amoniacului, n timp ce scderea presiunii deplaseaz echilibrul chimic n sensul descompunerii amoniacului (formrii azotului i hidrogenului).
3.3. ECHILIBRE C H I M I C E N S I S T E M E E T E R O G E N E Echilibrele chimice n sisteme eterogene se ntlnesc la reaciile analitice care au loc n sisteme formate din cel puin dou faze. In figura 1 sunt redate sistemele eterogene alctuite din dou faze (bifazice), ntlnite n cazul reaciilor analitice:
FAZA GAZOAS - FAZA SOLIOA
FAZA GAZOASA - FAZA LICHID
SISTEM ETEROGEN
FAZA SOLIO - FAZA LICHID
FAZA UCHID - FAZA LICHID (lichide nemisdbite)
Figura 1 Tipuri de sisteme eterogene bifazice ntlnite n chimia analitic In mod concret, reaciile chimice care au loc n sistem eterogen sunt reaciile care decurg cu formare de precipitate, reaciile de descompunere a carbonailor, hidrailor, amoniacailor: Mg(NO,)2 m + 2 KOH ^ CaC0 3 (s) =s=: CaOw + CO,w Mg(OH), w + 2 HNO s
M
NajSO, 10 rLO - a Na.SO, ( + H.0 w NHCI M ^ S N H a w + HCIj,
n cazul reaciilor chimice care decurg In sisteme eterogene expresiile constan telor de echilibru apar, de cele mai multe ori, simplificate. Astfel, pentru descompunerea termic a carbonarului de calciu echilibrul chimic este definit de presiunea sau concentraia bioxidului de carbon care se formeaz: CaCO CaO ( + CO, w Constanta de echilibru a reaciei este :
18
REVERSIBILITATEA REACHLOR ANALITICE
[CaOlfCO,] [CaCOjJ
Concentraiile componentelor solide fiind constante pentru o temperatur dat, pot f) nglobate n constanta de ecbWbru obinndu-se: K-fC02} Aceast relaie demonstreaz faptul c echilibrul chimic este definit de concen traia gazului sau de presiunea sa. 3.4. ECHILIBRE L E N T E S A U METASTABILE Orice fenomen chimic necesit un anumit interval de timp pentru desfurarea procesului. Totui, timpul necesar pentru desfurarea diferitelor reacii este foarte variat. Astfel, multe reacii se petrec instantaneu, altele, dei nu sunt instantanee, se desfoar cu o vitez considerabil fiind considerate reacii rapide. Exist Ins i reacii chimice care decurg cu viteze foarte mici, pentru desfurarea lor fiind nece sari ani sau poate chiar secole. n principiu aceste reacii nu pot atinge un echilibru real i de aceea sunt numite echilibre meiastabile. Muli reactivi utilizai n chimia analitic sunt metastabiU descompunndu-se sau participnd la reacii secundare, cu viteze suficient de mari pentru a crea dificulti. n aceast categorie de reacii sunt incluse procesele: - decolorarea soluiei de permanganat de potasiu la fierbere sau sub aciunea luminii; - decolorarea .unor soluii de indicatori la cald i n medii acide; - degradarea soluiei de bicromat de potasiu n prezena urmelor de diferii ioni (Hg*+); reacia ioduri) de potasiu cu oxigenul din aer, aceasta fiind numai aparent stabil fa de aer: Kl
> + ~2 * w i K l O s W
Aceste procese care au loc cu vitez foarte mic conduc n timp la modificarea concentraiei reactivilor i la apariia unor produi secundari nedorii. Modificrile de concentraie suferite de reactivi precum i produii secundari rezultai determin apa riia unor erori sistematice pentru analizele efectuate.
3.5. APLICAII A L E C O N C E P T U L U I DE E C H I L I B R U Pentru a nelege diferitele tipuri de reacii care prezint interes pentru chimia analitic este necesar s se ia n considerare teoria echilibrului chimic, aceast teorie permind determinarea condiiilor favorabile de desfurare a unei reacii chimice. In cele ce urmeaz sunt prezentate pe scurt constantele de echilibru corespun ztoare diferitelor tipuri de reacii utilizate in chimia analitic calitativ i cantitativ.
19
CHIMIE ANALITICA
3.5.1. ECHILIBRE N SOLUII DE ELECTROLII. CONSTANT DE IONIZARE Cnd sunt dizolvate n ap, substanele chimice se pot prezenta sub form disociat (ionizat) sau nedisociat (neionizat). n funcie de gradul de disociere n soluii apoase substanele pot fi clasificate n eiectrolii puternici, electrolii slabi i neelectrolii. * : Electrolii! puternici n soluii apoase se prezint complet ionizai, echilibrul chimic fiind complet deplasat spre dreapta. Electroliii puternici sunt acizii tari, bazele tari i srurile provenite de la acizi tari i baze tari. NaCI w NaOH HO,.,
H,0
Na*
(aq)
+ Cr
- ^ 2 - Na* ( a q ) + H O - , ^ H+m +
a-m
Datorit disocierii complete, n cazul electrdtHor tari nu poate fi aplicat legea aciunii maselor deoarece cantitatea de substan nedisociat este neglijabil i con stanta de echilibru tinde ctre infinit. Electroliii slabi n soluii apoase disociaz parial stabilindu-se la un moment dat starea de echilibru chimic. Din categoria electronilor slabi fac parte: apa, acizii slabi i bazele slabe. Dac se consider procesele de disociere care au loc ia dizolvarea acidului acetic i amoniacului n ap, ecuaiile reaciilor chimice i constantele de echilibru corespun ztoare sunt: CH 3 - COOH + H,0 = 5 = 5 CHj- COO* +
NH,.H,O^NH...HO-
" - p ^ f e
<">
Deoarece apa se afl n exces, se consider concentraia apei constant l pentru constantele de echilibru din relaiile (3) i (4) se vor obine urmtoarele expresii:
[CH3COOH]
*K >**-K0M
jflT
Aceste constante se numesc constant de aciditate (K.) dac electroiitul este un acid slab i constant de bazicitate (Kb) dac electroiitul este o baz slab. Cu ct K, i K au valori mai mari, cu att tria electrolitului acid i respectiv bazic este mai mare. Apa pur este un electroiit slab deoarece este uor ionizat, procesul de ionizare fiind exprimat astfel:
20
H 2 0 + H 2 0 = ^ H 3 C * + HO-
K-kagJdhOJ
(5)
Deoarece numrul de molecule de ap disociate este extrem de mic, concen traia apei se consider constant i pentru relaia (5) se obine expresia:
P Hj0 se numete produs Ionic al apei i are valoarea 1 x l 0 " 1 4 ^ p j
la
temperatura de 22C. n apa pur, concentraia ionilor de hidroniu este egal cu concentraia ionilor de hidroxil. ^ 3 O 4 ] = ^ O - ] = V l 0 - M = 1 0 ' 7 mol/l Caracterul acid sau bazic al unei soluii este dat de concentraia n ioni de hidroniu i se exprim n numere de tipul 10"p. ntruct aceast exprimare este greoaie, s-a introdus noiunea de pH. pH-ul unei soluii se exprim prin logaritmul zecimal cu semn schimbat al concentraiei ionilor de hidrogen: pH = -/ogrV*J. Neelectroliii n soluii apoase nu disociaz, echilibrul chimic fiind complet deplasat spre stnga. Deoarece concentraia n componenta disociat tinde ctre zero, se poate considera c i pentru constanta de echilibru valoarea este zero. n categoria neelectroliilor putem include solveni organici ca totuen, benzen, cloroform etc. 3.5.2. ECHILIBRE N SISTEME REDOX Reaciile chimice care se bazeaz pe modificarea strilor de oxidare pot fi reprezentate prin constante de echilibru. Considernd reacia dat de un oxidant (ox,) i un reductor (red2) se poate scrie ecuaia: p ox, + m red2 = s = i p red, + m 0X2 Aplicnd acestui sistem legea aciunii maselor, pentru constanta de echilibru se obine urmtoarea expresie:
Jred.lMoxJ"' [ox,Nred2r
Reaciile de oxido-reducere prezint, n geneial, valori mari pentru K ^ , dar au viteze de reacie reduse. Vitezele de reacie pot fi ns mrite n mod semnificativ prin utilizarea catalizatorilor.
21
CHIMIE ANALITICA
3.5.3. ECHILIBRE DE COMPLEXARE Formarea combinaiilor complexe implic diverse etape de echilibru care pot li exprimate cu ajutorul constantelor de echilibru. De exemplu, ionii de argint pot reaciona cu amoniacul Tn dou etape, pentru a forma ionii compleci: Ag*
+
NH3=*[Ag{NH3)r
fAg(NHj)]* + N H 3 =5=S [Ag(NH3)2}* Fiecare etap de echilibru are propria sa constant: * K [Ag'][NH7]
[A9(NH3)?1> " ~[Ag(NH 3 )][NH 3 ]
Aceste constante se numesc constante de formare sau de stabilitate. n mod frecvent, reaciile de complexare sunt scrise n mod invers, ca i cum ar fi reacii de disociere: [Ag(NH3)j* srsS Ag* + N H 3 n acest caz constanta de echilibru va avea expresia:
K
._M(NH3j ' [Ag(NH3)]-
Ks
: L
Constanta K, se numete constant de instabilitate i este reciproca constantei de stabilitate, K. Constantele de instabilitate constituie un criteriu cantitativ de apreciere a stabi litii ionilor compleci. O combinaie complex este cu att mai stabil cu ct are tendina de disociere mai sczut i deci o constant de instabilitate mai mic. 3.5.4. ECHILIBRE SOLID-LICHID. PRODUS DE SOLUBILITATE Un electrolit greu solubil introdus n ap se va dizolva parial, conform urm toarei reacii generale:
Am B
w
ssss
m A"*^ + n 8 % ^
Aplicnd legea aciunii maselor, expresia constantei de echilibru este:

[AmB]
22
Deoarece concentraia fazei solide, AJB, este constant, aceasta poate fi tre cut n membrul stng i expresia constantei de echilibru poate fi scris astfel:
P8 este numit produs de sofubilitateeA eiectrolitului greu solubil r\Ji. Cunoscnd c produsul de solubilitate este mrimea care Indic posibilitatea de a trece un ion ntr-o form greu solubil, se precizeaz c are o importan deosebit cunoaterea acestei mrimi n alegerea metodelor de analiz calitativ i cantitativ.
23
4. METODE CHIMICE DE ANALIZ

4 . 1 . ANALIZA C H I M I C CALITATIV Analiza chimic calitativ are ca obiect de studiu metodele de identificare a componenilor (elemente, ioni, substane compuse) care alctuiesc materialul de analizat. Analiza calitativ are o importan practic i tiinific considerabil, deoarece metodele sale constituie principalele metode care permit studiul substanelor i al transformrilor lor. Ele prezint un rol important n studiul medicinei, agronomiei, geologiei precum i n tehnic. 4.1.1. CLASIFICAREA CATIONILOR N GRUPE ANALITICE Clasificarea cationilor n grupe analitice s-a efectuat n funcie de diferenele de solubilitate a srurilor i hidroxizilor pe care i formeaz, diferene care permit separa rea grupelor de cationi unele fa de altele. . n acest mod, cationii au fost clasificai n cinci grupe analitice, dup cum urmeaz: - grupa I sau grupa cationilor ce formeaz sulfuri, cloruri, carbonai i hidroxizi solubili. Din aceast grup fac parte cationii de litiu, sodiu, potasiu, rubidiu, cesiu i amoniu. Ionul Mg2* aparine tot acestei grupe cu toate c formeaz hidroxid i carbonat cu solubilitate medie, deoarece n condiiile de precipitare ale celorlalte grupe, el rmne n soluie. Aceast grup analitic nu prezint reactiv de grup. .- grupa a ll-a este grupa cationilor care formeaz sulfuri, cloruri, hidroxizi uor solubili i carbonai greu solubili n ap. Din aceast grup fac parte cationii elemen telor alcalino-pmntoase (calciu, stroniu, bariu). Reactivul de grup este carbonatul de amoniu n mediu de amoniac i ciorur de amoniu (pH a 9). - grupa a 111-a este grupa cationilor ce formeaz sulfuri sau hidroxizi greu solu bili n mediu alcalin. Din aceast grup fac parte cationii de nichel, cobalt, mangan, fier, zinc, crom i aluminiu i are ca reactiv de grup sulfura de amoniu n mediu de amoniac i ciorur de amoniu (pH 9). - grupa a IV-a este constituit din cationi care formeaz sulfuri greu solubile n mediu acid. Din aceast grup fac parte ionii de cupru (II), cadmiu, mercur (II), staniu
METODE CHIMICE OE ANALIZA
(II i IV), plumb (II), arsen (III i V), stibiu (III i V) i bismut. Reactivul de grup TI constituie hidrogenul sulfurat fn mediu puternic acid (pH * 5). - grupa a V-a este grupa cationilor ce formeaz sulfuri i cloruri greu solubile. Din aceast grup fac parte cationii de cupru (I), argint, mercur (I) i plumb (II), iar reactivul de grup pentru aceti cationi este acidul clorhidric. 4.1.1.1. GRUPA CATIONILOR FR REACTIV DE GRUP Cationii: Na*. K*. NH* formeaz cloruri, sulfuri i carbonai solubili. n aceast grup este inclus i cationul Mg2* care formeaz hidroxid i carbonat de solubilitate medie. Reacii de identificare pentru ionul Na* /. Acatatul de uranil i magneziu conduce la o reacie sensibil i specific pentru ionul Na*. Din reacie rezult un precipitat galben-verzui de acetat de uranil, magneziu i sodiu, cu cristale caracteristice (octaedri) care se analizeaz la microscop: Na* + Mg [(U02)3(CH3COO)e] + CH3COOH - NaMg [(U0 2 ) 3 (CH 3 COO) 9 ] + H* 2. Hexahidroxoantimoniatul de potasiu formeaz cu ionul Na* un precipitat alb cristalin: Na* + K[Sb(OH)a] - Na[Sb(OH)6J + K* 3. Srurile volatile de sodiu coloreaz flacra incolor a unui bec de gaz n galben-deschis. Reacii de identificare pentru ionul K* /. Acidul percloric precipit din soluiile srurilor de potasiu, un precipitat alb, cristalin de perclorat de potasiu. K* + HCI0 4 ->KCI0 4 4- + H* Precipitatul rezultat este insolubil n alcool. 2. Hexanitrocobaltiatul de sodiu este un reactiv foarte sensibil pentru ionul de potasiu, cu care formeaz, n mediu de acid acetic, un precipitat galben, cristalin: 2K + + Na s [Co(N0 2 ) 6 ]-+r^NafCotNO^gli + 2Na* 3. Srurile de potasiu coloreaz flacra incolor a unui bec de gaz n violet. Reacii de identificare pentru ionul NH*, 1. Hidroxizi! alcalini adugai peste o substan solid sau lichid ce conine Ionul NH*, la nclzire, degaj amoniac care nalbstrete hrtia de turnesol. NH* + NaOH ~* NHg + H 2 0 + Na* 2. Reactivul Nessler (soluia alcalin de iodomercuriat de potasiu) formeaz cu amoniacul sau cu ionul amoniu, n mediu alcalin, un precipitat brun. NH 3 + 2 1 ^ [Hgl4] + 3KOH - HHJr\&G\l + 7KI + 2H 2 0
25
CHIMIE ANALITIC
Reacii de identificare pentru ionul Mg * /. Soluiile de hidroxizi alcaliniformeaz cu ionul de magneziu un precipitat alb gelatinos, solubil n acizi. Mg * + 2NaOH -Mg(OH)24- + 2Na* 2. Fosfatul disodic formeaz cu ionul de magneziu, n soluii care conin amoniac i ciorur de amoniu, un precipitat cristalin de culoare alb. Mg * + Na 2 HP0 4 + NH 3 -* MgNH 4 P0 4 i + 2Na* Clorura de amoniu mpiedic formarea precipitatului de hidroxid de amoniu. 4.1.1.2. GRUPA CARBONATULUI DE AMONIU Cationii: Ca2*, Sr2', Ba2* formeaz carbonai, sulfai, cromai i oxalai greu solubili. A. Reacii comune 1. Carbonatul de amoniu precipit ionii Ca2*, Sr2* i Ba2* din soluii apoase formnd carbonat corespunztori conform ecuaiei: Me2* + (NH 4 ) 2 C0 3 -* M e C 0 3 ! + 2NH 4 Precipitatele rezultate sunt albe, amorfe (CaC0 3 ) sau cristaline (BaC0 3 i SrC0 3 ), solubile n acid acetic diluat. 2. Sulfatul de amoniu i acidul sulfuric diluat formeaz cu cationii grupei a ll-a sulfai insolubili sub form de precipitate albe cristaline. Me2* + (NH 4 ) 2 S0 4 -> M e S 0 4 i + 2NH* Precipitatul de CaS0 4 este solubil n sulfat de amoniu. 3. Oxalatul de amoniu formeaz cu cationii Ca2*, Ba2* i Sr2* oxalaii corespunztori care se prezint sub form de precipitate albe: Me2* + (NH 4 ) 2 C 2 0 4 MeC 2 0 4 4> + 2NH* B. Reacii specifice Coloraia flcrii Srurile volatile de calciu coloreaz flacra Incolor a unui bec de gaz n roucrmiziu, cele de stroniu n rou carmin, iar cele de bariu n verde. Srurile solubile de bariu sunt foarte toxice pentru organismul animal, ionul Ba2* acumulndu-se n oase, muchi, mduv, plmni i rinichi. Acest ion poate ptrun de n organism pe cale exogen (otrava pentru obolani conine BaCOa) determinnd intoxicaii grave care se manifest prin: tahicardie ventricular, paralizia muchilor scheletici, diaree, fibrilaii ventriculare i paralizie respiratorie. 4.1.1.3. GRUPA SULFURI! DE AMONIU Cationii: Co2*, Ni2*, Mn2*, Fe2*, Fe3*, Cr3*, Al3*, Zn2* formeaz cu sulfura de amoniu n mediu alcalin (pH * 9) sulfuri Insolubile sau hidroxizi insolubili (AI(OH)3,
2 2
26
METOPE CHIMICE PE ANALIZ
Cr(OH),). Cationii din grupa sudurii de amoniu formeaz sulfuri, hidroxizi, carbonai, sulfii i fosfai greu solubili. A Reacii comune t. Sulfura de amoniu n mediu de amoniac i ciorur de amoniu, precipit: NiS (negru), CoS (negru), FeS (negru), Fe2S3 (negru), MnS (roz). ZnS (alb). Cr(OH)3 (verde-cenuiu) i AI(OH)3 (albijelatinos). Reaciile generale care au loc sunt: Me8* + (NHJ2S - MeSi + 2NH 4 Me3* + 3(NH4)eS - Me2S34- + 6NH* n cazul ionilor Al3* i Cr3*, sulfurile formate hidrollzeaz instantaneu formnd hldroxizii greu solubili: Me2S + 6H 2 0 ===== 2Me(OH)3J + 3H2S 2. Amoniacul cu cationii Fe**, Fe3*. Al3*. Mn** formeaz: Fe(OH)2 (alb-murdar ce trece n verde), Fe(OH)3 (rou-brun). AI(OH)3 (alb-gelatinos). Mn(OH)2 (alb-murdar). Ionii Mf**, Co2*. Zn2*, Cr3* formeaz precipitatele: Ni(OH)? (verde). Co(OH)2 (albastru). Zn(OH)2 (alb), Cr(OH)3 (verde-cenuiu) care se dizolv n exces de reactiv formnd urmtorii compleci solubili: lNi(NH3)s]** (albastru). [CoNHj)/* (galben), care se oxi deaz la ICotNHê)3* (roz). 'Zn(NH3)4f* (incolor) i [Cr(NH3)6J3* (violet). Reaciile generale care au loc sunt: ' Me** + 2NH 3 + 2 1 ^ 0
3
Me(OH)24 + 2NH 4 *
Me * +3NH3 +3H 2 0 -> Me(OH)3J. + 3NH 4 * 3. Hidroxizi! alcalini diluai cu ionii Zn2*, Cr3* i Al3* formeaz compuii greu solubili: Zn(OH)2 (alb), Cr(OH)3 (verde-cenuiu), AI(OH)3 (alb-gelatinos) care se dizol v n exces de reactiv obtinndu-se complecii solubili corespunztori: Na2[Zn(OH)4], Na[Cr(OH)4l, NatAKOH)],' Cationii: Ni2*, Co2*, Fe2*, Fe3* i Mn2* formeaz precipitate insolubile n exces de reactiv: Ni(OH)2 (verde), Co(OH)2 (albastru), Fe(OH)2 (alb-murdar), Fe(OH)3 (roubrun), Mn(OH)2 (aib). Ecuaiile reaciilor generale care au loc cu hidroxizi alcalini sunt urmtoarele: Me2* + 2HO~ - Me(OH)2 i Me 3 *+3HO~ -Me(OH) 3 4Hidroxizii de Zn2*, Cr3* i Al3* au caracter amfoter deoarece reacioneaz att cu acizi, ct i cu baze. B. Reacii caracteristice i specifice Ionul NP* cu a-dimetHglioxima, n soluie amoniacal, formeaz un precipitat NiCI2 4 2H6C4(NOH)2 + 2NH3 -H 12 C 8 (NO) 4 H 2 Ni i +2NH 4 CI Ionul Co2* n prezen de rodanuri alcaline (tiocianat de potasiu) formeaz u
rou:
CHIMIE ANALITICA
complex de culoare albastr solubil n aceton. Co ' + 4KSCN - K2[Co(SCN)4] + 2K* Dac soluia conine ionul Fe ' se adaug NaF pentru complexarea fierului, care cu suifocianura de potasiu formeaz o coloraie roie. 2 Ionul Fe * cu hexacianoferatul (III) de potasiu formeaz un precipitat albastru, denumit "albastru de Turnbull". 3Fe * + 2K3[Fe(CN)6 ] -* Fe3[Fe(CN)6]2 i +6K* Ionul Fe * cu hexacianoferatul (II) de potasiu formeaz un precipitat amorf de hexacianoferat (II) de fier (III) numit" albastru de Berlin" 4Fe3* + 3K4{Fe(CN)s] Fe 4 [Fe(CN) s ]3 + 12K*
3 2 1 2
n prezena tiocianatului de potasiu ionul Fe3* formeaz o coloraie roie dato rat tiocianatului complex: 2Fe3* + 6KSCN -> Fe(Fe(SCN)6 ]+6K * Ionul Mrf* prin topire oxidant cu azotat de potasiu i carbonat de sodiu (la 1000C) formeaz un compus colorat n verde. Ionul Zr?' precipitat sub form de Zn(OH)2 i transformat apoi n azotat de zinc, la 1000C n prezen de Co(NO,)2 formeaz un compus de culoare verde numit "verde Rinmann". Reacia se efectueaz pe hrtie de flitru: Zn2" + 2NH 3 + 2H 2 0 Zn(OH)2 + 2NH;
Zn(OH)2 + 2HN0 3 -* Zn(N0 3 ) 2 + 2H 2 0 Zn(N0 3 ) 2 C0(NO 3 ) 2 1000C CoZn0 2 (zincat de cobalt)
Ionul Cr* cu apa oxigenat n mediu alcalin formeaz o coloraie galben dator at ionului CrO2": 2Cr3* + 10NaOH + 3 H 2 0 2 - 2Na 2 Cr0 4 + 6Na* + 8 H 2 0 IonulA3* cu azotatul de cobalt n mediu alcalin, la 1000C formeaz un compus de culoare albastr numit "albastru Thenard". Reacia se efectueaz analog cu cea de obinere a verdelui Rinmann. Al3* + 3NH 3 + 3 H 2 0 -+ AKOH)3 + 3NH* AKQH)3 +3HNO, -> AKN0 3 ) 3 + 3H a O Co(N0 3 ) 2 Co(AI0 2 ) 2 (aluminat de cobalt) 1000C
AI(NOa)2
Prezena aluminiului n diet ntr-o concentraie mai mare dect cea normal poate induce stri de hipocalcemie (favorizeaz excreia calciului), malabsorbia fos28
METODE CHIMICE PE ANALIZA
forului, potasiului i magneziului. Compui ai aluminiului se afl dispersai Tn aer (concentraia este de trei ori mai mare n mediu urban dect n cel rural), vopsele, dezinfectant!, aditivi alimentari (con dimente, sare, zahr) i abrazivi. n cazul intoxicaiilor cu aluminiu se constat scderea n greutate a animalelor i scderea produciei de ou la psri. 4.1.1.4. GRUPA HIDROGENULUI SULFURAT Cationii: Hg2*, Pb2*, Br\ Cu2*, Cd2*. As (III, V), Sb (III, V). Sn (II, IV), cu hidrogenul sulfurat la pH * 0,5 formeaz sruri greu solubile n mediu acid. Pentru realizarea pH-ului optim de precipitare proba de analizat se aciduleaz cu acid clorhidric 0.3N. Dat fiind toxicitatea hidrogenului sulfurat se recomand, n practica de labora tor, folosirea unor nlocuitori, cum ar fi tioacetamida, care n soluie apoas gene reaz hidrogen sulfurat conform reaciei: CH3- C + 2H*0 > NH 2 ^ S H2S + NH 3 + CH3COOH
A Reacii comune 1. Hidrogenul sulfurat la pH * 0,5 precipit HgS (negru), PbS (negru), Bi2S3 (brun), CuS (negru), CdS (galben), AsaS3 (galben), A s A (galben), Sr^S;, (rou), SbaS5 (rou), SnS (brun), SnS2 (galben murdar) Reaciile generale care au loc sunt: Me2* + H 2 S->MeS + 2H* 2M63* + 3H2S - Me 2 S 3 + 6H* Me 4 * + 2H 2 S -> MeS 2 + 4H* 2Me** + 5H2S -+ Me 2 S s + 10H* Sulfurile de Hg2*, Pb2*, Bi3*, Cu2* i Cd2* sunt insolubile n sulfura de amoniu i n mediu alcalin; sulfurile de As (Hi, V), Sb (III, V), Sn (II, IV) sunt solubile n sulfura i polisulfur de amoniu. B. Reacii caracteristica Ionul Hg2* cu iodura de potasiu formeaz un precipitat rou-portocaliu de Hgl2 solubil n exces de reactiv cu formarea unui complex incolor. Hg 2 *+2KI-^Hgl 2 4-+2K* Hgl2 i+2KI->K 2 [Hgl 4 ] ... Ionul Hg2* este redus de ciorur de Sn (II) n dou trepte. n prima treapt se formeaz un precipitat alb de ciorur de Hg (I), reducerea continu n exces de reactiv pan la mercur metalic (precipitat cenuiu): 2Hg** + S n a 2 -*-Hg8CI2 i +Sn4*
29
CHIMIE ANALITICA
Hg2CI2 + SnCI2 -> 2Hg i +SnCI4 Ionul Bi:i* este redus de clorura de Sn (II) n mediu puternic alcalin la bismut metalic, de culoare neagr: SnCI2 + 2NaOH -* Sn(OH)2 i +2NaCI Sn(OH)2 i +2NaOH ->Na 2 (Sn(OH) 4 ] 2Bi3' + 3Na2[Sn(OH)4 ]+6NaOH 2Bi t> +6Na* + 3Na2[Sn(OH)6] Ionul de bismut este deosebit de toxic producnd methemoglobinemie urmat de moartea organismului. Ionul Cu2* n prezena piridinei (Py) i a sulfocianurii de potasiu formeaz un precipitat verde-mazre solubil n acid clorhidric. Cu 2 ' + 2Py + 2KSCN -> CuPy2(SCN)2 i +2K* Reacia a fost introdus n chimia analitic de chimistul romn Gheorghe Spacu. lonulOf* n prezena iodurii de potasiu formeaz un precipitat galben de Cui: Cu2' +4KI-*2Cul + l 2 +4K* l2 rezultat se extrage n CCI4 sau CHCI3. Ionul Cd2* formeaz n prezen de hidrogen sulfurat un precipitat galben de Cd2* + H , S - C d S i + 2 H ' Ingestia de alimente cu un coninut mai mare n cadmiu dect cel admis poate conduce la perturbri ale procesului de asimilare a fierului, disfuncii intestinale i renale. Compui ai cadmiului se afl n ngr.mintele chimice cu superfosfai, produii rezultai n urma arderii combustibililor i n gazele de eapament. Ionul As (III) este redus de clorura stanoas la arsen metalic de culoare neagr: 2As3* + 3Sn 2 ' -> 2As 1 +3Sn4* Ionul As (III) din arsenii formeaz n prezena azotatului de argint un precipitat galben de arsenit de argint: AsO3' +3Ag* -> Ag 3 As0 3 i Ionul As (V) din arseniai formeaz cu azotatul de argint un precipitat rou-brun (ciocolat) de arsenit de argint, solubil n acizi i n soluie de amoniac. AsO3 + 3Ag* -> Ag 3 As0 4 Ionul arsenit (As III) ete de 5-10 ori mai toxic dect ionul arseniat (As V). Aceti compui se gsesc n insecticide, erbictde, exfoliante, pesticide, precum i n unii produi de poluare din industria metalurgic. in intoxicaiile cu compui ai arseniutui apar deshidratri, dermatite, alergii ale pielii, diaree hemoragic, hematurie, precum i stri de hipotermie sau de febr. Pentru cine doza letal (oral) de arsenit de sodiu este 50-100 mg iar de trioxid de arsen de 100-1500 ng.
CdS.
30
METODE CHIMICE DE ANALIZA
Ionii Sb (III, V) reacioneaz cu metale (Fe, Zn, Al) formnd stibiu metalic care se prezint n mediu de reacie sub form de fulgi de culoare neagr: SSb3* + 3Fe -+ 2Sb 4- + 3Fe2* 2Sb 8 *+5Fe-2Sb<t+5Fe 2 * '
Ionul Sn (II) se oxideaz n prezena srurilor de Hg (II) la Sn (IV). n urma reaciei se formeaz un precipitat negru de mercur metalic. Ionul Sn (IV) se reduce la Sn (II) n prezena fierului metalic la Sn24. iar n prezena zincului metalic (metal mai activ dect fierul) ta staniu metalic: Sn**+2Fe4.-+Sn**+Fe** Sn**+2Zn->Sn + 2Zn2*
4.1.1.5. GRUPA ACIDULUI CLORHIDRIC Cationii kg,*, Pb*. Hgf.* formeaz doruri, sulfuri, ioduri, cromai etc. greu solu bile In ap i azotai, acetai, clorai, perclorai solubili. Dintre clorurile grupei, cea mai solubil este PbCl2, de aceea catranul Pb2* este menionat i la grupa hidrogenului sulfurat. Ionul Hg*.* este de forma Hg*- Hg* i are caracteristice reaciile de dismutaie: Hgf* = S Hg2*+ Hg A. Reacii comune 1. Acidul dom/dric (0,3-1 N), formeaz cu cationii grupei precipitate albe de AgCI, PbCljiHgjCI... Precipitatele de AgCl i PbCI2 sunt parial solubile n acid ctorhidric concentrat, formndu-se urmtorii compleci: AgClj + 3 H C I 5 = 2 : HsfAgCUJ P b C y +2HCI5Z-2: H2fJPbC'4J Precipitatul alb de Hg2CI2 reacioneaz cu amoniacul formnd clorura aminomercuric de culoare alb i mercur metalic negru: Hg2CI2 + 2NH 3 -> NH2HgCI i +Hg 4- +NH 4 CI 2. Iod ura de potasiu, soluie diluat, precipit Agi (glbui), Pbl2 (galben intens) i Hcfcl2 (verde). Precipitatul galben de Pbl2 se dizolv la cald i reprecipit la rece: Pby Pb2* + 2I* Precipitatul verde de Hg2l2n exces de iodur de potasiu formeaz un precipitat negru de mercur metalic:
31
CHIMIE ANALITICA
Hg 2 l 2 4 +2KI -* Hg 4- +K 2 [Hgl 4 ] 3. Cromatul de potasiu formeaz cu cei trei cationi precipitate diferit colorate: AftjCrO* (rou-brun), PbCr0 4 (galben) i Hg2CrO (rou-aprins): 2Ag*+K 2 Cr0 4 -* Ag 2 Cr0 4 4 +2K* Pb** + K 2 Cr0 4 - > P b C r 0 4 4 +2K* Hg|* +K 2 Cr0 4 --Hg 2 Cr0 4 4 +2K* 4. Hidrogenul sulfurat (gazos sau ap de H2S) precipit sulfurile corespunz toare de culoare neagr: 2Ag*+H2S-+Ag2Si+2H* Pb2* + H 2 S - t . P b S l + 2 H * Hg?,* + H 2 S -* Hg2S 4 + 2 H ' B. Reacii caracteristice Ionul Ag*, transformat in AgCI cu ajutorul unei soluii de acid clorhidric, cu sruri de Mn2* in mediu de hiciroxid de sodiu, formeaz un precipitat negru de argint metalic i dioxid de mangan: AgCI + Mn2* +4HO" -> Ag 4 +Mn0 2 H 2 0 + H 2 0 + Cr Reacia este cunoscut n chimia analitic sub numele de "reacia Tananaev" i se execut pe hrtie de filtru (metoda picturii). Ionul Pb2* n prezena unei soluii de acid sulfuric formeaz un precipitat alb de PbS0 4 insolubil n alcool: Pb2* + H 2 S 0 4 ->PbS0 4 4 + 2 H * Compuii anorganici i organici ai plumbului se pot gsi dispersai n aer (n zonele poluate) precum i n chituri i vopsele. n cazul intoxicaiilor cu plumb s-a evideniat acumularea ionului n rinichi, ficat, esut osos, snge i lapte. Intoxicaiile Cu plumb determin apariia anorexiei, salivaie intermitent, vomismente, stri de letargie i tulburri neuropsihice. Boala provocat de intoxicaia cronic cu plumb se numete saturnism. Ionul Hg2* din Hg2CI2 formeaz cu amoniacul un precipitat negru de mercur metalic i cloroamidur mercuric: Hg 2 CI 2 + 2NH 3 -* NH2HgCI 4 +Hg 4 +NH4CI Mercurul constituie unui dintre cele mai toxice elemente pentru animale i om. Poate ptrunde n organism prin intermediul apei i hranei contaminate cu compui organici sau anorganici ai mercurului, absorbia intestinal a compuilor anorganici ai mercurului fiind de cteva procente iar cea a compuilor organici fiind de 100%. Cele mai frecvente intoxicaii cu mercur sunt datorate consumului de cereale tratate cu fungicide. Aciunea toxic a mercurului se explic prin afinitatea sa pentru gruprile -NH 2 , -COOH, -OH din proteine, ca i pentru radicalul - P 0 3 H 2 din membranele celulare. Intoxicaiile cu compui anorganici i organici ai mercurului determin anorexie,
32
necroze gastro-intestinale i afeciuni renale grave, afeciuni neurologice i pierderi n greutate. 4.1.2. CLASIFICAREA ANIONILOR N GRUPE ANALITICE n literatura chimic exist multe ncercri de clasificare a anionilor, dar nu s-a stabilit o cale sistemic, riguroas de analiz. n practica analitic se utilizeaz o clasificare a anionilor n cinci grupe analitice: - antoni, care prin aciunea acizilor minerali (acid ciorhidhc sau sulfuric diluat) formeaz substane volatile, ce se degaj sub form de gaze care pot fi recunoscute dup culoare, miros sau printr-o reacie caracteristic: C 0 3 " , CN~, S2~, SO 2 ', NO;; - anioni care formeaz cu azotatul de argint sruri greu solubile n acid azotic diluat, iar cu clorura de bariu formeaz sruri solubile n ap: CI", Br~, CN~, SCN"; - anioni ale cror sruri de bariu sunt greu solubile n soluii cu caracter slab acid, iar srurile de argint sunt solubile n ap: F", S O f ; - anioni care formeaz sruri de bariu i de argint practic insolubile n ap, dar solubile n acid azotic diluat: CO2,", Si0 3 - , POj, SO|"; - anioni ale cror sruri de bariu i de argint sunt solubile n ap: NO;, C I 0 3 ; 4.1.2.1. REACII DE IDENTIFICARE PENTRU IONUL CARBONAT -1. Acizii minerali diluai (acidul clorhidric i sulfuric) descompun cantonaii cu degajare de bioxid de carbon. Gazul rezultat formeaz cu apa de var (hidroxidul de calciu) un precipitat alb de carbonat de calciu, care n exces de bioxid de carbon se dizolv formnd carbonatul acid de calciu: CO3" + H2SO< -> SO2- + C 0 2 + HaO C 0 2 + Ca(OH)2 -> CaC0 3 4- + H 2 0 CaC0 3 + C 0 2 + H 2 0 -> Ca(HC0 3 ) 2 2. Azotatul de argint formeaz cu srurile acidului carbonic un precipitat alb de carbonat de argint care se dizolv n acizi diluai (nu se utilizeaz acidul clorhidric): CO 2 +2AgN0 3 -> Ag 2 C0 3 4- + 2 N 0 3 Ag 2 C0 3 4- + 2HN0 3 -+ C 0 2 + H 2 0 + 2AgN0 3 3. Clorura de bariu precipit, din soluiile de carbonai, un precipitat alb de carbonat de bariu, solubil n acizi diluai (nu se utilizeaz acidul sulfuric): CO" + BaCI2 -> BaCOa i +2CI" BaCOa + 2HCI-> BaCI2 + C 0 2 + H 2 0
33
CHIMIE ANALITICA
4.1.2.2. REACII DE IDENTIFICARE PENTRU IONUL ACETAT Acidul sulfuric diluat, adugat la sarea solid ce conine ionul acetat, produce degajarea acidului acetic cu mirosul caracteristic de oet: 2CH3COO- + H 2 S 0 4 -+ 2CH3COOH t +Na 2 S0 4 4.1.2.3. REACII DE IDENTIFICARE PENTRU IONUL AZOTIT (NITRIT) 1. Acidul sulfuric diluat l concentrat descompune azotiii cu degajare de vapori bruni de hipoazotid: 2NO; + H2SO -* 2HNO, + SOj2HN0 2 -4>NO + N O 2 + H 2 0 NO +1 Oj -* NO, (de culoare brun)
2. lodura da potasiu fn prezen de add acetic este oxidat de ctre azotii, cu punerea In libertate a iodului, ce coloreaz soluia In brun: 2KN0 2 + 2KI + 4CH 3 COOH -*> la i +2NO+4CH 3 COOK + 2H a O Reacia nu este specific deoarece ionul I" poate fi oxidat la iod i de ctre alte substane cu caracter oxidant. 4.1.2.4. REACII DE IDENTIFICARE PENTRU IONUL AZOTAT (NITRAT) Acidul sulfuric concentrat descompune azotaii cu punerea In libertate a hipoazotidei, de culoare brun: 4 N 0 3 + 2H 2 S0 4 -+ 2SO*' + 4 N 0 2 + 0 2 + 2 H 2 0 4.1.2.5. REACII DE IDENTIFICARE PENTRU IONUL FOSFAT Molibdatul de amoniu, In mediu de acid azotic, la nclzire slab, cu ionul fosfat formeaz un precipitat galben de fosfomolibdat de amoniu. POJ- +3NH; +12 M O0 4 + 24H* (NH 4 ) 3 H 4 [P(Mo 2 0 ,),]4 +10H 2 O
4.1.2.6. REACII DE IDENTIFICARE PENTRU IONUL SULFURA 1. Acidul clorhidric descompune unele sulfuri solide, punnd In libertate hidro genul sulfurat, un gaz cu miros de ou stricate. S2-+2HCI-*2Cr+H2ST
34
2. Apa de clor i apa de brom oxideaz ionul S un aspect lptos: S

2
la sulf, care imprim soluiei
+CI 2 ->2CI + S 4
3 Acefalul de plumb (sau alt sare solubil de plumb) formeaz cu ionul S* un precipitat negru de sulfura de plumb: S ' + Pb(CH3COO)2 -* PbS i + 2CH3COO 4.1.2.7. REACII DE IDENTIFICARE PENTRU IONUL SULFIT Acidul sulfuric descompune sulf iii cu degajare de bioxid de sulf, cu miros de sulf ars: SO\- + H 2 S 0 4 -* SO - + S 0 2 1 +H z O 4.1.2.8. REACII DE IDENTIFICARE PENTRU IONUL SULFAT /. Clorura de bariu formeaz cu ionul sulfat un precipitat alb cristalin, greu solu bil n acizi minerali: SO2* +BaCI 2 -* BaS0 4 4 +2CI* 2. Acefalul de plumb (sau azotatul de plumb) formeaz cu tonul sulfat un precipitat alb cristalin, solubil n acid sulfuric concentrat: SOf
2 2
+Pb(CH3COO)2 -+PbS0 4 +2CH COO4 3
PbS0 4 4 +H 2 S0 4 -> Pb(HS0 4 ) 2 4.1.2.9. REACII DE IDENTIFICARE PENTRU IONUL FLUORUR Acidul sulfuric concentrat descompune fluorurile solide cu degajare de acid fluorhidric, sub forma unui fum alb: 2F + H 2 S0 4 -> 2HF + S O f Reacia se efectueaz ntr-un vas de platin sau de plumb, Iar deasupra vasului se pune o baghet de sticl cu o pictur de ap. Acidul fluorhidric atac sticla i pictura de ap se tulbur. 4.1 2.10. REACII DE IDENTIFICARE PENTRU IONUL CLORURA Azotatul de argint formeaz cu ionul ciorur un precipitat alb solubil n amoniac: CI" + AgNO, AgCI 4 +NO;
AgCi;+2NH3-*(Ag(NH3)2]CI
35
CHIMIE ANALITICA
4.1.2.11. REACII OE IDENTIFICARE PENTRU IONUL BROMUR 1. Azotatul de argint formeaz cu ionul bromuri un precipitat cu aspect brftnzos de culoare galben-descftis, solubil n amoniac: . Br" + AgN0 3 -* AgBr 4 +NO; AgBr4+2NH 3 -*>[Ag(NH3)2]Br -;{;:;: V
2. Apa de efor oxideaz ionul Br' la brom elementar care coloreaz soluia apoas n galben-brun: 2BT+CI, Br 2 +2CI
4,1.2.12. REACII DE IDENTIFICARE PENTRU IONUL lOOUR 1. Azotatul de argint formeaz cu ionul iodur un precipitat galben cu aspect brnzos. Precipitatul nu este solubil n amoniac: I +AgN03-+AgH+NO; 2. Apa de clor oxideaz ionul I" la iod elementar, care coloreaz soluia apoas n brun-nchis. Dac se adaug un dizolvant organic (sulfura de carbon sau tetraclorur de carbon) se extrage iodul, colornd stratul de solvent organic n violet: 21-+CL l,+2KCI Dintre anionii prezentai ionii azotit (nitrit) i azotat (nitrat) sunt deosebit de toxici, aceti ioni putnd fi preluai de ctre animale din ap i din furaje, n special cele verzi, inclusiv n form nsilozat. Limita concentraiei azotailor n hran, considerat sigur pentru animale, este 0,5 mg%, concentraii mai mari n azotai avnd un efect toxic. Azotaii au efect can cerigen, la animalele de experien producnd neoplasm al stomacului, pielii, creie rului, mduvei spinrii. Azotaii (nitraii) din hran au aciune inhibitoare asupra fun ciei tiroidiene prin diminuarea prelurii iodului de ctre gland. Dozele zilnice de aproximativ 150 mg azotat de potasiu au produs avort la taurine. Din acest motiv numrul de avorturi la taurine este mult mai mare n zonele depresionare dup con sumul de plante din flora spontan, bogate n azotai.
4.2. ANALIZA C H I M I C C A N T I T A T I V 4.2.1. ANALIZA VOLUMETRIC - Volumetria sau titrimetria cuprinde o grup de metode care, pentru determina rea cantitii de component de analizat (ion, element, radical, substan compus) utilizeaz msurarea exact a volumului de reactiv de concentraie cunoscut, con sumat n reacie. Cunoscnd astfel cantitatea de reactiv i raportul stoechiometric de combinare se calculeaz cantitatea de substan de analizat. Volumul de reactiv se adaug treptat, cu biureta, pn cnd are loc transforma36
rea total a componentului de analizat, conform reaciei care st la baza determinrii. Aceast operaie poart numele de titrare iar soluia de reactiv de concentraie exact cunoscut (soluie etalon primar sau secundar) se numete titrant (reactiv de titrare). Punctul de echivalent este momentul titrrii fn care reactivul de titrare i com ponentul de analizat au reacionat In cantiti echivalente. Pentru stabilirea punctului de echivalen se utilizeaz o anumit proprietate a sistemului de analizat, care In acest moment al titrrii sau foarte aproape de el sufer o schimbare brusc, ce poate fi sesizat vizual sau cu ajutorul unui aparat (instru mental). ntr-o dozare volumetric punctul de echivalen se determin cu o anumit eroare, deoarece schimbarea produs In sistemul de analizat nu coincide exact cu momentul de echivalen. Momentul la care se percepe modificarea (schimbarea cu lorii, apariia sau dispariia unui precipitat, modificarea fluorescentei) se numete punct final al titrrii, deoarece n acel moment se stopeaz titrarea. Precizia unei dozri volumetrice este cu att mai mare cu ct punctul final al titrrii este mai apropiat de punctul de echivalen. 4.2.1.1. CI ASIFICAREA METODELOR VOLUMETRICE DE ANALIZ n funcie de natura reaciilor chimice care stau la baza determinrilor, metodele volumetrice se clasific astfel: - metode volumetrice bazate pe reacii de neutralizare; - metode volumetrice bazate pe reacii redox; - metode volumetrice bazate pe reacii cu formare de compui greu solubili; - metode volumetrice bazate pe reacii cu formare de compui greu disociabili. 4.2.1.2. VOLUMETRIA BAZAT PE REACII DE NEUTRALIZARE Reacia de neutralizare este reacia dintre un acid i o baz n urma creia se formeaz o sare i ap. Reacia de neutralizare poate fi redat astfel: ACID + BAZ = SARE + AP BAZ + ACID = SARE + AP Deoarece o reacie de neutralizare implic trecerea de la o soluie acid la o soluie bazic sau de la o soluie bazic la o soluie acid, desfurarea reaciei poate fi urmrit prin determinarea pH-ului, n funcie de volumul de reactiv de titrare adugat. Reprezentarea grafic a pH-ului n funcie de volumul de reactiv se numete curb de titrare. n funcie de caracterul acido-bazic al reactivului de dozare, metodele volume trice bazate pe reacia de neutralizare cuprind: a) alcalimetria b) acidimetria
37
CHIMIE ANALITICA
4.2.1.2.1.
Alcalimetria
Este o metod de dozare a acizilor tari i slabi i a srurilor cu hidroliz acid, cu o soluie de baz tare de concentraie cunoscut. a) Dozarea volumetric a acizilor tari cu o soluie de baz tare Pentru a nelege mai bine acest caz, se presupune c se dozeaz acidul HA cu ajutorul unei soluii standardizate de baz tare BOH. Deoarece att acidul, ct i baza sunt complet disociate n soluie apoas, ecuaia reaciei este: H' +A +B' +HO ~B* +A + H 2 0 sau: H' + HO" H20
Pentru studiul acestei reacii se poate urmrii variaia concentraiei ionilor de hidrogen n decursul procesului. Dac soluia de acid are concentraia de 0 , 1 M, concentraia ionilor de hidrogen din soluie este egal cu concentraia acidului:
[H-]=10-\
iarpH =
La neutralizarea a 5 0 % din aceast soluie cu baza tare, [H* ] se reduce la:

[ H J' j = - 1 0 ' = 0 , 5 1 0 ' ; 1
100
p H = 1,3
Dac se neutralizeaz 9 0 % din acid, concentraia ionilor de hidrogen va fi:
fH'J= - H - - 1 0
1 J
100
= 10
pH =
F
La o neutralizare de 9 9 , 9 % din cantitatea iniial de acid se obine:

[ H * ] = - - IO"1 = 1 0 - " ; 1 J 1000 pH = 4
La neutralizarea complet a acidului:

[H*]=10-7; pH = 7
Dac se continu adugarea de baz n exces de 0 , 1 % , se obine:

|HO] = ! 1 0 - ' = 1 0 ' 1000
C 4
hi = 1 0 - 1 0
pH = 10
Pentru un exces de baz de 1 0 % rezult:

[HO ] = ^ 10-'=10-2; ^
+
] = 10-,J
pH = 12
Aceste date se pot nscrie ntr-un grafic, unde pe ordonat se trec valorile pHului, iar pe abscis volumele de reactiv (de baz) utilizate (figura 2). Curbele de titrare sunt curbe logaritmice ce prezint o variaie lent a pH i <'ui la nceputul i sfritul titrrii i un salt de pH la echivalen. Punctul de inflexiune
38
METODE CHIMICE OE ANALIZA PH14
ACID NEUTRALIZAT 100%
BAZ EXCES
VB0H(ml)
F'ûra 2 - Curba da titrare a unui acid tare cu o baz tare corespunde pe ordonat cu pH-ul la echivalent, iar pe abscis procentului sau volumului de reactiv necesar reaciei cantitative. Forma curbei de titrare este influenat de concentraia acidului tare i a bazei tari. Pe msur ce scade concentraia scade i mrimea saltului la echivalen i deci capacitatea de determinare cu exactitate a punctului de echivalen se diminueaz (figura 3). Limita cea mai sczut admis pentru o dozare volumetric de acest tip este de 1 O'3 mol/l.
PH
14
VB0H(ml)
Figura 3 - Curbele de titrare ale unui acid tare cu o baz tare pentru concentraii de 1 0 ' M , 1 0 ^ M , 10 3 M
39
CHIMIE ANALITICA
b) Dozarea volumetric], a acizilor slabi cu o soluie de baz tare Pentru exemplificare se presupune c are loc titrarea acidului acetic cu o soluie de hidroxid de sodiu: CH,COOH + NaOH " CH,-COONa + HO
3 3
Acest tip de titrare este caracterizat de urmtoarele procese: - disocierea acidului slab (pH-ul iniial este dependent de constanta de acidi tate K, a acidului; - la adugarea soluiei de baz, pn la punctul de echivalen, se formeaz sistemul de tampon CH3COOH/CH3COONa - la punctul de echivalen se formeaz o sare provenit de la un acid slab i o baz slab imprimnd soluiei un caracter bazic; - dup punctul de echivalen reactivul va imprima soluiei un caracter bazic. Din aceste motive, panta curbei de titrare este mult mai mic iar punctul final al titrrii se afl pe partea bazic a scalei de pH (figura 4). Panta curbei de titrare scade pe msur ce scade tria acidului, punctul final al titrrii deplasndu-se pe partea bazic a scalei de pH (figura 4). Din acest motiv prin aceast metod nu se dozeaz acizi cu K, < 1 0 ' 8 . Efectul dilurii conduce la aceeai modificare a pantei ca i n cazul titrrii unui acid tare cu o baz tare.
5
IU
0
V
BOH< M L )
Figura 4 - Curbele de titrare ale unor acizi slabi cu constante de aciditate K , < K , < K , cu o soluie de baz tare
4.2.1.2.2. Acidimetria Este o metod de dozare a bazelor tari i slabe i a srurilor cu hidroliz bazic cu o soluie de acid tare de concentraie cunoscut.
40
a) Dozarea volumetric a unei baze tari cu o soluie de acid tare Titrarea unei baze tari cu un acid tare este similar cu titrarea unui acid tare cu o baz tare, principala diferen constnd In schimbarea pH-ului pe direcie invers (de la mediu alcalin la mediu acid) (figura 5).
V H A(ml)
Figura 5 - Curba de titrare a unei baze tari cu un acid slab pentru concentraii de 1 0 ' M, 10" 8 M i 10"3 M i n cazul acestui tip de titrare concentraia minim admis pentru baz este 10"3 mol/l. b) Dozarea volumetric a unei baze slabe cu o soluie de acid tare Pentru a ilustra mai bine acest caz se presupune c baza s , NH..OH, este titrat cu acidul tare, HCI: NH4OH + HCI --5=5: NH4CI + HO Acest tip de titrare este guvernat de urmtoarele procese: - disocierea bazei slabe (pH-ul iniial este dependent de constanta de bazicitate a bazei) - la adugarea soluiei de acid, pn la punctul de echivalen, se formeaz sistemul tampon NH4OH - NH4CI - la punctul de echivalen se formeaz o sare provenit de la o baz slab i un acid tare imprimnd soluiei un caracter acid; - dup punctul de echivalen reactivul va imprima soluiei un caracter acid. Din acest motiv, panta curbei de titrare este mult mai mic iar punctul final al titrrii se afl pe partea acid a scalei (figura 6). Panta curbei de titrare scade pe msur ce scade tria bazei, punctul final al titrrii deplasndu-se pe partea acid a scalei de pH (figura 6). Deoarece precizia determinrilor este dependent de tria bazei slabe, prin aceast metod nu se dozeaz baze cu Kb < 10 *.
41
CHIMIE ANALITICA
i ... ,
ECHI
Vmm'riI) Figura 6 - Curbele de titrare ale unor baze slabe cu constante de bazicitate Kb, < K 6 , < K b , c u 0 soluie de acid tare
Diluarea reactivului de titrare i a bazei slabe de dozat, conduce la micorarea saltului la punctul de echivalen i implicit la scderea preciziei de detectare a punctului de echivalen. Dozarea acizilor slabi cu o soluii de baze slabe precum i dozarea bazelor slabe cu acizi slabi, datorit proceselor de disociere i hidroliz care au loc, se efec tueaz prin alte metode dect prin volumetria clasic. 4.2.1.2.3. Dozarea volumetric a acizilor i bazelor polifuncionale Acizii polibazici (H 2 S0 4 , H 3 P0 4 ) i bazele poliacide (Ca(OH)2) se vor neutraliza n trepte. Din acest motiv, curbele de neutralizare vor avea mai multe puncte de inflexiune, fiecare punct de inflexiune fiind corespunztor unei trepte de disociere. De exemplu, n cazul neutralizrii unui acid bibazic de forma AH2 cu hidroxid de sodiu, reacia de neutralizare are loc n dou trepte: AH 2 + NaOH -> NaHA + H 2 0 NaHA + NaOH -> Na2A + H 2 0 Pentru fiecare treapt, curba de titrare va prezenta un punct de inflexiune (figura 7) cu un salt la punctul de echivalen, suficient de mare dac constantele de aciditate pentru cele dou trepte de disociere ale acidului (K a i i K a t ) difer printr-un factor de cel puin 10"8 i nu sunt mai mici de 10"8 - 1 0 " * :
42
METODE CHIMICE PE ANALIZA PH

u
OL
'
VMctiv(ml)
Figura 7 - Curba de titrare a unui acid bibazic i a unei baze biacide cu o soluie de baz tare, respectiv de acid tare
. H A - = - = = H * + A2-
K. K l l A ! " l
'
Titrarea unei baze poliacide cu o soluie de acid tare decurge similar cu titrarea unui acid polibazic cu o soluie de baz tare, principala diferen constnd in schim barea pH-ului pe direcie invers (de la mediu alcalin la mediu acid) (figura 7). Pentru constantele de bazicitate, corespunztoare treptelor de disociere ale bazei poliacide, se pun aceleai condiii ca i n cazul titrrii acizilor polibazici. n figura 7 este redat curba de titrare a unei baze diacide, B(OH)2 cu o soluie de acid tare de concentraie cunoscut. 4.2.1.2.4. Metode vizuale de determinare a punctului de echivalen n cazul titrrilor acid-baz, cele mai utilizate metode de determinare a punctului final al titrrii se clasific n: metode vizuale i metode Instrumentale. Metodele vizuale constituie cea mai veche tehnic de determinare a punctului final i se bazeaz pe utilizarea indicatorilor. Indicatorii utilizai n volumetria bazat pe reacii de neutralizare sunt, n gene ral, substane organice (acizi slabi sau baze slabe) a cror form disociat posed o alt constituie structural i o alt culoare dect forma nedisociat. De exemplu, pentru metilorange schimbarea de culoare este explicat de urm toarele procese:
43
Pilii
mm
IS...
M 1
<1 1" 1
UIIIIIIIIIIIIMMIIIIIMHHIiill
"I
"""'I
"!!!'!'
::i
i,.,
q|j; P i r
Huli
CHIMIE ANALITICA
-0,8 N N N f C H , ) , + H *
'O.S - ^ ^ - N N N * ( C H H
) ,
iii
forma bazic (galben-orange)
forma acid (rou)
n tabelul 1 sunt prezentai indicatorii de culoare cei mai utilizai n volumetria bazat pe reacii de neutralizare. Tabelul 1 Indicatori de culoare acido-bazici Domeniul depH 3,0-4,6 3,1 -4.4 3,8 - 5.4 4,2 - 6.3 6.2-7,6 6,8 - 8,4 7.2 - 8,8 8-9.6 8.3 -10 10-12 Modificarea de culoare galben-aibastru rou-orange galben-albastru rou-galben galben-albastru galben-rou galben-rou galben-albastru incolor-purpuriu incolor-galben Preparare 0,4% soluie apoas 0 , 1 % soluie apoas 0 , 1 % soluie apoas 0 , 1 % n alcool 60% 0,5% soluie apoas 0,05% soluie apoas 0,05% soluie apoas 0,04% soluie apoas 0,05% n alcool 50% 0 , 1 % alcool
i!s In
Denumirea uzual Albastru de bromfenoi Metilorange Verde de bromcrezol Rou de metil Albastru de bromtimoi Rou de fenol Rou de crezol Albastru.de timol Fenolftalein Galben de alizarin
Alegerea indicatorului. Pentru indicarea corect a punctului de echivalen, ar trebui ca indicatorul s prezinte o modificare de culoare sesizabil chiar n acest moment al titrrii. n realitate majoritatea indicatorilor i modific o anumit proprie tate n apropierea punctului de echivalen, la punctul final al titrrii. Datorit acestei diferene apare o eroare denumit eroare de indicator. Alegerea indicatorului ntr-o titrare trebuie fcut n aa fel nct aceast eroare s fie ct mai mic. Alegerea indicatorului se face astfel nct punctul final al titrrii s fie n domeniul alcalin dac reactivul de dozare este o baz i n domeniul acid dac reactivul de titrare este un acid. O adugare excesiv de indicator poate provoca o eroare de titrare, ntruct Indicatorul este ei nsui acid sau baz consumnd o anumit cantitate de reactiv. Aceast eroare poate fi minimalizat prin utilizarea indicatorilor n soluii diluate i n cantiti ct mai mici. Virajul indicatorului poate fi mbuntit prin adugarea unui compus colorat n soluia de indicator (compus care h timpul titrrii nu i modific culoarea) obinnd culori complementare, care pot fi sesizate cu o precizie mai mare, precum i redu cerea domeniului de viraj. De exemplu, indicatorul metil-purpuriu, obinut prin ames tecarea roului de metil (rou-galben; pH 4,2-6,3) cu un colorant albastru i schimb culoarea de la purpuriu la verde (pH 4,2-6,2) trecnd prin culoarea intermediar gri n intervalul de pH 4,8-5,4. ' n afara indicatorilor de culoare, n volumetria bazat pe reacii de neufializare.
44
se utilizeaz i indicatorii de fluorescent. Proprietatea de fluorescent este sensibil la schimbarea pH-ului astfel, pe msur ce se schimb pH-ul, fluorescenta poate s apar sau s dispar. Acest tip de indicatori este utilizat n cazul n care probele de analiz sunt soluii intens colorate sau prezint un anumit grad de turbiditate. Pentru determinarea punctului final al titrrii n volumetria bazat pe reacii de neutralizare se pot utiliza i metode instrumentale (titrare conductometric, titrare poteniometric) mult mai precise, care necesit o aparatur mai complicat. 4.2.1.2.5. Titrri acido-bazice n soluii neapoase Pentru dozarea acizilor slabi cu Ka < 10 8 i a bazelor slabe cu Kb < 10"8 pre cum i a substanelor cu caracter acid sau bazic insolubile n ap este necesar ca cel mai utilizat solvent, apa, s fie substituit cu solveni de natur organic. n tabelul 2 sunt prezentate principalele substane cu caracter acid i bazic care se dozeaz n soluii neapoase. Tabelul 2 Compui cu caracter acid i bazic care se dozeaz n solveni neapoi ACIZI Acizi carboxilici alifatici Acizi carboxilici aromatici Fenoli Imide Tiouree Sulfonamide Acizi sulfonici Tiofenoli Barbiturai BAZE Amine.alifatice Amine aromatice Alcolai Poliamine Alcaloizi Antihistamine Xantogenai Baze Schiff Hidrazide Tioamide
Solvenii neapoi, dup proprietile acido-bazice, se clasific n: solveni amfiprotici i solveni aprotici. Solvenii amfiprotici pot fi protogenici (cu caracter acid puternic), protofilici (cu caracter bazic) i amfoteri (n funcie de condiiile de reacie pot avea caracter acid sau bazic). n tabelul 3 sunt prezentai solvenii neapoi cei mai utilizai n chimia analitic. Pentru titrrile n soluii neapoase se utilizeaz reactivi de titrare cu caracter acid sau alcalin. n general, pentru a obine o curb de titrare bine definit se utili zeaz acizi i baze tari. Cei mai utilizai reactivi de titrare cu caracter acid utilizai n solveni neapoi sunt: acidul percloric, acidul 2,4-dinitrobenzensulfonic, acidul 2, 4, 6 trinitrobenzensulfonic, acidul para-toluensulfonic.
45
CHIMIE ANALITICA
Tabelul 3 Solveni neapoi utilizai In volumetria bazata pe reacii de neutralizare SOLVENTUL AMFIPROTIC Solveni am1b teri etilenglicol metanol etanol izopropanol t-butanol Solveniprotogenlci acid acetic acid formic SolveniprotofilicJ amoniac butilamin etilendiamin SOLVENTUL APROTIC acetonitril aceton piridin dimetilformamid nitrometan anhidrid acetic dioxan nitrobenzen benzen cloroform tetraclorur de carbon
Pentru dozarea substanelor cu caracter acid n solveni neapoi, se utilizeaz urmtorii reactivi de titrare cu caracter bazic: hidroxizi sau alcolai de tetrabutllamoniu, tetrametilguanidin, difenilguanidin. Aceti reactivi pot fi solubilizai n meta nol, etanol, izopropanol sau ntr-un amestec format din benzen i unul dintre alcoolii menionai. 4.2.1.3. VOLUMETRIA BAZAT PE REACII DE OXIDO-REDUCERE Reaciile de oxido-reducere sunt reaciile chimice care au loc cu transfer de electroni ntre substanele participante la reacie. Oxidarea se definete ca o cedare de electroni; substana care cedeaz elec troni este numit reductor i se noteaz cu "red". n general, o reacie de oxidare se scrie astfel: p red,-m p e" = 5 = s p ox, Reducerea se definete ca o acceptare de electroni; substana care accept electroni este numit oxidant i se noteaz "ox". Un proces de reducere se scrie In general astfel: moXj + m p e" st "" m red2 Oxidarea i reducerea sunt procese care decurg simultan, alctuind un cuplu de reacii denumit reacie de oxido-reducere sau reacie redox. Expresia general a unei reacii de oxido-reducere este:
p red, + m ox2 a 1 * p ox, + m redg

Deoarece reaciile redox sunt procese reversibile, se poate defini constanta de
46
METODE CHIMICE DE ANALIZ
echilibru aplicnd legea aciunii maselor: [oxj'-red,]" 1 Tendina de a accepta electroni sau de a ceda electroni este diferit de la un sistem la altul. O msur a puterii oxidante sau reductoare a unui sistem este dat de valoarea potenialului de oxido-reducere standard, determinat n raport cu poten ialul de oxido-reducere standard al electrodului normal de hidrogen. Electrodul normal de hidrogen are potenialul de oxido-reducere egal cu O.OOV (eHj=0,00V). Potenialele redox standard pot avea valori pozitive sau negative. Pentru un cuplu redox: Cu ct potenialul de oxidare este mai mare, cu att caracterul oxidant al cuplu lui este mai mare iar caracterul reductor este mai slab. Cu ct diferena dintre carac terul oxidant i reductor al cuplurilor participante la reacie este mai mare, cu att viteza de reacie va fi mai mare iar reacia chimic va fi mai complet. Potenialele standard ale unor sisteme redox care prezint importan pentru volumetrie sunt prezentate n tabelul 4. Reaciile chimice utilizate n volumetria bazat pe reacii redox trebuie s fie rapide, totale, stoechiometrice i s existe o modalitate sigur de deteminare a pun ctului de echivalen. 4.2.1.3.1. Substane cu caracter oxidant i reductor utilizate ca reactivi de dozare n volumetrie n volumetria bazat pe reacii redox se dozeaz substane cu caracter redu ctor folosind ca reactiv de dozare o substan cu caracter oxidnd i mai rar sub stane cu caracter oxidant folosind ca reactiv de dozare o substan cu caracter redu ctor. Reactivii cu caracter reductor sunt mult mai puin utilizai comparativ cu cei cu caracter oxidant datorit instabilitii pe care o prezint. Aproape toi agenii reductori sunt predispui la oxidare n prezena oxigenului din aer; cu ct caracterul redu ctor este mai puternic, cu att stabilitatea fa de oxigen este mai mic. 4.2.1.3.1.1. Substane cu caracter oxidant Permanganatul de potasiu este un agent de oxidare puternic i multilateral. El are aplicaii specifice, n funcie de mediul n care este utilizat: acid, bazic sau neutru: MnO;+8H* + 5e _ ss=2! Mn 2 + + 4H 2 0 MpO; + 4H* + 3e" MnOJ +1 e" MnO, + 2H g O
5?==
*** H i ] K r
(mediu acid) (mediu neutru) (mediu alcalin)
MnOf"
47
CHIMIE ANALITICA
Tabelul 4
Potenialele standard ale unor sisteme redox Ecuaia reaciei Co3* + 1e" -~ Co2* 2H.O Mn2* + 4H 2 0 +1,84 +1,77 1,51 +1.2 1.36 +1,33 +1.09 +0,536 MnO. 0.51 0,00 -0,41 -2,71
H2Os + 2H* + 2e _ MnO; + 8H* + 5e"
MnO" + 4H* + 3e" = = : MnO, + Cl, + 2e"

2
2 2
2H.0
2
2cr
Cr 0 "+ 14H* + 6e" ==== 2 0 ^ * + 7H,0 Br + 2e" = i 2Br"

2
I 2e-ag=S2r
2
Mn0 "+ 1e*

4
i +
2 e " : = = 2H+ Cd
Cd * + 2e"
Na* + 1 e " = 5 : Na
Un alt motiv, pentru utilizarea sa pe scar larg, este i faptul c acioneaz ca autoindicator. Primul exces de permanganat de potasiu, peste punctul de echivalen , determin apariia unei culori roz. Dezavantajele folosirii permanganatului de potasiu ca reactiv de dozare, constau n faptul c acesta nu este un standard primar i c soluia este instabil. Datorit faptului c dup perioade lungi de stocare se formeaz Mn0 2 , soluia trebuie filtrat i standardizat nainte de utilizare. Deoarece lumina catalizeaz reacia de formare a bioxidului de mangan este indicat ca soluia s fie stocat n sticle brune. n tabelul 5 sunt prezentate cele mai importante aplicaii ale manganometriei, Dicromatul de potasiu este un agent de oxidare mai slab dect permanganatul de potasiu n mediu acid. Soluia de dicromat de potasiu prezint urmtoarele avan taje: este un standard primar, este stabil la lumin, este stabil fa de diveri com pui organici i fa de clor. Dicromatul de potasiu este utilizat n mediu acid avnd loc procesul: Cr 2 0 2 "+ 14H* + 6e" 5 = 5 : 2CI 3 * + 7H 2 0 48
Tabelul 5
Principalele dozri manganometrice COMPONENTUL DE DOZAT (COOH)2 HN0 2 PRODUSUL DE REACIE C 0 2 + H20 HN0 3 Br2 Sn** H?0 + 0 2
4
KMnO. n soluie acid
Br
Sn * H202 [Fe(CN)6] Mo3* Fe2* 1" KMnO, n soluie neutr Mn * KMnO n soluie bazic
i o ;
2 2
[Fe(CN)6]3 MoO2 Fe3' h Mn0 2

i o
CN"
s o
2
CNO
s o ' s o r
HS"
Principalul dezavantaj al utilizrii bicromatului de potasiu n volumetrie const n faptul c att reactantul (Cr 2 0 2 ), ct i produsul de reacie (Cr3*) au culori intense: portocaliu i respectiv, verde. Dicromatul de potasiu se utilizeaz pentru dozarea ionului Fe2*, Cr3* i GI0 4 . Ca indicator n dicromatometrie se utilizeaz difenilaminosulfonatul de sodiu i acidul Nfenilantranilic. Iodul solubilizat n iodur de potasiu este utilizat ca agent oxidant conform reaciei: l2 + 2 e - = i 2 | Soluia de iod este utilizat pentru dozarea unor substane cu caracter reduc tor puternic sau moderat. n iodometrie se utilizeaz dou metode de titrare: a) Titrarea direct: soluia de iod este utilizat ca reactiv de titrare, ntr-o can titate stoechiometric: Sn 2 *+I 2 ->Sn 4 * +2T b) Titrarea invers: soluia de iod se adaug n exces n proba reductoare i
49
CHIMIE ANALITICA
apoi excesul de iod este titrat cu tiosulfat de potasiu:
I 2 W M C ^ U + 2Na 2 S 2 0 3 -2Nal + Na 2 S 4 O e Utilizarea soluiei de l2 implic cteva dezavantaje: la pH mai mare de 8, iodul prezint p disproporie uoar n favoarea I" i IO;; iodul este volatil, astfel c pier derile datorate evaporrii sunt apreciabile. Soluia de iod nu este o soluie standard dar se standardizeaz cu uurin cu ajutorul unei soluii de tiosulfat de sodiu stan dardizat la rndul su cu o soluie standard primar de bicromat de potasiu. n iodometrie se utilizeaz ca indicator amidonul deoarece cu iodul formeaz o coloraie albastr. Soluia de iod n iodur de potasiu este utilizat pentru dozarea unor ioni (tabe lul 6) i a unor substane compuse (glucoza, acid uric, acid ascorbic, aldehide). Tabelul 6 Dozri iodometrice (titrarea direct) Ionul analizat As3' Sb
3.
Produsul AsO3" SbO 3 ; Sn** S
Sn2*
s2s2o2-
so2-
Bromul. Datorit volatilitii i naturii sale corozive, soluiile de brom nu sunt folosite n volumetrie. n general, cea mai bun metod const n generarea bromului n mediul de reacie. Aceasta se realizeaz prin adugarea n proba aflat n soluie, a unei cantiti de soluie standard de KBrOa i KBr n exces, care va genera bromul prin reacia: BrO; + 5Br + 6t-r - 3Bra + 3H 2 0 Dup bromurare, bromul rmas n exces este redus la Br prin adugare de Kl:
Br2+2P -+2Br + l 2
Iodul rezultat este titrat cu o soluie standardizat de tiosulfat de sodiu. Bromul este utilizat pentru determinarea gruprilor funcionale organice (amine, fenoli, compui organici nesaturai). , 2,6 diclorfenollndofenolulm mediu slab acid (pH 6,9) are un caracter oxidant, reactivul fiind utilizat pentru dozarea unor compui organici cu caracter reductor (acidul ascorbic). Utilizarea soluiei de 2,6 diclorfenolindofenol prezint avantajul c reactivul funcioneaz i ca indicator; forma oxidat este de culoare albastr iar forma redus este incolor:
50

O OH
CI
CI
OH
OH
Forma oxidat (albastru)
Forma redus (incolor)
Un mic exces de reactiv, dup atingerea punctului de echivalent, determin apariia unsi culori roz. 4.2.1.3.1.2. Substane cu caracter reductor lodura de potasiu, tn exces, este utilizat pentru dozarea unor substane cu caracter oxidant. Oxidantul este redus, fn mod cantitativ, elibernd o cantitate echiva lent de iod, care este titrat cu o soluie standard de tiosulfat de sodiu in prezent de amidon. Ionul I' se utilizeaz pentru dozarea peroxizilor organici (peroxizi, hidroperoxizi, dialchilperoxizi). Tfosu/fatul de sodiu este un reductor moderat care in prezenta unei substane cu caracter oxidant se transform tn tetrationat conform reaciei: S O 2 ' s - a * S 0 2 "+ 2e" 1 3 4 6 . Ttosulfatul de sodiu cristalizeaz cu un numr incert de molecule de ap (apro ximativ 5). Din aceast cauz, utilizarea sa ca standard primar este improprie, solu iile de tiosulfat necesitnd standardizarea. Standardizarea soluiei de tiosulfat se efectueaz ou dicromat de potasiu. Soluia standardizat de tiosulfat de sodiu este utilizat pentru dozarea unor substane cu caracter oxidant dintre care amintim: IO;, IO a , BrO;, CIO,, HGIO, Cla, Br,, lg, MnO,, H A . MnOs. Ali reactivi de titrare cu caracter reductor sunt srurile solubile de: Ti (Iii), Cr (II) si Sn (11), care sunt reductori puternici. Utilizarea lor este totui restrns datorit instabilitii pe care o prezint, soluiile fiind preparate extemporaneu. Titanul (III) i cromul (II) pot fl utilizai pentru analiza nitro, nitrozo i azoderivallor, precum i a esteilor acidului azotic.
51
CHIMIE ANALITICA
4.2.1.3.2. Metode vizuale de determinare a punctului de echivalent Determinarea punctului final al titrrii se poate face vizual (cu ajutorul indica torilor) sau instrumental. Indicatorii de culoare redox sunt substane cu caracter oxidant sau reductor (excepie face amidonul) care pentru a fi utilizat tn volumetrie trebuie s-i schimbe culoarea brusc ta punctul de echivalen i s sufere o schimbare reversibil conform reaciei: lnd ox + nH 3 ty + ne" s==5S H n I n d ^ + nH 2 0
culoar I culoar* II
Proprietatea privind reversibilitatea este cel mai greu de atins deoarece forma final (redus sau oxidat) sufer procese adiionale Tn mediul de reacie i reacia de oxido-reducere devine ireversibil. Indicatorii cei mai utilizai Tn volumetria bazat pe reacii redox sunt prezentai Tn tabelul 7. Tabelul 7 Indicatori redox Indicator Albastru de metiten Difenitbenzidina Acid dlfenHaminosulfonic Complex feros-o-fenantrolin Acid N-fenilantranilic Culoarea forma redus forma oxidat incolor incolor Incolor rou incolor albastru violet (verde) violet (verde) albastru pal roz
4.2.1.4. VOLUMETRIA BAZAT PE REACII CU FORMARE DE COMBINAII COMPLEXE (COMPLECI) 4.2.1.4.1. Structura combinaiilor complexe Combinaiile complexe sunt compui care se formeaz prin coordinarea unor ioni sau molecule numii liganzim jurul unui ion central (cel mai frecvent ion metalic), sarcina ionului complex rezultat fiind neutralizat de un alt ion din mediul de reacie. De exemplu, Tn hidroxiddiaminoargintic ionul central este Ag* i este nconjurat de dou molecule de amoniac formnd ionul complex [Ag(NH 3 ) 2 ]*.
ion central
ION COMPLEX
ligand
52
Numrul da liganzi care intr tn structura Ionului complex poart numele de numr de coordinaie. n general numrul de coordinaie are valori cuprinse ntre 2 i 6 i foarte rar este 7 sau 8. Ca ion central n combinaiile complexe apar n majoritatea cazurilor metale tranziionale i mai rar alte metale ca Al, Ca, Mg. Liganzi n aceti compui pot fi molecule neutre ca: NH3, H 2 0, C5HSN (piridin) sau ioni, ca: F", CI", I", CN", SCN" etc. Dup numrul de legturi coordinative pe care le pot forma, liganzii se clasific astfel: - liganzi monodentai, se ataeaz de ionul central printr-un singur punct de coordinare: F", CI", I", SCN", CN", NH3, H 2 0, piridin; - liganzipolidentai, se ataeaz de ionul metalic central prin mai multe puncte de coordinare; Liganzii polidentai cu dou puncte de coordinare sunt bidentap, cu trei tridentai, cu patru tetradentai. Exemple de liganzi polidentai:
acidul ortoamonibenzoic \ J
I
\
1
\
H2N C H j C H 2 NH C H 2 CH 2 NH 2
H3C C = N OH H3CC = N OH
i*
dimetllglioxlma
dietilentriamina
n sistemele de tip polidentat, coordinarea are ca rezultat formarea ciclurilor care confer o stabilitate mrit produilor rezultai. Aceti compui se numesc chelai iar liganzii implicai n coordinare se numesc ageni de chelatare. Formarea combinaiilor complexe La formarea combinaiilor complexe particip, ca ion central, n special metale tranziionale deoarece, ionii metalelor tranziionale posed orbitali liberi n care pot accepta electronii neparticipani ai ligandului, stabiiindu-se astfel legturi coordinative ntre ionul central i liganzi. tn general, posibilitatea ca un ion metalic s existe ntr-o stare simpl, necoordinat, apare numai n stare gazoas la temperaturi ridicate. La dizolvare, n prezena moleculelor de solvent, ionul metalic va coordina moleculele solventului avnd loc fenomenul de sotvatare. Numrul de molecule de solvent care se leag coordinativ de ionul metalic va fi dependent de structura i volumul ionului precum i de structura moleculelor de solvent. Dac solventul l constituie apa, procesul se numete hidratare i are loc con form reaciei:
53
CHIMIE ANALITICA
fwT + xHaO s = B (rvKH.OJJn cazul liganzilor monodentai, o reacie de compJexare, Tn soluie apoas, poa te fi definit ca acea reacie Tn care una sau mai multe molecule de ap, din sfera de coordinare a ionului metalic, este nlocuit de ctre alte molecule sau ioni. Ugandul L (molecule neutre sau ioni) va substitui succesiv moleculele de ap obinndu-se o sene de compleci: [M(H i! 0)J n * + L1"" = = = f M ^ O ^ L r " + H 2 0
fJM(H20).,LRN + L"" = = = :
1
lM(H,0),4L,r*" + HaO
Numrul de etape ale procesului de formare a combinaiei complexe va fi egal cu numrul de coordinaie al ionului metalic. n cazul liganzilor polidentai procesele de substituire a moleculelor de ap are loc cu viteze mult mai mari, iar diferenele dintre constantele de stabilitate, pentru fie care treapt, sunt semnificative, stoechiometria reaciilor fiind mai precis. Din acest motiv, procesul de chelatare se poate considera c are loc Tntr-o singur treapt, substituirea moleculelor de ap din sfera de coordinare a ionului metalic avnd loc instantaneu. De exemplu, n cazul formrii complexului metal-EDTA ecuaia reaciei este: [M(H 2 0) < T + H,Y* =s== [MYr-4 + 2H* + xH 2 0 Acest tip de reacii prezint avantajul c sunt aproape totale, echilibrul chimic fiind deplasat spre dreapta, rapide i prezint o anumit selectivitate n funcie de pHul de lucru. 4.2.1.4.2. Reactivi de titrare utilizai In volumetria bazat pe reacii cu formare de compleci Reactivi de titrare care conduc la formarea complecilor tn mal multe trepte Muli reactiv) monodentai formeaz o serie de compleci In etape succesive, fiecare etap implicnd o constant de formare. n mod uzual, valorile constantelor de formare sunt mici, adeseori fiind aproape similare, astfel c reacia nu are o stoechiometrie definit cu claritate. Deoarece Tn urma reaciei se formeaz mai muli produi de reacie, punctul de echivalen este foarte greu de precizat. De exemplu, pentru dozarea ionului Zn** se poate utiliza ca reactiv de titrare o soluie de amoniac conform reaciei: Zn 2 * + 4NH 3 * [ZnNhQJ2* n realitate, ns, reacia are loc n patru trepte, pentru fiecare treapt existnd o
54
METODE CHIMICE PE ANALIZA
constant de stabilitate, K,: Zn * + NH 3 fZnNHjjf* \2n(HHjif* + NH .=r f2n(NH ) f*

3 i 2
[Zn(NH3)f* [zn *][NH3]

2
= 1 9 x 1 Q 2
[Zn(NH ) f '* [Zn(NH 3 )f*[NH 3 ]

+
^ . o
Pn(NH )J* + N H * = * |Zn(NH,),f

3
3
K
K
rZn(NH )3f + N H
3
fZnfNrgj* *
..
"
" [Zn(NH3)2r [NH3]

[Zn(NH 3 ) 3 rt |NH 3 ]
[Zn(NH 3 ) 3 f*
i- 2,5x10*
,1x10
Pentru reacia global, constanta de stabilitate va fi: K.=K^K,s K^.K.4=4^510 Deci, un amestec de NH 3 i Zn2* tn raport molar 4:1 va conduce la apariia ionului de zinc sub cinci forme: Zn 2 *, [Zn(NH3)]2*, [Zn(NH 3 ) 3 ] 2 *, [Zn(NH 3 ) 3 f* i (Zn(NH 3 ) 4 r*. i Din acest motiv, dac se urmrete modificarea concentraiei ionului de zinc la adugarea de amoniac se observ o scdere gradat a concentraiei ionului. Deoa rece procesul nu prezint o scdere brusc a concentraiei ionului Zn2*, punctul de echivalen nu poate fi detectat cu precizie. Aceast reacie prezint i dezavantajul unei viteze de reacie sczute. " Inexistena unui salt la echivalen precum i vitezele de reacie relativ sczute fac imposibil utilizarea agenilor de complexare monodentai ca reactivi de dozare n volumetrie. Reactivi de titrare care conduc la formarea complecilor ntr-o singur treapt Aceste metode, cu o utilizare din ce n ce mai larg, conduc la formarea de cheia fi \ din acest motiv se mai numesc i metode che/atometrice. Din grupa acestor metode o ntrebuinare larg au cptat-o metodele complexonometrice care folo sesc ca reactivi de titrare soluii de complexoni. Complexonii sunt acizi poliaminopolicarboxilici care formeaz cu majoritatea cationilor sruri stabile numite comptexonafi. Acizii poliaminopolicarboxilici (complexoni) combin proprietile de coordinare ale azotului din gruparea amino cu proprietile gruprilor carboxil. Gruprile amino prezint o puternic tendin de coordinare a ionilor de Cu, Ni, Co, Zn, Cd precum i a altor ioni feforrrâai compleci cu amoniacul. Ionul carboxil, la fel ca i ionul acetat, prezint tendina de a coordina aproape toi ionii metalici. Luate individual, cete dou grupri formeaz cu ionii metalici com pleci cu stabilitate redus. Prezena ambelor tipuri de grupri ntr-o molecul impri m moleculei proprietatea de ligand polidentat conducnd la creterea stabilitii complexului format. Creterea stabilitii este determinat nu numai de existena unor puncte multiple de coordinare ci i de formarea unor cicluri inramoleculare care mresc efectul de chelatare.
55
CHIMIE ANALITICA
Cel mai utilizat acid poliaminopolicarboxilic este sarea disodic a acidului etilendiaminatetraacetic notat prescurtat EDTA (complexon III, versen, versenat de sodiu chelaton, trilon B). EOTA are urmtoarea structur: pu M,CH2-CCONa C H *-N<CHa-COOH
*H _ M ^ O H 2 C O O H
C H
'
N<
CH2-COONa
i poate fi notat In forma general: Na2H2Y sau H2Y2'. Acesta formeaz cu ionii metalici bivaleni, trivaleni i tetravaleni complexonat solubili i stabili, conform ecuaiilor M 2 * + HjY2" + 2 H 2 0 = = MY2" + 2H 3 0* M 3 * + H2Y2' + 2H2Q as= MY' + 2HaO* M 4 * + H2Y2' + 2H 2 0 ss==5" MY + 2H 3 0* Pentru un ion metalic M"*, reacia general este: M n * + H2Y2" + 2H 2 0 5 = = MY""4 + 2H a O* iar constanta de stabilitate are urmtoarea expresie:
iz
[M"-].[H2Y2-]
Oin expresia constantei de stabilitate se observ dependena acesteia de con centraia n ioni de hidrogen. Din acest motiv n cazul acestor determinri se lucreaz In prezena unui sistem tampon care trebuie s fac fa creterii concentraiei ionilor de hidrogen n cursul titrrii. n funcie de constantele de stabilitate ionii metalici reacioneaz cu EDTA ntrun anumit interval de pH. Astfel, n condiii bazice (pH 8-11) se pot doza ionii Mg2*, Ca2*, Sr2* i Ba2*, n condiii slab acide i slab bazice (pH 4-7,5) ionii Mn2*, Fe2*, Co2*, Ni2*, Cu2*. Zn2*, Cd2*, Pb2*, Al3* iar n condiii puternic acide (pH 1-4) se pot doza ionii Fe3*, Bi2*, Co2*, Cr3*, Hg2*, Sn2+. Controlul pH-uiui n cazul dozrilor cu EDTA confer reaciei un anumit grad de selectivitate fiind posibil dozarea unui ion In prezena altor toni metalici. n volumetrie au fost elaborate metode de titrare, direct sau indirect, pentru dozarea aproape a tuturor ionilor metalici, pentru fiecare ion fiind caracteristic o anumit valoare de pH. De exemplu, la pH puternic alcalin tonul de calciu formeaz cu EDTA complexonatul Ca-EDTA cu formula:
56
CH 2 Ca CH2-N<CH2-COO CH2-COOH n dozrile volumetrice care folosesc ca reactiv de titrare soluia de EDTA se nregistreaz un salt la punctul de echivalen, acesta putnd fi detectat uor prin metode vizuale i instrumentale precum i o vitez de formare a complexonatulu CaEDTA remarcabil. Aceste dozri se caracterizeaz i printr-o sensibilitate apreciabil, metoda fiind utilizat pe domeniu de concentraie semimicro-micro. Titrrile cu EDTA sunt utilizate tn laboratorul clinic la dozarea calciului i magneziului din urin i ser sanguin. Sarea disodic a acidului etilendiaminotetraacetic sub form de dihidratat, se poate utiliza ca standard primar. Se recomand pstrarea soluiilor de EDTA n reci piente de plastic, deoarece soluia se poate contamina cu ionii metalici din sticl. Nu se utilizeaz c.cidul etilendiaminotetraacetic liber i sarea sa monosodic deoarece aceti compui sunt insolubili n ap. Poliaminele reprezint o clas de ageni chimici de chelatare de tipul aminelor primare, secundare i teriare. Creterea numrului de puncte de coordinare crete efectul de chelatare i implicit stabilitatea complexului format l sensibilitatea reac tivului. Cele mal utilizate poiiamine n volumetrie sunt etilendiamina, 1,3-diaminopropanul, dietilentriamina, 1,2,3-triaminopropanul, trietilentetraamina (Trien), p,p',p"-triaminotrietilamina i tetraetilenpentaamina (Tetren). H2N - CH 2 - CH 2 - NH 2 etilendiamina H2N-CH2-CH2-NH-CH2-CH2-NH2 dietilentriamina H2N - CH 2 CH 2 CH 2 - NH 2 1,3-diaminopropan H2N CH 2 CHNH 2 CH 2 NH 2 1,2,3-triaminopropan
H2N - CH 2 - CH 2 - NH - C H 2 - C H 2 - NH - C H 2 - C H 2 - NHj trietilentetraamina ^C^-CHj-NH, N CH2-CH2-NH2 ^CH2-CH2-NH2 p,p',P"-triaminotrietilamin
57
CHIMIE ANALITICA
H,N - CH - CH a - NH - C H - C H , - NH - C H 8 - C H a - NH - C H 8 - C H - NH 2 tatraetilenpentaamin Poiiaminele sunt ageni de complexare foarte buni dar, nu sunt reactivi de titrare universali, deoarece formeaz compleci stabili numai cu acei ioni metalici care coordineaz amoniacul (Ni, Zn, Cu). Cele mai utilizate poliamine Tn volumetrie sunt trienul i tetrenul. * 4.2.1.4.3. Metode vizuale de determinare a punctului de echivalen Cea mai utilizat metod de detectare a punctului de echivalen este metoda indicatorilor metalcromici. * Indicatorii metalcromici sunt compui care complexeaz ionul de dozat formnd complexul rnetal-indicator cu o coloraie intens, diferit de cea a indicatorului ne complexat, n general, nu se observ erori de titrare, deoarece indicatorul se adaug tn cantiti ce nu depesc nivelul de urme. Complexul metal-indicator trebuie s aib o constant de stabilitate optim. Dac aceasta este prea mare, proba va fi supratitrat, iar dac este prea mic proba va fi subtitrat. Cel mai cunoscut indicator metalcromic l constituie ionul tiocianat. Acest ion este utilizat ia dozarea ionului Fe3* cu EDTA la pH 3, deoarece ionul Fe3* cu ionul tiocianat formeaz un complex rou-snge. n cursul titrrii cu EDTA, ionul Fe3* este scos din complexul Fe 3 , -SCN" formnd complexonatul Ca-EDTA incolor, cu stabi litate mai mare: Fe?*_ + S C N ' g = = F e 3 * - S C N ' + Fe3* rou - snge Fe 3 * + F e 3 * - SCN" + EDTA W = = F e 3 * - EDTA + SCN" incolor Momentul echivalenei este marcat de modificarea culorii de la rou intens la incolor. Eriocrom negru T este utilizat ca indicator la dozarea complexonometric cu EDTA a unui numr mare de cationi. Acest indicator formeaz compleci colorai cu diferii cationi: Ca2*, Mg2*, Zn2*, Cd2*, Ag*. Al3*. Fe3*, Co2*. Ni2*. Hg2*, lantanide, n anumite condiii de pH. Din punct de vedere cido-bazic indicatorul este un acid organic dlbazic slab. n funcie de pH, eriocrom negru T se prezint sub trei forme diferit colorate: H 2 l n d - ^ = f H lnd 2 'ii=r Ind 3 '
pH<7 rou 7<pH<11,5 albastru pH>11,5 portocaliu
Acest indicator este utilizat la pH mai mare dect 7, cele-mai multe determinri complexonometrioe, cu acest indicator, se efectueaz la pH 10. Pentru realizarea
58
'
______
acestei valori de pH se lucreaz n prezena tamponului NH3-NH4CI. Eriocrom negru T nu este un indicator adecvat pentru dozarea ionului Ca2* cu EDTA, deoarece complexul Ca-lndcator este instabH, proba de analizat fiind subti trat. Indicatorul este utilizat la dozarea volumetric a ionului Mg2* precum i la deter minarea duritii apel (dozarea ionilor Ca2* plus Mg2*). Murexidul tim punct de vedere acido-bazic este un acid organic polibazic slab. Murexidul formeaz compleci colorai cu ionii: Ni2* (galben), Cu2* (portocaliu), Ca2* (rou). n funcie de pH exist trei forme ale indicatorului, diferit colorate: H4lnd*
pH<9 rou-violet
H 3 ind 2 -*--5r H2lnd3'

9<pH<11,5 violet pH>11,5 albastru-violet
Murexidul se utilizeaz ca indicator la dozarea volumetric a ionului Ca2* cu EDTA la pH 1 i, cnd se nregistreaz virajul indicatorului de la rou la violet. Murexidul i ericrom negru T sunt instabili n soluie apoas i de aceea se utilizeaz n stare solid n amestec cu ciorur de sodiu. 4.2.1.5. VOLUMETRIA BAZAT PE REACII DE PRECIPITARE Reacii de precipitare Reaciile analitice bazate pe procese de precipitare constituie o ramur de baz a chimiei analitice. Un numr mare de separri, identificri i dozri se bazeaz pe reacii cu formare de precipitate. Reaciile cu formare de precipitate sunt procese chimice de echilibru care de curg n sistem eterogen, format din dou faze: faza solid (precipitatul) i faza lichid (mediul lichid de reacie). Precipitarea este complet n momentul n care ntre preci pitatul format i soluia saturat se stabilete un echilibru dinamic, cnd numrul ioni lor care se depun pe suprafaa precipitatului n unitatea de timp (la temperatur con stant) este egal cu numrul ionilor care trec n soluie n aceeai unitate de timp. Dac notm cu A_B sarea greu solubil (precipitatul) format n urma reaciei de precipitare, iar ionii si cu A"*, B", n soluia saturat va exista echilibrul: (Am Bn)( s = = _ m A"*(,q) + n B% Aplicnd legea aciunii maselor la aceast reacie de echilibru, rezult [AmB] Concentraia fazei solide, AmB, reprezint o mrime constant i poate fi tre cut n membrul stng al relaiei de mai sus obinnd: K[mBn] = P s = [ A " * ] m . ^ - ] n Aceast relaie reprezint expresia general a produsului de solubilitate (P s ) a unui electrolit greu solubil de forma A _ B . Produsul de solubilitate este o mrime care indic posibilitatea de a trece un ion
59
CHIMIE ANALITICA
ntr-o faz greu solubil. n funcie de relaia care exist ntre produsul de solubilitate i concentraiile-ionilor n soluie, soluiile pot fi: a) soluH nesaturate: [A** ]m [_B~ ]* < P8 b) soluii saturate: j/T ] M { B 1 - ]" = P 8 c) soluii suprasaturate: [A"*]m JB'""]" >P 8 Precipitatele se formeaz numai n cazul n care soluia este suprasaturat. ntr-un astfel de sistem, cnd soluia saturat a electrodului greu solubil se afl n contact cu faza solid, dac se modific concentraia unuia dintre ioni, echilibrul se va deplasa conform principiului lui Le Chtelier. Astfel, creterea concentraiei ionului A"* sau a ionului B M " conduce la formarea unei cantiti suplimentare de precipitat iar scderea concentraiei ionilor conduce la solubiiizarea unei cantiti de precipitat. Cele dou procese au loc pn la stabilirea unei noi stri de echilibru ntre ionii din soluia suprasaturat i ionii electrolitului greu solubil. Analiza volumetric utilizeaz reaciile de precipitare pentru determinarea canti tativ a diverilor constitueni, de regul ioni. n analiza volumetric sunt utilizate numai reaciile care conduc la precipitate practic insolubile, valoarea produsului de solubilitate s aib o valoare ct mai mic, i care decurg rapid. n cazul reaciilor lente apare fenomenul de supratitrare datorit absorbiei ionilor din reactivul de titrare la suprafaa precipitatului. Din acest motiv, multe reacii de precipitare, ca de exemplu titrarea ionilor metalici cu hidroxizi alcalini, nu sunt utilizate n practic. Factorul care guverneaz desfurarea complet a unei reacii de precipitare este solubilitatea precipitatului. Cu ct un precipitat este mai greu solubil, cu att reacia de precipitare este mai complet la punctul de echivalen iar precizia de dozare va fi mai mare. Cu toate c sunt cunoscute foarte multe reacii de precipitare, nu toate sunt utilizate n volumetrie deoarece nu satisfac condiiile menionate mai sus. Cele mai utilizate reacii de precipitare n analiza volumetric sunt reaciile de dozare ale halogenilor (CI'.Br i a pseudonatogenHor (RS",CN",SCN") cu ionul Ag* i doza rea ionului sulfat cu ionul Ba2*. 4.2.1.5.1. Dozri volumetrice bazate pe reacii de precipitare La dozarea ionului halogenur (X ) cu o soluie de concentraie cunoscut de azotat de argint are loc reacia de formare a precipitatului: X " M + A g r M - s = = AgX w Pe msur ce se adaug reactivul de titrare, concentraia ionului X' scade n mod treptat deoarece se formeaz compusul greu solubil AgX. La atingerea punctului de echivalen, concentraia ionului X' nu poate fi zero, deoarece precipitatul AgX este n echilibru cu ionii si. Cantitatea de ioni X" din soluie este determinat de valoarea produsului de solubilitate pentru compusul AgX, punctul de echivalen al titrrii fiind atins atunci cnd se atinge starea de echilibru pentru ionii din soluia suprasaturat i precipitat. La atingerea punctului de echivalen se constat o modificare brusc a concentraiei ionului X" (figura 8). Adugarea unui mic exces de
60

-LOFLM , ,
A(H>jlm,>
Figura 8 - Curba de titrare a ionului X" cu azotat de argint reactiv de titrare determin formarea unei cantiti suplimentare de precipitat. Pe msur ce scade concentraia ionului de dozat i concentraia reactivului de titrare se constat o scdere a saltului ia punctul de echivalen, determinnd o detectare mai dificil a acestuia. Mrimea saltului la punctul de echivalen este influenat i de valoarea produ sului de solubilitate. Cu ct solubilitatea precipitatului format este mai mic (P s are o valoare ct mai mic), cu att saltul nregistrat la punctul de echivalen va fi mai mare. Acest proces este ilustrat n figura 9 i n figura 10, unde sunt prezentate o serie de curbe de titrare teoretice n funcie de valoarea produsului de solubilitate. Cu ajutorul acestor curbe, putem concluziona c dozarea ionilor CP, Br" i r prin titrare cu o soluie de AgNQ3 este cantitativ; dozarea ionului sulfat este canti tativ prin titrare cu o soluie ce conine ionul Ba8*, semicantitativ cu Sr2* i necan titativ cu o soluie de Caz*. , Se poate anticipa c se pot obine rezultate bune la analiza amestecurilor T-Br" i r - C r i satisfctoare pentru amestecul B r - C r pentru care dife renele ntre produsele de solubilitate sunt sczute. Pentru dozarea ionului Cr se poate utiliza ca reactiv de titrare i o soluie de azotat mercuric: 2CI" + Hg(N0 3 ) 2 -* HgCI2 + 2 N 0 3 Aceast metod este caracterizat de o sensibilitate mrit precum i de un salt calitativ la punctul de echivalen mult mai mare comparativ cu metoda titrrii cu azotat de argint. Aceste avantaje sunt datorate valorii mult mai mici a produsului de solubilitate a clorurii mercurice (P S H ( f e C l ! =1,1-10"18). Datorit sensibilitii i preciziei de determinare a punctului de echivalen pe care o prezint, aceast metod este utilizat n laboratorul clinic pentru dozarea cloremiei.
61
CHIMIE ANALITICA 49CX-1
Afli
P,-8,3 1 0 "
Ps-5,2 1 0
M
i
i
g
Afli AgBr AgCI /
AgBr
P-1,8 1 0
VA9N0>(ml>
Figura 9 - Curbele de titrare pentru dozarea ionilor I", Br i cr cu o soluie de AgNO,
-JOGLSO]
VnKthi(ml)
Figura 10 - Curbele de titrare calculate pentru dozarea ionului SO 2 * cu soluii de Ca2*, Sr2* i Ba2* 4.2.1.5.2. Metode de determinare a punctului de echivalen Cele mai utilizate metode de determinare a punctului de echivalen, n volume tria bazat pe reacii de precipitare, folosesc indicatori de culoare. Aceste metode se bazeaz pe formarea unui precipitat i apariia unei culori ia suprafaa precipitatelor. Totui, n generai, aceste metode sunt utilizate la dozarea unor halogenuri i pseudo-
62
halogenuri cu azotat de argint, reactivii chimici utilizai ca indicatori pentru aceste reacii nefiind indicai i pentru alte titrri bazate pe reacii de precipitare. Metoda Mohr Aceast metod se bazeaz pe formarea unui precipitat la punctul de echiva len fntre ionii indicatorului i ion de dozat, atunci cnd acesta atinge concentraia corespunztoare a punctului de echivalen. Pentru utilizarea acestei metode este necesar s aib loc nti precipitarea ionului de dozat cu reactivul de titrare i apoi s se formeze cel de-al doilea precipitat. De exemplu, la titrarea ionului de clor cu azotat de argint se utilizeaz ca indi cator cromatul de sodiu. Procesele care au loc n cazul acestei dozri sunt: Pe parcursul titrrii: La punctul final: Ag*+CI"-> AgCI,,, 2Ag + + C r O f - > Ag 2 Cr0 4( rou Cromatul de sodiu, care acioneaz ca indicator, este adugat n proba care conine ionul de clor. Pentru a fi un indicator eficient, ionul cromat trebuie s reac ioneze cu ionul de argint atunci cnd n soluie se atinge concentraia ionului de argint corespunztoare punctului de echivalen. n concluzie, n cursul titrrii se formeaz un precipitat alb de ciorur de argint iar la punctul de echivalen se va forma un precipitat rou de cromat de argint. Deoarece ionul cromat imprim soluiei o culoare galben, virajul de la galben la rou este sesizat cu o eroare destul de mare. Pentru a evita eroarea de titrare care apare datorit culorilor contrastante (galben-rou) soluia de cromat de potasiu trebuie s aib o concentraie sczut. Din cauza preciziei sczute de determinare a punctului de echivalen, metoda Mohr are o aplicabilitate restrns. Ea poate fi utilizat pentru dozarea ionilor CI" i Br", dar nu i pentru dozarea ionilor I" i SCN". Metoda Volhard Aceast metod este utilizat la dozarea ionului de argint cu o soluie standard de tiocianat i folosete ca indicator o soluie care conine ionul Fe3*. Indicatorul este adugat n soluia care conine ionul de argint, pe parcursul titrrii formndu-se tiocianura de argint: Ag* + SCN" = AgSCN (s) Adugarea unui mic exces de reactiv de titrare determin apariia brusc a unei culori roii datorate complexrii ionului Fe3*: Fe 3 * + SCN" = = = [Fe(SCN)F+ rou Aceast metod se poate folosi i la dozarea halogenurilor cu o soluie stan dardizat de azotat de argint, procedeul fiind bazat pe titrarea indirect. Pentru a realiza o astfel de dozare, n soluia care conine ionul X" se adaug un volum exact msurat de soluie standard de azotat de argint n exces. Ionii de argint nereacionai (aflai n exces) sunt titrai cu o soluie standard de SCN", utiliznd ca indicator ionul Fe3*.
63
P s =1,8"IO" 10 Ps=t1-10_,z
CHIMIE ANALITICA
Comparnd produsele de solubilitate pentru AgCI (1>8-10",), AgBr (5.2-10" 13 ), Agi (8,3ICr'7) cu produsul de solubilitate pentru AgSCN (110" 1 2 ) putem conclu ziona c aceast metod poate fi utilizat numai pentru dozarea ionilor Br" i I". Deoarece produsul de solubilitate pentru ciorur de argint este mai mare dect cel al tiocianurii de argint, Tn cazul dozrii ionului CI' eroarea nregistrat este foarte mare. Prin metoda Volhard pot fi dozai i ali anioni, care formeaz cu ionul de argint sruri greu solubile. . Pentru ca erorile de dozare s fie ct mai mici se are In vedere ca solubilitatea srii de argint a anionului de dozat s fie mai mic dect cea a precipitatului de AgSCN. Metoda Volhard de determinare a punctului de echivalen, este utilizat i pentru dozarea ionilor CN", SCN", CO 2 ", CrO2", PO,", S2" i BH,, ioni care for meaz cu ionul Ag* sruri insolubile. Deoarece n aceste reacii de precipitare este implicat ionul Ag*, aceste metode de dozare se numesc i metode argentometrice. Metoda Fajans n cazul acestei metode, aciunea indicatorului const n apariia sau dispariia unei anumite culori la suprafaa precipitatului. Metoda Fajans utilizeaz indicatori de adsorbie deoarece procedeul implic adsorbia sau desorbia indicatorului la supra faa precipitatului. Indicatorii de adsorbie sunt compui cu proprieti acide sau bazice care pot disocia, n funcie de pH-ul mediului, conform ecuaiilor: H Ind = = _ H* + Ind" Ind OH ====_ Ind* + HO" Pentru dozarea ionului CI", cu o soluie standardizat de azotat de argint, se utilizeaz ca indicator fluoresceina. n condiii experimentale optime fiuoresceina se afl n soluie sub forma Ind". Pe parcursul titrrii, ionii CI" din mediul de reacie se acumuleaz pe suprafaa precipitatului de AgCI determinnd apariia unui strat pri mar de ioni de clor, cu sarcin negativ:
+cr
cr or
Astfel, forma anionic a fluoresceinei va imprima soluiei o fluorescent verdeglbui. Dup atingerea punctului de echivalen, primul exces de ioni Ag* va fi adsorbit la suprafaa precipitatului determinnd formarea unui strat primar de ioni de argint, de sarcin pozitiv:
Ag*
64
METODE CHIMICE PE ANALIZ
Imediat, antonii de fluorescein vor aciona ca nite contratoni i vor fi adsorbii la suprafaa precipitatului determinnd colorarea precipitatului fn roz-rou. Pentru obinerea unor erori ct mai mici este necesar ca particulele de precipitat s fie ct mai mici i s se gseasc ntr-o stare de dispersie avansat, tn mod ideal, parti culele trebuie s se menin n aceast stare n mod uniform, pe parcursul titrrii iar adsorbia indicatorului s fie puternic.
Cu ajutoul unui indicator adecvat, prin metoda Fajans se poate determina punctul de echivalen pentru un numr foarte mare de dozri, cteva dintre acestea fiind prezentate n tabelul 8. Tabelul 8 Indicatori de adsorbie utilizai n volumetria bazat pe reacii de precipitare Ionii de dozat SCN", CI", Br", r Br" Rou Congo Diclorfluorescein Difenilcarbazon Albastru de bromtimol Eozin Fluorescein Hgf SCN", CI", Br", 1" CI", Br", 1" Reactivul de dozare
AgN03
Indicator Albastru de bromfenol
Hg 2 (N0 3 ) 2
SCN", CI", Br" AgNCv,

AgN03 AgN03
CN", Br", SCN" cr

SCNBr", r, SCN" Cr, Br", r, SCN", [Fe(CN)6] 4
Hg(N0 3 ) 2
AgN03
Ag+ Ag+ Ba(OH)2
so2-
Determinarea punctului de echivalen n volumetria bazat pe reacii de preci pitare necesit un control riguros ai condiiilor experimentale. Alegerea incorect a indicatorului i a condiiilor de reacie, determin modificarea de culoare la un mo ment aflat mult prea departe de punctul de echivalen i deci, la apariia unor erori de titrare. Din aceast cauz, pentru detectarea punctului de echivalen, sunt utili zate metode instrumentale, cum sunt cele poteniometrice.
65
CHIMIE ANALITICA
4.2.2. ANALIZA GRAVIMETRIC Gravimetria cuprinde totalitatea metodelor chimice de analiz cantitativ care, pentru determinarea unuia sau a mai multor consitueni din prob, utilizeaz sepa rarea acestora sub form de compui greu solubili. Precipitatul se prelucreaz astfel nct s fie puf, s fie adus la o form stabil de compoziie bine definit. Prin cnt rire se determin masa precipitatului l din relaia stoechiometric ce exist ntre masa produsului obinut, i masa constituentului analizat se determin coninutul tn constituent al probei. Principalele operaii utilizate n analiza gravimetric Analiza gravimetric presupune o succesiune de operaii dintre care mai impor tante sunt: - pregtirea substanei pentru analiz i luarea probei; - aducerea probelor n soluie; - precipitarea; - filtrarea i splarea precipitatelor; - cntrirea; - calcularea rezultatelor. Pregtirea substanelor n vederea analizei se face n aa fel nct proba s reprezinte compoziia medie a masei de material analizat. Dac materialele analizate sunt gaze, soluii sau substane solide omogene de granulaie mic, luarea probei nu prezint dificulti; condiia care se pune este ca proba s conin o cantitate sufici ent din componentul ce urmeaz a fi determinat. Prelevarea probelor din materiale neomogene se face n aa fel nct coninutul lor s corespund coninutului mediu al materialului. Aducerea probelor solide n soluie se realizeaz cu diverse substane numite dizolvani (solveni), care se aleg n funcie de compoziia i structura materialelor ce se dizolv. Cei mai utilizai ageni de dizolvare sunt: acizii, bazele, complexanii. Precipitarea este operaia prin care constituentul analizat este trecut ntr-o for m greu solubil. Reactivii utilizai se numesc ageni de precipitare. Precipitatele utilizate n analiza cantitativ trebuie s ndeplineasc urmtoarele condiii: - s fie practic insolubile; - s prezinte o structur morfologic care s permit o filtrare rapid i o sp lare de impuriti practic complet; - s posede sau s se transforme ntr-un produs cu o compoziie bine definit, cu formul cunoscut; - prin uscare sau calcinare s capete o form stabil, de compoziie cunos cut; - coninutul componentului analizat n precipitat trebuie s fie ct mai mic posi bil, astfel nct erorile ce intervin s fie neglijabile. Filtrarea este operaia prin care se realizeaz separarea fazei solide cu ajutorul materialelor poroase numite filtre. Materialele din care se confecioneaz filtrele sunt: hrtia, porelanul poros, sticla poroas, azbestul. Splarea precipitatelor are drept scop ndeprtarea impuritilor reinute la su prafaa precipitatului i de ctre masa filtrant. Compoziia lichidelor de splare se
66
alege Tn general n funcie de solubilitatea i structura precipitatului. Uscarea l calc/narea precipitatelor se efectueaz pentru ndeprtarea, prin volatilizare, a urmelor de solveni sau a produilor volatili precum i n scopul tran sformrii chimice a precipitatului cu eliminarea unor componeni. Operaia de uscare se efectueaz la temperaturi care variaz ntre 20C i 400C. Calcinarea se efectueaz la temperaturi ridicate (400-1200C) i implic, n unele cazuri, transformri chimice ale precipitatului. Cntrirea n analiza gravimetric trebuie s fie ct se poate de exact i precis. n acest scop sunt utilizate balanele analitice. Calcularea rezultatelor se efectueaz cunoscnd cantitatea de substan solid deinut (forma cntrit) i relaia de mas existent ntre componentul analizat i substana cntrit:
- masa componentului ce se determin = masa substanei solide cntrite = masa rr Secular (atomic) a componentului ce se determin masa molecular a substanei solide cntrite Procedeele gravimetrice se utilizeaz n special pentru determinarea unor spe cii anorganice i mai rar pentru cele organice.
x m M Mc
67
5. METODE FIZICO-CHIMICE DE ANALIZ

Metodele fizico-chimice de analiz permit decelarea componentului de dozat, fn mod indirect, prin determinarea cu ajutorul unor aparate a caracteristicilor fizice cum sunt: absorbia luminii, intensitatea culorii, conductibilitatea electric, indicele de re fracie, diferena de potenial etc. Deoarece metodele fizico-chimice de analiz necesit utilizarea unei aparaturi speciale, necesare determinrii unei proprieti fizice a sistemului de analizat, sunt cunoscute i sub numele de metode instrumentale. 5 . 1 . CLASIFICAREA M E T O D E L O R F I Z I C O - C H I M I C E DE ANALIZ A. Metode optice. Metodele optice se bazeaz pe modul n care reacioneaz proba de analizat sub aciunea unei radiaii electromagnetice. Proprietile optice care pot fi corelate cu concentraia sunt: absorbia sau emisia de energie radiant, dispersia energiei radiante, modificarea direciei de propagare a radiaiei electromag netice, modificarea sau devierea planului luminii polarizate. Aparatele necesare acestor determinri implic, n general, utilizarea lentilelor, oglinzilor, prismelor, reelelor de difracie. B. Metode electrochimice. Metodele electrochimice au ca fundament studiul fenomenelor care au loc la trecerea curentului electric prin proba de analizat. Aceste metode necesit determinarea unor mrimi electrice ca: diferen de potenial, inten sitatea curentului electric, rezisten electric i tensiune. Pentru determinarea mri milor electrice se folosesc diverse aparate de msur i control ca: ampermetre, voltmetre, galvanometre, wattmetre etc. C. Metode de separare. Metodele de separare au ca suport principal, depla sarea moleculelor materialului de analizat sub aciunea unei fore care poate fi: gravi taional (ultracentrifugarea), electrocinetic (electroforeza) i hidrodinamic (croma tografia). Aceste metode sunt utilizate att n analiza calitativ i cantitativ, ct i n scopul purificrii materialului de analizat. Esena analizelor fizico-chimice const n studiul relaiilor dintre compoziie i proprietile fizice ale sistemelor chimice aflate la echilibru, rezultatele fiind exprimate prin diagrame de tipul "compoziie-proprieti". Determinarea cantitativ a compo nentului de analizat printr-o metod fizico-chimic implic determinarea unei mrimi caracteristice a sistemului, mrime care poate fi corelat cu concentraia. Deoarece n majoritatea cazurilor determinarea concentraiei (masei) compo-
METODE FIZICO-CHIMICE DE ANALIZ
nentuiui de analizat, Tn funcie de o anumit proprietate fizic a sistemului, necesit existena unui etalon, metodele fizico-chimice de analiz sunt metode relative, exacti tatea lor depinznd de exactitatea preparrii etalonului i de exactitatea etalonrii aparatului. n comparaie cu metodele chimice de analiz, metodele fizico-chimice se caracterizeaz prin rapiditate de execuie, sensibilitate i selectivitate ridicat. Exacti tatea acestor metode este superioar metodelor chimice obinuite, pe domenii mici de concentraie i inferioare metodelor chimice pe domenii mri de concentraie.
5.1.1. METODE OPTICE DE ANALIZ. SPECTROSCOPIA Spectroscopia se bazeaz pe studiul absorbiei i emisiei de radiaii de ctre materie. Un mod foarte simplu de a aprecia absorbia unei radiaii este culoarea prezentat de o substan care absoarbe o radiaie din domeniul vizibil. Dac radiaia absorbit se afl n regiunea roie a spectrului, radiaia transmis se va afla n regiunea albastr a spectrului i substana va prezenta culoarea albastr. n mod similar, substanele care emit radiaii prezint o anumit culoare dac radiaia emis se afl n domeniul vizibil. Determinarea intensitii sau a lungimii de und a radiaiei absorbite sau emise constituie fundamentul metodelor spectroscopice de analiz calitativ i cantitativ. Spectroscopia de absorbie este utilizat frecvent n analiza cantitativ (prin determinarea intensitii radiaiei absorbite) dar se poate utiliza i n unele determi nri calitative (prin determinarea lungimii de und a radiaiei absorbite). Spectroscopia de emisie este utilizat n determinri calitative i are o aplicabili tate mai restrns n determinrile cantitative deoarece emisia este condiionat de modul n care a fost indus. Studiul lungimii de und a radiaiei emise sau absorbite de un atom sau de o molecul va conferi informaiile necesare unei analize calitative, aceste tehnici fiind cunoscute sub numele de spectroscopie calitativ. Determinarea cantitativ a radia iei absorbite sau emise va furniza informaii despre numrul de particule implicate n proces i st la baza analizelor cantitative, cunoscute sub numele de spectroscopie cantitativ. Domenii spectrale Lumina sau radiaia electromagnetic prezint un caracter dual: de und i de particul. Natura ondulatorie a luminii explic o serie de fenomene optice, cum sunt: reflexia, difracia, interferena i difuzia lumini Natura corpuscular a luminii explic procesele de emisie i absorbie a radiaiei electromagnetice de ctre atomi i mole cule. Lumina este reprezentat de particule (fotoni) de mas m care se deplaseaz cu viteza c ( 3 - 1 0 m/s) i posed o und asociat, de lungime de und X i frec ven v. Relaia dintre natura corpuscular i ondulatorie a luminii este relevat de relaia lui Planck:
8
E = hv = mc2 unde, hreprezint constanta lui Planck i are valoarea 6 . 6 3 - 1 0 " erg-s. ntre lungimea de und a unei radiaii i masa m a particulei asociate exist relaia:
27
69
CHIMIE ANALITICA
mc nlocuind produsul mc n relaia lui Planck se obine relaia existent ntre energia unei particule (E) i lungimea sa de und l: E-h. X. Din expresia obinut se poate observa relaia de invers proporionalitate care exist ntre energie i lungime de und. n funcie de lungimea de und, radiaiile electromagnetice au fost mprite n domenii spectrale. n figura 11 sunt prezentate domeniile spectrale i implicaiile pe care le prezint la nivel molecular absorbia unei radiaii electromagnetice de ctre materie.
Tranziii ale ; electronilor . de pe straturile interne j Tranziii ale electronilor de valen
~ " T
Vibraii moleculare
Rotaii moleculare
Figura 11 - Clasificarea radiaiilor electromagnetice
70
METODE FIZICO-CHIMICE DE ANALIZA
- 5.1.1.1. SPECTROSCOPIA N ULTRAVIOLET l VIZIBIL (FOTOMETRIA) 5.1.1.1.1. Absorbia molecular n ultraviolet i vizibil n stare fundamental, moleculele se caracterizeaz printr-un nivel energetic sczut. Absorbia unei cuante determin trecerea moleculei ntr-o stare excitat caracterizat de un nivel energetic crescut: M + hv-+M* Moleculele aflate n stare excitat (M*) au o stabilitate sczut, n medie 10 - * s, dup care revine la starea fundamental M prin emisie de energie neradiant. M* - M+energie neradiant Trecerea moleculei din stare fundamental n stare excitat este dependent de structura electronic, tipul orbitalilor ce particip la formarea legturii, natura legturii chimice, interaciunea moleculei cu moleculele nvecinate etc. Absorbia unei radiaii din aceast regiune a spectrului determin tranziii ale electronilor aflfi pe orbitali moleculari pe orbitali foarte bogai n energie numii orbi tali de anti-legtur. Tranziiile electronice care pot aprea la absorbia cuantelor din domeniul vizibil i ultraviolet depind de natura orbitalilor implicai n procesul de tran ziie (figura 12). o. *
Tt*
ORBITALI DE ANTILEGTUR
..
ORBITALI DE NELEGTUR
n
O ORBILTAU DE LEGTUR
Figura 12 - Tipuri de tranziii electronice Se poate observa c cea mai mare energie necesit tranziiile de tip o - a * caracteristice legturilor covalente simple (exemplu: hidrocarburile saturate). Aceste tranziii apar n regiuni de lungimi de und sub 140 nm. Orbitalii de nelegtur, ocupai cu electroni neparticipani (electroni p), cum sunt cei de fa atomii de N, O, S i halogeni legai covalent, se excit mai uor determinnd tranziii n - > n * i n -> a *. n combinaiile chimice ce conin legturi multiple au loc tranziii n -> it * i n -> 7t * care necesit energii mai mici. Din acest motiv aceste combinaii absorb la lungimi de und mai mari. Electronii ce particip la formarea legturilor duble sau triple, din moleculele organice se excit uor i de aceea moleculele ce conin astfel de legturi prezint maxime ce se folosesc n analiz. Gruprile funcionale ce prezint legturi multiple i absorb n ultraviolet i vizibil
71
CHIMIE ANALITICA
se numesc cromofori. Lungimea de und a benzii de absorbie este dependent de conjugarea gruprilor cromofore, de geometria moleculei i de natura substituenilor. 5.1.1.1.2. Legea Lambert-Beer Dac o radiaie strbate un sistem absorbant, o parte din intensitatea radiaiei incidente (i0) este absorbit (l.) iar cealalt parte va trece prin sistem fiind transmis (I.) (figura 13).
PROBA
Figura 13 - Absorbia radiaiei Conform legii conservrii energiei, intensitatea radiaiei incidente va fi egal cu suma intensitii radiaiei absorbite i a radiaiei transmise: Una din legile fotometriei (Bouguer-Beer) stabilete c intensitatea radiaiei absorbite este proporional cu grosimea stratului de substan (d): l.-d Legea lui Beer stabilete c intensitatea radiaiei absorbite de un sistem absor bant, variaz proporional cu numrul de particule, deci variaz proporional cu con centraia (c): l,-c Aceste dou legi pot fi exprimate prin relaia: I, = l6 10-***; e - coeficient molar de absorbie Conform legii Lambert, intensitatea radiaiei absorbite este independent de intensitatea radiaiei incidente. Logaritmul zecimal al raportului y\, se noteaz cu A i se numete absorbant:
A = lgk nlocuind pe I, tn expresia absorbantei obinem relaia matematic a legii Lambert-Beer: to^-e-c-d
... ' ;
Conform legii Lambert-Beer, absorbanta este direct proporional cu concen traia particulelor absorbante (c) i cu grosimea stratului de substan (d): A-s-c-d Deoarece tn cursul determinrilor grosimea stratului de substan se pstreaz constant se poate considera c absorbanta variaz direct proporional cu concen traia: A=kc; k constant de proporionalitate Absorbanta este maxim la o anumit lungime de und, caracteristic pentru fiecare substan. Dac determinrile se efectueaz n domeniul vizibil absorbanta se noteaz cu E i poart numele de extincie iar pentru determinri efectuate n ultraviolet se noteaz cu DO i se numete densitate optic. Legea Lambert-Beer este valabil numai pentru o radiaie monocromatic, n soluii diluate (<10" 2 mol/l), putndu-se aplica ntre anumite limite de concentraie. Creterea concentraiei particulelor absorbante peste o anumit limit conduce la abateri de la legea de direct proporionalitate (figura 14). Aceste abateri sunt deter minate de modificri structurate, deplasri de echilibru chimic, procese de disociere, formare de compleci etc.
0,1 %
Concentrai*
Figura 14 - Abateri de ia relaia de direct proporionalitate pentru concentraii mai mari dect cele admise
73
CHIMIE ANALITICA
Abateri de la legea Lambert-Beer pot s apar i datorit condiiilor experi mentale: impuritatea radiaiei, determinarea greit a drumului optic, neparalelismul radiaiei, rspunsul neliniar al detectorului. 5.1.1.1.3. Aplicaiile spectroscopiei moleculare n ultraviolet i vizibil Metodele spectrofotometrice de absorbie molecular n UV i VIS se utilizeaz n aproape toate domeniile pentru efectuarea analizelor calitative i cantitative. Analize calitative. Utilizarea spectrofotometriei de absorbie n UV i VIS n ana liza calitativ const n compararea spectrelor de absorbie obinute pentru substana de analizat cu spectrele de absorbie ale unor substane etalon. n acest scop trebuie s se ia n consideraie urmtoarele criterii: - prezena unor maxime i minime; - intensitatea relativ a benzilor; - lungimile de und corespunztoare maximelor. n figura 15 sunt prezentate spectrele de absorbie pentru proteine (A) si ADN (B).
Absorbant (DO) Absorbant (DO)
260
280
300
nm.
200
250
300 nm
Figura 15 - Spectrele de absorbie n UV pentru proteine (A) i ADN (B) Analiza cantitativ. La baza determinrilor cantitative n spectrofotometria de absorbie molecular stau urmtoarele principii: - fiecare substan prezint o band de absorbie caracteristic, iar determi narea absorbantei se va face la lungimea de und X^ care corespunde absorbiei maxime (figura 16); - absorbia variaz direct proporional cu concentraia substanei ntr-un anumit interval. Pentru efectuarea unei analize cantitative (determinarea concentraiei) exist mai multe metode dintre care amintim: 1) metoda grafic: const n construirea curbei de etalonare a dependenei absorbantei n funcie de concentraie. Pentru realizarea curbei este necesar s se prepare scale de soluii de concentraii cunoscute din substana de dozat numite soluii etalon, pentru care se determin absorbanta; 2) metoda cu o solupe etalon const n compararea absorbantei soluiei etalon cu absorbanta probei de analizat;
74
METOOE FIZICO^HIMICE DE ANALIZA Absorbani
Ama-
Figura 16 - Dependena absorbantei de lungimea de und 3) calculul concentraiei din relaia lui Beer: cunoscnd valoarea coeficientului molar de absorbie, grosimea stratului de substan i absorbanta se determin con centraia din expresia: A c-ed Aparatur Pentru determinarea absorbantei se utilizeaz aparate numite spectrofotometre. Aceste aparate sunt capabile s produc radiaii cu lungimi de und definite i carac teristice i s determine intensitatea radiaiei absorbite. Schema general a unui spectrofotometru este redat n figura 17:
1
) /
Surs de radiaii
Monocromator
Cuv
Detector
nregistrator
Figura 17 - Componentele unui spectrofotometru Cele mai simple spectrofotometre sunt cele destinate determinrilor n domeniul vizibil i sunt numite fotocolorimetre. Sursa de radiaii pentru domeniul vizibil o constituie o lamp de tungsten; pen tru domeniul ultraviolet se utilizeaz lmpi de descrcare n hidrogen sau deuteriu sau lmpi cu vapori de mercur.
75
CHIMIE ANALITICA
Monocromatorul are rolul de a separa radiaia policromatic n radiaii monocromatice i de a selecta radiaia monocromatic adecvat. Cei mai utilizai monocromatori sunt prismele i reelele de difracie. Cuvele pentru prob trebuie s fie confecionate din materiale transparente n domeniul lungimii de und analizate. Oin acest motiv pentru domeniul vizibil se utili zeaz cuve de sticl iar pentru domeniul ultraviolet cuve de cuar. Detectoarele cele mai utilizate sunt celule fotoelectrice pentru domeniul vizibil i fotomultiplicatoare pentru ultraviolet. . 5.1.1.2. SPECTROSCOPIA DE ABSORBIE ATOMIC Absorbia unei cuante de energie de ctre atomi determin tranziii electronice. Comparativ cu tranziiile electronice care au loc la nivel molecular, aceste tranziii sunt limitate ca numr i sunt asociate cu un numr restrns de linii de absorbie. Radiaia cea mai puternic absorbit corespunde ia o tranziie electronic de la starea fundamental la starea excitat i este cunoscut ca linie de rezonan. Benzile de absorbie sunt corespunztoare excitrii electronilor de valen, energia necesar tranziiilor fiind diferit de la un element la altul. Spectroscopia de absorbie atomic este o metod de determinare a concentra iei unui element, prin msurarea absorbiei unei radiai) caracteristice de ctre atomii elementului adui n stare gazoas. Absorbia radiaiei respect legea Beer fiind di rect proporional cu numrul de atomi din unitatea de volum i cu grosimea stratului de substan: A=*kNd unde: ' N = numrul de atomi din unitatea de volum d grosimea stratului de substan Deoarece absorbia nu este dependent de temperatur i de energia de exci tare, procedeul cel mai simplu de a trece b substan n stare atomic const n nclzirea acesteia la o temperatur ridicat. Din acest motiv, n spectroscopia de absorbie atomic cuvele cu soluie sunt nlocuite cu flacra n care se atomizeaz proba. Dac un fascicul de lumin alb trece printr-o astfel de flacr, atomii aflai n stare fundamental vor absorbi o radiaie de lungime de und caracteristic pentru fiecare element, absorbiile fiind reflectate n radiaia transmis. Spectroscopia de absorbie atomic poate fi utilizat n analiza calitativ prin determinarea lungimii de und a radiaiei absorbite precum i n analiza cantitativ prin determinarea intensitii radiaiei absorbite. Schema unui spectrofotometru de absorbie atomic este redat n figura 18. Sursele de radiaii utilizate n spectroscopia de absorbie atomic sunt, n gene ral, lmpi cu catod scobit (cavitar). Acestea sunt alctuite dintr-un catod n form de U construit din elementul ce urmeaz a fi determinat i dintr-un anod de wolfram. Electrozii sunt plasai ntr-un tub de sticl ncrcat cu un gaz inert. Sursele de excitare de sensibilitate mare sunt tuburile de excitare cu micro unde, fr electrozi. Atomizoarele cele mai utilizate sunt arztoarele cu flacr. Spectrofotometrele de nalt rezoluie utilizeaz dispozitive de atomizare fr flacr care prezint avantajul utilizrii unui spaiu nchis sau semideschis, n scopul atomizrii, evitnd fenomenul de diluare spaial a atomilor. Cu ajutorul acestei metode se pot determina aproximativ 60 de elemente.
76
Modulator
Flacra
Monocromator Prob Surs de radiaii
Detector
Combustibil
Figura 18 - Componentele unui spectrofotometru de absorbie atomic 5.1.1.3. SPECTROSCOPIA DE EMISIE ATOMIC Absorbia de energie termic de ctre un atom, determin trecerea atomului din starea fundamental (A) ntr-o stare excitat (A*). Aceast trecere se produce dato rit tranziiilor, elctronice de pe straturi cu energie.joas pe straturi cu energie nalt. Atomii excitai revin la starea iniial prin emisia unei cuante de lumin hv. Principiul de obinere al emisiilor atomice se poate exprima schematic n felul urmtor: A+ energie termic A* A + hv
La baza analizei spectrale de emisie atomic stau dou principii: 1. atomii fiecrui element sunt caracterizai prin linii spectrale specifice; 2. intensitatea fiecrei linii spectrale depinde de concentraie, fiind direct propor ional cu concentraia, i de temperatur. Primul principiu st la baza analizei calitative iar cel de-al doilea la baza analizei cantitative. Pentru realizarea spectroscopiei atomica de emisie este necesar ndeplinirea urmtoarelor etape: - atomizarea probei i excitarea atomilor n vederea emisiei de radiaii; - separarea spectral a radiaiilor emise i determinarea intensitii Ion - compararea radiaiilor emise cu liniile caracteristice ale unor probe standard n care elementele corespunztoare se gsesc n concentraii cunoscute. Emisia atomic n flacr. Spectroscopia de emisie n flacr este un domeniu special al spectroscopiei de emisie, n care, pentru excitarea atomilor se utilizeaz o flacr. La pulverizarea unei soluii n flacr au loc urmtoarele procese: evaporarea solventului, trecerea n stare de vapori a compusului de analizat i disocierea sa n
77
CHIMIE ANALITICA
atomii componeni, excitarea atomilor i emiterea de radiaii caracteristice de ctre atomii excitai. Aparatul utilizat se numete flamfotometru iar metoda se mai numete i flamfotometrie. Schema unui flamfotometru este redat n figura 19.
Detector Proba
Combustibil Sursa de cldur
Figura 19 - Componentele unui flamfotometru Temperatura realizat in flacr este dependent de tipul combustibilului i oxidantului utilizat. n tabelul 9 sunt prezentai cei mai folosii combustibili i oxidani precum i domeniile de utilizare. Tabelul 9 Combustibili utilizai n spectroscopia de emisie atomic TEMPERATUR C 1900C OBSERVAII temperatura sczut determin excitarea unor atomi uor excitabiii ca: Na, Li, K i Ca temperatur medie corespunz toare majoritii emisiilor; se pot excita i atomii de Mg, Mn iSr temperatura ridicat determin excitarea elementelor retractile ca P
COMBUSTIBIL OXIDANT Propan Butan Acetilen aer aer aer oxid de azot
2300C
Acetilen
3000C
Principala aplicaie a emisiei n flacr este determinarea cantitativ a ele mentelor alcaline i alcalinopmntoase la concentraii avnd limita inferioar la 0,1 ng/ml. n laboratorul clinic metoda este utilizat pentru dozarea ionului Na* din ser sanguin i urin.
78
Emisia tn plasm Plasma este produs prin cuplarea unui gaz ionizabil cu cmpul electric ai unei surse de microunde; electronii cu vitez mare ionizeaz gazul producnd plasma. Fa de flacr, temperatura n plasm este mult mai ridicat i excitarea atomilor mai puternic, ceea ce determin creterea sensibilitii. 5.1.1.4. SPECTROSCOPIA DE FLUORESCENT ATOMIC Spectroscopia de fluorescent atomic este o combinaie ntre procesele de ab sorbie i emisie a luminii. Procesul de fluorescent const n absorbia unei radiaii luminoase de ctre un atom aflat n starea fundamental (A) i trecerea ntr-o stare excitat (A*). Revenirea atomului la starea fundamental se face prin emisia unei radiaii de o anumit lungime de und. Schematic procesul de fluorescent poate fi redat astfel: A + hX. - A* A + h?, n spectroscopia de fluorescent este analizat radiaia emis (h>.,), dup ce specia atomic a fost excitat cu o radiaie de o anumit lungime de und. n figura 20 este prezentat schema de principiu a unui spectrometru de fluorescent atomic. Trebuie subliniat faptul c sursa este plasat ortogonal fa de axele optice ale sistemului iar radiaia este modulat pentru a se detecta numai radiaia de rezonan a probei, provocat de ctre surs.
S'.-rsic**
r a d i a i
Proba
Figura 20 - Elementele componente ale unui spectrograf de fluorescent
79
CHIMIE ANALITICA
Ca surs de radiaie se utilizeaz lmpi de cuar care conin argon i metalul de analizat numite lmpi de descrcare fr electrozi. Metoda spectroscopiei de fluorescent atomic este utilizat pentru determina rea unor anumite metale din fluidele metabolice. Metodele de analiz calitativ i cantitativ utilizate sunt aceleai cu cele folosite n cazul emisiei atomice. 5.1.2. METODE ELECTROCHIMICE DE ANALIZ Metodele electrochimice de analiz se caracterizeaz prin folosirea n analiza calitativ i cantitativ a unor mrimi electrice ca: diferen de potenial, intensitatea curentului electric, cantitatea de energie electric consumat ta electroliz etc. n general, metodele electrochimice de analiz se bazeaz pe studiul fenomenelor ce au loc la trecerea curentului electric prin soluii de electrolii (oxidare, reducere, des compunere electrochimic). Denumirea metodelor electrochimice de analiz deriv de regul de la mrimea electric determinat. Poteniometria urmrete diferena de potenial dintre doi electrozi imersai n soluia de analizat; Conductometria se bazeaz pe determinarea conductivitii soluiei; Polarografia studiaz curentul de difuziune rezultat prin polarizarea unui elec trod special; Electrogravimetria se bazeaz pe determinarea prin cntrire a masei de sub stan depus prin electroliz. CELULE ELECTROCHIMICE Celulele electrolitice La aplicarea unei diferene de potenial ntre doi electrozi imersai ntr-o soluie, soluia va fi traversat de un curent electric care va genera reacii chimice care nu au loc n mod spontan. Proprietile electrice ale soluiei determin relaia dintre voltajul aplicat i cantitatea de curent ce traverseaz soluia i stau la baza metodelor conductometrice i polarimetrice. Schema unei celule electrolitice este redat n figura 21 A. Celule galvanice Celulele galvanice (pile electrice) genereaz energie electric n urma unor reacii chimice care au loc n mod spontan. n aceste celule, natura chimic a elec trozilor i soluiilor conduce la reacii chimice care au loc la electrozi i care gene reaz energie electric fr a avea nevoie de un voltaj extern (figura 21 B). O form restrictiv a celulelor galvanice este utilizat n poteniometrie, metod n care ntre electrozi nu este aplicat un voltaj exterior i nu trece un curent electric, dar se dez volt un potenial relativ n soluie dependent de natura electrozilor i soluiei. 5.1.2.1. METODE POTENIOMETRICE (POTENIOMETRIA) Poteniometria este o metod de analiz care se bazeaz pe msurarea diferenei de potenial care apare ntre un electrod indicator i un electrod de referin, la imersarea electrozilor n soluia de analizat.
80
M M* N*
captare de electroni
eliberare de electroni
Figura 21 - Schema unei celule electrolitice (A) i a unei celule galvanice (B) n mod uzual, electrodul indicator este constituit dintr-un metal nobil (Pt, Ag) i are rolul de a capta electronii care particip la reacie. Ca electrozi indicatori se pot utiliza i electrozi de crbune sau electrozi membran ion-selectiv, pentru cationi sau anioni, iar n pH-metrie electrodul de sticl sau de platin pretratat. Electrozii de referin cei mai utilizai sunt electrodul de calomel i electrodul Ag-AgCI. Electrodul de calomel este alctuit dintr-un fir de platin care face contactul electric cu un electrod care este alctuit dintr-o past de mercur metalic, ciorur mercuric (calomel) i ciorur de potasiu (figura 22). Tubul de sticl n care se afl firul de platin i pasta de calomel este umplut pe jumtate cu o soluie saturat de ciorur de potasiu i are rolul de a ntreine contactul electric direct cu dopul poros. Cele mai cunoscute aplicaii ale poteniometriei sunt determinarea pH-ului i stabilirea punctului de echivalen n volumetrie. 5.1.2.1.1. Determinarea pH-ului Cea mai utilizat metod de determinare a pH-ului este metoda cu electrod de sticl. Acest electrod este constituit dintr-un electrod Ag-AgCI imersat ntr-o soluie de referin de acid clorhidric (0,1M), coninut ntr-o membran de sticl (figura 23 A). Membrana este confecionat dintr-o sticl special, n mod uzual un aluminosilicat hidratat coninnd ioni de sodiu sau calciu. Aceast membran este permea bil selectiv pentru ionii de hidrogen. Potenialul dezvoltat la suprafaa membranei este proporional cu concentraia ionilor de hidrogen din soluia testat i comparat cu soluia acid de referin din interiorul electrodului. Acest potenial poate fi deter minat fa de electrodul de referin (electrodul de calomel) cu ajutorul unui voltmetru de impedan nalt. Pentru nlesnirea operaiei electrodul de sticl este de cele mai
81
CHIMIE ANALITICA
Fir platina
Figura 22 - Electrodul saturat de calomel
Marcur Pasa Soluia saturat da cloruri da potasiu Cloruri da pot lu solid Dop poros
Electrod da Ag-AgCI
Figura 23 - A. Electrodul de sticl
Sotute interni da rafarlni do HCI 0,1*1 Mombrani de sticli
multe ori combinat cu electrodul de referin Tn acelai tub de sticl (figura 23 B). Electrodul de sticl trebuie pstrat fn ap ntre utilizri pentru a menine membrana permanent hidratat.
82
3)
Soluie aaturati do KCI
Figura 23 - B. Electrodul combinat

Electrod de calomel Dop poros KClaoild Electrod de Ag-AgCI de HCI 0,1M Membrana de aticii Soluie de referina
Exist o relaie aproximativ liniar ntre potenial i pH i n afara domeniului 2-10, totui pentru valorile extreme ale pH-ului se utilizeaz un electrod de sticl special. nainte de utilizare este necesar calibrarea pH-metrului cu ajutorul unor soluii tampon de pH cunoscut sau cu ajutorul unor soluii obinute din substane pure (o soluie de ftalat acid de potasiu 0,05 M la 15C are pH 4,00). 5.1.2.1.2. Determinarea punctului de echivalen n volumetrie Determinarea poteniometric a punctului de echivalen este utilizat n volu metria bazat pe reacii de neutralizare, precipitare, oxido-reducere i complexare. Aparatura utilizat n titrrile poteniometrice cuprinde pe lng soluia de ana lizat i biuret, un electrod indicator i un electrod de referin cu potenial constant. Electrozii sunt conectai la un circuit poteniometric (figura 24). Pentru determinarea punctului de echivalen se reprezint grafic curba de titra re, piciorul perpendicularei coborte pe abscis din punctul de inflexiune reprezen tnd volumul de reactiv corespunztor punctului de echivalen. n figura 25 este reprezentat curba de titrare a unei soluii de acid acetic 0,1M (10 ml) cu o soluie de hidroxid de sodiu 0,2M. n volumetria bazat pe reacii de neutralizare metodele poteniometrice sunt utilizate pentru determinarea punctului de echivalen n cazul titrrilor n medii neapoase. n cazul acestor titrri folosirea indicatorilor este limitat deoarece modul de comportare al unui indicator este diferit de la un solvent la altul. n cazul titrrilor bazate pe reacii de oxido-reducere, metoda poteniometric de determinare a punctului de echivalen prezint un avantaj major care const n faptul c reprezint o metod convenabil i precis pentru urmrirea titrrilor dife-
83
CHIMIE ANALITICA
RwtotMitfvartaMIi
AAAAAAAAAAAAAA
Figura 24 - Schema unui circuit poteniometric
Gatvanomotru
Electrozi
P"14
12
10
8
7 6
t | .1
C O
Figura 25 - Curba de titrare poteniometric a unei soluii de acid acetic 0,1 M cu o soluie de NaOH 0,2M
reniate, componenii individuali dintr-un amestec putnd fi determinai unui Tn pre zena celuilalt. Metoda poteniometric clasic de determinare a punctului de echiva len are o aplicabilitate mai restrns. Posibilitatea detectrii punctului de echiva len n titrrile de precipitare prin metode poteniometrice este mult lrgit prin utili zarea electrozilor ion-selectiv.
84
n volumetria bazat pe reacii de chelatare determinarea punctului de echiva len prin metoda poteniometric se utilizeaz fn cazul titrrii metalelor cu acizi poli aminopolicarboxilici sau cu poliamine. Utilizarea acestei metode de determinare a punctului de echivalen tn volumetria bazat pe reacii cu formare de precipitate sau de chelai este posibil deoarece, n decursul titrrii, concentraia ionului metalic se modific determinnd schimbarea potenialului electrodului indicator. 5.1.2.1.3. Electrozi ton-selecttv Membrana electrodului de sticl utilizat pentru determinarea pH-ului este per meabil selectiv pentru ionii de hidrogen. Avnd ca punct de plecare acest concept a fost dezvoltat teoria electrozilor ion-selectiv. Variind compoziia membranei de sticl se poate modifica permeabilitatea sticlei obinnd un electrod cation-selectiv. Aceti electrozi pot fi definii ca electrozi specifici pentru ioni ca: Na*, K*, Ca2* i NH*., ei fiind numai selectivi i nu specifici i de aceea adesea prezint interferene semnificative cu ali ioni, n special cu ionii de hidrogen. Domeniul electrozilor ion-selectiv a fost foarte mult extins prin utilizarea unor sticle cu specificitate mai mare (tabelul 10). Tabelul 10 Electrozi ion-selectiv MEMBRANA IONI DE INTERFEREN I , Br", CP
IONUL TESTAT
Electrozi cu membran solid LaF F
cr
r 2 sCu2* Pb2* Cd2*
Br"
AgCI/Ag2S AgBr / Ag2S Agl/Ag^S Agl/Ag 2 S Ag2S / CuS Ag 2 S/PbS Ag 2 S/CdS AgaS
s , r s2,r 2 s-
Hg2 ,Ag* Hg 2 \Ag* Hg*, Ag*, Cu2*
Ag* Electrozi cu membran lichid K* Ca *

2
valinomicin n difenileter dialchilfosfat de calciu n dioctilfenilfosfonat
Schema general a electrozilor ion-selectiv este n general aceeai (figura 26), factorul difereniant fiind constituit de membrana ion-selectiv. Electrozii cu membran solid conin un disc solid, relativ insolubil, confecionat dintr-un material cristalin care prezint o specificitate crescut pentru un anumit ion. Membrana permite trecerea ionilor din interiorul reelei cristalului, ionii care prsesc primii reeaua cristalin fiind cei mai mobili ioni. tn mod uzual aceti ioni au cel mai mic diametru i cea mai mic sarcin. Astfel, numai acei ioni care prezint o similiss
CHIMIE ANALITICA
Electrodul Intern de referina
Figura 26 - Schema de principiu a electrozilor ion-selectiv

Soluia electroMtului da referina
Membrana lon-selectlvi
tudine structural cu ionii mobili din reea pot avea acces din afara membranei Tn interior i vor conferi membranei o specificitate ridicat. La imersarea electrodului Tn soluia de analizat se stabilete un echilibru Tntre ionii mobili din cristal i ionii similari din soluie determinnd crearea unui potenial la suprafaa membranei care poate fi determinat printr-o metod uzual. Cele mai simple membrane solide sunt cele destinate determinrii ionilor comuni cu ionii mobili din cristali i sunt confecionate dintr-un cristal alctuit dintr-o singur substan. n figura 27 este prezentat schema unui electrod ion-selectiv specific pentru ionul de Ag* a crui membran este confecionat din sulfura de argint. Ionul mobil din reea, ionul de argint, trece In soluie iar ionii de argint din solu ie trec prin membran, la stabilirea echilibrului la suprafaa membranei generndu-se o diferen de potenial. n cazul in care membrana solid este constituit din mai multe substane, ionul de analizat poate s reacioneze cu unul dintre ionii din membran determinnd alterarea activitii ionului mobil din membrane. Astfel, electrodul ion-selectiv cu membran de AgCI/Ag2S la imersarea Intr-o soluie care conine ionul C determin o reacie a ionului Ag* cu ionul CI'. Aceast reacie genereaz scderea activitii ionului de argint i implicit modificarea diferenei de potenial de la suprafaa membranei (figura 28). Electrozii cu membran lichid sunt confecionai dintr-un material ion-selectiv dizolvat ntr-un solvent nemiscibH cu apa. Lichidul este inserat ntr-o membran po roas, inert, care se afl n contact cu soluia intern de referin a electrodului pe o fa l cu soluia care se testeaz pe partea opus. Ionii din lichidul de referin se vor repartiza ntre cete dou lichide nemiscibile (faza apoas i faza organic) con ferind electrodului un potenial propriu. Prezena ionului de testat n prob afecteaz activitatea ionilor din membran determinnd schimbarea diferenei de potenial la suprafaa membranei.
86
Afl*
Ag*
Ag*
Figura 27 - Electrod ion-selectiv cu membran de AgCI
Electrod
cr
Figura 28 - Schema electrodului ion-selectiv cu membran de AgCI / Ag2S
87 .'
O M M E AIIMJT4CaA
Schema de baz a unui electrod ion-selectiv cu membran lichid este redat n figura 29.
Electrod
Soluie de referina Ionului de analizat
; MEMBRAN :. SOLVENT MEMBRAN ION-SELECTIV ',
ION OE TESTAT
Figura 29 Schema unui electrod ion-selectiv cu membran lichid n afara acestor dou tipuri de electrozi, au fost confecionai i electrozi cu enzime imobilizate pe membrane. Printre primele realizri de acest tip s-a numrat i electrodul cu ureaz. n prezena ureei enzima catalizeaz reacia: IMH2 NH, + 2H,0*ureaz *- C 0 8 + 2NH + + H il O
Ionii de amoniu rezultai vor conduce la modificarea diferenei de potenial, modificarea fiind sesizat de electrodul indicator. Electrozii cu enzime au fost realizai n special pentru laboratoarele clinice, fiziologice i biochimice. Electrozii ion-selectiv sunt utilizai pentru efectuarea unor analize calitative i cantitative. Aceti electrozi sunt utilizai i pentru determinarea poteniometric a pun ctului de echivalen n volumetria bazat pe reacii de precipitare, oxido-reducere i compiexare. Electrozii ion-selectiv precum i cei cu enzime devin instrumente analitice tot mai valoroase datorit selectivitii ridicate i rapiditii Cu care se efectueaz ana lizele. Titrrile poteniometrice se pot aplica n sisteme acid-baz, redox, cu formare de compleci i precipitate, n soluii apoase i neapoase, pentru substane organice i anorganice.
88
5.1.2.2. ANALIZA CONrXICTOMETRICA (CONDUGTOMETRIA) Analiza conductometric se bazeaz pe msurarea variaiei conductivitii solu iei de analizat ca urmare a modificrii concentraiei ionilor aflai fn soluie, modifi crile datorndu-se reaciilor chimica produse. Determinarea conductivitii reprezint cea mai simpl aplicaie a unei celule electrolitice. Dac un voltaj fix este aplicat intre doi electrozi care se afl imersai in soluia de testat, In funcie de conductivitatea soluiei, curentul va circula ntre cei doi electrozi. Determinarea conductivitii nu ofer informaii calitative despre ionii din soluie, dar informaiile obinute pot fi utilizate n analiza cantitativ. Aceste modificri de conductivitate sunt tot mai mult utilizate n scopul determinrii compoziiei pe parcursul operaiei de titrare. ;. Curentul care circul n soluie ntre cei doi electrozi, se datoreaz ionilor pre zeni i este dependent de numrul lor. Numrul de ioni din soluie este determinat de concentraia substanei i de gradul su de ionizare. La aplicarea voltajului con stant dintre electrozi, anionii din soluie vor ceda electroni anodului iar cationii vor accepta electroni de la catod (figura 30). Acest transfer de electroni determin canti tatea de curent care circul n soluie, contribuia fiecrei specii ionice fiind deter minat de mobilitatea ionic pe care o prezint.
\
A
0 o
Figura 30 - Schema proceselor care au loc la trecerea curentului electric printr-o soluie
89
CHIMIE ANALITICA
Creterea conductivitii cu concentraia este valabil numai pn la o anumit valoare a concentraiei. De exemplu, creterea conductivitii acidului sulfuric are loc pn la o concentraie de 35% (V/V); peste aceast valoare a concentraiei nregistrndu-se o scdere a conductivitii. Conform legii lui Ohm, intensitatea curentului electric (I) care trece printr-un conductor este dependent de voltajul aplicat (V) i rezisten (R) sau conductivitate (A). 1=^ R sau l =AV
5.1.2.2.1. Aplicaiile conductometriei Determinrile conductometrice sunt utilizate pentru: aprecierea coninutului n ap al unor reactivi organici, controlul puritii apei distilate, stabilirea punctului de echivalen n volumetria bazat pe reacii de neutralizare, precipitare i complexare. Aceast metod este utilizat pentru determinarea punctului de echivalen n volumetrie deoarece n decursul reaciilor chimice se modific mobilitatea ionilor i implicit conductivitatea electric. De exemplu, dac considerm ecuaia: A'B + C D ~*AD + C'B unde C D " este reactivul de titrare, n cursul reaciei chimice A* va fi nlocuit de C\ Deoarece mobilitatea ionic a lui A* este diferit de cea a lui C*, procesul va fi nsoit de o modificare a conductivitii electrice. Astfel dac se urmrete conductivitatea n timpul titrrii i se face reprezen tarea grafic a conductivitii n funcie de volumul de reactiv de titrare se obine o curb de titrare din care se poate determina cu uurin punctul de echivalen. n figura 31 sunt reprezentate cteva curbe de titrare conductometric pentru diferite reacii chimice. Utiliznd metoda conductometric de determinare a punctului de echivalen se pot efectua titrri de tipul acid slab-baz slab, precum i titrri de "amestecuri de acizi sau baze (figura 31 c). Titrrile poteniometrice i conductometrice pot fi aplicate la soluii opalescente, fluorescente, opace. Titrarea are o specificitate mare, ce decurge din utilizarea unei reacii de titrare n care este angajat numai specia de interes i permite determi narea precis a punctului de echivalen. 5.1.2.3. BIOSENZORI Biosenzorii sunt alctuii dintr-un component biologic i un transductor, compo nentul biologic fiind imobilizat pe transductor. Aceste instrumente sunt utilizate n domenii foarte largi: biomedicale (determinarea glicemiei la diabetici), industrie (chi mie) alimentar (determinarea gradului de prospeime la alimente nepreparate), biotehnologii (monitorizarea proceselor de fermentaie), toxicologie (detectarea substan elor toxice).
90
V reactiv (cm*)
Acid 1 Acid | tare ! slab

i
Exces
Vreactiv (cm )
V reactiv (CITI1)
Figura 31 - Curbe de titrare conductometric pentru reacii de neutralizare (a, b, c) i reacii de precipitare (d) Componenii biosenzorilor Componenii biologici care intr n structura biosenzorilor sunt prezentai n tabelul 11. Aceti componeni confer biosenzorilor specificitate i fac posibil efectuarea unei analize fr o pretratare a probei. Tabelul 11
Componenii biosenzorilor COMPONENT Biocatalizatori EXEMPLE Enzime Celule animale, vegetale, microbiene Organite subcelulare Anticorpi Lectine Receptori membranari Acizi nucleici Molecule sintetice
Bioreceptori
91
CHIMIE ANALITICA
Biocatalizatorii determin producerea unei reacii chimice cu eliberarea produilor de reacie. Enzimele constituie cei mai folosii biocatatizatori cu toate c enzimele purificate nu sunt satisfctoare fn toate cazurile. n aceste cazuri preparatele celulare care conin enzimele necesare Tn mediul lor natural, conduc la rezultate superioare. Aceste preparate reduc specificitatea dar pot fi utilizate cu succes pentru efectuarea analizelor referitoare la substane de poluare. Bioreceptorii au proprietatea de a lega ireversibil anumite substane cu care prezint complementaritate structural. O categorie foarte dezvoltat de biosenzori o constituie biosenzorii cu bioreceptori formai din anticorpi monoclonali. Bioreceptorii sunt utilizai la confecionarea biosenzorilor capabili s detecteze: medicamente, hor moni, virui i bacterii patogene. Transductori)'transform detecia componentului biologic ntr-un semnal electric dependent de concentraie. n funcie de mecanismul de efectuare a transduciei ei sunt clasificai n transductori electrochimici, optici, termici i piezoelectrici. Tipuri de biosenzori -! Biosenzorii electrochimici cei mai utilizai sunt cei cu enzime deoarece multe reacii enzimatice decurg cu formare sau consum de specii electroactive care pot fi monitorizate ampermetric, poteniometric sau conductometric. Biosenzorii ampermetricidetermin curentul rezultat la aplicarea unei diferene de potenial ntre transductor i electrodul de referin. Curentul este produs n urma oxidrii la anod sau a reducerii la catod a speciilor analizate. Cantitatea de curent este dependen de concentraia speciilor de la suprafaa electrodului. Acest tip de transducere este aplicat pentru dozarea substanelor care au caracter reductor sau oxidant. De exemplu, biosenzorul utilizat la dozarea glucozei din snge are ca funda ment reacia de oxidare a glucozei n prezena glucozoxidazei: glucoza + Q2 -> acid gluconic + H 2 0 2 Cu ajutorul unui electrod (electrodul Clark) se determin scderea curentului datorat consumului de oxigen. Biosenzorii poteniometrici determin diferena de potenial dintre electrodul transductor i electrodul de referin. Aceti biosenzori utilizeaz electrozi ion-selectiv i electrozi sensibili la gaze. 5.1.3. METODE ANALITICE DE SEPARARE Metodele analitice de separare au ca scop separarea unui amestec omogen sau eterogen n unitile sale componente. Exist o multitudine de procedee de separare, unele.cunoscute de foarte mult timp (distilarea, extracia cu solveni, preci pitarea), Tn timp ce altele au fost elaborate recent (cromatografia de gaze, electroforeza n geluri). n cadrul acestui capitol vor fi discutate metodele de separare care prezint interes pentru laboratorul sanitar-veterinar i anume, cromatografia i electroforeza.
92
5.1.3.1. CROMATOGRAFIA Cromatografia este o metod fizico-chimic de analiz care se bazeaz pe separarea n zone spaiale distincte a componenilor unui amestec, la trecerea ames tecului printr-un mediu n care componenii se deplaseaz cu viteze diferite. Termenul de cromatografie provine de la cuvntul grecesc chtoma care n seamn culoare. Pionierii cromatografiei au fost Oavid Day i Mihail vet. David Day a reuit s fracioneze ieiul brut pe pmntul Fuller iar vet a separat pig meni! dintr-un extract eteric de plante pe o coloan umplut cu carbonat de calciu. n cromatografie exist dou faze: faza staionar (taxa. fix) i faza mobil (eluentul). Faza staionar este reprezentat de materialul prin care circul proba i care asigur separarea. Faza mobil este amestecul lichid (gazul) care transport proba la suprafaa fazei staionare. Clasificarea metodelor cromatografice 1. Dup mecanismul de separare metodele cromatografice pot fi clasificate astfel: a) cromatografie de adsorbie b) cromatografie de partiie c) cromatografie de schimb ionic d) cromatografie de excludere molecular e) cromatografie de afinitate 2. Dup starea de agregare a celor dou faze, metodele cromatografice sunt clasificate n metode cromatografice de tip solid-lichid, solid-gaz, lichid-lichid i lichid - gaz. 5.1.3.1.1. Cromatografia de adsorbie Cromatografia de adsorbie se bazeaz pe adsorbia difereniat a componen ilor unui amestec pe un suport adsorbant (faza staionar). ntre suportul adsorbant i substanele care se deplaseaz peste faza staio nar se stabilesc interacii intermoleculare de tipul: dipol-dipol, van der Waals, leg turi de hidrogen. Aceste interacii conduc ia o adsorbie fizic reversibil. n cazul n care s-ar forma legturi chimice, procesul s-ar numi chemosorbie. Deoarece chemosorbia este un proces ireversibil, nu prezint interes pentru cromatografie. Deoarece adsorbia substanelor de faza staionar este reversibil, sub aciu nea fazei mobile, acestea se vor deplasa la suprafaa fazei staionare n urma unor procese de adsorbie-desorbie repetate. Vitezele de deplasare ale componenilor vor fi dependente de tria forelor de adsorbie i deci de viteza procesului de adsorbiedesorbie. De exemplu, dac se dorete separarea componenilor A i B dintr-un amestec, componentul A, adsorbit mai puternic, va prezenta o vitez de deplasare mult mai mic dect componentul B care este adsorbit slab (figura 32). n cromatografia de adsorbie se folosesc ca adsorbani (faza staionar) sub stane cu suprafa util mare (poroase) i cu grupri funcionale polare ca: celuloza, alumina, silicagelul, crbunele.
93 .
CHIMIE ANALITIC
ELUENT
ELUENT
NA
A -"^1 B
O)
s
FAZA SI
Figura 32 - Mecanismul de separare Tn cromatografia de adsorbie 5.1.3.1.2. Cromatografia de partiie Cromatografia de partiie se bazeaz pe coeficienii de repartiie diferii ai com ponentelor unui amestec n dou faze nemiscibile sau parial miscibile. Coeficienii de repartiie sunt dependeni de solubilitatea substanelor n cele dou faze, substanele de analizat dizolvndu-se preferenial Tn cele dou faze. Componentul cu solubilitate mai mare n faza mobil va avea o vitez de deplasare mai mare dect componentul cu solubilitate mare Tn faza staionar. Mecanismul de separare a doi componeni A, cu solubilitate mai mare Tn faza staionar, i B, cu solubilitate mai mare n faza mobil, este redat n figura 33. ELUENT ELUENT
FAZA
&3=
Figura 33 - Mecanismul de separare Tn cromatografia de partiie n cromatografia de partiie faza staionar (lichid) este fixat pe un suport (hrtie, silicagel). Aceast metod cromatografic este utilizat pentru separarea amestecurilor de glucide, aminoaclzi, peptide, lipide, vitamine, toxine.
94
5.1.3.1.3. Cromatografia de schimb ionic Schimbtorii de ioni sunt substane care au proprietatea de a schimba un ion propriu cu un alt ion din mediul lichid cu care aceste substane se gsesc n contact. Schimbtorii de ioni sunt clasificai dup proprietile acido-bazice pe care le prezint n cationii\ anionifi. Cationlii conin n structura lor grupri funcionale cu caracter slab acid (-COOH) sau puternic acid (-SCV") i au proprietatea de a schimba ionul H* cu un cation din mediul lichid cu care se afl n contact. Dac notm cu R matricea schimbtorului de ioni, procesul poate fi redat astfel: R -COOH + M+ ss= R -COO fvt* + H* RS0 H + M* s==S R S0 M* + H*
3 3
Anioniii conin n structura lor grupri funcionale cu caracter slab bazic (-NH(CH3)*OI-|-) sau puternic bazic (-N(CH 3 );OH). Aceti schimbtori de ioni au proprietatea de a schimba ionul HO' cu un anion din mediul lichid cu care se afl n contact: "jR-NH(CH3)J*HO- + A' ss=S [R-NH(CH3y*A* + HO' [R-N (CH 3 ) 3 rHO' + A' = = ! = [R-N(CH 3 ) 3 ]'A- + HODesorbia anionilor sau cationilor fixai pe rin se efectueaz prin modificarea pH-ului i triei ionice a eluentului. Schimbtorii de ioni sunt utilizai pentru separarea i purificarea proteinelor, peptidelor, acizilor nucleici etc. 5.1.3.1.4. Cromatografia de excludere molecular Cromatografia de excludere molecular, numit i gel-filtrare utilizeaz ca faz staionar anumite substane (dextran, poliacrilamid) care prezint poprietatea ca n contact cu apa sau cu soluii saline s se mbibe rapid, formnd geluri de diferite poroziti. Aceast metod permite separarea componenilor unui amestec lichid pe baza diferenelor de mrime molecular. Sub aciunea fazei mobile (eluentul) moleculele cu diametre mai mari dect cele ale porilor vor fi excluse de structura gelului i se vor deplasa o dat cu eluentul. Moleculele cu dimensiuni mici vor penetra gelul ptrun znd n lichidul din interiorul porilor gelului i astfel eluia lor prin coloan va fi nce tinit, n acest mod, eluia componenilor se va face n ordinea descrescnd a masei moleculare (figura 34). Exist o mare varietate de geluri utilizate n cromatografia de excludere molecu lar, clasificarea lor fiind efectuat n funcie de limita de excludere molecular (masa molecular relativ peste care toate moleculele sunt excluse din structura gelului (tabelul 12).
95
CHIMIE ANALITICA
Figura 34 - Mecanismul separrii prin cromatografie de excludere molecular
Tabelul 12 Tipuri ale gelului utilizate n cromatografia de excludere molecular NUMELE GELULUI SEPHADEX G -10 -> G -200 BIO - GEL ~* F300 SEPHAROSE 6B-+2B NATURA CHIMIC dextran nreelat poiiacrilamid nreelat aga roz MASA MOLECULAR MAXIM A MOLECULELOR OBINUTE 700-+200.000 200 -* 400.000 4. 1 0 r - + 4 - 1 0 *
Sephadexuf este o substan bldrofil, insolubil care deriv de (a dextran (poliglucid al glucozei cu formula brut (CeH,0O6) i care este constituit din maoromolecule filiforme legate ncruciat). Golurile pe baz de poiiacrilamid (Bio-gel) sunt preparate prin copolimerizarea acriiamidei cu N.N'-metilen-biacrilamid. Gelul obinut se prezint sub forma unei reele tridimensionale, gradul de nreelare fiind determinat de raportul molar al celor doi monomeri. Sepharoza, substan care deriv de la poliglucldul agaroza, permite fraciona rea amestecurilor formate din biomolecule cu mase moleculare foarte mari, la limita 96
de excluziune a produselor Sephadex i Bio-gel. Cromatografia de excludere molecular este utilizat pentru fracionarea ames tecurilor de substane care difer fntre ele prin masa lor molecular relativ i In special a substanelor labile, cum sunt enzimele. 5.1.3.1.5. Cromatografia de afinitate Cromatografia de afinitate reprezint o tehnic de separare a proteinelor, acizi lor nucleici, celulelor, pe baza proprietilor lor de legare specific, prin fore necovalente, de molecule complementare numite ligand. n cazul acestei metode cromatografice, faza staionar este constituit dintr-o matrice polimeric poroas (dextran, agaroz, poiiacrilamid), de care se leag covalent ligandul. Ligandul are proprietatea de a recunoate i lega selectiv, dintr-un amestec multicomponent, numai componentul care prezint o structur complementar cu a sa (figura 35).
Polimer insolubil
Figura 35 - Mecanismul de separare prin metoda cromatografiei de afinitate Eluia componentului imobilizat de faza staionar se poate efectua prin: redu cerea afinitii sale pentru ligand sau prin utilizarea unui eluent care conine molecule care pot substitui componentul de analizat din complexul format. Reducerea afinitii pentru ligand se poate realiza prin modificarea pH-ului sau a triei ionice a eiuentului. Aceste modificri conduc ia alterarea structurii conformaionale i implicit la scderea afinitii pentru ligand. Pentru efectuarea eluiei se pot utiliza i solveni organici care conduc la modifi carea constantelor dielectrice i la alterarea legturilor hidrofobice contribuind ia diso cierea complexului "ligand - componeni". Eluia se poate efectua i prin utilizarea unei faze mobile care conine ageni specifici competitivi pentru situsul de legare al ligandului ca substrate alternative sau inhibitori pentru enzime. Datorit complementaritii structurale care exist ntre ligand i componentul de analizat, cromatografia de afinitate este utilizat pentru separarea i purificarea unui tip particular de biomolecule dintre care se menioneaz: /. Enzime. Specificitatea unei enzime pentru substrat, coerizim sau inhibitor constituie fundamentul unui numr mare de separri prin metoda cromatografiei de
97
CHIMIE ANALITICA
afinitate. Enzimele pot fi purificate folosind ca liganzi imobilizai substrate, coenzime sau inhibitori. 2. Anticorpi. Reacia dintre anticorp i antigenul su are loc fr inducerea unor modificri chimice i a celor dou biomolecule, procesul fiind asemntor cu cel de formare a complexului enzim-substrat. Metoda permite n special purificarea anticor pilor folosind ca ligand antigenele corespunztoare. Utilizarea anticorpilor monoclonali face posibil i utilizarea procedurii inverse de purificare a antigenelor. 3. Lectine. Unele proteine extrase din plante sunt capabile s lege componeni ai membranelor celulare i pot determina aglutinarea unor celule (eritrocite, celule tumorale, celule embrionate). Aceste proteine sunt cunoscute ca fitohemaglutinine sau lectine. Cu ajutorul lectinelor imobilizate, cromatografia de afinitate permite purifi carea unor componeni membranari n scopul studierii interaciilor celulare. 4. Receptori proteici. Hormonii acioneaz asupra celulelor prin intermediul re ceptorilor membranari i pot fi utilizai pentru purificarea acestor receptori din omogenate celulare. Cu ajutorul acestei metode au fost separai receptorii pentru insulina i acetilcolin. 5. Acizi nucleici. Imobilizarea unor polinucleotide poate fi utilizat pentru extra gerea acizilor nucleici legai de proteine din preparate celulare. 5.1.3.1.6. Gaz - cromatografia c
Gaz-cromatografia este o metod prin care componenii unui amestec n stare gazoas sunt separai, pe msur ce proba trece printr-o faz staionar lichid sau solid. Dei primele separri cromatografice pentru substane aflate n stare gazoas au fost efectuate n 1952, aceast metod a fost foarte mult dezvoltat avnd largi aplicaii n diferite domenii de activitate. Metoda prezint multe avantaje, deoarece poate fi utilizat pentru analize calitative i cantitative, timpul de analiz este scurt, aparatura este simpl i are o sensibilitate nalt, fiind aplicat pentru analiza a circa 60% din compuii organici cunoscui. Pentru efectuarea gaz-cromatografiei se utilizeaz un aparat special numit gazcromatograf. Componentele eseniale ale unui gaz-cromatograf sunt redate n figura 36.
Rezervor
jjgntru gaz p'.rttonclzitor nclzitor nclzitor nregistrator
Figura 36 - Schema unui gaz-cromatograf
98
Principiul de separare este urmtorul: faza mobil (gazul purttor) curge prin sistem transportnd proba, care a fost introdus n blocul de injecie. n coloan, separarea componenilor are loc datorit adsorbiei sau repartiiei difereniate a lor n faza staionar lichid sau solid. Dup separare, fiecare component este detectat pe msur ce prsete coloana. Gazulpurttor(faza mobil) este, n mod obinuit, heliu sau azot (gaze inerte). Blocul de injecie este amplasat astfel nct proba s fie introdus direct n gazul de transport. In blocul de injecie are loc evaporarea instantanee a probei, astfel nct trecerea n coloan s se fac rapid. Coloanele folosite n gaz-cromatografie sunt confecionate n mod obinuit din evi de oel inoxidabil sau cupru, cu un diametru de 1,5-8 mm i lungimea de 1-4 m. Coloanele sunt umplute cu un material solid (cromatografie solid-gaz) sau cu un solid inert acoperit cu un strat lichid (cromatografie gaz-lichid). Coloana este plasat ntr-un cuptor, astfel ca temperatura s fie reglat i con trolat (25-400C). Pentru probe biologice sau pentru probe care reacioneaz cu oelul inoxidabil sau cupru se folosesc, n mod frecvent tuburi de sticl. Coloanele pot fi umplute cu diferite substane care au rolul de a funciona ca faze staionare: adiponitril, asfalt, cear de albine, carbowax, cauciuc siliconic, alege rea acesteia fiind fcut n funcie de natura amestecului care trebuie separat. Cauciucul siliconic este utilizat ca faz staionar n gaz-cromatografie pentru analiza alcoolilor, compuilor aromatici, compuilor biliari, medicamentelor, alcaloizilor, acizilor grai, pesticidelor, vitaminelor. Detectorii au rolul de a analiza gazul care prsete coloana cromatografic i de a transmite la nregistrator informaia primit. Detectoarele pot fi: cu conductibilitate termic, cu ionizare n flacr i cu captur de electroni. Detectorul cu conductibilitate termic are ca fundament principiul: un obiect n clzit pierde cldura cu o vitez determinat de compoziia gazului nconjurtor. Aa dar, viteza cu care se pierde cldura reprezint o msurare a compoziiei gazului. Dac peste filamentul detectorului trece gazul purttor, n condiii constante, atunci pierderea de cldur este constant. Schimbarea compoziiei gazului din jurul fila mentului determin modificarea temperaturii i implicit modificarea rezistenei fila mentului. Aceast modificare de rezisten este evaluat i pus n eviden de nre gistrator. ' Detectorul cu ionizare n flacr const dintr-o flacr H2-aer amplasat ntr-un cmp electrostatic. La trecerea gazului purttor, n regim constant, peste flacr cu rentul electric rmne constant. Cnd o substan organic prsete coloana, va fi transportat de gazul purttor n flacr unde are loc combustia sa. n urma com bustiei se produc ioni i electroni care vor modifica curentul electric. Modificarea curentului electric, determinat cu un set de electrozi, este proporional cu concen traia probei. Detectorul cu captur de electroni funcioneaz pe baza absorbiei de electroni de ctre compuii care au afinitate pentru electroni (de exemplu, halogenii). Acest detector este constituit dintr-o surs radioactiv care emite electroni, un catod care respinge electronii i un anod care colecteaz electronii. " Absorbia electronilor de ctre anod are loc n mod constant la trecerea gazului purttor. Pe msur ce un compus intr n detector, electronii vor fi absorbii avnd loc o scdere a numrului de electroni care ajung la anod i deci o scdere a curen tului electric. n acest mod detectorul va prezenta un rspuns dependent de compo ziia gazului care prsete coloana cromatografic. Detectorii cu captur de elec-
99
CHIMIE ANALITIC
troni sunt utilizai la analiza pesticidelor, deoarece clorul, care intr tn constituia lor, prezint afinitate pentru electroni. nregistratorul, n conformitate cu informaia primit de ia detector, va nregistra rspunsul detectorului n funcie de timp. Aceast nregistrare se numete cromatogram i se prezint sub forma unei linii curbe cu maxime i minime numite picuri. , Analiza calitativ Pentru efectuarea unei analize calitative se compar timpii de retenie ai com ponenilor de analizat cu timpii de retenie ai unor etaloane. n figura 37 este ilustrat o cromatogram pentru un amestec de alcooli necunoscui i o cromatogram pentru o serie de alcooli cunoscui (etaloane). Prin comparare se pot identifica alcoolii necunoscui din probe.
Alcooli necunoscui S Injectare
0 n6 .12 '18
>i
_L!
24
30
36
A B C D E
min
Etaloane
Alcool metilic Alcool etilic Alcool n-propilic Alcool n-butllic Alcool n-amilic
Injectare l_
12
18
24
30
36 min
Figura 37 - Identificarea componenilor necunoscui prin compararea timpilor de retenie Analiza cantitativ se poate realiza prin mai multe metode, cea mai important fiind triangulaia, n cazul acestei metode, se calculeaz aria fiecrui pic prin asimi larea picului cu un triunghi (figura 38). Cunoscnd suma ariilor, ZA, i aria fiecrui pic se calculeaz compoziia pro centual a fiecrui component dup relaia; %C
.2*.
A,
100
Metoda gaz-cromatografiei este caracterizat printr-o sensibilitate ridicat, per mind analiza calitativ i cantitativ a amestecurilor care conin substane n canti ti de ordinul nanogramelor (10~g).
IOO
T i m p de retenii
Figura 38 - Determinarea ariei fiecrui pic prin metoda triangulaiei a _Qy",. a _ b 2 h g . A , - , *~ 2 A _ p-in3 *3 " 2
5.1.3.2. ELECTROFOREZA Electroforeza reprezint o metod fizico-chimic de analiz bazat pe feno menul migrrii particulelor ncrcate electric, ntr-un mediu solid sau lichid, sub aciu nea unui cmp electric extern. Denumirea acestei metode de separare provine de la cuvntul grecesc elektron (electric) i de la cuvntul latin phore (purttor). n 1937 Arene Tiselius a pus la punct tehnica separrii electroforetice ntr-un mediu lichid numit electroforeza n front mobil de lichid. Pentru realizarea electroforezei Tiselius a utilizat un tub de forma literei U n care a introdus proba de anali zat format dintr-un amestec de proteine, tubul fiind apoi umplut cu o soluie tampon. La aplicarea unei diferene de potenial la capetele tubului s-a reuit separarea proteinelor din amestec datorit vitezelor diferite cu care au migrat. Cercetrile ulteri oare au condus la diversificarea tehnicilor electroforetice, la creterea capacitii lor de separare, n special prin introducerea unor medii poroase stabilizante. 5.1.3.2.1. Bazele fizice ale electroforezei Prin suspendarea unei particule coloidale ncrcate electric ntr-un mediu lichid, particula va fi nconjurat de ioni de semn contrar din mediul cu care se afl n con tact (figura 39). n acest mod n jurul particulei se va crea un strat ionic imobil format din ionii adsorbii la suprafa i un strat mobil care devine din ce n ce mai mobil o dat cu creterea distanei fa de suprafaa coloidului. Sarcina particulei coloidale, dependent de compoziia sa chimic i de pH-ul mediului lichid, este numit potenial electrochimie. Potenialul electrochimie al coloidului scade la creterea concentraiei srii din soluia tampon datorit efectului de neutralizare produs de ionii adsorbii. Sarcina
1 0 1
CHIMIE ANALITICA
Stratul mobil POTENIAL ELECTROCHIMIC POTENIAL 2ETA
Figura 39 - ncrcarea electric a unei particule coloidale net rezultat este numit potenial zeta i este factorul determinant al mobilitii electroforetice. La aplicarea unei diferene de potenial particula coloidal se va deplasa spre electrodul de semn contrar cu for F direct proporional cu sarcina sa (e) i cu intensitatea curentului electric (E). F = eE Acestei fore de deplasare i se opune o for de frecare intern (F') propor ional cu viteza particulei (v), vscozitatea mediului (n.) i raza particulei (r): F=6jtr-r|-v Egalnd cele dou fore obinem: e-E = 6nr-r|-v Din aceast relaie se obine expresia vitezei de migrare a particulei x n cmp electric: e-E 6nr-n. Mobilitatea electroforetic reprezint viteza de deplasare a particulei ntr-un cmp electric de 1 volt/cm i este direct proporional cu viteza i invers proporio nal cu intensitatea cmpului electric:
102
_ v __d_ ~E~tE
cm2 volts
Ionii de sarcin contrar care intr n constituia stratului fix i mobil tind s antreneze particula n direcie opus sensului ei de migrare, determinnd o micorare a mobilitii electroforetice. Potenialul eiectrocinetic este potenialul de sarcin contrar care se creaz n jurul particulei coloidale i care tinde s-i frneze micarea. Acest proces de frnare va fi direct proporional cu concentraia ionilor din tampon i implicit cu molaritatea tamponului. Tria ionic a tamponului (u) este jumtate din suma produsului dintre molaritatea tamponului (e) i sarcina ionilor din soluie la ptrat (C):
Termenul ^ este necesar deoarece numai jumtate din ionii soluiei tampon sunt de sarcin opus coloidului i sunt capabili s modifice sarcina particulei. De asemenea, unele medii utilizate ca suport de migrare (hrtia de filtru) se ncarc negativ la pH-ul la care se face electroforeza. Din aceast cauz, lichidul care mbib S u p o r t u l de migrare se ncarc pozitiv i va migra spre electrodul nega tiv. Acest fenomen de deplasare a lichidului n sens invers se numete electroendoosmoz i tinde s micoreze mobilitatea electroforetic a particulelor. Un alt factor care afecteaz deplasarea n cmp electric a particulei coloidale este cldura dezvoltat ca urmare a trecerii curentului electric. Acest factor determin creterea conductivitii electrolitului din soluie i de asemenea creterea curentului. Aceast cretere a temperaturii produce evaporarea apei din soluia tampon determi nnd creterea concentraiei acesteia, modificarea potenialului zeta i conductivitii tamponului. Din acest motiv se impune controlul temperaturii i meninerea constant fie a voltajului, fie a curentului. Schema celui mai simplu tank (cuv) de electroforeza este prezentat n figura
40.
Electrod
Soluie tampon
Suport
Figura 40 - Schema unui tank electroforetic Cea mai utilizat tehnic electroforetic este tehnica zonal i presupune apli carea probei de analizat pe un suport solid i inert i separarea componentelor de analizat sub forma unor benzi (zone).
103
CHIMIE ANALITIC
5.1.3.2.2. Suporturi electroforetice Hrtia de filtru constituie cel mai vechi i utilizat suport de electroforeza cu toate c prezint o serie de inconveniente. Structura neregulat a hrtiei conduce la forma rea unor benzi neregulate iar polaritatea pe care o prezint celuloza produce un efect de absorbie responsabil de slaba conturare a zonelor. De asemenea, datorit tim pului lung necesar separrii (12-18 h) i a cantitii mari de tampon coninut de hrtie, apar procese de difuzie care determin lirea benzilor obinute n urma procesului de separare. Comparativ cu alte medii utilizate ca suport n electroforeza, utilizarea hrtiei de filtru necesit un volum mare de prob (10 y\) i a unui voltaj ridicat (-6 kV). Aceast tehnic este n mod particular utilizat la separarea moleculelor mici care prezint sarcini electrice apropiate (nucleotide). Membranele de acetat de celuloz conin un numr mai mic de grupri polare comparativ cu celuloza, datorit acetilrii gruprilor hidroxil, i o structur mai regu lat a porilor. Din acest motiv, efectul de absorbie este mai sczut, necesit un volum mai mic de prob (1 -2 ni) i separarea se face ntr-un timp mai sczut (1 -2 h). Membranele de acetat de celuloz nu elimin electroendoosmoza dar, datorit tran sparenei pe care o prezint, permit utilizarea densitometrului la efectuarea analizei cantitative. Aceste membrane prezint dezavantajul unei fragiliti foarte mari n stare uscat i necesit o manipulare foarte atent. Gelurile utilizate ca suport n electroforeza elimin dezavantajele pe care le pre zint hrtia de filtru i acetatul de celuloz i se caracterizeaz printr-o putere mult mai mare de rezoluie, delimitare mai net a fraciunilor i o migrare mai rapid. Gelul de agar se prepar din agar purificat gelificat ntr-un electrolit tamponat ntr-o concentraie de I 0 g - l ' \ Acest gel are o utilizare mai restrns deoarece nu nltur fenomenul de electroendoosmoza datorit polaritii crescute pe care o pre zint i cauzeaz precipitarea unor substane cum sunt lipoproteidele. Gelul de agaroz (5 - 8 g I'"1) conine un numr mai mic de grupri polare com parativ cu gelul de agar i de aceea elimin efectele de electroendoosmoza i con fer un efect de sit molecular pentru molecule mari ca proteine i acizi nucleici. Gelul de amidon (150 g r 1 ) este un gel cu pori mici care expune proprieti de sit molecular mai mari dect gelul de agaroz. Acest gel este preparat prin hidroliza parial a amidonului din cartofi, mrimea porilor fiind dependent de mrimea fragmentelor rezultate la hidroliz (de gradul de hidroliz). ntr-un astfel de mediu moleculele mari vor fi stnjenite de structura porilor i se vor deplasa cu vitez mult mai mic, comparativ cu viteza de deplasare a moleculelor mai mici care au acelai potenial electrochimie. Acest efect de sit molecular conduce la creterea gradului de rezoluie. Gelul de amidon prezint dezavantajul c este extrem de fragil iar porozitatea este dependent de gradul de hidroliz, reproductibilitatea porozitii fiind sczut. Poiiacrilamid ofer mai multe avantaje comparativ cu gelul de amidon fiind un mediu cu o nalt rezoluie electroforetic i datorit naturii sale sintetice mrimea porilor poate fi controlat cu uurin. Gelul este rezultat prin polimerizarea a doi monomeri: acrilamida i agentul de nreelare N,N-metilen-bis-acrilamida (figura 41). Proporia celor doi monomeri i nu concentraia lor total este factorul care determin mrimea porilor precum i elasticitatea i transparena gelului. Mrimea porilor scade la creterea proporiei bis-acrilamidei pn la valoarea minim de 5% care confer
104
CH, C CH H I C = I NH,
jCHJ
C H ! C H ,
c*=oi
N H CH, N H
C H
c=o
I NH,
I I I | I .
I I CH5 CH I C I N H = I
u!
C H
I I
C H . CH
"
c = o
NH.
I
Figura 41 - Structura poliacrilamidei cea mai mic porozitate. Polimerizarea gelului poate fi grbit.cu ajutorul persulfatului de amoniu care are rol de catalizator. Este necesar s se includ i un iniiator al reaciei de polimerizare, TEMED (tetrametilendiamina) fiind cel mai utilizat. Electroforeza n gel de poiiacrilamid (PAG) se execut n tuburi cilindrice de sticl sau n plac, la un curent sczut pentru evitarea fenomenelor de nclzire. Electroforeza n gel de poiiacrilamid este utilizat n foarte multe domenii, ca studiul proteinelor i acizilor nucleici. Metoda electroforezei n gel de poiiacrilamid este utilizat i pentru determinarea masei moleculare relative a proteinelor, prin utilizarea detergentului dodecilsulfat de sodiu (SDS). Fixarea componentelor separate pe suport, sub form de benzi, se face prin nclzire ia 100C, pentru electroforeza pe hrtie, sau prin tratare cu acid tricloracetic. Vizualizarea benzilor (fraciunilor separate) se realizeaz cu ajutorul unor colo rani (comassie blue, amidoschwrtz, albastru de bromfenol). n urma procesului de colorare se obin nite pete de culoare numite spoturi. 5.1.3.2.3. Analiza i interpretarea electroforegramelor Analiza calitativ Numrul spoturilor obinute n urma separrii electroforetice i poziia lor con fer informaii referitoare la numrul i tipul componenilor din proba de analizat. Ast fel, la electroforeza pe hrtie a serului sanguin se obin cinci spoturi corespunztoare, n ordinea scderii mobilitilor electroforetice, albumlnelor, a,-, a2-, p- i y -globulinelor (figura 42). Analiza cantitativ a electroforegramelor se bazeaz pe principiul legii Lambert-Beer. Evaluarea poate fi realizat prin: metoda eluiei i metoda densitometric.
105
I
%C, =
CHIMIE ANALITIC
Figura 42 - Electroforeza pe hrtie a unei probe de ser sanguin
Metoda eluiei presupune decuparea spoturilor i eluia compuilor ntr-un volum exact msurat de solvent. Pentru fiecare soluie se determin absorbanta. Suma tuturor extinciilor (absorbantelor) corespunztoare pentru spoturile obi nute este considerat 100% iar distribuia procentual a componenilor separai se calculeaz dup relaia: E,-100
Metoda densitometric utilizeaz un aparat numit densitometru. Gelurile sau hrtia de filtru, imersat n glicerol pentru a deveni transparent, se plaseaz n cuve speciale de sticl. Acestea se deplaseaz lent de-a lungul unui fascicul luminos i semnalul obinut de un detector fotoelectric este nregistrat sub forma unor curbe gaussiene. Numrul picurilor nregistrate corespunde cu numrul componenilor iar aria fiecrui pic este proporional cu concentraia (figura 43).
Figura 43 - Analiza cantitativ a unei electroforegrame prin metoda densitometic

T globulirv p a2 ai Albumln
te
Procentul corespunztor arioi flecarul pic 19 11 9 S M
Prin naltele sale performane, electroforeza n diferitele ei variante modeme s-a impus ca una dintre cele mai eficiente i consacrate metode n analiza i cercetarea biochimic.
I06
BIBLIOGRAFIE
SELECTIV
Alexeev V. (1975), Analyse Qualitative, Edition MIR, Moscou. Braithwait A., Smith F. J. (1985), Cromatographic methods, 4* edition, Champan and Hali, London, U. K. Hames B. D. (1990), Gel electrophoresis of proteins - a practicai approach, nd 2 edition, IRL Press, Oxford, U. K. Hollas J. M. (1991), Modern Spectroscopy , 2 n d edition, John Wiley and Sons, Chichester, U. K. Holme P. J., Peck H. (1993), Analytical Biochemistry, 2 n J edition, John Wiley and So-s, Inc., New York, USA Koryta J. (1980), Medical and biological applications of electrochemical ' devices, la edition, Univ. Microfilms International, Michigan, USA Koryta J. (1991), Ions, electrodes and membranes, 2 n d edition, Academic Press, New York Liteanu C, Hopirtean Elena, (1972), Chimie analitica cantitativ . Volumetria, Editura Didactic si Pedagogic Bucureti Popa G., Paralescu I. A., (1977), Chimie analitic, Editura Didactic i Pedagogic, Bucureti Pietrzik D. J., Frank W. K. (1987), Analytical Chemistry, l s l edition, Academic Press, New York erban M., Cmpeanu G., Emanuela Ionescu (1993), Metode de laborator n biochimia animal, Editura Didactica si Pedagogica R. A. Bucureti Willard H. H., Meritt L. L. (1988), Instrumental methods of analysis, 7* edition, Wadsworth Publishing Co., Belmont, California, USA

Chimie Analitica

Încărcat de

Informații document

Titlu original

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Chimie Analitica

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

PREFAA

85 89 90 90 92 93 93 94 95 95 97 98 101 101 104 105 107

. . . . ... . . . . . . ... ... . . . . . . .

NOIUNI INTRODUCTIVE DE CHIMIE ANALITIC

1. CLASIFICAREA METODELOR ANALITICE

2. REACII l REACTIVI ANALITICI

3. REVERSIBILITATEA REACIILOR ANALITICE

CHIMIE ANAI I1ICA

Scderea tec crtMbrului cfwrac r temporaturii cono^c* I reaciei eno-ir-

Astfel, reacia tei cu modificare de VOM<

REVERSIBILITATEA REACIILOR ANALITICE

Pentru aceast reacie expresia constantei de echilibru este:

FAZA GAZOAS - FAZA SOLIOA

FAZA GAZOASA - FAZA LICHID

FAZA SOLIO - FAZA LICHID

FAZA UCHID - FAZA LICHID (lichide nemisdbite)

NajSO, 10 rLO - a Na.SO, ( + H.0 w NHCI M ^ S N H a w + HCIj,

REVERSIBILITATEA REACHLOR ANALITICE

REVERSIBILITATEA REACIILOR ANALITICE

P Hj0 se numete produs Ionic al apei i are valoarea 1 x l 0 " 1 4 ^ p j

[A9(NH3)?1> " ~[Ag(NH 3 )][NH 3 ]

._M(NH3j ' [Ag(NH3)]-

Aplicnd legea aciunii maselor, expresia constantei de echilibru este:

REVERSIBILITATEA REACIILOR ANALITICE

4. METODE CHIMICE DE ANALIZ

METODE CHIMICE OE ANALIZA

METOPE CHIMICE PE ANALIZ

Zn(OH)2 + 2HN0 3 -* Zn(N0 3 ) 2 + 2H 2 0 Zn(N0 3 ) 2 C0(NO 3 ) 2 1000C CoZn0 2 (zincat de cobalt)

METODE CHIMICE PE ANALIZA

METODE CHIMICE DE ANALIZA

METODE CHIMICE DE ANALIZA

METODE CHIMICE DE ANALIZA

2. Apa de clor i apa de brom oxideaz ionul S un aspect lptos: S

la sulf, care imprim soluiei

+Pb(CH3COO)2 -+PbS0 4 +2CH COO4 3

METODE CHIMICE DE ANALIZA

La neutralizarea a 5 0 % din aceast soluie cu baza tare, [H* ] se reduce la:

Dac se neutralizeaz 9 0 % din acid, concentraia ionilor de hidrogen va fi:

La o neutralizare de 9 9 , 9 % din cantitatea iniial de acid se obine:

La neutralizarea complet a acidului:

Dac se continu adugarea de baz n exces de 0 , 1 % , se obine:

Pentru un exces de baz de 1 0 % rezult:

METODE CHIMICE OE ANALIZA PH14

ACID NEUTRALIZAT 100%

METODE CHIMICE DE ANALIZA

METODE CHIMICE PE ANALIZA PH

forma bazic (galben-orange)

forma acid (rou)

METODE CHIMICE DE ANALIZA

p red, + m ox2 a 1 * p ox, + m redg

METODE CHIMICE DE ANALIZ

(mediu acid) (mediu neutru) (mediu alcalin)

H2Os + 2H* + 2e _ MnO; + 8H* + 5e"

MnO" + 4H* + 3e" = = : MnO, + Cl, + 2e"

Cr 0 "+ 14H* + 6e" ==== 2 0 ^ * + 7H,0 Br + 2e" = i 2Br"

Mn0 "+ 1e*

METODE CHIMICE DE ANALIZA

KMnO. n soluie acid

[Fe(CN)6]3 MoO2 Fe3' h Mn0 2

apoi excesul de iod este titrat cu tiosulfat de potasiu:

Produsul AsO3" SbO 3 ; Sn** S

METODE CHIMICE DE ANALIZA

Forma oxidat (albastru)

Hg2 ,Ag* Hg 2 \Ag* Hg, Ag, Cu2*