REACII DE IDENTIFICARE A UNOR SUBSTANE DIN PRINCIPALELE CLASE DE COMPUI BIOCHIMICI I.

CLASIFICAREA COMPUILOR BIOCHIMICI Principalele biochimice sunt: PROTEINELE Proteinele sunt compui macromoleculari cu masa moleculara foarte mare, formai din resturi de -aminoacizi unite prin legturi peptidice. Lagtura peptidica se formeaz prin eliminarea unei molecule de ap ntre gruparea amino - ! " a unui aminoacid i gruparea carbo#il -$%%! a altui aminoacid. Proteinele se clasific &. dup solubilitate n: grupe de substante

Proteine solubile globulare, de e#emplu albuminele din albuul de ou, gluteinele din cereale, globulinele din plasma sang'in(

Proteine insolubile fibroase, de e#emplu colagenul coarne, natural. ". +up produsii de hidroliz pe care i formeaz: din fibrina cartila)e din firul i tendoane, de mtase *eratinele din firele de pr, copite,

!oloproteine formeaz la hidroliza numai -aminoacizi de e#emplu albumine, globuline, gluteine(

!eteroproteine un colorant-n

conin i alte grupri cromoproteide, acid un nucliecglucidacid n n

neproteice numite prostetice, care pot fi: fosforic- n fosfoproteide, o lipid-n lipoproteide, nucleoproteide, glucoproteide.

,tructura

proteinelor.

protein

este

format din unul sau mai multe lanuri polipeptidice care conin la un capt o grupare - !" si la celalat una -$%%!. .ntre lanurile polipeptidice se stabilesc legturi de hidrogen , sulf sau cu un alt heteroelement. GLUCIDELE /lucidele reprezint una din cele mai importante clase de compui naturali reprezent0nd principala surs de energie necesar meninerii proceselor metabolice in lumea 'ie. +enumirea 'ine de la termenul grecesc 1glichis2 care nseamn dulce, deoarece ma)oritatea gucidelor au gust dulce sau formeaz la hidroliz substane dulci. +in punct de 'edere chimic sunt substane ternare conin n principal $, !. %. 3area ma)oritate conin hidrogenul i o#igenul n proporia apei, de aceea au fost iniial denumite hidrai de carbon. $lasificare:

3onozaharide care nu

sunt substane simple +e e#emplu

hidrolizeaz.

glucoza 4sau zahrul din struguri5 i fructoza care se gsete n amestec cu glucoza n fructe coapte, n mierea de albine. 6ructoza este mai dulce dec0t glucoza iar prin reducere ambele formeaz he#a he#ol numit sorbitol i utilizat ca ndulcitor n diabet. CH H OH H H C C C C O OH H OH OH

CH2OH D+ GLUCOZA %ligozaharidele monozaharide. hidrolizeaz $ele mai form0nd sunt simple

dizaharidele de e#emplu zaharoza sau

zahrul

alctuit dintr-o molecula de +475

glucoza si 8+4-5 fructoza( se gsete n trestia de zahr, sfecla de zahr, moco'i, pepeni galbeni, zmeur, caise. Polizaharidele sunt constituite dintr-un numr mare de monozaharide legate ntre ele prin puni glicozidice. 9u rol de depozit energetic mecanic, 4amidonul celuloza. i glicogenul5 sau 9midonul reprezint

principala surs de gucide, se formeaz n frunzele 'erzi prin fotosintez acumul0nduse n rdcini, semine, tuberculi. 9re doi componeni: 9miloza o polizaharid liniar, solubil n ap ce d cu iodul o coloraie albastr i amilopectina cu structur ramificat insolubil n ap. $eluloza este cea mai rsp0ndit substan organic din natur, reprezent0nd apro#imati' :;< din masa lemnoas. $ea mai pur celuloza se gsete n bumbac, n c0nep. 3acromolecula este liniar,

contin0nd intre =;;; i &";;; de uniti structurale. LIPIDELE Lipidele sau substanele grase sunt esteri ai acizilor grai cu alcoolii. /liceridele sunt esteri ai acizilor grai cu glicerina. Principalii acizi grai sunt acidul butiric $!> -4$!"5"-$%%!( palmitic, $!> -4$!"5&?$%%!, 4$!"5A stearic $!> -4$!"5&@-$%%!, -$%%!. Csterii arahidonic $!> -4$!"5&=-$%%!, oleic $!> -$!B$!-4$!"5A formai din acizi grai nesaturai sunt lichizi, grsimi lichide uleiuri, iar cei formai din acizi saturai sunt solizi.

VITAMINELE Ditaminele sunt substane organice necesare 'ieii care regleaz anumite etape ale metabolismului, influeneaz acti'itatea u enzimelor sau inter'in direct n anumite procese chiar de biosintez a enzimelor. fac parte din mai multe. ,e clasific n: Vitamine hidrosolubile ca: 'itamina $ care este acidul asco !ic citrice, tomate. 9'itaminoza reprezint o anumit clas de substane ele

se gsete n : ardei, ptrun)el, mrar, mce, 'itaminei $ produce scorbut.

OH H HO CH2 C H C

OH OH C O C CO

Vitamina C Acidul ascorbic

Ditamina E& din dro)die de bere, carne , lapte ou, inte'ine n metabolismul glucidelor. Cste o "ia#i$%. 9'itaminoza sa produce boala beri- beri.

Cl N H3C N CH2 NH2 N C CH3 CH2 CH2OH

CH C S

Tiamina Vitamina B

Ditamina

E"

sau

i!o&la'i$a

se

gsete n ficat, rinichi, ou, lapte. .nter'ine n procese o#idati'e n celula i

n sinteza unor enzime. 9'itaminoza determin con)uncti'ite, cderea prului.

OH CH2 N N O !ibo"la#ina Vitamina B2 CH N OH CH O NH OH CH CH2 OH

Ditamina E@ este o (i ido)i$%, se gsete n creier, ficat, splin, dro)die de bere, gr0u, porumb. .ntr n compoziia unor enzime i este necesar sintezei unor enzime.

CH2OH HO H3C N $irido%ina Vitamina B& CH2OH

 Ditamina E&" sau co!ala#i$a petilor. Vitamine grasimi Cste un hemato se

se

gsete n plante inferioare, n ficatul factor. ului. in 9'itaminoza perturb sinteza 9+ liposolubile

dizolva

Ditamina 9 R*"i$ol, se gsete n morco'i, ardei mazre, piersici, lapte, unt, br0nz, ou. .nter'ine n creterea organismului.

H3 C

CH3 CH CH3 CH

CH3 C CH CH

CH3 CH C CH CH2OH

!'tinol Vitamina A

Ditamina C se gsete n elin, mere, mcee, ulei, ou, ficat. $rete puterea de aprare la infecii.

Ditamina F. II. LUCRARE PRACTICA +. PRICIPIUL METODEI .dentificrile substanelor chimice reprezint un capitol al chimiei analitice calitati'e i se bazeaz pe efectuarea unor recii chimice selecti'e i specifice anumitor grupe funcionale. $aracteristica chimiei analitice calitati'e const n alegerea unor reacii ale cror produi de reacie s fie uor identificabili, mai e#act 'izibili. +e regul produii de reacie sunt compui colorai, sau precipitate, sau gazoi adic

substane a cror prezen este uor sezizat cu ochiul liber. , 3.1 MATERIALE I MOD DE LUCRU MATERIALE

La masa de lucru studenii 'or a'ea un stati' cu eprubete ce trebuiesc splate cu ap i cltite cu ap distilat. Pentru fiecare clas de substane biochimice e#ist sticlue cu reacti'i specifici. +up efectuarea fiecrui test eprubeta se pune n stati' a'0nd gri) s nu se ncurce -eprubetele se pot inscripiona cu mar*er. 3.2 IDENTIFICAREA PROTEINELOR

,.+.- R*ac.ia !iu *"ului Peptidele i proteinele reacioneaz cu sulfatul de cupru n mediu alcalin form0nd combinaii comple#e de culoare 'iolet. +enumirea reaciei 'ine de la comple#ul numit biuret, cea mai simpl combinaie din

aceast reacie.

clas.

+e

reinut

faptul

aminoacizii si dipeptidele nu dau aceast

Recativi necesari: soluie de protein ;,:<( soluie sulfat de cupru &<( ,oluie ?;<. Modul de lucru .ntr-o eprubet se introduce & ml soluie de protein( ,e adaug & ml picturi $u,%?( ,e agit eprubeta( Geacia poziti' este marcat de apariia unei coloraii 'iolete. ,.+.+ P *ci(i"a *a cu alcool *"ilic Proteinele se separ din soluiile slab acidulate prin precipitare n prezena alcoolului etilic i a electroliilor, datorit scderii hidrofiliei proteinelor n prezena sol'enilor organici precum i a scderii a%! ?;<( si "-> a%!

constantei dielectrice a mediului. .nfluena electrolitului const n neutralizarea sarcinilor electrice ale proteinelor fa'oriz0nd astfel coagularea. Reactivi necesari soluie de protein ;,:<( alcool etilic( clorur de sodiu Modul de lucru .ntr-o eprubet se introduc " ml solutie de protein( ,e c0ntresc la balana analitic ;.&g a$l( ,e introduce proteic( ,e agit pentru dizol'are( ,e adaug pictur cu pictur > ml alcool etilic( ,e agit eprubeta pentru omogenizare i se aseaz n stati'ul pentru eprubete( a$l n eprubeta cu soluie

Geacia poziti' este marcat de apariia unui precipitat.

3.3

IDENTIFICAREA GLUCIDELOR

Geacia specific a unei glucide de tip aldol este cea care pune n e'iden prezena unei grupri carbonilice de tip aldehid, adic cu reacti'ii Hollens sau 6ehling.

,.,.- Id*$"i&ica *a /luco0*i cu *ac"i' F*1li$/ Reactivi necesari /lucoza( ,oluie 6ehling .( 6ehling .. Modul de lucru ,e c0ntresc la balana analitic ;.;&g glucoz( ,e introduce glucoza ntr-o eprubet i se adaug & ml ap distilat ,oluie

,e adaug peste soluia de glucoz & ml solutie 6ehling . si & ml solutie 6ehling ..( ,e agit pentru omogenizare( ,e nclzete uor eprubeta la flacr. Geacia poziti' este marcat de apariia unei coloraii roii crmizii.

.dentificarea amidonului cu iod

3.4

IDENTIFICAREA VITAMINELOR

,.2.- Id*$"i&ica *a Vi"a#i$*i B+ 3 i!o&la'i$a4 .n mediu acid la p! I A ribofla'ina prezint o fluorescen galben 'erzuie accentuat Reactivi necesari ,oluie de ribofla'in- 'itamina E"( 9cid clorhidric sau sulfuric concentrat. Modul de lucru

.ntr-o eprubet se introduc " ml soluie de ribofla'in ,e adaug pictur cu pictur acid concentrat astfel nc0t p!-ul s fie apro#imati' :-?(

Geacia poziti' este marcat de apariia unei coloraii fluorescente galben 'erzui, intens.

,.2.+ Vi"a#i$a B5 Prin gruparea fenolic -%! 'itamina E@ reacioneaz cu clorura feric 6e$l > ntr-un mod asemntor fenolilor i formeaz compleci de culoare roie. Reactivi necesari ,oluie de 'itamina E@( ,oluie 6e$l> &<(

Modul de lucru .ntr-o eprubet se introduc ;.: ml soluie de 'itamina E@(

,e adaug ;.: ml soluie 6e$l > &< sub agitare. Geacia poziti' este marcat de apariia unei coloraii roii.

,.2., Id*$"i&ica *a Vi"a#i$*i B-+ 6co!ala$i$a Ditamina E&" este o substan cu structur comple#, conin0nd un nulceu heterociclic asemntor hemului comple#at n partea centrala cu ionul de cobalt he#acoordinat, o ribonucleitid ce are ca baz azotat :,@dimetilbenzimidazolul nitril $ legat de +-riboza printr-o legatura - -glicozidic i o grupare legat coordinati' la atomul central.

,.2.2 Id*$"i&ica *a Vi"a#i$*i C Ditamina $ este acidul ascorbic. $a reacie de identificare se utilizeaz formarea albastrului de Eerlin.

,ub

aciunea

acidului

ascorbic

he#acianoferatul ... de potasiu este redus la he#acianoferatul .. de prezena Eerlin. Reactivi necesari ,oluie 'itamina $ ... &<( de ,olutie potasiu de &<( he#acianoferatul Modul de lucru .ntr-o eprubet se introduc > ml soluie de 'itamina $( ,e introduc ? picturi soluie de he#acianoferatul ... de potasiu &<( ,e agit pentru accelerarea reaciei( ,e adaug c0te'a picturi soluie $lorur feric &<. clorurii potasiu care n ferice formeaz

ha#acianoferatul feric, adic albastrul de

,olutie $lorur feric &<.

Geacia poziti' este marcat de apariia unei coloraii intens albastre 6e?J6e4$ 5@K>.

,.2.7 Id*$"i&ica *a 'i"a#i$*i A

Reactivi necesari Ditamina 9 uleioas( ,oluie acid sulfuric concentrat. Modul de lucru Pe o lamel de sticl se pune o pictur de soluie de 'itamina 9 n ulei( ,e adaug o pictur de acid sulfuric concentrat. Geacia poziti' este marcat de apariia unei coloraii albastru - 'iolet. 2 PRELUCRAREA RE8ULTATELOR

+up efectuarea testelor de identificare se trec n re'ist eprubetele 'erific0ndu-se corectitudinea notielor.

Geferatul urmtoare.

se

completeaz

cu

reaciile

chimice care au a'ut loc i se pred ora

OBSERVATII La sf0ritul edinei de laborator fiecare student prezint cadrului didactic caietul de lucru. $adrul didactic 'a semna pentru autentificarea rezultatelor obinute, sau 'a indica refacerea anumitor msurtori. Geferatul se ntocmete la sf0ritul sedinei de laborator Geferatul se prezint cadrului didactic cel t0rziu la edina urmtoare CONTINUTUL REFERATULUI Geferatul de laborator se redacteaz pe h0rtie alb 9? cu chenar ,H9, i 'a conine Hitlul lucrrii

Ln scurt rezumat al prii teoretice Principiul lucrrii Gezultatele e#perimentale prelucrate conform indicaiilor din referat completate cu cele ale cadrului didactic

$oncluzii i interpretarea rezultatelor e#perimentale Gspunsiri la ntrebrile de la sf0ritul referatului -acolo unde acestea e#ist.