Sunteți pe pagina 1din 6

Tehnici si metode analitice pentru determinarea si analiza lipidelor

BIOANALIZA

Lipide
Dpdv structural: grup heterogen de compui hidrofobi, insolubili n ap, solubili n solveni organici (cloroform, eter, etc) Dpdv al rolului biologic: compui care pot ndeplini variate roluri biologice surse de energie izolatori termici substane tensioactive implicate n digestie hormoni provitamine, vitamine (A, D, E K) constitueni ai membranelor

Lipide
HIDROLIZABILE (SAPONIFICABILE) - esteri care n prezena apei i a catalizatorilor (NaOH, lipaze) elibereaz acizi grai sau srurile lor (spunuri) R-COOR + H2O = R-COOH + R-OH R-COOR + NaOH = R-COO-Na++ ROH NEHIDROLIZABILE - compui care au rezultat prin hidroliza lipidelor saponificabile sau se gsesc ca atare n organismele vii

Clasificare :

lipide simple gliceride sau grasimi, ceride (din ceruri vegetale), etolide (din conifere), steride (din organisme vegetale cu rol biochimic si fiziologic) lipide complexe lipoproteide ( din tesuturi si organe animale), glicerofosfolipide, serinfostatide (lecitina, cefaline)

Colesterol

Colesterolul - identificat n membrana celular i n esuturile organismului i transportat n snge. Termenul provine din grecescul chole (bil) i stereos (solis) plus sufixul ol, fiind identificat n calculii colesterolici n anul 1784. nu se absoarbe prin alimentaie, ci se sintetizeaz n oragnismul animal. Se concentreaz la nivelul ficatului, mduvei spinrii, a creierului dar i la nivelul plcii de aterom, conducnd la ateroscleroz. Colesterolul are un rol important n organism, numeroase procese biochimice avndu-l drept precursor. Hiperproducerea de colesterol (cel din lipoproteine de mic densitate) este asociat cu afeciuni vasculare: accidente vasculare cerebrale, cardiace, oculare .a., periclitante pentru via.

6:36 PM

Colesterol

Termenul de colesterol sanguin se refer de fapt la 2 tipuri de lipide:


LDL (low density lipoprotein) lipoproteine cu densitate mic aa numitul colesterol ru HDL (high density lipoprotein) lipoproteine cu densitate mare

6:36 PM

Metode cantitative
Metoda enzimatic colesterol ester+ O2 colesterol esteraza colesterol + acizi grasi colesterol colesterol oxidaza 4 cholestene-3-one + H202 H202 + 4-aminoantipirina + fenol peroxidaza Chinon-imina + H2O (550 nm)
Chinon-imine:

Metode cantitative
Metoda Liebermann-Burchard Colesterol + acid sulfuric + anhidrida acetica compus colorat verdealbastru

Ser Reactiv standard Ap bidistilat Soluie acid sulfosalicilic

Proba (ml) 0,1 0,6

Standard (ml) 0,1 0,6

Martor (ml) 0,1 0,6

se omogenizeaz, se las s se rceasc 10 min. si se adaug: Acid sulfuric conc. 0,2 0,2 Se citesc A proba (Ap) i A standard (As) fa de martor la 610 nm Calcul: Colesterol total (mg / 100ml ser) =(Ap/As) x 250

0,2

Determinarea trigliceridelor

1. Metoda enzimatica Aceasta metoda se bazeaza pe hidroliza enzimatica (lipaza - (LPL) a trigliceridelor plasmatice in glicerol si acizi grasi liberi (FFA). Glicerolul este fosforilat de catre trifosfat adenosin (ATP) in prezenta glicerol chinaza (GK) pentru a forma glicerol-3-fosfataza (G-3-P) si difosfat adenozina (ADP). G-3-P este oxidata de glicerofosfat oxidaza (GPO) pentru a forma fosfat dihidroxiacetona (DHAP) si apa oxigenata. Se obtine un compus colorat in rosu din reactia 4-aminoantipirina (4AA) si fenol in prezenta de H2O2, reactia fiind catalizata de peroxidaza (POD).

6:36 PM

10

Determinarea trigliceridelor