Histonele

Histonele, din punct de vedere chimic, sunt proteine cu un puternic caracter bazic, deoarece 25% din aminoacizii constitueni sunt bazici, purttori de sarcini pozitive (arginin, lizin i histidin). Sunt complet lipsite de triptofan, fenilalanin i tirozin. Din cauza naturii bazice, ele pot fi extrase uor cu acid clorhidric diluat sau cu acid sulfuric. Histonele sunt alctuite dintr-o singur caten polipeptidic. Dup coninutul n arginin i lizin, histonele cromozomale sunt clasificate n cinci clase: H1 (bogate n lizin), H2A i H2B (moderat bogate n lizin), H3 i H4 relativ bogate n arginin); n cadrul fiecrei clase exist cteva subtipuri care difer prin 1 -2 aminoacizi. Exist i histonele H5 i H6 prezente numai n nucleii eritrocitelor de psri (hematii circulante nucleate) unde nlocuiesc histona H1. Proprieti fizico-chimice ale histonelor Histona H1 este cea mai mare (GM=21.000 daltoni), conine circa 215 aminoacizi i se prezint sub form de monomer; lizina se gsete n cea mai mare proporie (27%). Prezint cea mai mare variabilitate de secven i este implicat n interaciunile cu componentele variabile ale cromatinei (non-histone, regiuni variabile ale altor histone). Fiind legat de ADN linker dintre doi nucleozomi, poate fi uor ndeprtat prin digestie enzimatic. Histona H2A este format din 129 de aminoacizi, are GM=14.000 daltoni i se prezint sub form de oligomeri. Conine 11% lizin, 9% arginin i leucin n cantitate mare. Histona H2B conine 125 de aminoacizi, are GM=13.775 daltoni i formeaz oligomeri. Conine 16% lizin, 6,5% arginin i un procent ridicat de serin i prolin. Histona H3 este format din 135 de aminoacizi, are GM=15.320 daltoni i conine 15% arginin, 12% lizin, fiind singura fracie n compoziia creia intr i cisteina. Histona H4 este format din 102 aminoacizi i are GM=11.280 daltoni. Este bogat n arginin (14%) i glicin (15%). H3 i H4 formeaz un tetramer (2 H3 - 2 H4), care mpreun cu oligomerii H2A i H2B construiesc cilindrul turtit, proteic al nucleozomului. H4, fiind cea mai mic histon, are descifrat complet secvena de aminoacizi: regiunea terminal NH2 cuprinde cei mai muli aminoacizi bazici, avnd i un caracter bazic foarte pronunat, pe cnd regiunea terminal COOH reprezint segmentul hidrofob i este numai uor bazic. Se consider c regiunea terminal NH2 este implicat n legarea la ADN, iar regiunea terminal COOH n legturi interhistonice sau cu alte componente ale cromatinei. Coninutul histonelor n aminoacizi bazici (arginin, lizin, histidin), purttori de sarcini pozitive, explic legarea lor la ADN. Aceasta se realizez prin formarea de puni ionice (electrostatice) ntre grupele fosfat ncrcate negativ ale ADN i grupele amino (NH2) ncrcate pozitiv ale catenelor laterale ale aminoacizilor bazici din catena polipeptidic a histonelor. Intensitatea legturii la ADN a diferitelor fracii de histone

este diferit. Astfel, lizina se leag preferenial la perechile A-T, n timp ce arginina se leag preferenial la perechile G-C. Aceste legturi se realizeaz la nivelul adnciturii mari, n timp ce adncitura mic prezint situsuri de recunoatere pentru ARNpolimeraz. Componena bazic a histonelor protejeaz ADN de denaturarea termic. Acest rol l ndeplinesc cationii care reduc forele de repulsie ce apar ntre gruprile fosfat cu sarcini negative. Temperatura de denaturare termic a ADN este n funcie de concentraia cationic a moleculelor de histone, acestea fiind policationi. Modificri ale histonelor Histonele sufer anumite modificri chimice cum sunt: metilarea, acetilarea i fosforilarea diferiilor aminoacizi. Aceste modificri duc la schimbarea sarcinii moleculelor histonice i sunt corelate cu activitatea genelor, cu replicarea ADN i cu diferenierea celular. Modificrile histonelor, cu excepia metilrii, sunt asociate cu evenimente cromozomale distincte i sunt schimbri reversibile. Fosforilarea i acetilarea influeneaz interaciunea histonelor cu celelalte componente cromozomale. Modificarea steric a histonelor are loc datorit faptului c gruprile fosfat i acetil sunt voluminoase. Regiunile de prindere sunt regiuni foarte voluminoase, fiind de altfel, cele mai afectate de modificrile amintite. Deci, metilarea, fosforilarea i acetilarea afecteaz, n esen, interaciunea ADN - histone i anume structura fibrei nucleozomale. Rolul histonelor Histonele sunt proteine de structur cu rol de stabilizator al fibrei de cromatin. ADN nativ este oarecum instabil deoarece apar fore de repulsie ntre gruprile fosfat ncrcate negativ, ceea ce duce la extensia moleculei i eventual, la separarea catenelor. ntre gruprile fosfat ale catenelor de ADN i gruprile NH2 ale histonelor se formeaz legturi ionice, care dau stabilitate moleculei. n afara rolului structural, histonele ndeplinesc i funcia de represori generalizai n reglajul genetic. Asocierea histonelor cu ADN imprim starea condensat a cromatinei, deci mpiedic transcrierea ADN. Deci, histonele reprezint o grup intermediar ntre protamine si albumine. Ele apar n globulele roii ale sngelui, n leucocite, n icre de pete etc. Sunt solubile n ap, cu reacie puternic alcalin; cantiti mici de sruri sau de amoniac le precipit n soluie. Specific este caracterul lor bazic, datorit coninutului de diamino-acizi (n special arginina).