PROTOCOLO DE AUXILIARES DE LABORATORIO CLINICO

PROTOCOLO DE TOMA DE MUESTRA DE LABORATORIO E INDICACIONES DEL PACIENTE

Confirmar en la orden la identidad del paciente y la orden medica. Verificar si el paciente est en ayunas ha cumplido las condiciones necesarias para el anlisis o determinacin que as lo requiera.

Preparar los elementos necesarios de acuerdo a los exmenes solicitados, rotular los tubos con el nmero dado por el sistema y las iniciales del paciente.
Observar y palpar el antebrazo del paciente, donde se encuentran las venas ms utilizadas. Si en los antebrazos no se logra ubicar alguna, se examinan las del dorso de la mano. Seleccionar la vena que se va a puncionar. Nunca debe hacerse la puncin en zonas cianticas, con edema, o con lquidos. Colocar el torniquete unos centmetros arriba del sitio de la puncin. Limpiar el rea de puncin con una torunda impregnada con alcohol etlico al 70%; en espiral.

Estirar hacia abajo la piel sobre la vena. Sostener la aguja con la mano opuesta, introduciendo la aguja con movimiento rpido y firme siguiendo la direccin de la vena, bisel hacia arriba, puncionando primero la piel y luego la vena. Insertar tubos requeridos. Despus de extraer la sangre necesaria, retirar el torniquete.

Colocar una torunda sobre el sitio de puncin, retirar el tubo y luego la aguja rpidamente sin hacer presin con el algodn.
Pedirle al paciente que se haga presin con la torunda por lo menos dos minutos. Mezclar suave e inmediatamente los tubos que fueron tomados con anticoagulante.

PUNCION CAPILAR (EXAMEN PARA MALARIA)

Frotar el rea a puncionar con un algodn hmedo en alcohol etlico al 70%, no slo para la asepsia sino para activar la circulacin. Secar con otro algodn. Puncionar con lanceta en forma rpida y profunda para evitar doble pinchazo. Hacer presin en el dedo con la mano hacia abajo, desechar la primera gota de sangre, limpiando con algodn seco. Soltar para permitir la circulacin sangunea. Repetir hasta obtener la sangre necesaria. Colocar algodn en el sitio de la puncin.

INDICACIONES PREVIAS A LOS PACIENTES

EXAMEN: PERFIL LIPIDICO, SEROLOGIA, GLICEMIA PRE Y POST PRANDIAL
No haber comido 8 horas antes de la toma de muestra, ni prolongar ms de 12 horas el ayuno. No realizar dieta la noche anterior, ni ejercicio horas antes a la toma de muestra.

No fumar antes de la toma de muestra, ni tomar licor mnimo 3 das antes de la toma de muestra.
Si tiene glicemia post tomarle la muestra en ayunas, desayunar en un tiempo mximo de 15 minutos. Lo que normalmente desayuna Terminado el desayuno empezar a contabilizar las 2 horas para la segunda toma de muestra. Disponer de 2 horas despus del desayuno para la toma del examen, y durante este tiempo NO volver a comer, beber, fumar, masticar chicle, caminar, ni hacer ningn tipo de ejercicio. (estar sentado en la parte de afuera del laboratorio).

 PARA EXAMEN DE TEST DE OSULLIVAN, GLICEMIA PRE Y POST CARGA CURVAS

Seguir las indicaciones anteriores excepto el desayuno, ya que se dar a tomar una carga de glucosa que se suministrar en el laboratorio en un tiempo no mayor a 5 minutos. Terminado de tomar la bebida en embarazadas empezar a contabilizar 1 hora para la segunda toma de muestra, si No esta embarazada contabilizar 2 horas. Para los pacientes con Curvas disponer de 3 horas siguiendo las indicaciones anteriores.

EXAMEN: PARCIAL DE ORINA (Uroanalisis), UROCULTIVOS, ANTIBIOGRAMA

Realizar buen aseo (bao) genital, 3 veces con agua y jabn. Recoger la PRIMERA orina de la maana orinar un poquito fuera del frasco y recoger el resto. Utilizar frasco estril NUEVO (de los que venden en las drogueras) no sirven reutilizados as estn hervidos, recoger ms de medio frasco, taparlos bien. No cierran a presin, sino enroscndolos, No colocarles bolsas o papel para taparlos. Traer marcada la muestra desde la casa con primer nombre y primer apellido.

EXAMEN: COPROLOGICO, COPROLOGICO SERIADO, SANGRE OCULTA

Utilizar una recipiente estril NUEVO (de los que venden en las drogueras) No reutilizados. Traer marcada la muestra desde la casa con primer nombre y primer apellido. Para coprolgico seriado traer la muestra durante 3 das seguidos. Para examen de sangre oculta NO consumir 3 das antes de recoger la muestra, carnes rojas, remolacha, habichuelas, zanahoria, tomate, espinaca, rbano, ni tomar pastillas que contengan hierro.

EXAMEN: FROTIS VAGINAL, SECRECION URETRAL

El da del examen no realizarse aseo genital interno, no aplicarse cremas, vulos, duchas vaginales ni tener relaciones sexuales.

Si el mismo da del examen tiene parcial de Orina, primero se toma el frotis y luego la orina( con aseo previo)si ya han pasado ms de 2 horas despus de la primera miccin de orina.

EXAMEN: KOH
Realizarse un buen aseo antes de toma de muestra con agua y jabn, no aplicar cremas, suspender medicamentos 3 das antes de la toma de la muestra.

CARGAS DE GLUCOSA
TEST DE OSULLIVAN
Se da al paciente 50 grs de azcar en 200 mls de agua

CURVA DE GLICEMIA EN Se disuelven 100 grs en 300 mls de agua EMBARAZADAS: GLICEMIA PRE Y POST CARGA ADULTOS
Se preparan 75 (3 sobres) mgr en 300 mls de agua

GLICEMIA PRE Y POST Peso del nio multiplicado por 1,75 para CARGA ADULTOS NIOS saber la carga de glucosa que debe darse.

FROTIS DE FLUJO VAGINAL

Se toman dos escobillones, uno se introduce en 1 cc de solucin salina, con el otro escobilln hago un extendido en una lmina portaobjetos en forma de ovillo, para colorear con Gram, la lmina debe estar previamente marcada con nmero, y FFV (iniciales de frotis de flujo vaginal)

COLORACIONES
COLORACIN DE GRAM: Para frotis vaginales, uretrales, frotis de garganta, gram de cualquier muestra

Violeta de genciana Lavar con agua corriente Lugol de Gram Lavar con agua corriente Decolorar con alcohol acetona Lavar con agua corriente Safranina 30 segundos 30 segundos 1 minuto

40 segundos

COLORACIN DE STOLTEMBERG: Para muestras de Frotis de Garganta

Cubrir la lmina con el colorante

20 minutos

Lavar con agua corriente

COLORACIN DE ZIEHL - NEELSEN: Para BK de esputo, muestras de lepra

Montaje de la muestra: Antes de iniciar me coloco los elementos de proteccin, tapabocas N95, careta, protector en acrlico transparente, apago el aire, abro las puertas, aviso a los dems compaeros del laboratorio que voy a montar y colorear BK. Lleno el mechero completamente con alcohol impotable y tengo a la mano la cuchara grande para colocar el mechero y flamear. Cubro el mesn con papel kraff impregnado de hipoclorito Alisto las muestras en el orden en que aparecen en el libro de registro diario de baciloscopias, escojo las lminas nuevas PREVIAMENTE LAVADAS y dejadas en alcohol, las seco y las marco con los cuatro nmeros asignados al paciente le escribo 1,--2,--3 de acuerdo a si es la 1era, 2da, o 3era muestra Si la muestra es saliva extender una capa, dejar secar y volver a montar para que quede una capa ms gruesa, para realizar el extendido colocar el mechero entre las muestras a procesar y el operador, el extendido se realiza tomando la muestra ms til con escobilln astillado y en la parte superior izquierdo de la lmina la extiendo hacia abajo haciendo estras hasta la parte inferior; inicio nuevamente arriba tomando de la misma muestra que ya extend en la lmina y vuelvo a hacer la estra; as sucesivamente hasta el extremo derecho de la lmina teniendo cuidado de dejar 2 mm de distancia por todos los lados. La dejo secar en la gradilla, flameo una vez. El material utilizado lo descarto en recipiente con hipoclorito, y los mesones los limpio con hipoclorito

COLORACION DE BK
Tincin: fucsina fenicada Cubra la totalidad del extendido con fucsina fenicada, previamente filtrada, cada vez que se colorea se filtra de una vez Flamee suavemente con la llama de un mechero, pasndolo por debajo de los portaobjetos, hasta que se observe emisin de vapores, retire la llama y cuando estos desaparezca, flamee nuevamente hasta completar 10 minutos, evitando que hierva la fucsina, debido a que la pared de los bacilos pueden destruirse. Si ocurre evaporacin o derrame del colorante, agregue nuevamente la fucsina. Deje enfriar y lave con agua destilada suavemente y elimine el exceso de agua para evitar diluir el prximo reactivo a adicionar.

Decoloracin: alcohol acido al 3% Limpie la parte posterior del portaobjeto Cubra el extendido teido con alcohol-acido al 3% durante 1 minuto y lave suavemente con agua y limpie la parte posterior del portaobjeto. Si el extendido conserva el color rojo o rosado, vuelva a decolorar, las veces necesarias, con alcohol acido hasta que quede transparente. Lave con agua destilada y elimine el exceso de agua para evitar diluir el prximo reactivo a adicionar. Coloque sobre un soporte metlico los portaobjetos con los extendidos fijados hacia arriba, separados y con el nmero de identificacin orientado hacia el operador. Limpie la parte posterior del portaobjeto.

COLORANTE DE CONTRASTE: AZUL DE METILENO

Cubra el extendido ya decolorado, con azul de metileno previamente filtrado durante 2 minutos ( Se filtra cada vez que se colorea) Lave suavemente con agua destilada Limpie la parte posterior del portaobjeto para retirar residuos de colorante que pueden inferir con la lectura Deje secar a temperatura ambiente en posicin vertical.

CONTROL DE CALIDAD DE LA COLORACION

Realice el control de calidad una vez a la semana(Lunes) , haciendo extendidos, utilice un control positivo ( vacuna de TBC) y un control negativo( yogurt) registre en el formato para tal fin.

BCG

YOGURT

COLORACIN DE WRIGHT: Para cuadro hemtico manual, extendido de sangre perifrica, Recuento de plaquetas manual

Colocar la lmina con el extendido hacia arriba Cubrir la lmina con 1 ml de colorante de wright Aadir agua destilada gota a gota ms o menos la misma cantidad que se us de colorante. Mezclar el colorante con el diluyente, se sopla en varias partes de la lmina, despus de esto tiene que aparecer una pelcula verdosa de aspecto metlico (al agregar el Buffer hacerlo cuidadosamente para evitar que se corra por los bordes de la lmina).

Dejar actuar por 9 minutos dependiendode la casa comercial varia el tiempo, lo estipulado es 5 minutos, pero si el colorante est muy diluido hay que dejarlo ms tiempo. Para laminilla solo 5 minutos Lavar con agua corriente Retirar con gasa o algodn humedecido en alcohol el colorante que persista detrs de la lmina

COLORACIN DE FIELD (HEMOPARSITOS): Para muestras de malaria, leishmania

Sumergir durante 1 segundo(decir 101) la lmina en azul de Pre coloracin metileno fosfatado previamente filtrado, dejar escurrir sobre una toalla de papel, luego sumergir en solucin buffer 1 segundo(101) y dejar secar.
El colorante de Field debe estar recin preparado, se hace de la siguiente forma: Una gota de solucin A filtrada, ms una gota de solucin B filtrada en 3 ml de solucin amortiguada. Coloracin Colorear el portaobjetos invertido, es decir, con la muestra de sangre hacia abajo sobre la solucin acuosa de Field, dejar actuar el colorante por 9 minutos. Juague el colorante. Dejar secar la lmina inclinada.

PROTOCOLO DE LIMPIEZA Y DESINFECCION DE MATERIAL USADO y DE VIDRIO

1. El material de vidrio se colocar en una vasija apropiada con solucin de hipoclorito de sodio al 0,5 % por un tiempo mnimo de 30 minutos. 2. Luego de este perodo se efectuar el lavado del material 3. Se proceder a colocar en una vasija jabn liquido para lavado de material en una proporcin de 1 parte de jabn por 4 partes de agua, por ejemplo 40 mls de jabn por 160 mls de agua.

Preparacin de diluciones de Hipoclorito

Para DESINFECCIN GENERAL se usa a 1000 PPM

Para SUPERFICIES se usa a 5000 PPM

Para SALPICADURAS DE SANGRE se usa a 10.000 PPM

CALCULOS DILUCIONES
FORMULA PARA PREPARAR DILUCION SEGN LA CONCENTRACION EN QUE VENGA EL HIPOCLORITO V1 X C1 = V2 X C2 Preparar 1000 mls de hipoclorito al 0,1% o sea a 1000 PPM, si el hipoclorito comercial viene al 5% V1 X C1 = V2 X C2 V1 X 5% = 1000 MLS x 0,1% V1= 1000 MLS X 0,1 % = 20 MLS 5% Mido 20 mls de hipoclorito y lo disuelvo en 1000 mls de agua