2013

MITOSIS: INDICE DE FASES

GONDRA RAMOS, MANUEL TEJEDA LAVADO, CINTHIA LABORATORIO BIOLOGIA 13/11/2013

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PRCTICA N8 MITOSIS: ndice de fases I.- INTRODUCCION El ciclo celular es un proceso que consiste en la replicacin de material gentico y formacin de clulas hijas. Compromete dos etapas: La primera llamada interfase, donde no ocurre divisin celular propiamente dicha y la segunda de divisin celular. Dependiendo del tipo de clulas donde se lleve a cabo, la divisin celular toma el nombre de mitosis (si ocurre en clulas somticas) o meiosis (si ocurre en clulas germinales).

La mitosis es un proceso exacto que permite controlar la transmisin de los rasgos de la herencia de un ncleo a otro durante la divisin celular. Es un mecanismo que genera nuevas clulas y reemplaza las clulas daadas en los organismos multicelulares. La mitosis implica cuatro etapas: Profase, Metafase, Anafase y Telofase. En las dos primeras ocurre la condensacin y ordenamiento de los cromosomas y en las dos ltimas se lleva a cabo la distribucin de los cromosomas. El resultado final son dos clulas hijas diploides (2n).

II.-OBJETIVO Reconocer las distintas fases del ciclo celular en clulas meristemticas de la raz de Allium cepa cebolla. En este sistema, la poblacin celular est en equilibrio dinmico y los cromosomas son relativamente grandes. Las clulas presentan un nmero diploide 2n = 16.

III.- FUNDAMENTO TERICO: La mitosis es el proceso clave de la divisin celular. En ella, el material gentico previamente duplicado se organiza en cromosomas y se reparte equitativamente a las dos clulas hijas en formacin. La raz de la cebolla es un buen material para observar este proceso, puesto que en el meristemo apical las clulas se dividen a gran velocidad, lo que aumenta la probabilidad de detectar clulas en mitosis. Los cromosomas, como la mayora de los componentes celulares, son invisibles al

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microscopio si no les aplicamos una tincin especfica. La orcena, colorante morado que usaremos en este caso, est compuesta en realidad de dos componentes, que se aaden en momentos diferentes. La orcena A reblandece las membranas celulares y la orcena B completa el proceso de tincin del material cromosmico al adherirse a estas estructuras. MATERIALES

LA CEBOLLA Allium cepa, o cebolla, es una planta herbcea bienal (que vive 2 aos) de la familia de las amarilidceas . la cebolla presenta un sistema radicular(proviene de raz) formado por numerosas raicillas, de color blanquecino, poco profundas, que salen a partir del disco caulinar.

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MARCADOR

EQUIPO DE DISECCION

GANCHO DE MADERA

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MECHERO DE ALCOHOL

ORCENA ACTICA

LAMINILLAS

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PIPETA

HOJA DE BISTURI

GRADILLA

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LUNAS DE RELOJ

ACEITE DE INMERSION

PROCEDIMIENTO Con 5 das de anticipacin a la prctica preparar el cultivo de cebolla de la siguiente manera: En un vaso con agua colocar una cebolla mediana de tal manera que haga contacto la parte terminal de la cebolla con el agua y dejar en lugar semioscuro. El agua del envase debe ser cambiada cada 24 horas.

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Preparacin de la muestra:
- Disponer de gran nmero de races de cebolla, haciendo cortes de la parte terminal (aproximadamente de 0.5 cm) y depositar en una luna de reloj.

Fig 1

Fig.02 - Colorear con orcena actica por 10 minutos.

Fig.3
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- Luego calentar la muestra hasta que emanen vapores blanquecinos por 2 veces consecutivas con intervalos de enfriamiento. Evitar que la muestra se seque.

- Trasladar las races a diferentes portaobjetos, separar solo el pice (parte terminal de la raz) y agregar una gota de orcena y cubrir con el cubreobjeto.

FIG.5 - Apretar la muestra suavemente a fin de esparcir la muestra de forma homognea.

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FIG 06

FIG.07 - Secar el exceso de colorante con papel filtro y llevar al microscopio para su observacin a diferentes aumentos.

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IV. RESULTADOS

Durante la prctica, donde estudiamos clulas en proceso de mitosis en la raz de la cebolla hubo dificultades porque dejamos expuesto demasiado tiempo al calor (se quemo) la primera muestra se perdi encontramos todas las fases de replicacin anafase, telofase, metafase, profase y diacinesis logrando ver las diferentes formas en la que el ncleo y sus cromosomas se ven en este tipo de proceso celular. AL MICROSCOPIO ANAFASE IMAGEN AL 40OX

IMAGEN 01

ANAFASE Mientras se ha ido formando el huso acromtico, los cromosomas se han dividido en dos mitades o cromtidas, las dos cromtidas se separan, arrastradas por los filamentos tractores del huso acromtico y se dirigen a los dos polos de la clula, convertidos ya en cromosomas hijos.

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TELOFASE IMAGEN AL 40OX

IMAGEN 02

TELOFASE

Los cromosomas se sitan en cada polo, las fibras del huso se dispersan por el citoplasma, se inicia la formacin de las envolturas nucleares que rodearn a los dos ncleos hijos. Los cromosomas se tornan difusos, pues se empiezan a desenrollar. Aparece un nucleolo en cada polo, se inicia la citocinesis (divisin del citoplasma por la mitad), se forman dos clulas hijas.

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METAFASE

En etapa de metafase cada cromosoma se une a dos fibras del huso, provenientes cada una de un polo, y se alinean en el plano ecuatorial, es decir, en el centro de la clula
IMAGEN AL 40OX

IMAGEN 03

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PROFASE La clula parece ms esfrica y el citoplasma ms viscoso. Al comienzo de la profase los cordones de cromatina se enrollan lentamente y se condensan, aparecen los cromosomas.
Durante la profase los pares de centrolos empiezan a alejarse el uno del otro, y a medida que stos se separan aparecen entre ambos pares de centrolos las fibras del huso acromtico, consistentes en microtbulos y otras protenas. Los nuclolos dejan de ser visibles. La envoltura nuclear se disgrega. Al terminar la profase, los cromosomas se han condensado por completo, los pares de centrolos estn en extremos opuestos de la clula. El huso se ha formado por completo.

IMAGEN 04

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DISCUSIN DE RESULTADOS: En la mitosis, se llegaban a distinguir un poco los cromosomas tras el proceso de tincin que llevaron a cabo, posteriormente fijando con carmn actico el portaobjetos debido a que se observaban claramente todas las fases de la mitosis. Como se describi en los resultados y ya que se pusieron las observaciones e imgenes en orden del ciclo celular se puede observar cmo estas clulas se encontraban en continua divisin para su replicacin o divisin celular, cuya finalidad como se observ en las imgenes es el dar origen a dos clulas hijas con igual dotacin de cromosomas.

CONCLUSIN Durante esta prctica, se estudi e identificaron los principales cambios morfolgicos que se presentan durante la profase, metafase, anafase, telofase y citocinesis en clulas meristmaticas de races de cebolla Allium cepa (cebolla), por su simplicidad de manejo y el gran tamao de sus clulas. La preparacin present el aspecto de una dispersin de clulas por todo el campo que abarca el microscopio. Se observaron clulas en distintas fases o estados de divisin celular. Con esta tcnica de tincin se ven los cromosomas impregnados por el carmn actico en color rosado.

SUGERENCIAS Se recomienda realizar bien el procedimiento de tincin ya que es muy importante para lograr observar claramente las diversas fases de la mitosis. Tambin se sugiere tener cuidado en el momento de presionar el cubre objetos, ya que este se puede romper; o en todo caso podemos estropear nuestra muestra de raz de cebolla Usar mascarilla en el momento de realizar la coloracin, ya que el acido actico emite olores fuertes.

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Observar de cerca el ciclo completo de la divisin celular nos permiti explicarnos y corroborar cmo sucede el milagro natural que hace que de una clula se originen otras clulas. Nos permiti apreciar las diferencias entre el proceso de mitosis en las clulas somticas y meiosis en las clulas germinativas. Todos los seres vivos vivimos en un proceso interno y constante de transformacin y regeneracin celular, del que no somos testigos ni muy conscientes. Este maravilloso proceso de la naturaleza es lo que nos mantiene vivos y con energa suficiente para dejar nuestra propia huella sobre el planeta.

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CUESTIONARIO 1) Estn las clulas repartidas en forma homognea en el preparado que

usted ha realizado? Explique. S, para ello se apret ligeramente el cubreobjetos a fin de esparcir el contenido de la muestra de forma homognea. 2) Por qu es esencial que cada clula resultante de la mitosis reciba

exactamente la misma cantidad de material nuclear? Ya que la clula madre duplica su material gentico en la interfase como resultado de esto la clula queda con mayor nmero de cromosomas lista para la etapa de la mitosis en la cual la clula madre se divide por medio de la profase metafase anafase y telofase que permite que la clula logre dividirse generando as dos clulas hijas de exactamente igual nmero de cromosomas y tamao. 3) Por qu la mitosis se describe como un proceso de igual transmisin de

material nuclear? Explique mediante un esquema utilizando como modelo una clula animal con nmero diploide 2n=4. Considerar que el par I es metacntrico y el par II es telocntrico. Adems enfatizar los cambios en: cantidad de ADN, cantidad de cromosomas y cantidad de cromtides hermanas y homologas. 4) Qu tcnicas celulares se emplean para la observacin del huso

acromtico y sus cambios durante la mitosis? Qu drogas empleara para evitar su formacin o acelerar su despolimerizacin? Explique. Drogas que detienen o inhiben la divisin celular. La colchicina es un frmaco antimittico que detiene o inhibe la divisin

celular en metafase o en anafase. Es un compuesto evita la distribucin de las cromtidas de un cromosoma durante la mitosis, provocando la poliploida de la clula filial, ya que aunque no haya separacin, s hubo duplicacin previa del material gentico. Su efecto se debe a su accin sobre las protenas citoesquelticas del huso mittico denominadas tubulinas. Desorganizarse el huso, los cinetocoros de las cromtidas no tienen donde unirse y traccionar, lo cual ocasiona que los cromosomas no se distribuyan normalmente durante la divisin celular. De este modo, en presencia de colchicina la divisin celular se interrumpe o bien da origen a clulas que son inviables debido a su carga cromosmica anmala. FACULTAD DE MEDICINA Pgina 17

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Nocodazol es un anti- neoplsica agente que ejerce su efecto en las clulas

al interferir con la polimerizacin de microtbulos. Los microtbulos son un tipo de fibra que constituye el citoesqueleto, y la red de microtbulos dinmica tiene varias funciones importantes en la clula, incluyendo el transporte vesicular, formando el huso mittico y en la citocinesis. Varios frmacos, incluyendo vincristina y colcemida son similares a nocodazol en que interfieren con la polimerizacin de microtbulos. 5) Qu es el ndice interfsico y que es el ndice mittico? ndice mittico: Nmero de clulas por unidad (normalmente 1.000) que sufren mitosis durante un determinado periodo de tiempo. El cociente se utiliza principalmente como estimacin de la velocidad del crecimiento tisular. ndice interfsico: Si preparamos adecuadamente una muestra de tejido y observamos detenidamente a travs del microscopio veremos que algunas clulas estn en proceso de mitosis y otras clulas estn en proceso de interface. Al sacar el porcentaje de las clulas en mitosis y el de las clulas en interface obtendremos el ndice interfsico. 6) Qu es la cariocinesis y qu es la citocinesis?

Cariocinesis: La cariocinesis es la divisin del ncleo celular con reparto del material nuclear durante la mitosis y meiosis. Citocinesis: La citocinesis es el proceso de divisin del citoplasma entre las dos clulas hijas y que en la mayora de las clulas se inicia durante la telofase. En la clula animal ocurre por estrangulamiento iniciando con la formacin de anillos en el plano ecuatorial para luego contraerse hasta lograr que la clula progenitora se divida, mientras que en la clula vegetal ocurre a travs de la formacin de una placa celular que se forma en la placa ecuatorial a partir de vesculas que libera el aparato de Golgi y que posteriormente se fusionan unindose a la membrana celular original formando dos membranas celulares que sirven para separar las clulas hijas. FACULTAD DE MEDICINA Pgina 18

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7) Al comparar los ndices mitticos y de fases de sus compaeros. Qu

conclusiones puedo obtener? No pude obtener ninguna conclusin ya que el profesor no explic nada sobre ndice mittico, debido a que del total de las mesas de trabajo solo se encontraron clulas en fase mittica en una sola. BIBLIOGRAFA http://www.rena.edu.ve/cuartaEtapa/Biologia/Tema7.html http://www.infobiologia.net/2011/09/division-celular-mitosis-ycitocinesis.html. http://es.scribd.com/doc/38581055/12/OBSERVACION-DEMITOSIS-EN-RAIZ-DE-CEBOLLA http://www.unicartagena.edu.co/librose/LABORATORIO%20No%2 09.%20MITOSIS.pdf http://farmaciaulat.blogspot.com/p/mitosis-en-meristemasvegetal.html http://labiologiauniboyaca.blogspot.com/2012/05/resultadosmitosis.html

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