Capitolul 4

Procese biotehnologice la pregatirea lemnului

Principalele posibiliti de aplicare a proceselor biotehnologice la pregtirea lemnului n vederea prelucrrii sale n industria de celuloz i hrtie sunt prezentate n figura 1.

Figura 1 Principalele aplicaii ale biotehnologiilor la pregtirea lemnului

4.1. Decojirea enzimatic

Separarea cojii este prima etap n toate procesele de prelucrare a lemnului i necesit cantiti nsemnate de energie. ecojirea avansat este impus de necesitatea obinerii unor celuloze sau paste chimice i mecanice de nalt calitate! deoarece chiar n cantiti mici! coaja determin colorarea produsului finit. "n plus fa de consumul mare de energie cojirea complet conduce la pierderi de materie prim datorit trtamentului prelungit n cojitoare mecanice.

Figura 2 Structura e#terioar a lemnului

$rania dintre lemn i coaj este reprezentat de cambiu! un strat celular viu! care produce celule de #ilem ctre interiorul tulpinii i floem ctre e#terior %figura &'. (cest strat celular %cambiu' se caracterizeaz pintr)un coninut ridicat de pectine* lignina este prezent n cantiti mici sau poate lipsi. +oninutul de pectine n celulele de cambiu variaz ntre speciile de lemn! dar poate ajunge pn la ,- . din masa uscat. e asemenea! coninutul de substane pectice i hemiceluloze este mai mare n floem. Studiile efectuate au artat c enzimele specifice pentru hidroliza straturilor de floem i cambiu faciliteaz separarea cojii. S)a constat o legtur direct ntre activitatea poligalacturonazei din preparatul enzimatic i reducerea consumului de energie la decojire. "n plus fa de galacturonaz! comple#ul de enzime produs de Aspergillus niger conine de asemenea enzime pectinolitice i hemicelulazice. Pentru a realiza decojirea discurile de lemn sunt imersate n soluia de enzim care difuzeaz n

principal tangenial la grania dintre lemn i coaj. atele obinute evideaniaz reducerea consumului de enrgie la decojirea lemnului %tabelul 1'.
Tabelul 1 /nfluena tratamentului cu poligalacturonaz asupra consumului de energie

relativ la decojirea lemnului de molid (ctivitatea n1at2ml 34 165 715

0

poligalacturonazei0!

+onsum de energie relativ! . 1-45 ,5 &-

iscurile de lemn sunt nmuiate n soluia de enzim timp de &, ore la &- -+.

"n acelai timp! enzimele pectinolitice i hemicelulazice se pot utiliza pentru separarea fibrelor de liber din unele specii de lemn sau din plantele anuale %in! cnep' utilizate n industria te#til. /n acest fel se elimin principalul dezavantaj al 8topirii9 microbiologice a inului care este mirosul neplcut i poluarea efluenilor.

4.2. Utilizarea tratamentelor biologice pentru reducerea con inutului de substan e e!tractibile din tocatur
Substanele e#tractibile reprezint &)6 . din compoziia lemnului! funcie de vrsta i specia lemnoas i sunt reprezentate in principal de rini volatile %de tipul terebentinei' sau substane solide %acizi rezinici! esteri ai acizilor grai'. Prezena rinilor n pasta celulozic afecteaz att utilajele %colmateaz sitele i flanelele! rezervoarele de stocare a pastei de hrtie' ct i calitatea hrtiei! fapt pentru care ele trebuie indeprtate nc din primele etape de prelucrare a lemnului. :etoda tradiional de reducere a rinilor const n depozitarea n aer liber a materialului lemnos naintea delignificrii. urata de depozitare variaz ntre cteva luni %pentru buteni' i cteva sptamni %pentru achii'. (ceast metod este cea mai simpl deoarece substanele e#tractibile se descompun n timpul depozitrii! dar este ineficient deoarece necesit spaii mari de depozitare i! n acelai timp! apare o reducere a gradului de alb i a randamentului n celuloza ca urmare a deteriorrii

biologice. "n cazul fierberii sulfat compuii volatili sunt recuperai ca terebentin! iar acizii grai i grsimile sub forma srurilor de sodiu! care se regsesc n aa)numitul spun sulfatic! din care se recupereaz ca ulei de tal. Spre deosebire de fierberea sulfat! n cazul delignificrii prin procedeul sulfit acizii grai i rezinici nsoesc fibrele celulozice! iar terebentina se recupereaz ca 8terebentin sulfit9. Principalele substane e#tractibile care formeaz depozite de rin sunt trigliceridele! acizii rezinici i esterii lor. ;ratamentul biologic al achiilor de lemn cu microorganismul Ophiostoma piliferum reduce substanial concentraia rinilor de pe suprafaa tocturii! din canalele rezinifere i din celulele de parenchim radial. (stfel! dup 1)1& zile de tratament! coninutul de substane e#tractibile n diclormetan % +:' a sczut cu circa ,- . %tabel &'. :ajoritatea tulpinilor de Ophiostoma piliferum sunt de culoare bleu)albastru. +reterea fungiilor pigmentai pe achiile de lemn determin scderea gradului de alb i creterea necesarului de chimicale la nlbire atunci cnd achiile se utilizeaz pentru obinerea de paste termo)mecanice sau celuloz sulfit. <peraiile de selecie i purificare a microorganismelor au condus la izolarea i comercializarea unei tulpini care nu mai coloreaz lemnul.
Tabelul 2 /nfluena tratamentului cu <phiostoma piliferum asupra lemnului de

rinoase urata tratamentului! zile martor lemn netratat 1, lemn inoculat 1, martor lemn netratat 1& lemn inoculat 1& Substane +:! . &!= &!1!, &!, 1!4 1!3 e#tractibile n

laborator

n hald

(ctualmente! la nivel industrial se poate utiliza o tulpin oferit de firma +lariant sub denumirea de +artapip care se dezvolt pe toctura de lemn! n absena tratamentelor de sterilizare i a elementelor nutritive. (cest inocul se prezint sub form pulverulent i are o eficien deosebit! astfel nct 1&-- t achii de lemn se pot trata cu 1 1g de produs. Scderea coninutului de substane e#tractibile ca urmare a degradrii rainilor i

a esutului parenchimatic radial %sursa de hran pentru microorganisme' are loc simultan cu slbirea structural a materialului lemnos. (stfel! traheidele din lemn se individualizeaz la rafinare mai uor % sub aciune mecanic! cu un consum mai redus de energie'! ceea ce constituie un alt avantaj al tratamentului biologic. +a urmare a pstrrii integritii fibrelor intr)o msur ridicat! pasta fibroas introdus in compoziia hrtiei determin mbunirea propriettilor papetare ale acesteia. "n alte e#perimente! cultivarea microorganismului Ophiostoma piliferum a precedat delignificarea lemnului prin procedeele sulfat i sulfit. atele obinute au evideniat c pe lng creterea proprietilor de rezisten a hrtiilor care au fost obinute din lemn delignificat prin procedeele sulfat i sulfit i tratat biologic! are loc i scderea cifrei >appa! ca rezultat a penetraii mai rapide i mai uniforme a reactivilor. ?a nivel industrial! ca rezultat al tratamentului cu +artapip 74 pe lng ndeprtarea rinii s)a reuit meninerea gradului de alb a celulozei i mbunatirea eficienei mainii de hrtie %vezi tabelul 3'. Tabelul " @fectele tratamentului biologic212 cu +artapip asupra pastei mecanice Substane e#tractibile in diclormetan $rad de alb (daos de chimicale la nlbire /ndice de traciune /ndice de sfiere /ndice de plesnire ) 34!5 . A -!7 . ) 3=!7 . A 5!, . A 3!, . A 3!3 .

Pe baza studiilor efectuate s)au dezvoltat dou posibiliti de tratare a tocturii de lemn n vederea reducerii conimutului de rini %fig 3),'. Prima metod! bazat pe tratarea tocturii n hald prezint avantajul unor costuri reduse! dar parametrii procesului sunt greu de controlat. +ea de)a doua metod permite un control mai riguros al umiditii i temperaturii n bioreactor! dar implic creterea costurilor de producie% costuri pentru sterilizare aer i toctur! energie pentru aerare'.

Figura "

ecojirea enzimatic a tocturii de lemn n hald

Figura 4 ;ratarea enzimatic a achiilor de lemn in bioreactor

(lte microorganisme care pot afecta coninutul de rin din biomasa vegetala fac parte din familia basidomicetelor sau a mucegaiurilor. :ucegaiuri ca Penicillium roqueforti, P. funicolosum, Rhizoporus arrhizus si Trichoderma lignorum 2&2 degradeaz cerurile n medii lichide* reduc coninutul de substane e#tractibile! fapt ce se evideniaz dac lemnul este e#tras cu amestec alcool)benzen%1B&'. in categoria basidomicetelor! fungii putregaiului alb i brun colonizeaz intens lemnul. Cungii putregaiului brun degradeaz preferenial polizaharidele! inclusiv celuloza i determin scderea rapid a gradului de polimerizare! fr a afecta coninutul de lignin. (ciunea lor asupra polimerului aromatic se manifest prin

reaciile de demetilare i o#idare a gruprilor )<:e. Cungii putregaiului alb afecteaz toate componentele lemnului. +el mai eficient s)a dovedit a fi Phanerochaete chrysosporium care! cultivat pe lemn de stejar timp232 de 1& sptamni! a produs o scdere cu ,=. a coninutului de substane e#tractibile %n alcool)benzen %&B1''. "n cazul achiilor de pin galben2,2! dup & sptmni coninutul de substane e#tractibile n diclormetan a fost redus cu &1 .. (naliza rinilor din lemn prin cromatografie n faz gazoas a permis evidenierea urmtoarelor aspecteB componentele rinilor se pot separa n fraciuni polare i nepolare* lemnul proaspt conine mai muli compui nepolari! n special iarna* principalul component este reprezentat de trigliceride* 7= . din acizii grai care constituie trigliceridele sunt reprezentai de acidul oleic i acidul linoleic* trigliceridele sunt descompuse i reduse rapid n timpul depozitrii* depozitele de rini care influeneaz negativ procesul de formare a hrtiei conin de asemenea n principal trigliceride. (ceste rezultate conduc la concluzia c trigliceridele reprezint cheia rezolvrii problemelor determinate de prezena rinilor n biomasa vegetal. (stfel! microorganismul Ceriporiopsis subvermispora degradeaz apro#imativ 53 . din trigliceride n 1, zile %tabel ,'. Tabelul 4 /nfluena microorganismului +eriporiopsis subvermispora asupra coninutului de rini din lemn :artor -!3-!13 -!33 -!11 -!44 ?emn tratat cu C. subvermispora -!1, -!-, -!1, -!-1 -!,=

;rigliceride @steri ai sterolului (cizi grai liberi Steroli (cizi rezinici

"n asemenea condiii a aprut i o alt soluie legat de propunerea de utilizare a lipazelor! enzime hidrolitice a cror aciune se manifest la nivelul legturilor esterice din grsimi. ?ipazele hidrolizeaz grsimile%fig. 5'! fr a afecta mediul nconjurtor sau calitatea hrtiei. Figura # :ecanismul hidrolizei trigliceridelor sub aciunea lipazelor Dinile e#trase s)au tratat cu lipaze! determinndu)se adezivitatea la suprafeele hidrofobe. +apacitatea de formare a depozitelor de rini crete cu raportul compui

nepolari2compui polari. @ste evident o adezivitate mai bun la suprafee hidrofobe a componentei nepolare a rainilor i un rol esenial n formarea depozitelor. +a rezultat al hidrolizei trigliceridelor se reduce semnificativ cantitatea de rini252! eficiena procesului fiind influenat de agitare! care menine contactului ntre enzima i substrat%trigliceride'2=2. (stfel! la o amestecare intens! 3-- ppm ?ipase E2 1g pot hidroliza mai mult de 6- . din trigliceridele prezente n material n numai dou ore. e asemenea! tratamentul cu lipaze nu afecteaz gradul de alb i proprietile de rezisten ale hrtiei. Cirma Fovo Fordis1 comercializeaz produsul Desinase ;: care se recomand a fi utilizat la prepararea pastelor de hrtie care conin past mecanic sau chimico) mecanic. Preparatul enzimatic folosit ntr)o gam larg de temperatur% 5-)4- -+' i pG %5)6' i este compatibil cu pero#idul de hidrogen si ditionitul. Se lucreaz la consistene cuprinse ntre 3 i 15 .! durata tratamentului fiind 3-)16- minute. (plicarea la nivel industrial a tratamentelor biologice a demonstrat c viteza de ndeprtare a rinilor din lemn a fost mai mare n timpul iernii i a permis reducerea costurilor pentru depozitare i a chimicalelor folosite la nlbire. +ontrolul enzimatic al rinilor folosind lipazele consituie un alt e#emplu de utilizare cu succes a enzimelor la soluionarea problemelor care apar n industria de celuloz i hrtie. (stfel! s)a constat mbuntirea condiiilor de funcionare a mainii de hrtie datorit reducerii coninutului de depuneri! alturi de ameliorarea calitii produselor finite. ;ratarea deeurilor de coaj i rumegu +oaja este supus e#traciei alcaline! cnd se separ celolignina* polifenolii i hemicelulozele se pot utiliza ca bioregulatori de cretere! iar e#tractul alcalin poate fi folosit la sinteza rinilor formaldehidice sau a celor epo#idice! n industria prelucrrii lemnului la obinerea plcilor i a altor produse stratificate. +elolignina poate fi utilizat la realizarea de materiale compozite! ca materie prim n industria fermentativ %se pot obine alcooli sau drojdii'! ca substrat pentru cultivarea ciupercilor sau ca agent de consolidare i fertilizare a solului. eeurile de coaj i rumegu pot fi utilizate la obinerea celulozei bacteriale! care se caracterizeaz printr)o rezisten foarte ridicat. a nivelul membranei lipo)proteice a bacteriei Acetobacter ylinum se e#trud catenele de celuloz %fig.=' care se organizeaz sub forma unor microfibrile cu structur cristalin n care s)a identificat celuloza /* n acelai timp! au fost remarcate i forme polimorfe %celuloza //'.

Figura $ (spectul fibrelor de celuloz

Figura % (spectul fibrelor de celuloz

bacterial

bacterial modificat

nt)un mediu de cultur

Cibrilele individuale! cu o grosime de = nm se organizeaz sub form de panglic. +ondiiile de cultur se introduc afecteaz procesul de asamblare a moleculelor la diferite nivele242.(stfel! dac n mediul de cultur se introduce un agent de nlbire fluorescent %calcofluor' microfibrilele de celuloz%fig.4' sunt formate din cristalite de celuloz cu dimensiuni mai mici dect cele caracteristice celulozei biosintetizate n mediul de cultur normal. ac n mediul de cultur se introduc cantiti reduse de hemiceluloze! are loc un fenomen de agregare a moleculelor de celuloz! similar celui din plantele superioare. Studiile 13 + D:F au relevat c n acest caz predomin forma /26)72. (vantajele produsului rezultat sunt multipleB se obine un material celulozic care nu necesit delignificarea* materialul obinut are hidrofilie mare! deci se poate utiliza ca superabsorbant* se pot obine microesturi care au stabilitate foarte ridicat. ;otodat! procesul are loc sub aciunea anor bacterii care prezint vitez ridicat de multiplicare %3- minute pentru dublarea masei celulare' i se pot utiliza substraturi tip hidrat de carbon relativ ieftine %deuri sau hidrolizate'. Singura problem este cea referitoare la costul ridicat %1=- H21g'! care se datoreaz n principal instabilitii fenotipului care nu mai prezint elemente caracteristice genotipului i obinerii unor cantiti nsemnate de acid gluconic. "n acelai timp! transferul de mas se realizeaz greu n culturile de suprafa. (ceste probleme au fost rezolvate prin selecionarea unor mutani care)i pstreaz stabilitatea n condiiile de lucru date i care produc cantiti reduse de acig gluconic. (ceti mutani pot fi cultivaii n bioreactoare prevzute cu sistem de agitare

10

%bioreactoare cu circulaie intern i cu circulaie sub presiune'.

<G < <G HO < <G

<G celobiaza mediu de acrilonitril celuloza sintetica < F <G

<G

+eluloza microbial are o comportare similar bumbacului* se poate utiliza sub form de esut tip piele arificial pentru diverse implanturi medicale! ca membran pentru desalinizarea apei de mare sau n calitate de material compozit la construcia unor nave maritime sau aerospaiale. Cibrele au o rezisten comparabil cu a celor >evlar. Pornind de la un derivat fluorurat al celobiozei s)a ajuns la sinteza celulozei in vitro. (stfel! n prezena celobiazei n mediu de acrilonitril are loc reacia de transglicozilareB

Eibliografie ;.+hen! I.Jang! K.$av! +.Ereuil! L.M.Gattan! Appita,,4!,=3%177,' D.?.Carell! >.Gata and :.E.Gall! in 8(dvances in Eiochemical @ngineering) EiotechnologN)vol. 54%1774'! Springer Merlag! p.&-+.S.?inn and F.S.+hao! Tappi !."#orea$! &&! 3&%177-' D.?.Carell!D.(.Elanchette! ;.S.Erush! K.Gadar! S./vanson! >. >risa! P.(.Jendler and J.Iimmerman! !. %ioechnol., 3-! 115%1773' K.Cujita and >.Gata! Tappi !.,4,! 55 %1771' K.Cujita and >.Gata! Tappi !.,45! 11& %177&' +.G.Gaigler! in EiosNnthesis and biodegradation of cellulose! eds. +.G.Gaigler and P.L.Jeiner! :arcel e11er! FeO Kor1! p.77! 1771 >./.Phlin! D.G.(talla and F.S.;homson! Cellulose! &! 1&7%1775' L.:.Gac1leN! D.G.(talla and .?.ManderGart! &nt. ! %iol 'acrom.! 1=! &15 %177,'

11