Sunteți pe pagina 1din 36

VARIABILITATEA EREDITAR

VARIABILITATEA GENETIC probleme:


1. Variabilitatea: definiie i surse 2. Mutaiile genice: 2.1. Substituiile nucleotidice 2.2. Deleiile si inseriile nucleotidice mici 2.3. Recombinri omoloage nealelice 2.4. Expansiunea instabil a repetiiilor trinucleotidice 2.5. Corelaii dintre genotip i fenotip 3. Mutaiile cromosomice i genomice

1. VARIABILITATEA GENETIC: definiie i surse


Variabilitatea genetic = ansamblul de fenomene care produc diferenele genetice - ntre indivizii unei populaii, - ntre populaii diferite
DIVERSITATE

EVOLUIE

Sursele de variabilitate:
1.1. Recombinrile genetice, 1.2. Mutaiile, 1.3. Migraiile.
3

1.1. Recombinrile genetice (RG)


RG = producerea unor combinaii genetice noi

(recombinani), prin rearanjarea materialului genetic cuprins n dou uniti genetice diferite.
RG presupune: asociere intim + interaciune / schimb egal RG = proces natural (normal) * cea mai mare surs de variabilitate.

RG: genomice, cromozomice, genice

R. genomic:

- n fecundare unirea genomuri gamei

R. cromozomial
- n gametogenez - R. intercromozomial (anafaza I) = asortarea independent a crz.omologi 223 combinaii posibile gamet cu structur genetic unic. - R. intracromozomial (profaz I) = CO egal

R. intragenic
CO egal ntre dou gene gen hibrid (fuziune genic)

1. 2. Mutaiile
Mutaiile: modificri n secvena sau aranjarea nucleotidelor (secvenelor) din ADN Nenaturale, permanente (), ereditare Consecine:
fr efect, variaii fenotipice normale, boal.

Clasificarea mutaiilor criterii:


Mrimea materialului genetic: M. genice (10-6/locus) M. cromozomiale (anom. structur) (10-6/diviz. cel) M. genomice (anom. numr) (10-2/diviz. cel)
Cauz: M. Spontane (majoritatea) erori de replicare a ADN erori de recombinare (CO inegal) erori de distribuie (nedisjuncie) M. induse de ag.mutageni Consecine fenotipice
M. germinale:
M. patogene M. neutre M. benefice

Tipul de celul afectat: M. germinale ereditare M. somatice clone an. ne-ereditare

M. somatice clone cancer, mbtrnire


7

COMENTARII:

(1). Mutaiile n special cele genomice sunt frecvente. M. germinale = 3% nn


Mutaiile sunt o cauz major de boal sau de predispoziie la mbolnvire

COMENTARII:

(2). M. somatice, produse prin erori de replicare, se acumuleaz cu vrsta efecte la vrsta a III-a (50.000/genom/zi corecie erori una la fiecare replicare genom x 1015 diviziuni cteva mii) (3). Mutaiile spontane = mai frecvente ca cele induse.

COMENTARII: (4). Mutaiile induse: ageni mutageni exogeni:


- fizici (radiaiile UV, ionizante) efecte relativ mici; - chimici (ag. alchilani / metilani etc., ce polueaz atmosfera / alimente efecte relativ grave !!!); fumul de igar cel mai important agent mutagen exogen - biologici (virusuri)

ageni mutageni endogeni:


produi oxidani (10.000 leziuni /genom /zi) sisteme antioxidante + mecanisme de reparare + antioxidani exogeni.
10

1.3. Migraiile
Migraii = transferul de gene prin deplasarea i ncruciarea unui grup de indivizi dintr-o populaie n alt populaie genetic diferit.

Surs important de variabilitate i vigoare hibrid (heterozis)


11

2. MUTAIILE GENICE

MUTAIILE GENICE: definiie i clasificare MG = modificri ale secvenei nucleotidice sau aranjrii ADN unei gene variante alelice

gena N

m1 m2 m3

12

Clasificarea mutaiilor genice

dup mecanism:
modificarea secvenei N: substituii = nlocuirea unei perechi de baze (pb). deleii = pierderea unei/unor pb inserii= introducerea unei/unor pb modificarea aranjrii N: recombinri omoloage nealelice deleie / duplicaie segmente ADN amplificarea repetiiilor trinucleotidice

A T

13

Clasificarea mutaiilor genice

dup dinamica:
M. stabile / fixe M. instabile / dinamice!

dup secvenele genice implicate:


exoni, introni secvene reglatoare
14

2.1. SUBSTITUIA NUCLEOTIDIC

Substituie = nlocuirea unui singur nucleotid (i deci a unei pb) = mutaie punctiform. S = cel mai frecvent tip de mutaie ntlnit la om.

15

a).Substituia nucleotidic: localizare intragenic


n EXONI: a). Codon sens (1) codon sens sinonim protein N (silent m.) ARNm (2) alt codon sens AA1 AA2 AAA AAG GAA UAA protein An (missens m.) (3) codon nonsens prematur protein An scurtat (instabil) Pr (non-sens m.) ..liz... ...liz... ..glu.. ..STOP.. b). Codon nonsens codon sens protein An alungit alt codon nonsens protein N
16

ADN

N (1) (2) (3) TTT TTC CTT ATT

Substituia nucleotidic: localizare intragenic

n INTRONI: Anulare situsuri de decupare: (splice site mutations) 5GT---------AG3 absena matisrii includerea intron n ARNm instabil

ADN

matisare

X Exon 1 GA-----------AG Exon 2 ARNm instabil


Exon 1 Intron Exon 2

Pr

---------------------

17

Substituia nucleotidic: localizare intragenic

n SECVENELE DE REGLARE

reg 5 - promotor
modificri cantitative ale sintezei proteinelor reg 3 anomalii de poliadenilare ARNm instabil

18

b). Mecanismele posibile de producere a substituiilor

(1). erori de replicare a ADN, datorit mperecherii


greite (mismatch) a nucleotidelor n catena nou sintetizat.

19

Mecanismele posibile de producere a substituiilor

(2). leziuni provocate n ADN de factori mutageni, exogeni sau endogeni, (fizici sau chimici ) - dezaminare,
- depurinare, - demetilare

20

c). Mecanismele reparare a leziunilor ADN


Erorile de mperechere au o frecven mare, de
~1:10.000 (10-4). Rata mutaiilor este meninut la un nivel sczut (10-10) prin intervenia unor mecanisme de recunoatere i reparare a leziunilor (controlul calitii ADN). Aciunea lor este cuplat cu mecanismele de control a progresiei prin ciclul celular i cu apoptoza. G1 Go reparare G1 sau apoptoz NU au o eficien absolut; n final, se produce o mutaie nou la fiecare replicare / diviziune celular. 21

Mecanismele reparare a leziunilor ADN

Tipuri mecanisme reparare (R):


R. erorilor de mperechere a nucleotidelor din cursul replicrii (mismatch repair = MMR) R. bazelor /nucleotidelor modificate dup replicare: excizie a bazelor (BER) excizia nucleotidelor (NER) R. rupturilor ADN (sistemul HR)

22

Mecanismele reparare a leziunilor ADN

Mecanismele de reparare (MMR, BER, NER) difer prin inta lor dar modul de aciune este asemntor (implicnd multiple gene i enzime mutator); Etape:
recunoaterea leziunii ADN, excizia fragmentului de ADNmodificat (endonucleaz) ndeprtarea i degradarea fragmentului (exonucleaz) refacerea secvenei normale (ADNpolimeraza)=reparare legarea ei la caten (ligaza)

23

Mecanismele reparare a leziunilor ADN

Mutaiile genelor ce codific enzime de reparare acumulare rapid mutaii creterea susceptibilitii la cancer
Ex.1, mutaiile genelor implicate n calea MMR cancerul colorectal non-polipozic ereditar (HNPCC) = 5% din cancere de colon
Caracteristici: apar sub 45-50 ani; loclizare proximal de unghiul splenic; cancere mucinoase; instabilitatea microsateliilor

Ex.2., mutaiile genelor implicat n calea HR cancerul de sn ereditar (genele BRCA1, BRCA2); Ataxia telangiectazia

24

2.2. DELEII I INSERII MICI


Del /Ins - care NU sunt multiplu de 3 nucleotide decalarea (defazarea) cadrului de lectur al genei (m. frameshift) schimbarea secvenei AA n aval de del/ins

Del /Ins a 3 nucleotide / multiplu de 3 1-n aminoacizi 25

Mecanismul de producere a deleii /inserii: glisare / derapare replicativ

Secvenele repetate din catena nousintetizat se aliniaz greit (gliseaz nainte sau napoi) fa de secvenele complementare ale catenei matri

determinat de mperecherea decalat a unor secvene repetate


Acest mecanism explic polimorfismul minisateliilor i expansiunea repetiiilor trinucleotidice

2.3. RECOMBINAREA GENIC ABERANT (recombinare omoloag nealelic)

Are loc n profaza meiozei I: - mperecherea (sinapsa) greit ntre regiuni omoloage (secvene de ADN identice sau cvasiidentice; ex., R1 ~ R2) dar nealelice; - CO schimb inegal ntre crz. omologi deleii, duplicaii, inversii a unor segmente mari

27

Recombinarea omoloag nealelic (RON) RON se produce datorit arhitecturii genomului uman Conine numeroase regiunile omoloage (~identice):
duplicaii segmentare (5-10% din genom); secvene repetitive mici (numr mic de repetiii identice)

situate n anumite segmente ale cromozomilor (la/lng centromer sau telomere); RON determin deleii, duplicaii, inversii ADN BOLI GENOMICE (deosebite de bolile cauzate de alterarea secvenei genice)

28

Bolile genomice Descrise recent (Lupski, 2002) Frecvente (10-4) n funcie de mrimea segmentului implicat (si deci nr de gene) : boli mendeliene (NF1) sdr. cu microdeleii (sdr. VCF) rearanjamente cromozomiale mari (inversii,
izocromozomi).

29

2.4. EXPANSIUNEA INSTABIL A REPETIIILOR TRINUCLEOTIDICE

Tip nou de mutaii instabile sau dinamice diferit de mutaiile clasice= permanente i stabile Se produc n genomul uman n regiuni cu repetiii trinucleotidice:
dispuse n tandem: CGG CGG CGG polimorfice (ntr-un numr diferit la persoanele normale); ex CGG = 6-50 repetiii. situate n diferite segmente ale genei (promotor; exoni; introni); ex. CGG n regiune promotor a genei FMR1 (Xq27.3 n situsul fragil FRAXA) inerte funcional (CGG=6-50 fenotip normal) instabilitate intergeneraional (meiotic)

30

Expansiunea instabil a repetiiilor trinucleotidice

instabilitatea intergeneraional (meiotic):


Pe msur ce gena trece prin meioz de la o generaie la alta nr. repetiiilor trinucleotidice crete progresiv dar moderat;
se produce o premutaie (pt CGG = 60-200 repetiii) normal mecanism: glisare sau derapare replicativ

Cnd se ajunge la un prag critic (ex. pt CGG = 230 repetiii) blocarea expresiei genei mutaie boal boli prin mutaii dinamice (expansiunea trinucleotidelor):
Sdr. X fragil (prin expansiunea CGG) retard mintal legat de X Boala Huntington (prin expansiunea CAG) boal neurologic degenetaiv Distrofia miotonic (prin expansiunea CTG) afeciune neuromuscular
31

Sindromul X fragil Inciden 1/4.000 de nou-nscui de sex masculin. Tip de transmitere recesiv legat de cromosomul X. Genetic mutaia genei FMR1, localizat Xq27.3, se caracterizeaz prin amplificarea unei secvene trinucleotidice CGG, existent n regiunea netranslat 5 a genei. n mod normal exist mai puin de 60 de repetiii CGG; n cursul ovogenezei printr-o aliniere eronat a secvenelor CGG se poate produce creterea numrului de repetiii la mai mult de 200 de secvene, cu apariia bolii la descendeni. Patogenie: n cazul prezenei unei amplificri trinucleotidice de 60-200, persoana are o premutaie, existnd un risc crescut de a avea descendeni anormali; prezena a mai mult de 200 de repetiii trinucleotidice determin hipermetilarea citozinei la nivelul regiunii promotor a genei, ceea ce duce la pierderea funciei genei; hipermetilarea citozinei modific replicarea regiunii respective i condensarea cromatinei ceea ce este corelat cu apariia situsului fragil caracteristic (figura), evideniat prin cultivarea limfocitelor n mediu srac n acid folic sau prin introducerea n mediu de cultur a metotrexatului este prezent fenomenul de anticipaie, corelat cu creterea numrului de repetiii CGG n cursul ovogenezei; Diagnostic clinic fenotipul caracteristic sindromului X-fragil apare la brbaii aduli i const n dismorfie facial (fa alungit, cu prognatism i urechi mari, proeminete) macroorhidie i retard mental moderat cu tulburri de comportament. La copil afeciunea este sugerat de ntrzierea apariiei limbajului, hiperactivitate cu deficit de atenie sau comportament de tip autist. Diagnostic paraclinic evidenierea prin PCR a numrului de repetiii CAG la descendenii unui individ afectat; evidenierea situsului X fragil prin tehnici citogenetice clasice. Prognostic retard mental mediu. Tratament nu exist tratament specific.

32

Boli prin mutaii dinamice caracteristici:

Expansiunea crete n succesiunea generaiilor boala apare mai precoce i este mai grav (anticipaie)

Intensitatea /gravitatea manifestrii bolii depinde uneori de sexul printelui; mama n sdr. X fragil; tatl n boala Huntington

33

2.6. EFECTELE FENOTIPICE ALE MUTAIILOR GENICE PATOGENE


1.
2.

3.

4.

Pierderea (total/parial) a funciei(activitii) genei - n majoritatea bolilor recesive (bolnavii = homozigoi) Ctigul de funcie - creterea nivelului de expresie a proteinei - ex., activarea permanent a unui receptor n absena ligandului Achiziia unor proprieti noi a proteinei mutante - ex., deficit n alfa-1 antitripsin varianta 1 AT Pittsburg nu mai acioneaz ca o anti- elastaz ci ca un inhibitor al coagulrii. Expresia inadecvat a genei ca timp i loc - ex., persistena ereditar a Hb fetale - oncogenele
34

Corelaii dintre genotip i fenotip


o gen o boal
n unele boli (ex., sicklemia) mutaia este unic la toi bolnavii manifestare identic a bolii; n alte boli bolnavii au mutaii diferite n aceeai gen graviti dfierite.

o gen mai multe boli


Mutaii diferite n gena RET b. Hirschprung (megacolon congenital); cancer ereditar tiroid + suprarenale (sdr. MEN) Mutaii diferite a genei beta-globin sicklemia (AR); betatalasmia (AR); methemoglobinopatia (AD)

mai multe gene o boal


B. Hirschprung mutaii gene RET sau ECE1 sau EDN3
35

Mutaiile genice cauz major de boal sau de predispoziie la mbolnvire

36

S-ar putea să vă placă și