FERMENTATIA DE REGIM

procesul de cretere a microorganismelor pe medii de cultur cu scopul obinerii unor produse de biosintez, denumii metabolii - primari - compui intermediari sau finali ai unor cicluri metabolice care, de regul, intr n compoziia biomacromoleculelor eseniale sau ai coenzimelor, adic sunt elemente constitutive ale substanelor celulare i - secundari compui care nu au rol n dezvoltarea biomasei, n schimb au o importan deosebit n alimentaie i n starea de sntate uman. creterea microorganismelor este rezultatul interaciunii dintre celula individual i mediul de cultur.

Fermentaii discontinue
-

culturi n sisteme nchise, care conin o cantitate limitat de nutrieni (substrat). dup inoculare, cultura va trece printr-un numr de faze de cretere celular.
ln (conc.biomas) I II III IV

timp

I faz de lag, sau faz de cretere staionar, considerat ca faz de acomodare a microorgnismelor la condiiile din fermentator; II faza de cretere logaritmic (exponenial) descris de ecuaia:

dx = x d
x - concentraia de biomas, - timpul, h, - viteza specific de cretere, h-1, pentru = 0 si x = x0 se obtine:

x = ln x0

ln x = ln x0 +

x = x0 e

panta segmentului de cretere exponenial reprezint viteza maxim de cretere pentru condiiile date; valoarea acesteia depinde de natura microorganismului;

Microorganismul Methylomonas methanolytica Aspergillus nidulans Penicillium crysogenum

max, h-1 0.53 0.36 0.12

- scderea vitezei de cretere poate fi rezultatul:

- scderii concentraiei de nutrieni din mediu, sau - acumulrii unor substane cu aciune inhibatoare.

III faza de descretere (retardare) datorat consumrii substratului, care poate fi descris printr-o relaie dintre i substana limitativ de cretere rezidual:

max c S
K S + cS

cS - concentraia rezidual a substratului limitativ; KS constanta de utilizare a substratului. KS numeric este egal cu valoarea concentraiei substratului pentru care = max i reprezint o msur a afinitii microorganismului pentru substrat. KS are valoare mic - microorganismul are o afinitate foarte mare pentru substratul limitativ, viteza de cretere nu va fi afectat pn cnd concentraia substratului nu va scdea la valori foarte mici; acest lucru determin o durat mic pentru faza de retardare; KS are valoare mare - microorganismul are o afinitate mic pentru substrat, viteza de cretere va fi afectat chiar i la valori relativ ridicate ale concentraiei substratului limitativ, iar perioada de descretere (retardare) a vitezei va fi lung. Concentratia de biomasa va fi descrisa de ecuatia Monod:

max c S dx = x d K S + c S

Microorganism Escherichia coli Saccharomyces cerevisiae Pseudomonas sp.

Substrat limitativ glucoz glucoz metanol

KS, mg/l 6.810-2 25.0 0.7

Obinerea metaboliilor primari, care se realizeaz n faza de cretere exponenial, este controlat de viteza de cretere celular i poate fi descris de relaia:

q p = Yp
S

qp viteza de formare metabolit;

Y p - randamentul de produs raportat la substratul consumat

S

IV faza staionar, care, n culturile discontinue, corespunde punctului n care viteza de cretere devine nul. n aceast etap, din punct de vedere fiziologic, microorganismele au nc metabolismul activ; aceast faz este cea n care se produc metaboliii secundari.

Culturile discontinue se folosesc pentru obinerea de: biomas, caz n care condiiile de cultur trebuie astfel alese nct s asigure o concentraie celular maxim. (ex. obinerea drojdiei de panificaie, a drojdiei de bere, a biomaselor proteice); metabolii primari, pentru care etapa de cretere exponenial trebuie extins (ex. obinerea de acizi organici citric, lactic, de aminoacizi); metabolii secundari n acest caz condiiile de cultur trebuie s conduc la o etap scurt de cretere exponenial i o perioad staionar lung.

Fermentaii continue
Avantajele fermentaiilor continue sunt: reducerea timpilor mori necesari pentru curire, umplere, golire, sterilizare, rcire; reducerea volumului fermentatoarelor; posibilitatea automatizrii; utilizarea mai eficient a substratului i obinerea unor randamente mai mari de produs. Fermentaiile continue se pot realiza n sisteme: - omogene, cnd masa din interiorul fermentatorului are o compoziie uniform (amestecare perfect), sau - eterogene cnd compoziia mediului variaz n lungimea fermentatorului (cazul bioreactoarelor tubulare, considerate cu deplasare total); - deschise cnd microorganismele prsesc zona de fermentaie n mod continuu, o dat cu efluentul i - nchise, cnd masa celular este reinut n zona de fermentaie, efluentul fiind lipsit de biomas. - sunt recomandate la viteze mari de cretere a microorganismelor.

Se definete noiunea de vitez de diluie, D, pentru cazul n care debitele de evacuare, respectiv de alimentare sunt astfel reglate nct se ajunge la o producie constant de celule (se atinge starea staionar - formarea de biomas nou compenseaz celulele evacuate din reactor): F debit volumetric de F alimentare, respectiv evacuare D= V V volumul bioreactorului Modificarea net a concentraiei de celule n timp (acumularea) poate fi scris ca:

dx = crestere evacuare = x D x = x( D ) d
n condiii staionare, concentraia de celule este constant, adic dx/d = 0 i deci x = Dx adic =D, ceea ce indic faptul c, n condiii staionare, viteza specific de cretere este controlat de viteza de diluie.

In conditii stationare, concentratia medie de biomasa, respectiv de substrat limitativ pot fi descrise de relatiile:

x = Yx / S c S 0 c S

KS D cS = max D

care exprim mecanismul prin care viteza de diluie, D, controleaz viteza de cretere, . Pentru D , max = Dcrit. Creterea celular determin o scdere a substratului limitativ pn la o valoare la care concentraia substratului va favoriza o vitez de cretere egal cu cea de diluie (=D). Dac concentraia substratului scade sub aceast valoare, celulele vor fi evacuate cu o vitez mai mare dect sunt produse (D > ), determinnd o scdere a concentraiei celulare; ca urmare concentraia de substrat limitativ va crete (neavnd cine s-l consume), determinnd o cretere a vitezei de generare de celule i bilanul (echilibrul) se va restabili. Acest tip de sistem continuu se definete ca un sistem chemostat, deoarece viteza de cretere este controlat de mediul chimic, adic de concentraia substratului limitativ.

Caracteristicile cinetice ale unui microorganism sunt descrise de valorile numerice ale constantelor Y, max i KS. - valoarea lui Y determin concentraia staionar de biomas, -max care este egal cu Dcrit definete viteza maxim de diluie care poate fi utilizat n condiii staionare, iar -KS determin concentraia rezidual a substratului (indirect concentraia de biomas) i viteza maxim de diluie ce poate fi aplicat.

A, A* - microorganism cu KS mare; B, B* - microorganism cu KS mic;

Pentru valori mici ale KS (afinitate mare fata de substrat) creterea vitezei de diluie are ca efect o cretere foarte lent a concentraiei reziduale de substrat limitativ pn cnd atinge valoare D = max = Dcrit, dup care creterea devine semnificativ. n cazul unei bacterii cu afinitate mic pentru substrat (valoare mare KS), creterea diluiei conduce la o cretere semnificativ a concentraiei substratului limitativ. Viteza de diluie la care x devine nul (celulele au fost evacuate n totalitate) poart denumirea de vitez critic de diluie, Dcrit i poate fi descris de ecuaia: c

Dcrit =

max

S0

K S + cS 0

Valoarea vitezei critice de diluie, Dcrit este determinat de valoarea vitezei maxime de cretere, max , a valorii KS i a variabilei cS0 , cu ct aceasta are o valoare mai mare Dcrit se apropie de max. ntr-o cultur chemostat simpl, max nu se atinge, deoarece ntotdeauna predomin condiiile de substrat limitativ.

Productivitatea culturilor poate fi exprimat ca raport dintre cantitatea de biomas i timpul de fermentaie. Productivitatea unei culturi discontinue se poate scrie ca fiind:

Pdisc

x max x0 = 1 + 2

Pentru o cultur continu productivitatea se exprim cu relaia:

P - productivitatea, adic concentraia celular/h, xmax - concentraia celular maxim atins n stare staionar, x0 - concentraia celular iniial, 1 timpul n care are loc creterea cu vitez maxim, 2 timpul de cretere cu o vitez diferit de cea maxim, care include faza de lag, faza de retardare, respectiv fazele de amestecare, sterilizare, golire.

Pcont

3 = D x 1 T

3 timpul necesar atingerii strii staionare i include pregtirea fermentatorului, sterilizarea i fazele discontinue care preced operarea continu, T - reprezint timpul de meninere a strii staionare.

Productivitatea maxim de biomas se obine pentru o diluie care conduce la o valoare maxim a produsului Dx.

FACTORII CARE INFLUENEAZ VITEZA PROCESELOR DE FERMENTAIE

Metaboliii sunt rezultatul reaciilor enzimatice din cadrul diferitelor ci metabolice. Viteza reaciilor enzimatice, ca i viteza reaciilor chimice, este influenat de o serie de factori, dintre care cei mai importani sunt: compoziia mediului de cultur i concentraia substratului limitativ; temperatura i pH-ul mediului; concentraia oxigenului dizolvat; intensitatea amestecrii. Cunoaterea modului de acionare (cu alte cuvinte efectul acestor factori) asupra reaciilor enzimatice permite stabilirea condiiilor optime pentru desfurarea procesului fermentativ. O caracteristic important a proceselor fermentative const n faptul c modificarea unui singur parametru atrage dup sine modificarea celorlali, putnd avea o influen profund asupra desfurrii procesului.

Influena concentraiei substratului limitativ i compoziia mediului de cultur

Influena concentraiei substratului limitativ asupra vitezei de cretere este redat de ecuaia: C

max

K S + CS

Funcie de concentraia substratului limitativ se pot deosebi trei cazuri: concentraia substratului limitativ, n mediu sau celul, este foarte mare comparativ cu constanta de asimilare a substratului, adic , ceea ce CS K S are ca efect egalitatea dintre viteza specific de cretere i viteza maxim, egalitate care se menine pn cnd are loc o scdere drastic a concentraiei substratului limitativ; concentraia substratului limitativ are valori comparabile cu valoarea constantei de asimilare a substratului, adic C K = max
S S

concentraia substratului limitativ este foarte mic, proporional cu concentraia substratului limitativ,

viteza procesului fiind

C S K S

max
KS

CS

Modul de furnizare a substratului limitativ influeneaz, la rndul su concentraia de metabolit

-la adugarea continu de substrat se evit ocul provocat de adugarea n trepte, oc datorat inhibiiei de substrat. Alegerea variantei de adugare continu presupune folosirea unui biosenzor adecvat, care s furnizeze informaii referitoare la concentraia substratului limitativ din mediul de fermentaie, n scopul meninerii acestuia n limitele prescrise. Alti factori care in de compoziia substratului sunt: - electroliii din mediu, care regleaz permeabilitatea membranei celulare; - natura sursei de carbon, concentraia componenilor mediului de cultur, care influeneaz viteza de cretere, de respiraie , respectiv de producere de metabolit; -- precursorii care orienteaz biosinteza spre un anumit produs.

Influena temperaturii
- influeneaz puternic activitatea microorganismelor i a enzimelor implicate, iar modificrile vitezei de reacie au loc ntr-un interval limitat de temperaturi. Viteza reaciilor enzimatice se poate dubla la o diferen de temperatur de 100C, cu condiia ca n acest interval enzima catalizatoare s nu se dezactiveze. Reaciile biochimice au o temperatur optim, corespunztoare activitii enzimatice maxime, temperatur care difer funcie de natura enzimei,

Existena unei temperaturi optime este rezultatul a dou procese contrare, dar care se produc simultan cu creterea temperaturii, i anume: - creterea vitezei reaciei biochimice, prin creterea valorii constantei de vitez, k i - creterea vitezei de inactivare termic a enzimei, datorit denaturrii proteinelor, a apoenzimelor ce intr n componena enzimelor. Temperatura optim a reaciilor biochimice depinde de natura enzimelor care catalizeaz reacia i poate depinde i de etapa procesului biochimic.

Denumire antibiotic Penicilin Streptomicin Rifamicin

Microrganism productor Penicillium notatum Streptomices griseus Streptomices rifamyces

Temperatura optim,0C 26 25 19

Temperatura de inactivare, 0C 30 30 27

Temperaturi de lucru situate sub valoarea optim pot conduce la o pierdere reversibil a activitii enzimatice, n timp ce temperaturile superioare induc un proces ireversibil prin denaturarea proteinelor ce intr n componena enzimelor.

Influena pH -ului

Influena pH-ului este complex, deoarece activitatea enzimatic este maxim la o anumit valoare a pH-ului mediului. Abaterile de la valorile optime pot conduce la pierderea activitii prin denaturarea ireversibil a proteinelor. Variaiile mici ale pH-ului acioneaz reversibil asupra activitii. Valoarea optim este determinat de natura enzimei, temperatura de lucru, compoziia mediului, prezena inhibitorilor. ntr-un ciclu de fermentaie, valoarea optim a pH-ului n faza de cretere este diferit de cea din faza de producere de metabolit. Din aceste considerente, n cazul proceselor continue fermentaia trebuie realizat cel puin n dou stadii, n care s se asigure valori optime pentru temperatur i pH, n vederea obinerii unor productiviti maxime.

Influena oxigenului
Oxigenul joac un rol esenial n metabolismul aerob de producere a energiei, ca acceptor final de electroni i protoni rezultai n urma reaciilor biochimice de oxidare. Totalitatea reaciilor n trepte care realizeaz transportul electronilor n final la oxigen (n cazul proceselor aerobe) sau la unele substane organice (n cazul proceselor anaerobe) alctuiesc mecanismul de respiraie celular. Cel de-al doilea mecanism productor de energie este fermentaia, care const n procese biochimice redox n care diferii compui organici acioneaz att ca donori ct i ca acceptori finali de electroni. Ca urmare, metabolismul energetic se poate realiza n prezena sau absena oxigenului; funcie de coninutul de oxigen al mediului, cele dou forme ale metabolismului energetic (respiraie i fermentaie) se desfoar cu intensiti diferite.

La un coninut de oxigen mai mic de 3% din concentraia de saturaie au loc numai procese de fermentaie, n timp ce la concentraii mai mari de 10% numai respiraie. Comportarea diferitelor microorganisme fa de oxigen depinde de tipul metabolismului energetic i ofer indicaii cu privire la enzimele pe care le posed. Pe lng microorganismele aerobe i anaerobe exist o categorie de microorganisme facultativ aerobe (aerotolerante), care au capacitatea de a-i modifica metabolismul n funcie de coninutul de oxigen al mediului de cultur. Metabolismul aceluiai microorganism poate varia de la etapa de acumulare de biomas (cretere celular) la cea de producere de metabolit, atrgnd dup sine modificarea naturii procesului biochimic i a necesarului de oxigen. Necesarul de oxigen al unei culturi microbiene depinde pe lng natura microorganismului i de natura sursei de carbon i energie.

Consumul de oxigen poate fi exprimat cu ajutorul vitezei de consum de oxigen RO2, care reprezint cantitatea de oxigen consumat n unitatea de timp i pe unitatea de mas microbian sau pe unitatea de volum de mediu de cultur. RO2 depinde de: - natura, - vrsta i morfologia microorganismelor, - natura substratului i - condiiile de fermentaie. RO2 este minim n etapa de lag, dup care, crete atingnd valoarea maxim n faza de cretere exponenial rmnnd la aceast valoare pn la atingerea fazei staionare cnd redevine minim.
Microorganism Escherichia coli Streptomyces griseus Penicillium crysogenum Aspergilllus niger - pentru acid citric - pentru -amilaz Acetobacter sp. Azobacter sp. Saccharomyces cerevisiae 28 56 90 10-15 8,0 mmoli O2/l*h 5-8 15 20-30 3,0 3,9 3,0 mmoli O2/g celule*h

Viteza de cretere a numeroase microorganisme este accelerat semnificativ de intensificarea aerrii, pn la o anumit valoare dup care are loc o stagnare sau chiar o reducere, fenomen explicat prin inhibiia produs de oxigenul din mediu (la concentraii mari) asupra unor procese metabolice.

Cunoscnd dependena dintre activitatea microorganismelor i concentraia de oxigen dizolvat, acumularea de biomas poate fi favorizat prin modificarea programat a gradului de aerare.

Dac se consider c i oxigenul este un substrat, viteza specific de cretere a masei celulare funcie de concentraia de oxigen solubilizat se poate exprima cu ajutorul ecuaiei:

= max

CO 2 K O 2 + CO 2

Pentru valori ale concentraiei de oxigen mai mici de o anumit valoare (definit concentraie critic CO2critic)

max
K O2

C O 2 critic

Scderea concentraiei de oxigen dizolvat sub valoarea critic are ca efect perturbarea metabolismului microbian. Valoarea concentraiei critice este specific fiecrui microorganism i este funcie de condiiile de cultur.

Microorganism Escherichia coli

T,0C 15.5 37.0 37.8

CO2 critic, mmol/l 0.0031 0.008 0.0083 0.035 0.0037 0.0040 0.0046 0.022

Azobacter sp Saccharomyces sp

30 20 30 34.8

Penicillium crysogenum

24

Necesarul de oxigen al culturilor de microorganisme pune problema dizolvrii oxigenului n mediu cu o vitez care s corespund vitezei maxime de cretere. Deoarece solubilitatea oxigenului n ap este redus, n vederea intensificrii dizolvrii, barbotarea aerului se combin cu amestecarea mecanic. Viteza de dizolvare a oxigenului crete cu turaia agitatorului, respectiv cu debitul de aer barbotat. Rolul amestecrii este de a dispersa bulele de aer n masa de fermentaie, intensificnd transferul de mas al oxigenului la biomas. Dei turaia agitatorului are o influen benefic, valoarea acesteia este limitat, datorit pericolului de distrugere mecanic a celulelor de microorganisme.

Ca urmare au fost adoptate modificri constructive pentru fermentatoare (tuburi centrale, icane, recirculri externe), care s realizeze o amestecare suplimentar. De asemenea, o dat cu creterea masei celulare apar modificri semnificative ale proprietilor reologice ale mediior de cultur, ceea ce influeneaz semnificativ desfurarea fenomenelor de transfer de mas, cldur i impuls. Viteza cu care microorganismul consum oxigenul dizolvat este dependent de: - gradul de dezvoltare a biomasei, - viteza de cretere a celulelor, - compoziia mediului de cultur i - nivelul concentraiei de oxigen. Dac oxigenul dizolvat se afl n concentraia mai mare dect concentraia critic, viteza de consum nu depinde de concentraia oxigenului dizolvat, dac ns concentraia este mai mic dect cea critic, scderea vitezei de consum va fi semnificativ. Eficiena aeraiei se poate msura fie n funcie de acumularea de biomas, fie funcie de viteza de eliberare a dioxidului de carbon.

R eactoare biologice fermentatoare

Rentabilitatea unui proces biochimic (caracterizat prin viteze sczute de reacie, concentraii finale reduse ale produilor, viscozitate mare a mediului i comportare reologic nenewtonian, consumuri energetice ridicate necesare prelucrrii unor volume mari de lichide, amestecare, aerare etc.) depinde n mare msur de condiiile de operare ale fermentatorului i de volumul su. Volumul bioreactorelor variaz n limite foarte largi, de la cteva sute de litri la zeci de mii de m3. Iat cteva exemple:
Domeniul de utilizare Epurarea biologic a apelor uzate (cu nmol activ) Biomase proteice Fabricarea berii Obinerea de acizi carboxilici (citric, lactic) Obinerea drojdiei de panificaie Fabricarea de antibiotice Fabricarea iaurtului Fabricarea pinii Volum, m3 25.000 - 30.000 1500 - 2000 300 - 500 200 - 300 200 100 - 200 10 1

Clasificarea fermentatoarelor - se poate face n funcie de mai multe criterii:

Modul de amestecare:
- bioreactoare cu amestecare mecanic, echipate cu amestectoare (agitatoare) de diferite tipuri constructive, - bioreatoare cu amestecare pneumatic, n care amestecarea se realizeaz prin barbotarea unui gaz (aer, dioxid de carbon, metan etc); funcie de tipul constructiv i funcional se deosebesc : bioreactoare tip coloan bioreactoare tip air-lift cu circulaie intern sau extern i bioreactoare cu strat fluidizat. - bioreactoare cu amestecare hidraulic, care se bazeaz pe circulaia sau recircularea mediului cu ajutorul pompelor. Din acest punct de vedere, sunt bioreactoare cu circulaie intern sau extern, cu duze (jet) exterioare i interioare (necate), cu pulverizare, cu strat fluidizat sau cu contact multiplu. bioreactoare cu amestecare mixt.

Modul de curgere

- cu amestecare perfect, n care n orice punct din interiorul mediului parametri procesului (concentraie, temperatur, pH) au aceeai valoare; - cu deplasare total, n care valorile parametrilor variaz pe direcia de curgere. Ambele modele sunt ideale, comportarea real situndu-se ntre cele dou modele ideale.

Modul de funcionare

discontinue, lucreaz n arje; semicontinue/semidiscontinue, unul sau mai muli componeni ai mediului se alimenteaz n mod continuu, n limita volumului util al vasului; continue, recomandate pentru cantiti mari de mediu, funcioneaz n regim staionar; cu recirculare, realizeaz o cretere a gradului de asimilare a substratului i asigur un transfer termic i de mas eficient. Regimul termic Bioreactoarele pot funciona n regim izoterm, adiabat sau neizoterm, neadiabat. Necesarul de oxigen - corespunztor naturii microorganismelor care realizeaz transformarea de substrat: aerobe sau anaerobe.

n alegerea sau conceperea unui bioreactor trebuie s se in seama nu numai de caracteristicile procesului biochimic ci i de alte cteva considerente, printre care: s permit curare i sterilizare simpl i rapid, inclusiv pentru echipamentele conexe; s realizeze un transfer de cldur i de mas (n special pentru oxigen, n cazul proceselor aerobe) eficient; s permit un control eficient al spumrii; folosirea unor materiale de construcie care s nu interacioneze cu mediul nutritiv, material care s nu conin elemente cu caracter inhibitor; caracterizat prin flexibilitate (posibilitatea utilizrii utilajului n diferite procese); costuri ct mai reduse de investiie i operare.

Fermentator discontinuu cu amestecare mecanica

Bioreactoare hidraulice a. cu jet exterior; b. cu jet interior; c. cu contact multiplu; d. cu strat fix; e. cu strat fluidizat

Separarea biomasei, separarea si purificarea produsului

Separarea masei celulare este precedat de inactivarea microorganismelor, care se realizeaz prin modificri semnificative ale temperaturii, pH-ului sau prin adaos de substane chimice. Separarea se poate face prin filtrare, centrifugare sau procedee mai moderne utiliznd uniti de separare cu membrane. Separarea i purificarea produselor reprezint cheia instalaiilor biochimice, care influeneaz semnificativ economicitatea procesului. Una din caracteristicile proceselor biochimice l constituie concentraia mic a produsului biosintetizat n substrat i n multe cazuri labilitatea sa structural, ceea ce impune acordarea unei atenii deosebite etapelor de separare i purificare. Operaiile de separare i purificare se aleg n funcie de natura, concentraia din substrat, proprietile fizico-chimice, locul de obinere (extracelular sau intracelular) al produsului, respectiv de cantitatea i proprietile substratului care trebuie prelucrat. Metodele de separare i purificare, condiiile de operare i utilajele n care se realizeaz trebuie s asigure o eficien maxim la cheltuieli minime.

Distrugerea membranei celulare

Se impune pentru eliberarea metabolitilor intracelulari, sau in cazul separarii unor substante celulare (enzime, proteine). Principalele metode se impart in: metode fizico-mecanice macinare umeda sau uscata inghetare dezghetare metode chimice: - tratare cu solutii de detergenti degradeaza lipoproteinele membranei celulare; - tratare cu solutii alcaline produce hidroliza materialului peretelui celular; - metode enzimatice utilizare de enzime care provoaca hidroliza unor legaturi specifice in peretele celular; - soc osmotic modificarea brusca a concentratiei saline, care provoaca distrugerea unor tipuri de celule

Extractia cu solventi
operatie de separare amestecuri lichide omogene, bazata pe diferenta de solubilitate a componentilor intr-unul sau mai multi dizolvanti corespunzator alesi; - cuprinde etapele: a. contactarea fazelor (mediu solvent); b. separarea fazelor; c. recupararea solventului. Criterii de selectie a solventilor: -selectivitate, descrisa de coeficientul de repartitie; -proprietati fizice (,) care sa permita dispersarea usoara a fazelor; -posibilitate de recuperare-recirculare; -siguranta in exploatare; -accesibilitate si cost redus.

Extractie reactiva: solubilizarea se realizeaza ca urmare a unei reactii chimice cu agentul de extractie (solubili, de regula, in faza organica, formand cu solutul un compus solubil la randul sau in faza organica); Extractie cu fluide supercritice, tehnica care permite: - evitarea degradarii produselor extrase datorita conditiilor blande de operare; - eficienta sporita datorita proprietatilor fizice (de solvatare, densitate, viscozitate) deosebite; - realizarea unei extractii complete si rapide cu o separare facila a fazei extrase. Cel mai folosit fluid in extractiile supercritice este dioxidul de carbon, utilizat pe scara larga in industria alimentara, chimica, biotehnologie etc.)

Diagrama de faza a dioxidului de carbon

Extractie cu membrane emulsionate lichide - membranele emulsionate lichide se obin prin formarea unei emulsii ntre dou faze nemiscibile i apoi prin dispersarea prin agitare a emulsiei ntr-o a treia faz continu, pentru a realiza procesul de extractie (pertracie).

Reprezentarea schematic a unei membrane emulsionate lichide

Procesul de transfer de mas cu membrane emulsionate lichide include urmtoarele etape: obinerea emulsiei primare; dispersarea emulsiei primare n contact cu o faz extern continu, pentru a forma o emulsie dubl cu rol separator; decantarea, pentru a separa emulsia primar din faza extern, faza extern constituind rafinatul; spargerea emulsiei, pentru a recupera faza intern ca extract i faza de membran pentru recirculare. Aplicatii: separare din medii de fermentatie de aminoacizi, acizi carboxilici, antibiotice

Reprezentarea schematic a unui proces de pertracie cu membrane emulsionate lichide.

Procedee membranare de separare

Procesul de membran Microfiltrare (MF) Ultrafiltrare (UF) Tipul membranei Simetric, microporoas (0,1 1 m) Asimetric, microporoas (0,01 1 m) Asimetric, cu strat activ dens i subire Cationice i anionice Lichid Fora motoare Presiune hidrostatic (0,1 1 bar) Presiune hidrostatic (0,5 5 bar) Presiune (20 200 bar) Mecanism de separare Curgere capilar i adsorbie Curgere capilar Aplicaii Filtrare steril, limpezire Separarea soluiilor de macromolecule Solubilizarea srurilor i microsolviilor din soluii ndeprtarea ionilor din soluie Separarea ionilor i a speciilor biologice

Osmoza invers (RO)

Solubilizare, difuzie

Electrodializa (ED) Membrane lichide

Potenial chimic Potenial chimic

Schimb de sarcin Solubilizare, difuzie cu transportor