Genetica Na Agropecuaria - OK

GENTICA
NA
AGROPECURIA
GENTICA
NA
AGROPECURIA
Lavras - MG
2012
Autores
MagnoAntonioPatto Ramalho
Joo Bosco dos Santos
Csar Augusto Brasil Pereira Pinto
ElaineAparecida de Souza
Flvia MariaAvelar Gonalves
Joo Cndido de Souza
5
a
Edio Revisada
2012 by MagnoAntonio Patto Ramalho, Joo Bosco dos Santos, Csar Augusto Brasil Pereira
Pinto, Elaine Aparecida de Souza, Flvia Maria Avelar Gonalves e Joo Cndido de Souza
Brasil Pereira Pinto. 5
a
Edio Revisada - 2012.
Nenhuma parte desta publicao pode ser reproduzida, por qualquer meio ou forma, sem a
autorizao escrita e prvia dos detentores do copyright.
Direitos de publicao reservados Editora UFLA.
Impresso no Brasil ISBN: xxxxxxxxxxxxx
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Reviso de Texto: Rose Mary Chalfoun Bertolucci
Referncias Bibliogrficas: Patrcia Carvalho de Morais
Editorao Eletrnica: Fernanda Campos Pereira, Patrcia Carvalho de Morais e Renata de
Lima Rezende
Capa: Ernani Augusto de Souza Junior
Ficha Catalografica Preparada pela Diviso de Processos Tcnicos da
Biblioteca da UFLA
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
1. xxxxxxxxxxxxxxxx2. xxxxxxxxxxxxxxx3. xxxxxxxxxxxxxxxx
4. xxxxxxxxxxxxxx. 5. xxxxxxxxxxxxxxx. I. xxxxxxxxxx.
CDD xcxxxxxx
PREFCIO
Aaceitao do livro Gentica naAgropecuria nas edies anteriores foi muito grande,
estimulando a publicao dessa nova edio. Como a gerao de novos conhecimentos
cientficos enorme especialmente na Gentica, necessrio que as publicaes sejam
constantemente revisadas e atualizadas. Nessa nova edio do livro procurou-se atualizar
alguns temas.
Todos os seis autores so professores da disciplina de Gentica de vrios cursos de
graduao da UFLAh longo tempo. Na abordagemdos temas utilizou-se dessa experincia
dos autores para expor os mesmos de modo o mais didtico possvel. Procurou-se tambm
utilizar deexemplos ligados agropecuria. Deve ser enfatizado, contudo, que o conhecimento
de gentica obtido emqualquer organismo pode ser extrapolado para qualquer outro.
Enfatizamos que essa publicao fruto da nossa experincia de ensino e, sobretudo
por isso estamos vidos por sugestes da comunidade acadmica, professores, alunos de
graduao e ps-graduao, que possammelhorar o contedo ou o modo de apresentao
das nossas futuras edies.
Os autores
SUMRIO
1 IMPORTNCIA DO ESTUDO DA GENTICA........................................... 13
1.1 INTRODUO................................................................................... 13
1.2 A GENTICA E SUA IMPORTNCIA............................................. 15
2 VARIAO E SEU SIGNIFICADO BIOLGICO............................ 23
2.1 INTRODUO................................................................................... 23
2.2 CONSERVAO DA VARIABILIDADE GENTICA................... 25
2.3 CONSERVAO DA VARIABILIDADE GENTICA NO
BRASIL......................................................................................................
28
2.4 CONSERVAO DA VARIABILIDADE GENTICA NO
MUNDO.....................................................................................................
30
PROBLEMAS PROPOSTOS.............................................................. 33
3 GENTICA MOLECULAR.................................................................. 35
3.1 INTRODUO.................................................................................. 35
3.2 NATUREZA QUMICA DO MATERIAL GENTICO.................... 35
3.3 COMPOSIO QUMICA E ESTRUTURA DOS CIDOS
NUCLICOS..............................................................................................
41
3.4 FUNES DO MATERIAL GENTICO.......................................... 50
3.5 MANIFESTAO FENOTPICA...................................................... 76
3.6 ORIGEM DA VARIABILIDADE GENTICA.................................. 77
3.7 GENES, ALELOS E DNA................................................................. 82
PROBLEMAS PROPOSTOS............................................................. 84
4 ORGANIZAO DO MATERIAL GENTICO E DIVISO
CELULAR....................................................................................................
87
4.1 INTRODUO................................................................................... 87
4.2 DIVISO CELULAR......................................................................... 93
4.3 CONSEQUNCIAS GENTICAS DA MITOSE.............................. 97
4.4 FORMAO DOS GAMETAS......................................................... 98
4.5 CONSEQUNCIAS GENTICAS DA MEIOSE.............................. 108
PROBLEMAS PROPOSTOS............................................................. 111
5 MENDELISMO....................................................................................... 113
5.1 INTRODUAO................................................................................... 113
5.2 ETAPAS NO ESTUDO DO CONTROLE GENTICO DE UM
CARTER.........................................................................................................
113
5.3 CONCEITOS COMUMENTE UTILIZADOS PELOS
GENETICISTAS...............................................................................................
119
5.4 ESTUDO DO CONTROLE GENETICO EM ANIMAIS................... 120
5.5 LEI DA DISTRIBUIO INDEPENDENTE.................................... 123
5.6 GENERALIZAES DAS PROPORES MENDELIANAS......... 126
5.7 MODO PRTICO PARA DETERMINAO DOS GAMETAS E
DOS DESCENDENTES DE CRUZAMENTOS...................................... 127
6 INTERAES ALLICAS E NO-ALLICAS................................ 141
6.1 INTRODUO................................................................................... 141
6.2 INTERAES ALLICAS................................................................ 141
6.3 INTERAES NO-ALLICAS OU GNICAS............................. 148
6.4 AUMENTANDO A COMPLEXIDADE............................................. 161
7 BIOMETRIA............................................................................................ 167
7.1 INTRODUO................................................................................... 167
7.2 LEIS DE PROBABILIDADE.............................................................. 167
7.3 DISTRIBUIO DE PROBABILIDADE.......................................... 169
7.4 PROBABILIDADE DE SE OBTER UMA DETERMINADA
COMBINAO GENOTPICA............................................................... 175
7.5 TESTE DE SIGNIFICNCIA - TESTE
2
5
......................................
177
8 ALELISMO MLTIPLO....................................................................... 185
8.1 ALELISMO MLTIPLO E A VARIABILIDADE DAS
POPULAES.................................................................................................
185
8.2 EXEMPLOS DE ALELISMO MLTIPLO EM ANIMAIS.................. 187
8.3 EXEMPLOS DE ALELISMO MLTIPLO EM PLANTAS................. 192
8.4 TESTE DE ALELISMO.................................................................................. 201
PROBLEMAS PROPOSTOS.......................................................................... 204
9 LIGAO, PERMUTA GENTICA E PLEIOTROPIA.................. 207
9.1 INTRODUO................................................................................... 207
9.2 ESTIMATIVADA FREQUNCIA DE RECOMBINAO (FR)....... 210
9.3 BASES CROMOSSMICAS DA PERMUTA................................... 214
9.4 PROVACITOGENTICA DAOCORRNCIA DAPERMUTA....... 215
9.5 MAPA GENTICO............................................................................. 216
9.6 PLEIOTROPIA................................................................................... 226
9.7 CORRELAO GENTICA E SELEO INDIRETA.................... 228
10 EFEITOS DO AMBIENTE NA EXPRESSO GNICA................. 235
10.1 INTRODUO................................................................................ 235
10.2 EFEITOS DO AMBIENTE NA MANIFESTAO
FENOTPICA............................................................................................
235
10.3 PENETRNCIA E EXPRESSIVIDADE........................................ 239
10.4 INTERAO GENTIPOS X AMBIENTES................................. 241
10.5 ESTIMATIVAS DE CONTRIBUIO DO EFEITO DOS
GENTIPOS, AMBIENTES E DA INTERAO GENTIPOS X
AMBIENTES.................................................................................................... 224
PROBLEMAS PROPOSTOS............................................................ 247
11 HERANA E SEXO.............................................................................. 251
11.1 INTRODUO............................................................................... 251
11.2 DETERMINAO DO SEXO PELAS CONDIES
AMBIENTAIS..................................................................................................
251
11.3 DETERMINAO GENTICA DO SEXO.................................... 252
11.4 GENES MASCULINIZANTES E FEMINILIZANTES................... 255
11.5 EVOLUO DOS CROMOSSOMOS SEXUAIS........................... 257
11.6 DETERMINAO DO SEXO EM ABELHAS............................... 258
11.7 GINANDROMORFOS...................................................................... 259
11.8 DETERMINAO DO SEXO EM PLANTAS............................... 261
11.9 HEREDITARIEDADE EM RELAO AO SEXO......................... 262
12 GENTICA QUANTITATIVA............................................................ 271
12.1 INTRODUO................................................................................. 271
12.2 HIPTESE DOS FATORES MLTIPLOS POLIGENES.......... 271
12.3 INTERAES ALLICAS............................................................ 279
12.4 PREDIO DA MDIA DE UM CARTER EM POPULAES
OBTIDAS POR CRUZAMENTO............................................................. 291
12.5 EMPREGO DE VARINCIA NO ESTUDO DOS CARACTERES
QUANTITATIVOS................................................................................... 300
PROBLEMAS PROPOSTOS.................................................................. 312
13 GENTICA DE POPULAES......................................................... 317
13.1 INTRODUO............................................................................... 317
13.2 FREQUNCIAS ALLICAS E GENOTPICAS........................... 317
13.3 EQUILBRIO GENOTPICO DAS POPULAES...................... 319
13.4 TESTE DE EQUILBRIO DE HARDY-WEINBERG................... 321
13.5 ESTIMATIVA DAS FREQUNCIAS ALLICAS COM
DOMINNCIA COMPLETA.................................................................... 321
13.6 FATORES QUE ALTERAM AS FREQUNCIAS ALLICAS E
GENOTPICAS DE UMA POPULAO.............................................. 322
14 ABERRAES CROMOSSMICAS................................................ 337
14.1 INTRODUO................................................................................ 337
14.2 ABERRAES CROMOSSMICAS NUMRICAS.................... 337
14.3 ABERRAES CROMOSSMICAS ESTRUTURAIS................ 347
PROBLEMAS PROPOSTOS........................................................... 362
15 TEORIA SINTTICA DA EVOLUO............................................ 367
15.1 INTRODUO............................................................................... 367
15.2 PROCESSO QUE CRIA VARIABILIDADE MUTAO......... 367
15.3 PROCESSOS QUE AMPLIAM A VARIABILIDADE.................. 368
15.4 PROCESSOS QUE ORIENTAM AS POPULAES PARA
MAIOR ADAPTAO........................................................................... 370
15.5 ESPECIAO.................................................................................. 376
15.6 CONCEITO DE ALGUNS TERMOS.............................................. 378
16 EFEITO MATERNO E HERANA EXTRACROMOSSMICA.. 379
16.1 INTRODUO................................................................................ 379
16.2 EFEITO MATERNO........................................................................ 379
16.3 HERANA EXTRACROMOSSMICA........................................ 382
16.4 DIFERENA ENTRE EFEITO MATERNO E HERANA
EXTRACROMOSSMICA.................................................................... 390
17 BIOTECNOLOGIA............................................................................... 395
17.1 INTRODUO............................................................................... 395
17.2 TCNICAS BIOTECNOLGICAS APLICADAS AOS
VEGETAIS..............................................................................................
395
17.3 TCNICAS BIOTECNOLGICAS APLICADAS AOS
ANIMAIS DOMSTICOS...................................................................... 412
18 MARCADORES MOLECULARES.................................................... 421
18.1 INTRODUO............................................................................... 421
18.2 MARCADORES MORFOLGICOS............................................. 421
18.3 MARCADORES MOLECULARES............................................... 422
18.4 EMPREGO DOS MARCADORES MOLECULARES.................. 445
PROBLEMAS PROPOSTOS.......................................................... 473
19 REGULAO DA EXPRESSO GNICA...................................... 477
19.1 INTRODUO............................................................................... 477
19.2 PROCARIOTOS.............................................................................. 478
19.3 EUCARIOTOS................................................................................ 488
RESPOSTAS DOS PROBLEMAS PROPOSTOS.................................. 501
GLOSSRIO............................................................................................... 525
BIBLIOGRAFIA COMPLEMENTAR.................................................... 555
13
Importncia do Estudo da Gentica
1.1INTRODUO
Gentica o estudo de dois fenmenos distintos: a hereditariedade e a variao. A
hereditariedade o fenmeno pelo qual os descendentes se assemelham aos seus
ascendentes. Como ser visto, no transcorrer da leitura desta publicao a informao para
expresso fenotpica dos diferentes caracteres passada de pais para filhos por meio dos
gametas. Emcontrapartida, a variao pode ser definida como sendo todas as diferenas
ambientais ougenticas entre os organismos relacionados pela descendncia. Dessa forma,
as variaes tanto podemser decorrentes exclusivamente do meio e, portanto, no hereditrias,
como tambmpodemser produzidas por alteraes na constituio gentica, sendo, nesse
caso, hereditrias.
Aparentemente, a hereditariedade e a variao so foras antagnicas. Isso porque,
enquanto a hereditariedade est relacionada coma semelhana entre osindivduos no decorrer
das geraes, a variao faz comque os indivduos sejamdiferentes. Embora antagnicas
nesse aspecto, a hereditariedade e a variao so foras que se completam, pois, se por um
lado a variao permite que existam diferenas sobre as quais atua a seleo havendo o
melhoramento e evoluo, por outro lado, o resultado da seleo s ser positivo, ou seja,
ser mantido, se a variao sobre a qual ela atuou for herdvel.
bemprovvel que a gentica tenha despertado a ateno do homemh muitos e
muitos anos. Existemevidncias de que h 10 mil anos, o homemj se preocupava coma
seleo de plantas e animais para sua sobrevivncia. Muitas hipteses foramformuladas
para explicar a transmisso das caractersticas hereditrias ao longo do tempo. Porm, a
gentica recebeu seu maior impulso por meio dos trabalhos do monge agostiniano Gregor
Mendel (Figura 1.1), realizados no final do sculo XIXe que receberamcrdito apenas no
incio do sculo XX.
H relatos de inmeros outros pesquisadores antes de Mendel que tentaramelucidar as
bases da hereditariedade, sem, contudo obteremsucesso. H algumas razes para o xito de
Mendel, entre elas: a) Aescolha do material experimental. Ele trabalhou comervilha, uma
planta de ciclo curto, descendncia numerosa e que ocupa pequeno espao; b) Estudou vrios
caracteres da ervilha, emrealidade sete, visando a ter certeza dos resultados obtidos; c) Foi
1 IMPORTNCIADO
ESTUDO DA GENTICA
14
Gentica na Agropecuria
persistente emconduzir o trabalho eemdefender suas idias, que eramdiferentes de tudo que
ocorria na poca. de se imaginar a sua angstia, como monge, tentando explicar os seus
resultados a cientistas famosos da poca.
Infelizmente, o trabalho de Mendel s foi reconhecido em1900, 16 anos aps a sua
morte (1884), quandotrs pesquisadores: DeVries, CorrenseTschermak, independentemente,
mostraramque a teoria do monge Agostiniano era correta. Assim, 1900 foi considerado o
marco zero, ouo ano do nascimento da gentica. por essa razo que ela conhecida como
uma cincia do sculo XX.
A gentica , portanto, uma cincia relativamente nova, mas que tem evoludo
espetacularmente, sobretudo porque despertou a ateno de vrios ramos do conhecimento
humano. Estima-se que o tempo necessrio para dobrar o conhecimento cientfico de
cerca de dez anos, mas esse tempo de apenas cinco anos para as cincias biolgicas e, no
caso especfico da gentica, de pouco mais de umano.
FIGURA 1.1. Johannes Gregor Mendel. Filho de agricultores, nasceu na cidade de Brno, em
22 de julho de 1822. Aos 25 anos entrou para um mosteiro, onde pde continuar seus estudos
em Zoologia, Botnica, Fsica e Matemtica. Em1857, com cerca de 35 anos, iniciou em uma
pequena rea do convento os seus trabalhos de hibridao com ervilha, que duraram cerca de
6 anos e contriburamdecisivamente para elucidar os princpios da transmisso das informaes
hereditrias (Freire Maia, 1995).
15
1.2 AGENTICAESUAIMPORTNCIA
Agentica uma das cincias que foi, e ser a que mais temcontribudo para o bem
estar da humanidade. Para evidenciar esse fato, os dados do crescimento populacional so
uma boa prova. Na figura 1.2, pode-se observar o que ocorreu com o crescimento da
populao ao longo do tempo e o que estimado at 2025. Para se ter uma melhor ideia do
que isso representa atualmente, a cada segundo nascemtrs novos habitantes. Emumdia, a
populao do planeta acrescida de 240 mil habitantes. Quais as consequncias do
crescimento populacional dessa magnitude? Sero inmeras as consequncias, entre elas
pode-se citar: i) incremento nos problemas desade da populao. ii) a demanda por alimento
ser crescente. iii) as questes ambientais principalmente relacionadas ao consumo de gua,
produo de lixo e muitos outros iro acentuar. iv) aumento da competio no mercado de
trabalho, entre outros. Agentica contribuiu e continuar contribuindo na soluo desses
problemas. No caso da sade, por exemplo, quanto maior a densidade demogrfica mais
fcil a disseminao dos agentes patognicos e as epidemias so muito mais frequentes.
No o objetivo dessa publicao enfocar a gentica mdica, contudo, vale salientar que,
atualmente, h evidncias de que praticamente todas as patologias so hereditrias. No
sempropsito, que entre as reas da gentica, a mdica a que mais cresce e possui uma
maior contingente de profissionais envolvidos no seu estudo.
At na questo do saneamento bsico, a gentica contribuiu e ter participao decisiva
no futuro. Alguns organismos j foram selecionados visando despoluio de reas
contaminadas. Essa uma rea emque as perspectivas da gentica emcontribuir na reduo
do impacto ambiental enorme.
Nesse momento, o que interessa mostrar a participao da gentica na soluo dos
problemas decorrentesda demanda de alimentos, fibras e biocombustvel. No difcil imaginar
o consumo dirio de alimentos de uma populao superior a 8 bilhes de habitantes em
2025.
Almdo mais, o crescimento populacional ocorre especialmente nos centros urbanos.
Oque se espera que a grande maioria da populao se concentre emcidades commais de
100 mil habitantes e que, apenas uma parcela se dedique produo de alimentos primrios.
Isso indica que, almda necessidade de produzir uma maior quantidade de alimentos, essa
atividade ser realizada por umcontingente de agricultores, proporcionalmente, beminferior
ao existente nos dias de hoje.
Nos seus primeirosanos, a gentica sepreocupou emconhecer o controle gentico dos
caracteres. Porm, a partir dos anos 50 foramintensificadas as pesquisas sobre a natureza
qumica dogene, seu funcionamento eregulao que contriburampara o desenvolvimento de
uma nova rea, a gentica molecular e uma das tecnologiasgeradas a do DNArecombinante.
16
Esses dados s no so mais dramticos porque a experincia do passado possibilita
afirmar que o homemdispe de tecnologiapara produzir alimentos na quantidade e qualidade
necessrias paraatender s necessidades dapopulao. Dentre as tecnologiasque contriburam
e devero continuar contribuindo para oaumento na produo dealimentos, o melhoramento
gentico de plantas e animais se destaca. Nesse aspecto, so conhecidos muitos exemplos
da contribuio efetiva do melhoramento gentico. Entre os inmeros casos, umdos mais
expressivos foi a produo de milho hbrido, iniciada comos trabalhos de G.H. Shull, E.M.
East e D.J. Jones, nas duas primeiras dcadas do sculo XX. At 1940, quando os primeiros
hbridos foramrecomendados aos agricultores, a produtividade foi praticamente a mesma
(Figura 1.3). Apartir da, o crescimento emprodutividade foi espetacular. EmMinnesotta
(EUA), por exemplo, a produtividade passoude 2010 kg/ha em1930, para aproximadamente
10.000 kg/ha em2010.
FIGURA 1.2. Crescimento da populao humana a partir de 1650 e sua projeo para o ano
de 2025.
17
FIGURA 1.3. Dados da produtividade de gros de milho (t/ha) de 1860 a 2008 nos Estados
Unidos.
Esse expressivo aumentona produtividade pode ser atribudo melhoria deuma srie de
prticas culturais; porm, o melhoramento gentico, pela incluso do milho hbrido no sistema
produtivo, foi responsvel por cerca de 58%desse ganho emprodutividade. Se for considerado
que s os Estados Unidos produzematualmente mais de 260 milhes de toneladas/ano de
milho, fcil deduzir a importncia social e econmica doaprimoramento gentico obtido.
Omelhoramento gentico das plantas temsido realizado de vrias formas, como, por
exemplo, a introduo de alelos de resistncia a pragas e doenas, s condies adversas de
solo e clima e tambmmelhorando a arquitetura da planta. Nesse ltimo aspecto, destacou-
se umtrabalho realizado coma cultura do arroz, que foi fundamental no que se denominou
de revoluo verde e contribuiu para que a partir de 1960, quando a populao do planeta
sofreu o seu maior crescimento, no houvesse falta desse importante alimento. Ocultivo do
arroz, emquase todo planeta realizado sob o sistema de inundao. At 1960, uma das
cultivares mais utilizadas era a PETAque tinha porte alto. Para incrementar a produo de
gros por rea, era necessrio utilizar doses crescentes de fertilizantesnitrogenados. Contudo,
quando essas plantas de porte alto recebiamdoses crescentes de nitrognio, o crescimento
vegetativo era excessivo e elas acamavam, colocando os gros em contato com a gua.
Nessa situao, a produtividade de gros reduzia, ao invs de aumentar como era de se
esperar (Figura 1.4). Os geneticistas encontraramuma linhagemque crescia pouco, planta
18
baixa, DEE-GEE-WOO-GEN. A produtividade dessa linhagem era muito baixa,
impossibilitando o seu uso comercial. Emcruzamento, contudo, coma PETApossibilitou a
obteno de plantas de porte intermedirias e muito produtivas. Desse trabalho, foi obtida,
por exemplo, a cultivar IR-8, que, ao contrrio da PETA, apresentava grande resposta ao
fertilizante nitrogenado, semacamar, permitindo obter enorme produtividade de gros por
rea, to necessria emvrias regies do planeta emque a demanda por arroz era grande e
a rea agrcola era escassa, tais como: China, Filipinas e muitos outros pases.
FIGURA1.4. Aobteno da cultivar IR-8, (A) proveniente do cruzamento da Peta, muito alta
e a DEE-GEE-WOO-GEN, muito baixa. (B) comparao da performance das cultivares de
arroz PETA e IR-8 em doses crescentes de nitrognio, tanto em ano agrcola com pouca ou
muita precipitao (chuva). Fonte: Chrispeels e Sadava (1994).
A contribuio do melhoramento gentico no Brasil tambm foi decisiva. O pas
apresentou a maior taxa de crescimento no sculo XX, quando a populao aumentou 10
vezes. No entanto, o incremento emprodutividade emgros por rea, possibilitou que no
s fosse possvel alimentar toda a populao como tambm houve grande excedente
exportvel compraticamente a mesma rea agrcola (Figura 1.5).
19
FIGURA 1.5. Produo (milhes de toneladas) e rea colhida de gros (milhes de hectares)
no Brasil. (IBGE, 2011).
Apenas para exemplificar, ser considerado o caso da soja. Essa leguminosa at 1970
concentrava-se no sul do Brasil. Isso porque, a soja uma espcie originria da China,
domesticada e cultivada sob condies de dias longos, isto , mais de 18 horas de luz.
Quando as cultivares existentes antes de 1970, eramcultivadas mais prximas do equador
em que o comprimento do dia prximo de 12 horas, floresciam precocemente sem as
plantas atingiremumbomdesenvolvimento vegetativo. Como consequncia, a produtividade
por rea era muito baixa, impedindo o seu cultivo comercialmente. Geneticistas brasileiros,
conseguiramselecionar plantas comperodo juvenil longo. Essas plantas, mesmo comdias
curtos, vegetamprimeiro, atingemumbomcrescimento, e s ento iniciamo florescimento.
Nessa condio, a produtividade obtida economicamente vivel.
Almdesse carter, os geneticistas selecionaramplantas mais adaptadas a regies sob
vegetao de cerrado. Por exemplo, foramselecionadas estirpes de Rhizobiumadaptadas
ao cultivo de solo de cerrado. Como resultado desses esforos, no se empregam mais
fertilizantes nitrogenados no cultivo da soja no Brasil e a produo passou de pouco mais de
2 milhesde toneladas em1970para prximo de 60milhes na safra de 2009/2010. Aumento
de praticamente 30 vezes em30 anos (Figura 1.6). Adicionalmente ocorreu a economia de
fertilizantes nitrogenados que atualmente superior a 4milhes de toneladas.
O eucalipto, outra espcie extica, um exemplo de muito sucesso obtido por
pesquisadores brasileiros. Em 1960, a produtividade era de 20 m
3
/ha/ano de madeira,
atualmente ela superior a 45 m
3
/ha/ano. Aprodutividade de celulose que era 5,8t/ha/ano
passou para mais de 11t/ha/ano. Esse excepcional incremento emumperodo to curto foi
20
decorrente da melhoria do manejo e, sobretudo, ao melhoramento gentico. Foram
selecionados os indivduos superiores e que foramperpetuados por meio de propagao
assexuada, (clone).
FIGURA 1.6. Evoluo da produo de soja no Brasil.
Fonte: IBGE( 2009).
Todas as informaesdisponveis apontamque a agriculturabrasileira ser responsvel
no s para atender ao mercado interno de alimentos, fibras e biocombustvel, mas tambm
o mercado externo. Isso porque em vrios pases em que a populao crescente, no
existemmais possibilidades de incrementos na produo de produtos vegetais.
No caso dos animais, a contribuio do melhoramento gentico tambm teve o
mesmo sucesso obtido com as plantas. O melhoramento das aves, por exemplo,
proporcionou a obteno de novos hbridos, tanto visando produo de carne como
de ovos, que contriburampara uma verdadeira revoluo na avicultura. Como prova disso,
as companhias de melhoramento gentico de aves conseguiramaumentar o peso mdio
das aves de 1.500 g aos 105 dias, em 1930, para 2.300 g aos 42 dias, em 2008. Como
pode ser observado, o melhoramento gentico proporcionou aumento de 53% no peso
mdio das aves e, principalmente, reduo de 63 dias no perodo para estarememcondio
de seremabatidas. Simultaneamente, a converso alimentar passou de 3,50:1 para 1,88:1.
Emse tratando de postura, a melhoria da eficincia das aves foi equivalente, ou superior
quela obtida para a produo de carne. As aves caipiras - no melhoradas - produzem,
emmdia, 60 a 80 ovos /ave/ano, ao passo que as aves melhoradas esto produzindo 270
ovos/ave/ano. Esses dados mostram que o melhoramento gentico possibilitou uma
verdadeira revoluo na explorao avcola, permitindo que os produtos da avicultura se
P
r
o
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o
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1
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)
21
tornassemmais competitivos no mercado. OBrasil atualmente o principal exportador de
carnes e ovos, mas ainda pode e deve desenvolver o melhoramento gentico das aves,
reduzindo a necessidade da importao de matrizes de outros paises.
Abovinocultura brasileira, tanto de leite como de carne, tambmapresentou enorme
crescimento nos ltimos anos. Na tabela 1.1, mostra-se a participao de alguns pases na
produo de carne bovina. Veja que o Brasil o segundo mair produtor e , atualmente, o
principal exportador de carne do planeta. Isso foi possvel emrazo da melhoria do manejo,
dos aspectos de sanidade animal e, sobretudo, ao melhoramento gentico. Nesse ltimo
aspecto, vale salientar que o Brasil exporta matrizes selecionadas para inmeros pases,
evidenciando o trabalho realizado emmelhoramento gentico animal no pas.
TABELA 1.1. Principais pases produtores e exportadores de carne bovina no perodo de
2001 a 2007. (Dados 1.000 toneladas equivalente de carcaa).
Fonte: Agroanalysis (2008).
Pas Produtores 2001 2007 % do mercado
EUA 11.983 12.096 20,0
Brasil 6.895 9.470 15,7
Unio Europia 8.346 8.175 13,5
China 5.503 7.494 12,4
Argentina 2.640 3.200 5,3
ndia 1.770 2.500 4,1
Mxico 1.925 2.200 3,6
Austrlia 2.049 2.197 3,6
Mundo 53.377 60.437 100,0
Pas Exportadores 2001 2007 % do mercado
Brasil 741 2.189 28,8
Austrlia 1.376 1.400 18,4
ndia 365 735 9,7
EUA 1.029 649 8,5
Argentina 169 532 7,0
Total 5.842 7.605 100,00
Aimportncia dagentica no se limitaao melhoramento gentico de plantas e animais.
Vrias contribuies so tambmconhecidas emoutras reas, como na medicina. Ocaso da
produo de penicilina ilustra bemesse fato, uma vez que a linhagemoriginal dePenicillium
chrysogennum, utilizada por Fleming, produzia 2mg/l de penicilina, enquanto as linhagens
melhoradas atuais produzem20g/l, ou seja, umaumento 10 mil vezes emrelao produo
original.
22
Como advento da biotecnologia especialmente a tecnologia do DNArecombinante e
a genmica, contribuies importantes ocorreram, tais como: a produo de insulina e do
hormnio de crescimento somatostatina. Amaior eficincia da produo desses produtos
permitiu atender demanda mundial que crescente e a umpreo muito mais acessvel. No
caso das plantas a introduo da resistncia ao herbicida glifosato e a vrios insetos (Bt),
ambos os genes encontrados em bactrias do solo, para plantas de soja, milho e outros
vegetais, temmelhorado sensivelmente o manejo das culturas.
Aesperana que embreve, algumas plantas e/ou animais domsticos possamser
transformados emverdadeiras fbricas de medicamentos. Esse fato j vemocorrendo no
caso de ovelhas transgnicas que produzemuma protena teraputica, antitrombina humana,
que j comercializada nos EUAe Europa. Pesquisadores da regio nordeste do Brasil,
utilizandocaprinos transgnicosestotrabalhando ativamentena produode protenahumana.
O consumo de leite dessas cabras pelas populaes mais carentes, poder suprir as
necessidades dos indivduos, sobretudo de certas protenas que so deficientes emalgumas
crianas.
Em 1997, foi divulgado o primeiro caso de clonagem em animais - a obteno da
ovelha Dolly, por geneticistas escoceses. Pouco tempo depois geneticistas brasileiros
conseguiramclonar o primeiro bovino, que foi denominado de Vitria. Essas descobertas
mostram, mais uma vez, a capacidade criativado homeme vislumbra vrias possibilidades de
que oscientistas, conscientes da suaresponsabilidade, podero no futurodesenvolver inmeras
tecnologias que, certamente, permitiro que muitas realizaes da gentica, atualmente
consideradas como fico, tornem-se realidade.
Osequenciamento do DNA-genoma, de vrias espcies atualmente uma rotina. Esse
fato permite vislumbrar inmeras contribuies no s emtermos de conhecimento cientfico
da atuao dos genes, como de aplicao tecnolgica, visando melhoria do padro de vida
da sociedade humana nunca antes imaginada.
Finalmente, meritriocomentar queopapel dosgeneticistasquedesenvolverampesquisas
relacionadas coma agropecuria temsido reconhecido pela sociedade emvrias ocasies.
Tanto assimque geneticistas j foramlaureados como prmio Nobel. Entre eles, merece
meno o Dr. Norman Borlaug que recebeu o prmio Nobel da Paz de 1970 pelas suas
pesquisas, durante mais de vinte e cinco anos, no melhoramento do trigo, e tambma Dra.
Barbara McClintockque, trabalhando comcitogentica do milho, recebeu o prmio Nobel de
Fisiologia e Medicina em1983, visto que os seus trabalhos abriramperspectivas, entre outras
coisas, para que muitas doenas hereditrias pudessemser mais eficientemente controladas.
23
Variao e Seu SignificadoBiolgico
2.1 INTRODUO
Todos os organismos que constituem uma dada espcie animal ou vegetal so
semelhantes, emdecorrncia de receberemmaterial gentico de ancestrais comuns. Porm,
emuma anlise mais detalhada de dois ou mais indivduos dessa espcie, notamos que eles
nemsempre socompletamente idnticos, ao contrrio, notam-se diferenas fenotpicas para
vrias caractersticas. Essas diferenas constituema variao.
Para que possamos entender melhor a natureza dessa variao preciso inicialmente
fornecer alguns conceitos. Oprimeiro o quedenominamos decarter, ouseja, as informaes
que identificamumindivduo. Assim, tomandocomo exemploumaplantademilho, h inmeros
caracteres, isto, altura da planta, cor das folhas, tamanho das razes, cor dos gros, tamanho
dos gros, teor de protena, produtividade de gros, etc., que identificamcada planta. Se
fosse umbovino, entre os caracteres que identificamo indivduo estariamo sexo, a cor da
pelagem, a presena ou no de chifres, a produtividade de leite e o teor de gordura no leite.
As diferentes expresses de umdado carter constituemo que denominamos defentipo.
Para o carter altura da planta de milho o fentipo pode ser alto ou baixo, para a cor dos
gros o fentipo pode ser amarelo ou branco. J para a produo de leite de uma vaca, o
fentipo pode assumir qualquer valor emtermos de kg de leite por lactao, enquanto para a
cor da pelagemo fentipo pode ser preto e branco ou vermelho e branco.
importante salientar que para uma mesma espcie todos os indivduos apresentamos
mesmos caracteres e, portanto, a variao observada entre esses indivduos a variao
fenotpica. Ela pode ocorrer emvirtude de diferenas ambientais (variao ambiental) a
que os indivduos esto submetidos ou ocorrer por causa de diferenas emsuas constituies
genticas (variao gentica).
Avariao ambiental se deve a qualquer diferena, excetuando-se aquelas de natureza
gentica, que seoriginamemfuno deflutuaes na fertilidade dosolo, nutrio, temperatura,
incidncia de doenas ou pragas, umidade, etc. Assim, se tomarmos dois pedaos do caule
(manivas) retiradas de uma mesma planta de mandioca, portanto geneticamente idnticas, e
plantarmos emcondies diferentes de fertilidade, uma das plantas produzir muito mais
razes do que a outra. Avariao fenotpica, nesse caso, toda ambiental.
2 VARIAO E SEU
SIGNIFICADO BIOLGICO
24
oportuno salientar que a variao ambiental quase sempre est presente, o que muda
a intensidade comque ela pode se manifestar. Umoutro aspecto da variao ambiental
que ela nunca pode ser transmitida descendncia. Por exemplo, se uma vaca apresenta uma
alta produo de leite, emrazo do excelente manejo dado pelo pecuarista, a produtividade
de sua descendncia ser inferior, se os animais foremsubmetidos a piores condies de
manejo. Assim, comoa variao ambiental no transmitida descendncia, elano utilizada
na seleo e, portanto, no promove o melhoramento gentico. Contudo, como veremos em
algunstpicos docurso, o seuefeitopodedificultar o trabalho domelhorista no reconhecimento
dos indivduos geneticamente superiores.
Avariao gentica aparece emdecorrncia das diferenas nas constituies genticas
que, por sua vez, surgempela mutao (Captulo 3). Ao contrrio da variao ambiental, a
variao gentica pode, pelo menos emparte, ser transmitida descendncia e, portanto,
hereditria, sendo, por esta razo, essencial para o melhoramento gentico das espcies
domesticadas e para a evoluo de todas as espcies (Captulo 15).
Aexistncia de variao gentica comuma todas as espcies biolgicas e ocorre
praticamente para todas as caractersticas de uma espcie. Desse modo, tmsido observadas
variaes para a colorao de flores de roseiras, produtividade de gros de arroz, colorao
de gros do feijoeiro, altura de rvores de Pinus, densidade da madeira de eucalipto, teor de
amido emtubrculos de batata, teor de leo emsementes de soja, colorao da pelagemde
cavalos, produo de leite emvacas, comprimento da carcaa de sunos, colorao da casca
do ovo de galinhas, suscetibilidade ou resistncia a certos patgenos, ou seja, para todos os
caracteres das diferentes espcies.
Esses exemplos mostram que possvel realizar a seleo e, consequentemente,
promover o melhoramento gentico para qualquer espcie e, praticamente, qualquer carter
de interesse. Para isso, o geneticista ou melhorista deve ser capaz no s de detectar a
ocorrncia da variao fenotpica, mas, sobretudo, de identificar sua natureza, isto , se
gentica e/ou ambiental.
Principalmente, emrazo das exigncias do mercado consumidor e dos produtores,
as cultivares de plantas e as raas de animais so cada vez mais uniformes. Essa uniformidade
, semdvidanenhuma, umrisco paraa agropecuria mundial. Assim, por exemplo, se ocorrer
umpatgeno ao qual o gentipo suscetvel, todos os indivduos sero afetados comgraves
consequncias para a espcie. Aexistncia de variabilidade gentica importante para a
continuidade das espcies e, tambm, para que, por meio do melhoramento gentico, sejam
obtidas novas combinaes de maior interesse para o homem. Deve-se considerar ainda que
as necessidades humanas variam com o tempo, de modo que a demanda futura para
caractersticas especficas podemser diferentes das atuais. Almdisso, mudanas climticas
podemocorrer tornando-se necessria a obteno de novas cultivares de plantas ou raas
25
de animais mais adaptadas a essas condies. Assim, fundamental que tenhamos
variabilidade suficiente para atender aos requisitos exigidos nos programas de melhoramento
gentico.
2.2 CONSERVAODAVARIABILIDADEGENTICA
A preservao da variabilidade, ou a conservao dos recursos genticos
considerada uma das questes mais importantes para a sobrevivncia da humanidade e
temrecebido a ateno dos governantes. Adiversidade representa a base biolgica para
que se possa produzir os alimentos hoje, bem como dispor de meios para enfrentar os
desafios futuros emtermos de crescimento populacional, mudanas climticas e presena
de pragas e doenas, que esto emconstante evoluo. Aconservao das espcies pode
ser feita in situ ou ex situ. No primeiro caso, a conservao da variabilidade gentica
feita no ambiente onde a espcie se evoluiu e, no segundo caso, a conservao realizada
embancos de germoplasma, entendendo-se comogermoplasma umconjunto de indivduos
representativos de uma espcie.
A escolha da forma de conservao depender de diversos fatores, entre eles se o
material cultivadoou selvageme da disponibilidade de recursos fsicos e financeiros. Quanto
ao germoplasma a ser conservado, eles se enquadramemquatro categorias: (a) cultivares
avanadas, atualmenteemuso ouno, mas utilizadascomercialmente; (b) variedades primitivas;
(c) parentes selvagensdas culturas atuais ouanimais compotencial de utilizao e (d) estoques
genticos, tais como, mutaes ou estoques citogenticos (translocaes, inverses, etc.).
2.2.1 conservao in situ
Aconservao in situ temsido preferida para as espcies selvagens e parentes das
culturas que ocorremna natureza. Os alelos dessas espcies podemser transferidos para a
espcie cultivada, contribuindo para aumentar a tolerncia a condies de estresse ambiental,
bemcomo a resistncia a pragas e doenas; almdisso, tmsido encontrados muitos alelos
que conferemmelhor sabor, qualidades culinrias e valor nutricional. Uma das vantagens
preconizadas para a conservao in situ a possibilidade das espcies continuaremseus
processos evolutivos, o que lhes permitiria coevoluremcomos seus patgenos e pragas. Por
outro lado, esse tipo de conservao no adequado para cultivares. Umoutro aspecto que
deve ser considerado, a existncia de umgrande nmero de espcies selvagens e parentes
das espcies cultivadas, tornando invivel sua conservao ex situ.
Aconservao in situ temsido realizada pelo estabelecimento de reas protegidas,
como as reservas naturais e parques nacionais. Algumas vezes, as reservas so estabelecidas
para proteger umapaisagemfamosa ou salvar ummamfero ouave rara da extino. Situao
mais rara a criao de reservas para proteger parentes silvestres de espcies de plantas
26
cultivadas. Contudo, o estabelecimento das reservas naturais, muitas vezes, contempla,
casualmente, os parentes silvestres.
2.2.2 conservao ex situ
Aprincipal nfase para a conservao da variabilidade genticaex situ temsido dada
para as cultivaresprimitivas das espcies maisimportantes. Arazo disso que essas cultivares
tiveramumpapel relevante no desenvolvimentocientfico da agricultura, sendoos ancestraisde
todas as cultivares modernas. Uma outra razo importante que esse material temumvalor
potencial como fonte de variao para os futuros programas de melhoramento gentico, alm
de estar sobuma eminente ameaa de extino.
Obanco de germoplasma o local onde se armazena o material gentico das espcies
de interesse. Emoutras palavras, banco de germoplasma umbanco de alelos, que so as
formas alternativas dos genes e que caracterizama existncia de diversidade gentica. Em
realidade, os bancos de germoplasma no possuem apenas a funo de armazenar o
germoplasma, sendo tambmresponsveis pelas atividades deprospeco, coleta, introduo,
intercmbio, quarentena, caracterizao, conservao, inspeo, multiplicaoe regenerao
do germoplasma.
a) Prospeco e coleta - A prospeco uma atividade que antecede a coleta do
germoplasma e objetiva efetuar um estudo preliminar para assegurar o sucesso de uma
expedio de coleta. Acoleta deve ser realizada de preferncia emregies onde a espcie
possui maior variabilidade. Assim, uma coleta de germoplasma de milho no Brasil no deve
ser realizada no Sudeste, onde a agricultura mais evoluda e quase todos os agricultores
adquiremsementes melhoradas. Por outro lado, no Norte e Nordeste, principalmente entre
os indgenas, aindaso encontrados vrios tiposde milho que, por noteremsido selecionados,
ainda mantmuma grande variabilidade. J, na coleta de germoplasma de amendoim, seriam
visitadas algumas regies do Sul de Minas, onde h evidncias de que essa espcie temmaior
diversidade.
Umaspecto importante a ser observado na coleta o tamanho da amostra, que varia,
principalmente emfuno do modo de reproduo da espcie. No basta apenas coletar um
ou poucos indivduos emcada propriedade, pois esse pequeno nmero pode no representar
o germoplasma ali existente. Tambmno sedeve coletar umnmeroexcessivo de indivduos,
pois o nmero de amostras (acessos) que o banco de germoplasma pode conservar restrito.
b) Introduo, intercmbio e quarentena - Uma outra forma de obteno de acessos
para umbanco de germoplasma por meio da introduo e intercmbio. Ointercmbio se
constitui no recebimento e envio de germoplasma para outros centros de conservao,
podendo ser considerado uma das formas mais efetivas de aumento de variabilidade a ser
27
preservada. Normalmente, o intercmbio e o servio de quarentena so atividades de um
mesmo setor dentro dos grandes bancos de germoplasma, que tema responsabilidade de
reduzir os riscos de introduo inadvertida de enfermidades e pragas no pas, ou regio que
recebe o material gentico. O setor de intercmbio e quarentena, normalmente, possui
laboratrios de bacteriologia, micologia, virologia, nematologiae entomologia, visando a evitar
a disseminao desses patgenos e pragas.
c) Caracterizao - Aps a coleta ou introduo, o acesso deve ser, se possvel,
caracterizado, permitindo aos melhoristas tomar conhecimento das qualidades disponveis
no germoplasma das espcies que sero preservadas. Essas informaes variamcoma
espcie, mas geralmente apresentamdescries sobre resistncia s pragas e patgenos,
caractersticas de gros, tolerncia a estresses ambientais, etc. Os responsveis pelos bancos
de germoplasma, periodicamente, publicamesses dados para fornecer, especialmente aos
melhoristas, as informaes que eles mais necessitama respeito do germoplasma disponvel.
d) Conservao - Existemdiversos mtodos de conservao ex situ, tais como bancos
de sementes, preservao in vivo, cultura de tecidos e criopreservao para plen,
meristemas, embries, smen e microrganismos. As sementes so a forma mais apropriada
para armazenamento de germoplasma vegetal, pois, geralmente, so de tamanho reduzido
e ocupampequeno espao. Para fins de armazenamento, elas so classificadas emdois
grandes grupos:
1) Sementes ortodoxas - aquelas que podem ser dessecadas a baixos teores de
umidade (4 a 6%) e armazenadas por longos perodos emcmaras frias, emembalagens
hermticas. Como exemplos, temos o milho, feijo, trigo, arroz, soja, algodo, cebola,
cenoura, tomate, eucalipto, etc.
2) Sementes recalcitrantes - aquelas que morremrapidamente quando dessecadas
abaixo dedeterminados nveis crticos, podendo, por isso, ser armazenadasapenas por poucas
semanas ou meses. Como exemplos, citam-se o caf e cacau.
As espcies que no produzemsementes comfacilidade ou que apresentamsementes
recalcitrantes tmsido conservadas na forma in vivo, isto , emcolees de plantas vivas.
De modo geral, esse sistema de preservao mais trabalhoso que aconservao de sementes,
alm de estar sujeito a desastres naturais como fogo e ataque de pragas e doenas. No
entanto, constitui uma das nicas formas de conservao de algumas espcies florestais e de
espcies animais.
Aconservao na forma de cultura de tecidos bastante apropriada, principalmente
para espcies de propagao vegetativa ouque produzemsementes compouca frequncia.
Para fins de conservao do germoplasma, a cultura de tecidos, utilizada de maneira que o
crescimento seja retardado, evitando multiplicaes constantes. Bancos de germoplasmain
vitro j esto bem estabelecidos para mandioca, batata, batata-doce e algumas espcies
frutferas temperadas.
28
e) Multiplicao e regenerao - A multiplicao a reproduo de um acesso para
atender demanda dos melhoristas oupara fins deintercmbio. Cuidados devemser tomados
no processo de amostragem (tamanho da amostra), evitando alteraes nas frequncias
allicas. Normalmente, a multiplicao sed emcondies decampo, oude casade vegetao,
principalmente, quando se trata de espcie propagada por sementes. Aregenerao a
reproduo de um acesso visando manuteno da sua integridade gentica e a sua
conservao por mais umperodo de tempo no banco. Recomenda-se que essa regenerao
deva ser feita, toda vez queas sementes armazenadas apresentemporcentagemde germinao
mnima para cada espcie. No caso de espcies mantidas in vitro, as plntulas devemser
transferidas para casas de vegetao, permitindo o seu revigoramento vegetativo. Ointervalo
de tempo entre uma regenerao e outra deve ser determinado para cada espcie, levando-
se emconsiderao se a espcie conservada na forma de sementes ou in vitro. Para as
espcies conservadas in vitro, normalmente, o intervalo bemmais curto do que para as
conservadas como sementes que, muitas vezes, podemser armazenadas por muitos anos,
at mais de umsculo, no caso de gramneas.
2.3 CONSERVAODAVARIABILIDADEGENTICANOBRASIL
No Brasil, a conservao da variabilidadegentica temsido coordendapela EMBRAPA
Recursos Genticos e Biotecnologia (CENARGEN) fundada em1974. OCENARGEN
iniciou as atividades de coleta, em 1975, e conta hoje com mais de 350.000 acessos de
feijo, arroz, cevada, soja, trigo, sorgo, milho, caupi, algodo, triticale, amendoim, aveia e
outras espcies. Algumas espcies de propagao vegetativa como mandioca, batata-doce,
car, batata, banana, morango e aspargo so conservadas in vitro. Aconservao ex situ
tambm feita em diversos bancos de germoplasma distribudos nas vrias unidades da
Embrapa (Tabela 2.1).
A conservao in situ, no CENARGEN, iniciou-se em 1984, com a criao de 5
reservas genticas onde so preservadas espcies como o pinheiro-do-Paran, imbua, erva-
mate, jequitib, cedro, angico, mogno, etc.
O CENARGEN tambmse preocupa com a conservao de germoplasma animal
iniciada em 1981. Aconservao feita in vivo nos ncleos de criao e inclui bovinos
(Mocho Nacional, Crioulo Lageano, Pantaneiro, Curraleiro), bubalinos (Baio e Carabao),
ovinos (Crioulo Lanado, Santa Ins e Morada Nova); equinos (Lavradeiro e Pantaneiro),
asininos (Jumento Nordestino e Jegue), caprinos (Moxot, Marota, Canind e Repartida),
sunos (Moura, Caruncho, Pirapetinga, Piau, Canastra, Macao e Nilo) e aves. Amaioria
dessas raas est no Brasil desde o perodo colonial e desenvolveram rusticidade e
adaptabilidade que so importantes para os programas de melhoramento. Realiza-se, ainda,
a criopreservao de smen e embries de bovinos e smen de caprinos.
29
TABELA2.1. Constituiodas curadorias debancos ativos degermoplasma, nas unidades da Embrapa.
Fonte: Wetsel e Ferreira (2007)
Unidade da Embrapa Curadoria de Bancos ativos de germoplasma Local
Embrapa Agrobiologia
Microrganismos: bactrias diazotrficas e
Microrganismos: bactrias micorrizas
Itagua, RJ
Embrapa Agroindstria
Tropical
Caju; Flores e espcies ornamentais tropicais Fortaleza, CE
Embrapa Algodo Algodo, Sisal, Amendoim, Gergelim e Mamona
Campina Grande,
PB
Embrapa Amaznica
Ocidental
Caiau, dend, Capuau, Guaran, Mandioca, Plantas
condimentares, medicinais, aromticas, Espcies florestais,
Fruteiras tropicais e Crton
Manaus, AM
Embrapa Amaznica
Oriental
Palmeiras, Plantas inseticidas, Bfalos, Culturas industriais,
Forrageiras, Fruteiras, Mandioca, Plantas condimentares,
Plantas medicinais, Plantas fibrosas-curau, Cupuau, Bacuri,
Camu-Camu, Poney puruca e Cavalo Marajoara
Belm, PA
Embrapa Arroz e Feijo Arroz e Feijo Goinia, GO
Embrapa Caprinos Caprinos da raa Canind e Moxot Sobral. CE
Embrapa Cerrados
Mandioca, Quinoa, Seringueira, Plantas medicinais,
Forragerias, Eucalyptus e Pinus e Abacate
Braslia, DF
Embrapa Clima
Temperado
Azevm, Batata-doce, Batatas cultivadas e silvestre, Frutas
nativas, Cenoura, Capsicum, Cebola, Cucurbitceas,
Espinheira-santa e Prunideas
Pelotas, RS
Embrapa Florestas Conferas folhosas Colombo, PR
Embrapa GadodeCorte Brachiaria, Panicum e Stylosanthes CampoGrande, MS
Embrapa Hortalias
Abbora, Moranga, Alho, Batata-doce, Mandioquinha-salsa e
Berinjela
Braslia, DF
Embrapa Mandioca e
Fruticultura Tropical
Mandioca, Citros, Abacaxi, Acerola, Banana, Mamo e
Maracuj
Cruz das Almas,
BA
Embrapa Meio-Norte
Bovino da Raa P-duro, Caprinos da Raa Marota, Caprino da
Raa Azul e Feijo caupi
Teresina, PI
Embrapa Milho e Sorgo Milheto, Milho e Sorgo Sete Lagoas, MG
Embrapa Pantanal Bovino Pantaneiro e Cavalo Pantaneiro Corumb, MS
Embrapa Pecuria
Sudeste
Paspalum So Carlos, SP
Embrapa Pecuria Sul Ovelha Crioula Lanada e Forrageiras Bag, RS
Embrapa Recursos
Genticos e
Biotecnologia
Cogumelos, Espcies florestais nativas e pinus, Arachis,
Menta, Manihot, Plantas ornamentais, Animais de grande porte
e Animais de pequeno porte
Braslia, DF
Embrapa Rondnia
Cupuau, Flores Tropicais e plantas ornamentais, Plantas
medicinais, Caf, Espcies florestais, Guaran, Pimenta-do-reino
Porto Velho, RO
Embrapa Semi-rido Curcubitcea, Forrageira, Mandioca, Manga, Umbu, Uva Petrolina, PE
Embrapa Soja Soja, Microrganismos: fungos entomopatgenos e Girassol Londrina, PR
Embrapa Sunos e Aves Aves de corte, Aves de postura e Sunos Moura Concrdia, SC
Embrapa Tabuleiros
Costeiros
Coco Aracaju, SE
Embrapa Trigo Aveia, Centeio, Cevada, Triticale, Trigo e Espcies afins PassoFundo, RS
Embrapa Uva e Vinho Uva
Bento Gonalves,
RS
30
TABELA 2.2. Relao das Instituies responsveis pelos principais bancos de germoplasma
do mundo.
! IPGRI - International Plant Genetic Resources Institute (Instituto Internacional para
Recursos Genticos Vegetais) - Itlia - Coordena oito estaes internacionais de
Pesquisa e 60 bancos de genes em diversas naes.
! NSSL - Laboratrio Nacional de Armazenagem de Sementes (ligado ao IBPGR) -
Situado em Fort Collins, Colorado, Estados Unidos.
! IRRI - Instituto Internacional de Pesquisa do Arroz - Filipinas.
! CIMMYT - Centro Internacional de Melhoramento de Milho e Trigo - Mxico.
! CIAT - Centro Internacional para Agricultura Tropical - Colmbia.
! IITA - Instituto Internacional de Agricultura Tropical - Nigria.
! CIP - Centro Internacional da Batata - Peru.
! ICRISAT - Instituto Internacional de Pesquisa de Culturas para os Trpicos Semi-
ridos - ndia.
! WARDA - Associao para Desenvolvimento do Arroz da frica Ocidental -
Libria.
! ICARDA - Centro Internacional de Pesquisa Agrcola em reas Domsticas -
Lbano.
Fonte: Mooney(1987)
OSvalbard Global Seed Vault (Silo Global de Sementes de Svalbard) foi criado para
servir como umseguro para a diversidade das espcies cultivadas (Figura 2.1). Aidia surgiu
no ano de 1980, mas somente com o apoio da International Treaty on Plant Genetic
2.4 CONSERVAODAVARIABILIDADEGENTICANOMUNDO
As colees de sementes de todo o mundo esto vulnerveis a uma ampla gama de
ameaas combates civis, guerras, catstrofes naturais, e, mais frequentemente, mas no
menos desastroso, o manuseio incorreto, falta de recursos adequados e falhas de
equipamentos. Variedades nicas das nossas culturas mais valiosas so perdidas toda vez
que alguns desses desastres acontecem, de modo que amostras duplicadas das colees em
vrios locais emtodo o mundo atuamcomo uma aplice de seguros para o suprimento de
alimentos no mundo. Ao redor de todo o mundo, diversos centros so responsveis pela
preservao dadiversidade gentica. NaTabela2.2, apresentada uma relao das Instituies
onde se concentramos principais bancos de germoplasma. Em2008, foi inaugurado o maior
banco de germoplasma do mundo localizado emSvalbard (Noruega).
31
Resources (Comit Internacional de Recursos Genticos de Plantas) e de um acordo
internacional para a conservao e acesso diversidade das culturas que a construo tornou-
se possvel.
FIGURA 2.1 Esquema ilustrativo do silo de sementes de Svalbard. (1) O teto da entrada do silo
possui ao altamente refletivo, espelhos e prismas. Nos meses de vero, a luz polar refletida
enquanto que, nos meses de inverno, mais de 200 cabos de fibras ticas tornam a luz turquesa-
esverdeada ou branca. (2) Umtnel de 93,3 m cortado dentro da montanha e se liga a uma entrada
de 26 mpara os trs silos. Cada silo temaproximadamente 10 mde largura, 26 mde comprimento
e 6 m de altura. (3) Escritrio localizado a 80 m da entrada e que tem como funo receber as
sementes dos bancos degermoplasma de todo omundoefazer o inventrio. (4) Osilo temcapacidade
para armazenar cerca de 4,5 milhes de amostras de sementes. Cada amostra tem uma mdia de
500 sementes, totalizando 2,25 bilhes de sementes. (5) As sementes sero armazenadas a 18 C,
emembalagens de4 filmes depapel alumnio, colocadas emcaixas seladas ecolocadas nas prateleiras.
Abaixa temperatura e umidadepermitiropouca atividade metablica mantendo as sementes viveis
por dcadas, sculos ou, emalguns casos, milnios.
Osilo de sementes de Svalbard o maior silo para sementes do mundo, e foi construdo
prximo pequena vila de Longyearbyen, no remoto arquiplago rtico de Svalbard, a
apenas cerca de 1120 km ao sul do plo norte. O silo de Svalbard tem como objetivo
32
salvaguardar a biodiversidade das espcies de plantas cultivadas que servemcomo alimento
para as populaes do mundo e seus pases e preservar cerca 90%das sementes conhecidas
existentes no mundo, doadas pelos pases produtores.
Osilo uma estrutura inteiramente subterrnea e foi escolhido por ser umlugar a salvo
das possveis alteraes climticas causadas pelo aquecimento global e/ou quaisquer outras
causas. Osilo temcapacidade para abrigar 2,25 bilhes de sementes. As cmaras estaro a
uma temperatura de -18C, e se por alguma razo o sistema eltrico de refrigerao falhar, o
montante de geloe neve que, naturalmente, recobre o silo permafrost manteras sementes
entre -4 e -6C. O silo componente essencial de um sistema global e racional para a
conservao da diversidade das espcies cultivadas e ser mantido comrecursos do Comit
Internacional, o qual est comprometido emdar apoio aos custos operacionais e emassistir
os pases emdesenvolvimento como preparo, empacotamento e transporte das sementes
para o rtico.
Todas as sementes armazenadas no silo permanecero de propriedade do pas ou
instituio remetente das mesmas. No haver mudana de propriedade embora, emtodos
os casos, qualquer semente aceita para armazenamento no silo dever estar livremente
disponvel sob os termos do Comit Internacional de Recursos Genticos de Plantas. Em
outras palavras, no haver sementes no silo que no estaro facilmente acessveis por meio
de umsimples contato direto como banco que as enviou. Essas instituies, mandamsuas
colees de sementes para o silo coma finalidade de usar da segurana que ele oferece.
Armazenar as sementes livre de custos para os bancos e uma ao voluntria. Ainstituio
depositria assina umcontrato como NordGen, que o responsvel pelo gerenciamento do
silo, mas ningumtemo direito de abrir as caixas quando elas chegamao banco.
33
PROBLEMASPROPOSTOS
1. Por que importante para a gentica a existncia de variao?
2. Explique por que a variao gentica herdvel e a variao ambiental no herdvel.
3. Uma vaca, durante a sua vida, produziu 5 bezerras e 3 bezerros, e o peso dos animais
no momento do nascimento foi diferente. Qual a natureza dessa variao? Qual seria
sua resposta, se fosse considerada a variao no peso ao nascer dos 8 leites de uma
leitegada de uma porca?
4. Qual a principal atividade do Centro Nacional de Pesquisa de Recursos Genticos e
Biotecnologia (CENARGEN)? Oque faz o profissional que trabalha nesse centro?
5. Explique qual a importncia de conservar o germoplasma das espcies cultivadas e
de seus parentes prximos.
35
Gentica Molecular
3.1 INTRODUO
Embiologia, bastante conhecido o lema estrutura e funo esto intimamente
relacionados. Isso significa que qualquer funo biolgica realizada, por exemplo, por
umrgo que possui uma estrutura adequada para a suafuno. No caso docontrole gentico
dos caracteres, sabemos que ele ocorre graas existncia de unidades hereditrias, os
genes, que tambmseguemo mesmo lema. Alis, qualquer estrutura biolgica depende, em
primeiro lugar, da sua composio qumica. Assim, para entendermos bemo funcionamento
do gene devemos estender o lema composio qumica, estrutura e funo esto
intimamente relacionados. Portanto, para que possamos conhecer a base molecular da
herana, precisamos responder s seguintes perguntas: Qual a constituio qumicae estrutura
do gene - material gentico? Como ele funciona para produzir os fentipos que ns
observamos? E, finalmente, qual a base da variabilidade gentica?
Antes de procurar entender esses fenmenos importantes, necessrio salientar que a
maioria desses conhecimentos foi obtida mediante pesquisas realizadas combactrias e vrus,
principalmente, porque esses organismos apresentamuma srie de caractersticas que os
tornam atrativos aos estudos genticos. Entre essas caractersticas, destacam-se o ciclo
reprodutivo muito curto e o fcil manuseio em laboratrio de um grande nmero de
descendentes, associados menor complexidade e organizao do material gentico.
Agentica molecular o ramo que evolui mais rapidamente, no sdentro da gentica,
mas tambmde toda a biologia. Ovolume de trabalhos cientficos publicados nessa rea
enorme, de modo que as informaes logo esto ultrapassadas. Assim, neste captulo
procuraremos dar uma viso geral dos princpios fundamentais da gentica molecular,
lembrando aos leitores que h necessidade de manter contato constante coma literatura para
se atualizar comas novas descobertas.
3.2 NATUREZAQUMICADOMATERIALGENTICO
Em1928, a elucidao da natureza qumica do material gentico comeou a tomar
forma. Trabalhando coma bactria causadora da pneumonia emmamferos, Streptococcus
3 GENTICA MOLECULAR
36
pneumoniae, o pesquisador Griffith demonstrou que a virulncia dessa bactria emratos
depende da presena de uma cpsula composta de polissacardeos que impede a fagocitose
da bactria. As colnias dessas bactrias exibemuma superfcie lisa e so designadas S. Por
outro lado, existembactrias no virulentas, porquesofagocitadas, emrazodenopossurem
a cpsula de polissacardeos. Essas bactrias produzemcolnias comsuperfcierugosa, sendo
designadas R. Griffith verificou que, injetando emratos bactrias Rvivas, ou bactrias S
mortas pelo calor, estas no lhes causavama morte. Entretanto, quando bactrias Rvivas e S
mortas pelocalor foraminjetadas, simultaneamente, os ratosmorriamdepneumonia, indicando
que algumas bactrias R haviamse transformado no tipo virulento S (Figura 3.1). Essas
bactrias S isoladas a partir do sangue dos ratos mortos, aliada capacidade delas em
produzir novas transformaes de bactrias R para S, indicaram que a transformao
provocava uma mudana gentica permanente e hereditria.
Por meio desseexperimento, ficou demonstrado que deveriaexistir algumcomponente
nas bactrias Sque transformava as bactrias Remvirulentas. No entanto, esse componente
denominado princpio transformante, s foi identificado dezesseis anos depois, em1944, por
trs pesquisadores: Avery, MacLeod e McCarty. Eles isolaramdiferentes classes de molculas
FIGURA 3.1. Esquema do experimento realizado por Griffith, que demonstrou a transformao
bacteriana.
37
Gentica Molecular
encontradas nos restosde bactrias Smortas pelo calor e testaramcada classe separadamente
para verificar suacapacidade transformante. Testesde molculaspurificadas de polissacardeos,
DNA, RNAe fraes proticas revelaramque somente o DNApodia transformar clulas R
para o tipo S.
Esses resultados foramtambmconfirmados por meio de outro experimento, no qual
eles usaramenzimas que degradamcertostipos especficos de molculas. Entre essas enzimas,
incluiu-se DNase - desoxirribonuclease, que degrada DNA, mas no RNAou protenas;
RNase -ribonuclease, que degrada somente RNA; e protease, que degrada apenas protenas.
Atransformao de bactria Rno tipo virulento S s no ocorreu empresena de DNase,
demonstrando queessa enzima havia destrudo a informao gentica contida no DNA(Figura
3.2). Apesar desses resultados conclusivos, a dvida entre DNAou protena como material
gentico ainda continuou por alguns anos (Box3.1).
FIGURA 3.2. Experimento de Avery, Mac Leod e McCarty que comprovou ser o DNA o
material gentico primrio. Observe que somente o DNAfoi capaz de transformar as bactrias
R em S. Veja tambm que em presena da DNase no ocorre transformao, uma vez que
esta enzima degrada o DNA.
38
BOX 3.1. PROVA QUE O DNA O MATERIAL GENTICA E NO A PROTENA
Advida entre protena ou DNAcomo material gentico s foi definitivamente
elucidada como trabalho de Hersheye Chase em1952. Eles realizaramumexperimento
usando o bacterifago- partcula viral quese reproduz na clulabacteriana. Obacterifago
ou, simplesmente, fago organismo bastante simples, constitudo apenas de uma capa
protica, no interior da qual se aloja uma molcula de DNA. Hershey e Chase
demonstraramque a reproduo do fago pela bactria hospedeira dependia apenas da
introduo do DNAviral, o qual fornecia todas as informaes genticas necessrias
formao de fagos novos. Segundo esses pesquisadores, a capa protica do fago
permanece no exterior da bactria infectada e, portanto, nada tem a ver com as
informaes genticas necessrias sua reproduo. Para chegar a essas concluses,
Hershey e Chase produziramduas populaes diferentes de fagos. Uma coma capa
protica marcada comenxofre radioativo (
35
S) e outra comDNAmarcado comfsforo
radioativo (
32
P). Essas duas populaes de fagos foram posteriormente usadas para
infectar duas colnias bacterianas, separadamente, e os novos descendentes dos fagos
foramavaliados quanto radioatividade.
Apopulao de fagos marcada comfsforo radioativo produziu descendentes
altamente radioativos, demonstrando que o DNAmarcado havia penetrado na bactria
e comandado a sntese de novos fagos. Por outro lado, a populao marcada com
enxofre radioativoproduziuuma descendncia praticamentedesprovidade radioatividade.
Esses resultados mostraramclaramente que o DNA tambmo material gentico desse
fago e no a protena, porque ela no foi passada para os fagos filhos.
39
Gentica Molecular
As pesquisas realizadas por Stadler e Uber, em1942, tambm, forneceramevidncias
sobre a natureza do material gentico emeucariotos. Mutaes gnicas foraminduzidas,
irradiando-se plen de milho comraios ultravioleta, os quais so absorvidos pelo DNA.
Esses gros de plen foram utilizados na polinizao de plantas que geraram alguns
descendentes mutantes. Ficou assimdemonstrado que o DNA tambmo material gentico
emeucariotos, e que qualquer alteraonessa macromolcula transmitida aos descendentes.
Nos tempos atuais, no existe a menor dvida de que o DNA o material gentico dos
organismos vivos e a prova direta foi fornecida a partir dos trabalhos de produo de
transgnicos que consiste na transferncia de genes DNA entre diferentes espcies, que
se iniciarama partir da dcada de 1980.
Capa protica
radioativa
40
H, contudo, excees apenas emalguns vrus, nos quais o material gentico primrio
o RNA, emvez de DNA(Box 3.2).
BOX 3.2. PROVA DE QUE O RNA DO VRUS DO MASAICO DO FUMO (TMV)
O MATERIAL GENTICO.
OTMV constitudo por uma molcula de RNAenvolta por uma capa protica, a
qual protege o material gentico da degradao por enzimas - ribonucleases. OTMV
possui vrias estirpes e cada uma possui a sua capa protica especfica. Cada estirpe
capaz de infectar uma cultivar particular de fumo, por meio de sua capa protica.
Empregando mtodos bioqumicos, Fraenkel-Conrat e outros mostraramque a protena
podia ser separada do RNA, mas noera infectante por si s. Somente quando combinada
comRNAisolado, reconstituindo-seo vrus, que ainfectividadeocorria, sendo produzidas
novas partculas virais. Mais tarde, experimentos de Fraenkel-Conrat e Singer mostraram
que TMVs reconstitudos comRNAde uma estirpe (A) e protena de outra (B) eram
infectivos, mas suas prognies eraminteiramente determinadas pelo RNAdo genitor (A)
e no pela protena do genitor (B), demonstrando o papel gentico desse cido nuclico.
41
Gentica Molecular
3.3 COMPOSIO QUMICA E ESTRUTURA DOS CIDOS
NUCLICOS
Oconhecimento das molculas constituintes dos cidos nuclicos e as ligaes entre
elas, emconsequncia de suas propriedades, so fundamentais para entendermosas estruturas
tanto do DNAquanto dos RNAs. Essasestruturas, por sua vez, soresponsveis pelas funes
desses cidos e nos ajuda a compreend-los como as molculas responsveis pela vida.
3.3.1 DNA
ODNA composto de monmeros chamadosnucleotdeos. Cadanucleotdeo contm
um cido fosfrico, um acar de cinco carbonos - desoxirribose - e uma das quatro
bases nitrogenadas: adenina (A), guanina (G), timina (T), e citosina (C) (Figura 3.3).
Adenina e guanina pertencemao grupo chamado de purinas, enquanto a timina e citosina
so do grupo das pirimidinas.
Aestrutura molecular do DNAfoi proposta por Watson e Crick em1953. Para isso,
eles consideraramas propriedades qumicas dos seus componentes e, principalmente, as
evidncias obtidas por Chargaff e colaboradores sobre a composio de bases do DNAde
diferentes espcies e, tambm, os resultados dos estudos de difrao de raios X tipo de
radiografia feitos por Frankline Wilkins.
FIGURA 3.3. Estrutura qumica dos quatro desoxirribonucleotdeos que constituemo DNA. Em
dois, participamas bases nitrogenadas pricas e correspondem a desoxiadenosina 5monofosfato
(A) e a desoxiguanosina 5 monofosfato (B); nos outros dois as bases nitrogenadas so pirimdicas
e compreendem a desoxicitidina 5 monofosfato (C) e a timidina 5 monofosfato (D).
42
Aprincipal contribuio de Chargaff foi a evidncia de que a quantidade deA igual
de T e a quantidade de G igual de C, independente da espcie. Portanto, A/T=1 e G/
C=1. J os estudos comdifrao de raios Xmostraramque a molcula do DNA helicoidal
(Figura 3.4).
Figura 3.4 Fotografia com raios X do DNAtipo B ou hidratado, derivado de timo de bovino. A
partir dessa fotografia foi sugerido que a molcula helicoidal e cada volta contm 10 pares de
nucleotdeos, ocupando umespao de 34 . Cada par de nucleotdeo ocupa umespao na molcula
de 3,4 . Foi constatado ainda que o dimetro da molcula de 20 (Frankling e Gosling 1953).
Segundo o modelo formulado por Watson e Crick, a molcula de DNA constituda
por duas cadeias enroladas para a direita, formando a chamada hlice dupla (Box 3.3 e
Figura 3.5). Analogamente, a estrutura do DNApode ser comparada a uma escada circular
com dois corrimos. Nesse caso, os corrimos correspondem s ligaes repetitivas de
acar-fosfato ao longo de todo o comprimento da molcula. Aligao do acar-fosfato
ocorre de modo tal que a posio 3' da molcula de acar liga-se ao grupamento fosfato
que, por sua vez, liga-se posio 5' da molcula de acar subsequente, isto , elas so
sintetizadas na direo de 5 para 3. Observando a Figura 3.6, nota-se que as duas cadeias
ocorrememdirees opostas, isto , enquanto uma 5' 3' a outra 3' 5'. por essa
razo que as cadeias so ditas antiparalelas.
Aparte varivel da molcula constituda por pares de bases nitrogenadas que formam
os degraus da escada. Cada degrau ocupa umespao de 3,4 de comprimento e tmentre
si umdesvio no sentido horrio de 36
. Dessa forma, uma volta completa - 360

o
- envolve
dez degraus perfazendo 34 de comprimento.
: :
43
Gentica Molecular
BOX 3.3. TRABALHO DE WATSON E CRICK, PUBLICADO NANATURE EM 1953
PROPONDO A ESTRUTURA DO DNA.
MOLECULAR STRUCTURE OF
NUCLEIC ACIDS
A Structure for Deoxyribose Nucleic Acid
E wish to suggest a structure for the salt of
deoxyribose nucleic acid (D.N.A.). This
structure has novel features which are of conside-
rable biological interest.
A structure for nucleic acid has already been
proposed by Pauling and Corey
1
. They Kindly
made their manuscript available to us in advance of
publication. Their model consists of three
intertwined chains, with the phosphates near the
fibre axis, and the bases on the outside. In our
opinion, this structure is unsatisfactory for two
reasons:(1) We believe that the material which
gives the X-ray diagrams is the salt, not the free
acid. Without the acidic hydrogen atoms it is not
clear what forces would hold the structure toge-
ther, especially as the negatively charged phosphates
near the axis will repel each other. (2) Some of the
van der Waals distances appear to be too small.
Another three-chain structure has also been
suggested by Fraser (in the press). In his model the
phosphates are on the outside and the bases on the
inside, linked together by hydrogen bonds. This
structure as described is rather ill-defined, and
for this reason we shall not comment on it.
inside of the helix and the phosphates on the
outside. The configuration of the sugar and the
atoms near it is close to Fubergs standard
configuration the sugar being roughly
perpendicular to the attached base. There is a
residue on each chain every 3.4 . in the z-direction.
We have assumed an angle of 36 between adjacent
residues in the same chain, so that the structure
repeats after 10 residues on each chain, that is, after
34 . The distance of a phosphorus atom from the
fibre axis is 10 . As the phosphates are on the
outside, cations have easy access to them.
The structure is an open one, and its water
content is rather high. At lower water contents we
would expect the bases to tilt so that the structure
could become more compact.
The novel feature of he structure is the manner in
which the two chains are held together by the purine
and pyrimidine bases. The planes of the bases are
perpendicular to the fibre axis. They are joined
together in pairs, a single base from one chain being
hydrogen-bonded to a single base from the other
chain, so that the two lie side by side with identical z-
co-ordinates. One of the pair must be a purine and
the other a pyrimidine for bonding to occur. The
hydrogen bonds are made as follows: purine
position 1 to pyrimidine position 1 purine position 6
to pyrimidine position 6.
If it is assumed that the bases only occur in the
structure in the most plausible tautomeric forms
(that is, with the keto rather than the enol
configurations) it is found that only specific pairs of
bases can bond together. These pairs are: adenine
(purine) with thymine (pyrimidine), and guanine
(purine) with cytosine (pyrimidine).
In other words, if an adenine forms one member
of a pair, on either chain, then on these assumptions
the other member must be thymine; similarly for
guanine and cytosine. The sequence of bases on a
single chain does not appear to be restricted in any
way. However, if only specific pairs of bases can be
formed, it follows that if the sequence of bases on
one chain is given, then tho sequence on the other
chain is automatically determined.
It has been found experimentally
3,4
that the ratio
of the amounts of adenine to thymine, and the ratio
of guanine to cytosine, are always very close to unity
for deoxyribose nucleic acid.
It is probably impossible to build this structure
with a ribose sugar in place of the deoxyribose, as
the extra oxygen atom would make too close a van
der Waals contact.
The previously published X-ray data
5,6
on
deoxyribose nucleic acid are insufficient for a
rigorous test of our structure. So far as we can tell, it
is roughly compatible with the experimental data,
but it must be regarded as unproved until it has
been checked against more exact results. Some of
these are given in the following communications. We
were not aware of the details of the results presented
there when we devised our structure, which rests
mainly though not entirely on published
experimental data and stereo-chemical arguments.
It has not escaped our notice that the specific
pairing we have postulated immediately suggests a
possible copying mechanism for the genetic
material.
Full details of the structure, incluiding the
conditions assumed in building it, together with a set
of co-ordinates for the atoms, will be published
elsewhere.
We are much indebted to Dr. Jerry Donohue for
constant advice and criticism, especially on
interatomic distances. We have also been stimulated
by a knowledge of the general nature of the
unpublished experimental results and ideas of Dr.
M. H. F. Wilkins, Dr. R. E. Franklin and their co-
workers at Kings College, London. One of us
(J.D.W.) has been aided by a fellowship from the
National Foundation for Infantile Paralysis.
J. D. Watson
F. H. C. Crick
Medical Research Council Unit for the Study of the Molecular Structure of Biological
Systems, Cavendish Laboratory, Cambridge. April 2.
1
Paulling, L., and Corey, R. B., Nature, 171, 346 (1958); Proc. U.S. Nat. Acad. Sci., 39, 84
(1953)
2
Furberg, S., Acta Chem. Scand., 6, 634 (1952).
3
Chargaff, E., for references see Zamenhof, S., Brawerman, G., and Chargaff, E.,
Biochim. et Biophys. Acta, 9, 402 (1952).
4
Wyatt, G. R., J. Gen. Physiol., 36, 201 (1952).
5
Astbury, W. T., Symp. Soc. Exp. Biol. 1, Nucleic Acid, 66 (Camb. Univ. Press. 1947).
6
Wilkins, M. H. F., and Randall, J. T., Biochim. et Biophys. Acta. 10, 192 (1953).
W
We wish to put forward a radically
different structure for the salt of
deoxyribose nucleic acid. This
structure has two helical chains each
coiled round the same axis (see
diagram). We have made the usual
chemical assumptions, namely, that
each chain consists of phosphate
diester groups joining !-D-
deoxyribofuranose residues with 3,5
linkages. The two chains (but not
their bases) are related by a dyad
perpendicular to the fibre axis. Both
chains follow righthanded helices, but
owing to the dyad the sequences of
the atoms in the two chains run in
opposite directions. Each chain
loosely resembles Furbergs
2
model
No. 1; that is, the bases are on the
This figure is purely
diagrammatic. The two
ribbons symbolize the
two phosphate sugar
chains, and the
horizontal roads the
pairs of bases bolding
the chains together.
The vertical line marks
the fibre saxis.
44
FIGURA 3.5. Esquema da hlice dupla de DNA, evidenciando o dimetro da molcula de 20
, o espao ocupado por um par de nucleotdeos de 3,4 e o espao ocupado por dez pares de
nucleotdeos de 34 , que corresponde a uma volta completa.
FIGURA 3.6. Molcula de DNA mostrando os quatro pares de nucleotdeos e a orientao
antiparalela das cadeias acar-fosfato, isto , a direo 5 3 como indicado pelas setas. :
10 pares
de base
3
5
45
Gentica Molecular
Odimetro da hlice dupla de 20 , fato que levou Watson e Crick a estabelecer
que purinas e pirimidinas estejampareadas no interior da molcula. Esse pareamento feito
por pontes de hidrognio que, apesar de ser uma ligao fraca, confere alta estabilidade
molcula, emrazo do grande nmero emque ocorrem. Almdessas pontes, outra fora que
tambm responsvel pela alta estabilidade do DNAso as interaes hidrofbicas, isto
, as bases nitrogenadas fogemdo meio aquoso e, por isso, ficamno interior da molcula.
Duas pontes de hidrognio so responsveis pelo pareamento exclusivo entre adenina
e timina e trs entre citosina e guanina (Figura 3.6). Emoutras palavras, as basesda cadeia
dupladeDNAdevemter uma relao quantitativa, sendo A= Te G= C, de acordo comos
achados de Chargaff. Note, entretanto, que no existe restrio quanto s propores do
par ATemrelao ao par GC, de modo que a quantidade deA+Tno temnenhuma relao
coma quantidade G+ C. De fato, essa relao pode ter qualquer valor, dependendo de qual
espcie o DNAfoi obtido. Consequentemente, embora a ordemlinear de bases emuma das
cadeias seja irrestrita, a sequncia de bases na cadeia oposta predeterminada ecomplementar.
Assim, se emuma das cadeias temos, por exemplo, a sequncia 5' AGCATT3' a sequncia na
outra cadeia ser necessariamente 3' TCGTAA5'.
Adiversidade de informaes determinada pela sequncia de bases nitrogenadas, a
qual, como j foi dito, pode ocorrer em qualquer ordem linear em uma das cadeias.
Teoricamente, o nmero possvel de sequnciasdiferentes - ou informaes - extremamente
grande, e depende do nmero de pares de nucleotdeos existentes nas molculas de DNAdo
organismo (Box 3.4). Esse nmero varia de acordo comsua complexidade (Tabela 3.1).
Assim, organismos simples como os bacterifagos possuem200 mil pares de nucleotdeos
por unidade, as bactrias possuemalguns milhes e fungos tmde dezenas a centenas de
Organismo Nmero de pares de nucleotdeos
Homem 5,81 x 10
9
Bovinos 5,08 x 10
9
Aves 2,36 x 10
9
Carpa 2,90 x 10
9
Lrio 3,60 x 10
11
Milho 1,36 x 10
10
Fumo 2,18 x 10
9
Drosophila melanogaster 3,40 x 10
8
Neurospora 8,60 x 10
7
Carvo do milho (Ustilago maydis) 3,80 x 10
8
Escherichia coli 4,30 x 10
6
Bacterifago T
2
2,00 x 10
5
TABELA3.1. Nmero de pares de nucleotdeos por clula somtica de diferentes organismos.
46
milhes. J, osorganismos mais complexos, como mamferos, anfbios e as plantas, o nmero
de pares de nucleotdeos ainda maior, podendo atingir algumas centenas de bilhes por
clula diplide.
BOX 3.4. A CAPACIDADE DO DNA EM CODIFICAR INFORMAES EM
COMPARAO COMADAINFORMTICA.
Neste ponto, devemos chamar a ateno para umfato que normalmente passa
despercebido no s para os leigos, mas principalmente pelos bilogos. Geralmente, nos
surpreendemos comacapacidade dos computadores modernos emarmazenar e processar
informaes. Como eles trabalhamemumsistema binrio - isto , cada impulso eltrico
ou bit pode estar ligado ou desligado -, o nmero de informaes que conseguem
processar 2
n
, em que n representa o nmero de bits que possuem. Contudo, se
compararmos esses computadores comos sistemas biolgicos, nota-se que esses ltimos
so bem mais eficientes. Nos organismos vivos, as informaes so codificadas por
intermdio de umsistema quaternrio, isto, as quatro bases nitrogenadas que compem
o DNAA, G, T, C- de modo que o nmero de informaes capazes de ser processadas
4
n
, emque n representa o nmero de pares de nucleotdeos contidos no genoma da
espcie. Assim, pode-se verificar que, se umorganismo qualquer possuir umnmero de
pares de nucleotdeos igual ao nmero de bits de umcomputador, esse organismo ser
capaz de processar o quadrado das informaes do computador, isto , 4
n
= (2
n
)
2
.
Tomando comoexemplo a espcie humana, o nmero de DNAs potencialmente diferentes
na espcie praticamente infinito e equivale a 4
2,9bilhes
.
Essas comparaes salientam a perfeio do sistema de codificao das
informaes genticas e a capacidade de armazen-las emuma estrutura de dimenses
microscpicas, emoposio aos computadores que, por menores que sejam, so muito
maiores do que as clulas. Alm disso, demonstram tambm o incrvel potencial de
variabilidade dos seres vivos.
3.3.2 RNA
ORNA bastante similar ao DNA, pormdifere emtrs pontos principais: o acar
a ribose; emvez de timina temos a pirimidina uracila (U); e caracteriza-se por apresentar
uma nica cadeia, de modo que as razesA/Ue G/Cgeralmente diferemde um(Figura 3.7).
Existemtrs tipos principais de RNA, cada umcomfuno especfica, oRNAmensageiro,
o RNAribossmico e o RNAtransportador. Almdesses tipos, h algumas dezenas de
47
Gentica Molecular
RNAs denominados de pequenos e que participamprincipalmente emfuno enzimtica no
ncleo e citoplasma (Box 3.5). Todos so transcritos a partir de uma das cadeias do DNA.
FIGURA 3.7. Molcula de RNA mostrando os quatro tipos de nucleotdeos. Observe que ao
contrrio do DNA, a molcula apresenta uma nica cadeia, presena da ribose que possui OH
na posio 2, e presena de uracila (U), que possui um tomo de H na posio 5.
3.3.2.1 RNA mensageiro (mRNA)
responsvel pelo transporte da informaogentica contida no ncleoat ocitoplasma,
para direcionar a sntese protica. So bastante instveis em sistemas bacterianos e de
estabilidade variada emorganismos superiores, da a quantidade relativamente pequena de
mRNAnas clulas, cerca de 2%emrelao ao total.
48
3.3.2.2 RNA ribossmico (rRNA)
O RNAribossmico constitui-se na maior poro do RNAcelular. Ele tambm
transcrito de uma das cadeias do DNA, nesse caso, a partir do DNAque se encontra em
uma posio especfica de alguns cromossomos, a constrio secundria, tambmchamada
de regio organizadora do nuclolo. Aps o seu acmulo no nuclolo e a associao com
protenas ribossmicas, eles so transportados para o citoplasma e formamo ribossomo,
cuja funo principal participar da sntese de protenas.
3.3.2.3 RNA transportador (tRNA)
So molculas pequenas de RNA- contm73 a 93 nucleotdeos - que servemcomo
receptores e transportadores de aminocidos, tendo papel fundamental na sntese protica.
Existe pelo menos umtRNApara cada umdos vinte aminocidos e cada umdeles temuma
estrutura ligeiramente diferente do outro. Uma caracterstica interessante dos tRNAs que
eles se enrolamsobre si mesmos, ocorrendo pareamento de bases na ordemde 50%. Esse
pareamento faz comque a estrutura secundria de todos os tRNAs se assemelhe a uma folha
de trevo (Figura 3.8a).
Ofololo central possui uma sequncia desete nucleotdeos, dos quaistrs so chamados
de anticdone reconhecemtrs nucleotdeos do mRNA, ocdon, tambmpelo processo de
pareamento de bases no sentido antiparalelo. A base da folha de trevo formada pelas
extremidades da molcula, que so idnticas emtodos os tRNAs. Aextremidade 5' possui a
base G e, a 3' a sequncia 5CCA3', sendo a base A o stio de ligao do aminocido.
Funcionalmente, entretanto, o tRNAocorre emformato de Linvertido, que corresponde sua
estrutura terciria (Figura3.8b). As duas partesdo Lcorrespondema doissegmentos emhlice
dupla, perpendiculares e cada uma comaproximadamentedez pares de base e uma volta. Uma
das extremidades doLcorrespondeaolocal ondeseligao aminocido, a extremidade5CCA3',
e a outra extremidade o anticdon. Essas duas posies fundamentais do tRNA so
diametralmente opostas e facilitamo seufuncionamento no processo de sntese de protenas.
H evidncias de que a regio interna do L o local no qual se liga a enzima aminoacil-tRNA
sintetase, essencial para reconhecer o aminocido e uni-lo ao tRNA(Figura 3.8b).
49
Gentica Molecular
FIGURA 3.8 A. Esquema da estrutura secundria do tRNA mostrando o stio de ligao do
aminocido (extremidade 3), e o anticdon. B - Estrutura terciria do tRNA.
BOX 3.5. ALGUNSTIPOS DE RNAs PEQUENOS
Algumas dezenas de RNAs pequenos j so conhecidos. Entre eles umdos grupos
mais estudados aquele envolvido como processamento do pr-mRNA. Na realidade,
o processamento realizado por uma ribonucleoprotena constituda por cinco RNAs
pequenos nucleares (snRNAs) denominados de U1, U2, U4, U5 e U6, associados a
mais de uma centena de protenas/enzimas. Essa ribonucleoprotena denominada de
spliceossomoouSNURPS. No nuclolo, ocorretambmuma estruturaribonucleoprotica
que processa o pr-rRNA. Igualmente ela constituda por protenas/enzimase os RNAs
nucleolares pequenos (snoRNAs).
Ainda no ncleo so encontrados RNAs pequenos comfunes enzimticas como
as ribozimas, que atuamtambmnoprocessamento do pr-mRNAde alguns organismos,
50
coma funo especfica de cortar o pr-mRNAemuma sequncia especfica. Uma das
ribozimas mais conhecidas a denominada cabea de martelo, a qual comercializada
para ser utilizada emtransgnicos como fimde cortar umdado mRNAvisando a eliminar
a expreso de umgene. Outro RNApequeno utilizado emtransgnico visando tambm
eliminar a expresso de umdeterminado gene o denominado RNAinterferente (RNA
i
),
o qual tambmatua no ncleo promovendo a degradao de mRNAs.
J no citoplasma, umdos RNAs pequenos mais conhecidos aquele que faz parte
de uma ribonucleoprotena, cuja funo encaminhar certas protenas que esto sendo
sintetizadas para dentro do retculo endoplasmtico. Esse RNA denominado de scRNA
e a ribonucleoprotena denominada deSCYRPS. importante lembrar que esse retculo
endoplasmtico frequentemente denominado de rugoso exatamente porque essa
ribonucleoprotena est atuando e forando o ribossomo a ficar associado ao retculo.
3.4 FUNESDOMATERIALGENTICO
As principaisfunes do material genticopodemser visualizadas noseguinte diagrama,
correspondendo s funes fundamentais da biologia e da vida:
3.4.1REPLICAODODNA
Aestrutura do DNAproposta por Watson e Crick oferece a vantagem de explicar
como novas molculas de DNApodemser exatamente copiadas da molcula pr-existente.
Emvez de a molcula se replicar intacta, eles propuseramque as pontes de hidrognio se
rompem, permitindo que as cadeias complementares se separem. Opareamento especfico
entre as bases permite que cada cadeia simples sirva de molde para a sntese da cadeia
complementar, sendo que a nova molcula apresenta uma cadeia velha e uma cadeia nova.
Esse tipo de replicao chamada semiconservativa e est representado na Figura 3.9.
Mais detalhes so apresentados no Box 3.6.
Por esse processo de replicao do DNA, fcil entender como a informao
transportada de uma clula para outra. No momento emque antecede s divises celulares
- na fase Sda intrfase - ocorre a replicao do DNA, de modo que as clulas filhas recebem
todas as informaes contidas na clula original. Almdisso, na replicao semiconservativa
a possibilidade de erros muitopequena, o que explica a preciso na passagemda informao
de uma clula para outra.
Replicao
Transcrio Traduo
DNA RNA PROTENA
51
Gentica Molecular
FIGURA 3.9. Replicao semiconservativa da molcula de DNA. Observe que cada molcula
nova mantm uma cadeia de molcula velha (cinza) que funciona como molde para a sntese
da cadeia complementar (branca).
A enzima responsvel pela sntese de DNA conhecida como DNA polimerase.
Essa enzima no pode iniciar a sntese de uma nova molcula de DNApor si s; ela apenas
adiciona novos nucleotdeos a uma pequena cadeia pr-existente conhecida comoprimerou
iniciador. Aeste primer - constitudo de umsegmento de RNAde cerca de 10 bases - so
adicionados nucleotdeos pela DNApolimerase emuma sequncia complementar cadeia
molde, segundo as regras do pareamento especfico de Watson e Crick. Os nucleotdeos
so acrescentados extremidade 3' da cadeia emcrescimento, de modo que a sntese sempre
caminha na direo 5' : 3'. Evidentemente a cadeia molde lida pela DNApolimerase na
direo 3' 5'.
Desde que no se conhea nenhuma enzima que sintetize DNAna direo 3' 5', uma
perguntaquelogosurge: comosedasntesedasduascadeiasemcadaforquilhadereplicao?
Arespostapara essa questo surgiucoma descoberta deOkazaki, umcientista japons, que a
sntese deuma dascadeias contnua, enquanto a outra descontnua (Figura3.10a). Nacadeia
sintetizada descontinuamente, surgemdiversos fragmentos contendo cercade mil nucleotdeos
conhecidos comofragmentos de Okazaki. Esses fragmentos, a exemplo dacadeia sintetizada
continuamente, so tambmformadosna direo 5' 3' pelaDNApolimerase.
:
:
:
52
Emprocariotos, ocorremtrs tipos de DNApolimerase e a principal, que replica o
DNA, a DNApolimerase III. Sabe-se que essa enzima , na verdade, umdmero, isto ,
duas molculas funcionais trabalhando unidas. Nesse dmero, uma unidade responsvel
BOX 3.6. PROVA QUE A REPLICAO DO DNA SEMICONSERVATIVA
Na literatura, soencontrados vrios experimentos que demonstramser a replicao
do DNAsemiconservativa, e umdos mais clssicos foi realizado por Meselsone Stahl em
1958. Eles sabiamque, quando bactrias so cultivadas emmeio contendo
15
N, seu DNA
mais denso que aquele de bactrias cultivadas emmeio com
14
N. ODNApesado pode
ser separado do DNAleve por meio da centrifugao emsoluo que forma gradiente de
densidade, como ocloreto de csio. Inicialmente Meselsone Stahl cultivaramE. coli num
meio contendo
15
Npor vrias geraes, de maneira que todo o DNAficasse pesado. Em
seguida, transferiramessas bactrias para ummeio contendo
14
Ne deixaramque elas se
multiplicassempor uma gerao. Amostras do DNAdas bactrias filhas foramobtidas e
submetidas centrifugao. O resultado mostrou que o DNA apresentava densidade
intermediria quando comparado comDNAexclusivamente de
14
Nou
15
N, isto, o DNA
apresentava molculas hbridas compostas ao mesmo tempo, de
14
Ne
15
N, como ilustrado
a seguir e provaram, comesse resultado, que a replicao semiconservativa.
53
Gentica Molecular
pela sntese da cadeia contnua e a outra, pela sntese da descontnua. Como as cadeias
moldes so antiparalelas, a pergunta como o dmero DNApolimerase III produz as duas
cadeias filhas no sentido 5 3 e antiparalelas s cadeias moldes? Uma hiptese a cadeia
molde da descontnua dobrar-se, formando umanel, prximo da forquilha de replicao, de
forma que umsegmento de cerca de 1000 bases assume a mesma direo da cadeia molde
complementar (Figura3.10b). Aps sintetizado essefragmento de Okazaki, aDNApolimerase
III desprende-se da cadeia molde, aqual forma umnovo anel para dar sequncia replicao.
Os vrios fragmentos de Okazaki so ligados pela enzima DNAligase, formando, assim, a
cadeia descontnua no interrompida.
Areplicao do DNAno eucarioto realizada pela DNApolimerase alfa pol
que sintetiza o primer para as cadeias contnua e descontnua, a DNApolimerase delta
pol que sintetiza a cadeia descontnua, e a DNA polimerase psilon pol e que
sintetiza a cadeia contnua. Oprocesso similar ao que ocorre emprocariotos, entretanto,
algumas dezenas de protenas e enzimas so envolvidas no processo. Mais detalhes
constantemente atualizados sobre a replicao emeucariotos so encontrados emhttp://
www.dnareplication.net.
medida que a replicao prossegue, as cadeias velhas separam-se para serviremde
molde s cadeias novas. Da surge outra pergunta: como ocorre a separao dessas cadeias,
uma vez que a molcula do DNA helicoidal? Aprimeira impresso que se tem que
medida que a separao das cadeias prossegue a parte da molcula ainda no replicada fica
superenovelada. Na verdade, logo frente da DNApolimerase III uma protena, ahelicase,
desenrola as cadeias. No entanto, para evitar o superenrolamento, frente da helicase, a
enzima DNAgirase realiza o corte de uma das cadeias da molcula, relaxando-a e, inclusive,
enovelando-a ao contrrio, efeito denominado enovelamento negativo, para facilitar a
separao das cadeias moldes pela helicase.
Pelo envolvimento dessas poucas enzimas e protenas na replicao, j se percebe que
ela muito complexa. O nmero de molculas envolvidas, na verdade, muito maior,
especialmente nos eucariotos, nos quais o DNAencontra-se associado s histonas. Almde
complexa, a replicao extremamente rpida. EmE. coli, por exemplo, emcondies
ideais de crescimento, estima-se que sejam adicionados cerca de 850 nucleotdeos por
segundo e a bactria gasta 100 minutos para replicar seu cromossomo. Nos eucariotos, em
razo da associao do DNAcomas histonas, a velocidade de replicao cerca de dez
vezes mais lenta do que nos procariotos.
Emprimeiro lugar, necessrio mencionar que a replicao inicia-seemlocal especfico
da molcula do DNA, a origemde replicao. Nesse local, o DNApossui uma sequncia
particular de bases que reconhecida pela DNApolimerase e demais enzimas, protenas e
cofatores envolvidos no incio da replicao. NaE. coli, que possui apenas umcromossomo
:
8
7
54
circular, existe apenas uma origemde replicao, a partir da qual a replicao bidirecional,
isto , formam-se duas forquilhas de replicao que caminhamemsentidos opostos e na
mesma velocidade.
FIGURA. 3.10. Modelo de replicao da molcula de DNA, mostrando que a direo de
sntese das cadeias sempre 5:3(A). Envolvimento do dmero DNApolimerase na replicao
das duas cadeias de DNA; observe que uma das molculas sintetiza a cadeia contnua e a
outra a cadeia descontnua por meio dos fragmentos de Okazaki; nesse ltimo caso o molde
forma um anel, para permitir a sntese tambm na direo 5: 3, e que a enzima caminhe na
direo da forquilha de replicao (B).
Amenor velocidade de replicao do DNAnos eucariotos, associada ao fato de eles
possuremmuito mais DNAdo que as bactrias, permitiu estimar que uma clula eucarioto
gastaria mais dedois meses para replicar o DNAde seus cromossomos. No entanto, sabemos
que a fase Sdo ciclo celular gasta emtorno de seis horas para replicar todos os cromossomos.
Diante desses fatos, como ocorre a replicao nos eucariotos?
Nos eucariotos, almda replicao ocorrer simultaneamente nos vrios cromossomos,
emcada umexistemat 3.000 regies, emque as replicaes iniciam-se ao mesmo tempo,
como na fava - Vicia faba-, o que viabiliza a replicao de uma enorme quantidade de DNA
emumperodo de tempo relativamente muitomenor do que nos procariotos. Ofragmento de
DNA replicado a partir de uma origem de replicao constitui um replicon. Assim, o
cromossomo da E. coli corresponde a um nico replicon, enquanto que apenas um
cromossomo de fava possui emmdia 3000 replicons (Box 3.7).
55
Gentica Molecular
3.4.2 Transcrio-Sntese de RNA
A funo de todo gene - DNA - produzir uma cadeia polipeptdica, isto , uma
protena. No entanto, emeucarioto sabemos que o DNAse encontra no ncleo das clulas,
enquanto a sntese protica se d no citoplasma. Evidentemente, o DNAno pode sair do
ncleo para dirigir a sntese protica no citoplasma. Assim, o DNAtransfere suas informaes
para molculas de RNA, as quais atravessama membrana nuclear para comandar a sntese
protica no citoplasma. Esse processo de transferncia de informaes do DNApara o
RNAchama-se transcrio.
Ao contrrio do que ocorre no processo de replicao do DNA, a transcrio no
feita ao longo de todo o comprimento da molcula de DNA, mas simde genes individuais ou
BOX 3.7. RAPIDEZ E PRECISO DA REPLICAO DO DNA
Como o DNA uma molcula que contma informao gentica codificada, cada
par de bases considerado como umaletra da mensagem. Utilizandonovamente a espcie
humana como exemplo, emcada clula somtica temos 5,81 x 10
9
pares de bases. Para
ocorrer apenas uma mitose necessrio que todo esse DNAseja replicado na intrfase
pr-mittica. Se tal mensagemfosse digitadaempginas como do presente livro, caberiam
100 pares de bases por duas linhas e 1900 pares de bases por pgina. Ototal de DNA
de uma clula somtica gastaria trs milhes de pginas ou 6.000 livros de 500 pginas,
que deveriamser digitados emseis horas. Por quantas pessoas?
necessrio considerar que na replicao ocorre erro, em mdia de um par de
bases entre cada ummilho. No total de DNAde uma clula humana esperado cerca de
12.000 nucleotdeos inseridos erradamente emcada replicao e que corresponderia a
doiserrospor livro. Seriafantsticoseopresentelivrotivesseapenas doiserros. importante
lembrar que nemtoda alterao no DNAocorrida na replicao resulta efetivamente em
erro, porque algumas delas so variaes genticas geradas que se tornamimportantes
para a sobrevivncia da espcie.
Ataxa de erro na replicao considerada baixa porque existemmecanismos de
reparo desses erros e entre eles, um dos principais executado pela prpria DNA
polimerase. Essa funo chamada de reviso editorial e semelhante a umdatilgrafo
reler o texto recm-digitado a fimde verificar se existe algumerro.
Outra funo importante da DNApolimerase a retirada do primer de RNAe sua
substituio por uma cadeia de DNA. Essa funo executada pela DNApolimerase I
emprocariotos e por outras enzimas emeucariotos.
56
FIGURA 3.11. Transcrio do pr-mRNA, utilizando como molde a cadeia antissenso do
DNA. O pr-mRNA sintetizado na direo 5 : 3, sendo assimantiparalela e complementar
cadeia antissenso do DNA.
grupos de genes seletivamente escolhidos. Para isso, a enzimaRNApolimerasese acopla
determinada regio da molcula de DNAa ser transcrita, o stiopromotor. Emprocariotos
a RNApolimerase reconhece o stio promotor na sequncia especfica T
82
T
84
G
78
A
65
C
54
A
45
que se situa na posio emtorno de -35, isto , 35 bases antes da primeira transcrita. Nessa
sequncia o nmero no ndice de cada nucleotdeo corresponde frequncia mdia que ele
ocorre nos promotores j estudados. Amesma enzima promove a separao das cadeias do
DNAna sequncia T
80
A
95
T
45
A
60
A
50
T
96
, tambmdenominada de stio TATA. Esse stio TATA
est localizado na posio emtorno de -10. Essas duas sequncias so da cadeia senso do
DNAe emumpromotor ideal elas esto distantes de 16-18 nucleotdeos. Emeucariotos o
reconhecimento do stio promotor bemcomo a separao das duas cadeias do DNA feita
por umcomplexo enzimtico e somente aps, que se liga a RNApolimerase para realizar a
transcrio.
A sntese da molcula de RNA se d na direo 5' : 3' pela incorporao de
nucleotdeos, os quais so complementares aos nucleotdeos de uma das cadeias do DNA.
A essa cadeia transcrita d-se o nome de cadeia molde ou antissenso. A transcrio
prossegue at que umponto de terminao seja encontrado. Aenzima e a molcula de RNA
so, ento, liberadas, e a molcula de DNAse refaz por meio da reconstituio das pontes
de hidrognio que haviamsido rompidas no incio do processo (Figura 3.11).
57
Gentica Molecular
Emprocariotos, a molcula de RNA transcrita a partir de umgene se constitui no
mRNA propriamente dito, sendo, em seguida, utilizada na sntese de protenas e,
posteriormente, degradada. Por outro lado, emeucariotos a situao bemmais complexa,
ocorrendo uma srie de modificaes do RNAantes que ele possa servir como mediador na
sntese de protenas.
Essas modificaes so necessrias porque a grande maioria dos genes de organismos
eucariotos interrompida, isto , o DNApossui segmentos que codificamaminocidos, os
xons, separados por regies que no os codificam, os ntrons. Os DNAs so transcritos
em uma longa molcula de RNA, com tamanhos variveis, chamada RNA nuclear
heterogneo hnRNA ou pr-mRNA-, que, por sua vez, deve ser processada para
produzir ummRNAcontendo apenas xons, ouseja, sequncias que codificamaminocidos.
Os segmentos que no codificamaminocidos, ntrons, so cortados por enzimas especficas
chamadas endonucleases. Aps os cortes, os xons so religados para formar a molcula
de mRNAcompleta.
importante lembrar que a mensagemest codificada no mRNAna sua sequncia de
bases. Portanto, no processo de retirada dos ntrons, qualquer base de umntron que no
seja retirada ou de umxon que seja erradamente retirada altera a mensagem. Assim, que
mecanismo seria to preciso para evitar erros to pequenos como esses? Observando-se a
sequncia de bases dos ntrons, constatou-se que 100% deles iniciam, em 5 com GU e
terminam em 3 com AG. Portanto, essas sequncias so fundamentais no s para a
identificao do ntroncomo tambmpara a sua correta retirada. Oreconhecimento dessas
sequncias feito por alguns dos RNAs nucleares pequenos (Boxes 3.5 e 3.8).
BOX 3.8. PROCESSAMENTO ALTERNATIVO DO pr-mRNA
Processamento alternativo significaque umnico pr-mRNApode ser processado
de formas alternativas emrgos ou organismos diferentes, resultando emmRNAs que
codificamprotenas diferentes. Umdos exemplos bemestudados ocorre como pr-
mRNAdo gene dsx emDrosophila. Opr-mRNAdesse gene temseis xons e cinco
ntrons e sofre processamentos diferentes no macho e na fmea, exatamente para
determinar a diferenciao sexual da mosca.
No processamento do pr-mRNAna fmea, o ntron3 corretamente retirado e
o mRNA fica com o xon 4 no qual existe um ponto final de traduo. Portanto, a
protena produzida contmuma sequncia de aminocidos derivada dos xons 1, 2, 3 e
4at no referido ponto final. Essa protena atua no desenvolvimento da mosca reprimindo
a expresso de genes masculinizantes.
58
Quando ocorre o processamento do pr-mRNA no macho, o spliceossomo
reconhece a extremidade 5 do ntron3 e a extremidade 3 do ntron 4 e elimina os dois
ntrons mais o xon 4 que ocorre entre esses dois ntrons. Emconsequncia, o mRNA
formado contmos xons 1, 2, 3, 5 e 6. Esse mRNAorienta a sntese de uma nova
protena cuja funo bloquear a diferenciao sexual feminina.
No processamento para eliminao de umou mais ntrons/xons, o spliceossomo
reconhece a extremidade 5 do ntron por meio de snRNAU1 e U6, enquanto que a
outra extremidade 3 reconhecida pelo U5. O snRNAU2 reconhece uma terceira
sequncia dentro do ntron. Os reconhecimentos dessas sequncias so acompanhados
por reaes emque, inicialmente, a extremidade 5 do ntron cortada e levada at
prximo da extremidade 3, por meio de pareamento entre os snRNAs (Us). A
extremidade 5 ataca quimicamente a extremidade 3, promovendo a unio dos dois
xons adjacentes e eliminao do ntron.
Asequncia de reaes to bemdelineada de tal forma que somente aps o
trmino do processamento e produo do mRNAque ele levado para o citoplasma.
Isso s possvel porque parte do complexo protico do spliceossomo ir tambm
fazer parte da ribonucleoprotena que contmo mRNApara o seutransporte atravs do
poro nuclear para o citoplasma.
Outras modificaes sofridas pelo pr-mRNAso a adio de uma guanina metilada
na extremidade 5', o capacete, e a formao de uma cauda de poli-A. Tanto o capacete
quanto a cauda de poli-Afuncionamno sentido de proteger o mRNAcontra a ao destrutiva
de certas enzimas. Ocapacete facilita tambma ligao do mRNAaos ribossomos, durante
a sntese protica. Aps ocorrer todas as alteraes do pr-mRNA, ele passa a ser o
mRNA.
Todas as reaes de processamento do pr-mRNAse do no ncleo da clula. A
molcula de RNA ento liberada para o citoplasma, na forma de ummRNAmaduro capaz
de ser traduzido na forma de uma cadeia polipeptdica. Na passagem do ncleo para o
citoplasma, o mRNAassocia-se a protenas, que o protegemcontra endo e exonucleases.
Ao complexo mRNAe protenas d-se o nome de informossomo. AFigura 3.12 mostra os
passos envolvidos no processamento que d origemao mRNAda ovalbumina, uma protena
que se encontra nos ovos de aves.
59
Gentica Molecular
3.4.3 Traduo Biossntese da cadeia polipeptdica
Adescoberta de que as protenas so arranjos lineares de aminocidos semelhana
dos nucleotdeos de umcido nuclico, levou hiptese de que a sequncia dos aminocidos
na protena seja especificada pela sucesso dos nucleotdeos de um gene. Evidncias a
esse respeito surgiram quando estudos de sequenciamento de protenas foram
correlacionados com a sequncia exata de nucleotdeos do DNA. Como vimos na
transcrio, o mRNA uma cpia fiel da mensagemgentica codificada no DNAe, aps
ser transportado para o citoplasma, ele est pronto para ser traduzido em uma cadeia
polipeptdica.
No entanto, para que esse processo possa ser entendido necessrio que
compreendamos como a informao hereditria codificada. Assim, a partir do momento
emquefoi estabelecida a relaoentre a sequncia denucleotdeos do DNAea de aminocidos
da protena, foi necessrio levantar a hiptese de umcdigo gentico. Oproblema bsico
desse cdigo era indicar de que modo a informao escrita comquatro letras quatro pares
de nucleotdeos do DNA- formaria umdicionrio contendo vinte palavras - 20 aminocidos
da protena - uma vez que toda cadeia polipeptdica constituda por, no mximo, 20
aminocidos diferentes.
FIGURA 3.12. Esquema de processamento do pr-mRNAtranscrito do gene da ovoalbumina
de galinha, para produo do mRNA. As regies que no sero traduzidas (ntrons) so
representadas em branco e as regies a serem traduzidas (xons) em preto. Logo aps o
incio da transcrio, adicionada uma guanina metilada na extremidade 5, o capacete
(cinza claro) e, aps o trmino, adicionada uma cauda de poliadenina (poli-A) na extremidade
3(tracejado). Em seguida, so retirados os ntrons por endonucleases e ocorre a unio dos
xons.
60
A idia de um cdigo gentico
Na realidadeo cdigo gentico muito semelhante a umidioma qualquer. Considerando
essa analogia, sabemos que o idioma portugus, por exemplo, consta essencialmente de um
dicionrio depalavras e as regras para uso dessas palavras a gramtica dalngua portuguesa.
Portanto, para se conhecer o idioma cdigo gentico basta conhecermos o dicionrio de
palavras desse cdigo e as regras para a utilizao dessas palavras para se construir uma
frase, isto , uma cadeia polipeptdica.
Inicialmente, procurou-se conhecer o dicionrio de palavras, por meio dos trabalhos
de decifrao do cdigo gentico, que passarampor duas etapas distintas. Aprimeira fase
consistiu apenas de idias e especulaes lanadas por pesquisadores, baseadas no
conhecimento da estrutura do DNA e das protenas. Uma dessas idias era a de que, no
mnimo, seria necessria a combinao de trs nucleotdeos do mRNApara codificar cada
aminocido. Arazo disso era porque comapenas umnucleotdeo poderiamser codificados
somente quatro aminocidosdiferentes, ou seja, 4
1
. Se osquatro nucleotdeos se combinassem
dois a dois, o nmero mximo de aminocidos diferentes seria 4
2
= 16. Por outro lado,
combinaes de trs nucleotdeos dariam4
3
=64 combinaes diferentes possveis, o que
seria mais que suficiente para codificar os vinte aminocidos.
Decifrando o cdigo gentico
Adecifrao definitiva do cdigo gentico teve seu incio na dcada de sessenta, aps
a descoberta da sntese de cadeias polipeptdicas invitro por meio do uso de mRNAsinttico
de composio de bases conhecida. Nesses experimentos, a sntese do mRNAfoi efetuada
pela enzima polinucleotdeo fosforilase, a qual no utiliza nenhuma cadeia de DNAcomo
molde, de modo que a sequncia de nucleotdeos depende exclusivamente da composio
de bases nomeio. Por exemplo, se o nico nucleotdeo presente for o UDPuridina difosfato
- o mRNAser umhomopolmero contendo apenas uracila.
O primeiro cdon - sequncia de trs nucleotdeos que codifica umdeterminado
aminocido - a ser identificado foi o correspondente ao aminocido fenilalanina. Foi
verificado que, quando ummRNAsinttico contendo apenas uracila (poli-U) era usado
para dirigir a sntese protica in vitro, a protena formada continha apenas fenilalanina.
Portanto, o cdon 5' UUU3' codifica o aminocido fenilalanina. Emseguida, descobriu-
se que o poli-A, formado a partir do ADP adenosina difosfato - produzia a poli-lisina
e o poli-C, formado a partir de CDP citidina difosfato - produzia a poli-prolina. Portanto,
5' AAA 3' o cdon para o aminocido lisina, enquanto 5' CCC 3' o cdon para
prolina.
Alguns cdons contendo mais de umtipo de nucleotdeo foramidentificados usando-
se mRNAs sintticos comdois tipos de bases. Por exemplo, se estiverempresentes na
61
Gentica Molecular
5' AAC 3' = 5' ACA3' = 5' CAA3' = 0,7 x 0,7 x 0,3 = 0,147
5' ACC 3' = 5' CAC 3' = 5' CCA3' = 0,7 x 0,3 x 0,3 = 0,063
5' CCC 3' = 0,3 x 0,3 x 0,3 = 0,027
Aidentificao dos cdons e dos respectivos aminocidos pode ser feita relacionando-
se as frequncias esperadas de cada cdon comas dos aminocidos encontrados na cadeia
polipeptdica. Por exemplo, considerando-se o mRNAanterior, a determinao de que o
aminocido asparagina se encontra na frequncia de aproximadamente 14,7% indica que
ele codificado por umcdon contendo 2Ae 1C. Entretanto, esse mtodo no preciso
o bastante para distinguir a sequncia correta dos nucleotdeos dos cdons coma mesma
composio de bases, como por exemplo, no foi possvel identificar se o cdon da
asparagina o 5AAC 3, ou o 5ACA3, ou o 5 CAA3.
O mtodo mais eficiente para a determinao dos 64 cdons foi desenvolvido em
1964 por Niremberg e Leder (Figura 3.13). Eles descobriram que molculas de tRNA
carregadas comseu aminocido especfico se ligamao complexo ribossomo - mRNA. Por
exemplo, quando poli-U misturado comribossomos, somente tRNAda fenilalanina se
prende quele complexo. Almdo mais, umaspecto importante dessa tcnica que a ligao
especfica do tRNAno requer longas molculas de mRNA. De fato, apenasumtri nucleotdeo
suficiente para promover a ligao. Assim, o tri nucleotdeo 5' UUU3' resulta na ligao
tRNA- fenilalanina, e o trinucleotdeo 5' AAC3' promove a ligao tRNA- asparagina. Por
meio dessas tcnicas, os pesquisadores decifraramos 61 cdons que codificamtodos os
vinte aminocidos (Tabela 3.2).
Para se conhecer o significado de umcdon, como o 5AUG3, por exemplo, basta
localizarmos na Tabela 3.2 a primeira letra do cdon que est na posio 5A, seguida da
segunda letra no meio do cdon U e, finalmente a terceira letra do cdon que est na
posio 3 G. Veja que essa sequncia codifica o aminocido metionina.
reao dois nucleotdeos diferentes, digamos ADPe CDP, na proporo de 70% e 30%,
respectivamente, o mRNA conter 70% de A e 30% de C. Note, entretanto, que a
sequncia das bases desconhecida, embora possa se prever a composio do mRNA
como umtodo. Por exemplo, no presente caso a probabilidade de ocorrer a sequncia
5' AAA 3' de 0,7 x 0,7 x 0,7, ou seja, 0, 343. Isso , 34,3% dos cdons so
presumivelmente 5' AAA3'. As probabilidades dos demais cdons so:
62
FIGURA 3.13. Esquema do procedimento desenvolvido por Niremberg e Leder por meio do qual
RNAs de apenas trs nucleotdeos foramtraduzidos. Quando o RNAse ligava no ribossomo e era
reconhecido pelo tRNA-aa, formava-se um complexo que era retido por um filtro. Na figura, o
RNAutilizado era 5 UGG 3 que foi reconhecido pelo tRNA-Trp, cujo anticdon 5 ACC 3
Propriedades do cdigo gentico
No processo de sntese de protenas, a partir da informao gentica contida no DNA,
utilizado o dicionrio do cdigo, bem como umconjunto de propriedades do material
gentico semelhana das regras gramaticais de umidioma. Fazendo essa analogia, as regras
gramaticais, ou as principais propriedades do cdigo gentico so as seguintes:
Aunidade do cdigo gentico constituda de trs letras
Como vimos anteriormente, o nmero mnimo de nucleotdeos necessrios emcada
palavra do cdigo - cdon -, para codificar todos os vinte aminocidos que participamda
sntese das protenas, deveria ser de trs letras. Aconfirmao sobre essa proposio ocorreu
a partir de 1961, comtrabalhos realizados como fago T4 por Crick e colaboradores. Alm
disso, outras evidncias permitirama constatao de cdons de trs nucleotdeos, como por
exemplo, o mRNAcomsequncia 5' UGUGUGUGU3', sintetizado por Khorana, produziu
uma cadeia polipeptdica comdois tipos de aminocidos, isto , cistena-valina-cistena,
indicando que o cdon de trs letras 5' UGU3' codifica cistena e 5' GUG3' codifica valina.
Nota-se, ainda, nesse ltimo exemplo que a razo nmero de nucleotdeos do RNAdivido
pelo nmero de aminocidos do polipeptdeo 3.
63
Gentica Molecular
TABELA 3.2. O dicionrio do cdigo gentico.
Primeira Segunda letra Terceira
letra (posio 5) U C A G letra (posio 3)
U
Fenilalanina
(Phe)
Serina
(Ser)
Tirosina
(Tyr)
Cistena
(Cys)
U
Fenilalanina
(Phe)
Serina
(Ser)
Tirosina
(Tyr)
Cistena
(Cys)
C
Leucina
(Leu)
Serina
(Ser)
Final de
Traduo
Final de
Traduo
A
Leucina
(Leu)
Serina
(Ser)
Final de
Traduo
Triptofano
(Trp)
G
C
Leucina
(Leu)
Prolina
(Pro)
Histidina
(His)
Arginina
(Arg)
U
Leucina
(Leu)
Prolina
(Pro)
Histidina
(His)
Arginina
(Arg)
C
Leucina
(Leu)
Prolina
(Pro)
Glutamina
(Gln)
Arginina
(Arg)
A
Leucina
(Leu)
Prolina
(Pro)
Glutamina
(Gln)
Arginina
(Arg)
G
A
Isoleucina
(Ile)
Treonina
(Thr)
Asparagina
(Asn)
Serina
(Ser)
U
Isoleucina
(Ile)
Treonina
(Thr)
Asparagina
(Asn)
Serina
(Ser)
C
Isoleucina
(Ile)
Treonina
(Thr)
Lisina
(Lys)
Arginina
(Arg)
A
Metionina
(Met)
Treonina
(Thr)
Lisina
(Lys)
Arginina
(Arg)
G
G
Valina
(Val)
Alanina
(Ala)
c.
asprtico
(Asp)
Glicina
(Gly) U
Valina
(Val)
Alanina
(Ala)
c.
asprtico
(Asp)
Glicina
(Gly) C
Valina
(Val)
Alanina
(Ala)
c.
glutmico
(Glu)
Glicina
(Gly) A
Valina
(Val)
Alanina
(Ala)
c.
glutmico
(Glu)
Glicina
(Gly) G
64
O cdigo temponto inicial
Aleitura da cadeia de mRNAsempre comea por umponto determinado. Esse ponto
o cdon5' AUG3', quepermite a utilizao do aminocido formil-metionina emprocariotos
e metionina nos eucariotos. Oincio da traduo sempre no local correto se d graas a uma
sequncia anterior ao cdon 5' AUG3', que complementar ao rRNAda subunidade menor
do ribossomo, de modo que, quando o mRNA se associa com o ribossomo, o cdon 5'
AUG3' se posiciona no local de incio da traduo. Quando o cdon5' AUG3' se encontra
no meio da cadeia do mRNA, a metionina, sem o radical formil, incorporada cadeia
polipeptdica. Quemadiciona o formil-metionina no incio da cadeia polipeptdica, no stio P
do ribossomo, umtRNAespecial.
Embora a formil-metioninaseja o ponto inicial da sntese protica, nemtodasas protenas
se iniciamcomeste aminocido. H enzima que remove apenas o radical formil de algumas
cadeias polipeptdicas e s vezes remove a formil-metionina, ou mesmo mais de um
aminocido, de modo que nem sempre ela o primeiro aminocido de uma cadeia
polipeptdica. Entretanto, noseucariotos, uma situao diferente ocorrecomos polipeptdeos
que so exportados do citossol para outras organelas ou mesmo para o exterior da clula, os
quais possuem uma sequncia de 15 a 30 aminocidos, na extremidade amino-terminal,
denominada de sequncia guia. Essa sequncia tema finalidade de reconhecer o local da
membrana do retculo endoplasmtico, no qual o polipeptdeo ser exportado. Aps o
polipeptdeo atravessar a membrana, a sequncia-guia eliminada por enzimas. Nesse caso,
o primeiro aminocido do polipeptdeo funcional no nemo primeiro ousegundo transcrito,
mas pode variar do dcimo sexto ao trigsimo primeiro.
O cdigo no sobreposto
Em um cdigo no sobreposto, cada grupo de trs bases especifica somente um
aminocido, por exemplo, seja a sequncia 5' ACUGCA3'. Essa sequncia codifica apenas
dois aminocidos - 5' ACU3' : Treonina e 5' GCA3' : Alanina. Por outro lado, se o cdigo
fosse sobreposto emduas letras, esta mesma sequncia codificaria quatro aminocidos
5' ACU 3' : Treonina, 5' CUG 3' : Leucina, 5UGC 3 : cistena e 5' GCA3' =
Alanina. Note que as duas primeirasletras do segundo cdonso as duas ltimasdo primeiro,
as duas primeiras do terceiro so as duas ltimas do segundo e, assim, sucessivamente, isto ,
dois cdons vizinhos sempre usamduas letras comuns so sobrepostos.
Aconcluso sobre a no sobreposio do cdigo pode ser obtida mediante estudos da
sequncia de aminocidos emmutantes. Suponha, por exemplo, que na sequncia anterior a
guanina seja trocada por citosina; no caso de no sobreposio haver a troca de apenas um
aminocido, isto, aalanina ser trocadapor prolina. J, nocasode sobreposioemduas letras,
sero alteradosvrios cdonse, consequentemente, maisdeumaminocido, do seguinte modo:
5' ACU3' : Treonina, 5' CUC3' : Leucina, 5' UCC3' : Serina e 5' CCA3' : Prolina.
65
Gentica Molecular
Estudos da sequncia de aminocidos emmutantes para a capa protica do vrus do
mosaico do fumo - TMV - demonstraram que apenas um aminocido alterado e que,
portanto, o cdigo gentico no sobreposto.
Outra evidncia a favor da no sobreposiode cdons obtida a partir da constatao
de que nospolipeptdeos, umaminocido pode ter como vizinho qualquer umdos aminocidos
que participamdas protenas. Esse fato no ocorreria se o cdigo fosse sobreposto emuma
ou duas letras. Comsobreposio de duas letras, por exemplo, a sequncia 5AUUC 3
codificaria isoleucinae fenilalanina emumdado polipeptdeo. Comovimos, nesse polipeptdeo
o aminocido vizinho da isoleucina a fenilalanina, porque o nucleotdeo seguinte ao cdon
5AUU3 a citosina e, no seu lugar, poderia ocorrer mais trs outros nucleotdeos vizinhos:
o que possui U, produzindo o cdon 5UUU3: fenilalanina; o que possui A, produzindo o
cdon5UUA3: leucina; e oque possui G, produzindo ocdon5UUG3: leucina. Portanto,
a sobreposio emduas letras implica que nos polipeptdeos, o aminocido isoleucina poderia
ter apenas outroaminocido como vizinho aleucina. Usando o mesmoraciocnio, a fenilalanina
poderia ser antecedida por apenas trs diferentes, almda isoleucina, que so a valina, leucina
e fenilalanina. Portanto, umaminocido qualquer na cadeiapolipeptdica poderiaser antecedido
no mximo por quatro aminocidos diferentes e sucedido por no mximo dois.
O cdigo no temvrgulas
Poderia se pensar que para ocorrer a leitura correta dos cdons fosse necessrio a
separao dos mesmos por umnucleotdeo que funcionaria como uma vrgula. Assim, numa
sequncia teramos, por exemplo, vACUvGCAv... emque v seria a vrgula. De fato, no
existe nenhumnucleotdeo diferente dos quatro normais que ocorremno RNApara preparar
os cdons para a leitura. Asua preciso depende do incio correto a partir do ponto inicial.
Almdesse fato, no se pode aceitar que umdos quatro nucleotdeos normais funcione como
vrgula, pois, pelo menos trs dos polinucleotdeos sintticos formados comumnico tipo de
nucleotdeo - poliA, poli Ue poli C- foramtraduzidos. Portanto, impossvel que os quatro
tipos de nucleotdeosfuncionemcomo vrgula.
O cdigo degenerado
Observando-se a tabela do cdigo gentico (Tabela 3.2), notamos que a maioria dos
aminocidos codificada por mais de umcdon diferente. Evidentemente, esse fato seria
esperado, uma vezque so 64oscdons possveis, enquanto temos apenas vinte aminocidos.
Essa propriedade de existir cdons sinnimos chamada degenerescncia do cdigo.
Adegenerescncia variada entre os vinte aminocidos. H aqueles codificados por
at seis cdons diferentes, como o caso da serina, arginina e leucina; cinco aminocidos so
codificados por quatro cdons, como a valina; apenas a isoleucina codificada por trs
cdons. Porm, nove aminocidos, entre eles a fenilalanina, so codificados por dois cdons
66
cada. A degenerescncia do cdigo s no ocorre para dois aminocidos, metionina e
triptofano, codificados por 5' AUG3' e 5UGG3', respectivamente.
Apesar do cdigoser degenerado para amaioria dos aminocidos, eleo principalmente
em relao terceira base do cdon na posio 3. Note na tabela 3.2, que todos os
aminocidos para os quais o cdigo degenerado, as duas primeiras bases do cdonso as
mesmas, comexceo apenas da leucina, serina e arginina.
No pareamento do cdondo mRNAcomo anticdondo tRNA, de forma antiparalela,
a terceira base do cdon - posio 3- pareia-se coma primeira do anticdon - posio 5.
Sabe-se que esse pareamento no sempre perfeito, isto , quando a primeira base do
anticdon a uracila, ela pareia-se coma adenina ou guanina do cdone, quando a primeira
base do anticdon a guanina, ela pareia-se comcitosina ou uracila do cdon. Umcaso
ainda mais anormal quando a primeira base do anticdon a inosina (I), homloga da
adenina, que se pareia comadenina ou uracila ou comcitosina. De todos esses pareamentos,
apenas os perfeitos - uracila comadenina e guanina comcitosina - so pareamentos fortes.
Os demais so fracos e so chamadas de oscilantes. Assim, so esses pareamentos oscilantes
que contribuempara que o cdigo seja mais degenerado na terceira base do cdon. Para um
dos trs aminocidos emque seus cdons diferemnas duas primeiras bases, so necessrios
tRNAs diferentes que sempre fazempareamentos fortes comas mesmas. Por exemplo, dois
cdons que codificama serina so 5UCU3e 5AGU3, e requeremtRNAs comanticdons
diferentes, respectivamente, 5AGA3e 5ACU3.
Adegenerescncia do cdigo gentico, ao contrrio do que se poderia pensar, traz
alguma vantagemevolutiva no sentido de torn-lo mais estvel contra os efeitos da mutao.
Por exemplo, a troca de umnucleotdeo na terceira posio do cdon 5 GCU3no traria
nenhum efeito na cadeia polipeptdica, uma vez que 5' GCC 3', e 5' GCA 3' e 5' GCG 3'
codificampara o mesmo aminocido, isto , a alanina.
O cdigo no ambguo
Umcdonseria ambguo se ele codificasse para dois oumais aminocidos diferentes.
Aceita-se que em condies naturais o cdigo no ambguo. Aambiguidade pode ser
observada somente em certas condies artificiais. Por exemplo, alteraes no pH ou
temperatura ou presena de estreptomicina no meio de cultura fazemcomque, emE. coli, o
cdon 5' UUU3' codifique para fenilalanina bemcomo para leucina, treonina e isoleucina.
O cdigo universal
Uma das questes mais intrigantes que surgiudurante a decifrao do cdigo era se os
cdons especificamos mesmos aminocidos para todos os organismos. Auniversalidade do
cdigo foi demonstrada quando mRNA e ribossomos de reticulcitos de coelho foram
corretamente reconhecidos por tRNAs de E. coli, havendo sntese de hemoglobina.
67
Gentica Molecular
Atualmente, sabe-sequeo cdigo gentico universal nomundovivo, ocorrendo apenas
pouqussimasexceesdealgunscdonscomsignificadosdiferentesemmitocndriasdealgumas
espcies. Essa universalidade sugere que todos os seres vivos tmumancestral comum. Um
fatointeressante, noentanto, queosseres vivos exibemumadiversidadeextremamente grande,
tanto em relao aos seus aspectos e comportamentos, quanto s propores G/C e A/T,
porm, o conjunto de protenas e enzimas necessrias para a sobrevivncia similar emtodos
eles. Diante desse fato, o cdigo s pode ser universal porque ele tambm degenerado.
Graas universalidadedo cdigo que foi possvel desenvolver a tecnologia de obteno dos
organismos transgnicos, como ser comentado no Captulo 17.
Ocdigo temponto final
Otrmino da leitura de ummRNA determinado por cdons de terminao. So trs
os cdons de terminao - 5' UAA3', 5' UAG3' e 5' UGA3' -, os quais no so lidos por
tRNAs, mas possuem afinidades para ligarem-se a protenas especficas conhecidas por
fatores de liberao.
O processo da traduo
Asntese protica tambmconhecida como traduo, porque a linguagemescrita
comas quatro letras correspondentes aos nucleotdeos deve ser traduzida na forma de uma
cadeia polipeptdica comos vinte aminocidos. Atraduo umprocesso bemmais complexo
que a replicao e transcrio do DNA, pois envolve a participao de mais de uma centena
de macromolculas, taiscomo enzimas, tRNAs, mRNA, almdas estruturas macromoleculares
responsveis pela sntese propriamente dita, os ribossomos.
Um dos primeiros passos na sntese protica a ativao dos aminocidos e o
carregamento dos tRNAs, do seguinte modo:
Aminoacil - tRNA sintetase
Aminocido + ATP <<<<<<<<<<<: Aminoacil KAMP + PP
i
Aminoacil - tRNA sintetase
Aminoacil KAMP + tRNA <<<<<<<<<<<: Aminoacil-tRNA+ AMP
Aaminoacil tRNAsintetase uma enzima cuja funo criar umambiente favorvel
para a realizao das reaes apresentadas anteriomente. Na verdade, podemos comparar a
molcula da enzima a uma casa comquatro cmodos, sendo umespecfico para oATP, um
segundo especfico para umdos vinte aminocidos, umterceiro especfico para o tRNA
correspondente ao aminocido e umquarto especfico para uma molcula de gua, que
utilizada emhidrlise. Portanto, existe pelo menos uma aminoacil-tRNAsintetase para cada
aminocido. De fato, a traduo correta da mensagemgentica depende do alto grau de
especificidade dessas enzimas. Elas soaltamente seletivas no reconhecimentodo aminocido
a ser ativado, bemcomo no reconhecimentodo respectivo tRNA. Essa seletividade possvel
68
graas s diferentes sequncias encontradas emcada tipo de tRNA, como j foi mencionado
anteriormente (Box3.9).
Entre esses tRNAs, existem dois especficos para o aminocido metionina. Um
utilizado apenas para iniciar a traduo - tRNA
f
- e o outro responsvel para inserir a
metionina emoutras posies da cadeia polipeptdica. No entanto, ambos reconhecemo
mesmo cdonno mRNA, o 5AUG3.
Atraduo mais facilmente compreendida seela for dividida emtrs etapas sucessivas,
isto , o incio, a elongao e o trmino da cadeia polipeptdica. Essas trs etapas so
similares em procariotos e eucariotos, embora existam tambm algumas diferenas
especialmente no incio da traduo.
Nos procariotos, o incio da traduo ocorre quando a extremidade 5 da molcula de
mRNAse combina coma subunidade menor - 30S- do ribossomo e coma formil-metionina -
tRNA
f
(Figura 3.14e Box3.10). Aligao da formil-metionina-tRNA
f
ao complexo se d por
meio de pontes de hidrognio entre as bases do mRNA- cdon de iniciao 5AUG3- e as
bases complementares do tRNA
f
anticdon5 CAU3. Emrazo do cdondeiniciao no
estar situado na extremidade 5 do mRNA, podemos perguntar como o anticdon da formil-
metionina-tRNA
f
encontra o cdon 5AUG3? Foi constatado que existe uma sequncia no
mRNA, antes do 5AUG3, que complementar extremidade 3do rRNA16 S, que um
constituinte da subunidade menor do ribossomo - 30S. Portanto, ocorreo pareamento dessas
duas sequncias complementares e, emconsequncia, o cdon5AUG3fica posicionado na
subunidade 30 S, facilitando o seu pareamento como anticdon do tRNA
f
carregado coma
formil-metionina. Emseguida, a subunidade maior do ribossomo - 50 S- seliga ao complexo
para formar o ribossomocompleto, tambmdenominadocomplexode iniciao.
FIGURA 3.14. Esquema do incio da sntese de uma cadeia polipeptdica, o complexo de
iniciao. Note que os dois stios onde entram os aminocidos, o P (formil-Met) e o A(demais
aminocidos) ocorrem entre as duas subunidades do ribossomo. Portanto, existe uma fenda
entre as duas subunidades, onde localiza-se o mRNAe por onde entramos tRNAs, processando
a sntese da cadeia polipeptdica.
69
Gentica Molecular
Cada aminocido representado pela abreviatura de seu nome na lngua inglesa,
de trsletrasouuma letra, definidosemconveno internacional. Amaioriadas abreviaturas
corresponde s trs ou a primeira letra do seu nome.
Cada aminocido reconhecido por uma aminoacil-tRNAsintetase especfica. Cada
enzima pode ter apenas uma cadeia polipeptdica ( ), duas idnticas (
2
), quatro idnticas
(
4
), ou quatro de dois tipos (
2 2
). Acadeia a ou b especifica de cada enzima. As
aminoacil-tRNA sintetases so classificadas em dois grupos. O grupo I so aquelas
principalmente monomricas e que reconhecemos 10 aminocidos escritos comletra
normal e o grupo II so enzimas principalmente dimricas e reconhece os 10 aminocidos
escritos comletra emitlico.
BOX 3.9. OS VINTE AMINOCIDOS E AMINOACIL-tRNA SINTETASES QUE
SO UTILIZADOS NA TRADUO
% 8
8 8
8
Aminocido
Abreviaturas
aminoacil-tRNA sintetase
3 letras 1 letra
cido asprtico Asp D 8
2
cido glutmico Glu E 8
Alanina Ala A 8
4
Arginina Arg R 8
Asparagina Asn N 8
2
Cistena Cys C 8
Fenilalanina Phe F 8
2
6
2
Glicina Gly G 8
2
6
2
Glutamina Gln Q 8
Histidina His H 8
2
Isoleucina Ile I 8
Leucina Leu L 8
Lisina Lys K 8
2
Metionina Met M 8
Prolina Pro P 8
2
Serina Ser S 8
2
Tirosina Tyr Y 8
2
Treonina Thr T 8
2
Triptofano Trp W 8
2
Valina Val V 8
70
BOX 3.10. O RIBOSSOMO E ALGUMAS ENZIMAS ENVOLVIDAS NATRADUO
DE PROCARIOTO E EUCARIOTO
No procarioto o ribossomo(70S) uma estrutura ribonucleoproticae constitudo
de duas subunidades, uma menor (30S) e outra maior (50S). Asubunidade 30S contm
uma molcula de rRNA(16S com1542 bases) associada a 21 molculas de protenas
(S1 a S21). Asubunidade 50S contm duas molculas de rRNA, uma 23S com 2904
bases e outra 5S com120 bases, associadas a 34 molculas diferentes de protenas (L1
a L34).
Oribossomodo eucarioto (80S) semelhante ao do procarioto, porm, ligeiramente
maior, sendo constitudo da subunidade menor (40S) e outra maior (60S). A40S
constituda pelo rRNA18S com1874 bases e 33 protenas, enquanto a subunidade 60S
possui trs rRNAs, o 28S com4718 bases, o 5,8S com160 bases e o 5S com120 bases,
todos associados a 49 protenas.
Essas duas subunidades s ocorremjuntas quando est ocorrendo a traduo e, no
ribossomo, ocorremvrias reaes enzimticas envolvendoos prpriosrRNAs etambmas
protenasribossmicas, emvrioslocais, comdestaqueparatrsstios: oPondeentraoprimeiro
tRNA corregado com a metionina (metionil-tRNA
f
), o A onde entra os demais tRNAs
carregados(aminoacil-tRNAs) e oEondeo tRNAdescarregadodo aminocidoser liberado
doribossomo.
Nos procariotosparticipamtrs enzimas noincio da traduo, osfatores de iniciao
(IF1, IF2 e IF3). OIF1 e IF3 inicialmente ficamunidos subunidade 30Spara impedir
que ela se ligue 50S na ausncia do mRNA. O IF2, aps unido ao GTP, liga-se
especificamente formil-Met-tRNA
f
para introduzi-lo no stio P na subunidade 30S.
No geral, a aminoacil-tRNAsintetase reconhece o seuaminocido pela curvatura
interna do tRNAna sua estrutura terciria e emalgumponto prximo ou no anticdon.
Entretanto, aquelas do grupo I tambm o reconhece pelo brao do aminocido na
conformao de umgrampo, contatando o tRNAno sulco menor da hlice dupla. J,
aquelas do grupo II fazemo contato no brao do aminocido na conformao emhlice,
por meio do sulco maior. Aps o reconhecimento do tRNA, as enzimas do grupo I ligam
o aminocido na posio 2 da ribose da adenosina situada em3 do tRNA, enquanto as
enzimas do grupo II o liga na posio 3, exceto a enzima da Phe.
71
Gentica Molecular
Comessa ligao, a hidrlise do GTP a GDP e a liberao dos trs fatores de iniciao,
permitema ligao da subunidade maior (50S) e a formao do complexo de iniciao.
Apartir do complexo de iniciao comea a elongao tambmcoma participao
de trs enzimas, os fatores de elongao (EF-Tu, EF-Ts e G). Afuno da EF-Tu
semelhante aodo IF-2, juntamente como GTPintroduz cadaaminoacil-tRNAsomente no
stioA. Aps o EF-Tu-GDP liberadoe o EF-Ts liga-se nesse complexo para descarregar
o GDP. Outro GTP liga-se no EF-Tu, libera o EF-Ts e promove a introduo de novo
aminoacil-tRNAnostioA.
Assimque ocorrea ligao peptdica entre os dois aminocidos queesto nos stios
AeP, o mRNAjuntamentecomesses dois tRNAsso translocados coma participao do
fator de elongao Gconsumindo umGTP, isto , o aminoacil-tRNAdo stioAvai para o
stio PeotRNAdo stioPvai para ostio E, liberando-o paratransportar outroaminocido.
Note que o stioAfica vago para receber umprximo aminoacil-tRNA.
Nos eucariotos participamumnmero maior de enzimas. Entre as mais conhecidas,
na iniciao participamo eIF2 e eIF2B, que so equivalentes, respectivamente, IF2 e EF-
Ts de procarioto. Inicialmente, forma-se o complexo ternrio eIF2-GTP-Met-tRNA
i
.O
eIF3 liga-se subunidade menor do ribossomo (40S) e o eIF6 liga-se subunidade maior
(60S), para mant-las separadas. Simultaneamente, o eIF3 tambmauxilia o complexo
ternrio ligar-se no capacete-eIF4E-eIF4G-eIF4F, seguido do eIF4Aque desenovela o
mRNA, auxiliado pela eIF4B. Esse complexo escaneia o mRNAat encontrar oAUG. O
eIF5 utiliza o GTPpara liberar eIF2, eIF3, eIF6, e provavelmente, os demais eIFs, para
permitir aunioda60S, formandoocomplexodeiniciao, queestabilizaoinciodatraduo.
Aelongao e o trmino da traduo no eucarioto so similares ao procarioto.
Nesse estgio, a formil-metionina-tRNA
f
ocupa o stio P - stio do peptdeo - do
ribossomo, enquanto o stio A- stio do aminocido -, est vazio. Aassociao desses
elementos mediada por enzimas chamadas de fatores de iniciao, almdo consumo de
energia fornecida pelo GTP.
Aelongao da cadeia polipeptdica ocorre a partir do complexo de iniciao. A
leitura prossegue na direo 5 3 do mRNApela entrada de umsegundo aminoacil-tRNA
no stioAdo ribossomo (Figura 3.15). Esse segundo aminoacil-tRNAa ser inserido depende
do cdonnomRNAque se encontrano stioA. Estandoos stios PeAdevidamente ocupados,
os dois primeiros aminocidos j esto estrategicamente prximos para seremunidos por
meio de uma ligao peptdica. Essa ligao se d entre o grupo carboxlico do primeiro
:
72
FIGURA 3.15. Esquema de elongao da cadeia polipeptdica. Observe que um segundo
tRNA, transportando o aminocido Ala, entra no stio Aque estava vago. Em seguida, ocorre
a ligao peptdica da Ala comMet, formando umdipeptdeo ligado momentaneamente no stio
A. Aps o movimento do mRNAatravs do ribossomo, em um espao equivalente a um cdon,
o dipeptdeo passa do stio Apara o stio P e o tRNA
f
passa para o stio E para ser liberado. Um
novo stio A se torna vago para a entrada de um terceiro tRNA carregado com aminocido.
Esse processo repete-se at que o stio Aatinja um ponto final.
aminocido e o grupo amnico do segundo. Aligao peptdica catalizada pela peptidil
transferase, uma enzima que parte integrante da subunidade maior do ribossomo.
importantemencionar queos dois aminocidos, dosstios PeA, esto posicionadosexatamente
sobre o stio da peptidil transferase, na subunidade 50 S, facilitando, assim, a ocorrncia da
ligao peptdica. Emconsequncia dessa ligao, forma-se umdipeptdeo no stioAe o
tRNA
f
do stio Pdesliga-se da formil-metionina. Aps essa ligao, ocorre atranslocao,
que consta basicamente de trs movimentos; o mRNAmove-se atravs do ribossomo em
uma extenso de trs nucleotdeos - umcdon, o dipeptdeo-tRNAmove-se do stioApara
o stio Pe o tRNAdescarregado do stio P transferido para o stio Edo ribossomo, sendo
emseguida liberado. Oresultado da translocao o terceiro cdon do mRNAque fica
posicionado no stio A, pronto para receber o terceiro aminoacil-tRNA. Esse processo
repete-se at o final da cadeia polipeptdica e, em cada passo, esto tambm envolvidas
vrias enzimas, os fatores de elongao, e o GTP. Devemos observar que apenas o tRNA
f
entra no stio P, todos os outros entramno stioA.
73
Gentica Molecular
FIGURA 3.16. Esquema do trmino da sntese de uma cadeia polipeptdica. Note que o stio
A, direita do ribossomo, ficou vago e contm o ponto final 5 UAA 3. Como este cdon tem
afinidade pelos fatores de liberao, as protenas RF1 e RF3, ocorre a hidrlise de todo o
conjunto, com o auxlio de energia fornecida pelo GTP. Em consequncia, ser liberada a
cadeia polipeptdica j completa que est presa no ltimo tRNA, no stio P.
Otrmino da traduo ocorre quando no stio Ase encontra umdos trs cdons 5
UAA3, ou 5 UAG 3, ou 5 UGA3 (Figura 3.16). Para esses trs cdons, no existe
tRNAs comanticdons complementares, mas simprotenas especficas que os reconhecem
como sinais de parada. Essas protenas chamadas de fatores de liberao se ligama um
dos cdons de terminao no stioAe ativama peptidil transferase, que realiza a hidrlise da
ligao entre o polipeptdeo e o tRNAno stio P. Aps a hidrlise, a cadeia polipeptdica
completa se dissocia do tRNA, a molcula de mRNAse liberta dos ribossomos e estes, por
sua vez, se dissociamnas duas subunidades.
Atraduo nos eucariotos difere daquela nos procariotos emalguns pontos. Entre
eles, o ribossomo eucarioto possui as duas subunidades ligeiramente maiores, sendo a menor
40 S e a maior 60 S. O tRNAque inicia a traduo - tRNA
i
- tambm especial, isto , s
serve para comear a traduo e tambmcarrega a metionina, embora estano seja formilada.
No mRNAeucarioto, a sequncia que precede o cdon 5AUG3, no complementar
extremidade 3 do rRNAda subunidade 40 S. Almdisso, o mRNApossui o capacete na
74
extremidade 5, que se une subunidade 40 S do ribossomo. Essa subunidade tambmj
est previamente associada metionina - tRNA
i
. Portanto, a ligao do tRNA
i
com o
mRNAno se faz inicialmente por meio do pareamento cdon-anticdone sim, por meio do
caminhamento da subunidade 40 S sobre o mRNA no sentido 5 3, at encontrar o
primeiro 5AUG3que se pareia como anticdon. Emseguida, une-se subunidade maior
do ribossomo - 60 S - formando o complexo de iniciao. Emtodos os passos, participam
enzimas, fatores de iniciao e h consumo de energia proveniente deATPe GTP.
Nos eucariotos, as protenas que so secretadas geralmente so sintetizadas nos
ribossomosassociadosaoretculoendoplasmtico, oqual denominadoderugosopelapresena
do ribossomo. Aaparente ligao do ribossomo ao retculo se d por meio de uma complexa
estrutura ribonucleoprotica denominada de partcula de reconhecimento do sinal (SRP). A
SRP constituda por umscRNAcom305 bases associadas a seis molculas de protena. A
funo da SRP ligar-sea umasequncia de 15-30aminocidos(peptdeosinal) da extremidade
amino terminal da cadeia polipeptdica, que est sendo sintetizada pelo ribossomo.
Simultaneamente, a SRPliga-sea uma protenareceptoradeSRPsituadano retculo, formando-
se umporo na sua membrana e direcionando a cadeia polipeptdica sobsntese para o interior
do retculo.Aps a cadeia polipeptdicaestar no interior doretculo o peptdeo sinal eliminado
por uma enzima, formando-seassimaprotenamadura. Essaprotena, emseguida, direcionada
para o complexo de Golgi de onde emergemvescula coma protena, encaminhando-a para a
membrana plasmtica e liberando-a para o exterior da clula.
Vrias cadeias polipeptdicas so sintetizadas no citossol e, posteriormente, elas so
destinadas ao interior de organelas como a mitocndria ou o cloroplasto. Essas cadeias
conseguematingir seu destino tambmgraas a umpeptdeo sinal, o qual s vezes duplo,
pois necessitamcruzar as duas unidades de membrana dessas organelas. Umfato curioso foi
a obteno da soja transgnica resistente ao glifosato pela empresa Monsanto. No preparo
do gene quecodifica a protena queconfere resistncia a esse herbicida, foi necessrio adicionar
o peptdeo sinal para assegurar que a protena sintetizada no citossol chegasse no interior do
cloroplasto onde o glifosato atua.
importante enfatizar que muitos ribossomos podemtraduzir simultaneamente uma
nica molcula de mRNA, aumentando grandemente a eficincia de utilizao do mRNA.
Umgrupo de ribossomos ligados a uma molcula de mRNA chamadopolirribossomos ou
polissomos. Cada ribossomo desse grupo funciona independentemente, sintetizando uma
molcula completa da cadeia polipeptdica. Assim, se temos umpolissomo constitudo de
cinco ribossomos, teremos cinco molculas daquela protena (Figura 3.17; Box 3.11)
:
75
Gentica Molecular
BOX 3.11. INIBIDORES DA SNTESE PROTICA
Umaspecto importante de se conhecer a sntese de protenas o sucesso que se
temhoje como controle de infeces bacterianas por meio de antibiticos. Isso porque
o mecanismo de ao de vrios antibiticos exatamente no processo de traduo de
protenas das bactrias, embora no afete o processo de traduo do eucarioto. Por
outro lado, algumas toxinas letais a eucarioto atuamno seusistema de traduo.
Antibitico/toxina Ao Organismo
1. Estreptomicia e outros
aminoglicosdeos
Inibe a iniciao da traduo Procariotos
2. Tetraciclina Inibe a ligao de aminoacil-tRNAs Procariotos
3. Cloranfenicol
Inibe a atividade da peptidil transferase
Procariotos
4. Cicloeximida Inibe a atividade da peptidil transferase Eucariotos
5. Eritromicina
Liga-se na subunidade 50S e inibe a
translocao
Procariotos
6. Puromicina
Entra no lugar de aminoacil-tRNA e
causa trmino pr-maturo da traduo
Procariotos e
Eucariotos
7. Protena da difiteria
Bloqueia a translocao durante a
traduo inativando o fator de
elongao eEF2
Eucariotos
FIGURA 3.17. Diagrama de um polirribossomo (polissomo). O mRNA move-se atravs dos
ribossomos na direo 5 : 3 at encontrar umdos cdons de terminao. O funcionamento de
cada ribossomoindependente, isto, cada ribossomo produz uma molcula da cadeia polipeptdica.
3
76
FIGURA. 3.18. Esquema da expresso do gene para a cor da flor. Observe que o gene
(DNA) transcrito em um pr-mRNA que processado para produzir o mRNA. A cadeia
polipeptdica produzida a partir da traduo do mRNA. A protena sintetizada atua como
enzima na converso do substrato em pigmentos coloridos. Apesar desse gene estar presente
em todas as clulas da planta, ele s se manifesta nas ptalas da flor.
3.5 MANIFESTAOFENOTPICA
Vimos at agora como a informao codificada no DNA passada de clula para clula
por intermdio da replicao e, tambmque o processo da traduo resulta na sntese de uma
cadeia polipeptdica. Nesse tpico, procuraremos demonstrar de uma formabemsimplificada
comoumgenecontrolaumdeterminadofentipo. Naverdade, estecontroleindireto, porquena
maioria das vezes o produto final da transcrio e traduo, isto , a cadeia polipeptdica, no
expressaprontamente. Por exemplo, umgene que controlaacor da flor emuma espcie vegetal
no o responsvel direto pela sntese dos pigmentos coloridos (Figura 3.18). Emvez disso,
esses pigmentos soprodutos de uma viametablica cujas reaes socatalisadas por enzimas,
as quaisso sintetizadas graas sinformaescontidas no DNA, como visto anteriormente.
Por outro lado, existemsituaes emque a cadeia polipeptdica temfuno estrutural
e, nesse caso, a expresso fenotpica produto direto da informao proveniente do DNA.
Por exemplo, o colgeno uma protena fibrosa presente na pele, ossos, cartilagens e dentes
de todos os mamferos. Portanto, o aspecto fenotpico desses tecidos animais controlado
diretamente pelo DNA.
77
Gentica Molecular
Atroca de bases ocorre porque existemformas tautomricas (Figura 3.19), isto ,
formas alternativas das bases nitrogenadas e que, frequentemente, apresentampareamento
irregular durante a replicao do DNA. Por exemplo, adenina no seuestado normal amino
forma pontes de hidrognio coma timina, mas na forma tautomrica imino pode se parear
coma citosina. Da mesma maneira, timina, no estado ceto, se pareia coma adenina, mas na
forma tautomrica enlica capaz de se parear coma guanina (Figura 3.20). As formas
tautomricas raramente esto presentes nas clulas, mas podemse tornar comuns, graas
ao de agentes mutagnicos naturais ou artificiais.
Assimsendo, certos caracteres tais como produo de gros, produo de leite, teor
de vitaminas emfrutos etc., so bastante complexos e resultamgeralmente da participao
de centenas de genes. No entanto, mesmo que no se conhea completamente o controle
desses caracteres, podemos inferir que o fentipo final surge de maneira anloga quela
descrita para a cor da flor, havendo, porm, centenas de passos metablicos e talvez a
interao dos vrios produtos formados.
3.6 ORIGEMDAVARIABILIDADEGENTICA
A origem da variabilidade gentica so as mutaes e correspondem a mudanas
herdveis queservemcomomatria-primaaosprocessos demelhoramento genticoeevoluo.
Como as mutaes so herdveis, elas devemocorrer na sequncia de nucleotdeos do gene,
provocando alteraesdomesmo e, consequentemente, produzindonovas formas alternativas,
os alelos.
Existemvrias causas que podemprovocar uma mutao gnica, mas que apresentam
sempre uma caracterstica emcomum: todas elas afetama sequncia de bases nitrogenadas
do DNA. Essa alterao gera umnovo alelo e pode modificar a cadeia polipeptdica a ser
sintetizada, dando origemna maioria das vezes, a umnovo fentipo. As causas que podem
provocar alteraes nas sequncias de bases do DNAso:
Substituio de bases - Podem ocorrer vrios tipos de trocas, as quais recebem
denominaes especiais. Assim, a troca de uma purina - adenina ou guanina - por outra, ou
de uma pirimidina - citosina ou timina - por outra, denominada de transio; contudo, a
substituio de uma purina por uma pirimidina, ou vice-versa, denominada de transverso.
Quatro diferentes transies e oito diferentes transverses so possveis, como pode ser
observado no esquema apresentado a seguir:
78
FIGURA 3.19. Bases do DNA e suas respectivas formas tautomricas raras que explicam as
mutaes gnicas advindas de substituio de bases. mostrado o local na molcula em que
ocorrem as alteraes tautomricas. Essas alteraes correspondem mudana de posio do
tomo de H. Emconsequncia, o grupo amino (NH
2
) perde umHe origina o tautmero imino (NH).
De forma semelhante, o grupo enol (COH) tambm perde umH e origina o tautmero ceto (CO).
79
Gentica Molecular
FIGURA 3.20. Diagrama dos pareamentos dos tautmeros, durante a replicao do DNA.
Observe que as formas tautomricas possibilitam o pareamento anormal, o que contribui para
a substituio de bases, que uma das causas de mutao.
A substituio de bases causa alterao em um nico cdon no DNA. O cdon
mutante pode ouno provocar mudana de umaminocido ao longo da cadeia polipeptdica,
possibilitando trs alternativas:
Mutao silenciosa - Nesse caso, a substituio de bases no DNA no altera a
sequncia de aminocidos na cadeia polipeptdica. Por exemplo, seja 3' AGC5' a sequncia
de bases da cadeia molde de umsegmento de DNA, e o aminocido codificado por esse
segmento a serina. Se a citosina no cdon anterior for substituda por uma guanina, o
cdon mutante ser 3' AGG5', o qual tambmcodifica o aminocido serina. Portanto, a
ocorrncia de uma mutao no DNAno traz nenhuma consequncia cadeia polipeptdica,
graas degenerescncia do cdigo gentico. Umefeito similar ao da mutao silenciosa
produzido quando a substituio de base no DNAocasiona a substituio de umaminocido
80
na cadeia polipeptdica sem, no entanto, acarretar nenhuma alterao na sua funo. Esse
ltimo caso chamado de mutao neutra.
Mutao de sentido errado- Quando a substituio de uma base no DNAacarreta
alterao emumaminocido na cadeia polipeptdica, temos uma mutao de sentido errado.
Por exemplo, considerando que no cdon anterior 3' AGC 5' a guanina seja trocada por
adenina, teremos 3' AAC5' que, por sua vez, codifica o aminocido leucina. Emgeral, essa
mutao resulta na produo de uma protena compropriedades diferentes, ocasionando a
formao de umnovo fentipo.
Mutao semsentido- Tem-se esse tipo de mutao, quando de uma troca de bases
no DNAsurge umdos cdons de terminao no mRNA, impedindo a sntese completa da
cadeia polipeptdica. Assim, se a guanina for substituda pela timina no cdon 3' AGC 5',
teremos3'ATC5', quesertranscritoem5' UAG3' nomRNA, oqual umcdonde terminao.
Na Figura 3.21 apresentam-se esses trs tipos de mutaes.
FIGURA 3.21. Esquema de possveis substituies de bases em um segmento de DNA.
Observe que a substituio de bases pode contribuir para uma mutao que no altera a cadeia
polipeptdica (mutao silenciosa Ser : Ser), uma mutao de sentido errado, por substituir
um aminocido na cadeia polipeptdica (Ser : Leu) e uma mutao sem sentido, emrazo de
ocorrncia de um ponto final (UUG : UAG).
81
Gentica Molecular
Adio ou deleo de bases - Aretirada ou a incluso de uma nica base provoca
alteraes na sequncia de DNAa partir do ponto em que ocorreu a deleo ou adio.
Seja, por exemplo, uma molcula de DNAcoma seguinte sequncia de bases:
5' ATGCCGACGTATCAGTAA3' - cadeia senso
ORNAmensageiro transcrito ter a seguinte sequncia de bases:
5' AUGCCGACGUAUCAGUAA3'
Essa sequncia debases, por sua vez, codifica uma cadeia polipeptdicacomos seguintes
aminocidos: metionina - prolina - treonina - tirosina - glutamina. Se, por exemplo, for
adicionado erradamente durante a replicao do DNA, o par A-T, entre o quinto e sexto
pares de bases, a nova molcula do DNAter a seguinte sequncia:
5' ATGCCAGACGTATCAGTAA3'
3' TACGGTCTGCATAGTCATT5'
OmRNAser: 5' AUGCCAGACGUAUCAGUAA3' e a sequncia de aminocidos
dever ser: metionina - prolina - cido asprtico - valina - serina - valina. Como se observa,
a adio de apenas uma base modifica completamente a sequncia de aminocidos na cadeia
polipeptdica sintetizada, a partir do ponto emque ocorre a adio da base nitrogenada no
DNA. Almdisso, desapareceu o ponto final, produzindo, assim, uma cadeia polipeptdica
que certamente no ser funcional.
Pelo exemplo demonstrado, fica evidenciado que a mutao do tipo adio ou deleo
bemmais drstica do que a substituio de bases. De fato, esse tipo de mutao pode ser
letal se a protena original for essencial para a sobrevivncia do indivduo, no sendo assim
passada aos descendentes. Quando o alelo mutante no letal, geralmente forma alelo no
funcional que denominado de recessivo.
Deve ser enfatizado que, como umgene constitudo por centenas de nucleotdeos,
teoricamente, o nmero de alelos para umdado gene muito grande. Isso ocorre porque a
probabilidade de que uma dada mutao reverta ao estado allico anterior muito menor do
que a probabilidade de uma mutao adicional para umnovo estado allico. necessrio
comentar que, apesar do grande nmero de nucleotdeos que constitui umgene, a frequncia
de mutao muito baixa por ser o processo de replicao do DNA muito preciso. Ela
corresponde, emgeral, a valores entre 10
-5
a 10
-6
por loco por gerao, embactrias. Em
eucariotos, embora no existamestimativas precisas, imagina-se que as frequncias sejam
semelhantes. Apesar dessas baixas frequncias, o nmero de mutantes na espcie funo
3' TACGGCTGCATAGTCATT5' - cadeia molde ou antissenso
82
do nmero de indivduos. Empopulaes muito grandes como, por exemplo, emuma colnia
de bactria, sempre ocorremmutantes emumoumais genes. De forma semelhante, emuma
cultura de milho, por exemplo, frequente encontrarmos plantas albinas, como resultado de
mutao sem sentido no gene da clorofila. A frequncia de mutao, porm, pode ser
incrementada utilizando agentesmutagnicos que podemser substnciasqumicas ou agentes
fsicos.
Emfuno da regio do corpo do indivduo emque uma clula sofre uma mutao, ela
denominada de somtica, se ocorrer emqualquer clula, de modo que no seja herdada.
Entretanto, se a clula somtica mutante originar umtecido reprodutivo e o alelo mutante for
passado para umgameta, ele ser herdvel. Igualmente, se a mutao ocorrer nas clulas da
linha germinativa ou no prprio gameta, sendo, portanto, herdvel, chamada de mutao
germinal ou gamtica.
3.7 GENES, ALELOSEDNA
Uma pergunta frequentemente formulada se todo o DNAde umorganismo constitui
os seus genes. Se compararmos as quantidades de DNAde diferentes organismos, notamos
que sua variao muito grande. Oexcesso de DNApor genoma ocorre, principalmente,
nos organismos superiores. Omilho, por exemplo, possui cerca de 1500vezes a quantidade
de DNAda bactria Escherichia coli. Abactria, apesar de ser um procarioto, um ser
autnomo e, portanto, possui todos os genes necessrios para a sua sobrevivncia. Assim,
errneo afirmar que o milho possui 1500 vezes mais genes do que a E. coli, na realidade
apenas cerca de oito vezes(Tabela 3.4). Defato, estudos realizados comDNAde eucariotos,
procariotos e vrus mostraramque o DNAde vrus e de procariotos faz parte quase somente
de seus genes. No entanto, os eucariotos possuemtrs classes de DNA: 1. Os altamente
repetitivos, que so sequncias pequenas, de comprimentos entre 6 e 300 pares de bases e,
cada sequncia repetida at um milho de vezes por genoma; 2. Os moderadamente
repetitivos, emque cada segmento ocorremrepetidos entre mil e dez mil vezes; 3. E os no
repetitivos.
ODNAaltamente repetitivo concentra-se principalmente prximo do centrmero, e
acredita-se que sua funo esteja relacionada como alinhamento dos cromossomos durante
as divises celulares. Portanto, no so genes. Entretanto, pequenas sequncias de DNA
altamente repetitivo ocorremao longo de todo o genoma e at mesmo dentro de muitos
genes, nas regies no traduzidas do primeiro e ltimo xon. O moderadamente repetitivo
constitui alguns poucos genes que se encontramrepetidos, como os de rRNAe de histonas,
e tambm devem corresponder s inmeras sequncias que participam da regulao da
expresso dos genes, as quais tambmno so genes e simstios regulatrios (captulo 19).
J, o DNAno repetitivo representa a grande maioria dos genes.
83
Gentica Molecular
TABELA 3.4. Nmero de genes de algumas espcies.
Outro ponto tambma ser comentado questionar a diferena entre gene e alelo sob
o ponto de vista molecular. Emgeral, pode-se dizer que os genes possuemnmeros muito
diferentes de pares de nucleotdeos, uma vez que correspondema segmentos diferentes do
DNA- situados emlocos diferentes do cromossomo. Almdisso, os eucariotos emgeral,
possuemnmeros diferentes de xons e ntrons, variando de uma cinquenta. Portanto, a
diferena entre os genes se deve basicamentes diferenas de tamanho da cadeia polipeptdica
codificada por cada ume que correspondemaos xons, e tambma variao do nmero de
xons e ntrons. J, os alelos, por corresponderema segmentos homlogos deDNA- possuem
o mesmo nmero de pares de nucleotdeos, quando so provenientes de mutao por
substituio de bases, ou possuemnmeros semelhantes de pares de nucleotdeos, quando
forem originados por mutao do tipo adio ou deleo de bases. Em geral, os alelos
diferentes possuemo mesmo nmero de xons e ntrons.
Espcie Nmero de genes (* estimado)
Mycoplasma genitalium 470
Rickettsia prowazekii 834
Haemophilus influenzae
Escherichia coli
Saccharomyces cerevisiae
Drosophila melanogaster
C. elegans
Arabidopsis thaliana
Homo sapiens
Oryza sativa
Zea mays
1.743
4.288
6.034
12.000*
19.000*
25.000*
35.000*
40.000*
32.000*
84
PROBLEMASPROPOSTOS
1. Acomposio de bases de vrios cidos nuclicos isolados de algumas espcies
fornecida a seguir:
Bases (%)
Espcies
A C G T U
1 20 30 30 20 -
2 40 10 10 40 -
3 30 30 20 - 20
4 40 10 40 - 10
5 30 30 20 20 -
Para cada espcie, caracterize o cido nuclico encontrado.
2. ODNAde uma clula haplide da galinha contm1,3 x10
-12
ge a adenina corresponde
a 28% de suas bases. a) Qual a proporo de citosina esperada nesse DNA? b)
Qual o nmero esperado de nucleotdeos emuma clula somtica? c) Qual seria o
comprimento total do DNAde uma clula haplide, se todos os seus cromossomos
fossemunidos? d) Considerando que o ncleo de uma clula tem3mmde dimetro,
qual a implicao biolgica dessa dimenso emrelao ao comprimento do DNA?
Observao: Considere que o peso molecular mdio de umnucleotdeo 330 daltons
e 1 dalton equivale a 1,67 x 10
-24
g.
3. Considerando ainda o DNA de uma clula haplide da galinha, quantos tipos de
molculas de DNAso possveis? Qual a implicao biolgica desse resultado?
4. Ogene da ovoalbumina da galinha possui 8 xons e 7 ntrons. a)Aprimeira sequncia
na posio 5' da cadeia senso umxon. Considerando que os xons e ntrons esto
numerados emordemcrescente da posio 5' : 3', esquematize a estrutura do pr-
mRNAtranscrito desse gene. b) Suponha que a cadeia polipeptdica codificada pelo
gene da ovoalbumina possua 200 aminocidos. Sabendo-se que o primeiro a lisina
e que o gene possui 2.016 nucleotdeos, quantas bases constituemos ntrons?
5. Uma cadeia da molcula de DNAcontma seguinte proporo de bases nitrogenadas:
20% A, 30% C, 40% G e 10% T. Quais so as propores dessas mesmas bases
esperadas na hlice dupla desse DNA?
85
Gentica Molecular
6. O genoma haplide do bicho-da-seda temapenas uma cpia do gene da fibrona -
protena da seda. Durante a produo da seda, cada clula produz 10
9
molculas
dessa protena, sendo que o gene transcrito 10
4
vezes. Quantas vezes uma mesma
molcula do mRNA traduzida?
7. Considere as 60 protenas diferentes de uma espcie vegetal, cada uma comtamanho
mdio de 120 aminocidos. Qual o nmero de nucleotdeos dos xons relacionados
coma sntesedessas protenas? Admitaque o primeiro aminocido detodas as protenas
no seja a metionina.
8. Ogro do milho pode ser liso ou enrugado. Oliso decorrente de umalto contedo
de amido no endosperma, e o enrugado decorrente da presena de acares solveis
emgua no lugar do amido. Sabe-se que otipo de acar do endosperma controlado
por umpar de alelos, e que cada umcodifica uma cadeia polipeptdica. Qual seria a
explicao bioqumica para formar amido ou acares solveis emgua?
9. Em um dos genes da soja que codifica para a antocianina, existem 1.212 bases
nitrogenadas nos seus xons. Considerando que na cadeia polipeptdica codificada
por esse gene o primeiro aminocido a metionina, pergunta-se:
a) Qual o nmero de aminocidos dessa protena?
b) Qual o nmero de bases nitrogenadas do mRNA?
c) Qual o nmero de tRNAs envolvidos na sntese de uma molcula? Para sintetizar
cada cadeia polipeptdica, quantos ribossomos so necessrios?
10. No sorgo, umdeterminado alelo apresenta a seguinte sequncia de bases:
xon 1 ntron 1 xon 2 ntron 2 xon 3
5 ATG CAC CGA AAT GAT AGA ATT ACG CCC CCA CCACCA CCA CAA TAG A3
3 TAC GTG GCT TTACTA TCT TAA TGC GGG GGT GGT GGT GGT GTT ATC T 5
Acadeia antissenso dessa molcula tema timina como primeira base na posio 3'. A
partir desse alelo pergunta-se:
a) Qual a sequncia de bases no mRNA?
b) Qual o nmero de aminocidos que faro parte da protena codificada por esse
alelo?
c) Se foremsintetizadas 10 molculas de protena, qual o nmero total de tRNAe de
ribossomos que iro participar?
d) Qual a sequncia de aminocidos na protena?
86
e) Considerando a cadeia antissenso a partir da extremidade 5', se ocorrer a deleo
da quinta base - timina - e a adio de uma citosina aps a 18 base, qual ser a
sequncia de aminocidos na cadeia polipeptdica mutante?
87
Organizao do Material Genticoe DivisoCelular
4 ORGANIZAO DO
MATERIAL GENTICO E
DIVISO CELULAR
4.1 INTRODUO
A forma de organizao do material gentico nas clulas varia em funo da
complexidade do organismo. Emorganismosprocariontes - bactrias e algas verde-azuladas,
no h separao entre ncleo e citoplasma e o material gentico encontra-se emummesmo
compartimento denominado nucleide. Nesses organismos, o cromossomo constitudo
apenas de DNA, que normalmente no se associa a qualquer outra molcula, estando livre
para realizar suas funes.
J, os organismos superiores - eucariontes - possuemncleo diferenciado, no qual se
encontra a quase totalidade das informaes hereditrias. Oncleo geralmente esfrico e
pode ser observado ao microscpio tico, quando a clula tratada comcorantes bsicos.
Os seguintes elementos constituemo ncleo e sero descritos a seguir: membrana nuclear,
cariolinfa, cromatina e nuclolo.
1. Membrananuclear- tambmchamada de carioteca, constitudade duas unidades
de membrana separadas uma da outra por um espao de 100 a 150 . Uma estrutura
peculiar dacarioteca a presenade poros que colocamemcontato a cariolinfa e o citoplasma.
Na verdade, os poros apresentamuma estrutura complexa. Seu dimetro de 500 a 800
, pormno se verifica umlivre contato da cariolinfa como citoplasma. Nesse local, existe
uma substncia detectada pela microscopia eletrnica. Almdisso, nos bordos do poro,
existe uma estrutura circular chamadanulo, formadade oito grnulos presentesna superfcie
nuclear e citoplasmtica.Aestrutura do poro complexa e funciona comouma vlvula abrindo
e fechando, permitindo ou no a passagemde macromolculas que so selecionadas por
protenas presentesno complexo do poro. Aexportao deRNAs do ncleo parao citoplasma
e a importao de protenas do citoplasma para o ncleo so reguladas por essas protenas
presentes no complexo do poro. Aestrutura do poro poder ser melhor entendida por meio
da figura 4.1.
Os poros ocupamde 5 a 36%da superfcie da membrana nuclear e so mais frequentes
nas clulas comintensa atividade de transcrio.
88
FIGURA 4.1. Membrana nuclear e corte transversal de um poro.
2. Cariolinfa - a cariolinfa ou nucleoplasma a parte fluda do ncleo. de natureza
coloidal, no corvel e rica emprotenas.
3. Cromatina- o constituintemaisimportante doncleoe constitudaprincipalmente
por DNAe protenas, sendo a quantidade de DNAconstante e a quantidade de protena
varivel, quando consideramos as clulas de uma espcie com mesmo nmero de
cromossomos.
Durante a intrfase, a clula apresenta grande atividade metablica, por isso os
cromossomos esto descondensados e so chamados decromatina. Na diviso, a cromatina
se condensa para tornar possvel a movimentao dos cromossomos para os polos da clula.
Acromatina se encontra na forma deeucromatina ea heterocromatina.Aeucromatina
corresponde poro do cromossomo que est descondensada, cora-se menos intensamente
e possui a grande maioria dos genes. J a heterocromatina se divide em constitutiva e
facultativa. Aconstitutiva a parte do cromossomo permanentemente condensada emtodas
as clulas do organismo. Corresponde s regies prximas do centrmero e telmero e
tambmos cromossomos B, ou extranumerrios, que ocorrememalgumas gramneas como
no milho. Essa poro da cromatina geralmente constituda por sequncias pequenas de
DNA, repetidas at ummilho de vezes e chamadas de DNAaltamente repetitivo, sendo,
normalmente, desprovida de genes. Aheterocromatina se caracteriza por apresentar uma
replicao tardia, no final do perodo de replicao do DNA. Aheterocromatina facultativa
aquela condensada na intrfase s de alguns cromossomos sexuais, como por exemplo, o
cromossomo X, formando o corpsculo de Bahr que ocorre nas fmeas de mamferos.
A condensao da cromatina um fenmeno intrigante pela sua intensidade e
complexidade. Apenas para ilustrar, no milho existem20cromossomos nas clulas somticas.
89
Durante a metfase, que a fase emque os cromossomos encontram-se na condensao
mxima, se elesfossemenfileirados, mediriammais oumenos 80 Im. Porm, o comprimento
das 20 molculas de DNAdos mesmos 20 cromossomos, se fossemenfileiradas, mediriam
4,62 m. Portanto, a reduo de comprimento do DNA do milho at atingir o estdio de
cromossomos metafsicos da ordemde 57 mil vezes.
Acondensao da cromatina, para formar os cromossomos, envolve vrios estdios.
No primeiro estdio, formada uma estrutura chamada nucleossomo e que a base para
formao da fibra mais fina da cromatina com110 de dimetro.
Na constituio do nucleossomo, o DNAest intimamente associado a cinco tipos de
protenas bsicas, as histonas, e que so denominadas de H1, H2A, H2B, H3 e H4. O
nucleossomo uma estrutura comaproximadamente 110 de dimetro, formado por um
ncleo comoito molculas de histonas sendo duas molculas de cada uma das histonas H2A,
H2B, H3 e H4. Emtorno desse ncleo, enrola-se umsegmento de DNA, emmdia de 146
pares de base, numtotal de 1,75 volta (Figura 4.2). Entre dois nucleossomos vizinhos, existe
umsegmento de DNAde cerca de 54 pares de bases. Externamente a cada nucleossomo
associa-se histona H1, coma funo provvel de aproximar dois nucleossomos vizinhos
para formao da fibra de 110 de dimetro. Assim, considerando os 200 pares de bases
do DNAemcada nucleossomo, multiplicado pelo comprimento de cada par de bases, que
de 3,4 , temos o comprimento do segmento de DNAde 680 . Como esse comprimento
reduzido ao dimetro do nucleossomo de 110 , deduz-se que a condensao, nesse
primeiro estdio, de aproximadamente sete vezes.
FIGURA 4.2. Diagrama de um nucleossomo mostrando as oito molculas de histonas de
quatro tipos (duas de H2A, H2B, H3, H4) circundadas por 1,75 voltas da hlice dupla de DNA.
Observe que a histona H1 liga-se externamente a esta estrutura.
90
No segundo estdio de condensao da cromatina, provavelmente a fibra de 110
assume uma estrutura emziguezague, chamada desolenide(Figura 4.3). Emconsequncia,
forma-se uma fibra comdimetro de aproximadamente 300 e que pode ser observada no
ncleo interfsico. Nesse segundo estdio, o comprimento do DNAfica cerca de 40 vezes
mais curto. Esse o nvel de condensao da eucromatina. Existem outros estdios de
condensao para que a cromatina se transforme nos cromossomos nas divises celulares.
Considerando novamente os cromossomos metafsicos do milho, que so 57 mil vezes mais
curtos do que o DNA, verifica-se que a maior intensidade da condensao ocorre somente
aps a clula iniciar a diviso celular. Nessa fase, o solenide sofre novas espiralizaes e
dobramentos que so contidos emumesqueleto protico. Essa nova estrutura se enrola,
dobra-se e constituir o cromossomo metafsico, atingindo, portanto, o grau mximo de
condensao (Figura 4.4).
FIGURA 4.3. Modelo de um solenide ilustrando o segundo estdio de condensao da
cromatina dos organismos eucariontes. Essa estrutura responsvel pela condensao de
cerca de 40 vezes, formando uma fibra com cerca de 300 Q de dimetro.
91
FIGURA 4.4. Esquema de condensao da cromatina a partir da molcula de DNA at atingir
o estdio de cromossomo metafsico.
Os cromossomos foram descobertos em 1842 por C. Von Nageli. Em 1879, W.
Flemming empregou o termo cromatina para os cromossomos descondensados no ncleo
interfsico e que se coravamcomcorantes bsicos. Apalavra cromossomo foi utilizada por
W. Waldeyer em1888, para se referir cromatina condensada durante as divises celulares.
Morfologicamente, os cromossomos tmo aspecto geral de umbasto comuma ou
duas regies mais estreitas. Uma dessas regies o centrmero ou constrio primria.
Esta comuma todos os cromossomos e o local onde se prendemas fibras do fuso que
movimentamos cromossomos durante a diviso celular. Ocentrmero, dependendo de sua
posio, divide o cromossomo em dois segmentos chamados de braos. Com base nos
comprimentos relativos dos braos, existemquatro tipos de cromossomos (Figura 4.5). Esses
tipos so definidos por meio da razo de brao (rb) que corresponde ao comprimento do
Cromossomo
Metafsico
92
brao maior dividido pelo comprimento do brao menor. Os tipos de cromossomos so:
metacntrico comrb = 1,00 - 1,49; submetacntrico comrb = 1,50 - 2,99; acrocntrico
com rb > 3,00; telocntrico com rb =
"
. Asegunda regio mais estreita a constrio
secundria que s ocorre emalguns cromossomos e o local onde se forma o nuclolo,
sendo tambmchamada de regio organizadora do nuclolo(RON). As extremidades do
cromossomo so chamadas de telmeros, os quais tma propriedade de impedir que dois
cromossomos se fundam.
FIGURA 4.5. Tipos de cromossomos. A) metacntrico; B) submetacntrico, C) acrocntrico
e D) telocntrico.
Quando uma clula inicia a diviso, cada cromossomo formado por dois filamentos
paralelos unidos pelo centrmero. Cada filamento recebe o nome de cromtide e possui
uma molcula de DNA(de hlice dupla). Portanto, numcromossomo comduas cromtides
(cromossomo duplicado), existemduas molculas de DNAidnticas, emconsequncia da
replicao semiconservativa da nica molcula de DNAdo cromossomo interfsico que
precede a diviso celular. Por isso, diz-se que um cromossomo duplicado possui duas
cromtides irms (Figura 4.5).
Para considerar a quantidade de DNApor clula, tomemos como exemplo novamente
o milho. Numgameta dessa espcie existem10 cromossomos diferentes, cada umcomuma
molcula de DNA. Denomina-se de Ca quantidade de DNAdesse gameta. Quando dois
gametas se unem, forma-se o zigoto que passa a ter 2Cde DNA. Quando o DNAdo zigoto
se replica para ocorrer a primeira mitose, a quantidade de DNAchega a 4C, que novamente
se reduz a 2Cnas clulas filhas da mitose e a C, nos gametas.
4. Nuclolo - uma estrutura geralmente esfrica, associada constrio secundria
do cromossomo e constitudo de RNAribossmico (rRNA) transcritos da RON. Onuclolo
93
maior nas clulas comgrande atividade de sntese protica e o local onde produzido o
ribossomo. Essa produo consiste na associao dos rRNAdos tipos 28S, 18S, 5,8S e 5S
comcerca de 70 protenas diferentes.
4.2 DIVISOCELULAR
Uma planta de milho, por exemplo, surge a partir da unio de dois gametas umdos
ncleos reprodutivos do gro de plene a oosfera - para dar origema uma clula denominada
ovo ouzigoto. Essa clula se multiplica inmeras vezes e se diferencia, originando o embrio
da semente. Este, por sua vez, quando posto a germinar, dar incio formao de uma
planta adulta por intermdio tambmdos processos de crescimento e diferenciao. Sendo
assim, na formao de uma planta ou mesmo de umanimal, esto envolvidos dois processos
bsicos: o crescimento e a diferenciao.
Uma planta de milho adulta possui milhes de clulas, de modo que fcil entender
que o crescimento se manifesta via o aumento no nmero de clulas. Ocrescimento tambm
ocorre emrazo do aumento no tamanho das clulas, pormesse incremento normalmente
limitado e a sua contribuio para o crescimento total do indivduo insignificante emrelao
ao aumento do nmero de clulas.
Para aumentar o nmero de clulas, necessrio que a clula pr-existente se divida
emduas e essas duas emquatro e assimpor diante. Oprocesso de divisocelular conhecido
por mitose. Tanto nos vegetais como nos animais, a mitose ocorre principalmente nas clulas
no diferenciadas do corpo. Nos vegetais, essas clulas correspondemaos meristemas e
nos animais elas ocorremprincipalmente nos epitlios e na epiderme.
A maioria dos eucariotos diplide, isto , possui os diferentes cromossomos
organizadosaos pares. Os cromossomos queconstituemumpar sochamados dehomlogos,
sendo morfologicamente idnticos e contmos mesmos genes. Onmero gamtico de uma
espcie ncromossomos e o nmero somtico 2n. Onmero bsico de cromossomos de
uma espcie x. Assim, espcies diplides so aquelas que apresentam2n=2xcromossomos,
isto , o conjunto bsico de cromossomos ou genoma repetido duas vezes (2x). Omilho,
que tomamos como exemplo, possui emcada clula 2n = 2x = 20 cromossomos, ou seja,
dez pares de cromossomos homlogos, isto , toda a informao necessria para formar
uma planta de milho est distribuda nesses dez pares de cromossomos. Na Tabela 4.1,
esto apresentados os nmeros de cromossomos de algumas espcies. Amaioria das espcies
temnmero par de cromossomos porque so diplides ou mesmo poliplides e possuem
reproduo sexuada.
94
TABELA 4.1. Nmero de cromossomos de algumas espcies.
Embora os cromossomos homlogos possuama mesma morfologia, geralmente h
considervel diferena emforma e tamanho, quando se consideramos cromossomos no
homlogos, observando-se o mesmo quando se comparam a cromossomos de espcies
diferentes.
Aclula, antes de entrar no processo mittico propriamente dito, passa por umciclo
interfsico. Esse ciclo interfsico uma sequncia de eventos que ocorre entre o final de uma
diviso e o incio de outra. Dessa forma, o ciclo interfsico pode ser considerado como um
perodo de preparo para a prxima diviso. Ele dividido emtrs estdios; a durao de
cada umdesses perodos varia de espcie para espcie, de rgo para rgo e mesmo entre
as clulas de umrgo. Na Figura 4.6, mostra o ciclo celular, isto , a intrfase e a mitose, de
Vicia faba que temuma durao emtorno de 20 horas. Aquantidade de DNA, medida em
picogramas (10
-12
g), de uma clula haplide C. Assim, nos estdios G
1
e G
2
, a clula
apresenta 2Ce 4Cde DNA, respectivamente.
Nome comum Nome cientfico
Nmero de cromossomos nas clulas
somticas
Plantas
Melncia Citrulus vulgaris 22
Milho Zea mays 20
Tomate Lycopersicon esculentum 24
Feijo Phaseolus vulgaris 22
Arroz Oryza sativa 24
Trigo Triticum vulgaris 42
Batata Solanum tuberosum 48
Samambaia Ophioglossum reticulatum 1260
Mamferos
Bovinos Bos taurus 60
Sunos Sus scrofa 38
Cavalo Equus caballus 64
Jumento Equus asinus 62
Co Canis familiares 78
Gato Felis catus 38
Homem Homo sapiens 46
Aves
Galinhas Gallus domesticus 78
Insetos
Formiga Myrmecia pilosula 2
Drosfila Drosophylla melanogaster 8
95
FIGURA 4.6. Ciclo celular de Vicia faba mostrando a durao relativa das trs fases da
intrfase (G
1
, S e G
2
), da Mitose e a quantidade de DNA presente nas clulas em cada estdio.
a) Estdio G
1
- Nesse estdio, a clula aumenta de tamanho e h uma intensa sntese
protica e de cido ribonuclico. Amaioria das protenas sintetizadas ter funo enzimtica
no processo de replicao do DNA.
b) Estdio S - o estdio de sntese, no qual ocorre a replicao do DNA. Essa
replicao semiconservativa (ver Captulo 3), de modo que, aps a replicao, cada
cromossomo passa a ser composto de duas cromtides irms. Essas cromtides partilham
de umcentrmero comume apresentamevidentemente a mesma sequncia de bases, isto ,
a mesma constituio gentica.
c) Estdio G
2
- Nesse estdio ocorrem algumas snteses de RNA e protenas. o
perodo que vai da replicao ao incio do processo mittico, sendo de menor durao que
os demais.
Mitose - Amitose constituda por uma sequncia contnua de eventos e que para
facilitar dividida emfases denominadasprfase, metfase, anfase e telfase. Considere
novamente uma clula de milho como exemplo. No entanto, para simplificar, utilizaremos
apenas dois pares de cromossomos, portanto reduzindo-se numa clula 2n =4 (Figura 4.7),
sendo que emumdos pares de cromossomos homlogos, esto os alelos responsveis pela
cor da planta, representados por Rque determina planta roxa e por r para planta verde, e no
96
segundo par de homlogos os alelos responsveis pela cor da semente, sendoYresponsvel
por semente amarela e y por semente branca.
Prfase - Aprfase marcada pela condensao dos cromossomos, quando o ncleo
se apresenta como se fosse umnovelo de l comfios emaranhados. Durante a prfase, a
condensao dos cromossomos progressiva. Nessa fase, os cromossomos j se encontram
comdois filamentos longitudinais denominados cromtides irms, e que so os produtos da
replicao do DNA na intrfase. No final da prfase, observa-se o desaparecimento dos
nuclolos e da membrana nuclear, o deslocamento dos cromossomos para o equador da
clula e a formao das fibras do fuso no citoplasma.
Metfase - Ametfase corresponde ao perodo emque os cromossomos esto no
equador da clula formando a placa metafsica e esto no mximo de sua condensao.
Nessa fase, cada cromossomo est preso s fibras do fuso por meio de seu centrmero.
Como se nota na Figura 4.7, as fibras unem as cromtides irms por intermdio de seus
centrmeros aos plos opostos da clula.
FIGURA 4.7. Mitose.
97
Anfase - No incio da anfase, ocorre a separao dos centrmeros, de modo que
cada cromtide passa a ter o seu prprio centrmero. As cromtides irms, agora livres,
dirigem-se aos plos opostos. Aps a separao, as cromtides passama ser denominadas
de cromossomos.
Telfase - Quando os cromossomos chegamaos plos, termina a anfase e inicia-se
a telfase. Os acontecimentos dessa fase so o inverso dos observados na prfase, isto ,
ocorre a formao da membrana nuclear, os cromossomos se descondensame, emseguida,
reaparecemos nuclolos. Simultaneamente, o fuso desaparece e a clula se divide emduas
clulas filhas geneticamente idnticas. Aidentidade emconstituio gentica das clulas filhas
pode ser notada, comparando-se comaconstituio da clula mena fase G
1
, e consequncia
da replicao semiconservativa dos cromossomos na fase S e tambm da separao das
cromtides irms para os plos opostos na anfase.
4.3 CONSEQUNCIASGENTICASDAMITOSE
Vimos que uma clula me produz por meio da mitose duas clulas idnticas
geneticamente. Isto significa que todas as clulas que compemuma planta de milho - clulas
do tecidosomtico - foramderivadas da clula ovoouzigoto, viaprocesso mitticoe, portanto,
so idnticas a ela. Surge ento a pergunta: j que as clulas somticas so todas iguais,
como explicar a formao de razes, caule, folhas, pendo, boneca e gros? Mais ainda, por
que esses rgos ocorremsempre no local certo e comsuas caractersticas? As respostas a
estas indagaes so obtidas conhecendo-se o processo de diferenciao celular.
Considerando que todas as clulas emvegetais sototipotentes, isto , contminformaes
suficientes paraoriginar umindivduo completo, idntico quele ao qual elas pertencem, pode-
se dizer, de ummodo muito simplista, que a diferenciao celular nada mais do que o ato de
ligar e desligar os alelos de diferentes genes no local certo e no momento certo. Assim,
nos tecidos queconstituema raiz daplanta, s esto ligados aqueles genes que condicionam
caractersticas associadas s razes. Do mesmo modo, o alelo que condiciona semente amarela
s ser ligado no momento de formao do gro e apenas emalgumas clulas que esto
presentes na inflorescncia feminina.
Emanimais, clulas totipotentes so aquelas capazes de diferenciarem-se emtodos os
tecidos e so encontradas nos embries nas primeiras fases de diviso, isto , quando o
embrio tem de 16 a 32 clulas. As clulas pluripotentes, ou multipotentes podem
diferenciarem-se emquase todos os tecidos, exceto a placenta e os anexos embrionrios e
so encontradas nos embries com32 a 64 clulas. As clulas totipotentes e pluripotentes
constituem-se nas clulas-tronco embrionrias.
O conhecimento do processo mittico tem uma importncia fundamental na
agropecuria, pois ele no s nos explica como ocorre a multiplicao celular como tambm
98
nos permite entender por que certas espcies vegetais, que se reproduzemassexuadamente,
mantma sua constituio gentica. Pode-se afirmar, por exemplo, que umpomar contendo
plantas ctricas, formado commudas oriundas de uma nica planta matriz, uma populao
de plantas geneticamente idnticas, denominada clone. Oprocesso de clonagem, embora h
bastante tempo conhecido e utilizado no reino vegetal, temdespertado ateno e interesse
emanimais, aps ter sido verificado seu potencial na clonagememvrias espcies (Captulo
17). Essa descoberta abriu a possibilidade do emprego dessa tcnica na produo de animais
superiores para explorao econmica. Contudo, devemos estar cientes de suas implicaes
no que diz respeito reduo da variabilidade gentica e dos perigos que isso pode trazer
explorao animal.
4.4 FORMAODOSGAMETAS
Agrande maioria dos organismos superioresse reproduz por via sexuada, que consiste
de dois acontecimentos principais, a gametognese e a fertilizao.
Gametognese a denominao genrica para o processo de formao de gametas,
tanto emanimaiscomoemvegetais. Emanimais do sexomasculino, agametognese chamada
de espermatognese porque os gametas formados so os espermatozides. No caso
feminino, ocorre a ovognese a qual culmina com a formao do vulo. Emvegetais, a
formao dos gametas masculinos conhecida por microsporognese, enquanto que os
gametas femininos so produzidos pela megasporognese.
Gametognese em animais
Oprocesso de formao de gametas emanimais est mostrado na Figura 4.8a e 4.8b.
Aespermatognesese origina no epitliogerminal dos tbulos seminferos dos testculos.
Dentro desses tbulos, ocorremclulas que sofremrepetidas divises mitticas at formarem
os espermatognios. Estes cresceme se diferenciamnos espermatcitos primrios, os
quais tmcapacidade de sofrer meiose. Aps a primeira diviso meitica, so produzidos os
espermatcitos secundrios que sofrema segunda meiose, originando os espermatdes.
Estas passam por um processo de maturao, formam cauda e do origem aos
espermatozides.
Aovognese ocorre no epitlio germinal do ovrio. Por crescimento e armazenamento
de citoplasma, a ovognia origina o ovcito primrio que sofre a primeira diviso meitica,
produzindo duas clulas de tamanhos diferentes, o ovcito secundrio e o corpsculo polar
primrio. Emalgumas situaes, o corpsculo polar primrio pode sofrer a segunda diviso
meitica, produzindo dois corpsculos polares secundrios. Asegunda diviso meitica do
ovcito secundrio produz umcorpsculo polar secundrio e uma ovtide, a qual passa por
crescimento, diferenciao e maturao para originar o vulo. Todos os trs corpsculos
polares se degenerame no tomamparte na fertilizao.
99
FIGURA 4.8. Gametognese animal - A) Espermatognese, B) Ovognese.
100
Gametognese em vegetais
Agametognese, que ser descrita sucintamente aqui, aquela tpicadas angiospermas
(Figura 4.9).
FIGURA 4.9. Gametognese vegetal. A) Microsporognese, B) Megasporognese.
101
Amicrosporogneseocorre nos sacos polnicosdentro das anteras dasflores, resultando
na formao dos gros de plen. Aclula me dos gros de plen - microsporcito primrio
- sofre a primeira diviso meitica produzindo dois microsporcitos secundrios que, aps a
segunda diviso meitica, originamquatro micrsporos. Estes passampor uma mitose, sem
a citocinese, isto , uma endomitose, produzindo uma clula comdois ncleos. Emseguida,
umdesses ncleos passa por uma segundaendomitose, resultando umgro de plencontendo
trs ncleos, umvegetativo e dois reprodutivos ou gamticos.
Amegasporognese ocorre dentro do ovrio, resultando umrgo reprodutivo com
oito ncleos chamado de saco embrionrio. Aformao do saco embrionriose inicia quando
ummegasporcito se divide por meiose, formando duas clulas haplides. Asegunda diviso
meitica produz uma estrutura contendo quatro clulas, linearmente dispostas, chamadas
megsporos. Aps a meiose, trs megsporos se degenerame o remanescente sofre trs
endomitoses sucessivas. Oresultado uma clula grande contendo oito ncleos e que recebe
a denominao de saco embrionrio. Osaco embrionrio envolto pela nucela e por duas
camadas de tecido materno chamadas de integumento. Esse rgo especializado recebe a
denominao de vulo.
Emuma das extremidades do saco embrionrio, h uma abertura - micrpila na qual
penetra o tubo polnico. Trs dos oito ncleos do saco embrionrio se localizamprximos
micrpila, dois so as sinrgidas que se degeneram, e o terceiro a oosfera. Trs outros
ncleos se posicionamna extremidade oposta e se degeneram, so as antpodas. Os outros
dois ncleos se fundemaproximadamente na regio mediana do saco embrionrio, dando
origemao ncleo polar.
Convmsalientar que otermo vulorepresentaestruturasdistintas quandose consideram
animais ou vegetais. Enquanto em animais, o vulo uma nica clula com funo
reprodutiva - gameta feminino, emvegetais, ele representa umrgo, dentro do qual est
presente o gameta feminino - oosfera -, almde outros ncleos que no tomamparte da
fertilizao.
Fertilizao
Afertilizao umfenmeno que consiste na penetrao do vulo por umgameta
masculino, originando umzigoto. Para isso, necessrio que ocorra a fuso dos ncleos dos
dois gametas.
Fertilizao emanimais
Para que ocorra a fertilizao emanimais, necessrio queo espermatozide atravesse
duas camadas que recobrem o vulo. Para isso, o espermatzoide deve liberar enzimas
lticas que digeremcertos componentes dessas camadas, facilitando sua penetrao. To
logo umespermatozide penetra o vulo, este se torna impenetrvel a outros espermatozides.
Ocorre ento a fuso dos dois ncleos haplides, gerando um nico ncleo diplide,
completando, desse modo, a fertilizao.
102
Os gmeos univitelinosouidnticos so oriundospor mitose de umnicozigotoformado
a partir da fecundao de umvulo e de umespermatozide. Portanto, so clones de um
mesmo zigoto e possuema mesma constituio gentica. Os gmeos bivitelinos ou fraternos
so formados a partir da fecundao de dois vulos e de dois espermatozides diferentes.
Assimsendo, so originados de dois zigotos geneticamente diferentes.
BOX4.1. ESPERMATOGNESEEMMAMFEROS
Aespermatognese emmamferos se inicia na puberdade e contnua at a velhice.
Aovognese seinicia na fase embrionriaeos ovcitos primriospermanecemno diplteno
da prfase I da meiose at a puberdade. Aovocitao ocorre no perodo compreendido
entre aprimeiramenstruao oucio ea menopausa. Namaioria dos mamferos, a fertilizao
ocorre antes de a ovognese ter acabado. Apenetrao do espermatozide estimula o
ovcito secundrio a prosseguir a meiose que se encontra estacionadana metfase II.
Fertilizao em vegetais
Afertilizao emplantas envolve a fuso dos dois ncleos reprodutivos do gro de
plen, sendo umcoma oosfera e o outro comos ncleos polares. Por essa razo, emvegetais
ocorre a chamada dupla fertilizao(Figura 4.10). Oprocesso se inicia quando umgro de
plense aloja no estigma da flor. Por meio de estmulos hormonais e umidade, presentes no
estigma, o gro de plen germina emitindo o tubo polnico que cresce atravs do interior do
estilete emdireo ao ovrio. As sinrgidas desempenhamumpapel importante, por meio de
estmulos qumicos e fsicos, no crescimento e na orientao do tubo polnico at a entrada da
micrpila. Otubo polnico penetra o vulo atravs da micrpila e libera seus dois ncleos
reprodutivos, enquanto que o ncleo vegetativo desaparece. Aps a chegadado tubo polnico,
as sinrgidas se degeneram. Umdos ncleos reprodutivos se funde coma oosfera, gerando
a clula-ovo ou zigoto, a qual por mitoses sucessivas dar origemao embrio da semente. O
outro ncleo reprodutivose funde comosdois ncleos polares, formandouma clula triplide
(2n =3x), que se divide mitoticamente para originar o endosperma. Portanto, o endosperma
da semente contmdois genomas da planta me e umgenoma do genitor masculino.
103
FIGURA 4.10. Dupla fertilizao em vegetais.
Meiose
Como visto na gametognese, a meiose essencial para a formao dos gametas, que
so os agentes que passamos alelos dos pais para os filhos por intermdio da reproduo
sexuada. Nessa diviso, ocorremvrios acontecimentos, que se constituememfundamentos
de diversos tpicos da gentica. Assim, ser dada nfase, principalmente, a esses
acontecimentos, com o objetivo de mostrar a importncia da meiose como base para o
entendimento da gentica.
Ameiose difere da mitose emdiversos aspectos. Umdeles que aps a replicao
dos cromossomos ocorremduas divises celulares. Outro aspecto que ela se processa
apenas emcertos estdios de desenvolvimento do organismo e emregies especficas do
corpo do indivduo, emclulas denominadas meicitos. Ainda, ao contrrio da mitose, as
clulas filhas no sofremnovas meioses e os cromossomos meiticos no se comportam
individualmente, mas associam-se, como ser visto emseguida.
Como na mitose, o estudo da meiose feito tambmemfases e, antes da diviso, a
clula passa igualmente por um perodo de preparo - a intrfase. Porm, a meiose emsi
104
geralmente gasta um tempo maior do que o observado com a mitose. Emseguida, ser
apresentado umcomentrio resumido das diversas fases da meiose, considerando como
exemplo a mesma clula de milho, esquematizada na Figura 4.7.
Como a meiose consta de duas divises celulares, tem-se a diviso I, ou meiose I, e a
diviso II, ou meiose II. Emcada uma dessas divises geralmente se observama prfase, a
metfase, a anfase e a telfase.
Prfase I (Figura 4.11). Essa uma fase bem mais extensa do que a prfase da
mitose, almde ocorreremdiversos acontecimentos que s so observados na meiose.
Por estas razes, ela dividida emsubfases, que so o leptteno, zigteno, paquteno,
diplteno e diacinese. No leptteno, inicia-se a condensao dos cromossomos, s
que o ncleo se apresenta como umnovelo de fios bemmais finos do que os observados
no incio da prfase mittica. Em seguida, no zigteno, ocorre a sinapse, que o
pareamento dos cromossomos homlogos. Esse pareamento se d entre regies
exatamente correspondentes, graas ao desenvolvimento de uma estrutura denominada
complexo sinaptonmico. Quando o pareamento se completa, tem-se aparentemente os
cromossomos reduzidos metade, sendo que cada um corresponde a um par de
homlogos, denominado bivalente. O perodo em que os homlogos permanecem
pareados corresponde ao paquteno e a fase em que ocorre a permuta gentica (do
ingls crossing-over). Esta corresponde troca de partes entre cromtides homlogas
no irms (Captulo 9).
importante salientar que os cromossomos apresentam-se bastante distendidos
at a ocorrncia da sinapse, sendo que, emseguida, a condensao se torna mais acentuada
e progressiva. Assim, observa-se que do leptteno ao paquteno cada cromossomo
exibe um padro de regies densas, os crommeros, interligados por regies menos
densas.
Ainda na prfase I, a tendncia de separao dos homlogos caracteriza odiplteno.
Essa separao no se completa, pois eles permanecemunidos emdeterminados pontos,
os quiasmas, considerados os locais onde ocorrerampermutas no paquteno. Somente
nessa subfase que se nota cada cromossomo duplicado, comduas cromtides, apesar de
a replicao ter ocorrido na intrfase. Adiacinese corresponde ao final da prfase I e
quando os bivalentes atingem a condensao mxima. Nessa fase observa-se a
terminalizao dos quiasmas, que corresponde ao seu posicionamento nas extremidades
do bivalente. Ainda nesse final da prfase I, se d o desaparecimento do nuclolo e da
membrana nuclear (Figura 4.11).
Metfase I corresponde etapa em que ocorre a orientao dos bivalentes na
placa metafsica. Os cromossomos homlogos do bivalente ficamequidistantes do equador
da clula, orientados para os plos opostos e presos s fibras do fuso, por meio de seus
105
centrmeros. importante frisar que a orientao dos bivalentes se processa ao acaso,
tornando-se assimo acontecimento fundamental para a distribuio independente dos genes
situados nos cromossomos no homlogos. Esta , portanto, a base da lei da distribuio
independente ou segunda Lei de Mendel (Figura 4.11).
Anfase I, ao contrrio do observado na anfase mittica, ocorre a segregao dos
cromossomos homlogos duplicados para polos opostos e, emconsequncia, cada ncleo
filho a ser formado receber um nmero de cromossomos reduzido metade. Esse
acontecimento o responsvel pela formao de gametas com a metade do nmero de
cromossomos das clulas somticas.
Telfase I, os cromossomos homlogos chegamaos polos da clula. Essa fase difere
da telfase mittica, porque o nmero de cromossomos est reduzido metade e cada
cromossomo possui duas cromtides (Figura 4.11).
Aps a diviso I, segue umperodo interfsico, a intercinese, que precede a diviso
II. interessante notar quea telfase I e a intercinese so fasesopcionais, sendo apresentadas
apenas por algumas espcies. Na intercinese, ao contrrio da intrfase pr-meitica, no
ocorre a replicao de DNA, apenas sntese de RNA.
Meiose II - Emgeral, a segunda diviso se assemelha mitose, apenas diferindo
quanto ao nmero de cromossomos, que j foi reduzido metade, e tambm, quanto s
cromtides de um cromossomo duplicado, que ficammais separadas. Sob o ponto de
vista gentico, importante visualizar a constituio dos produtos da meiose. Cada ncleo
haplide formado aps a Anfase II recebe uma das quatro cromtides de cada bivalente,
resultando assimnas quatro clulas filhas de ummeicito, e que se diferenciaro nos gametas
do milho. interessante notar que a constituio gentica desses gametas diferente
(Figura 4.11), ao contrrio das clulas filhas de mitose.
106
107
FIGURA 4.11. Meiose.
prender
108
BOX4.2. CONSEQUNCIADEIRREGULARIDADESNOPAREAMENTODOS
CROMOSSOMOS HOMLOGOS
Aausnciade pareamento entre oscromossomos homlogos, ouseja, a ausncia da
sinapse no zigteno da prfase I da Meiose pode levar a umprocesso meitico irregular
resultando emesterilidade.Aocorrncia de cromossomos assinpticospode ser decorrente
da falta de homologia entre eles. Por exemplo, o burro e a mula (2n=2x=63) so hbridos
interespecficos, oriundosdocruzamentodagua(Equuscaballus, 2n=2x=64)comojumento
(Equus asinus, 2n=2x=62) e normalmente so estreis. Aesterilidade ocorre pela falta de
homologia dos cromossomos das duas espciesgenitoras, ouseja, daassinapse entre seus
cromossomos. Portanto, a Meiose irregular no havendo a formaode gametas viveis.
4.5 CONSEQUNCIASGENTICASDAMEIOSE
J foi comentado que as espcies possuemo nmero de cromossomos constante em
todas as suas clulas. Como durante a fertilizao h unio dos gametas masculinoe feminino
para formar a clula ovo ou zigoto, deve existir algummecanismo para reduzir metade o
nmero decromossomosdasclulas sexuais, issoporque, emcaso contrrio, a cada fertilizao
o nmero de cromossomos seria duplicado. Como foi visto, o processo meitico que se
encarrega de reduzir o nmero de cromossomos pela metade, permitindo que aps a
fertilizao o nmero de cromossomos da espcie permanea constante.
Oprocessocrucialdameioseoqueocorreduranteadiviso I. Acompreenso dessa
fase imprescindvel para quem deseja entender o comportamento dos genes durante a
reproduo. No exemplo considerado (Figura4.11), utilizou-se umaclulame de constituio
RrYy. Sabe-se que umindivduo de gentipo RrYyproduz quatro tipos de gametas - RY,
Ry, rY, ry - coma mesma frequncia: 25%. Quando se considera uma clula, so produzidas
no final da meiose, como j mencionado, quatro clulas filhas, pormde apenas dois tipos,
isto , 50%RYe 50%ry ou 50%Ry e 50%rY. Ento, como se explica o fato comumente
mencionado de que o indivduo RrYy produz quatro tipos de gametas? Existe alguma
incorreo emalguns desses dois princpios que foramcomentados? primeira vista, pode-
se imaginar que h alguma incorreo, mas na realidade isso no acontece. Quando se
considera uma nica clula, so produzidos apenas dois tipos de gametas. Porm, emum
indivduo, o nmero de clulas que sofremmeiose muito grande, e ento espera-se que em
50% dos casos ocorra o caminhamento dos alelos RYpara umplo e ry para outro; nos
outros 50% as combinaes so Ry e rY. Dessa forma, estando envolvido um grande
nmero de clulas, iro ocorrer 25%de cada umdos tipos esperados - RY, Ry, rY, ry.
109
Se a constituio genotpica do indivduo fosse RrYyDd e admitindo-se que cada
gene esteja emum cromossomo diferente, isto , 2n = 6, seriamesperados oito gametas
diferentes com a frequncia de 12,5% de cada um. Contudo, para cada clula me
individualmente, s seriamproduzidos dois tipos de gametas RYDe ryd ou RYd e ryDou
RyD e rYd ou Ryd e rYD, na frequncia de 50% emcada situao. Porm, quando se
considera umgrande nmero declulas, ocorremtodas as combinaespossveis. importante
lembrar que todas as combinaes ocorremcoma mesma frequncia porque a orientao de
cada bivalente aleatria. Assim, todas as orientaes metafsicas tambmocorremcoma
mesma frequncia. Oentendimento do comportamento dos cromossomosdurante a metfase
I fundamental para se entender esses fatos discutidos anteriormente. Na metfase I, ocorre
a orientao dos cromossomos homlogos, isto , se o cromossomo contendo o aleloRest
orientado para umpolo, o cromossomo homlogo contendo o r, evidentemente, s poder
estar orientado para o polo oposto. Omesmo fato vlido para os cromossomos contendo
o alelo Ye y. Assim, com2n=4 cromossomos, so possveis duas orientaes e com2n =
6 cromossomos, so possveis quatro orientaes na metfase. Onmero de orientaes
metafsicas possveis fornecido pela expresso 2
n-1
, em que n representa o nmero de
pares de cromossomos. Assim, como aumento do nmero de cromossomos, o nmero de
orientaes metafsicas incrementado rapidamente. No milho, por exemplo, com2n= 20
cromossomos, so esperadas 2
9
orientaes metafsicas diferentes.
Essas observaes permitem-nos fazer uma constatao de enorme importncia para
a gentica. Durante a metfase I, h umverdadeiro embaralhamento - recombinao - dos
genes, de modo que so obtidas inmeras combinaes novas. Voltemos ao exemplo do
milho com2n=20 cromossomos. Se umindivduo for portador de dez genes, cada umdeles
situado emumcromossomo diferente e representado por dois alelos - heterozigoto -, sero
observadas 2
9
orientaes diferentes na metfase, que iro propiciar o aparecimento de 2
10
gametas comdiferentes constituies genticas. Assim, a meiose permite a recombinao
dos genes - aparecimento de combinaes novas no existentes nos genitores -, o que
evidentemente contribui para ampliar a variabilidade na natureza. Essa ampliao da
variabilidade fundamental para a evoluo das espcies e tambm a principal matria-
prima para os melhoristas de plantas e animais.
Alm de tudo o que foi comentado, possvel fazer mais uma constatao. A
probabilidade de que umindivduo seja heterozigoto para umgrande nmero de genes, e
produza umgameta idntico ao que lhe deu origem muito pequena, na realidade, se for
considerada permuta gentica, essa probabilidade praticamente nula. Vejamos qual a
probabilidade de que umtouro deexcepcional qualidade produza umespermatozide idntico
ao quelhedeuorigem. Onmerodecromossomosdosbovinos2n=60(Quadro 4.1), ou seja,
30 cromossomos vieram do pai e 30 da me; portanto, sero formadas na metfase 2
29
110
orientaes diferentes, provenientes das combinaes dos cromossomos de origemmaterna
e paterna, e que daro no final da meiose 2
30
gametas. Desses gametas, apenas um ter
todos os cromossomos que o touro recebeu do seu pai. Assim, a probabilidade de o
espermatozide dotouro ser idntico aoque lhe deuorigem de 1/2
30
. Comentrios adicionais
sobre esse aspecto sero novamente apresentados no Captulo 7.
Embora a diviso meitica seja um processo preciso, possvel ocorrer algumas
anormalidades que podem resultar na esterilidade total ou parcial do indivduo. Essas
anormalidades ocorrememrazo de problemas durante o pareamento e a distribuio dos
cromossomos homlogos. Essas situaes sero estudadas no Captulo 14.
111
PROBLEMASPROPOSTOS
1. Oeucalipto uma espcie que pode ser multiplicada assexuada e sexuadamente. Qual
a diferena entre esses dois processos emtermos prticos? Justifique sua resposta.
2. Por que a meiose importante para a gentica e o melhoramento de plantas e animais?
3. Sessenta clulas de umvegetal coma constituio representada aseguir sofremmeiose:
Apartir dessas clulas, pergunta-se:
a) Qual o nmero de orientaes possveis na metfase I?
b) Quantas clulas so esperadas apresentando uma mesma orientao?
c) Quantos gros de plen so esperados apresentando a constituio MDF?
d) Quantos tipos de gros de plendiferentes so esperados?
4. O alho (Allium sativum L.) uma espcie que s se reproduz por via assexuada.
Que implicao biolgica temesse fato?
5. Umcitologista, estudando a meiose deuma dada espcie, identificou2.048 orientaes
diferentes na metfase I.
a) Qual o provvel nmero de cromossomos no genoma dessa espcie?
b) Desconsiderando a ocorrncia de permuta gentica, qual o nmero esperado de
gametas diferentes?
6. Emcitricultura, comumenxertar-se borbulha de uma planta-matriz de boa qualidade
emumcavalo de limo-cravo. Por que a planta obtida continua produzindo frutos
s de boa qualidade como os da planta-matriz?
7. Umcriador de sunos comprou umreprodutor da raa Duroc de excelente qualidade e
deseja que ele produza espermatozides idnticos ao que lhe originou.
a) Qual a probabilidade de que esse fato ocorra?
b) Qual a probabilidade de umde seus espermatozides apresentar 10 cromossomos
provenientes do gameta que lhe deu origem?
Desconsidere a ocorrncia de permuta gentica e lembre-se de que emsunos 2n=38.
112
8. O burro umexcelente animal de trao, sendo umhbrido interespecfico entre o
jumento (Equus asinus, 2n = 62) e a gua (Equus caballus, 2n = 64). Apesar do seu
vigor fsico, ele no produz descendentes. Sugira algumas explicaes sobo ponto de
vista citolgico para a sua esterilidade.
113
Mendelismo
5 MENDELISMO
5.1 INTRODUO
Otermo controle gentico monognica utilizado por alguns geneticistas para os
casos emque os genitores diferememsomente uma caracterstica, controlada por umgene;
outros, emcontrapartida, tmutilizado essetermo para qualquer cruzamentoemque somente
uma caracterstica controlada por umgene est sendo considerada, no interessando se os
genitores diferememoutros caracteres. Aqui ser utilizado o termo nesse ltimo sentido.
Como determinadoocontrole gentico deumcarter? Para responder a essa pergunta,
sero utilizados basicamente os mesmos procedimentos empregados por Mendel no
estabelecimento dos princpios do controle gentico.
5.2 ETAPAS NO ESTUDO DO CONTROLE GENTICO DE UM
CARTER
5.2.1 Escolha do Material
Na determinao do controle gentico, necessrio que o carter considerado
apresente expresses contrastantes ou formas alternativas, isto , queexistavariabilidade.
Como exemplo, ser considerada a determinaodo controle gentico datextura das sementes
do milho. Atextura da semente do milho pode ser lisa - milho normal - ou enrugada - milho
doce. Ento, para se estudar o controle gentico desse carter o primeiro passo a obteno
de indivduos contendo esses dois tipos de sementes.
5.2.2 Conduo do experimento
Uma vez obtido umgenitor comsementes lisas e o outro comsementes enrugadas, a
prxima etapa ser determinar se eles so puros para a caracterstica considerada. Por meio
da forma de polinizao da espcie, ou seja, pode-se saber se ela predominantemente de
autofecundao - autgama - ou de polinizao cruzada algama - possvel inferir se os
genitores so puros ou no. Omilho uma planta de polinizao cruzada. Nesse caso, para
verificar se os genitores so puros, o geneticista pode escolher entre autofecundar as plantas
ou plant-las emlotes isolados. Aautofecundao consiste na fecundao da planta como
seu prprio plen. No caso do milho, esta operao facilmente realizada, coletando-se os
114
gros de plen no pendo - inflorescncia masculina - e colocando-os na espiga - boneca ou
inflorescncia feminina - da mesma planta. Olote isolado consiste no plantio de cada umdos
genitores emumlocal que dista de qualquer cultura de milho empelo menos 200 me deixar
que as plantas intercruzem-se naturalmente. Para certificar se os genitores so puros, basta
utilizar umdesses mtodos e observar a descendncia. Se nas sementes provenientes do
genitor de sementes enrugadas no ocorrer nenhuma lisa ou vice-versa, porque eles no
segregame, portanto, so puros.
De posse dos genitores puros, deve-se obter a primeira gerao filial - gerao F
1
.
Para isto, necessrio realizar o cruzamento entre os dois genitores. Emse tratando da
cultura do milho, o cruzamento pode ser realizado artificialmente planta a planta, tomando-se
o plen de umdos genitores e colocando-o na boneca do outro genitor. Pode-se tambm
trabalhar comlotes isolados. Essa ltima opo muito mais fcil e amplamente utilizada.
Nesse caso, deve-se semear emlote isolado, linhas de ambos os genitores. Pode-se semear,
por exemplo, 5 linhas de 10 m de cada um. Nas linhas laterais, semeia-se o genitor com
sementes lisas e nas trs centrais o de sementes enrugadas (Figura 5.1). Quando o milho
comear a florescer, procede-se ao despendoamento - emasculao - nas linhas do genitor
de sementes enrugadas. Essa operao consiste na retirada da inflorescncia masculina,
antes que as anteras entrem em deiscncia. Isso facilmente realizado puxando-se a
inflorescncia masculina no sentido vertical, poisela se desprende inteiramente, comfacilidade.
Assim, quando da polinizao, as bonecas das linhas centrais - genitor de sementes enrugadas-
FIGURA 5.1. Esquema do cruzamento de dois genitores (P
1
e P
2
) de milho em campo isolado,
P
1
- genitor de sementes lisas, e P
2
- genitor de sementes enrugadas.
115
Mendelismo
recebemplendas linhas laterais - genitor de sementes lisas. As sementes das linhas centrais,
provenientes do cruzamento, constituem a primeira gerao filial - F
1
. Atextura dessas
sementes deve ser anotada. No caso considerado, todas as sementes da gerao F
1
apresentamtextura lisa.
Resta agora a obteno da gerao F
2
- segunda gerao filial. Existemduas opes:
a primeira as sementes da gerao F
1
devemser semeadas emlotes isolados e as plantas F
1
intercruzem-se livremente. Asegunda as plantas da gerao F
1
podemser autofecundadas
artificialmente. Emrealidade, a nica gerao emque a autofecundao e o intercruzamento
fornecemo mesmo resultado na F
1
. Todas as sementes obtidas pertencero gerao F
2
(Figura 5.2). Pode-se tambmobter os retrocruzamentos - RC-, ou seja, o cruzamento da
gerao F
1
comos genitores. Agerao RC
1
ser o resultado do cruzamento da gerao F
1
como genitor de sementes lisas - P
1
-, e a RC
2
, da gerao F
1
como genitor de sementes
enrugadas - P
2
.
FIGURA 5.2. Espiga de milho mostrando a segregao de sementes lisas e enrugadas na
gerao F
2
.
5.2.3 Proposio e teste da hiptese do controle gentico do carater
Oprximo passo consiste na avaliao das segregaes obtidas nas geraes F
2
e em
umdos retrocruzamentos, no caso o RC
2
. Nas espigas provenientes das geraes segregantes
- F
2
e RC
2
-, as sementes lisas e enrugadas devem ser contadas e os dados devem ser
tabulados e apresentados como na Tabela 5.1.
TABELA 5.1. Segregaes obtidas no estudo do carter textura da semente do milho.
Fentipos das sementes
Geraes
Lisas Enrugadas
P
1
460 -
P
2
- 380
F
1
520 -
F
2
365 115
RC
1
450 -
RC
2
185 189
116
Na interpretao dosresultados daTabela 5.1, deve-se lembrar de quesendo os genitores
puros no haver segregao na gerao F
1
. Como vimos, a gerao F
1
apresentoua mesma
textura da semente do P
1
, semente lisa. Na gerao F
2
, houve segregao que se aproxima de
uma relao de 3 sementes lisas: 1 semente enrugada; o RC
2
segregou numa proporo de 1
lisa:1 enrugada. Oprximo passo testar estas hipteses de segregao. Isto , mostrar que a
gerao F
2
, por exemplo, segregou nas propores de 3:1. Para isso, deve-se empregar um
teste estatstico. Nesse caso, utilizado o teste de Qui-quadrado (
2
'
). Para a aplicao desse
teste procede-se da maneira descrita no Captulo 7, utilizando-se a expresso:
Para facilitar a estimativa do
2
5
, conveniente utilizar aTabela 5.2.
TABELA 5.2. Estimativa do
5
3
para testar a hiptese de segregao 3 sementes lisas:1
semente enrugada na gerao F
2
.
Nessa tabela, a frequncia esperada estimadadividindo-se o total observado por 4(3+
1). Dessa forma, 480/ 4=120, quecorresponde frequncia esperadadas sementes enrugadas,
e 120 x 3 = 360 a frequncia esperada das sementes lisas. Depois, basta seguir o que est
indicadonoquadro, obtendo nofinal aestimativado
2
C
5
. Essa estimativadeveser testadae para
isso utilizadaa tabela de
2
5
(Tabela7.8Cap.7). Essatabela exige o nvel de probabilidade ( )
eograudeliberdade(GL), sendooGLcorrespondenteaonmerodeclassesfenotpicas possveis
menos um. Issoporque se existemdois fentipose umnmero fixados degros da F
2
, apenas o
nmero de umdos fentipos varivel o outro encontrado por diferena. Ao nvel de 5%de
probabilidade, que comumente utilizado pelos geneticistas, e comgrau de liberdade de 1 (2
classes fenotpicas - 1) a tabela nos d
2
5
=3,84. Como o valor de
2
C
5 obtido menor que o
tabelado, dizemos queo
2
C
5
nosignificativo eque, portanto, aceitamos ahiptese formulada,
isto , afrequnciaobservadase ajustaaumafrequnciaesperada, considerandouma segregao
de 3:1. De modo idntico, pode-se testar a frequncia observada no retrocruzamento -RC
2
-,
sabendo-se que nesse caso a frequncia observada se ajusta segregao de 1:1. Aprxima
etapa consiste emexplicar esses resultadosgeneticamente.
&
& $
2
2
Frequncia observada - Frequncia esperada
Frequncia esperada
0 5 ?
Fentipo
da gerao F
2
Frequncia
observada (FO)
Frequncia
esperada (FE)
Desvio
(FO-FE)
Desvio
2
(FO-FE)
2
(Desvio)
2
/FE
Semente lisa 365 360 5 25 0,07
Semente enrugada 115 120 -5 25 0,21
Total 480 480
2
c
5 = 0,28
117
Mendelismo
5.2.4 Interpretao Gentica dos Resultados Obtidos
Por que razo na gerao F
1
s se manifesta umfentipo? Qual a causa da segregao
3:1 na gerao F
2
? Isso pode ser explicado conhecendo-se, sobretudo, o comportamento
dos cromossomos durante a meiose para a formao dos gametas (Captulo 4). Seno,
vejamos: o milho uma espcie diplide, ou seja, temos seus cromossomos organizados aos
pares. Almdisso, sabemos que a expresso fenotpica dos caracteres controlada pelos
genes, que podemapresentar algumas formas alternativas denominadasalelos. No presente
caso, suponha um gene condicionando o aspecto das sementes e representado por dois
alelos. Umcondiciona sementes lisas - Su - e o outro condiciona as sementes enrugadas -
su. Pelo exposto, uma planta pura - homozigtica - para sementes lisas deve apresentar a
constituio gentica Su Su, e as de sementes enrugadas, su su. Quando da formao dos
gametas, as clulas haplides obtidas apresentaro apenas umdos alelos de cada par, isto ,
o gameta produzido pelo genitor P
1
(sementes lisas) possuir apenas o aleloSu. Por sua vez,
o gameta produzido pelo P
2
ter apenas a constituio su. Pela unio desses gametas durante
a fertilizao, ser obtido novamente umindivduo diplideheterozigtico, que ter umdos
alelos do P
1
e o outro do P
2
, portanto comconstituio gentica Su su. Considerando que
o alelo para sementes lisas - Su - domina o alelo para sementes enrugadas - su -, pode-se
explicar a ocorrncia de apenas umfentipo na gerao F
1
.
As plantas F
1
devero obviamente produzir dois tipos de gametas, umcontendo o
alelo Su e o outro, o alelo su. Emrazo do comportamento dos cromossomos durante a
meiose, pode-se esperar que 50%dos gametas contero o alelo Sue os outros 50%, o alelo
su. Durante a fertilizao, ocorre a unio ao acaso desses gametas, e o resultado pode ser
visualizado na Tabela 5.3.
As propores genotpicas esperadas na F
2
sero, portanto, de 1/4 Su Su : 1/2 Su
su : 1/4 su su. Como os gentipos Su Su e Su su conferemo mesmo fentipo, pode-se
esperar na gerao F
2
que 3/4 das sementes sero lisas e 1/4 enrugadas, isto , aspropores
fenotpicas de 3:1, como foi observada pelos dados de campo (Tabela 5.4). Pode-se dizer
que uma segregao fenotpica de 3:1 na gerao F
2
indica genotipicamente que a
caracterstica, cujo controle gentico est sendo estudado, controlada por umgene com
TABELA5.3. Gametas produzidos pelas plantas F
1
e a respectiva constituio gentica da F
2
proveniente da unio aleatria dos gametas durante a fertilizao.
Gametas masculinos
Gametas femininos
Su su
Su Su Su Su su
su Su su su su
118
dois alelos, havendo dominncia de umalelo sobre o outro. Utilizando-se o mesmo raciocnio
pode-se explicar o resultado observado no RC
2
.
Os resultados dos dois retrocruzamentos (Tabela 5.5) servempara confirmar essa
hiptese gentica, de que nesse caso est envolvido apenas umgene comdois alelos. Conclui-
se tambmque na reproduo das plantas heterozigticas da gerao F
1
so produzidos dois
TABELA 5.4. Propores fenotpicas e as respectivas constituies genticas das plantas
para o carter textura da semente do milho nos genitores e nas geraes F
1
e F
2
.
Genitores: P
1
x P
2
Fentipos: Semente lisa Semente enrugada
Gentipos: Su Su su su
Gametas: Su su
Primeira gerao filial: F
1
Fentipo: 100% semente lisa
Gentipo: Su su
Gametas: Su : su
Segunda gerao filial: F
2
Fentipos: sementes lisas : sementes enrugadas
Gentipos: Su Su : Su su : su su
Gametas: Su : su
TABELA 5.5. Representao dos resultados dos cruzamentos que explicam as segregaes
obtidas nos retrocruzamentos, considerando o carter controlado por um gene com dois alelos.
P
1
x F
1
P
2
x F
1
Fentipos: Semente
lisa
Semente
lisa
Semente
enrugada
Semente
lisa
Gentipos: Su Su Su su su su Su su
Gametas: Su Su e su su Su e su
Retrocruzamentos: RC
1
RC
2
Fentipos: Sementes lisas sementes enrugadas e
sementes lisas
Gentipos: Su Su e Su su su su e Su su
119
Mendelismo
gametas distintos na mesma proporo, que o fundamento da primeira Lei de Mendel,
ou seja: Os dois alelos de umgene segregam(separam) umdo outro durante a formao
das clulas sexuais, de modo que metade dos gametas carrega um dos alelos e a outra
metade carrega o outro alelo.
5.3 CONCEITOSCOMUMENTEUTILIZADOSPELOSGENETICISTAS
Deve-se salientar que existemmuitos termos utilizados pelos geneticistas que precisam
ser bementendidos. Os primeiros conceitos que devemficar bemclaros so os de gene e
alelos. Esses termos foramcriados em1909 por Johannsen, umpesquisador dinamarqus.
Gene originado da palavra grega genesis, que significa origem, e est de acordo coma
etimologia da palavra, uma vez que ele representa a origemprimria dos caracteres. Nesse
ponto, pode-se conceituar gene como sendo umsegmento de DNA, situado numa posio
especfica de umdeterminado cromossomo (loco) e que participa da manifestao fenotpica
de um certo carter. Alelos so formas alternativas de um mesmo gene que ocupam o
mesmo locoemcromossomos homlogos eque afetamevidentemente amesma caracterstica,
pormde modo diferente. Ouso dos dois termos frequentemente causa equvoco. Para
uma melhor compreenso, voltemos ao exemplo da textura da semente de milho. Essa uma
caracterstica controlada por umgene que est representado de duas formas alternativas, Su
e su. Assimsendo, umindivduo puro Su Su portador de alelos Su iguais e no de genes
Su iguais. Umoutro modo de expressar seria dizer que o indivduoSu Supossui dois alelos
iguais do mesmo gene.
Os genes so simbolizados, de modo geral, por letras do alfabeto romano ou por
abreviaes das designaes dadas aos fentipos do caracter normalmente da lngua do pas
onde foi feita a descoberta do alelo mutante. Geralmente, o alelo recessivo de umgene
simbolizado por letra minscula, enquanto a letra maiscula indica o alelo dominante. O
importante que os alelos devemser sempre representados pela mesma letra. No caso do
gene responsvel pela textura das sementes do milho, foi utilizado o smboloSupara sementes
lisas. Este smbolo derivado da palavrasugary(aucarado), jque o mutante foi identificado
nos Estados Unidos. Quando existemmais de dois alelos (Captulo 8), usa-se a mesma letra,
comumexpoente, que pode ser nmero, letras ou abreviao que lembramo fentipo, para
diferenci-los.
Umoutro termo comumente utilizado gentipo. Ele definido como a constituio
gentica de umindivduo. Se a espcie diplide, o gentipo contmdois alelos de cada
gene, podendo ser homozigtico, quando elesso iguais - SuSue susu-, ou heterozigtico,
quando os alelos so diferentes - Susu. Diferentes gentipos podemdar origemao mesmo
fentipo, dependendo ou no da ocorrncia da interao allica dedominncia completa.
Assim, SuSue Susu, por exemplo, so gentipos diferentes, pormas sementes apresentam
o mesmo fentipo, isto , solisas. Pode-se dizer que osfentipos so as formas alternativas
120
de expresso de uma caracterstica. Na realidade, como ser visto posteriormente, a
manifestao fenotpica depende no s do gentipo mas tambmdo ambiente.
As clulas sexuais de umdeterminado indivduo recebema denominao degametas.
No caso do gentipo Susu, so produzidos dois gametas diferentes, umcontendo o alelo
Su e o outro, o alelo su. Aunio aleatria desses gametas durante a fertilizao que
produz as segregaes genotpicas caractersticas das geraes F
2
e de um dos
retrocruzamentos.
Asegregao dos gametas, que a expresso da Primeira Lei de Mendel, pode ser
comprovada facilmente. Isso ocorre quando possvel constatar as propores de 1:1
nos prprios gametas. Um dos exemplos refere-se colorao dos gros de plen do
milho que carregamo alelo Wxou o alelo wx. Quando o indivduo homozigtico WxWx,
o gro de plen Wx e possui amilose e amilopectina. Assimsendo, se tratarmos esse
plen comsoluo de iodo, ele colore-se de azul. Nos indivduos de gentipo wxwx o
plen wxe no chega a formar a amilose, pois possui 100%de amilopectina, que se cora
de vermelho. Umindivduo heterozigtico Wxwx produz dois tipos de gros de plen,
aqueles como alelo Wx, que so azuis aps a colorao com iodo, e os wx, que sero
vermelhos. Se for contado o nmero de gros de plen de uma planta heterozigtica
Wxwx, sero encontrados 50% de cada tipo, mostrando que os gametas segregamcomo
previsto na Primeira Lei de Mendel.
O modo mais utilizado para verificar se a segregao est ocorrendo , porm,
por meio do cruzamento teste, ou seja, o cruzamento do indivduo supostamente
heterozigtico, no exemplo indivduos da gerao F
1
com o genitor que possui alelos
recessivos. Isto , o cruzamento teste , neste exemplo, umretrocruzamento. Na Tabela
5.5, est ilustrado um cruzamento teste; observe que, devido ao P
2
ser homozigtico
para o alelo recessivo, o fentipo da descendncia do cruzamento teste depende apenas
da expresso dos alelos presentes nos gametas do indivduo heterozigtico da gerao
F
1
. No caso, as propores esperadas no cruzamento teste so de 1:1, em razo da
segregao dos gametas, contendo os alelos Su e su durante a meiose, ocorrer nestas
propores.
5.4 ESTUDODOCONTROLEGENTICOEMANIMAIS
Umoutro aspecto que deve ser comentado diz respeito ao estudo do controle gentico
dos caracteres em animais. Nesse caso, por no ser possvel realizar a autofecundao,
certificar que umanimal puro-homozigtico-, complica umpouco mais. Porm, se no
acasalamento entre irmos, por exemplo, no ocorrer segregao porque os animais em
questo devemser puros para o carter considerado. Quando se deseja conhecer o controle
gentico de umcarter, emuma espcie cuja descendncia numerosa e que tambmseja
121
Mendelismo
Vale ressaltar que uma coelha pode ter at oito partos por ano emmdia comoito
lparos (filhotes) por parto, o que possibilita obter uma descendncianumerosa, facilitando o
estudo da herana de qualquer carter nessa espcie.
Especialmente para aquelas espcies cuja descendncia no numerosa, e a gerao
mais longa, o controle gentico de umcarter pode ser realizado por meio do estudo da
genealogia. Na elaborao da genealogia, tambmdenominada de pedigree, heredograma
ou rvore genealgica, normalmente so utilizados os smbolos apresentados na Figura
5.4. Na Figura 5.5, mostrado umexemplo de pedigree de uma famlia de ces comatrofia
progressiva da retina. uma doena ocular de origemhereditria que se caracteriza pela
degenerao irreversvel da camada retinal fotoreceptora do olho, causando cegueira em
muitas raas. O gene que controla esta doena o RDS. Observando o pedigree, fcil
inferir que o carter controlado por umgene e que o alelo recessivo confere a enfermidade.
Veja tambmque o macho da gerao III s pode apresentar a doena porque seus pais
eramheterozigticos. Esse macho, da gerao III, foi cruzado com15 fmeas normais,
porma maioria delas deve ser heterozigtica dada a grande frequncia de animais afetados
na descendncia.
possvel vrias geraes por ano, praticamente no h diferena do procedimento adotado
para a cultura do milho, comentado anteriormente. Esse fato pode ser comprovado na Figura
5.3, emque apresentado oestudo do controle genticodo carter cor dapelagemde coelhos.
P
1
P
2
Albino X Aguti
cc CC
F
1
Aguti
Cc
F
2
Albino Aguti
38 126
cc C__
FIGURA 5.3. Resultados do estudo da herana da cor da pelagem em coelhos. Como se
observa, as propores fenotpicas na gerao F
2
se ajustou as propores de 3:1 (
2
5
calculado =
0,29 NS), indicando que o carter controlado por um gene (C) comdois alelos, o dominante C
que confere a cor aguti e o recessivo c a cor albino.
122
FIGURA 5.4. Smbolos mais usados em heredogramas.
123
Mendelismo
FIGURA 5.5. Pedigree (rvore genealgica) de uma famlia de ces com atrofia progressiva
da retina.
5.5 LEI DADISTRIBUIOINDEPENDENTE
Oque foi descrito anteriormente envolvia uma caracterstica controlada por umgene
com dois alelos. Agora ser estudado o que ocorre quando esto envolvidas duas
caractersticas distintas, cadauma controlada por umgene comdois alelos. Para exemplificar,
ser utilizada novamente a cultura do milho e duas caractersticas da semente. Aprimeira
caracterstica refere-se textura da semente que, como j foi visto, pode ser lisa ou enrugada.
Asegunda caracterstica a cor do endosperma da semente que pode ser branco ou amarelo.
Essa caracterstica tambm controlada por umgene comdois alelos, havendo dominncia
do alelo Y, que condiciona sementes amarelas e que domina o de sementes brancas, y.
Utilizando osmesmos procedimentos j descritos, foi realizado o cruzamentode plantas
homozigticas provenientes de sementes lisas e amarelas complantas oriundas de sementes
brancas e enrugadas e foramproduzidos os resultados da Tabela 5.6.
Os dados obtidos na gerao F
1
mostraramque o alelo que condiciona semente amarela
domina o que condiciona semente branca; o mesmo ocorre no caso do alelo de semente lisa
que domina o de enrugada. Considerando cada carter isoladamente, observa-se que na
gerao F
2
ocorreu a segregao de 3:1 emcada caso, pois foramobtidas 354 sementes
124
amarelas para 126 sementes brancas e 365 sementes lisas para 115 sementes enrugadas.
Sendo assim, para cada carter analisado isoladamente, o fenmeno de segregao ocorreu,
como j foi visto nos tpicos anteriores.
TABELA 5.6. Fentipos dos genitores e das geraes F
1
e F
2
provenientes do cruzamento de
plantas de milho homozigticas e contrastantes para a cor e textura das sementes.
Fentipo das sementes
Geraes Amarelo
liso
Amarelo
enrugado
Branco
liso
Branco
Enrugado
P
1
100% - - -
P
2
- - - 100%
F
1
100% - - -
F
2
268 86 97 29
Considerando as duas caractersticas emconjunto, a segregao da gerao F
2
obtida
segue as propores de 9:3:3:1. Essa segregao da gerao F
2
, na realidade, o produto
das segregaes 3:1 de cada uma das caractersticas, isto , (3 Amarelas :1 Branca)
(3Lisas:1Enrugada) =9Amarelas Lisas : 3Amarelas Enrugadas : 3 Brancas Lisas : 1 Branca
Enrugada. Isso est de acordo com a Lei do Produto de Probabilidades que diz: a
probabilidade de que dois ou mais eventos independentes ocorramjuntos o produto das
probabilidades de suas ocorrncias em separado. Vale ressaltar que na gerao F
2
, os
fentipos da textura da semente se combinaramao acaso, comos fentipos da cor.
Como se pode observar, as propores fenotpicas da gerao F
2
(268 sementes
amarelas lisas; 86 sementes amarelas enrugadas; 97 sementes brancas lisas; 29 sementes
brancas enrugadas)esto de acordocomasesperadasbaseada na distribuio independente
-
2
c
0, 77NS 5 ? .
Como as propores fenotpicas obtidas concordam com a lei do produto das
probabilidades, podemos concluir que isso s possvel se a herana das duas caractersticas
for independente, isto , se o comportamento dos alelos que condicionama cor da semente
for completamente independente dos alelos responsveis pela textura da semente.
Alei do produto de probabilidades tambm vlida para as propores genotpicas
da gerao F
2
, isto : . SuSuYY
16
1
YY
4
1
. SuSu
4
1
? Omesmo vlido para as demais
combinaes genotpicas.
Oponto fundamental da distribuio independente a produo de quatro tipos de
gametas empropores iguais (Tabela 5.7). Para a obteno da gerao F
2
, os indivduos da
gerao F
1
sero autofecundados, ou sero intercruzados livremente, como j foi mostrado
anteriormente. Como todos os indivduos da gerao F
1
apresentam o mesmo gentipo
125
Mendelismo
- SusuYy -, os gametas produzidos tanto no plen como no vulo sero iguais; dessa
forma a obteno da gerao F
2
consiste apenas na combinao destes quatro tipos de
gametas dois a dois - masculinos comfemininos - emtodas as possibilidades. Isso pode ser
feito por meio do quadro de Punnett, tambmdenominado Xadrez Mendeliano (Figura
5.6). Note que as propores fenotpicas 9:3:3:1 so resultantes da soma de todas as classes
genotpicas que apresentamo mesmo fentipo.
TABELA5.7. Propores fenotpicas e respectivas constituies genticas para os caracteres
textura e cor das sementes do milho nos genitores e gerao F
1
.
FIGURA 5.6. Segregao para os caracteres textura e cor da semente de milho.
Apartir de resultados como esses, foi enunciada a Segunda Lei de Mendel, tambm
conhecida comoLei daDistribuioIndependente, quediz: Quando dois oumais genes so
considerados, cadaumcomporta-se independentemente dooutro. Esse fatoocorre, emrazo
da distribuioindependentedosgenesduranteameiose, paraaformaodosgametas, isto, os
alelos Suesuse combinamao acaso comosalelosYe ypara formaremos quatrogametas. Isto
pode ser melhor visualizadoutilizando-se ocruzamentoteste(Tabela5.8), que o cruzamento
dosindivduosdagerao F
1
comumindivduo homozigtico portador dosalelosrecessivos.
Genitores: P
1
x P
2
Fentipos: Sementes amarelas lisas Sementes brancas enrugadas
Gentipos: SuSu YY susu yy
Gametas: Su Y su y
1 Gerao filial: F
1
Fentipo: Sementes lisas amarelas
Gentipo: Susu Yy
Gametas: Su Y; Su y; su Y; su y
#
Su Y Su y su Y su y
Su Y 1/16 SuSu YY 1/16 SuSu Yy 1/16 Susu YY 1/16 Susu Yy
Su y 1/16 SuSu Yy 1/16 SuSu yy 1/16 Susu Yy 1/16 Susu yy
su Y 1/16 Susu YY 1/16 Susu Yy 1/16 susu YY 1/16 susu Yy
su y 1/16 Susu Yy 1/16 Susu yy 1/16 susu Yy 1/16 susu yy
!
126
Apartir do cruzamento teste, pode-se verificar que os quatro tipos de gametas do
indivduo heterozigtico da gerao F
1
ocorremempropores iguais para cada tipo (Tabela
5.8). importante salientar mais uma vez que no cruzamento teste, por ser o indivduo
testador homozigtico su su yy, produzido um tipo de gameta (su y) que no altera a
manifestao fenotpica determinada pelos alelos presentes nos gametas do heterozigoto.
Assim, o fentipo da descendncia depender apenas do tipo de gameta produzido pelo
gentipo Su suYy dos indivduos da gerao F
1
.
TABELA 5.8. Resultado do cruzamento teste que comprova a distribuio independente.
F
1
(amarelas lisas) x (brancas enrugadas)
Susu Yy susu yy
Gametas Su Y
Su y su y
su Y
su y
Descendentes
Gentipos Fentipos
Susu Yy Sementes amarelas lisas
Susu yy Sementes brancas lisas
susu Yy Sementes amarelas enrugadas
susu yy Sementes brancas enrugadas
Como jfoi mostrado por meiodo comportamento dos cromossomosdurante a meiose,
a distribuio independente ir ocorrer sempre que os genes estiverem situados em
cromossomos diferentes. Existe uma outracondio emque a distribuio ser independente
quando os genes situam-se no mesmo cromossomo, pormesse assunto ser abordado no
Captulo 9.
5.6 GENERALIZAESDASPROPORESMENDELIANAS
At o momento, foramapresentados exemplos envolvendo apenas umoudois genes.
Quando ocorremtrs genes ou mais, iro aparecer muitas classes genotpicas nas geraes
segregantes. Contudo, o princpio da segregao e distribuio independente dos genes
sempre o mesmo, no importando o nmero de genes envolvidos. Assim, possvel fazer
predies, utilizando a lei do produto das probabilidades, para qualquer nmero de genes de
umorganismo diplide, e considerando cada gene comdois alelos (Tabela 5.9).
127
Mendelismo
TABELA 5.9. Generalizaes do que esperado quando se tem um carter controlado por
diferente nmero de genes. Considerando um indivduo diplide, heterozigtico e com dois
alelos por loco.
Nmero de
Genes
Nmero de
Gametas
Diferentes em F
1
Combinaes
Genotpicas
Possveis em F
2
Classes
Genotpicas
Diferentes em F
2
Nmero de
Gentipos
homozigticos
em F
2
1 2 4 3 2
2 4 16 9 4
3 8 64 27 8
4 16 256 81 16
B B B B B
n 2
n
4
n
3
n
2
n
5.7 MODOPRTICOPARADETERMINAODOSGAMETAS E
DOSDESCENDENTESDECRUZAMENTOS
Quando se trabalha commais de trs genes, a determinao dos diferentes tipos de
gametas fica trabalhosa e ainda podemocorrer omisses. Ummtodo simples e seguro de
determin-los consiste emescrever os alelos do primeiro gene na vertical, comintervalo entre
as letras. Emseguida, frente de cada umescreve-se os alelos do segundo gene. Do mesmo
modo, acrescentamos os de um terceiro, quarto etc., unindo, por traos, aos alelos
acrescentados anteriormente. Seguindo os traos que unemos alelos dos diferentes genes e
anotando todosos alelos pelos quais passaramos traos, temos automaticamentea constituio
dos gametas comrelao aos alelos envolvidos. Oprocesso absolutamente seguro, rpido
e fcil de compreender, como pode ser visto na Figura 5.7.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
128
Queremos salientar quedesdequetenhasidoentendidaaheranadeumgene, se estiverem
envolvidos vrios genes o raciocnio sempre o mesmo e, desde que a distribuio seja
independente, teremos sempre umproduto de probabilidade de cada umdos locos envolvidos.
Seja por exemplo a autofecundao de umindivduo F
1
de constituio Aa BbCc Dd Ee, se
estivermos interessados emverificar a proporo de indivduos como gentipoAABBCC
DDEEna gerao F
2
, procederemos do seguinte modo: para o gene A, esperado na F
2
os
gentipos AA, Aa e aa, como j vimos, nas propores de 1/4, 2/4 e 1/4, respectivamente.
Para os demais genes, logicamente, vlido o mesmo raciocnio. Considerando os genes em
conjunto teremos a probabilidade de ser AA e BB, e ... EE, sendo que esse e indica um
produto de probabilidade (ver Captulo 7). Assim, a proporo esperada do gentipoAABB
CCDD EEdever ser de 1/4 (AA) x 1/4 (BB) x 1/4 (CC) x 1/4 (DD) x 1/4 (EE), isto ,
(1/4)
5
= 1/1024. Se a pergunta fosse para o gentipoAa BBCc ddEE, teramos: 2/4 (Aa) x
1/4 (BB) x 2/4 (Cc) x 1/4 (dd) x 1/4 (EE), ou seja, (2/4)
2
. (1/4)
3
= 4/1024 = 1/256.
Suponhamos agora a seguinte indagao. Qual a frequncia do gentipoAaBbcc DD
ee Ff a partir do cruzamento Aa BB Cc Dd Ee ff x Aa bb cc Dd Ee FF? Nesse caso,
devemos identificar primeiroos locos que esto emheterozigose emambos os indivduos que
sero cruzados, isto , os locos A, De E. Para esses, o procedimento idntico ao anterior. O
FIGURA5.7. Gametas comas respectivas frequncias produzidos por umindivduo de gentipo
Aa Bb Cc DD. Observe que o indivduo homozigtico para o alelo D e, nesse caso, ele
representado apenas uma vez, sendo sua frequncia evidentemente igual a 1. Para os demais
locos so colocados os dois alelos, por estarem em heterozigose. Nesse caso, a frequncia do
gameta AbcD 1/8, o que corresponde ao produto da probabilidade de cada alelo ocorrer neste
gameta, 1/2A x 1/2 b x 1/2c x 1D.
129
Mendelismo
segundo passo identificar oslocos que sohomozigotosemambosospais, no importando se
os paistmalelos iguais ouno, no caso o loco Be o F. Para eles, a descendncia s ter uma
nica possibilidade. Se os alelos so iguais emambos os pais, o descendente ser homozigoto
para aquele loco, se diferentes, o indivduoser heterozigoto. Finalmente, devemos verificar os
locos emque h heterozigose emum dos genitores e homozigose no outro. O loco Cse
enquadra nesse caso, Cc de umlado ecc dooutro. Adescendnciaser 1/2Cc e1/2cc. Temos
ento condio de fornecer a proporo esperada do gentipo desejado. Do exposto 2/4(Aa)
x1 (Bb) x1/2 (Cc) x 1/4 (DD) x 1/4 (ee) x1 (Ff), o que corresponde a 2/128 =1/64.
Se a indagao fosse emtermos fenotpicos, ao invs de genotpicos o procedimento
seria semelhante. Considere, por exemplo, a autofecundao de umindivduo F
1
Aa Bb Cc
Dd Ee, emque as letras maisculas identificamos alelos dominantes. Qual a frequncia
esperada de descendentes com o mesmo fentipo do indivduo da F
1
na gerao F
2
?
Novamente, vamos considerar apenas o locoA. Se h dominncia, os indivduos do gentipo
AAouAada F
2
possuemomesmo fentipo do F
1
. Oouindicaque oseventos so mutuamente
exclusivos, a ocorrncia de umdeles impede a ocorrncia do outro. Nesse caso, teremos
uma aplicao da soma de probabilidade, 1/4 AA+2/4 Aa, como j comentado A_ = 3/4.
Desse modo, na gerao F
2
, indivduos com o mesmo fentipo ao da F
1
, devero ter o
gentipo A_ B_ C_ D_ E_, e iro ocorrer coma frequncia de 3/4 (A_) x 3/4 (B_) x 3/4
(C_) x 3/4 (D_) x 3/4 (E_) = 243/1024.
Vejamos agora o que ocorre comsucessivas geraes de autofecundao. Seja um
indivduo F
1
de gentipo Bb, aps uma autofecundao, teremos na gerao F
2
, os gentipos
BB, Bb e bb com as frequncias de 1/4, 2/4 e 1/4, respectivamente. Aps a segunda
autofecundao, teremos a gerao F
3
. Os indivduos da gerao F
2
que so homozigotos,
pelas razes que j foramapresentadas, mantero a sua constituio genotpica. Porm, os
heterozigotos Bb, que esto coma frequncia de 1/2, devero segregar. Como se observa,
o seu gentipo igual ao da F
1
e aps a autofecundao teremos 1/4 (BB) 2/4 (Bb) 1/4
(bb). Como apenas metade dos indivduos da F
2
so Bb, teremos que multiplicar essas
propores por 1/2. Assim, teremos 1/8 (BB) 2/8 (Bb) 1/8 (bb), como resultado da
descendncia do indivduo F
2
de gentipo Bb. Na F
3
, 3/8 dos indivduos sero BB, sendo
1/4 oriundos da autofecundao do indivduoBBe 1/8 do Bb. Omesmo raciocnio vlido
para o indivduo bb. Teremos, ento, BB(3/8), Bb (2/8) e (bb) 3/8. Como se constata em
cada autofecundao a frequncia dos heterozigotos reduz-se a metade e a dos homozigotos
aumenta (Tabela 5.10). Pode-seextrapolar para uma gerao F
g
qualquer emquea frequncia
do heterozigotoser de (1/2)
g-1
e dosdois homozigotos 1-(1/2)
g-1
. Comoso dois homozigotos
(BB e bb), a frequncia de cada umser de [1-(1/2)
g-1
]/2.
Quando esto envolvidos vrios genes e sucessivas autofecundaes, o raciocnio
anlogo. Seja a autofecundao do indivduo F
1
Aa BbCc DdEe Ff at a gerao F
5
. Qual
a frequncia do gentipo AA BB CC DD EE FF nessa gerao? Como foi visto
130
Se for considerado um indivduo qualquer, no necessariamente da gerao F
1
, a
previso do que ocorre com as autofecundaes a mesma, lembrando apenas que nos
locos emhomozigose no h alterao. Se o interessefor emdeterminar afrequncia esperada
de indivduos como gentipo AABBcc DDEEaps trs autofecundaes de umindivduo
de gentipo Aa BB cc Dd EE, proceder-se do seguinte modo: nos locos que esto em
homozigoseB, Ce Eno halterao, naquelesque esto emheterozigose, Ae D, a frequncia
do gentipo homozigoto, aps 3 autofecundaes, dever ser: [1-(1/2)
3
]/2 = 7/16. A
frequncia esperada do gentipo AABBcc DDEEdever ser ento: 7/16 (AA) x 1 (BB)
x 1 (cc) x 7/16 (DD) x 1 (EE) = 49/256 = 19,14%.
tambmpossvel conhecer todas as combinaes genotpicas na descendncia de
umindivduo qualquer, comn genes emheterozigose e aps g autofecundaes. Entre os
descendentes varivel o nmero de locos comalelos emhomozigose e suas combinaes
podemser previstas pela distribuio binomial (Captulo 7), ou seja:
Em que: a e b so as probabilidades de os locos estarem em homozigose ou
heterozigose, respectivamente; i o nmero de locos emhomozigose e varia de 0 a n en o
nmero de locos envolvidos.
n
i
n i n i
n
i o
(a b) a b
C
>
?
@ ?
0
TABELA 5.10. Frequncias genotpicas esperadas com as sucessivas autofecundaes de
umindivduo de gentipo Bb.
Frequncia genotpica
Geraes
BB Bb bb
F
1
0 1 0
F
2
1/4 1/2 1/4
F
3
3/8 2/8 3/8
F
4
7/16 2/16 7/16
. . . .
. . . .
. . . .
F
g
[1-(1/2)
g -1
]/2 (1/2)
g -1
[1-(1/2)
g -1
]/2
anteriormente, a frequncia do gentipo AAna F
5
dever ser [1-(1/2)
g-1
]/2 = [1-(1/2)
5-1
]/2 =
15/32. Desse modo, na F
5
teremos: 15/32 (AA) x 15/32 (BB) x 15/32 (CC) x 15/32 (DD)
x 15/32 (EE) x 15/32 (FF) = (15/32)
6
= 1,06%.
131
Mendelismo
n g 1 g 1
1 (1/ 2) (1/ 2)
> >
' *
> @
C G
, aps algumas operaes aritmticas chega-se a expresso:
n
g 1
(2 1) 1
>
' * > @
C G
. Como exemplo, seja o gentipo F
1
AaBbCc autofecundado at a gerao
F
6
. Nessa situao, g = 6 e n = 3, assimteremos:
n 3
g 1 6 1 3 3
1 (2) 1 1 (2) 1 (1 31) (32) 32.768
> >
' * ' * @ > ? @ > ? @ ? ?
C G C G
combinaes genotpicas
Entre esse total de combinaes genotpicas pode-se estimar o nmero nas diferentes
classes, contendo locos emhomozigose ou heterozigose.
Ento, coma expanso do binmio (31+1)
3
emque nesse exemplo, 1 refere-se a loco
emheterozigose e 31 a loco emhomozigose e pode-se obter:
3
3 i i n i
n
i 0
(31 1) C (311 )
>
?
0 @ ?
Para i = 0, nenhumloco emhomozigose, tem-se:
1 ) 1 31 (
)! 0 3 ( ! 0
! 3
) 1 31 ( C
3 0 3 0 0
3
? A
>
? A indivduo comtodos os locos emheterozigose;
De modo anlogo, obtm-se:
Apartir dos conhecimentos anteriores possvel obter a probabilidade de se ter um
loco emhomozigose (a), utilizando a expresso a= 1 - (1/2)
g- 1
, e tambma probabilidade
de ter locos emheterozigose (b) b = (1/2)
g-1
. Assim, o binmio assume a expresso
Para i = 2
883 . 2 1 1 3 3 ) 1 1 3 (
2)! - (3 2!
3!
) 1 1 (3 C
1 2 1 2 1 2 2
3
? ( ( ? ( ? ( comumloco emheterozigose e dois em
homozigose;
Para i = 3
3 3 0 3 0 3 0
3
3!
C (31 1 ) (31 1 ) 1 31 1 29.791
3!(3 3)!
( ? ( ? ( ( ?
>
com todos os trs locos em
homozigose.
Depreende-se, ento, que a proporo de indivduos emF
6
comtodos os locos em
heterozigose de 1 em32.768. De modo anlogo, a proporo de indivduos comtodos os
trs locos emhomozigose 29.791/32.768.
importante frisar que se o indivduo a ser autofecundado tiver locos emhomozigose,
estes no segregaro na descendncia e no alteraro o nmero de combinaes genotpicas
derivadas dos locos emheterozigose.
Para i =1
93 1 31 3 ) 1 31 (
)! 1 3 ( ! 1
! 3
) 1 31 ( C
2 2 1 2 1 1
3
? ( ( ? (
>
? ( comdois locos emheterozigose e umem
homozigose;
132
BOX 5.1. EFEITO DE XNIA
Existe alguma diferena no estudo da herana de um carter como a textura da
semente de milhoe, por exemplo, o carter altura da plantaouat mesmo a cor da semente
do feijoeiro? Narealidadenohdiferena. Ametodologia sempreamesmajcomentada,
mas necessrio conhecer bemo carter para fornecer a interpretao correta. Assim, por
exemplo, vemos que umnico gene controlao carter textura da sementede milho, sendo
o alelo Su responsvel pelo fentipo liso e o alelo recessivo su pelo fentipo enrugado.
Para a altura da planta tambmest envolvido umnico gene, sendo o alelo dominanteBr
e o recessivo br responsveis pelos fentipos plantas altas e baixas, respectivamente.
Se for efetuado o cruzamento entre uma planta de milho homozigticaBrBrSuSu
e uma planta brbr susu, sendo esta utilizada como genitor feminino, o que ocorrer?
Sendo o genitor feminino de gentipo brbrsusu, ou seja, fentipo baixo e comsementes
enrugadas. Como ser polinizada por plen Br Su as sementes F
1
tero a constituio
gentica Br br Su su. Como o alelo Su domina o su, as sementes, no caso da gerao
F
1
, sero lisas. Se essas sementes F
1
foremplantadas, teremos plantas F
1
, de gentipo
Br br, que sero altas. Como se v, para o carter textura das sementes, o produto do
cruzamento - gerao F
1
- j se manifestou na gerao da planta me. Quando isso
ocorre diz-se que o carter temxnia, isto , se manifesta sempre uma gerao antes
dos demais caracteres. No caso do carter altura da planta preciso semear a gerao
F
1
, para que a planta F
1
expresse o fentipo, portanto, no apresenta xnia.
Considerando o que foi discutido, pode-se argumentar que qualquer carter
relacionado a sementes deve apresentar o fenmeno de xnia. Arealidade, no entanto,
no essa. Seja, por exemplo, o carter cor da semente do feijo, que pode ser preta,
gentipo PP, e branca, gentipo pp. Se uma planta ppfor polinizada complende uma
planta de gentipo PP, as sementes resultantes sero pretas ou brancas? Se for
considerado o raciocnio anterior, isto , que toda caracterstica da semente possui
xnia, as sementes deveriamser pretas. Contudo, nesse caso, as sementes emvez de
pretas sero brancas. Somente quando essas sementes brancas de gentipo Pp,
provenientes de plantas pp, foremsemeadas, que as plantas F
1
produziro sementes
pretas. Assim, o carter, apesar de ser da semente, no temxnia.
Qual a razo dessa diferena? Na resposta a essa indagao que entra o aspecto
da necessidade de se conhecer detalhes do carter emestudo. No caso da textura do
133
Mendelismo
milho, o fato de ser lisa ou enrugada depende do teor de amido presente no endosperma
da semente, o qual produto da fertilizao. J, a cor da semente uma caracterstica
do tegumento, ou seja, proveniente do desenvolvimento da parede do ovrio, sendo,
portanto, umcarter que se expressa no final do ciclo da planta. Assim, no caso da
semente do feijoeiro, temos caracteres que se expressamnos tecidos embrionrios, na
fase inicial da vida, e apresentam, portanto, xnia, enquanto o tegumento, por ser um
tecido materno, no possui xnia. Assim, a cor do tegumento do feijo determinada
antes da fertilizao. Do exposto, pode-se ento complementar e dizer que o fenmeno
de xnia s ocorre para caractersticas que se manifestamno endosperma e embrio das
sementes, cuja expresso fenotpica dependente do resultado da fertilizao.
Oque ocorre emanimais? Eles apresentamXnia? Como a maioria no temuma
fase intermediria como o caso da semente emvegetais, no h xnia. Contudo, nas
aves, os ovos produzidos uma situao semelhante a das sementes. Vamos utilizar
134
como exemplo, a cor da casca do ovo emaves. Quando umgalo de uma raa que produz
ovos brancos, gentipo oo cruza comgalinha de ovos azuis, gentipo OO, tem-se na
primeira gerao filial 100%de ovos azuis, comgentipo Oo e quando umgalo de uma
raa que produz ovos azuis, gentipo OOcruza comgalinha de ovos brancos, gentipo
oo, temse na primeira gerao filial 100% de ovos brancos, comgentipo Oo. Assim
como ocorreu com a casca da semente do feijo, a cor do ovo no tem xnia, pois a
manifestao de qualquer carter da casca depende da constituio apenas da me. J
quando o vulo fertilizado os caracteres que se manifestam no ovo iro apresentar
xnia, entretanto, namaioria dos casos noh interesse nesses caracteres, pois a observao
do fentipo necessariamente envolveria a retirada da casca e, consequentemente,
dificilmente poderia ocorre a ecloso do pintinho para continuar os estudos genticos.
135
Mendelismo
PROBLEMASPROPOSTOS
1. No milho, a semente pode ser lisa (endosperma comamido) ouenrugada (endosperma
comacar solvel emgua). Apartir do cruzamento de duas cultivares puras, sendo
uma comsementes lisas e outra comsementes enrugadas (milho doce), obtiveram-se
os seguintes resultados:
Populaes Fentipos das sementes (nmero)
Lisa Enrugada
P
1
400 -
P
2
- 320
F
1
560 -
F
2
370 125
a) Fornea uma provvel explicao para a herana do carter.
b) Se uma das espigas F
2
no apresentar a proporo fenotpica 3 lisa:1 enrugada,
qual seria a explicao?
c) Quantas sementes lisas da gerao F
2
deveriam ser semeadas para originar 300
plantas puras?
d) Houtramaneira de comprovar que ocorreusegregao almdo resultado observado
na F
2
?
e) Se as plantas provenientes de sementes lisas da gerao F
2
foremautofecundadas,
qual seria o resultado genotpico e fenotpico esperado?
2. Considerando o carter textura da semente do milho, relatado no problema anterior, o
que ocorreria se o campo de plantas F
1
recebesse 30% dos gros de plen de uma
plantao prxima, homozigtica para sementes lisas?
3. Emgalinhas, a ausncia de penas no pescoo decorrente do alelo dominanteN, e a
presena de penas, ao alelo recessivo n. Qual o procedimento para a seleo mais
rpida, a partir de uma populao F
2
, de galinhas homozigticas compescoo pelado?
4. Umtouro mocho (semchifres) foi cruzado comtrs vacas. Coma vacaAchifruda, foi
obtido umdescendente semchifres. Coma vaca B, tambmchifruda, obteve-se um
descendente chifrudo. Efinalmente coma vacaCmochafoi produzidoumdescendente
chifrudo.
a) Qual o provvel gentipo dos animais envolvidos nos cruzamentos?
b) Como proceder para obter um plantel com pelo menos 20 animais mochos
homozigticos a partir do cruzamento do touro coma vaca C?
136
5. Emalface, o alelo Ccondiciona folha crespa e o recessivo c, folha lisa. Apartir do
gentipo Cc, quais as propores genotpicas e fenotpicas esperadas aps a quarta
gerao de autofecundao?
6. Considerando os dados do problema anterior, qual seria o resultadoesperado na quarta
gerao, se as plantas fossemcruzadas aleatoriamente emvez de autofecundadas?
7. No tomateiro, a folha pode ser normal (bordos recortados) ou batata (bordos lisos).
Foramrealizados vrios cruzamentos envolvendo indivduos comesses dois fentipos
e obtidos os seguintes resultados:
Fentipo das plantas envolvidas Fentipo dos descendentes (nmero)
nos cruzamentos Normal Batata
1) Normal x Batata 92 0
2) Normal x Normal 155 52
3) Batata x Batata 0 83
4) Normal x Batata 47 43
5) Normal x Normal 85 0
a) Fornea uma provvel explicao para a herana do carter.
b) Especifique o gentipo das plantas envolvidas nos cruzamentos.
8. Emumtrabalho realizado para estudar a herana da poca de florescimento empepino,
foramobtidos os seguintes resultados:
Nmero de plantas com florescimento
Populaes
Precoce Tardio
P
1
50 -
P
2
- 50
F
1
50 -
RC
1
(F
1
x P
1
) 195 -
RC
2
(F
1
x P
2
) 101 91
F
2
281 80
a) Fornea todas as interpretaes genticas e estatsticas para estes resultados.
b) Quantas sementes F
2
necessitariamser semeadas para se obter 150 plantas com
florescimento tardio?
137
Mendelismo
9. No cruzamento entre a cultivar de tomate Santa Cruz (P
1
), que possui hipoctilo roxo
e folha normal, coma cultivar Folha Batata (P
2
), que apresenta hipoctilo verde e folha
batata, foramobtidos os seguintes resultados:
Fentipos (nmero)
Geraes Hip. roxo
Folha normal
Hip. roxo
Folha batata
Hip. verde
Folha normal
Hip. verde
Folha batata
F
1
25 - - -
F
2
238 75 80 26
RC
1
163 - - -
RC
2
45 43 39 44
a) Interprete geneticamente esses resultados.
b) Esquematize os cruzamentos realizados.
10. Considere os dados do problema 9.
a) Quais os resultados que indicama ocorrncia da distribuio independente?
b) Emque fase da meiose e emqual gerao ocorreu a distribuio independente para
produzir esses resultados?
11. Oarroz possui 2n = 24 cromossomos. Considere que emuma planta ocorra umalelo
dominante emcada cromossomo e o alelo recessivo correspondente no seu homlogo,
isto , a planta heterozigticapara esses doze genes. Se essa plantafor autofecundada,
pergunta-se:
a) Qual a frequncia esperada dos descendentes como fentipo condicionado pelo
alelo recessivo dos doze genes?
b) Qual a frequncia esperada dos descendentes como mesmo gentipo da planta
autofecundada?
c) Qual a frequncia esperada dos descendentes com o mesmo fentipo da planta
autofecundada?
d) Quais seriamesses resultados se essas plantas fossemautofecundadas por mais
uma gerao?
12. Na mandioca, razes marrons so decorrentes do alelo dominante Be razes brancas,
do alelo recessivo b. Fololos estreitos so decorrentes do alelo dominanteLe fololos
largos, doalelo recessivol. Uma planta de razes marrons e fololos estreitos foi cruzada
138
com outra de razes brancas e fololos largos, e produziram 40 descendentes com
fololos estreitos, dos quais a metade tinha razes marrons e a outra metade, de razes
brancas. Quais os gentipos dos genitores e a proporo genotpica dos descendentes?
13. Em equinos, o alelo dominante T responsvel pelo trote e o alelo recessivo t
responsvel pela marcha. Para a cor de pelagem, o aleloA responsvel pelo fentipo
baio e o alelo recessivo a, pelo fentipopreto. Umcriador possui umcavalo marchador
preto e vrias guas puras para o trote e baias. Como o criador deseja obter animais
puros marchadores e baios, qual deve ser seu procedimento? Explique.
14. Uma planta de pepino de gentipo BBCCTTWWfoi cruzada comoutra de gentipo
bbccttww para produzir a gerao F
1
, a qual foi autofecundada para obteno da
gerao F
2
. Assumindo que esses genes controlamas seguintes caractersticas: B
espinhos pretos; bespinhos brancos; Cresistncia aovrus do mosaico; csuscetibilidade
ao vrus do mosaico; Tpresena de gavinhas; t ausncia de gavinhas; Wfruto imaturo
de cor verde; wfruto imaturo de cor branca.
a) Que proporo de F
2
apresentar o fentipo espinhos brancos, suscetibilidade ao
vrus do mosaico, ausncia de gavinhas e o fruto de cor branca?
b) Que proporo de F
2
apresentar o fentipo espinhos pretos, resistncia ao vrus
do mosaico, presena de gavinhas e fruto imaturo de cor verde?
c) Que proporo de F
2
genotipicamente semelhante gerao F
1
?
d) Quaisseriamasrespostas dositens anteriores seosgenitores apresentassemgentipos
BBCCttwwe bbccTTWW?
15. Quais seriamasrespostas do problema anterior se as plantas F
2
fossemautofecundadas
at a gerao F
4
?
16. Areao ao vrus do mosaico do pepino controlada por umgene, sendo o aleloR-
dominante responsvel pela resistncia, e r pela suscetibilidade a essa virose. Uma
cultivar resistente - homozigtica - foi cruzada comoutra suscetvel, sendo obtida a
gerao F
1
. Posteriormente, as plantas obtidas foram submetidas a algumas
autofecundaes. Na ltima autofecundao, gerao F
n
, a proporo de plantas
suscetveis era de 31/64. Quantas autofecundaes foramrealizadas para se obter
esse resultado?
17. Aseguir apresentado o heredograma de uma famlia de sunos:
139
Mendelismo
Ofentipo identificado pelo hachurado representa a ocorrncia de animais comcistos
renais emsunos. Essa anomalia decorrente de umalelo dominante ou recessivo?
Justifique sua resposta comdetalhes.
18. Atransmisso de duas anomalias raras emces mostrada na genealogia apresentada
na pgina seguinte. Acaracterstica 1, neuropatia hipertrofica - causa danos sensoriais
e motor, indicada pela parte hachurada na metade superior e a caracterstica 2,
linfedema primrio- anormalidadedosistemalinftico identificada pelaparte hachurada
na metade inferior. Utilizando o smboloApara o gene responsvel pela caracterstica
1 e B para a caracterstica 2, pede-se:
a) Que tipo de herana est envolvida no controle de cada uma das patologias?
b) Coloque o provvel gentipo de todos os indivduos na etapa IV.
c) Se os indivduos identificados na genealogia etapa IV forem acasalados, que
proporo fenotpica esperada.
140
141
InteraoAllicas e No-Alelicas
6 INTERAESALLICAS
E NO-ALLICAS
6.1 INTRODUO
Os efeitos dos alelos (gentipos), para formar os fentipos, dependemde sua ao e
de sua interao. Para exemplificar esses efeitos, vamos utilizar o carter textura da semente
do milho, cujo controle gentico foi estudado no Captulo 5. Vimos que esse controle
monognico e esto envolvidos os alelos Su, responsvel pela produo de sementes lisas, e
su, responsvel pela produo de sementes enrugadas. Esses alelos combinam-se para
formar os gentipos SuSu, Susu e susu. Emcada gentipo homozigtico, ocorre apenas
umalelo e, temos ento, neste caso, apenas a ao desse alelo, ou seja, a semente lisa do
gentipo SuSu decorrente da ao do alelo Su e a semente enrugada do gentipo susu
decorrente da ao do alelo su. J, o gentipo heterozigtico possui dois alelos, Susu, e a
semente lisa que ele produz proveniente da ao combinada destes dois alelos que
denominada de interao allica.
6.2 INTERAESALLICAS
Existemvrios tipos de interao allica e o procedimento para a sua identificao
consiste emcomparar o fentipo do heterozigoto comos fentipos dos homozigotos. A
seguir so apresentados os principais tipos:
6.2.1 Dominncia Completa
O carter textura da semente do milho, analisado no Captulo 5, umexemplo da
ocorrncia de dominncia completa. Isso porque foi visto que do cruzamento de gentipos
homozigticos, para sementes lisas e enrugadas, obteve-se na F
1
somente sementes lisas
que a expresso do heterozigoto. Na gerao F
2
, observou-se a segregao fenotpica
para a textura da semente, de 3 lisas:1 enrugada, que caracterstica desse tipo de
interao allica. Observa-se ainda que, nesse caso, no se pode identificar o gentipo
quando a semente temo fentipo liso, isto , o homozigoto e o heterozigoto apresentam
o mesmo fentipo, j no caso do fentipo enrugado, condicionado pelo alelo recessivo,
isso possvel.
142
Pelo exposto para este tipo de interao, aparentemente o alelo dominante impede
a expresso do alelo recessivo, quando esto juntos, e o fentipo decorrente do alelo
recessivo s produzido pelo indivduo portador do gentipo homozigtico para esse
alelo.
No Captulo 3, foi comentado que umgene corresponde a umsegmento de DNAque
codifica para formao de uma cadeia polipeptdica e que, na maioria das vezes, ir atuar
como uma enzima emumpasso de uma via metablica. Essa via, por sua vez, produz um
produtofinal que constitui o fentipoque observamos. Assim, sobo ponto devista bioqumico,
umalelo dominante considerado aquele que codifica uma enzima funcional e que permite
uma via metablica produzir umproduto final. Emcontrapartida, o alelorecessivo, emgeral,
corresponde a ummutante semsentido, que no produz nenhuma enzima, ou ummutante de
sentido errado, que produz uma enzima no funcional, ou comeficincia muito reduzida em
relao ao alelo no mutante. Emqualquer caso, a via metablica fica interrompida ou a
quantidade do produtofinal muito pequena. necessrio salientar quea dominncia completa
refere-se aos casos quando, no heterozigoto, o alelo dominante produz uma quantidade
suficiente de enzima, necessria para que seja produzida uma quantidade de produto final,
pela via metablica, igual produzida pelo indivduo portador do gentipo homozigtico
para o alelo dominante.
Utilizando novamente o carter textura da semente do milho, nas sementes enrugadas
(susu), 39% da matria seca do gro so acares solveis em gua e apenas 32% da
matria seca correspondemao amido. No milho normal, SuSu, por outro lado, no ocorre
acares solveis emgua e a quantidade de amido corresponde a 83%da matria seca.
J foi constatado tambm que os gros heterozigticos no possuem quantidades
intermedirias de acares solveis emgua. Portanto, podemos deduzir que os acares
solveis em gua so os substratos que so convertidos em amido, por intermdio da
enzima codificada pelo alelo funcional Su, levando produo de sementes lisas, enquanto
nas sementes enrugadas esses substratos foramsimplesmente acumulados, porque o alelo
su no produz uma enzima funcional. interessante lembrar que o amido presente nos
gros de milho doce, susu, oriundo de outras vias metablicas independentes da ao
do alelo Su.
6.2.2 Dominncia Incompleta
Neste tipo de interao allica, o fentipo do heterozigoto situa-se no intervalo
estabelecido pelos fentipos dos homozigotos para os dois alelos emconsiderao.A herana
da forma da raiz do rabanete umexemplo tpico (Tabela 6.1).
143
TABELA6.1. Forma da raiz do rabanete. Ofentipo intermedirio da F
1
emrelao aos parentais
juntamente com o resultado da gerao F
2
, caracterizam umcaso de dominncia incompleta. Note
que os alelos so diferenciados por expoentes.
Observa-se que o fentipo do heterozigoto intermedirio e que, neste caso, possvel
identificar qualquer gentipo por meio de seu fentipo.
Emtermos bioqumicos, a explicao semelhante quelaapresentada para dominncia
completa, ouseja, umdos alelos produz uma enzima funcional e permite que a via metablica
libere umproduto final, que responsvel pela expresso deumfentipo. Noentanto, o outro
alelo no permite a formao de umproduto final, pela falta de uma enzima funcional. Anica
diferena que, na dominncia incompleta, a quantidade de produto final da via metablica
menor do queno homozigotoe, emconsequncia, aexpressodoheterozigoto intermediria.
Convmsalientar que o tipo de interao allica depende do grau de profundidade
empregado na anlise dos fentipos. Ocorre algumas vezes que, no estudo de um dado
carter, determina-se umtipo de interao allica, quando o exame dos fentipos superficial.
Porm, numa observao mais minuciosa, verifica-se que ocorre outro tipo de interao
allica. Isso o que acontece com a textura da semente em ervilha, que pode ser lisa e
enrugada. Do cruzamento de indivduos puros lisos RR, comenrugados rr, observa-se que
100% das sementes F
1
- Rr - so lisas, como umdos pais.
Esse resultado sugereque ainterao allica do tipo dominnciacompleta. No entanto,
examinando-se os gros de amido dos gentipos homozigticos e heterozigticos, observa-se
que a semente RRpossui muitos gros de amido grandes, arrpossui poucosgros pequenos
e a semente Rr possui gros de amido emquantidade e tamanho intermedirios, indicando,
assim, que, na anlise dos gros de amido, ocorre dominncia incompleta.
Umexemplo semelhante a citrulinemia que ocorre embovinos da raa holandesa,
que consiste emuma profunda depresso do recm-nascido, causando a morte entre trs e
cinco dias de idade. Esse fentipo ocorre pela intoxicao por amnia que se acumula no
P:
Gentipos: r
1
r
1
x r
2
r
2
Fentipos: (raiz longa) (raiz esfrica)
F
1
:
Gentipo: r
1
r
2
Fentipo: (raiz oval)
F
2
:
Gentipos: r
1
r
1
r
1
r
2
r
2
r
2
Fentipos: (raiz longa) (raiz oval) (raiz esfrica)
144
organismo, emdecorrncia da ausncia da enzima argininosuccinatosintetase (ASS), que
transforma amnia emuria. Sabe-se que os animais comcitrulinemia so homozigticos
para o alelo defeituoso, resultante de uma mutao no 86 cdon, pela substituio do cdon
CGApara UGAno mRNA, causando umponto final. Portanto, na avaliao clnica, trata-se
de um exemplo de dominncia completa. Porm, o teste em laboratrio dos animais
heterozigticos mostra 50% de atividade da enzima ASS caracterizando a dominncia
incompleta. Essa avaliao bioqumica importantepara o diagnstico dos animais portadores
do alelo recessivo, o heterozigoto, para evitar que eles se reproduzam.
Emtermos bioqumicos, h autores queconsideramalguns caracteres emque ambos os
alelos mostram-se ativos, ocorrendo diferena acentuada na contribuio de cada um. Um
exemplo o teor de vitamina Ano endosperma do milho, controlado por dois alelos Ye y.
Nesse exemplo, emumgrama de endosperma, Ycontribui comcerca de 2,20 unidades de
vitaminaA, eycontribui comaproximadamente 0,05unidades. Ainda emtermos bioqumicos,
umoutro exemplo ocorre emmaravilha, onde do cruzamento de linhagens puras comptalas
vermelhas cruzadas com linhagens puras de ptala branca, a gerao F
1
tem ptalas rosas
(Figura 6.1) e a gerao F
2
segrega 1vermelha: 2 rosas: 1branca. Aexplicao pode ser dada
FIGURA 6.1. Exemplo de dominncia incompleta emmaravilha.
145
emnmero de doses do alelo que determina a concentrao de umdeterminado pigmento
(cor). Duas dosesgerammais quantidadedeprotena e, portanto, maior quantidade depigmento,
obastanteparatornar as ptalas vermelhas.Adosenica (heterozigoto) produz menos pigmento,
e, assim, as ptalas so rosa. Adose zero no produz pigmentos e as flores so brancas.
6.2.3 Codominncia
Essa interao allica se caracteriza pelo fentipo do heterozigoto apresentar-se como
uma misturados fentipos de seusgenitores homozigticos. Acodominncia frequentemente
confundidacomadominnciaincompleta. Adiferenaentreelasocorreporque, nacodominncia,
os dois alelos presentes no heterozigoto so ativos e independentes. Emtermos bioqumicos,
cada alelodo heterozigoto condiciona a formao de uma protena ou enzima funcional.
Umexemplo dessainteraocorresponde resistnciadolinho a duasraas de ferrugem.
Nesse exemplo, a planta M
1
M
1
resistente raa 1, a planta M
2
M
2
resistente raa 2, e a
planta M
1
M
2
resistente s duas raas. Assim, emumcampo onde ocorremas duas raas,
somenteo heterozigotono apresentara doena, euma populao F
2
apresentara segregao
de 25%das plantas resistentes apenas raa 1, 50%resistentes s duas raas e 25%resistentes
apenas raa 2. Nesse caso, provavelmente no heterozigotoM
1
M
2
, o alelo M
1
responsvel
pela protena receptoraque reconhece uma molculaespecfica de uma raa patognica, a raa
1 de ferrugeme o alelo M
2
condiciona o reconhecimento da outra raa.
Umoutro exemplo interessante de codominnciaocorre na raa de bovinos Shorthorn.
Nesses animais, a pelagempode ser vermelha, branca ou ruo. Quando cruza-se umtouro
vermelho comvacas brancas na gerao F
1
ocorremanimais rues e na F
2
a segregao de
1/4 vermelho; 2/4 ruo e 1/4 branco (Figura 6.2). Observando o pelo dos animais rues
nota-se que so vermelho e branco, emigual proporo, o que d o aspecto ruo. Nesse
caso, ento, est envolvido o gene R, comdois alelos funcionais, o alelo R
1
confere a cor
vermelha e o R
2
a cor branca. No heterozigoto R
1
R
2
, por ter os dois alelos funcionais, so
produzidos os pelos vermelhos e brancos.
Vrios caracteres emplantas e animais exibemcodominncia, que pode ser verificada
por meio daidentificao das substncias queconstituemos seus fentipos. Isto conseguido,
por exemplo, por intermdio de eletroforese, no qual se consegueseparar protenas diferentes
quando submetidas a umcampo eltrico.
Amistura de protenas colocada emumgel e, dependendo do tamanho da molcula
e de suacarga eltrica, ela sedesloca no gel at uma posio especfica. Quando se identificam
as posies, observam-se bandas, cada uma correspondente a uma protena. Um dos
exemplos de codominncia estudado por meio da tcnica de eletroforese a presena de
albumina no soro sanguneo de cavalo. A albuminaA condicionada pelo alelo Al
A
e a
albumina Bpelo aleloAl
B
. UmanimalAl
A
Al
A
possui somente a albuminaAno soro sanguneo
albumina no soro sanguneo de cavalo. Aalbomina A condicionada pelo alelo Al
A
e a
albumina bpelo aleloAl
B
. UmanimalAl
A
Al
A
possui somente a albuminaAno soro sanguneo
146
FIGURA 6.2. Exemplo de codominncia. Cor da pelagemde bovino da raa Shorthorn.
e forma apenas uma banda no gel de eletroforese. OanimalAl
B
Al
B
possui somente a albumina
Be forma tambmapenas uma banda, s que numa posio diferente da banda da albumina
A. O animal Al
A
Al
B
possui as duas albuminas e exibe as duas bandas, caracterizando a
codominncia entre os dois alelos.
6.2.4 Alelos Letais
Alguns alelos apresentamumcomportamento bempeculiar, podendo causar a morte
do indivduo que os possui. Esses alelos so conhecidos como alelos letais e, geralmente,
o alelo recessivo que causaa morte. Algunsdeles, almde estaremrelacionados viabilidade
do indivduo, causamalteraes fenotpicas que podemser facilmente detectadas. Oprimeiro
exemplo desse tipo de alelo foi descrito em1904 por Cuenot. Ele cruzou ratos amarelos x
normais e observou, na prognie, uma segregao de 1 amarelo : 1 normal. Esse resultado
sugere que o rato amarelo heterozigtico e que o alelo que condiciona a cor amarela
147
dominante emrelaoao normal. Quando foramcruzados ratos amarelos entresi, era esperada
uma descendncia de 1:2:1, mas obteve-se uma descendncia de 2 amarelos: 1 normal.
Esses resultados levaram-no a propor que o carter controlado por umgene, comdois
alelos e que o alelo dominante que condiciona a cor amarela, supostamente letal quando em
homozigose. Chamando de Ay o alelo que confere pelagem amarela e de Ao alelo que
condiciona pelagemnormal, a partir do cruzamento de ratos amarelos heterozigticosAyAx
AyA, a gerao F2 teria uma proporo genotpica de AyAy, AyA, AA(Figura 6.3,
Tabela 6.2). Aalterao para a proporo 2:1, era decorrente da morte dos indivduosAyAy,
antes mesmo do nascimento. Desse modo, indivduos de pelagemamarela so heterozigotos
AyA, enquanto que indivduos de pelagemnormal so AA.
AhiptesedoaleloAyser letalemhomozigosefoi confirmadaposteriormentequandouma
fmeagrvidadocruzamento amareloxamareloteve seuteroretirado. Foi verificadoque 25%
de seus embriesestavammortos, provavelmente emdecorrnciadaconstituioAyAy.
Outro exemplo de alelo letal encontrado emgatos. Uma nica dose do alelo ML,
interfere gravemente no desenvolvimento da coluna dorsal, resultando na falta de cauda no
indivduo heterozigtico MLM. Mas, no homozigoto MLML, a dose dupla do alelo produz
uma anomalia to extrema no desenvolvimento da coluna que o embrio no sobrevive.
Amaioria dosalelos letais recessivos nose expressamno heterozigoto. Emtal situao,
a letalidade recessiva diagnosticada, observando a morte de 25% da descendncia em
algumestgio do desenvolvimento.
Umoutro exemplomuito comum aocorrncia de plantasjovensalbinas empopulaes
segregantes. Essas plantas so homozigticcas para umalelo que impede a formao de
clorofila e sobrevivem at esgotar as reservas nutritivas da semente. Tais plantas so
descendentes de heterozigotos portadores do alelo recessivo defeituoso.
FIGURA6.3. resultados do crusamento de ratos amarelos letetozigticos.
148
6.3 INTERAESNO-ALLICASOUGNICAS
Nemtodososcaracteres so controlados por umnico gene, comodiscutido no Captulo
4. De fato, umgrande nmero de caractersticas controlado por dois ou mais genes e sua
expresso fenotpica depende, almda ao e interao allica, tambmda ao combinada
dos alelos de diferentes genes que recebe a denominao de interao gnica
Aao conjunta de dois ou mais genes independe de suas localizaes no genoma da
espcie, pois, como sero demonstradas, as interaes ocorrem nos produtos gnicos -
enzimas queso formadosno citoplasma. Assim, dois genes localizadosemdois cromossomos
diferentes tero distribuio independente (2 lei de Mendel), embora as propores
Mendelianas sejammodificadas emfuno da maneira como esses genes se interagem.
Uma forma muito comumde interao gnica a epistasia. Nesse caso, diz-se que o
alelo de umgene episttico, quando ele inibe a expresso do alelo de outro gene. Esse
ltimo gene, cujo alelo tema expresso inibida, recebe a denominao dehiposttico.
Segundo Miller(1997), o termo epistasia pode ser agrupado emtrs categorias:
a) Epistasia funcional - quando umgene determina a presena ou ausncia de uma
determinada estrutura, por exemplo pelos; se no existir pelos, como no caso de um
possvel mutante emcamundongos ou ces, as diferenas de cor no poderiamser
detectadas. Assim, o alelo que controla a produo de pelos seria episttico para o
alelo da colorao. Outro exemplo semelhante o caso de espinhos pretos ou brancos
empepino, que seriamencobertos (hiposttico), caso ocorra ummutante semespinho.
b) Bloqueio de umpasso metablico quando, emuma rota metablica, a ausncia
de umproduto evita (inibe) a formao de outros produtos. Por exemplo:
Alelo A Alelo B
9 9
enz. A enz. B
9 9
Substrato <<<: Produto A<<<: Produto B
TABELA 6.2. Resultados obtidos por Cuenot para os cruzamentos entre ratos de pelagem
amarela e pelagem normal.
Amarelos x Normais Amarelos x Amarelos
AyA 9 AA AyA 9 AyA
AyA
amarelos
AyAy
morrem
AA
normais
AyA
amarelos
AA
normais
149
Nesse caso, se o alelo A mutar para o alelo a a enzima A poder no mais ser
produzida e no transforma o substrato em produto A. Por falta desse produto, a rota
metablica estariabloqueada, no havendo a sntese do produto B. OaleloA, pois, episttico
do B.
c) Converso - quando o produto do alelo de umgene convertido emoutro produto
pelo alelo de outro gene, mascarando a ao ou o produto do primeiro alelo.
Por exemplo:
Alelo A Alelo B
9 9
enz. A enz. B
9 9
Substrato <<<: Produto A<<<: Produto B
(branco) (amarelo) (branco)
Nesse caso, o alelo B episttico para o alelo A, pois o produto do primeiro gene
(produto A) foi convertido emumproduto Bque confere umfentipo semelhante quele
expresso pelo acmulo do substrato.
A seguir, so apresentados alguns exemplos mais comuns de epistasia.
6.3.1 Epistasia recessiva
Acor da flor emgirassol pode ser amarela, alaranjada ou limo. Emdeterminados
cruzamentos, esses fentipos segregamna F
2
, respectivamente, nas propores 9:3:4. Essas
propores indicama atuao de dois genes de distribuio independente, comdois alelos
cada. Combase nesses resultados, o controle gentico do carter pode ser explicado pela
ao de umalelo dominante Ade umdos genes, o qual necessrio para que haja a produo
de cor, enquanto o recessivo impede a sua formao. Emoutro gene, o alelo dominanteB
responsvel pela cor amarela e seu alelo recessivo bdetermina a cor alaranjada. Nesse caso,
o alelo a episttico, pois impede a expresso dos alelos Be b.
Outro exemplo ocorre na cor da pelagem de ces da raa Labrador. As cores
preta, marrome dourado so controladas geneticamente por dois genes B e Eque atuam
do seguinte modo: os alelos B e b produzem, respectivamente, as cores preta e marrom,
que so depositadas nos pelos e nas mucosas. Para o gene E a constituio recessiva
ee episttica ao gene B, resultando na colorao dourada dos pelos. Assim, ces
pretos so B_E_, ces marrons so bbE_e ces dourados so B_ee ou bbee, resultando
em F
2
na segregao 9 pretos:3 marrons:4 dourados (Figura 6.4). Os ces dourados,
podem produzir pigmentos pretos ou marrons no nariz e lbios (mucosas). Aao do
alelo e evitar a deposio de pigmentos nos pelos no impedindo a deposio nas
150
mucosas. Dessa forma, podemos reconhecer o animal comalelos recessivos bbee pela
pigmentao marromnas mucosas.
FIGURA 6.4. Exemplo de epistasia recessiva. Controle gentico da cor da pelagem em ces
da raa Labrador.
151
6.3.2 Epistasia recessiva dupla
Umestudorealizadono Departamento de Biologiada UFLAvisouaconhecer o controle
gentico da cor do tegumento de algumas cultivares de feijoeiro. Para isso, foramcruzadas
duas cultivares, sendo uma a Small White, que possui tegumento branco e flores brancas, e a
outra, a ESAL545, que possui tegumento verde e tambmflores brancas. Nesse cruzamento,
eram esperados descendentes com flores brancas, uma vez que os genitores eram
homozigticos. No entanto, a gerao F
1
produziu flores violetas e esse fato inesperado
levou-nos a estudar o controle gentico desse carter. Os resultados obtidos encontram-se
na Figura 6.5.
Como se observa, as propores fenotpicas da gerao F
2
esto muito prximas de
nove plantas comflores violetas para sete plantas comflores brancas(
c
2
=0,42), indicando
a ocorrncia de dezesseis combinaes genotpicas, decorrentes da segregao e
recombinao de dois genes independentes, comdois alelos cada. Considerando tambm
os dados da gerao F
1
e dos dois retrocruzamentos pode-se explicar osresultados utilizando
a Tabela 6.4.
Nesse esquema, as flores violetas ocorremsomente nas plantas comgentipo que
possuempelo menos umalelo dominante emcada loco: P_V_. Nos demais gentipos, a
ausncia de alelos dominantes, emumou nos dois locos, condiciona o surgimento de flores
brancas.
Soboponto de vista bioqumico, uma possvel explicao para os resultados observados
pode ser esquematizada utilizando, a seguinte via metablica:
Precursor <<<:substncia intermediria <<<: pigmento violeta
(incolor) (incolor)
Considerando as quatro classes genotpicas da F
2
, segundo a presena ou ausncia
dos alelos Pe V, e a via metablica esquematizada anteriormente, temos a seguinte situao
apresentada na Tabela 6.4.
5
Alelo P
enzima P
Alelo V
enzima V
152
FIGURA 6.5. Controle gentico da cor da flor do feijoeiro.
153
TABELA6.3. Representao dos gentipos comos respectivos fentipos, relativos cor da flor do
feijoeiro das cultivares genitoras e de seus descendentes.
TABELA6.4. Presena (+) ou ausncia (-) da enzima P, da substncia intermediria, da enzima V
e do pigmento violeta, nas flores de feijo das quatro classes de gentipos F
2
.
Apartir doque foi exposto nessatabela, verifica-se que entre as dezesseis combinaes
da F
2
, apenasnove apresentamflor violeta, porque possuemas duas enzimas necessrias para
que a via metablica se complete. Nas demais combinaes da gerao F
2
, a via metablica
no se completa, pela falta de uma ou das duas enzimas. Portanto, o pigmento violeta o
produto final dessa via metablica. Asua presena depende da participao conjunta dos
alelos dominantes nos dois locos.
Classes de
Gentipos F
2
Enzima P
Substncia
intermediria
Enzima V
Pigmento
violeta
9/16 P_V_ + + + +
3/16 P_vv + + - -
3/16 ppV_ - - + -
1/16 ppvv - - - -
P:
Small White - P
1
ESAL 545 - P
2
Gentipos:
Fentipos:
ppVV
branca
x PPvv
branca
F
1
:
Gentipo:
Fentipo:
PpVv
Violeta
F
2
:
Gentipos:
Fentipos:
9/16 P_V_
violeta
: 7/16 (P_vv, ppV_, ppvv)
branca
RC
1
:
Gentipos:
Fentipos:
PpV_
violeta
: ppV_
branca
RC
2
:
Gentipos:
Fentipos:
P_Vv
violeta
:
P_vv
branca
154
Se considerarmos, por exemplo, plantas de constituio ppV_, elas no produzemo
pigmento violeta porque o alelo recessivo pno deve produzir uma enzima funcional, o que
impede a transformao do precursor na substncia intermediria da via metablica. Nesse
caso, diz-se que o alelo p episttico emrelao a V, porque impede a sua expresso por
meio da cor violeta. De modo semelhante, a planta comconstituio P_vv igualmente no
produz o pigmento violeta porque o alelo recessivo v , nesse caso, o episttico emrelao
a P tambm por meio da cor violeta. Portanto, no controle gentico da cor da flor do
feijoeiro temosumexemplo de epistasiarecessiva dupla e nagerao F
2
, as classes genotpicas
emque esto participando esses epistticos (3/16 P_vv; 3/16 ppV_; 1/16 ppvv) sempre
produzemo mesmo fentipo coma frequncia de 7/16.
6.3.3 Epistasia Dominante
Em abbora, a colorao do fruto pode ser amarela, alaranjada ou verde-escura.
Alguns cruzamentos entre cultivares puras comestas cores de fruto apresentamna gerao F
2
uma segregao de 12 amarelos: 3 alaranjados: 1 verde escuro. Esse resultado indica a
participao dedois genescomdistribuioindependente, sendoqueocorreumalelo dominante
Aque responsvel pela cor alaranjada do fruto, enquanto o recessivo asimplesmente no
produz opigmento alaranjado e ofruto fica verde-escuro. Emoutro gene, oalelo dominanteB
bloqueia aformaodeclorofilanofruto, o qual ficaamarelo, emconsequncia do impedimento
de expresso de Ae a. Orecessivo bno interfere na expresso de Ae a. Emsntese, ocorre
apenas umalelo episttico dominante (B) (Tabela 6.5, Figura 6.6).
TABELA6.5. Controle gentico das cores do fruto de abbora.
P:
Gentipos:
Fentipos:
AA bb
alaranjado
x aa BB
amarelo
F
1
:
Gentipo:
Fentipo:
Aa Bb
amarelo
F
2
:
Gentipos:
Fentipos:
A_ B_, aa B_
12/16 amarelo
A_ bb
3/16 alaranjado
aabb
1/16verde-escuro
155
FIGURA6.6. Exemplodeepistasia dominante. Controle gentico da coloraodofrutoemabbora.
Embovinos da raaAngus, a pelagem preta e na raa Jerseya colorao chamada
preta/vermelha. Os animais obtidos pelo cruzamento dessas duas raas (F
1
) sotodos pretos,
mas quando intercruzadosproduzemuma descendncia (F
2
) na qual as propores fenotpicas
so de 12 pretos : 3 pretos/vermelhos : 1 vermelha, caracterizando uma epistasia dominante
(Figura 6.7).
156
6.3.4 Epistasia Recessiva e Dominante
As raas de galinhas Leghorn e Silkie apresentamplumagembranca. Quando essas
aves so cruzadas, as aves da gerao F
1
so todas brancas. Porm, na gerao F
2
, observa-
se, ao contrrio do que seria esperado, a ocorrncia de algumas aves coloridas entre as
brancas. Foi constatado ainda, que do cruzamento de aves coloridas coma raa Leghorn
branca, obtm-se uma descendncia completamente branca; porm, se no cruzamento
utilizada a raa Silkie branca, na descendncia ocorremaves coloridas. Portanto, deve existir
umgene que inibe a expresso da cor nas aves da raa Leghorn.
FIGURA 6.7. Controle gentico das cores da pelagem em gado bovino.
157
Considerando que na gerao F
2
do cruzamento LeghornxSilkie branca observam-se
as propores de 13 aves brancas: 3aves coloridas, pode-se explicar a herana de plumagem
branca ou colorida admitindo-se a participao de dois genes de distribuio independente,
comdois alelos cada, do seguinte modo: h umalelo Cnecessrio para a produo de cor,
enquanto o alelo recessivo condiciona a ausncia de pigmentao; emoutro gene, o alelo
dominante I episttico emrelao a C, inibindo, portanto, sua expresso, e o recessivo i
determina simplesmente a ausncia de inibio. Desse modo, o acasalamento das duas raas
brancas referidas anteriormente pode ser representado como no Figura 6.8.
Arelao de 13/16 brancas para 3/16 coloridas corresponde, portanto, aos resultados
normalmente observados. Nota-se que a plumagembranca comfrequncia13/16 emF
2
resulta das classes genotpicas I_C_e I_cc, emrazo da presena do episttico dominante I
e tambmdo gentipo iicc, no qual o alelo c provavelmente no funcional e por isso, no h
a produo de pigmentos. Nesse ltimo caso, o alelo c pode ser considerado tambm
episttico, uma vez que ele deve interromper uma via metablica e impedir a produo de um
produto final - pigmento. Temos assim, nesse exemplo, umcaso de epistasia dominante e
recessiva.
O alelo I episttico emrelao ao alelo C, e o alelo c episttico porque inibe a
formao de umproduto final.
Umoutroexemplointeressantedessetipodeepistasia verificadocomalgumas cultivares
de arroz, que apresentam umaroma caracterstico quando seus gros so cozidos ou as
folhas verdes so maceradas. Essas cultivares so bemapreciadas emalguns pases asiticos
e sua cotao no mercado superior s cultivares no aromticas. Tsuzuki e Shimokawa
(1990) cruzaramuma cultivar aromtica do Nepal, denominada Brimful, comduas outras
cultivares japonesas no-aromticas e obtiveramna gerao F
2
o resultado apresentado na
Tabela 6.6.
Os resultados observados se ajustama uma distribuio de 13 plantas semaroma : 3
comaroma, indicando que a presena de aroma decorrente do gentipoaa B_ e a ausncia
de aroma, aos gentipos A_ B_ ou A_ bb ou, ainda, aa bb.
158
FIGURA 6.8. Exemplo de epistasia recessiva e dominante. Controle gentico da cor da pena em
galinhas das raas Leghorn e Silkie.
Tabela 6.6. Resultados observados na gerao F
2
envolvendo cultivares de arroz no aromticas e
aromticas.
6.3.5 Outros tipos de interaes no-alelicas
Almdos exemplos de epistasias j apresentados, ocorreminmeras outras formas de
interaes gnicas, que no necessariamente implicamembloqueio de vias metablicas,
converses ou mesmo alteraes estruturais. Umdos exemplos mais conhecidos aquele
denominado de genes duplicados. Nesse caso, genes comfunes idnticas podemestar
representados mais de uma vez no genoma, alterando as propores mendelianas esperadas.
Uminteressante exemplo ocorre comuma planta do cerrado denominada de bolsa do pastor.
Cruzamentos Sem aroma Comaroma Total
Brimful x Koshihikari 240 62 302
Brimful x Nipponbare 157 34 191
159
Os frutos dessa planta podemser triangular ou alongado. Quando cruza-se uma planta com
fruto triangular comuma de fruto alongado, obtm-se a segregao emF
2
de 15 triangular : 1
alongado. Isso explicado considerando a presena de doisgenes Ae B, comefeitos iguais.
Os alelos dominantes de cada umdesses genes, sozinhos ou combinados, conferemo mesmo
fentipo, frutos triangulares, j o gentipoaabbo nico responsvel pelofruto alongado.
Umoutro exemplo semelhante ocorre emsoja. Emumdos genes o alelo dominanteG
produz sementes verdese o recessivogsementes amarelas. Emoutro gene, o alelo dominante
Y
3
resulta em sementes verdes e o alelo recessivo y
3
sementes amarelas. Na gerao F
2
a segregao fenotpica de 15 verdes (G_Y
3
_, G_ y
3
y
3
, ggY
3
_) : 1 amarela (gg y
3
y
3
).
Uma outra forma de interao tambmenvolvendo genes duplicados, aquela pela
qual aparece umterceiro fentipo, resultante da presena simultnea de alelos dominantes de
cada umdos genes envolvidos. Por exemplo, emabbora o formato esfrico controlado
pelo alelo Aou pelo alelo B enquanto que o formato alongado deve-se aos alelos a ou b.
Assim, os gentipos A_ bb e aa B_ conferemfrutos esfricos e aa bb frutos alongados.
Quando os alelos dominantes dos dois genes esto juntos, A_ B_, eles se interagempara
produzir o formato discide. Desse modo, na gerao F
2
a segregao de 9discides (A_
B_) : 6 esfricos (A_ bbe aa B_) : 1 alongado (aa bb). Esse tipo de interao conhecido
como genes duplicados cominterao entre os alelos dominantes (Figura 6.9).
FIGURA 6.9. Exemplo de genes duplicados cominterao entre os alelos dominantes. Controle
genetico do formato do fruto da abobora.
160
Uma situao semelhante a essa a que ocorre coma cor da pelagemdas raas de
sunos Large White e Duroc Jersey. Os alelos R ou S so responsveis pela sntese de
pigmentos vermelhos, enquanto que r ou s conferemcolorao branca. Indivduos com
alelos dominantes em apenas um dos genes (R_ ss ou rrS_) produzem uma pequena
quantidade de pigmentos vermelhos e adquirem uma colorao areia. Indivduos
completamente recessivos (rrss) so brancos e indivduos comalelos dominantes nos dois
genes (R_S_) so de colorao vermelho intenso. A segregao na gerao F
2
de 9
vermelhos : 6 areia : 1 branco.
Emgalinhas, o formato da crista apresenta uma maneira beminteressante de interao.
O alelo dominante R controla crista rosa, o alelo dominante P crista ervilha e os alelos
recessivos rr pp crista simples. Quando os alelos dominantes dos dois genes esto juntos
R_ P_ a crista do tipo noz. Assim, na gerao F
2
a segregao de 9 Noz (R_ P_) : 3
FIGURA6.10. Exemplo de genes duplicados cominterao entre os alelos dominantes. Controle
gentetico da cor da pelagem das raas de suinos Large White e DurocJersey.
161
Rosa (R_ pp) : 3 Ervilha (rr P_) : 1 Simples (rr pp). Note que, embora a segregao seja de
9:3:3:1, esta situao difere da segregao mendeliana tpica, por se tratar de apenas um
carter, ao invs de dois caracteres controlados por genes independentes.
6.4 AUMENTANDOACOMPLEXIDADE
Como pode ser observado pelos exemplos discutidos, todo organismo um ser
complexo no qual todos os genes devemfuncionar coordenadamente e apresentar interaes
emmaior ou menor grau. pouco provvel que umdeterminado gene atue isoladamente.
Umoutro aspecto que deve nos chamar a ateno que, emmuitos casos, o carter
que se est estudando, de fato consiste de diversos caracteres, cada um controlado por
genes especficos. Assim, as diversas expresses fenotpicas desse carter na verdade se
devema esses inmeros genes. Umexemplo ilustrativo a colorao dos gros do feijoeiro.
Aparentemente, trata-se de umnico carter, mas se estudado emprofundidade, veremos
que pode ser decomposto emcor do tegumento, presena ouno de listras, presena ou no
de pintas, cor do halo, brilho do tegumento, etc. Embora a colorao do gro seja um
carter cujo controle efetuado por muitos genes (supe-se mais de 18 genes), vamos
considerar apenas 5 genes para ilustrar este ponto. O alelo dominante P bsico para a
expresso da cor; todos os indivduos pp apresentam tegumento branco. Contudo, a
expresso da cor propriamentedita se deve a outros genes. Oalelo dominanteL responsvel
pela formao de listras em presena de P_. O gentipo ll no apresenta listras,
independentemente da constituio para o geneP. Umoutro gene condiciona a colorao do
halo, embora a definio da sua colorao seja realizada por outros genes, como por exemplo
o alelo Dque condicionahalo marrom. Oalelo dominanteJconferegros brilhantes, enquanto
o recessivo j gros foscos. Pode-se observar que, considerando apenas uma pequena poro
dos genes envolvidos coma colorao, o nmero de fentipos possveis extremamente
grande.
Situao semelhante ocorre para o carter colorao de pelagemde mamferos, que
tambm composto por vrios padres de colorao, envolvendo a colorao de cada
pelo, como tambma distribuio desses pelos no corpo do indivduo. Ocontrole gentico,
embora ainda no completamente elucidado, realizado por, pelo menos, 6 genes (A, B, C,
D, E, S). Umaspecto interessante que esses seis genes parecemestar presentes emtodos
os mamferos, embora nem sempre eles apresentemtodos os alelos conhecidos emcada
loco. Acolorao se deve presena de grnulos de pigmentos contendo melaninas emuma
matriz protica. As melaninas so o produto de uma srie de vias metablicas que convertem
a tirosina em eumelaninas (cor escura) ou feomelaninas (cor clara). As clulas em que
ocorrema produo das melaninas so os melancitos e os grnulos de pigmentos so os
eumelanossomas ou feomelanossomas.
162
Ogene A(Aguti): esse gene determina a distribuio de pigmentos no pelo. OaleloA
- selvagem- produz umafaixaamarela terminal ousubterminal emumpelo queseria totalmente
preto (aa). Dependendo do alelo presente, a colorao do pelo pode variar desde
completamente amarelo at todo negro.
Ogene B: os alelos desse gene afetama poro protica dos grnulos de pigmentos
alterando sua forma. Oalelo Bpermite a formao de grnulos normais, alongados e de cor
negra. Oalelo b produz grnulos ovides ou esfricos que so marrons, chocolates ou, no
caso de cavalos, castanhos.
O gene C: parece que este o gene estrutural da enzima tirosinase, que catalisa o
primeiro passo da converso de tirosina emmelanina. Oalelo Cproduz tirosinase normal,
enquanto queos demais alelos produzemformas menos eficientes daenzima, havendo reduo
no nmero de grnulos de pigmentos. O alelo recessivo c evita a formao de qualquer
colorao (gene episttico), gerando indivduos albinos.
O gene D: os alelos do gene D afetam a intensidade da pigmentao por meio da
aglutinao dos grnulos, mas no pela reduo de seu nmero. Oalelo ddilui o negro em
azul e o amarelo em creme. O alelo D dominante na maioria dos mamferos, mas em
cavalos parece haver dominncia incompleta.
O gene E: esse gene parece ter influncia na distribuio de pigmentos amarelos e
pretos emtoda a pelagemdo animal e no dentro de cada pelo.
Ogene S: o gene Stambmcontrola a distribuio de pigmentos ao longo do corpo do
indivduo. De fato, ele controla a presena (ss) ouausncia (S_) demanchas. Essepadro pode
ocorrer comqualquer combinao genotpica discutida anteriormente, comexceodoalbino.
Umoutro exemplo de genes comao caracterstica so os chamados modificadores.
Esses genes geralmente no tmefeito prprio, mas modificamoutros genes, reduzindo ou
intensificando sua expresso. OgeneD, que ocorre emmuitos mamferos, afeta a intensidade
de pigmentao de outros genes que controlama cor da pelagem. Os gentipos DDe Dd
permitema expresso completa da colorao, enquanto que dd dilui a colorao tornando-
a mais clara. Assim, se o alelo B confere pelagempreta e b pelagemmarromos gentipos
B_D_ seriam pretos, B_dd seriampreto-diludo, bbD_ marrons e bbdd marrom claro,
apresentando uma segregao de 9:3:3:1 na gerao F
2
.
Umexemplo semelhante emplantas o que ocorre para a cor dos frutos maduros em
pimentes. Umalelo dominante Ycontrola a remoo da clorofila no fruto, enquanto o alelo
y permite que a clorofila se mantenha no fruto maduro. medida que o fruto amadurece,
pigmentos carotenides so sintetizados; o alelo R determina pigmentos vermelhos e r
pigmentos amarelos. Os alelos recessivos de dois genes diferentes c
1
e c
2
tmuma ao
semelhante e reduzema quantidade de carotenides que so sintetizados. Por exemplo,
plantas Y_R_C
1
_C
2
_ produzemfrutos vermelhos, enquanto y_R_c
1
c
1
C
2
_apresentamfrutos
163
alaranjados. Plantas Y_rrC
1
_C
2
_ apresentamfrutosamarelos, enquanto Y_rrC
1
_c
2
c
2
frutos
amarelo-claros. Os dois genes C
1
e C
2
so genes duplicados, com efeitos semelhantes.
Porm, seus efeitos so cumulativos, de modo que o gentipo c
1
c
1
c
2
c
2
praticamente impede
a sntese de carotenides. Desse modo, o gentipo Y_rrc
1
c
1
c
2
c
2
praticamente branco.
164
PROBLEMASPROPOSTOS
1. Emgalinhas, os indivduos compenas normais so de gentipo ff, os indivduos FF
apresentampenas acentuadamente onduladas e quebradias e o heterozigoto apresenta
as penas medianamente onduladas. Apartir do cruzamento de umgalo compenas
medianamente onduladas comtrs fmeas, foramproduzidos 12 descendentes por
ninhada. Dos 36 descendentes, 18 apresentarampenas medianamente onduladas, 15
penas acentuadamente onduladas e apenas 3 foram normais. Quais os provveis
gentipos das trs fmeas?
2. Embovinos, a presena de chifres governada pelo alelo recessivo m, enquanto o
alelo dominante Mconfere ausncia de chifres (mocho). Acor da pelagemvermelha
fornecida pelo gentipo RR, cor branca por rr e vermelho-branco (ruo) por Rr.
a) Determine a proporo fenotpica de F
2
proveniente do cruzamento de umtouro
vermelho, comchifres, comvacas brancas e mochas, homozigticas.
b) Quantos animais da gerao F
2
sero necessrios para se selecionar 20 animais
homozigticos de pelagemvermelha e mochos?
c) Qual a proporo fenotpica esperada se os animais rues e mochos da gerao F
2
foremacasalados entre si?
3. No estudo da herana da forma da raiz do rabanete, e tambmda cor da raiz, obteve-
se na F
2
a seguinte proporo fenotpica: 11 vermelhos e esfricos; 20 vermelhos e
ovais; 9 vermelhos e alongados; 21 rosas e esfricos; 39 rosas e ovais; 19 rosas e
alongados; 10 brancos e esfricos; 22 brancos e ovais e 11 brancos e alongados.
a) Quais as interaes allicas para os dois caracteres?
b) Esse tipo de interao facilita ou dificulta o trabalhodo melhorista?
c) Quais os gentipos dos genitores para possveis cruzamentos que produzirama F
2
fornecida?
d) Qual o tamanho da F
2
para se obter 50 plantas comraiz branca e alongada?
4. Em abbora, a cor do fruto pode ser branca, amarela e verde. Do cruzamento de
plantas homozigticas de frutos brancos complantas de frutos verdes foi obtida uma
gerao F
1
comtodos os indivduos de frutos brancos. Na gerao F
2
, foramobtidas
45 plantas comfrutos brancos, 13 comfrutos amarelos e 3 comfrutos verdes.
a) Qual a explicao para a herana desse carter?
165
b) Cruzando-se uma planta de frutos amarelos comoutra de frutos brancos obtiveram-
se 27 plantas comfrutos brancos, 16 comfrutos amarelos e 16 comfrutos verdes.
Quaisos gentipos das duas plantas que foramcruzadas?
5. Do cruzamento entre duas linhagens de ervilha de cheiro (Lathyrusodoratus) de flores
brancas foram obtidas plantas com 100% de flores de cor prpura. Dos 245
descendentes provenientes da autofecundao dessas plantas, 110 apresentaramflores
brancas e os demais flores prpuras. Determine o tipo de herana do carter e o
provvel gentipo dos genitores.
6. Emalgumas cultivares de cebola, a cor do bulbo pode ser amarela, roxa ou branca.
Do cruzamento entre uma cultivar de cor roxa comoutra de cor branca, foi obtido na
gerao F
2
a segregao de 9 roxos: 3 amarelos: 4 brancos.
a) Qual a explicao gentica para esse resultado?
b) Estabelea umesquema que explique bioquimicamente esseresultado.
7. Ogro de milho possui uma camada de clulas que encobre o endosperma, chamada
aleurona, e que pode ser incolor, vermelha ou prpura. Aformao destes fentipos
controlada pelos seguintes passos metablicos:
Admitindo-se que ocorra dominncia completa emtodos os genes, pergunta-se:
a) Quais os fentipos dos seguintes gentipos?
IiAAMm; IiaaMM; IIAAmm; iiAAMM; iiAAmm.
b) Quais as propores fenotpicas emF
2
do cruzamento entre duas plantas sendo
uma de gentipo IIAAMMe a outrade gentipo iiaamm?
Admitindo-se queocorradominncia completa emtodososgenes, pergunta-se:
a) Quais osfentiposdos seguintes gentipos?
IiAAMm; IiaaMM; IIAAmm; iiAAMM; iiAAmm.
b) Quais asproporesfenotpicasemF
2
docruzamento entre duas plantas sendo uma de
gentipoIIAAMMe aoutrade gentipo iiaamm?
Substrato 1
I
i
Substrato incolor
Substrato 1
(incolor)
A
Substrato 2
(vermelho)
(vermelho)
Substrato incolor
a
M
m
prpura
vermelho
166
8. Do cruzamento de uma plantaAcomuma B, de feijo, foramobtidos 510 descendentes
de flores brancas e 176 de flores prpuras. Quando a plantaAfoi autofecundada ela
produziu 76 descendentes comflores prpuras e 58 comflores brancas.
a) Quais os gentipos das plantasAe B?
b) Quais as propores genotpicas e fenotpicas esperada da planta Bquando ela for
autofecundada?
9. No caupi, umalelo C
1
responsvel pela resistncia raa 1 de ferrugeme seu alelo
C
2
, resistente raa 2. Plantas C
1
C
2
so resistentes s duas raas. Aaltura da planta
se deve ao de 2 genes, sendo A-B- e A-bb responsveis por planta alta, aaB-
responsvel por planta comaltura mdia e aabb, planta baixa. Ocruzamento entre
uma planta alta e resistente s duas raas comoutra baixa e tambmresistente s duas
raas forneceu o seguinte resultado: 340 altas e resistentes raa 1; 570 altas e
resistentes s duas raas; 280 altas e resistentes raa 2; 80 mdias e resistentes
raa 1; 155 mdias e resistentes s duas raas; 72 mdias e resistentes raa 2; 27
baixas e resistentes raa 1; 47 baixas e resistentes s duas raas; 29baixas e resistentes
raa 2.
a) Quais os gentipos das plantas que foramcruzadas?
b) Quais os tipos de interaes envolvidas emcada carter?
10. Emgalinhas, observaram-se os seguintes resultados para cor de plumagema partir dos
cruzamentos entre as raas Wyandotte branca, W, Leghorn branca, Le Silkie branca,
S: o cruzamento das raas Wx Lproduziu emF
1
100%branco e emF
2
a proporo
fenotpica dos descendentes foi de 13 brancos: 3 coloridos. No cruzamento WxS, o
F
1
foi tambm100%colorido, pormna F
2
foramproduzidos 9 coloridos:7 brancos.
a) Fornea as explicaes genticas para os resultados obtidos.
b) Quais as propores fenotpicas esperadas, nas geraes F
1
e F
2
, do cruzamento L
x S?
167
Biometria
7 BIOMETRIA
7.1 INTRODUO
Biometria uma cincia hbrida entre a biologia e estatstica. Ela temcomo objetivo
aplicar a estatstica aos dados de natureza biolgica. Coma biometria possvel testar
hipteses formuladas e consequentemente facilitar as interpretaes dos fenmenos
biolgicos.
Aaplicao da biometria na gentica comeou como prprio Mendel. Alis, essa foi
a sua contribuio mais expressiva. Ele foi capaz de estabelecer propores fenotpicas a
partir de suas observaes sobre as caractersticas da ervilha, e a partir dessas propores
formular hipteses que pudessemexplicar os resultados obtidos.
7.2 LEISDEPROBABILIDADE
A probabilidade de ocorrncia de um evento dada pelo nmero esperado de
vezes que esse evento ocorra emrelao ao nmero total de eventos. Para ilustrar as
inmeras aplicaes da probabilidade emgentica, ser considerado como exemplo a
determinao do sexo embovinos (Captulo 11). Embovinos, o touro - sexo masculino
- possui os cromossomos sexuais Xe Ye a vaca - sexo feminino - os cromossomos XX.
Portanto, na meiose de umtouro so produzidos dois tipos de gametas, umcontendo o
cromossomo Xe o outro Y; j, a vaca produz apenas gametas com o cromossomo X.
Sendo assim, quemdetermina o sexo do descendente o touro. Como a proporo dos
gametas masculinos contendo o cromossomo X - do touro - de 50% e contendo Y
tambm 50%, fcil entender que a probabilidade de que qualquer descendente seja
fmea ou macho 1/2.
Os conhecimentossobre meiose (Captulo 4), mostramque a fertilizao para produzir
qualquer descendente, no temnenhuma relao comoutra. Emoutras palavras, se uma
vaca obtiver vrios descendentes, a produo de cada umdeles umevento inteiramente
independente, isto , o sexo de umdescendente no temrelao alguma como sexo dos
demais. Sendo assim, pode-se indagar qual ser a probabilidade de que uma vaca tenha dois
descendentes, ambosdo sexo feminino?Considerandoque, emcada gestao, a probabilidade
168
de ser fmea de 1/2, a probabilidade de ambas seremfmeas dada por 1/2 . 1/2 = 1/4.
Isto conhecido como Lei do Produto das Probabilidades, que diz Aprobabilidade de
ocorrncia simultnea de dois ou mais eventos independentes igual ao produto das
probabilidades de suas ocorrncias emseparado.
Consideremos ainda, como ilustrao, umrebanho bovino comcemvacas, tendo cada
uma delas dois descendentes, cuja distribuio dos sexos est apresentada na Tabela 7.1.
TABELA7.1. Distribuio dos dois descendentes de cada uma das 100 vacas de acordo com
o sexo.
Nmero de vacas Sexo dos descendentes
24 duas fmeas
54 uma fmea e um macho
22 dois machos
Esto esses resultados de acordo com o esperado, baseado nas leis de
probabilidades? Como foi mostrado, a probabilidade dos doisdescendentes seremdo
sexo feminino dada por 1/2 . 1/2 = 1/4. De modo anlogo a probabilidade de ambos
seremdo sexo masculino tambm1/2 . 1/2 = 1/4. Por outro lado, a probabilidade do
primeiro ser do sexo feminino e o segundo do sexo masculino tambm1/2 . 1/2 = 1/4.
Porm, aqui pode tambmocorrer o contrrio, isto , o primeiro descendente ser macho
e o segundo ser fmea, cuja probabilidade tambm 1/2 . 1/2 = 1/4. Assim, existem
duas opes de nascimento dos bezerros dos dois sexos com a probabilidade de 1/4
cada. Nota-se que, nesse caso, os dois eventos so mutuamente exclusivos, ou
alternativos. Isso significa que, se ocorrer a primeira situao - fmea-macho -, a segunda
- macho-fmea - no temcondies de ocorrer simultaneamente. Nessa situao, tem-
se o que se denomina de Segunda Lei de Probabilidade ou Lei da Soma das
Probabilidades, que diz: Quando dois eventos so mutuamente exclusivos, a
probabilidade de que eles ocorram fornecida pela soma das probabilidades de que
cada um deles ocorra em separado. No exemplo, a probabilidade ser 1/4 (fmea-
macho) + 1/4 (macho-fmea) = 1/2.
Desse modo, considerando as cemvacas, obtm-se as estimativas do nmero esperado
de vacas emfuno do sexo dos dois descendentes de cada uma (Tabela 7.2).
Como se constata, os resultados observados e os esperados baseados nas leis de
probabilidade so muito semelhantes.
169
Biometria
TABELA7.2. Distribuio observada e esperada dos dois descendentes de cada uma das 100
vacas de acordo com o sexo.
7.3 DISTRIBUIODEPROBABILIDADE
7.3.1 Distribuio Binomial
Em gentica, alm de se conhecer a probabilidade de que umdeterminado evento
ocorra, h necessidade, na maioria dos casos, de se identificar a probabilidade de que
determinadas combinaes de eventos possamocorrer. Nesse caso, trata-se de umbinmio
porque existemapenas dois eventos, por exemplo, macho ou fmea, semente de milho lisa ou
enrugada.
Como exemplo, ser utilizada tambma determinao do sexo embovinos. Seja o
rebanho mencionado anteriormente com cem vacas, s que agora ser considerado que
cada vaca pode ter seis descendentesemsua vida. Apartir dessa informao, muitas perguntas
poderiamser formuladas, como, por exemplo, qual a probabilidade de que cada vaca tenha
pelo menos quatro descendentes do sexo feminino? Qual a probabilidade de que pelo menos
umdescendente de cada vaca seja do sexo masculino? Essas e muitas outras indagaes
podemser facilmente respondidas a partir da expanso do binmio. Vejamos agora como
isso pode ser feito.
No caso anterior, comdois descendentes, as combinaes possveis so fornecidas
pelo desenvolvimento da expresso (a + b)
2
= a
2
+2ab + b
2
, emque a representa o evento
fmea, bo eventomacho e o expoente dois representa onmero de descendentes envolvidos,
isto , dois descendentes. Aprobabilidade de ocorrncia do evento a - fmea - dada por p
e a probabilidade de ocorrncia do evento b - macho - dada por q. Nesse caso, p = q =
1/2. Desse modo, a probabilidade de se ter duas fmeas (a
2
) ou dois machos (b
2
) = (1/2 . 1/
2 =1/4) para cada combinao. E a probabilidade de se ter ummacho e uma fmea 2ab =
2 . 1/2 . 1/2 = 1/2. Ou seja, o mesmo resultado mostrado na Tabela 7.2.
Para n eventos independentes, a expanso do binmio fornecida por:
& $
n-i
0 0
!
a
! ! ? ?
0 0 @ ? ?
n n
n
i i w x
n
i i
n
a b C b p q
w x
em que: & $
n-i
0 0
!
a
! ! ? ?
0 0 @ ? ?
n n
n
i i w x
n
i i
n
a b C b p q
w x
Nmero de vacas
observadas
Sexo dos
descendentes
Probabilidade de
ocorrncia do
evento
Nmero esperado de vacas
baseado na probabilidade
de ocorrncia
24 duas fmeas 1/4 25
54 Uma fmea e um macho 1/2 50
22 dois machos 1/4 25
TOTAL 100 100
170
i
n
C corresponde combinao de n eventos i a i, isto , fazendo n - i = we i = x,
tem-se que
! w ! x
! n
C C
x
n
i
n
? ?
No caso empauta, n corresponde ao nmero de descendentes ou nmero total de
eventos; w onmero de vezes que ocorreo eventoa - onmero de fmeas, por exemplo - e;
x onmero de vezes que ocorreo eventob- no caso, o nmero de machos. Aprobabilidade
de ocorrncia de cada umdos eventos p e q.
Considerados os seis descendentes, we xpoderiamassumir os seguintes valores:
Nmero de Fmeas
(w)
Nmero de Machos
(x)
6 0
5 1
4 2
3 3
2 4
1 5
0 6
Pelo exposto anteriormente, para se ter 6 fmeas, a probabilidade de (1/2)
6
, j que
os eventos so independentes. Quando se considera, por outro lado, a probabilidade de se
ter 5 fmeas - F- e 1 macho- M-, deve-se considerar que estoenvolvidas vrias alternativas,
as quais podemser esquematizadas do seguinte modo:
Ordemdos descendentes Probabilidade de ocorrncia
1 2 3 4 5 6
M F F F F F (1/2)
6
F M F F F F (1/2)
6
F F M F F F (1/2)
6
F F F M F F (1/2)
6
F F F F M F (1/2)
6
F F F F F M (1/2)
6
Assim, o descendente do sexo masculino pode ser o primeiro, o segundo, o terceiro, o
quarto, o quinto ou o sexto descendente. Portanto, os eventos so mutuamente exclusivos
segunda lei de probabilidade. Dessa forma, a probabilidade de se ter um macho e cinco
fmeas dada pela soma das probabilidades de cada umdos eventos emseparado, isto , 6
(1/2)
6
.
171
Biometria
Por meio da expanso do binmio, muito fcil chegar a este e aos demais resultados.
Neste caso n = 6, se for considerada a primeira situao, ou seja, de todos seremfmeas
tem-se:
p = q = 1/2
n = 6 descendentes
w= 6 fmeas
x = 0 machos
pelo binmio
& $ & $ & $
6 0 6
2 / 1 2 / 1 . 2 / 1
! 0 ! 6
! 6
! !
!
? ?
x w
q p
x w
n
como foi mostrado.
Aprobabilidade de se ter ummacho e cinco fmeas de:
p = q = 1/2
n = 6 descendentes
w= 5 fmeas
x = 1 macho
& $ & $ & $
6 1 5
2 / 1 6 2 / 1 . 2 / 1
! 1 ! 5
! 6
! !
!
? ?
x w
q p
x w
n
Do mesmo modo, tm-se as demais probabilidades mostradas na Tabela 7.3. Observa-
se que possvel obter a probabilidade desejada para cada evento e at mesmo estimar o
nmero esperado de vacas que produz uma determinada descendncia.
TABELA 7.3. Distribuio de probabilidades dos seis descendentes de cada uma das cem
vacas de acordo com o sexo.
Nmero
de fmeas
Nmero
de machos
Probabilidade
(P)
Frequncia
esperada entre 100 vacas
6 0 (1/2)
6
= 0,015625 1,56
5 1 6(1/2)
6
= 0,093750 9,38
4 2 15(1/2)
6
= 0,234375 23,43
3 3 20(1/2)
6
= 0,312500 31,25
2 4 15(1/2)
6
= 0,234375 23,43
1 5 6(1/2)
6
= 0,093750 9,38
0 6 (1/2)
6
= 0,015625 1,56
Total 1,000000 100,00
172
Voltemos, no entanto, indagao formulada inicialmente. Qual a probabilidade de
que pelo menos quatro descendentes de cada vaca sejamdo sexo feminino? Odesejado
que se tenha pelo menos quatro fmeas, ento os casos possveis so aqueles com4, 5 e 6
fmeas. Sendo assim, basta somar as probabilidades de cada umdestes eventos, uma vez
que eles so mutuamente exclusivos. No caso considerado, tem-se: P (4 fmeas) + P (5
fmeas) + P (6 fmeas) = 0,234375 + 0,09375 + 0,015625 = 0,343750. Pelo exposto, a
probabilidade de se ter pelo menos 4 fmeas de 0,34375, ou seja, entre as cem vacas,
espera-se que 34,4 tenhampelo menos 4 descendentes do sexo feminino.
Vejamos outra aplicao da distribuio binomial na gentica. Suponhamos que um
criador de bovinos possua umtouro comfentipos favorveis para vrias caractersticas e
esteja interessado emconhecer, por exemplo, qual a probabilidade de que ele produza um
espermatozide idntico ao que lhe deu origem. Para responder indagao, necessrio
inicialmente desconsiderar a ocorrncia de permuta gentica (Captulo 9). Isso porque, com
a permuta, essa probabilidade evidentemente ser nula.
Como nos bovinos 2n = 60 cromossomos, o touro recebeu 30 cromossomos via
espermatozide e 30 cromossomos do vulo. Como foi comentado (Captulo 4) que a
orientao a ser seguida na metfase I para cada umdos cromossomos homlogos s tem
duas opes, a probabilidade de que o cromossomo 1 v para umpolo qualquer da clula
de 1/2, o mesmo ocorrendo como os cromossomos 2, 3, 4 etc. Desse modo, como so
eventos independentes, a probabilidade de que todos os cromossomos de uma dada origem
migrempara umdeterminado polo (1/2)
30
. Pode-se perguntar tambm, por exemplo, qual
a probabilidade deque o espermatozide tenha50%dos cromossomos que vieramdo genitor
masculino. Aqui, tambm, o modo mais eficiente de resolver via distribuio binomial.
Assimsendo, tem-se:
n = 30 cromossomos
w= 15 cromossomos de origemmaterna
x = 15 cromossomos de origempaterna
p = q = 1/2
Pela expresso do binmio, obtm-se:
Por outro lado, se a pergunta fosse qual a probabilidade de se ter pelo menos 90%dos
cromossomos que vieramdo pai, a distribuio binomial facilitaria a obteno do resultado.
Como 90%de 30 so 27 cromossomos, ento os eventos que nos interessamenvolvem27,
28, 29 e 30 cromossomos paternos. Aprobabilidade de se ter cada umdestes eventos :
& $ & $
15 15
w x
n! 30!
p q 1/ 2 1/ 2 0,1445 14, 45%
w!x! 15! 15!
? ? ?
173
Biometria
Como os eventos so mutuamente exclusivos, a probabilidade de se ter pelo
menos 90% dos cromossomos fornecida por: P (27) + P (28) + P (29) + P (30) =
0,0004215%.
7.3.2 Distribuio Polinomial
Nos casos considerados anteriormente, foramapresentados apenas dois eventos,
como macho ou fmea. Contudo, emgentica, normal ocorreremcasos emque esto
envolvidos mais de dois eventos. Seja, por exemplo, um rebanho de bovinos da raa
Shorthorn. Nessa raa, a cor dos animais pode ser branca, vermelha e vermelho-branca
(ruo). Esse carter controlado por umgene, sendo que o branco possui o gentipo
R
1
R
1
, o vermelho R
2
R
2
e o vermelho-branco R
1
R
2
. Nesse caso, tem-se uma distribuio
comtrs fatores, isto , uma distribuio trinomial, fornecida por (a + b + c)
n
, emque a,
b e c representam os eventos - gentipos R
1
R
1
(branco), R
2
R
2
(vermelho) e R
1
R
2
(vermelho-branco). Oestimador para calcular a probabilidade de umdeterminado evento
semelhante da distribuio binomial, ou seja:
em que, w, x e y representamo nmero de descendentes de cada um dos trs diferentes
gentipos, cujas probabilidades so p, q e r, respectivamente. No cruzamento de umtouro
vermelho-branco com12 vacas tambmvermelho-brancas, espera-se o seguinte resultado
na descendncia:
& $ & $
27 3 30!
P(27) 1/ 2 1/ 2
27!3!
?
& $ & $ & $
28 2 30!
P 28 1/ 2 1/ 2
28!2!
?
& $ & $ & $
29 1 30!
P 29 1/ 2 1/ 2
29!1!
?
& $ & $ & $
30 0 30!
P 30 1/ 2 1/ 2
30!0!
?
& $
n
n
w x y
i 0
n!
a b c p q r ,
w!x!y!
?
@ @ ?
0
174
Desse modo, p, q e r assumemvalores de 1/4, 1/2 e 1/4, respectivamente. Pode-se
indagar, por exemplo, qual a probabilidade de que entre os 12 descendentes trs sejam
brancos, trs vermelho-brancos e os demais vermelhos? Nessa situao, tm-se:
n = 12 descendentes
w = 3 brancos
x = 3 vermelhos brancos
y= 6 vermelhos
p = 1/4
q = 1/2
r = 1/4
Assim, obtm-se:
0,8811%.
Vejamos agora, qual a probabilidade de que ocorra 3 brancos, 6 vermelho-brancos
e 3 vermelhos, isto , a proporo esperada.
n = 12 descendentes
w = 3 brancos
x = 6 vermelhos brancos
y= 3 vermelhos
p = 1/4
q = 1/2
r = 1/4
Neste caso, tem-se:
ou seja,
Como era dese imaginar, essa probabilidade bemsuperior observadano caso anterior.
Qualquer outra distribuio polinomial pode ser considerada. Como exemplo, a cor e
a textura das sementes do milho. Como j foi mencionado, quando estas duas caractersticas
esto envolvidas, os seguintes gentipos e suas respectivas propores so esperadas na
gerao F
2
:
Vacas Touro
R
1
R
2
x R
1
R
2
R
1
R
1
R
1
R
2
R
2
R
2
& $ & $ & $
3 3 6
w x y
n! 12!
p q r 1/ 4 1/ 2 1/ 4 0, 008811
w!x!y! 3! 3! 6!
? ? ou seja,
& $ & $ & $
3 6 3
w x y
n! 12!
p q r 1/ 4 1/ 2 1/ 4 0, 0704952
w!x!y! 3! 6! 3!
? ? 7,05%.
175
Biometria
Semente amarela e lisa 9/16
Semente amarela e enrugada 3/16
Semente branca e lisa 3/16
Semente branca e enrugada 1/16
No exemplo, tm-se quatro fentipos - eventos a, b, c, d - que ocorrem com as
probabilidades de p, q, r e s, respectivamente, e a expresso do polinmio passa a ser:
Pode-se perguntar, por exemplo, qual a probabilidade de se tomar aoacaso 20sementes
de uma espiga F
2
de milho e de se obter 11 sementes amarelas e lisas e 3 de cada umdos
fentipos restantes. Na situao empauta, tm-se:
n =20 sementes
w= 11 sementes amarelas e lisas
x = y= z = 3 sementes comoutros fentipos
p = 9/16
q = r = 3/16
s = 1/16
Assimobtm-se:
fcil visualizar que essas distribuies tminmeras aplicaes na gentica e podem
desempenhar umimportantepapel notrabalhodogeneticistae/oumelhoristadeplantas eanimais.
7.4 PROBABILIDADE DE SE OBTER UMA DETERMINADA
COMBINAOGENOTPICA
A probabilidade possui outra aplicao de grande utilidade na gentica, que a
determinao do tamanho mnimo de uma populao segregante para se obter pelo menos
uma plantacomo gentipo desejado. J foi mostrado que possvel conhecer a probabilidade
de ocorrncia de uma combinao genotpica qualquer emuma determinada gerao. Como
o objetivo obter pelo menos uma planta como gentipo almejado, o problema est em
reduzir ao mnimo a probabilidade de no ocorrncia desse gentipo.
Seja p a probabilidade de ocorrncia de umgentipo desejado e logicamente (1 - p) a
probabilidade de que o mesmo no ocorra. Assim, como aumento da populao, diminui
& $
n
n
w x y z
i 0
n!
a b c d p q r s
w!x!y!z! ?
0 @ @ @ ?
& $ & $ & $ & $
11 3 3 3
w x y z
n! 20!
p q r s 9 / 16 3/ 16 3/ 16 1/ 16
w!x!y!z! 11! 3! 3! 3!
?
= 0,00533956 = 0,534%.
176
exponencialmente a probabilidade de no ocorrncia do referido gentipo como mostra a
Tabela 7.4. Essa expresso permite estimar o tamanho mnimo da populao - n - para se
obter pelo menos um indivduo com uma dada probabilidade de ocorrncia do evento.
Como exemplo, ser considerado o cruzamento de plantas de milho comsementes lisas e
enrugadas, apresentado no Captulo 5.
Do exposto pode-se obter uma populao qualquer de tamanho (n), com uma
probabilidadePdeocorrncia do gentipo oufentipo desejado, e de(1- P) deno ocorrncia.
Sendo assim, na populao comnindivduos haver a probabilidade (1 - P) de no ocorrer
pelo menos umdos gentipos ou fentipos desejados, e pode-se escrever que:
) 1 ( ) 1 ( P p
n
> ? >
e resolvendo tem-se:
p) - (1 log
) 1 ( log P
n
>
?
Apartir desse resultado, pode-se indagar qual o tamanho mnimo da gerao F
2
para
que se tenha pelo menos uma semente enrugada, considerando uma probabilidade de 99%
de que essa planta ocorra. No exemplo, a probabilidade de que o gentipo almejado
ocorra p = 1/4; a probabilidade desejada de ocorrncia de pelo menos 1 indivduo P =
0,99 ou 99%. Assim, o tamanho mnimo da populao ser:
Isso significa que, comuma populao de 16 sementes, tem-se 99%de probabilidade
de que pelo menos umdos indivduos seja o procurado, isto , sementes enrugadas. Na
Tabela 7.5, fornecido o nmero mnimo de indivduos - n - na populao segregante, para
diferentes probabilidades de ocorrncia de umevento desejado - gentipo ou fentipo -
considerando que este ocorra comprobabilidade de 95 ou 99%.
Nmero de indivduos
na populao
Probabilidade de no-ocorrncia de um gentipo
desejado
1 1 - p
2 (1 - p)
2
3 (1 - p)
3
B B
n (1 - p)
n
TABELA7.4. Probabilidades de no-ocorrncia de umgentipo desejado emfuno do tamanho
da populao.
& $
& $
& $
& $
log 1 P log 1 0, 99
n 16, 0078
log 1 p log 1 0, 25
> >
? ? ?
> >
.
.
.
.
.
.
177
Biometria
TABELA 7.5. Estimativas do tamanho da populao - n em que ocorre pelo menos um
indivduo desejado com 95% ou 99% de probabilidade (P).
7.5 TESTEDESIGNIFICNCIA- TESTE
5
3
Emgentica, assimcomo emmuitasoutras cincias, osresultadosnumricos observados
emumexperimento so frequentemente comparados comaqueles esperados combase em
alguma hiptese. Suponhamos umexperimento envolvendo o estudo da herana da cor e
texturadasementedomilho(Captulo 5) emque foramobtidas 480sementes assimdistribudas:
268 amarelas e lisas, 86 amarelas e enrugadas, 97 brancas e lisas e 29 brancas e enrugadas.
Considerando que o carter cor da semente controlado por umgene comdominncia do
alelo que condiciona cor amarela sobre branca, a segregao esperada emF
2
de 3 amarelas:
1 branca. Do mesmo modo, no controle da textura da semente, a segregao esperada em
F
2
tambmde 3 lisas:1 enrugada. Admitindo-se que os dois genes apresentamdistribuio
Probabilidade do Tamanho da populao - n
evento - p (P) = 0,95 (P) = 0,99
15/16 1,08 1,66
13/16 1,79 2,75
3/4 2,16 3,32
2/3 2,73 4,19
9/16 3,62 5,57
1/2 4,32 6,64
7/16 5,21 8,00
27/64 5,47 8,40
3/8 6,37 9,80
1/3 7,39 11,36
1/4 10,41 16,01
3/16 14,43 22,18
9/64 19,77 30,39
1/8 22,43 34,49
1/16 46,42 71,36
3/64 62,40 95,92
1/32 94,36 145,05
1/64 190,23 292,42
1/256 765,41 1176,62
1/512 1532,32 2355,54
1/1024 3066,13 4713,39
1/2048 6133,76 9429,09
1/4096 12269,02 18860,47
178
independente, a proporo esperada quando se consideramas duas caractersticas ao mesmo
tempo ser obtida (ver Captulo 5) pelo produto das probabilidades dos dois eventos em
separado, isto (3:1) (3:1) =9:3:3:1. Temos ento que verificar se os valores observados se
ajustama essas propores esperadas.
Baseado na hiptese formulada - H
o
, segregao de 9:3:3:1-, os valores esperados
so: 9/16 (480) = 270 amarelas lisas; 3/16 (480) =90 amarelas enrugadas; 3/16 (480) = 90
brancas lisas; 1/16 (480) = 30 brancas enrugadas. Comparando o valor esperado como
observado para cada fentipo obtm-se o desvio, como mostrado na Tabela 7.6. Devemos
verificar, ento, se esses desvios so significativos ou no, baseados na probabilidade de
ocorrncia do evento. Se os desvios no so significativos, conclui-se queeles so decorrentes
do acaso, aceitando-se a hiptese formulada. Emoutras palavras, ser considerado que os
valores observadosse ajustam proporo esperada de 9:3:3:1 e, geneticamente, isso significa
que as duas caractersticas so controladas por genes que se distribuemindependentemente.
Por outro lado, se os desvios so significativos, a hiptese rejeitada, havendo necessidade
de se formular nova hiptese para explicar os resultados obtidos.
TABELA 7.6. Frequncias observadas, esperadas e desvios de cada fentipo na gerao F
2
,
relativo ao estudo da herana da cor e textura da semente do milho.
Fentipos
Frequncia
observada - FO
Frequncia
1/
esperada - FE
Desvios
(FO - FE)
Amarela lisa 268 270 - 2
Amarela enrugada 86 90 - 4
Branca lisa 97 90 + 7
Branca enrugada 29 30 - 1
1/
Considerandoa segregaode9:3:3:1
Para determinar se os desvios so significativos ou no, deve-se lanar mo de testes
estatsticos, os quais iro avaliar se apenas o erro amostral suficiente para explicar os
desvios estimados entre os valores observados e os esperados. Os testes estatsticos so
empregados para estimar o valor da probabilidade associado a um determinado desvio.
Quanto maior o valor da probabilidade, maior a chance que os desvios sejamdecorrentes
dos fatores de acaso. Por exemplo, suponha que os clculos do teste estatstico d uma
probabilidade de 0,30. Esse valor significa que, nas condies em que foi avaliada essa
gerao F
2
, h 30% de possibilidade de que apenas o erro amostral seja suficiente para
explicar a ocorrncia de desvios de mesma magnitude e, consequentemente, h 70% de
chance de que os desvios sejamdecorrentes de outras causas. Por outro lado, umvalor da
probabilidade de 0,01 indicaria que h somente 1% de chance que apenas o erro amostral
179
Biometria
seja suficiente para explicar desvios de magnitude semelhante, enquanto as outras causas do
desvio atingemo nvel de 99%de probabilidade.
Temos de decidir qual o valor da probabilidade que desejamos encontrar para indicar
se os desvios so decorrentes do acaso ou no. Normalmente, escolhido o nvel de
significncia de 0,05 ou 5%; isso ajuda a minimizar a chance de aceitar uma hiptese errada
semincrementar a probabilidade de rejeitar a hiptese correta. Assim, se o teste estatstico
fornecer umvalor de probabilidade superior a 5%, pode-se concluir que o erro amostral ,
na realidade, a causa dos desvios observados. Denominam-se os desvios como no
significativos e aceita-se a hiptese formulada. Mas, se o teste estatstico fornece umvalor
abaixo de 5%, conclui-se, ento, que os desvios no podemser explicados apenas emfuno
do erro amostral. Nesse caso, denominam-se os desvios como significativos e rejeita-se a
hiptese. importante compreender que o nvel de significncia somente fornece a
probabilidade base para a qual ns rejeitamos a hiptese, mas no fornece prova de que a
hiptese verdadeira ou falsa.
Resta agora comentar que existemvrios testes estatsticos que podemser utilizados
para verificar a significncia dos desvios. Umdos testes mais utilizados pelos geneticistas o
5
3
- qui-quadrado. Nesse teste, os desvios so transformados numnico valor de
5
3
, o
qual uma medida padronizada da magnitude dos desvios. Cada valor de est associado a
uma probabilidade que corresponde possibilidade de que os desvios tenham a mesma
magnitude se o experimento for repetido. Ovalor de
5
3
estimado pela seguinte expresso:
Vejamos a aplicao deste teste no estudo da herana da cor e textura da semente do
milho (Tabela 7.7). Ahiptese formulada a de que a frequncia observada se ajusta
frequncia esperada, considerando uma proporo fenotpica de 9:3:3:1. Para aceitarmos,
ou no, a hiptese H
o
, isto , para verificar se os desvios observados foram em razo,
exclusivamente, do acaso, deve-se comparar o valor calculado do
5
3
comumvalor tabelado
(Tabela 7.8). No corpo da Tabela, esto apresentados os valores de associados a uma
certa probabilidade - P - que representa a chance de os desvios seremdecorrentesdo acaso.
Na primeira coluna da Tabela 7.8, representam-se os graus de liberdade - GL. Em
uma anlisede , os GLcorrespondemao nmero de classes emque osdados foramseparados,
menos 1. Como exemplo, existem4 classes fenotpicas, ento o GL igual a 3. Isso indica
que existem3 classes que podemassumir qualquer valor, mas a quarta classe ter o valor
determinado para completar o nmero total de indivduos. De posse dessas informaes,
pode-se agora recorrer Tabela 7.8, e verificar emque nvel de probabilidade se enquadra
o valor do calculado. Com3 GL, o valor de calculado - 0,770 - situa-se entre os nveis de
80% e 90% de probabilidade de que os desvios sejamdecorrentes do acaso. Isso indica
% #
2 2
( FO FE ) / FE 0 5 ? >
180
que a segregao observada emF
2
se ajusta proporo de 9:3:3:1 e, consequentemente,
que as caractersticas so controladas por dois genes que se distribuemindependentemente.
TABELA7.7. Aplicao do teste
5
3
aos dados da gerao F
2
, relativo ao estudo da herana
da cor e textura da semente do milho.
Na utilizao do teste de
5
3
alguns cuidados so necessrios:
Oteste somente deve ser aplicado aos dados observados do experimento e nunca s
porcentagens ou propores oriundas dos mesmos.
Oteste muito sensvel ao tamanho da amostra. Se a amostra muito pequena, por
exemplo, a classe de menor frequncia foi inferior a 5, o teste pode no ser acurado. No
caso de amostras pequenas, comumutilizar a correo de Yates, que consiste emsubtrair
0,5 dos desvios entre a frequncia observada e a esperada. Dessa forma, a expresso do
5
3
passa a ser:
% #
0
> > ? FE FE FO / ] 2 / 1 ) [(
2 2
5
Finalmente, deve ser mencionado que a deciso de aceitar ou rejeitar a hiptese no
deve ser tomada como prova de que a proporo gentica proposta verdadeira ou no. O
teste estatstico somente auxilia nessa deciso, fornecendo os valores de probabilidade de
que os desvios sejamdecorrentes do acaso.
Fentipos FO FE Desvios (FO - FE) (Desvios)
2
2
5
= (Desvios)
2
/FE
Amarela lisa 268 270 - 2 4 0,015
Amarela enrugada 86 90 - 4 16 0,178
Branca lisa 97 90 + 7 49 0,544
Branca enrugada 29 30 - 1 1 0,033
2
5
= 0,770
181
Biometria
TABELA 7.8. Valores de
2
5
para diferentes nveis de probabilidade.
GL
1/
Probabilidades
0,95 0,90 0,80 0,70 0,50 0,30 0,20 0,10 0,05 0,01 0,001
1 0,004 0,02 0,06 0,15 0,46 1,07 1,64 2,71 3,84 6,64 10,83
2 0,10 0,21 0,45 0,71 1,39 2,41 3,22 4,60 5,99 9,21 13,82
3 0,35 0,58 1,01 1,42 2,37 3,66 4,64 6,25 7,82 11,34 16,27
4 0,71 1,06 1,65 2,20 3,36 4,88 5,99 7,78 9,49 13,28 18,47
5 1,14 1,61 2,34 3,00 4,35 6,06 7,29 9,24 11,07 15,09 20,52
6 1,63 2,20 3,07 3,83 5,35 7,23 8,56 10,64 12,59 16,81 22,46
7 2,17 2,83 3,82 4,67 6,35 8,38 9,80 12,02 14,07 18,48 24,32
8 2,73 3,49 4,59 5,53 7,34 9,52 11,03 13,36 15,51 20,09 26,12
9 3,32 4,17 5,38 6,39 8,34 10,66 12,24 14,68 16,92 21,67 27,88
10 3,94 4,86 6,18 7,27 9,34 11,78 13,44 15,99 18,31 23,21 29,59
No significativo Significativo
1/
Grau deLiberdade.
182
PROBLEMASPROPOSTOS
1. Na raa holandesa de bovinos, os animais podem ser preto e branco, pelo alelo
dominante V, e vermelho e branco, pelo alelo recessivov. Do cruzamento de umtouro
heterozigoto comuma vaca vermelha e branca, determine as seguintes probabilidades:
a) De o primeiro descendente ser preto e branco;
b) De os dois primeiros serempreto e branco;
c) De os dois primeiros terema mesma cor de pelagem;
d) De os dois tipos de pelagens ocorreremnos dois primeiros descendentes.
2. Emumcruzamento emgalinhas, obteve-seuma ninhada com12pintinhos. Determine
as seguintes probabilidades:
a) De os 12 pintinhos seremdo sexo masculino;
b) De todos possuremo mesmo sexo;
c) De ocorrer 6 fmeas;
d) De ocorrer pelo menos 6 fmeas.
3. Na ervilha 2n=14, do cruzamentoentre uma cultivar brasileira euma europia, obteve-
se a gerao F
1
. Considerando a meiose das plantas da gerao F
1
, pergunta-se:
a) Qual a probabilidade de ocorrer um gro de plen com todos os centrmeros
provenientes da cultivar brasileira?
b) Qual a probabilidade de um gro de plen ser portador de um centrmero da
cultivar brasileira e os demais da europia?
c) Qual a probabilidade de um gro de plen ser portador de pelo menos trs
centrmeros de origemda cultivar brasileira?
4. Embovinos, ofentipo mocho decorrentede umalelo dominante, e o alelo recessivo
confere o fentipo chifrudo. Umtouro mocho foi cruzado com10 vacas sabidamente
heterozigticas e todos os descendentes foram mochos. Qual a probabilidade do
touro ser homozigoto?
5. Em coelho, a cor branca decorrente do alelo recessivo c e a himalaia ao alelo
dominantec
h
. Ummacho heterozigoto foi cruzado comuma fmeade mesmo gentipo
e produziu 8 descendentes. Qual a probabilidade de que a prognie apresente
exatamente a proporo esperada de 3 himalaias: 1 branco?
183
Biometria
6. Emcaf, a planta pode apresentar altura normal - bourbon - pelo gentipo n
a
n
a
, as
plantas de gentipo nn so ans - n
a
n
a
- e as de gentipo n
a
n apresentam altura
intermediria - murta. Do cruzamento entre duas plantas murtas foramobtidas 12
sementes. Determine as seguintes probabilidades:
a) De todas as sementes produziremplantas do tipo murta;
b) De todas as plantas seremnana;
c) De que a descendncia seja exatamente a esperada de 3 bourbon : 6 murta : 3 nana.
7. Emovelha, a ausncia de orelhas decorrente de gentipo E
1
E
1
, as orelhas curtas
ocorrememrazodo gentipoE
1
E
2
eas orelhas longas sodeterminadas pelo gentipo
E
2
E
2
. Nesses animais, a cor da gordura pode ser branca, pelo alelo dominante F, e
amarela, pelo alelo recessivo f. Determine os tamanhos das descendncias, para se
conseguir 12 animais semorelhas e que produzamgordura amarela, com95%e 99%
de probabilidade, a partir dos seguintes cruzamentos:
a) E
1
E
2
Ff x E
1
E
2
Ff
b) E
1
E
2
Ff x E
1
E
1
Ff
c) E
1
E
1
ff x E
1
E
2
Ff
8. Emtomate, o alelo dominante do gene C responsvel pelo fentipo folha normal e o
alelo c folha batata. J o alelo dominante do gene Aconfere a cor roxa e o a, a cor
verde das plantas. Analise os resultados dos seguintes cruzamentos e estime o valor
do
5
3
. Lembre-se de que os dois genes em apreo situam-se em cromossomos
diferentes.
Nmero de descendentes
Cruzamentos
Roxo
recortado
Roxo
batata
Verde
recortado
Verde
batata
a) AaCc x Aa Cc 41 15 8 2
b) AaCc x aaCc 321 101 310 107
c) AaCc x Aacc 219 207 64 71
d) AACc x aaCc 722 231 0 0
e) AaCC x aacc 404 0 387 0
f) Aacc x aaCc 70 91 86 77
184
185
AlelismoMltiplo
8 ALELISMO MLTIPLO
8.1 ALELISMO MLTIPLO E A VARIABILIDADE DAS
POPULAES
Nos exemplos discutidos nos captulos anteriores, foramconsiderados apenas dois
alelos de umdado gene, afetando a expresso de umcarter. No entanto, umgene pode
possuir, emgeral, no apenas dois alelos, mas vrios. Aesse grupo de alelos d-se o nome
de srie allica e ao fato de um carter se expressar de vrias maneiras alternativas, em
decorrncia de uma srie allica, denomina-se alelismo mltiplo.
importante lembrar que esto sendo considerados indivduos diplides e cada
indivduo pode conter, no mximo, dois alelos diferentes. Assim, a srie allica ocorre em
nvel populacional.
Os alelosmltiplos so representados pela mesma letra, acompanhada de umexpoente,
para seremdiferenciados. Assim, uma srie allica de umgeneApode ser representada por
A
1
, A
2
, A
3
... A
m
alelos desse gene.
Os diferentes alelos de uma srie surgempela ocorrncia de mutao. Como vimos no
Captulo 3, umgene corresponde a uma sequncia de pares de nucleotdeos que codifica
uma cadeia polipeptdica. Supondo que esta cadeia polipeptdica possua 100 aminocidos,
necessita-se de pelo menos 300 pares de nucleotdeos para codific-la. Se considerarmos
apenas uma substituio de bases do DNA, que uma das causas de mutaes gnicas,
existe a possibilidade de sua ocorrncia nos 300 pares de nucleotdeos. Almdisso, emcada
par h trs possveis substituies, isto , se no alelo original temos o par A-T, este pode ser
substitudo por G-C, T-Ae C-G. Assim, no segmento de DNAcom300 pares existem900
possibilidades de alteraes, para formar, teoricamente, 900 alelos. evidente tambmque
esse alelo pode sofrer, simultaneamente, duas ou mais substituies, o que contribuir para
produzir umnmero de alteraes - alelos - extremamente grande. necessrio lembrar que
essas inmeras possibilidades diminuememrazo do cdigo gentico ser degenerado e da
ocorrncia de inmeras mutaes semsentido ou de sentido errado, que produzemenzimas
no funcionais. No entanto, em funo das possibilidades de alteraes do DNA serem
quase ilimitadas, pode-se facilmente compreender por que todo gene deve ser representado
por uma srie allica.
186
Aocorrncia de uma mutao produzindo umalelo novo a fonteoriginal que permite
ampliar a variabilidade gentica de uma populao. Essa ampliao se d de modo mais
rpido, graas reproduo sexuada, que combina os alelos emvrios gentipos diferentes.
Assim, por exemplo, se temos dois alelos, A
1
e A
2
, o nmero de gentipos diferentes na
populao ser trs, A
1
A
1
, A
1
A
2
eA
2
A
2
, porm, se surgir umterceiro alelo, A
3
, o nmero de
gentipos diferentes passa a ser de seis, os trs anteriores e mais A
1
A
3
, A
2
A
3
e A
3
A
3
. Se
considerarmos malelos, o nmero de gentipos diferentes - NGD- dado pela expresso:
Desse total de gentipos, o nmero de homozigotos igual ao nmero de alelos - m-
e o nmero de heterozigotos - NGH- dado pela expresso:
Quando seconsidera mais de umasrie allica, uma decada gene, o nmerode gentipos
na populao aumenta exponencialmente. Assim, dois genesAe B, cada umrepresentado
por malelos, permite formar na populao [m(m+ 1)/2]
2
gentipos diferentes, sendo m
2
homozigotos emambosos locos, os demaistero pelo menos umdos locos, emheterozigose.
Sejamos genes Ae B, comdois alelos A
1
e A
2
e B
1
e B
2
. Na populao sero possveis 9
gentipos diferentes: A
1
A
1
B
1
B
1
, A
1
A
1
B
1
B
2
, A
1
A
1
B
2
B
2
, A
1
A
2
B
1
B
1
, A
1
A
2
B
1
B
2
, A
1
A
2
B
2
B
2
,
A
2
A
2
B
1
B
1
, A
2
A
2
B
1
B
2
e A
2
A
2
B
2
B
2
.
Ento, nesse caso, m=2, o nmero de gentipos diferentes fornecido pela expresso
[m(m + 1)/2]
2
= 9. Desses, m
2
= 4 so homozigotos, em ambos os locos; A
1
A
1
B
1
B
1
,
A
1
A
1
B
2
B
2
, A
2
A
2
B
1
B
1
, A
2
A
2
B
2
B
2
. Os demais tero pelo menos umloco emheterozigose.
Para ngenescommalelos onmero de gentipos diferentes fornecido pela expresso
[m(m+ 1)/2]
n
. Desses, m
n
sero homozigotos emtodos os locos. Se desejarmos encontrar
o nmero das diferentes combinaes genotpicas possveis, comdiferentes nmeros de locos
emhomozigoseouheterozigose, poderemos utilizar as propriedades de expanso do binmio
(ho + he)
n
emque
ho: nmero de locos em homozigose. Lembrando-se que para cada loco,
correspondente ao nmero de alelos
he: nmero de locos emheterozigose que dado por
m(m-1)
2
, para cada loco.
Ento, pela expanso do binmio tem-se:
& $ m m+1
NGD=
2
& $ m m 1
NGH
2
>
?
J F
n
i
i n i
n
1 0
c m m(m 1) / 2
>
?
0 >
187
AlelismoMltiplo
emque i o nmero de locos emheterozigose emcada classe degentipo,
i
n
C a combinao
dos n locos emcada classe para umdado valor de i.
Como exemplo do emprego dessa expresso, vamos considerar quatro locos (n = 4)
com oito alelos em cada (m = 8). Nesse caso, temos os valores de i variando de 0 a 4,
portanto, so possveis, cinco classes. Onmero esperado de gentipos emcada classe :
i Classes de Gentipos Nmero de Gentipos
0 4 locos homozigticos
1 3 locos homo e 1 hetero
2 2 locos homo e 2 hetero
3 1 loco homo e 3 hetero
4 4 locos heterozigticos
Podemos notar que o total de gentipos dessas cinco classes de 1.679.616 e
corresponde ao NGD= [m(m+ 1)/2]
n
.
Quando o nmero de alelos no o mesmo para vrios genes, o nmero de gentipos
na populao pode ser determinado, seguindo-se o mesmo raciocnio. Assim,
considerando que o gene A possui r alelos e o gene B possui s alelos, o nmero de
gentipos diferentes ser {[r(r + 1)/2].[s(s + 1)/2]}, dos quais r.s correspondem ao
nmero de homozigotos, {[r(r - 1)/2].[s(s - 1)/2]} corresponde ao nmero de
heterozigotos nos dois locos, r[s(s - 1)/2] corresponde aos gentipos homozigticos no
locoAe heterozigticos emloco Be s[r(r-1)/2] corresponde aos gentipos homozigticos
no loco B e heterozigticos em A. Para trs ou mais genes, obtm-se o nmero de
gentipos para cada umindividualmente, e, emseguida, determina-se o nmero total de
gentipos na populao, que corresponde ao produto dos nmeros individuais para cada
srie allica - lei do produto das probabilidades.
8.2 EXEMPLOS DEALELISMOMLTIPLOEMANIMAIS
Entre os vrios exemplos de alelismo mltiplo, interessante citar a cor da pelagemda
maioria dos animais domsticos. No co, por exemplo, a cor da pelagemde certas raas
explicada pela presena de 5 alelos do gene C. O alelo C responsvel por uma intensa
pigmentao; c
de
cor de intensidade reduzida de vermelho passando para amarelo; c
d
nesse
caso, o pelo branco compele e olhos escuros; c
h
pelos cinzas e olhos azuis escuros; c cor
albina, nariz rosa, olhos azuis e pelos brancos.
Como a srie responsvel pela cor da pelagem composta de cinco alelos, nas
populaes de cachorros so possveis 15 gentipos diferentes, sendo 5 gentipos
homozigticos e 10gentipos heterozigticos. Anica interao que ocorre entre os alelos
a dominncia completa que representada, emordemdecrescente, da seguinte maneira: C>
& $
0
0 4
4
C 8 28 4.096 ?
& $
1
1 3
4
C 8 28 57.344 ?
& $
2
2 2
4
C 8 28 301.056 ?
& $
3
3 1
4
C 8 28 702.464 ?
& $
4
4 0
4
C 8 28 614.656 ?
188
c
de
> c
d
> c
h
> c. Nesse caso, os quinze gentipos expressam apenas cinco fentipos
correspondentes ao nmero de alelos.
Omelhor exemplo de alelismo mltiplo emanimais ocorre no sistema imunolgico.
Por essa razo, alguns comentrios a respeito sero feitos. uma rea importantssima em
termos de conhecimento e, inclusive, foi criada uma subdiviso da gentica, denominada de
IMUNOGENTICA, responsvel pelo seu estudo.
Osistema imunolgico s ocorre nos vertebrados. Quando uma substncia estranha,
chamada antgeno, entra na corrente sangunea desses animais, eles respondemao ataque,
por meio de umsistema de proteo denominado resposta imune. Essa resposta imune
envolve a produo de uma protena, produto de genes, que capaz de reconhecer e
destruir o corpo estranho. Areao do organismo presena do antgeno realizada
por substncias produzidas pelos tecidos linfides (ndulos linfticos, amgdalas e bao).
Aresposta imunolgica realizada basicamente pelos linfcitos Be linfcitos T (Figura
8.1). Desses, a que nos interessa mais emtermos de imunogentica a dos linfcitos B,
que produzemos anticorpos. Vale salientar que, como antgeno, existemuma infinidade
de substncias. Os anticorpos devem ser suficientemente versteis para reconhecer e
destruir todas as substncias estranhas ao organismo. Alguns comentrios de como
produzida essa versatilidade de atuao dos anticorpos sero apresentados a seguir.
Os anticorpos so protenas denominadas imunoglobulinas. Elas so formadas por
quatro cadeias polipeptdicas, sendo duas leves, denominadas cadeia L, comcerca de 214
aminocidos, e duas pesadas, cadeias H, com446 aminocidos. Nas Figura 8.2, encontra-
se o esquema de uma molcula de umanticorpo. Observe que as molculas so unidas por
pontes de dissulfeto e possuemuma regio constante e outra varivel. Detalhes adicionais
sobre essa molculaso encontrados emGarrett e Grisham(1995). Aqui importante enfatizar
que h vrios genes, distribudos emdiferentes cromossomos responsveis pela produo
das cadeias polipeptdicas das molculas de imunoglobulinas. Os diferentes arranjos desses
genes afetama parte varivel da cadeia, e possibilitam, assim, a produo de uma enorme
diversidade de anticorpos capazes de reconhecer praticamente toda substncia estranha que
penetra no organismo.
Como foi mencionado, esses anticorpos s sero produzidos se ocorreremantgenos
estranhos ao organismo. H excees de anticorpos, contudo, que so produzidos
independente da presena dos antgenos especficos. o que ocorre no sistema sanguneo
(ABO) da espcie humana, J embovinos eABemgatos. Nesse caso, ocorremanticorpos
naturais, que surgemlogo aps o nascimento.
189
AlelismoMltiplo
FIGURA 8.1. A origem e processamento das clulas produtoras de anticorpos. Adaptado de
Strickberger (1976)
FIGURA 8.2. Esquema de uma molcula de anticorpo.
No sangue, mais especificamente nas hemcias, so produzidos inmeros antgenos.
Esses antgenos so geneticamente controlados e a maioria dos genes envolvidos possui
vrios alelos. Na Tabela 8.1, encontra-se uma ideia da diversidade de antgenos existentes
em alguns animais e o nmero de alelos em cada um deles. Apenetrao de hemcias
estranhas ao organismo, por transfuso ououtro mecanismo, induz produo de anticorpos
que so encontrados no soro.
Dos grupos sanguneos, o mais conhecido o sistemaABOda espcie humana. Por
essa razo, alguns comentrios sero realizados a respeito desse sistema que, provavelmente,
possa ser extrapolado para os sistemas existentes emoutros mamferos.
190
TABELA8.1. Exemplos de sistemas de grupos sanguneos em animais domsticos, evidenciando
o grande nmero de alelos presentes na maioria dos casos.
Gatos
Locos A B C
N de alelos* 2 2 2
Sunos
Locos A B C D E F G H I J K L M
N de alelos 2 2 2 2 15 3 3 7 2 3 5 6 18
Ovelhas
Locos A B C D M R X
N de alelos* 3 52 4 2 4 2 2
Bovinos
Locos A B C F J L M S Z T
N de alelos 11 >1000 >100 8 4 2 3 15 3 2
Cavalos
Locos A C D K P Q U
N de alelos* 11 2 11 2 3 5 2
Ces
Locos A B C D F Tr J K L M N
N de alelos 3 2 2 2 2 3 2 2 2 2 2
Galinhas
Locos A B C E H I J K L P R
N de alelos* 5 35 5 5 9 3 5 3 4 2 10 2
*Nmeromnimodealelos
No sistemaABO, existemquatro grupos sanguneos A, B, ABe O. Os trs primeiros
produzemantgenos que so encontrados na superfcie dos glbulos vermelhos. Cada um
desses antgenos consta de cadeia de acar associada cadeia polipeptdica. Os antgenos
Ae Bdiferemsomente no acar terminal (Tabela 8.2). Aadio desse acar terminal
determinada por formas distintas da enzima transferase, que so produtos de alelos distintos
situados no cromossomo 9.
Um dos alelos, o I
B
, codifica uma enzima que interfere nos passos metablicos,
dando como produto a galactose no final da cadeia, isto , o antgeno B. O alelo I
A
,
produz uma outra enzima, a N-acetil-galactosamina, que confere umacar final diferente
do anterior. Quando o indivduo de gentipo I
A
I
B
, as duas enzimas so produzidas,
ocorre codominncia, e os dois tipos de antgenos so produzidos. J, o alelo i no produz
enzimas e, como consequncia, nenhum antgeno. interessante observar que I
A
e I
B
dominam o alelo i. Assim, so possveis seis gentipos, os trs homozigotos
A A B B
I I , I I e ii,
e trs heterozigotos
A B A B
I i, I i, I I
. Ocorremquatro fentipos, o Aque
191
AlelismoMltiplo
produz o antgenoA, o Bantgeno B, oABcomos dois antgenosAe Be Oque no produz
nenhumdos dois antgenos.
TABELA8.2. Antgenos do sistema ABO na espcie humana. (Adaptado de Nicholas, 1999).
Alelo Grupo Enzima Antgeno
i O - -
I
A
A N acetil
galactosaminil
transferase
I
B
B galactosil
transferase
Esqueleto
protico
Esqueleto
protico
4 cadeias
de acar
4 cadeias
de acar
N
G
Se o sangue de umindivduo do grupoAfor doado a umdo grupo B, as hemciasAdo
doador, antgenoA, so aglutinadas pelo anticorpoBdo plasma do receptor. Os aglomerados
de hemcias obstruempequenos vasos sanguneos, causando problemascirculatrios. Algum
tempo depois, tais hemcias so destrudas pelos glbulos brancos, liberando hemoglobina e
outros produtos no plasma. Pode ocorrer, ento, desde uma pequena reao alrgica at
leses renais graves que podemocasionar a morte. Omesmo ocorre se umindivduo do
grupo Bdoar sangue a umdo grupoA.
Quando a transfuso pequena, at meio litro de sangue, os anticorpos do doador se
diluemmuito no volume total do sangue do receptor, a concentrao to pequena a ponto
de no causar aglutinao. Assim, o problema principal nas transfuses a aglutinao das
hemcias do doador pelo plasma do receptor.
Como jmencionado, indivduos do grupoOno produzemantgenos.Assim, pequenas
quantidades desse sangue podem ser doadas a qualquer receptor. Por isso, eles so
denominados de doadores universais. Os indivduosdo grupoABproduzemos dois antgenos
e nenhumanticorpo, portanto no podemdoar sangue, a no ser para indivduo do mesmo
grupo sanguneo, mas podem receber de qualquer outro grupo sendo denominados de
receptores universais.
Um outro exemplo importante, citado na literatura de imunogentica, a doena
hemoltica de recm-nascidos. Essa doena comumempotros. Os animais, ao nascer, so
perfeitamente normais, porm, cerca de 24horas aps o parto, comeama apresentar sintomas
de anemia aguda, ictercia e hemoglobinria. H alterao nos batimentos cardacos e na
respirao e, como consequncia, normalmente os animais morremempoucos dias.
192
Essa anomalia se deve a uma hemorragia que ocorre algumas vezes durante a gravidez
ou nascimento (deslocamento da placenta), liberandohemcias do feto na corrente sangunea
da me, envolvendo o grupo sanguneo A. Para que isso ocorra, o feto deve ter herdado o
antgeno Ado seu pai, isto , o feto e o pai apresentam reao positiva para o referido
antgeno (A
+
) e a me A
-
(no produz o antgeno). Quando as clulas do feto entramem
contacto coma corrente sangunea da me, essa produzir anticorpo contra o antgenoA.
Esse anticorpo ser transferido junto comoutros existentes no colostro (denominao dada
ao leite materno nos primeiros dias ps-parto) para o potro, durante a alimentao. Os
anticorposA, ento absorvidos pelo tubo digestivo, passam corrente sangunea e destroem
rapidamente todas as clulas comantgenoA
+
na sua superfcie.
Normalmente, no primeiro parto, o problema no srio, j que a resposta imune
lenta. Contudo, no segundo parto, a resposta imune torna-se mais pronunciada, causando a
doena hemoltica do recm-nascido.
H alguns procedimentos que podemser utilizados para evitar a doena: a) dar ao
potro alimentao artificial nas primeiras 36 horas para evitar o colostro contendo o antgeno
A
+
; b) usar uma me adotiva que tambmsejaA
+
, como o potro, no ocorrendo, nesse caso,
o anticorpo. Maiores detalhes podemser encontrados emNicholas (1987).
Aimportncia emse conhecer esses grupos sanguneos est relacionada ao fato de
que determinados tipos de sangue conferemmaior sobrevivncia antes e aps o nascimento
e tambmestorelacionadas resistncia acertas molstias e comoutrosatributos de interesse
econmico.
Uma utilidadeadicional dos grupos sanguneos refere-se correo deerros no registro
de umanimal - pedigree - principalmente quando estefoi produzido por inseminao artificial
e ocorreutrocade smen, o que, relativamente comum, especialmenteemgrandes programas
de melhoramento, nos quais utiliza-se smende muitos machos. Por exemplo, emprogramas
de melhoramento de galinhas j foramencontrados cerca de 3%de registros errados. Tais
erros podemser facilmente corrigidos por intermdio do exame dos grupos sanguneos dos
genitores e do filho. Essa prtica , portanto, muito valiosa numprograma de melhoramento
e na correo da genealogia de umanimal.
8.3 EXEMPLOSDEALELISMOMLTIPLOEMPLANTAS
So conhecidos inmeros caracteres emplantas, nas quais ocorremalelos mltiplos.
Inicialmente, vamos considerar a srie allicaque controla a cor da semente de soja. Ocorrem
quatro alelos com a seguinte ordem de dominncia: I > i
a
> i
b
> i. Em funo disso, so
possveis os seguintes gentipos comos respectivos fentipos:
193
AlelismoMltiplo
importante mencionar que outros genes esto tambmenvolvidos na expresso de
cor do tegumento, ocasionando modificaes dos fentipos determinados pela srie allica I.
Como j foi enfatizado, so inmeros os exemplos de alelismo mltiplo emplantas.
No entanto, umdos principais exemplos o fenmeno da incompatibilidade que corresponde
ao insucesso de certos cruzamentos emproduzir descendentes, ou a incapacidade de ocorrer
autofecundao - autoincompatibilidade. Esse fenmeno foi descrito pela primeira vez em
fumo - Nicotiana - sendo a causa demonstrada pela incapacidade de crescimento do tubo
polnico, ou por umcrescimento muito lento, ineficiente para a fertilizao.
Cerca de metade das famlias das angiospermas hermafroditas - aproximadamente
150 famlias - representadas por mais de 3.000 espcies, apresentamesse fenmeno e, entre
elas, esto plantas de valor econmico como Rosceas - ameixeira, macieira; Crucferas -
repolho, brcolis; Leguminosas - crotalria; Gramneas - centeio; Esterculiceas - cacau;
Passiflorceas - maracuj; Composta - girassol; Solanceas - fumo, certos tomates, etc.
Mediante cruzamentos apropriados, foi constatado que a incapacidade de crescimento
do tubo polnico explicada, geneticamente, pela presena de uma sria allica. Os alelos
dessa srie so simbolizados pela letra S- do ingls self-incompatibility, que corresponde
auto-incompatibilidade - e so utilizados expoentes para identificar os diferentes alelos.
Ocorrem dois sistemas de incompatibilidade em angiospermas hermafroditas,
controlados pela srie allica S, conhecidos como incompatibilidade gametoftica e
esporoftica.
Embora ainda no se conhea completamente a base molecular da incompatibilidade,
estudos recentes constatarama formao de uma glicoprotena no estigma da flor, tanto em
espcies comincompatibilidade gametoftica quanto emespcies comincompatibilidade
esporoftica. Foi verificado que cada alelo da srie produz uma glicoprotena especfica.
Esta s produzida nos tecidos da flor feminina onde o plen e o tubo polnico entramem
contato, sendo quase a totalidade no estigma. Uma pequena quantidade foi constatada no
ovrio e acredita-se que seja para assegurar a incompatibilidade.
Emespcies comincompatibilidade gametoftica, verifica-se no estilete a inibio do
crescimento do tubo polnico, pelo engrossamento de sua extremidade, que pode rebentar-
se emconsequncia da deposio de calose. Nas espciescomincompatibilidade esporoftica,
a inibio se d no estigma e tambmpela formao de calose emsuas clulas.
Gentipos Fentipos
II; Ii
a
; Ii
b
; Ii Hilo e tegumento amarelos
i
a
i
a
; i
a
i
b
; i
a
i Hilo escuro e tegumento amarelo
i
b
i
b
; i
b
i
Hilo e parte do tegumento que o circunda escuros,
enquanto o restante do tegumento amarelo
ii Hilo e tegumento escuros
194
A inibio do crescimento do tubo polnico s ocorre quando o cruzamento
incompatvel, isto , depende da interao entre os produtos dos alelos Sidnticos, presentes
no plen e na flor feminina. Assim que esses produtos se encontram, determina-se uma
reao de incompatibilidade empoucos minutos. Uma hiptese para explicar tal reao
sugere que a glicoprotena produzida por umdeterminado alelo S, no estigma, determine
tambmasua formao no plenouna clula me desse plen. Quandoocorre a polinizao,
as duas molculas se combinampara formar dmeros.
Adotando essa hiptese e considerando que a reao de duas substncias especficas
semelhante s reaes do tipo antgeno e anticorpo comentada para os animais, vamos
utilizar uma analogia para facilitar o entendimento de incompatibilidade emplantas. Nessa
analogia, a glicoprotena presente no plenser considerada umantgeno e a glicoprotena
presente no estigmaser considerada umanticorpo. Esse critrio explicatodos os resultados
genticos obtidos a partir de cruzamentos envolvendo os dois sistemas de incompatibilidade.
Incompatibilidade Gametoftica
No sistema gametoftico, o fentipo do plen, para a reao de incompatibilidade
determinado pelo alelo S que ele possui. Na flor feminina, cada alelo S responsvel por
uma glicoprotena especfica, ocorrendo, portanto, uma interao allica do tipo
codominncia. Assim, no cruzamento ( ) S
1
S
2
x( ) S
1
S
3
produzido o resultado mostrado
na Figura 8.3.
Nesse cruzamento, o genitor masculino formou dois tipos de gros de plen, S
1
que
produziu o antgeno 1 e S
2
que produziu o antgeno 2. Na flor feminina, o gentipo S
1
S
3
condicionou a produo dos anticorpos anti 1 e anti 3. Como a reao especfica,
quando seencontramantgenos e anticorposde mesmo nmero, elesso bioquimicamente
afins e a causa do impedimento de crescimento do tubo polnico, ocorrendo, assim, o
aborto do plen. Portanto, no cruzamento considerado, ocorreu 50%de aborto de plen -
S
1
- e formaram os descendentes S
1
S
2
e S
2
S
3
.
No sistema gametoftico de incompatibilidade, ocorrer aborto do plen sempre
que houver alelos emcomumnos genitores masculinos e femininos. Quando os dois alelos
do gentipo de umgenitor so os mesmos do outro genitor, correspondendo, portanto, a
uma autofecundao, ou a umcruzamento onde os gentipos dos genitores so idnticos,
ocorrer 100% de aborto de plen e no formar nenhumdescendente. Por outro lado,
quando os gentipos dos genitores no possuemnenhumalelo emcomum, no ocorrer
aborto de plen e sero produzidos todos os descendentes esperados. Quando apenas
umalelo est emcomumnos dois genitores, como no exemplo apresentado, nunca ser
recuperado o gentipo materno entre os descendentes. Emfuno desse mecanismo de
incompatibilidade, nunca chegama ser formados gentipos homozigticos para os alelos S
emcondies naturais.
195
AlelismoMltiplo
Para melhor esclarecer sobre o efeito da autoincompatibilidade gametoftica considere
os cruzamentos apresentados na Tabela 8.3. Trs situaes podemocorrer: 1) quando os dois
alelos so idnticosnos dois genitores, nenhumdescendente produzido; 2) quando apenas um
dos alelos idntico nos dois genitores, so produzidos dois tipos de descendentes, cada um
comfrequncia de ; 3) quando todos os alelos so diferentes nos dois genitores, no ocorre
aborto de plene so produzidos quatro tipos de descendentes na proporo de .
FIGURA 8.3. Incompatibilidade gametoftica. Resultado do cruzamento ( ) S
1
S
2
x S
1
S
3
( ).
Observe que em razo de o alelo S
1
estar presente nos dois genitores, apenas o gro de plen
portador desse alelo abortado no estigma.
TABELA8.3. Resultados de cruzamentos entre plantas de fumo, que possuem incompatibilidade
gametoftica, portadoras de diferentes alelos da srie S.
Genitor Masculino Genitor
Feminino
S
1
S
2
S
2
S
3
S
3
S
4
- S
1
S
3
S
1
S
3
- S
2
S
3
S
2
S
3
- - S
1
S
4
S
1
S
2
- - S
2
S
4
S
1
S
2
- S
2
S
4
S
2
S
3
S
1
S
3
- S
3
S
4
196
O conhecimento desse fenmeno de grande importncia. Em vrias fruteiras da
famlia Roscea, por exemplo, muito comumocorreremcultivares incompatveis, havendo
a necessidade de plantar nos pomares cultivares compatveis para se conseguir a produo
de frutos. evidente que numa populao de plantas, quanto maior o nmero de alelos da
srie, menor a possibilidade de ocorrer cruzamentos incompatveis e tambmocorrer falha
na produode sementes. Pode-se demonstrar que a frequncia decruzamentos incompatveis
na populao funo da expresso 2/m, emque m o nmero de alelos da srie S.
Incompatibilidade Esporoftica
No sistema esporoftico, o fentipo do plen, para a reao de incompatibilidade,
determinado pelo gentipo da clula me do gro do plen, emvez de seu prprio alelo S.
Isso ocorre porque a produo do antgeno se d na clula me do gro de plen, para em
seguida terminar a meiose e formar os gros de plen, os quais j recebemo antgeno.
Como a clula me do gro de plen diplide, ocorre interao entre os alelos de
incompatibilidade, oque determina a produodo antgeno. Umainterao frequentemente
observada a dominncia completa e, nesse caso, forma-se apenas o antgeno em
decorrncia do alelo dominante, que passado a todos os gros de plen. Oanticorpo
formado no pistilo, de modo semelhante ao sistema gametoftico, coma diferena de que a
interao allica frequentemente observada tambma dominncia completa.
Considerando o cruzamento ( ) S
1
S
2
x ( ) S
1
S
3
e admitindo que o alelo S
1
seja o
dominante nos doisgenitores, tem-seo resultadoapresentado na Figura 8.4. Nessecruzamento,
o genitor masculino produziu dois tipos de gros de plen, S
1
e S
2
, e ambos receberamo
nico antgeno 1 formado pela clula me dos gros de plen, emrazo de ser o alelo S
1
dominante. Aflor feminina tambmformou umnico anticorpo anti 1, pela mesmarazo do
alelo S
1
ser dominante. Assim, todos os gros de plen eramportadores do antgeno 1,
que tinha afinidade como anticorpo anti 1, resultando em100%de aborto do plen e no
produzindo nenhumdescendente.
Apesar do sistema gametoftico ser o mais comum e conhecido h mais tempo, a
autoincompatibilidade esporoftica tambmocorre emmuitas espcies importantes, como,
por exemplo, nas brssicas: brcolis, repolho e couve flor. Para melhor entender esse
mecanismo, considere os cruzamentos apresentados na Tabela 8.4. Nesses cruzamentos, foi
considerado que o alelo de menor expoente dominante aos alelos de maior expoente em
todos os gentipos. Nos exemplos, ocorremcruzamentos com100%de aborto de plen e
nenhumdescendente, quando o alelo dominante comumnos dois genitores. Nos demais
cruzamentos so formados todos os descendentes esperados, na proporo de .
importante observar que entre os descendentes ocorremalguns homozigotos, ao contrrio
do que se observou para a autoincompatibilidade gametoftica.
197
AlelismoMltiplo
FIGURA 8.4. Incompatibilidade esporoftica. Resultado do cruzamento ( ) S
1
S
2
x S
1
S
3
( ).
Observe como h dominncia de S
1
em relao a S
3
, nenhum dos gros de plen consegue penetrar
no ovrio no havendo produo de sementes.
TABELA8.4. Resultados de cruzamentos de plantas de brcolis, que possuem incompatibilidade
esporoftica, portadoras de diferentes alelos S.
Genitor Masculino Genitor
Feminino
S
1
S
2
S
2
S
3
S
3
S
4
- S
1
S
3
S
1
S
3
S
1
S
2
- S
1
S
3
S
1
S
4
- S
2
S
2
S
2
S
3
- S
2
S
3
S
2
S
4
S
1
S
2
- S
2
S
3
S
2
S
3
S
1
S
3
- S
2
S
4
S
2
S
2
- S
3
S
3
S
2
S
3
- S
3
S
4
198
Os mecanismos de incompatibilidade favorecem os cruzamentos entre gentipos
diferentes, evitando, desse modo, a formao de homozigotos, que podemser prejudiciais
para a adaptao de uma espcie, quando unememumgentipo alelos deletrios ou letais.
Oconhecimento de incompatibilidade importante para o melhoramento gentico das
plantas que a possui, como as crucferas. Uma operao que se torna mais facilitada, graas
incompatibilidade, a produo de hbridos. Nesse caso, quando sedeseja produzir sementes
hbridas, a partir do cruzamento de duas linhagens, por exemplo S
1
S
1
e S
2
S
2
, basta plant-las
no campo, emfileiras alternadas, e todas as sementes produzidas sero hbridas.
Amultiplicao das linhagens homozigticas para produzir novos hbridos possvel
mediante a autofecundao artificial, na fase de boto floral, quando, provavelmente, ainda
no se formou o anticorpo no pistilo, que condiciona a incompatibilidade na
autofecundao natural. Atualmente, como desenvolvimento das tcnicas de cultura de
tecidos, o processo tornou-se mais fcil, pela possibilidade de multiplicar as linhagens
autoincompatveis por via assexuada.
Vale salientar tambmque emalgumas espcies do gnero Eucalyptus frequente a
ocorrncia de autoincompatibilidade. Em um povoamento da espcie Eucalyptus
leucoxylon, por exemplo, foi constatado que em 57% das plantas no ocorria
autofecundao (Ellis e Sedgley, 1993). Omecanismo envolvido foi atribudo, emparte,
ocorrncia de macho-esterilidade (Captulo 16), mas, principalmente, ao fenmeno de
autoincompatibilidade.
Aidentificao de plantas autoincompatveis emeucaliptos muito promissora, por
possibilitar a obteno de sementes hbridas, a baixo custo, pois no haver necessidade de
se proceder cruzamentos artificiais. Basta, para isso, colocar a planta autoincompatvel nos
campos de produo de sementes, emespaos regulares entre outras rvores que apresentem
boa combinao coma referida planta. Toda semente coletada na planta autoincompatvel
ser, evidentemente, hbrida, uma vezqueoplenoriundodasplantasvizinhas. Amanuteno
e ampliao da planta autoincompatvel efetuada por meio de propagao assexuada. A
empresaAracruz Celulose, no estado do Esprito Santo, encontrouuma planta provavelmente
autoincompatvel e a utiliza na produo de sementes hbridas utilizando procedimento
semelhante ao relatado.
Abase molecular da incompatibilidade amplamente estudada e mais complexa do
que colocado aqui. Obox8.1ilustraos modelos moleculares dossistemas de incompatibilidade
esporoftica e gametoftica.
199
AlelismoMltiplo
BOX 8.1 - BASE MOLECULAR DOS SISTEMAS DE AUTOINCOMPATIBILIDADE
EM PLANTAS
Embora tenha sido comentado no texto que a autoincompatibilidade decorrente
de umgene comvrios alelos, trabalhos mais recentes embiologia molecular apontam
que o sistema bem mais complexo. De fato, o loco S consiste de pelo menos duas
unidades intimamente ligadas, uma funcionando como responsvel pela expresso da
incompatibilidade no tecido feminino (determinante feminino) eoutra como determinante
masculino. Osistema de reconhecimento do plense d pela interao protena-protena
dos dois determinantes.
Fonte: Takayama, Isogai (2005).
Modelo molecular da autoincompatibilidade esporoftica emBrassicacea:
Nas brssicas ocorremde 30 a 50alelos de autoincompatibilidade e a rejeio do plen
se d pela falta de hidratao e a rpida paralisao do crescimento do tubo polnico na
superfcie do estigma. OlocoSconsiste de trs genesSLG, SRKe SP11. Os determinantes
femininos so o SLG(glicoprotina do loco S) e a receptor kinase do loco S (SRK) que
se localizamna membrana plasmtica das clulas da papila do estigma. Odeterminante
masculino a protena SP11, que se expressa predominantemente no tapete das anteras
e se acumula na superfcie do plendurante a sua maturao. Na polinizao, a SP11
penetra na parede celular da papila e se liga SRKde forma especfica. Essa ligao
induz a autofosforilao da SRKe desengatilha uma cascata de sinais que resulta na
200
rejeio do prprio plen. ASLGno essencial para o reconhecimento do plen, mas
aumenta a reao de autoincompatibilidade emalguns gentipos.
Modelo molecular da autoincompatibilidade gametoftica emSolanaceae,
Rosaceae e Scrophulariaceae.
Oloco S consiste de dois genes, S-RNase eSLF/SFB. Odeterminante feminino
a S-RNase, uma glicoprotena que secretada emgrandes quantidades na matriz extra
celular do estigma. Na polinizao, aS-RNase absorvida pelo tubo polnico e funciona
como uma citotoxina que degrada o RNAdo plen. Embora aS-RNase penetre no tubo
polnico, independentemente de seu gentipo, a degradao do RNAocorre somente
no prprio plen. ASLF/SFB o determinante masculino e membro de uma famlia de
protenas que, geralmente, funcionamcomo componentes deumcomplexo E3-ubiquitina
ligase que media a degradao de SRNases de diferentes gentipos, permitindo o
crescimento do tubo polnico.
Fonte: Takayama, Isogai (2005).
201
AlelismoMltiplo
FIGURA 8.5. Cor da pelagememcoelhos. A) Aguti ou Selvagem, em que o animal marromou
preto comuma faixa amarela na extremidade do plo; B) Chinchila, oanimal cinza-claro sema faixa
amarela; C) Himalaia, branco comas extremidades pretas; D) Albino, totalmente sempigmentao.
Observe na Tabela 8.5, que emtodos os casos na gerao F
2
foi obtida a segregao
tpica da ocorrncia de umnico gene, segregao de 3:1. Como est envolvido umnico
gene e ocorre interao allica de dominncia completa e se observammais de dois fentipos
porque esse gene deve possuir mais de dois alelos. Assim, se considerarmos o gene C,
teremos os seguintes alelos C- selvagem, c
ch
chinchila, c
h
himalaia, c albino. Veja que o alelo
8.4. TESTEDEALELISMO
Esse teste comumente usado para determinar se diversos fentipos de umdado
carter, observados numa populao de indivduos, resulta da participao de uma srie
de alelos ou da interao gnica. Oteste consiste emcruzar indivduos puros portadores
dos vrios fentipos, dois a dois, em todas as combinaes possveis. So obtidas as
geraes F
1
e F
2
e estudadas as segregaes fenotpicas nas descendncias. Se, em100%
dos cruzamentos o resultado for explicado pela herana monognica, os vrios fentipos
da populao so decorrentes do alelismo mltiplo. Porm, se em pelo menos um
cruzamento, for constatada uma herana diferente da monognica, tem-se umcaso de
interao gnica.
Para exemplificar, vamos considerar o carter cor da pelagemdos coelhos. Na natureza,
ocorremquatro tipos de coelho (Figura 8.5): o selvagemouaguti, emque o animal tempelo
preto ou marrom-escuro e apresenta uma faixa amarela prxima extremidade do pelo; o
chinchila, que cinza-claro e falta a faixa amarela na extremidade do pelo; o himalaia, que
possui pelos marrons ou pretos apenas nas orelhas, cauda, focinho e patas, sendo as demais
regies do corpo de pelagem branca, e os olhos cor-de-rosa; o albino, em que o pelo
inteiramente branco e os olhos cor-de-rosa. Para verificar se esses quatro fentipos so
decorrentes de umnico gene comvrios alelos ou a mais de umgene que se interagem,
devemos realizar o teste de alelismo. Para isso, os coelhos portadores dos vrios fentipos
sero cruzados dois a dois, emtodas as combinaes possveis (Tabela 8.5) e estudadas as
segregaes fenotpicas nas descendncias.
202
TABELA 8.5. Teste de alelismo para o carter cor da pelagem dos coelhos.
Fentipo feminino Fentipo
Masculino
Geraes
Chinchila Himalaia Albina
F
1
Selvagem Selvagem Selvagem
Selvagem
F
2
3 Selvagem:
1 Chinchila
3 Selvagem:
1 Himalaia
3 Selvagem:
1 Albino
F
1
- Chinchila Chinchila
Chinchila
F
2
-
3 Chinchila:
1 Himalaia
3 Chinchila:
1 Albino
F
1
- - Himalaia
Himalaia
F
2
-
-
-
-
3 Himalaia:
1 Albino
Vejamos, agora, umoutro exemplo de cor de pelagem, pormemsunos. Na raa
Duroc-Jersey, os animais podem ter cor vermelha, areia ou albina. Para verificar como
ocorre o controle gentico, foi efetuado umteste de alelismo (Tabela 8.6). Veja que nesse
caso, na gerao F
2
, a segregao nem sempre foi monognica - soma das propores
fenotpicas igual a 4. Emalguns casos, foi constatada a segregao dignica - soma das
propores fenotpicas de 16. Asegregao de 9 vermelho : 6 areia : 1 albino indica a
ocorrncia de dois genes que se interageme, portanto, no umcaso de alelismo mltiplo.
Do que foi exposto no Captulo 6, pode-se inferir que esto envolvidos dois genes, no caso
denominados de Re S, que atuamdo seguinte modo:
C, se expressa na gerao F
1
empresena de c
ch
, c
h
e c, o c
h
manifesta na F
1
o seu fentipo
apenas em presena do albino (c), e o alelo c
ch
se expressa em F
1
, na presena de c
h
e c.
Depreende-se ento que o carter controlado por umgene, com4 alelos e coma seguinte
ordemde dominncia C> c
ch
> c
h
> c. Nesse caso, comm= 4, so possveis 10 gentipos
que expressamquatro fentipos, ou seja:
Gentipos Fentipos
CC, Cc
ch
, Cc
h
, Cc Selvagem
c
ch
c
ch
, c
ch
c
h
, c
ch
c Chinchila
c
h
c
h
, c
h
c Himalaia
cc Albino
203
AlelismoMltiplo
TABELA8.6. Teste de alelismo para o carter cor da pelagem de sunos.
Fentipos e Gentipos ( )
Gentipo e
Fentipo ( )
Geraes
Areia (RR ss) Albino (rr ss)
F
1
RRSs Vermelho RrSs Vermelho
Vermelho
(RRSS)
F
2
3 RRS_ Vermelho
1 RRss Areia
9 R_S_ Vermelho
3 R_ss Areia
3 rrS_ Areia
1 rrss Albino
F
1
RrSs Vermelho rrSs Areia
Areia
(rrSS)
F
2
9 R_S_ Vermelho
3 R_ss Areia
3 rrS_ Areia
1 rrss Albino
3 rrS_ Areia
1 rrss Albino
Na Tabela 8.6, so mostrados os gentipose fentipos genitores edos descendentes da
gerao F
1
, que explicamas segregaes mencionadas emF
2
. Chama a ateno o resultado
do cruzamento entre os dois animais de cor areia, que produziu uma gerao F
1
vermelha,
indicando queos dois animais, apesar de apresentaremo mesmofentipo, possuemgentipos
diferentes.
Gentipos Fentipos
R_S_ Vermelho
R_ss ou rrS_ Areia
rrss Albino
204
PROBLEMASPROPOSTOS
1. Suponha que umcarter, emuma dada espcie vegetal diplide, seja controlado por
umgene comdois alelos.
a) Quantos gentipos so possveis na populao?
b) Quantos fentipos so possveis, considerando a interaode dominncia completa?
c) Quantos fentipos so possveis, considerando a dominncia incompleta?
d) Se o referido gene tivesse 10 alelos, qual seria sua resposta para os itens a, b e c?
e) Quantos gentipos homozigticos seriamencontrados na populao?
2. Por queoalelismo mltiplo no temimportncia paraumnico indivduode umaespcie
diplide?
3. Numa espcie vegetal diplide, o gene para as tonalidades de cor da flor possui 12
alelos.
a) Qual o nmero mnimo de indivduos necessrio para conter todos os alelos?
b) Qual o nmero de gentipos diferentes esperado na populao?
4. No caupi (Vigna unguiculata), a cor da vagemimatura controlada por umgene com
5 alelos, coma seguinte ordemde dominncia: p
g
- vagemprpura comsuturas verdes
> p
s
- vagem verde com suturas prpuras > p
o
- vagem verde com sutura ventral
prpura > p
t
- vagemcomextremidade prpura > p - vagemverde.
a) Numa populao contendo todos os alelos, quantos gentipos homozigticos e
heterozigticos so esperados?
b) Quantos fentipos so esperados e quais as constituies genotpicas possveis dos
indivduos para cada fentipo?
5. UmdeterminadogeneApossuitrs alelos(A
1
, A
2
, A
3
) eaordemdedominncia: A
1
=
A
2
> A
3.
a) Qual o nmero possvel de gentipos heterozigticos e homozigticos na
descendncia?
b) Qual o nmero esperado de fentipos?
205
AlelismoMltiplo
c) Se for includa mais a seguinte srie allica A
4
> A
5
= A
6
, sendo que todos estes
dominamos alelos de menor expoente, quais as novas respostas para as perguntas
formuladas anteriormente?
6. Na alface, a presena de antocianina na folha condicionada por umgene comtrs
alelos. Oalelo R responsvel pela cor vermelha, r por manchas avermelhadas e r
por vermelho-claro. Aordem de dominncia R > r > r. Em um campo, foram
semeadas trs cultivares homozigticas, sendo 35% vermelhas, 20% commanchas
avermelhadas e 45%vermelho-claras, as quais cruzaram-se livremente. Se o agricultor
plantar umaamostra das sementes colhidas no campo, qual ser a proporo genotpica
e fenotpica nesse novo plantio?
7. Na ameixa, ocorreincompatibilidade gametoftica. Dois agricultores resolveramformar
umpomar de ameixeiras. Oprimeiro, desejando uniformidade, plantou apenas uma
cultivar no seu pomar. J, o outro utilizou cinco cultivares para formar o seu pomar.
Considerando que as condies ambientais sejamas mesmas, qual dos dois agricultores
ter mais sucesso? Justifique sua resposta.
8. Emfumo, ocorre incompatibilidade gametoftica. Foi obtido uma nova cultivar com6
alelos - S
1
, S
2
, S
3
, S
4
, S
5
, S
6
- que controlama incompatibilidade.
a) Quantos gentipos para essa srie allica so esperados nessa cultivar?
b) Se emumcampo ocorreremtodos esses gentipos coma mesma frequncia, qual
ser a proporo de gametas abortados, considerando que os cruzamentos ocorram
inteiramente ao acaso?
9. Mostre que emuma espcie que possui incompatibilidade gametoftica a proporo de
gametas abortados fornecida por 2/m, em que m o nmero de alelos de
incompatibilidade existente na espcie.
10. No repolho, ocorre incompatibilidade esporoftica. Emuma populao que est sendo
melhorada ocorremos gentipos S
1
S
2
, S
2
S
3
, S
3
S
4
emigual frequncia.
a) Admitindo-se que a ordemde dominncia seja S
1
> S
2
> S
3
> S
4
, qual a proporo
de acasalamentos incompatveis?
b) Comoproceder, utilizando esse fenmeno, para obter uma cultivar hbrida de repolho,
a partir de duas linhagens provenientes dessa populao?
206
11. Supondo que na espcie de Eucalyptus que voc ir trabalhar ocorra auto-
incompatibilidade, pergunta-se:
a) Como proceder para identificar as plantas autoincompatveis nas plantaes?
b) Como manter essas plantas?
c) Qual o procedimento para se produzir sementes hbridas de eucaliptos utilizando
essas plantas?
12. Suponha que voc identifique umnovo sistema de grupos sanguneos emcoelhos.
Como voc procederia para verificar se o controle gentico decorrente de uma srie
de alelos mltiplos?
207
Ligao, Permuta Gentica e Pleiotropia
9 LIGAO, PERMUTA
GENTICAEPLEIOTROPIA
9.1INTRODUO
Logo aps a redescoberta das leis mendelianas, foramrealizados inmeros trabalhos
visando a explicar a herana de vrios caracteres nas mais diversas espcies de plantas e
animais. No estudo da herana da forma do fruto e do tipo de inflorescncia emtomateiro,
foramobtidos os resultados apresentados na Tabela 9.1.
TABELA 9.1. Segregaes obtidas no estudo da herana da forma do fruto e no tipo de
inflorescncia do tomateiro.
Geraes
Fentipos P
1
(Yellow Pear)
P
2
(Grape Cluster)
F
1
F
2
Cruzamento
teste
Redondo, simples 15 126 23
Redondo, composta 25 63 85
Alongado, simples 23 66 83
Alongado, composta 4 19
Total 23 25 15 259 210
Considerando cada carter isoladamente, podemos notar que a herana monognica,
comdominncia completa do aleloque confere fruto redondo (O) emrelao afruto alongado
(o) de modo que na gerao F
1
todas as plantas apresentaramfrutos redondos e, na gerao
F
2
, observaram-se 189 plantas com frutos redondos e 70 com frutos alongados, uma
proporo prxima de 3:1 ( 5
3
= 0,57). De modo semelhante, para o tipo de inflorescncia,
todas as plantas F
1
apresentaraminflorescncia simples e na F
2
ocorreram192 plantas com
inflorescncia simples (S) e 67 com inflorescncia composta (s), tambmprxima a 3:1
( 5
3
= 0,10). Porm, quando se analisamos dois caracteres simultaneamente, nota-se que a
proporo fenotpica observada na F
2
no explicada pela lei da distribuio independente,
a qual corresponde lei do produto de probabilidades, como visto no Captulo 5, ou seja,
(3:1)(3:1) =9:3:3:1. Outro resultado observado, que tambmno explicado por essa lei,
208
o do cruzamento teste, cuja proporo fenotpica observada nitidamente diferente da
proporo esperada combase na distribuio independente, que corresponde a 1:1:1:1. As
comparaes destas frequncias observadas (FO) e esperadas (FE) foramfeitas pelo teste5
3
,
como apresentado na Tabela 9.2.
Como visto no Captulo 5, a distribuio independente ocorre quando os genes
considerados esto emcromossomos diferentes. Uma vez que os resultados da Tabela 9.2
excluema ocorrncia de distribuio independente, pode-se deduzir que os genes emapreo
esto no mesmo cromossomo, isto , ligados.
Aocorrncia de dois ou mais genes emum mesmo cromossomo j era uma teoria
altamente previsvel, pois, como se sabe, cada espcie possui milhares de genes que devem
estar distribudos emalguns poucos cromossomos. No tomateiro -Lycopersicumesculentum
-, por exemplo, ocorremsomente 12 pares de cromossomos e j foramdescritos maisde mil
genes. Todos os genes situados emumdado cromossomo constituemumgrupode ligao.
Portanto, o tomateiro, com12 pares de cromossomos, possui 12 grupos de ligao e cada
grupo possui em mdia cem genes, considerando apenas aqueles j identificados. Se
considerarmos que as estimativas do nmero de genes emorganismos eucariontes variamde
30 mil a 40 mil, conclui-se que o nmero de genes emcada cromossomo da ordem de
milhares.
TABELA 9.2. Teste
5
3
dos resultados observados na F
2
e no cruzamento teste, admitindo a
ocorrncia de distribuio independente.
Como se sabe, durante a meiose os cromossomos so puxados para os polos das
clulas e todos os genes que se localizamemummesmo cromossomo deveriamsegregar
juntos. No entanto, se isso tivesse sido observado para as caractersticas consideradas, no
cruzamento teste seriam observados apenas os fentipos paternais. Contudo, surgiram
descendentes portadoresde fentipos dos doisgenitores simultaneamente e queso chamados
de fentipos recombinantes. Esses recombinantes somente foramformados porque, durante
o processo de formao dos gametas, ocorreu a permuta gentica (Figura 9.1), isto , um
Gerao F
2
Cruzamento teste
Fentipos
FO FE desvio FO FE desvio
Redondo, simples 126 145,7 - 19,7 23 52,5 - 29,5
Redondo, composta 63 48,6 14,4 85 52,5 32,5
Alongado, simples 66 48,6 17,4 83 52,5 30,5
Alongado, composta 4 16,1 - 12,1 19 52,5 - 33,5
Total
259 259,0
5
3
= 22,25**
210 210,0
5
3
= 75,79**
209
fenmeno que permite a troca de segmentos homlogos de cromtides no irms. Quando
os genes esto muito prximos no cromossomo, a separao deles no se realiza e, nesse
caso, dizemos que ocorre ligao completa; quando h permuta gentica, dizemos que a
ligao parcial.
FIGURA 9.1. Representao da permuta gentica, mostrando os produtos meiticos parentais
e recombinantes.
Quando temos genes ligados como nesses genitores, ou seja, umalelo dominante e um
recessivo em cada cromossomo, denominamos a ligao de fase de repulso ou
configurao trans. Por outro lado, quando emumcromossomo esto ligados os alelos
dominantes dos dois genes ou os dois recessivos, denominamos a ligao defase de atrao
ou configurao cis. No exemplo da Tabela 9.1, essa ltima fase de ligao encontrada
nos indivduos recombinantes da F
2
e do cruzamento teste.
Quando lidamos comgenes ligados, a representao dos gentipos feita de forma
fracionria, que consiste em colocar no numerador os alelos que esto situados num
cromossomo e no denominador os que esto no seu homlogo. Assim, a representao do
gentipo do genitor YellowPear oS/oS, do Grape Cluster Os/Os e das plantas F
1
Os/
oS. Anecessidade de se utilizar essa notao para genes ligados poder representar no
gentipo a fase de ligao dos genes, o que permite identificar os gametas paternais e
recombinantes, alm de distinguir os casos em que os genes apresentam distribuio
independente.
210
9.2 ESTIMATIVADAFREQUNCIADERECOMBINAO(FR)
Quando no h permuta gentica, somente so formados gametas paternais, enquanto
que, quando h permuta, so formados gametas paternais e recombinantes em propores
iguais (Figura 9.1).
Geralmente, no ocorre permuta gentica entre dois genes em todos os meicitos, de
modo que a frequncia de gametas recombinantes sempre menor que 50 por cento.
A estimativa da frequncia de permuta pode ser obtida a partir da descendncia de um
cruzamento teste ou da gerao F
2
. No cruzamento teste, o testador possui apenas alelos
recessivos, de modo que, o fentipo do descendente ser estabelecido emfuno da constituio
gentica do gameta oriundo do indivduo F
1
. Portanto, o emprego dos resultados do cruzamento
teste possibilita a estimativa mais fcil da frequncia de recombinao (FR), que dada pela
expresso:
Comoexemplo, vamos utilizar o resultadodo cruzamentotesteapresentadonaTabela9.1.
Como vimos, os recombinantes so as 23 plantas comfrutos redondos e inflorescncia
simples e19plantascomfrutosalongados e inflorescncia composta, totalizando 42indivduos.
O total de descendentes obtidos no cruzamento teste 210; ento, a frequncia de
recombinaoentreoslocosOeS(42/210)100 = 20%.
Adescendncia do cruzamento teste apresentada na Tabela 9.1 proveniente do
cruzamento de uma planta F
1
- Os/oS- comoutra de fruto alongadoe inflorescncia composta
- os/os. J foi enfatizado que a proporo fenotpica desses descendentes equivale
proporo de gametas da F
1
; assim, a frequncia de permuta estimada de 20%corresponde
aos gametas recombinantes, sendo 10%OSe 10%os, e os gametas paternais correspondem
aos 80% restantes, ou seja, 40%Os e 40% oS.
Vejamos como proceder para se fazer predies para a gerao F
2
, quando se conhece
a frequncia de recombinao. Tomemos como exemplo o mesmo cruzamento apresentado
na Tabela 9.1. Agerao F
2
obtida a partir da autofecundao das plantas F
1
- Os/oS- ou
do intercruzamento dessas plantas. Para isso, devemos proceder unio, ao acaso, dos
gametas masculinos e femininosproduzidos pela planta F
1
, osquais, comoforamdeterminados
anteriormente, correspondem aos 80% paternais - 40% Os e 40% oS - e aos 20%
recombinantes - 10%OSe 10%os. Para facilitar essa operao, vamos utilizar o quadro de
Punnett e, para simplificar os clculos, vamos dividir a frequncia de cada gameta por dez
para obter-se a frequncia de cada descendente, j emporcentagem), o que fornecea seguinte
proporo fenotpica esperada (Tabela 9.3):
Frequncia de recombinao(FR) = x100
teste cruzamento do es descendent de Total
tes recombinan de N
E
211
TABELA 9.3. Estimativa da proporo genotpica da F
2
, proveniente do cruzamento das
cultivares de tomate YellowPear, oS/oS, e Grape Cluster, Os/Os, considerando-se a freq!ncia
de permuta de 20% entre os genes responsveis pelos caracteres da forma do fruto e do tipo
de inflorescncia.
Comparemos agora nossa previso comos resultados observados dos indivduos da
gerao F
2
(Tabela 9.1). Na gerao F
2
, ocorreram259 indivduos. Segundo nossa previso,
esperaramos 51% de 259 plantas comfrutos redondos e inflorescncia simples, 24% de
259 comfrutos alongados e inflorescncia simples, etc. Na Tabela 9.4, esto apresentados
os resultados observados e os esperados do cruzamento anteriormente especificado,
mostrando que houve umajustamento quase perfeito 5
c
2
=1,30 NS. Portanto, emcasos
como esses, o conhecimento da frequncia de recombinao permite fazer previses de
descendncia.
Gametas
femininos
Gametas masculinos
1 OS 4 Os 4 oS 1 os
1 OS 1 OS/OS 4 OS/Os 4 OS/oS 1 OS/os
4 Os 4 Os/OS 16 Os/Os 16 Os/oS 4 Os/os
4 oS 4 oS/OS 16 oS/Os 16 oS/oS 4 oS/os
1 os 1 os/OS 4 os/Os 4 os/oS 1 os/os
Fentipos Classe genotpica Frequncia
redondo, simples OS/_ _ 51%
alongado, simples oS/o _ 24%
redondo, composta Os/_ s 24%
alongado, composta os/os 1%
Total 100%
TABELA 9.4. Comparao das segregaes fenotpicas observadas e esperadas da gerao
F
2
, assumindo frequncia de permuta de 20% relativa forma do fruto e tipo de inflorescncia.
Fentipos
Frequncias
Observadas Esperadas
Redondo, simples 126 132,09
Alongado, simples 66 62,16
Redondo, composta 63 62,16
Alongado, composta 4 2,59
Essa metodologia para estimar a FR criticada pelo fato de considerar apenas uma
das quatro classes fenotpicas de F
2
. Por isso, temsido preferido o uso do mtodo chamado
razo de produtos e que consiste em se estimar um valor z a partir de todas as quatro
212
Entrando comesse valor na tabela de z (Tabela 9.5), encontramos que o valor mais
prximo 0,1211, que corresponde a uma frequncia de recombinao de 0,230 ou 23,0%.
Como pode ser observado, as trs metodologias fornecemresultados muito prximos
(20,0%, 24,86%e 23,0%), demonstrando que todas elas podemser empregadas para estimar
a frequncia de recombinao.
Novamente empregando-se os dados da Tabela 9.2 tem-se:
0,1212
66 x 63
4 x 126
z ? ?
o o
o o
n recomb. 1 x n recomb. 2
z=
n parentais 1 x n parentais 2
classes fenotpicas. Com esse valor entra-se em uma tabela de valores z e estima-se a
frequncia de recombinao. Ovalor z calculado pela expresso:
213
TABELA9.5. Frequncias de recombinao (FR) em funo da razo de produtos (valores z)
para genes ligados em repulso ou atrao.
FR
Valores de z
FR
Valores de z
Repulso Atrao Repulso Atrao
.005 .000050000 .00003361 .305 .2367 .2228
.010 .00020005 .0001356 .310 .2465 .2328
.015 .0004503 .0003076 .315 .2567 .2432
.020 .0008008 .0005516 .320 .2672 .2538
.025 .001252 .0008692 .325 .2780 .2649
.030 .001804 .001262 .330 .2892 .2763
.035 .002458 .001733 .335 .3008 .2881
.040 .003213 .002283 .340 .3127 .3003
.045 .004070 .002914 .345 .3250 .3128
.050 .005031 .003629 .350 .3377 .3259
.055 .006096 .004429 .355 .3508 .3393
.060 .007265 .005318 .360 .3643 .3532
.065 .008540 .006296 .365 .3783 .3675
.070 .009921 .007366 .370 .3927 .3823
.075 .01141 .008531 .375 .4076 .3977
.080 .01301 .009793 .380 .4230 .4135
.085 .01471 .01116 .385 .4389 .4298
.090 .01653 .01262 .390 .4553 .4467
.095 .01846 .01419 .395 .4723 .4641
.100 .02051 .01586 .400 .4898 .4821
.105 .02267 .01765 .405 .5079 .5007
.110 .02495 .01954 .410 .5266 .5199
.115 .02734 .02156 .415 .5460 .5398
.120 .02986 .02369 .420 .5660 .5603
.125 .03250 .02594 .425 .5867 5815
.130 .03527 .02832 .430 .6081 .6034
.135 .03816 .03083 .435 .6302 .6260
.140 .04118 .03347 .440 .6531 .6494
.145 .04434 .03624 .445 .6768 .6735
.150 .04763 .03915 .450 .7013 .6985
.155 .05105 .04220 .455 .7266 .7243
.160 .05462 .04540 .460 .7529 .7510
.165 .05832 .04875 .465 .7801 .7786
.170 .06218 .05225 .470 .8082 .8071
.175 .06618 .05591 .475 .8374 .8366
.180 .07033 .05973 .480 .8676 .8671
.185 .07464 .06371 .485 .8990 .8986
.190 .07911 .06787 .490 .9314 .9313
.195 .08374 .07220 .495 .9651 .9651
.200 .08854 .07671 .500 1.0000 1.0000
.205 .09351 .08140 .505 1.0362 1.0362
.210 .09865 .08628 .510 1.0738 1.0736
.215 .1040 .09136 .515 1.1128 1.1124
.220 .1095 .09663 .520 1.1533 1.1526
.225 .1152 .1021 .525 1.1953 1.1942
.230 .1211 .1078 .530 1.2390 1.2373
.235 .1272 .1137 .535 1.2844 1.2819
.240 .1334 .1198 .540 1.3316 1.3282
.245 .1400 .1262 .545 1.3806 1.3762
.250 .1467 .1328 .550 1.4317 1.4260
.255 .1536 .1396 .555 1.4847 1.4776
.260 .1608 .1467 .560 1.5400 1.5312
.265 .1682 .1540 .565 1.5975 1.5868
.270 .1758 .1616 .570 1.6574 1.6446
.275 .1837 .1695 .575 1.7198 1.7045
.280 .1919 .1777 .580 1.7848 1.7668
.285 .2003 .1861 .585 1.8526 1.8316
.290 .2089 .1948 .590 1.9234 1.8989
.295 .2179 .2038 .595 1.9972 1.9689
.300 .2271 .2132 .600 2.0742 2.0417
214
9.3 BASESCROMOSSMICASDAPERMUTA
A permuta gentica resulta da troca de partes entre cromtides no irms e,
portanto, ela deve ocorrer quando os cromossomos homlogos esto pareados. Isso
se d, como sabemos, durante a prfase I da meiose, quando eles se associam de tal
maneira que no paquteno o pareamento ocorre ao longo de todo o seu comprimento.
No diplteno, os centrmeros homlogos comeama se separar uns dos outros, estando
os bivalentes unidos s nos pontos em que ocorreram as permutaes genticas,
denominadas quiasmas .
Os cromossomosno diplteno so constitudosde duas cromtides (Captulo4). Pode-
se demonstrar experimentalmente que os quiasmas representampermutaes ocorridas entre
cromtides no irms (Figura 9.1). conveniente lembrar que, se ocorresse permuta entre
cromtides irms, elas no poderiamser geneticamente identificadas. Umnico quiasma
numbivalente resulta na formao de duas cromtides no permutadas e de duas cromtides
permutadas, isto , a frequncia de recombinao a metade da frequncia de quiasma
(Figura 9.1). Assim, se todas as clulas que sofrem meiose apresentaremessa permuta,
teramos umasituao equivalente distribuioindependente dos dois genes, pois o indivduo
duplo heterozigtico, representado nessa figura, produz os quatro tipos de gametas coma
mesma frequncia, ou seja, 50%paternais: 25%oSe 25%Os - e 50%recombinantes: 25%
OS e 25% os.
No entanto, so comuns as situaes emque no se observa quiasma entre dois
genes emtodas as clulas que sofremmeiose. No exemplo apresentado na Tabela 9.1,
vimos que a frequncia de recombinao 20% entre os locos Oe S. Como a frequncia
de quiasma ou de clulas que sofrempermuta o dobro da frequncia de recombinao,
podemos dizer que entre 100 clulas F
1
, oS/Os, apenas em40 se observam quiasmas
entre esses genes, produzindo os quatro tipos de gametas empropores iguais; isto ,
espera-se que sejam produzidos 160 gametas, sendo 80 paternais - 40 oS e 40 Os - e
80 recombinantes - 40 OS e 40 os. Nas 60 clulas F
1
restantes, no se observam
quiasmas entre esses genes e, portanto, espera-se que sejam produzidos 240 gametas
todos paternais, sendo 120 oS e 120 Os. Vemos assimque, de umtotal de 400 gametas,
apenas 80 so recombinantes, o que corresponde a uma frequncia de recombinao de
20%.
Quando ocorre mais de um quiasma entre dois cromossomos homlogos, as
oportunidades para rearranjo dentro dos grupos de ligao aumentam, mas bvio que deve
ocorrer umnmero mpar de quiasmas entre os dois genes para que seja detectada a permuta.
Deve ser salientadoque o nmero dequiasmas por cromossomo dependede seucomprimento,
variando geralmente de 1 a 10.
215
9.4 PROVACITOGENTICADAOCORRNCIADAPERMUTA
Demonstrar praticamente a ocorrncia da permuta gentica no to fcil como
poderamos imaginar. Adificuldade ocorre porque, emcondies normais, os cromossomos
de umpar de homlogos no sedistinguemvisivelmente, nemsequer mediante umminucioso
exame microscpico. S emcondies excepcionais, quando os cromossomos homlogos
esto marcados de algummodo, que poderemos observar citologicamente a ocorrncia da
permuta. Essa demonstrao foi conseguida por meio de experimentos brilhantemente
conduzidos por H.B. Creighton e B. McClintock, trabalhando com milho e C. Stern,
trabalhando commosca das frutas. Ser discutido aqui o trabalho realizado como milho.
No milho, o cromossomo 9 - o segundo mais curto no complemento de 10 pares -
normalmente no possui uma pequena protuberncia denominada knob. Uma das linhagens
utilizadas possua umdos cromossomos 9 diferente, comumknobno final do brao curto e
tambmcomumsegmento adicional translocado docromossomo 8. Ooutro cromossomo do
par eranormal, no possuindo nemo knob, nemo segmento translocado. Almdisso, sabia-se
quenocromossomo9ocorriam, entreoutros, osseguintes genes: Caleuronacolorida; caleurona
incolor; Wx endosperma amilceo; wx endosperma ceroso. Ambas as caractersticas se
manifestamlogo aps a fertilizao e, portanto, apresentamxnia. Aplanta portadora desse
cromossomo 9diferenteera tambmheterozigtica tantopara o gene da aleurona quanto para
o gene do endosperma e, a partir de trabalhos anteriores, Creightone McClintock sabiamem
quecromossomodopar estavaumdeterminadoalelodecadagene. Assim, osdoiscromossomos
9dessaplanta, a qual foi usadacomo genitor femininonos cruzamentos, podemser identificados
citolgica e geneticamente e ser esquematizados do seguinte modo:
Oindivduopossuindo tais cromossomos 9desiguais foramcruzados comumindivduo
do gentipo cWx/cwx, almdisso, possuindo dois cromossomos 9 semo knob e sem o
segmento adicional do cromossomo 8 - cromossomos 9 normais -, isto , coma seguinte
constituio:
216
Adescendncia do cruzamento realizado est esquematizada naTabela 9.6, mostrando
os diversos fentipos obtidos bemcomo a configurao dos cromossomos emcada classe.
Nota-se entre os descendentes, que a semente comaleurona incolor e endosperma ceroso
umrecombinante fenotpico e sua presena s pode ser explicada por meio da permuta entre
os alelos c e wx. Citologicamente, essa permuta foi confirmada porqueo descendente incolor
ceroso exibiu umdos cromossomos 9 comapenas uma marca numa extremidade - segmento
translocado do cromossomo 8 -, indicando que o knob da outra extremidade foi separado
juntamente comoaleloCpelapermutagentica. Osdemaisrecombinantes citolgicos tambm
mostraram-se resultantes da permuta, por apresentaremuma nica marca emumde seus
cromossomos, embora no sejamrecombinantes fenotpicos. Portanto, esses resultados
comprovamque a permuta envolve a troca de segmentos cromossmicos e tambmque os
genes esto situados nos cromossomos.
TABELA 9.6. Descendncia do cruzamento de duas plantas de milho, mostrando os
recombinantes fenotpicos e citolgicos, relativos cor de aleurona e presena de amido ou
cera no endosperma.
9.5 MAPAGENTICO
Afrequncia de permuta influenciada pela distncia entre os genes. Isto , existe
correlao positiva entre a distncia de dois genes e a frequncia de recombinao entre eles.
J que no se pode medir a distncia entre os genes utilizando as unidades de distncia
normalmente empregadas emmicroscopia e, emrazo do relacionamento geral entre frequncia
de permuta e distncia entre os genes, os geneticistas usamuma unidade arbitrria, chamada
centimorgan- cM-, para descrever a distncia entre genes ligados. Umcentimorgan igual
a umporcento de recombinao, isto , representa a distncia linear para a qual umporcento
217
abc
abc
x
abc
ABC
Nesse cruzamento, foramconsiderados trs caracteres no milho, sendo os seguintes
os alelos recessivos e seus fentipos: a. plntulas virescentes; b. plntulas brilhantes; c. planta
macho-estril - caracterizada por uma distribuio irregular dos cromossomos na meiose.
Os gentipos dos descendentes esto representados pelos gentipos dos gametas do genitor
ABC/abc, que so os nicos responsveis pelos fentipos dos descendentes, emrazo da
interao allica, nos trs locos, ser dominncia completa. Porm, subentende-se que cada
descendente possua tambma combinao abc proveniente do gameta do genitor abc/abc.
Observando a Tabela 9.7, as seguintes concluses podemser tiradas:
a) As combinaes paternas - ABC e abc - foram as que apresentaram maior
frequncia;
b) A descendncia com a permuta dupla - duplos recombinantes - representa o
produto de duas probabilidades, isto , a probabilidade de permuta entre A e B e a
probabilidade de permuta entre Be C. Como se observa, os tipos compermuta dupla foram
os menos frequentes. Desse modo, podemos verificar qual gene est situado na posio
central (Figura 9.2). No nosso exemplo, os tipos compermuta dupla so plantas estreis e
de recombinantes observada. Assim, para o exemplo anterior, a distncia entre os genesO
e S de 20 cM. Utilizando esse critrio, os geneticistas podemestabelecer a distncia entre
os genes e assimconstruir ummapa gentico, isto, umdiagrama no qual so representados
os genes comsuas respectivas posies no cromossomo.
9.5.1 Teste de Trs Pontos
Na elaborao dos mapas genticos, utiliza-se o processo denominado teste de trs
pontos, que corresponde ao cruzamento teste envolvendo trs genes ligados. Anecessidade
de se considerar trs genes ligados (Figura 9.2) porque dependendo da distncia entre dois
genes - Ae C- pode ocorrer mais de uma permuta e se elas forememnmero par no so
produzidos recombinantes, por exemplo, Ac e aC. Portanto, a permuta dupla s pode ser
detectada quando esto envolvidos trs genes. Nesse caso, podemos observar, na Figura
9.2, que a permuta dupla produz dois gametas paternais e dois duplos recombinantes. Esses
duplos recombinantes diferemdos paternais apenas no gene central - gene B- e permitem
identificar a ocorrncia da dupla permuta. Almdo mais, quando se usamapenas dois genes,
a distncia entre eles poderia ficar subestimada, j que ocorrendo as duplas permutaes
elas no seriamdetectadas.
Vejamosagoracomoessetestepodeser utilizadonaconstruodeummapagentico. Para
issoseroutilizadososresultadosapresentadosnaTabela9.7, provenientesdocruzamentoteste:
218
virescentes, de gentipo aBc, e planta brilhante AbC, pelo fato j apontado de seremmenos
frequentes.
FIGURA 9.2. Representao esquemtica de uma permuta dupla e de seus produtos que so
duas cromtides no permutadas e duas recombinantes para o gene situado no meio (gene B).
Fentipo da descendncia Gentipo Frequncia observada
Normal ABC 235
Brilhante, estril Abc 62
Estril ABc 40
Estril, virescente aBc 4
Brilhante, estril, virescente abc 270
Brilhante AbC 7
Brilhante, virescente abC 48
Virescente aBC 60
Total 726
TABELA9.7. Resultado do cruzamento teste, envolvendo trs caracteres monognicos do milho.
Comparando-se os duplos recombinantes comos paternais, pode-se verificar que a
ordemdos genesno cromossomo ABC, pois a permuta dupla s alterou o geneB, devendo
este estar situado na posio intermediria. Os demais resultados da Tabela 9.7 s podero
ser explicados considerando o gene Bna posio intermediria, isto , com os trs genes
b) A descendncia com a permuta dupla
a) As combinaes paternas
219
na ordemcorreta. importante frisar que na anlise de qualquer resultado, se os gentipos
dos descendentes foremapresentados como genes na ordemerrada, necessrio reescrev-
los na ordem certa, para prosseguir na interpretao dos resultados de um teste de trs
pontos.
Assim, denominando de regio I a situada entre Ae Be de regio II a situada entre B
e C, podemos verificar os recombinantes provenientes de uma nica permuta emuma regio
ououtra.
Os gentipos recombinantes da regio I, por exemplo, podem ser identificados,
comparando-os comos gentipos paternais mais semelhantes, porque eles se originaramde
permuta nessa regio. Assim, identifica-se o recombinante da regio I, Abc, pois, ao ser
comparado como paternal mais semelhante abc, eles diferemapenas no loco A; e tambm
da regio I, o recombinante aBC, quando comparado como paternal mais semelhanteABC,
porque esse recombinantedifere do paternal apenasnesse gene. Domesmo modo, identificam-
se os recombinantes da regio II. Aps identificados todos os gentipos descendentes,
temos o seguinte:
ABC - 235 Combinaes paternas
abc - 270
AbC - 7 Combinaes compermutas duplas
aBc - 4
Abc - 62 Combinaes provenientes de permuta na regio I
aBC - 60
ABc - 40 Combinaes provenientes de permuta na regio II
abC - 48
Sabemos que a frequncia de recombinao pode ser transformada diretamente em
centimorgan. Podemos ento estabelecer as distncias relativas dos genes no cromossomo
do seguinte modo:
a) Estimativa da distncia na regio I
Para se estimar a porcentagemde permuta na regio I, isto , a distncia entre os genes
Ae B, deve-se considerar todos os recombinantes provenientes da permuta s na regio I e
tambmos duplos recombinantes, pois evidentemente eles sofreramtambmpermuta na
regio I. No exemplo considerado, tem-se: 62 Abc, 60 aBC, 7 AbC, 4 aBc, totalizando
133 recombinantes da regio I. Desse modo, a percentagemde permuta nessa regio de
133/726 x 100 = 18,3%. Assimsendo, pode-se dizer que a distncia entre os genes Ae B
de 18,3 cM.
220
1,5% = x100
726
4 + 7
= x100
es descendent de total N
tes recombinan duplos de N
= FPDO
o
o
Como jfoi comentado, a frequncia de permuta dupla esperada- FPDE- o resultado
de umproduto de probabilidades, isto , a probabilidade de ocorrer permuta nas regies I e
II, simultaneamente. Assim, a frequncia de duplas permutaes esperadas fornecida por:
No exemplo, tem-se:
Como pode ser constatado, a FPDO inferior FPDE, emrazo da ocorrncia da
interferncia, a qual pode ser estimada por:
Para a situao apresentada, tem-se:
Assim, a interferncia foi de 0,4, significando que 40%das frequncias de permutas
duplas esperadas no foramobservadas. De posse desses dados, pode-se agora esquematizar
o mapa gentico para esses trs genes, ou seja:
100
II regio na a x Distnci I regio na Distncia
= FPDE
% 5 , 2
100
x13,6 18,3
= FPDE ?
Interferncia (I) =
FPDE
FPDO
1>
4 , 0
2,5
1,5
- 1 = I ?
b) Estimativa da distncia na regio II
De modo semelhante ao procedimento adotado anteriormente, tm-se os indivduos
recombinantes na regio II: 40 ABc, 48 abC, 7 AbC, 4 aBc, totalizando 99 recombinantes.
Assim, aporcentagemdepermutanaregioII de (99/726) x100= 13,6%. Portanto, a distncia
entre os genes B e C de 13,6 cM.
c) Estimativa de interferncia
A permuta em uma regio pode interferir com a ocorrncia de uma outra, nas suas
proximidades, e esse fenmeno denominado interferncia. Quanto mais prximos estiverem
os pontos de permuta, maior a interferncia. Ela pode ser estimada comparando-se a frequncia
de permutas duplas observadas comas esperadas. Assim, por exemplo, a frequncia de permuta
dupla observada - FPDO, no caso que est sendo considerado, fornecida por:
221
a 18,3 b 13,6 c
9.5.2 Elaborao do Mapa Gentico
Adistribuio sequencial dos genes ao longo dos cromossomos de uma espcie
constitui o seu mapa gentico, em que a distncia entre os genes corresponde
frequncia de recombinao, como visto anteriormente. Como exemplo, consideremos
o mapa gentico do milho apresentado na Figura 9.3. Nota-se que os genes so
distribudos no idiograma - representao esquemtica do complemento cromossmico
de uma espcie. Em geral, os locos so representados pelos alelos mutantes, e as
distncias entre eles so indicadas a partir da extremidade do brao curto de cada
cromossomo, que recebe o valor zero, e as distncias entre os locos so somadas at
a outra extremidade, determinando, assim, o comprimento do cromossomo. Observe
que, apesar de as distncias representarema porcentagemde recombinao, a distncia
mxima no de 100 unidades, isso porque as distncias entre os genes adjacentes
vo sendo sempre somadas; dessa forma, o comprimento do cromossomo funo
das distncias e do nmero de genes j identificados.
importante frisar que dois genes distantes de 50 cMoumais apresentamsegregao
semelhante distribuio independente. Por exemplo, considerando o cromossomo 1 do
milho, o alelo sr
1
na posio zero distribui-se independentemente do alelo as na posio 56
e tambmde todos os demais locos nas posies superiores.
Para algumas espcies mais estudadas, j existem os mapas citolgicos e
citogenticos e at mesmo os moleculares, como ser comentado no Captulo 18. O
primeiro representa simplesmente a morfologia do conjunto bsico de cromossomos com
alguns detalhes estruturais e, no segundo, feita a localizao dos locos no mapa citolgico.
Essa localizao conseguida relacionando as alteraes estruturais dos cromossomos -
delees, inverses, duplicaes e translocaes, comentadas no Captulo 14 que so
citologicamente visveis, comos fentipos observados. , portanto, ummapa fsico dos genes
nos cromossomos.
Nesse mapa, a sequncia dos genes a mesma do mapa gentico, o que confirma a
validade do teste de trs pontos, para estabelecer de modo indireto a ordemdos genes nos
cromossomos. H, contudo, ligeiras diferenas nas distncias entre locos, quando se compara
ummapa gentico comummapa citogentico, o que fcil de compreender, porque no
mapa citogentico tm-se as distncias reais obtidas por observao direta, enquanto no
mapa gentico as distncias correspondems frequncias de recombinao que variamao
longo dos cromossomos.
222
9.5.3 Emprego dos Mapas Genticos
A principal utilidade do mapa gentico possibilitar a previso do resultado de
cruzamentos quando esto envolvidos genes ligados. Para ilustrar o seu emprego vamos
utilizar o mesmo mapa apresentado na Figura 9.3. Para isso, vamos considerar que foram
cruzadas duas plantas de milho comos gentipos Ws
3
Lg
1
Gl
2
/ws
3
lg
1
gl
2
x ws
3
lg
1
gl
2
/ws
3
lg
1
gl
2
.
Nota-se que os genes ws
3
, lg
1
e gl
2
situam-se no cromossomo 2, nesta ordem, e,
respectivamente, nas posies 0, 11 e 30. Isso equivale a dizer que a distncia entre ws
3
e
lg
1
de 11 cM e entre lg
1
e gl
2
de 19 cM, isto , 30 - 11. Supondo ainda que o valor de
interferncia seja de 0,7, pode-se perguntar quais as propores fenotpicas esperadas entre
os mil descendentes do cruzamento das duas plantas de milho. Como se trata de um
cruzamento teste emque uma das plantas tri-hbrida, as frequncias dos gametas produzidos
por essa planta correspondems frequncias dos descendentes do cruzamento; assim, basta
determinar as frequncias dos gametas dessa planta. Para fins didticos, vamos dividir a
resoluo emquatro etapas:
a) Estimativa da frequncia de duplos recombinantes
como
FPDE
FPDO
- 1 = I
, pode-se escrever que FPDO = FPDE (1 - I); assim,
Como so 1.000 descendentes, esperamos que 6,30 sejam duplos recombinantes,
sendo 3,15 de cada tipo.
% 09 , 2
100
11x19
= FPDE ?
FPDO = 2,09 (1 - 0,7) = 0,63%
cruzadas duas plantas de milho comos gentipos
223
FIGURA 9.3. Mapa gentico do milho.
Genes descritos:
Cromossomo 1
sr
1
folhas estriadas estrias longitudinais finas durante a vida da planta
zb
4
zebra
as assinptico parcialmente estril, espigas mal granadas
br
1
braqutico interndios curtos, planta coma da altura normal
gs
1
listras verdes 1 listras verde claras
bm
2
nervura central marrom2, 40%menos lignina nas folhas e colmo
Ts
6
tassel seed 6 sementes no pendo
Cromossomo 2
ws
3
lmina foliar branca
lg
1
folha semlgula 1
224
gl
2
plntula suave 2
B booster intensificador da cor da planta
Ch pericarpo chocolate
Cromossomo 3
cr
1
folhas onduladas folhas largas coma base ondulada
d
1
planta an 1 planta comcerca de 1/5 da altura normal
rt sem-raz razes secundrias poucas ou ausentes
ga
7
fator gametoftico
Cromossomo 4
de
1
endosperma defeituoso 1
Ga
1
fertilizao gamtica diferencial
sp
1
plen pequeno
Tu espiga tunicata glumas circundamcada gro. Tu Tu, geralmente estril, Tu tu
sementes nuas
Cromossomo 5
amameitico esterilidade masculina e feminina de forma parcial ou total
v
3
plntula virescente 3 plntula amarela-clara mas que se torna verde rapidamente
ys
1
listra amarela 1 listras amarelas entre os feixes de nervuras
Cromossomo 6
po
1
polimittico plenno produzido
pg
11
plntula verde-plido 11
py planta pigmeu plantas pequenas, comfolhas pequenas e grossas
Cromossomo 7
o
2
endosperma opaco endosperma quebradio e comaltos teores de lisina e de triptofano
v
5
plntulavirescente 5plntulaamarela-esverdeada mas que setorna verde rapidamente
bd espigas bifurcadas
Cromossomo 8
v
16
plntula virescente 16 plntulas amarelas-bemclaras, tornam-se verdes lentamente
ms
8
macho-estril 8
j
1
japnica 1 listras veriegadas, expressamna planta adulta
Cromossomo 9
Dt
1
Aleurona manchadas
bz antocianina bronze
225
wx endosperma ceroso gros de amido coram-se de vermelho-amarronzado, ao invs
de azul, aps tratado comiodo
v
1
plntula virescente 1 plntula amarelada, torna-se verde rapidamente
bm
4
nervura marrom4
Cromossomo 10
Rp resistncia ferrugem resistncia raa 3 de Puccinia sorghi
Og listra cor de ouro velho
li listras listras longitudinais apenas nas folhas velhas
b) Estimativa da frequncia de recombinantes apenas entre ws
3
e lg
1
- regio I
Segundo o mapa gentico, na regio I ocorrem11%de permuta, ouseja, so esperados
11 gametas em100 provenientes de permuta na regio I ou 110 em1.000. Porm, sabemos
que a frequncia de permuta da regio I inclui tambmos duplos recombinantes, assim, os
gametas esperados a partir de permuta apenas na regio I correspondema 103,70, isto ,
110 - 6,30, sendo 51,85 para cada tipo.
c) Estimativa da frequncia de recombinantes apenas entre lg
1
e gl
2
- regio II
Utilizando o mesmo raciocnio anterior, a frequncia de permuta da regio II 19%, o
que significa que so esperados 19 gametas recombinantes na regio II em100 ou 190 em
1.000. Tambmaqui temos de subtrair os duplos recombinantes para estimarmos o nmero
esperado de gametas provenientes de permuta apenas na regio II, que equivale a 183,70 ou
91,85 de cada tipo.
d) Estimativa da frequncia das combinaes paternas
Os gametas paternais so aqueles que mantmas combinaes allicas originais,
isto , so formados sem que ocorra a permuta. Assim, sua frequncia pode ser
determinada por diferena, uma vez que j estimamos que entre os 1.000 gametas
produzidos pelo gentipo Ws
3
Lg
1
Gl
2
/ws
3
lg
1
gl
2
so esperados 6,30 gametas duplos
recombinantes, 103,70 gametas recombinantes somente na regio I e 183,70 gametas
recombinantes apenas na regio II. Desse modo, o nmero total de gametas
recombinantes corresponde a 293,70. Sendo assim, o nmero esperado de combinaes
paternas 1.000 - 293,70 = 706,30 ou 353,15 para cada tipo de gameta. Os diferentes
tipos de gametas comos seus respectivos gentipos e frequncias so apresentados na
Tabela 9.8.
Como vimos, os mapas genticos so de grande utilidade prtica para o geneticista e
melhorista, quando estes desejamcalcular a probabilidade de conseguir certas combinaes
genticas. Desse modo, possvel ao pesquisador prever o tamanho necessrio da populao
experimental, visando a garantir a probabilidade mnima, pormsegura e econmica, de
obter a combinao ou as combinaes desejadas.
226
TABELA 9.8. Tipos de gametas e as respectivas frequncias esperadas produzidos em um
indivduo de gentipo Ws
3
Lg
1
Gl
2
/ ws
3
lg
1
gl
2
.
9.6 PLEIOTROPIA
Apleiotropia definida como sendo o fenmeno pelo qual umgene controla dois
ou mais caracteres. Todo gene que temsido estudado intensivamente temse mostrado
pleiotrpico emmaior ou menor extenso. Existemvrios casos citados na literatura; no
feijoeiro, por exemplo, o gene P responsvel pela cor do hipoctilo, caule, flores e
tegumento das sementes. Assim, esse gene atua emdiferentes estdios da vida da planta.
O gene pleiotrpico em certos casos afeta a expresso de caracteres que so
aparentemente bem diferentes. Isso o que ocorre no tomateiro, em que um alelo
recessivo dl reduz a formao de pelos no caule, pednculos e anteras. Emconsequncia,
da reduo dos pelos nas anteras, elas ficamseparadas, ao contrrio do que ocorre nas
plantas normais, Dl, emque as anteras so unidas e aparentemente soldadas. Como nas
plantas normais, comanteras soldadas, o mecanismo de acasalamento a autofecundao;
nas plantas dldl esse mecanismo fica alterado e a taxa de polinizao cruzada chega a
50%, resultando numa reduo da produo de frutos, de aproximadamente, 90% nas
condies de campo.
Umoutro exemplo interessante o do alelomutante recessivodr, namamona (Ricinus
communis), que afeta uma srie de caractersticas (Tabela 9.9). Muitos alelos mutantes tm
sido identificados emorganismos superiores, mas nenhumdeles afeta tantas caractersticas
como o alelodr. Ointeressante desse alelo queas caractersticas afetadasso completamente
distintas umas das outras, como, por exemplo, formato da semente e colorao do caule,
impossibilitando se conhecer o modo de atuao desse gene.
Tipos Gentipo Frequncia
Paterno Ws
3
Lg
1
Gl
2
353,15
Paterno ws
3
lg
1
gl
2
353,15
Recombinante da regio I Ws
3
lg
1
gl
2
51,85
Recombinante da regio I ws
3
Lg
1
Gl
2
51,85
Recombinante da regio II Ws
3
Lg
1
gl
2
91,85
Recombinante da regio II ws
3
lg
1
Gl
2
91,85
Duplo recombinante Ws
3
lg
1
Gl
2
3,15
Duplo recombinante ws
3
Lg
1
gl
2
3,15
Total 1.000,00
227
TABELA 9.9. Caractersticas afetadas pelo alelo dr em mamona.
Carter ou rgo afetado Expresso do drdr
Forma da semente Redonda em vez de alongada
Velocidade de germinao Lenta
Velocidade de crescimento Lenta
Comprimento dos interndios Reduz acentuadamente com a idade
Ramificao Parcialmente inibida
poca de florescimento Tardio, cerca de 14 dias
Expresso sexual Tendncia masculina
Antese de flores masculinas Frequentemente incompleta
Absciso de flores femininas Tendem absciso permanente
Produo de sementes Reduzida
Hbito de crescimento Moita compacta em vez de uma rvore alta e aberta
Vigor da planta Fraco
Colorao do caule Pigmentao mais intensa de antocianina com a idade
Necroses do caule Maior nmero de leses necrticas com a idade
Ciclo de vida Curto. Senescncia da planta acelerada.
Fonte: SHIFRISS(1973).
Emgalinhas, as penas arrepiadas afetamvrias caractersticas e constituemumoutro tipo
de pleiotropia(Figura9.4). Umalelorecessivofazcomqueaspenasdagalinhafiquemenroladas
para fora, diminuindo assim a proteo contra a perda de calor. Consequentemente, para
manter atemperatura, a galinha precisacomer muito mais, aumentar o seumetabolismo eo seu
sangue circular muito mais rapidamente. H umahipertrofia doaparelho circulatrio, digestivo
e excretor. Por economia, essa galinha quase no produz ovos. Assim, ums carter provoca
o aparecimento de vrios outros. Essa pleiotropia chamada sindrmica, pois existe um
conjunto defentipos que sempre aparecemjuntos e que constituemuma sndrome.
Figura 9.4. Galinhas com penas arrepiadas.
228
9.7 CORRELAOGENTICAESELEOINDIRETA
Acorrelao umparmetro estatstico que mede o grau de associao entre duas
variveis. Diz-se que duas variveis esto correlacionadas quando, a variao emuma delas
acompanhada por variao simultnea na outra. Acorrelao gentica procura explicar,
por meio de mecanismos genticos, a variao conjunta de duas variveis. Nesse contexto,
a ligao e pleiotropia so os fenmenos genticos que explicama ocorrncia de correlaes
genticas. Isso ocorre porque quando dois genes esto intimamente ligados eles tendema
ser transmitidos emummesmo gameta, originandoumindivduo, que poderouno expressar
os fentipos correspondentes aos alelos herdados. Situao semelhante ir ocorrer quando
o gene emquesto pleiotrpico. Nesse caso, haver a tendncia dos fentipos, associados
a ummesmo alelo, sempre ocorreremjuntos. Por exemplo, emfeijoeiro a cor do tegumento
do gro e a cor da flor so controladas por umgene pleiotrpico, de forma que sempre que
a flor apresentar colorao roxa o gro ser preto.
Emfuno de dois ou mais fentipos ocorreremjuntos, emrazo dos fenmenos de
ligao gentica ou pleiotropia, muitas vezes enfrentamos dificuldades emdeterminar qual
deles est presente naquele caso especfico. Para sanar essa dvida o melhor procedimento
realizar umcruzamento teste, tendo o cuidado de se obter uma descendncia numerosa,
pois dessa forma, se os genes foremligados, haver uma probabilidade de que ocorra algum
indivduo recombinante. Se este no ocorrer, h umforte indcio de que esteja envolvido
apenas um gene no controle das caractersticas, tratando-se, portanto, de um caso de
pleiotropia.
Apleiotropia umfenmeno de grande importncia para os melhoristas de plantas e
animais, podendo ser til ou prejudicial. Ela ser til quando os fentipos associados forem
favorveis, desse modo, o melhoramento de umdeles ir contribuir, ao mesmo tempo, para
o melhoramento do outro. Por outro lado, se umfentipo favorvel estiver associado a
outros desfavorveis, o melhoramento do primeiro ir prejudicar os demais.
Oconhecimento das correlaes genticas empregado eminmeros casos, embora
emmuitas situaes a pessoa que as esteja utilizando no tenha cincia do fenmeno gentico
envolvido. Por exemplo, os juzes de animais nas exposies agropecurias baseiamo seu
julgamento emuma srie de caractersticas do animal, como cor da pelagem, formato do
corpo e cabea, irrigao do bere, tamanho e distribuio das tetas do bere etc., as quais,
ele sabe, so associadas ao desempenho de outros atributos, tais como produo de leite ou
carne.
Uma outra situao muito conhecida pelosmelhoristas o emprego de seleo indireta.
Aseleo indireta aquela praticada emumdeterminado carter para se ter ganho emum
outro, associadoao primeiro. Por exemplo, a resistncia ao nematoidedas galhasMeloidogyne
incognita em tomateiro controlada por um alelo dominante Mi. Aseleo de plantas
229
resistentes umprocesso trabalhoso que envolveo preparo do inculo, inoculao e avaliao
emcondies de campo ou casa de vegetao, almde se manifestar nas razes, necessitando
que a planta seja removida do solo para ter o seu sistema radicular avaliado. Contudo, sabe-
se que o alelo Mi est ligado ao loco da enzima fosfatase cida. Assim, possvel selecionar
indivduos que apresentam atividade para essa enzima com a inteno de obter plantas
resistentes ao nematoide, semhaver necessidade das inoculaes e do arranquio das plantas,
que muitas vezes resulta emsua morte.
Mais recentemente, a seleo indireta tem sido realizada empregando-se marcadores
moleculares associados a outros caracteres de interesse agronmico ou econmico. O emprego
dessa tcnica discutido no Captulo 18.
230
PROBLEMASPROPOSTOS
1. No tomateiro, a altura da planta decorrente de umgene comdominncia do aleloD,
que condiciona planta alta emrelao ao dpara planta an. Apresena de pilosidade
no fruto depende do alelo recessivo p, enquanto o alelo Pcondiciona frutos lisos. Foi
realizado umcruzamento teste e obtido o seguinte resultado: an e lisa 5; an e pilosa
118; alta e pilosa 5; alta e lisa 161.
a) Qual a frequncia esperada de cada fentipo, no cruzamento teste, se os genes
apresentassemdistribuio independente?
b) De acordo coma sua resposta no itema, qual a sua explicao para os resultados
obtidos?
2. Utilizando os dados do problema 1:
a) Esquematize as situaes que ocorreramno diplteno, metfase I e telfase II, dos
meicitos do indivduo da gerao F
1
.
b) Considerando 100 meicitos, qual o nmero de clulas emque foi observada cada
uma dessas situaes?
3. No caupi, o alelo I, dominante, responsvel pela resistncia ao vrus da mancha
anelar e est ligado ao alelo C, tambmdominante, que confere resistncia ao vrus do
mosaico. Ocruzamento de uma planta resistente s duas doenascomoutra suscetvel
produziu a seguinte descendncia:
440 plantas resistentes aos dois vrus;
plantas suscetveis aos dois vrus;
plantas resistentes apenas ao vrus da mancha anelar;
145 plantas resistentes apenas ao vrus do mosaico.
a) Qual a distncia entre os genes?
b) Indique os gentipos dos genitores e dos descendentes do cruzamento.
c) Qual a fase de ligao dos genes, no genitor resistente?
4. Emsoja, o alelo dominanteRconfere nodulao normal e seualelo recessivorrestringe
a nodulao. Oalelo F, tambmdominante, responsvel por caule cilndrico e seu
alelo f, por caule fasciado. Ocruzamento entre a cultivar Clark e a T248 produziu os
resultados seguintes:
231
FENTIPOS
Geraes Ndulao normal
Caule cilndrico
Ndulao
normal
Caule fasciado
Ndulao reduzido
Caule cilndrico
Nodulao reduzido
Caule fasciado
P
1
40 - - -
P
2
- - - 20
F
1
25 - - -
F
2
784 212 212 119
RC
1
250 - - -
RC
2
102 68 72 108
a) Fornea a interpretao gentica desses resultados.
b) Determine a fase de ligao dos genes.
c) Determine a distncia entre os genes.
5. Acor do aqunio emalface controlada por umgene comdominncia do alelo que
condiciona aqunio preto (W) sobre o branco (w). Por seu turno, a ocorrncia de
folhas comos bordos ondulados condicionada por umalelo recessivo (fr) e o alelo
dominante condicionafolha lisa (Fr). Considerando que esses dois genes esto situados
no mesmo cromossomo a 34 cM, pergunta-se:
a) Qual a proporo fenotpica esperada na gerao F
2
do seguinte cruzamento?
P
1
X P
2
Aqunios pretos Aqunios brancos
e folhas onduladas e folhas lisas
b) Se fosse realizado o cruzamento teste, qual seria a proporo esperada?
6. Pericarpo vermelho no milho decorrente do alelo dominante P, enquanto pericarpo
incolor condicionado pelo alelo recessivop. Sementes no pendo so decorrentes do
alelo recessivots
2
, enquantopendo normal depende doaleloTs
2
. Os resultados obtidos
nos cruzamentos testes, envolvendo duas plantas heterozigticasforamos seguintes:
Fentipos Descendentes
Planta 1 Planta 2
Pericarpo vermelho - semente pendo 15 580
Pericarpo incolor - pendo normal 14 610
Pericarpo incolor - semente pendo 1.174 8
Pericarpo vermelho - pendo normal 1.219 9
232
a) Quais os gentipos das plantas 1 e 2?
b) Qual a frequncia de recombinao entre esses genes?
c) Se as plantas 1 e 2 forem cruzadas, qual a frequncia esperada de plantas com
pericarpo incolor e sementes no pendo?
7. Uma linhagem de melo, homozigtica para trs alelos recessivos, q, c, f que
condicionam, respectivamente, polpa verde, casca verde e fruto liso, foi cruzada com
outra linhagemhomozigtica para os alelos dominantes. AF
1
foi retrocruzada coma
linhagemrecessiva dando os seguintes resultados:
Descendentes
Fentipos Nmero
Polpa verde, casca verde, fruto liso 422
Polpa salmo, casca amarela, fruto rendilhado 418
Polpa verde, casca amarela, fruto liso 424
Polpa salmo, casca verde, fruto rendilhado 416
a) Esses genes esto ligados oudistribuem-se independentemente? Explique.
b) Caso estiveremligados, estimar a frequncia de recombinao.
8. No cromossomo 1 do algodoeiro, ocorremos genes que afetamo comprimento e o
tipo defolhaLe Cu a 16 cMde distncia. Oalelo Lconfere folha estreita e l folha
larga. Oalelo Cu condiciona folhas normais e cu folhas onduladas. Ogene para a
reao ao Fusariumfusariumencontra-se no cromossomo 2, sendo o alelo dominante
Wresponsvel pela resistncia.
a) Qual o resultado esperado do cruzamento teste sendo a fase de ligao de repulso?
b) Qual a proporo esperada de plantas comfolhas largas e onduladas e suscetveis
ao Fusarium, provenientes da autofecundao da planta heterozigtica utilizada no
cruzamento teste?
9. No estdiodeplntula, uma planta demilho homozigtica para todosos alelosrecessivos
apresenta fentipo folhas brilhantes, virescentes e semlgula. Essa planta foi cruzada
comoutra heterozigtica para as trs caractersticas produzindo a seguinte proporo
de descendentes:
233
Fentipos Nmero de descendentes
Folhas sem brilho, verde, com lgula 28
Folhas sem brilho, verde, sem lgula 179
Folhas sem brilho, virescente, com lgula 69
Folhas sem brilho, virescente, sem lgula 250
Folhas brilhantes, verde, com lgula 198
Folhas brilhantes, verde, sem lgula 70
Folhas brilhantes, virescente, com lgula 183
Folhas brilhantes, virescente, sem lgula 23
TOTAL 1.000
a) Determinar a ordemdos genes e construir o mapa gentico envolvendo esses trs
locos.
(Obs.: Folhas brilhantes = gl, virescente =v, semlgula =lg).
b) Calcular o coeficiente de interferncia e interpretar o resultado.
c) Qual o gentipo da planta heterozigtica usada no cruzamento teste?
10. No cromossomo 5 do milho, esto localizados os seguintes genes e respectivas
frequncias de recombinao:
lu - gl - 5 gl - ps - 5 lu - ps - 10
lu - vp
2
- 9 gl - bv - 13 vp
2
- bv - 9
ps - bm - 2 bv - ps - 8 bm - bv - 6
a) Construa o mapa gentico, mostrando a posio desses 6 genes.
b) Quais as distncias entre os genes lu - bm; lu - bv; gl - vp
2
; gl - bm; vp
2
- ps; vp
2
- bm?
11. Emtomate, os seguintes genes esto localizados no cromossomo 2, como mostra o
mapa:
m d p
17 21,5 26
Emque:
m- folhas manchadas
d - planta an
p - fruto piloso
a) Apartir do cruzamento
mdp
mdp
x
MDP
MDP
, qual a proporo emF
2
de indivduos puros e
de fentipo:
234
1. Folhas verdes, planta alta e fruto liso;
2. Folhas verdes, planta an e fruto liso.
b) Quais seriamsuas respostas para o itema, se o F
1
apresentasse constituio
Mdp
mDP
?
12. Howes e Lachman, 1974 (The Journal of Heredity, 65:313-4), verificaramque os
alelos recessivos id, a e h que condicionamos fentipos flores indeiscentes, plantas
semantocianina e sempelos, respectivamente, esto situados no cromossomo 11 do
tomateiro, conforme o seguinte mapa gentico:
h a id
37 57 74,4
a) Esquematize umcruzamento teste envolvendo os trs genes emfase de atrao.
b) Considerando que 1.000 indivduos foramobtidos nesse cruzamento teste, qual o
nmero esperado de cada fentipo? (I=0,2)
13. No cromossomo 3 do milho, ocorremtrs genes, conforme o seguinte mapa gentico:
Cr
1
d
1
a
0 18 111
a) Quais as propores genotpicas esperadas a partir do cruzamento ?
b) Qual o tamanho da descendncia do itema para se obter 50 descendentes do
gentipo Cr
1
D
1
A/cr
1
d
1
a com95% de probabilidade?
14. Uma cultivar de caupi, resistente ao Fusariume aos nematides que causamgalha, foi
cruzada comoutra cultivar suscetvel tanto aoFusariumquantoaos nematoides. Todas
as plantas F
1
mostraram-se resistentes aos dois organismos e o retrocruzamento da F
1
coma cultivar suscetvel produziu 128 plantas resistentes aos dois organismos e 132
suscetveis aos dois organismos.
a) Formule uma hiptese para explicar a herana desses caracteres.
b) Sugira umprocedimento para testar essa hiptese.
1 1 1 1
1 1 1 1
Cr d a cr d a
x
cr D A cr d a
235
EfeitodoAmbiente na ExpressoGnica
10 EFEITOS DOAMBIENTE
NA EXPRESSO GNICA
10.1 INTRODUO
Na maioria dos exemplos j apresentados, foi considerado que o gentipo o nico
responsvel pela produo de umdado fentipo, independentemente da condio ambiental
emque o organismo se encontra. No entanto, para a maioria dos caracteres, a expresso
fenotpica dependente tambmdo ambiente.
Aparticipao do gentipo na expressodo fentipo evidenciadaemmuitas situaes,
como, por exemplo, quando semea-se uma semente de feijo e outra de milho nummesmo
solo e emcondies ambientais semelhantes, tem-se uma planta de feijo e uma de milho,
cada uma comas caractersticas tpicas de cada espcie. Isso ocorre apesar de que, para a
formao das duas plantas, foramutilizados e transformados aparentemente os mesmos
recursos do ambiente, ou seja, nutrientes do solo, gua, CO
2
e luz. Atransformao dessas
substnciasemduas plantas completamente distintas possvel graas sinformaes genticas
especficas, presentes nas clulas da semente de cada espcie.
Por outro lado, a influncia dos fatores ambientais tambmaltera o fentipo, como
pode ser notado quando semeam-se duas sementes oriundas da autofecundao de uma
planta homozigtica de feijo, sendo uma emsolo frtil e a outra na areia. As duas plantas
resultantes sero bastante diferentes em diversas caractersticas, embora ambas sejam
geneticamente idnticas.
Assim, peloexposto, nota-se que indivduos geneticamente diferentes desenvolvem-se
de modo diferente no mesmo ambiente, mas tambmindivduos geneticamente idnticos
desenvolvem-se desigualmente emambientes diferentes. Na realidade, o que ocorre na
expresso de qualquer carter uma ao conjunta do gentipo e do ambiente, isto :
Fentipo (F) = Gentipo (G) + Ambiente (A)
10.2 EFEITOSDOAMBIENTENAMANIFESTAOFENOTPICA
Emseguida, serocomentados alguns exemplos onde se verificamalteraes marcantes
nos fentiposdecorrentes da influncia defatores do ambiente, taiscomo temperatura, nutrio,
luz e hormnios.
236
10.2.1 Efeitos da Temperatura
Umexemplo clssico o efeito da temperatura na cor da pelagemdos coelhos. O
gentipo c
h
c
h
produz o tipo denominado himalaia e que lembra os animais com pelos
pigmentados (marromou preto) apenas nas extremidades do animal, isto , no focinho, nas
patas, na cauda e nas orelhas. Na verdade, este fentipo dos animais c
h
c
h
ocorre quando
eles esto expostos a temperaturas que variamentre 15 e 24Ce resulta da ao do aleloc
h
,
que responsvel pela produo de umtipo termo-sensvel da enzima tirosinase. Essa enzima
s catalisa a sntese de pigmentos - melanina - nas regies do corpo emque a temperatura
inferior a 15C, como nas extremidades do animal. Coelhos c
h
c
h
expostos a temperaturas
abaixo de 2Ctornam-se pigmentados emtodo o corpo. Por outro lado, emtemperaturas
acima de 29C, o alelo c
h
no ativo e todo o corpo do animal branco.Veja que o animal
normalmente, s possui as extremidades de cor preta. Contudo, se o pelo for raspado e
colocado uma bolsa de gelo, por algumtempo, o novo pelo ser preto (Figura 10.1).
Outro exemplo que salienta o efeito da temperatura na determinao do fentipo o
que ocorre emPrimula sinensis, emque algumas variedades produzemflores vermelhas
somente quandocultivadas emtemperaturas inferiores a 30Ce floresbrancas emtemperaturas
superiores. J, as variedades de floresbrancas, apresentamessa cor emqualquer temperatura.
Nesses exemplos, verifica-se que determinados fentipos podemser produzidos tanto
por fatores genticos quanto ambientais.
FIGURA 10.1. Efeito da temperatura na cor da pelagem dos coelhos himalaias.
237
10.2.2 Efeitos da Luz
Um exemplo tpico do efeito da luz sobre o fentipo corresponde produo de
clorofila nas plantas, que determinada por genes que s se expressamempresena de luz.
Quando uma planta cresce na ausncia de luz, ela fica albina. Ofentipo induzido por fatores
ambientais e semelhante a outro determinado geneticamente denominadofenocpia.
Ofentipo albino produzido por deficincia de luz umafenocpia domutante albino,
o qual no produz clorofila por uma causa gentica.
Emsunos e aves, a sntese de vitamina Dtambm regulada pela exposio direta dos
animais luzsolar. Animais que socriados emgalpescobertosdevemreceber suplementao
dessa vitamina, pois, embora possuama informao gentica para sua sntese, falta condio
ambiental favorvel para sua expresso.
importanteressaltar que a variao fenotpica decorrentes das alteraesdo ambiente
comumente adaptativa. Umexemplo interessante o que ocorre emcertas espcies de
Ranunculus. Essasplantas vivemna gua e esto sujeitas agrandes variaes, principalmente
na forma da folha. Elas produzemfolhas filamentosas quando submersas e folhas inteirias
quando esto na superfcie da gua (Figura 10.2). Essas formas podemser alteradas de
acordo como nvel da gua. Osignificado adaptativo dessa mudana na morfologia da folha
est emse manter umequilbrio timo entre os dois fatores mais necessrios fotossntese:
luz e gua. Para a folha submersa apenas a luz umfator limitante. Emconsequncia, quanto
maior a superfcie da folha em relao a seu volume, maior a proporo de clulas e
FIGURA 10.2. Planta aqutica (Ranunculus aquatilis) mostrando a grande diferena entre
o formato das folhas flutuantes e das submersas.
238
cloroplastos que esto diretamente expostos luz relativamente fraca que penetra na gua.
Por outro lado, a folha no submersa recebe bastante luz, mas pode perder gua por meio da
transpirao. Afolha, sendo relativamente compacta, tema vantagemde reduzir essa perda
de gua.
10.2.3 Efeitos da Nutrio
Em coelhos, a gordura dos animais pode ser amarela ou branca. Essa diferena
atribuda a umgene, sendo o alelo recessivo a responsvel pela gordura amarela. Oalelo
dominante Aproduz uma enzima especfica, que atua sobre a xantofila, que amarela e
encontrada nas partes verdes das plantas transformando-a, emuma substncia incolor. Nos
indivduos aa, nohavendo produo da enzima, a xantofila encontrada nosalimentos verdes
armazenada no tecido gorduroso. O interessante, contudo, que evidencia o efeito do
ambiente que se a alimentao dos animais aa for realizada comalimentos no verdes a
gordura ser branca, como nos animais A_. Ofentipo gordura branca, nos animais aa,
umoutro exemplo de fenocpia dos animais portadores do alelo dominante A.
Em plantas, tambm ocorre alterao na expresso fenotpica, em razo do fator
nutricional. Assim, por exemplo, comdeficincia de nitrognio no solo as plantas ficam
amareladas, embora possuaminformao gentica para manifestar a cor verde normal.
10.2.4 Efeitos Hormonais
No milho, ocorremvrios tipos de plantas ans, sendo cada tipo decorrente de um
controle monognico. Alguns mutantes anes, entre eles o braqutico - decorrente do alelo
br
2
-, respondemao tratamento como hormnio giberelina, produzindo umcrescimento
normal. Tambma enxertia sobre plantinhasnormais contribui para o crescimento do enxerto
ano, at atingir o porte normal, indicando uma difuso do regulador de crescimento,
provavelmente giberelina, do normal para o ano. As diferentes mutaes para ano
correspondem, portanto, ao bloqueio na formao da giberelina, que deve ser o produto final
de uma via metablica. Porm, como so conhecidos vrios mutantes para ano e como eles
reagemdiferentementeao tratamento comgiberelina, provvel que osvrios genes controlem
diferentes passos na sntese da giberelina e de hormnios relacionados. No milho, quando se
obtmuma planta de altura normal, a partir do tratamento comgiberelina de uma plantinha
comconstituio gentica para ano, tem-se tambmfenocpia da planta de altura normal,
determinada geneticamente.
H vrios outros exemplos de efeitos hormonais, sendo que umdos mais expressivos
aquele que afeta a reverso sexual empeixes, mais especificamente emTilpia, emque
os alevinos tratados comhormnios alterama proporo sexual. Emplantas de pepino, a
proporo sexual tambmpode ser alterada por efeitos hormonais. As auxinas, por exemplo,
239
contribuem com o maior aparecimento de flores femininas e o contrrio ocorre com a
giberelina.
10.3 PENETRNCIAEEXPRESSIVIDADE
Apenetrncia definida como a porcentagemde indivduos de uma populao com
umdado gentipo, que expressa o fentipo correspondente. Apenetrncia de umgentipo
pode ser completa ou incompleta. Penetrncia completa quando umgentipo produz o
fentipo correspondente sempre que estiver presente emcondies de se expressar. J, a
penetrncia incompleta quando apenas uma parcela dos indivduos como mesmo gentipo
expressa o fentipo correspondente.
Aexpressividade corresponde ao modo de expresso do gentipo, que pode ser
uniforme ouvarivel. Expressividade uniforme ocorre quando umgentipo expressa sempre
umnico tipo de fentipo, de fcil reconhecimento. Porm, quando a expresso do gentipo
resulta no aparecimento de vrios padres de fentipos ou vrios graus de expresso,
tem-se uma expressividade varivel. Esse caso constitui uma dificuldade para o geneticista
e melhorista, pois, primeira vista, parece tratar-se de caracteres comcontrole gentico
mais complexo, quando na verdade trata-se de umcarter emque umgentipo apresenta
expresses variadas.
Umexemplo de penetrncia incompleta e expressividade varivel ocorre na cultivar de
feijo Carioca. Nessa cultivar existe umalelo dominante L, responsvel pela presena de
listras marrons na semente, que temuma colorao creme-claro. Observa-se que cerca de
5%das sementes da cultivar no apresentamlistras, embora todas sejamhomozigticas para
o alelo L. Assim, a penetrncia da classe genotpica L_ de 95%. ATabela 10.1 ilustra as
propores genotpicas empopulaes obtidas pelo cruzamento das cultivares Carioca e
Mulatinho.
TABELA 10.1. Propores fenotpicas nas geraes F
1
e F
2
obtidas a partir do cruzamento
das cultivares de feijo Carioca e Mulatinho.
Genitores: Carioca x Mulatinho
Gentipos: LL ll
Fentipos: Com listras Sem listras
F
1
:Gentipo:
Fentipos:
Ll
95% com listras : 5% sem listras
F
2
: Gentipos:
Fentipos:
25% LL 50 L l 25% ll
Com listras: 23,75% 47,50% 0
Sem listras: 1,25% 2,50% 25,00%
240
Observe que a penetrncia incompleta do gentipoLl determina segregao fenotpica
na gerao F
1
e a segregao fenotpica na F
2
fica alterada para 71,25%comlistras e 28,75%
sem listras. O padro de listras conferido pelo alelo L tambm varivel, pois existem
sementes comapenas traos de marrons, at aquelas quase inteiramente marrons (Figura
10.3). Portanto, gentipos comalelo Lapresentampenetrncia incompleta e expressividade
varivel.
FIGURA 10.3. Penetrncia incompleta e expressividade varivel de gentipos com o alelo L
responsvel pela presena de listras marrons na semente do feijoeiro.
Os fenmenos de penetrncia e expressividade so tambmmuito comuns entre os
animais. Na Figura 10.4, mostrado um caso de expressividade varivel comrelao a
ocorrncia de manchas na pelagemde algumas raas de ces.
Os termos penetrncia e expressividade so utilizados quando no se conhecemtodos
os fatores que afetam a expresso de umdeterminado gentipo. Tais fatores podemser
tanto ambientaiscomo genticos. Porm, sempre quando umgentipo apresenta penetrncia
incompleta e/ou expressividade varivel, a relao gene-carter fica mascarada pela alterao
da correspondncia entre o gentipo e o fentipo.
241
F = G + A + GA
Ainteraogentipos por ambientes umfenmeno amplamente disseminado entre as
plantas e os animais, e inmeros exemplos so conhecidos. Ela o principal complicador do
trabalho dos melhoristas, exigindo que o melhoramento seja conduzido nas condies em
que o gentipo ser utilizado. Ainterao dos gentipos xambientes caracterizada quando
o comportamento das raas, linhagens ou cultivares no so consistentes nos diferentes
ambientes, isto , a resposta de cada gentipo especfica e diferente de outros gentipos s
alteraes que ocorremnos ambientes.
FIGURA 10.4. Exemplo de expressividade na cor da pelagem de ces. Todos esses ces
possuem o mesmo alelo (S
P
) responsvel pelas manchas na pelagem, veja contudo, a grande
diferena na expresso fenotpica dos animais.
10.4INTERAOGENTIPOSXAMBIENTES
At agora foi enfatizado que o fentipo o resultado do gentipo + ambiente. Na
realidade, existe quase sempre umterceiro componente, que a interao gentipos por
ambientes - GA-; assim, tem-se:
242
Uma boa situao para ilustrar a interao a resistncia de plantas a umdeterminado
patgeno que possui inmeras raas. Seja, por exemplo, o caso da resistncia do feijoeiro
ao Colletotrichum lindemuthianum, agente causal da antracnose. Esse um patgeno
responsvel por perdas expressivas na produo de gros dessa leguminosa. Emtrabalho
realizado na Universidade Federal de Lavras, trs linhagens de feijo foraminoculadas com
trs raas desse patgeno, sendo obtidos os resultados apresentados na Tabela 10.2.
Compare o comportamento das linhagens Carioca MGe CI 140. Observe que houve
uma inverso decomportamento. AlinhagemCarioca MGfoi resistente raa89 e suscetvel
raa 81 do patgeno e coma CI 140 ocorreu exatamente o contrrio. Considerando as
raas do patgeno como um efeito ambiental, tem-se a situao clara da interao dos
gentipos x ambientes, como j mencionado, o comportamento das cultivares no foi
consistente nos dois ambientes. Essa interao pode ser constatada para outros inmeros
fatores ambientais, tais como fertilidade do solo, umidade, temperatura, fotoperodo, etc.
TABELA 10.2. Reao de linhagens de feijo a duas raas do agente causal da antracnose.
Raas do patgeno
Linhagens
81 89 119
Carioca S* S S
Carioca MG S R S
CI-140 R S S
* S: Suscetvel R: Resistente
Os dados apresentadosnaTabela10.3ilustramuma situao emquefentipo =gentipo
+ ambiente +interao dos gentipos xambientes. Foramavaliadas seis cultivares de feijo
comconstituies genticas diferentes, como evidenciamas produtividades mdias de gros
das cultivares. O efeito ambiental realado pela produtividade mdia obtida em cada
localidade. Emcondies de temperatura moderada (Popayan), a produtividade mdia foi
superior das outras duas localidades. Ainterao gentipos xambientes est tambmbem
evidenciada. Veja, por exemplo, que nas condies de altas temperaturas as cultivares com
melhor desempenho foramP 589 e S 215-N. Essas mesmas cultivares sob condies de
baixa temperatura nochegarama produzir gros. Por outro lado, as cultivares DiacolAndino
e Cargamanto, que praticamente no produziramgros emalta temperatura, foramas mais
produtivas embaixas temperaturas.
Para a produo de leite, os animais da raa holandesa apresentam gentipo para
maior potencial produtivo. Porm, os animais dessa raa s manifestamesse potencial em
boas condies de manejo. Nas propriedades rurais em que o manejo no favorvel,
como ocorre emmuitas regies do Brasil, os rebanhos mestios (hbridos) ou at os de raa
243
TABELA 10.3. Produtividade de gros, em t/ha, de cultivares de feijo testados em trs
localidades com diferentes condies de temperatura, na Colmbia ( International Center for
Tropical Agricultur e - CIAT, 1979)
zebunas, gir leiteiro por exemplo, so os que apresentammaior produo. Na Tabela 10.4,
evidenciado esse fato, considerando vrias caractersticas para rebanhos que possuem
diferentes propores de alelos da raa holandesa e guzer. Observe que nas condies de
alto manejo a produo de leite e as demais caractersticas so melhores nos rebanhos com
maior proporo de alelos do holands. Omesmo noocorre emcondies de baixo manejo.
TABELA 10.4. Resultados mdios e desvios padres para caractersticas da primeira
lactao de vacas de rebanhos holands x guzer com seis propores diferentes de alelos,
obtidos em fazendas de alto e baixo nvel de manejo.
1/
Nvel de manejo;
2/
Desvio da estimativa.
Proporo de alelos
do rebanho holands
Caractersticas
Durao da
lactao (dias)
Produo de leite
(kg/lactao)
Produo de gordura
(kg)
Alto
1/
Baixo Alto Baixo Alto Baixo
H
400
, 37
2/
154
, 38
3438
, 207
772
, 390
126,6
, 15,4
/
28,4
, 15,8
7/8
318
, 20
289
, 41
3076
, 267
1959
,418
118,0
, 8,4
77,8
, 16,9
3/4
315
, 26
275
, 30
3322
, 267
1717
,306
133,5
, 10,1
68,0
, 12,4
5/8
203
, 23
260
, 33
1622
, 235
1474
,335
53,3
, 9,5
60,6
, 13,6
1/2
322
, 20
307
, 28
3235
, 205
2322
,287
141,7
, 8,3
96,1
, 11,7
1/4
225
, 21
155
, 38
1443
, 218
859
,387
60,1
, 8,9
38,5
, 15,7
Cultivares
Localidade
Santa F
(alta temp.)
Popayan
(temp. moderada)
Pasto
(baixa temp.)
Mdia das
Cultivares
P 589 2,23 3,10 0,00 1,78
S 215-N 2,22 2,27 0,00 1,65
Jamaica 1,53 3,27 0,19 1,66
Linea 29 2,10 3,22 0,00 1,77
Diacol Andino 0,02 1,88 1,32 1,07
Cargamanto 0,02 1,83 0,94 0,93
Mdia dos locais 1,35 2,67 0,41
244
Esses resultados realammuito bema interao dos gentipos por ambientes e mostrama
necessidade de que nas condies do Brasil, onde h uma diversidade muito grande de
ambientes, o rebanho deve ser escolhido emfuno das condies de manejo predominantes.
10.5 ESTIMATIVAS DE CONTRIBUIO DO EFEITO DOS
GENTIPOS, AMBIENTES E DA INTERAO GENTIPOS X
AMBIENTES
Umdos objetivos da maioria dos programas de melhoramento gentico de plantas e
animais estimar quanto da variao fenotpica se deve interao. Por meio dessas
informaes, os pesquisadores podemdirecionar seus trabalhos visando a atenuar os efeitos
da interao ou at mesmo utiliz-la na obteno de plantas e animais para condies
especficas.
Essas estimativas so obtidas por meio de uma anlise de varincia, sendo necessrio
que se disponha de uma tabela de dupla entrada, tal como, por exemplo, cultivares de plantas
ou raas de animais avaliadas emalguns ambientes. Seja, por exemplo, a avaliao de trs
cultivares de arroz emtrs localidades do Estado de Minas Gerais (Tabela 10.5, caso A).
Com base nessa tabela, pode-se estimar a soma de quadrados totais (SQ
T
), a soma de
quadrados decorrente de cultivares (SQ
C
) e a soma de quadrados decorrente dos locais
(SQ
L
). Pela diferena SQ
T
- SQ
C
- SQ
L
, obtm-se a soma de quadrados da interao
cultivares x locais (SQ
CL
). No exemplo tem-se:
00 , 3
9
) 18 (
) 0 , 1 ( ... ) 0 , 3 ( ) 5 , 2 (
2
2 2 2
? > @ @ @ ?
T
SQ
50 , 1
9
) 18 (
3
) 5 , 4 ( ) 0 , 6 ( ) 5 , 7 (
2 2 2 2
? >
@ @
?
C
SQ
00 , 0 ? > > ?
L C T CL
SQ SQ SQ SQ
50 , 1
9
) 18 (
3
) 5 , 4 ( ) 5 , 7 ( ) 0 , 6 (
2 2 2 2
? >
@ @
?
L
SQ
Como se observa nessa situao a interao foi nula, isto , o comportamento das
cultivares de arrozfoi consistente nos trslocais. Na Figura 10.5a, so mostrados graficamente
os resultados obtidos. Novamente, fcil ver que o comportamento das cultivares
consistente. S no ocorreu interao porque as trs retas foramparalelas.
Vejamos, agora, os resultados obtidos emoutros trs locais, envolvendo as mesmas
trs cultivares, Tabela 10.5 (caso B). Nesse exemplo, tem-se as seguintes somas de
quadrados:
245
Nesse caso, h interao. Veja no grfico, Figura 10.5b, que as trs retas no so
paralelas. visvel, entretanto, nesse caso que a interao no mudou a classificao das
cultivares emfuno do local. AGuarani foi a melhor cultivar emtodos os trs locais.
Nessa situao, a interao denominada de simples.
Seja novamente a avaliao das trs cultivares emoutros trs locais, Tabela 10.5(caso
C) e Figura 10.5c. Nessa situao, tem-se:
SQ
L
= 1,6689
SQ
CL
= SQ
T
- SQ
C
- SQ
L
= 0,0977
SQ
T
= 1,2422
SQ
CL
= 0,8310
SQ
L
= 0,2956
SQ
C
= 0,1156
TABELA 10.5. Produtividade de gros de arroz (t/ha) em algumas localidades do estado de
Minas Gerais.
SQ
T
= 2,5022
SQ
C
= 0,7356
Caso A
Cultivares
Locais
Totais
A B C
Guarani 2,5 3,0 2,0 7,5
Dourado 2,0 2,5 1,5 6,0
IAC-47 1,5 2,0 1,0 4,5
Totais 6,0 7,5 4,5 18,0
Caso B
D E F
Guarani 3,0 2,5 1,7 7,2
Dourado 2,5 2,2 1,4 6,1
IAC-47 2,0 1,8 1,3 5,1
Totais 7,5 6,5 4,4 18,4
Caso C
G H I
Guarani 3,0 2,0 2,4 7,4
Dourado 2,5 2,5 2,2 7,2
IAC-47 2,0 1,8 2,8 6,6
Totais 7,5 6,3 7,4 21,2
246
FIGURA 10.5. Produtividade de gros (t/ha) de cultivares de arroz avaliadas emdiferentes localidades.
A) - seminterao; B) - interao simples; C) - interao complexa.
Ainterao foi mais expressiva que as fontes de variao, locais e cultivares. Observe
que houve uma inverso na classificao das cultivares de acordo como local. Essa uma
interao complexa e temefeitos expressivosdificultando o trabalho dos melhoristas. Existem,
contudo, procedimentos que no sero comentados aqui, que possibilitamatenuar os efeitos
desse tipo de interao.
De tudo o que foi mostrado, ficou evidente que tanto o gentipo como o ambiente tm
umpapel decisivo na manifestao fenotpica. De nada vale umgentipo superior quando o
ambiente desfavorvel, como tambmno adiantamuito melhorar o ambientese o gentipo
no o adequado. Enfim, os resultados mostrama necessidade de conduzir os programas
de melhoramento ou adquirir animais matrizes nas condies mais prximas possveis que os
descendentes encontraro para o seu crescimento e desenvolvimento.
5
6
7
247
PROBLEMASPROPOSTOS
1. No coelho himalaia, os animais so brancos comas extremidades escuras decorrentes
da presena de melanina no pelo. Se for retirado o pelo branco do dorso do animal,
por exemplo, e esse animal for colocado emumlocal comtemperatura baixa, o novo
pelo que ir crescer na regio depilada ser escuro como nas extremidades do corpo.
Sugira uma explicao para esse fenmeno.
2. Quando se corta a grama e se amontoa o material cortado emumdeterminado local
desse gramado, por algumtempo nota-se que sob o material cortado a grama que se
desenvolve albina.
a) Como pode ser explicado esse fato?
b) Se for encontrado nesse mesmo gramado algumas plantas albinas, mesmo expostas
ao solo, qual a explicao para esse fato?
c) Como se denominamas plantas albinas por ausncia de luz?
3. Os resultados mdios obtidos emkg/ha para cinco cultivares de feijo, avaliados em
quatro localidades do Estado de Minas Gerais, no perodo de 1985/86, foram os
seguintes:
Locais
Cultivares Caldas Ponte Nova Machado Governador Valadares Mdia
ESAL 502 1.825 2.193 169 1.729 1.479
ESAL 505 2.329 1.807 281 2.086 1.626
ESAL 506 2.216 1.709 449 2.188 1.640
ESAL 508 2.199 1.575 429 1.704 1.477
Carioca 1.774 1.675 347 1.948 1.436
Mdia 2.069 1.792 335 1.931 1.532
a) Quais resultadosindicama existncia doefeito do ambiente naexpresso do gentipo
para a produo de gros?
b) Quais resultados indicama existncia do efeito do gentipo?
c) Esses resultados indicama existncia de interao cultivares xlocais? Justifique sua
resposta.
d) Qual a importncia para os melhoristas de feijo da avaliao de cultivares emmais
de umlocal?
248
4. Utilizando os dados do problema 3, sugira valores para a produtividade mdia das
cultivares emMachado, de modo que no ocorra interao gentipos x ambientes,
coma localidade de Caldas. Considere que no h alterao das mdias de produo
dessas duas localidades.
5. Nos grficos, so representadas as produtividades de gros emt/ha, de duas cultivares
de arroz - Alto Paranaba e IAC47 -, cultivados emtrs localidades:
Interpreteostrsgrficosconsiderandoaocorrnciaounodeinteraocultivares xlocais.
6. Em um experimento conduzido na UFLA em 1981/82, foram avaliados algumas
cultivares de feijo emconsrcio como milho e emmonocultivo. As produtividades
mdias de gros, emkg/ha, de oito cultivares nos dois sistemas de plantio foramas
seguintes
Cultivares Sistema de plantio
Monocultivo (M) Consrcio (C) C/M %
Venezuela 63 1.413 502 35,5
Moruna 828 322 38,9
ESAL 1 958 374 39,0
Carioca 831 292 35,1
Roxo PV 807 601 74,5
Linea a 1.584 671 42,4
Pintado 630 515 81,7
IPA 1.300 950 73,1
Mdia 1044 528
249
a) Esses resultados indicama existncia de interao cultivares xsistemas de cultivo?
b) Qual a implicao prtica desses resultados?
7. As produtividades mdias de gros de caf beneficiado emkg/ha, de trs prognies
obtidas durante 6 anos, emCampinas, So Paulo, foramas seguintes:
Ano da colheita
Prognies
1 2 3 4 5 6
Mdia
C 848 229,6 879,2 841,1 1.535,2 1.688,8 2.887,5 1.343,7
C 376-1 706,4 818,3 1.158,1 1.152,7 1.983,8 2.134,4 1.325,7
MP 376-4 589,8 897,2 1.195,8 2.936,9 1.935,7 5.080,1 2.105,8
a) Ocorreu interao prognies x anos? Justifique sua resposta.
b) Como pode ser interpretado esse resultado, emtermos de recomendao para os
cafeicultores?
8. Quando se estudou a herana do vrus do mosaico da ervilha,verificou-se que ela
monognica, sendo a resistncia decorrente do alelo recessivo. No entanto, nesses
estudos, sempre era verificado um nmero de plantas suscetveis menor do que o
esperado na F
2
.
a) Qual seria a explicao para esse resultado na F
2
?
b) Posteriormente, foi verificadoque, se a F
2
fosseinoculada emantidanuma temperatura
de 18C ou menos, a resistncia mostrava-se controlada por um alelo dominante.
Porm, se a F
2
fosse mantida temperatura de 27C, a resistncia era controlada pelo
alelo recessivo. Quais suas concluses sobre esses fatos? Qual sua nova concluso
sobre o itema?
9. Acultivar de feijo pintado apresenta gros de cor creme commanchas vermelhas.
No entanto, as sementes apresentamnormal-mente uma certa variao no padro
de manchas e at mesmo a sua ausncia. Essa variao na expresso fenotpica, s
vezes, responsvel pela eliminao do lote de semente, como argumento de que
se trata de uma mistura varietal. Como proceder para verificar se o caso considerado
foi decorrente da penetrncia incompleta e expressividade varivel ou uma mistura
de gentipos?
10. Em alguns animais, a suscetibilidade a determinados patgenos geneticamente
controlada. Contudo, frequentemente animais como mesmo gentipo manifestam
diferentes gradaes do sintoma da doena. Como pode ser explicado esse fato?
250
11. Aseguir so apresentados os resultados obtidos da produo de leite (kg/lactao) de
alguns rebanhos de bovinos avaliados emtrs propriedades do Sul de Minas Gerais.
Propriedades
Rebanho
A B C
Holands puro (H) 6000 4000 3000
Gir leiteiro (G) 3000 2800 2700
1/2 G x 1/2 H 5000 3800 3600
3/4 H + 1/4 G 5500 3500 3200
a) Considerando o fentipo, produo de leite, quais so as causas de variao que
ocorreram?
b) Quais as implicaes desse resultado para os pecuaristas?
12. Na V&MFlorestal, algumas espcies deEucaliptus foramavaliadas emtrs locais no
estado de Minas Gerais. Os resultados mdios do volume de madeira (m
3
/ha) aos 6
anos de idade, foramos seguintes:
Locais
Espcies
Paraopeba Curvelo Bocaiuva
E. grandis 40 22 12
E. camaldulensis 60 52 28
E. citriodora 45 35 18
E. cloeziana 55 45 30
a) Quais foramos fatores que contriburampara a variao na expresso fenotpica
(volume de madeira)?
b) Quais as implicaes desse resultado para a empresa florestal?
13. Embovinos de raa Charols, foi verificado que a artrogripose, doena que afeta a
circulao dos animais, controlada por umalelo recessivo que apresenta penetrncia
incompleta e expressidade varivel, o que isso significa?
251
Herana e Sexo
11 HERANAE SEXO
11.1 INTRODUO
Emprincpio a funo biolgica fundamental do sexo a reproduo. Contudo, sabe-
se que esta pode ocorrer por meios assexuais emumgrande nmero de plantas e animais
inferiores. Osexo, no entanto, temuma segunda funo biolgica que a de promover a
segregao e recombinao dos genes. A reproduo sexual , sem dvida, um dos
responsveis pelaevoluo, pela enorme variabilidade gentica gerada nas espcies e viabiliza
o melhoramento gentico . Parte dessa variabilidade est relacionada a diferenciao sexual
e ao controle gentico de alguns caracteres cujos fentipos dependemda expresso sexual.
Dada a importncia desses fenmenos para a gentica, neste captulo iremos discutir alguns
aspectos de como se d a determinao do sexo, bemcomo o controle gentico de alguns
caracteres cujos fentipos dependemda expresso sexual.
11.2 DETERMINAODOSEXOPELASCONDIESAMBIENTAIS
Existemvrios exemplos na literatura que mostrama grande influncia do ambiente na
determinao do sexo. Um dos exemplos mais notveis observados entre as plantas foi
apresentadopeloprofessor HamiltonBicalho(ESALQ/USP). Emseutrabalho, ele demonstrou
que plantas da espcie de orqudea Catasetum fimbriatum podem apresentar, algumas
vezes, flores do sexo masculino e/ou do sexo feminino, dependendo da condio ambiental
emque ela se encontra. Por exemplo, se as plantas foremcolocadas empleno sol produziro
flores femininas e, no caso das plantas estaremsombreadas, dentro de umestaleiro, as flores
produzidas sero masculinas.
Umoutro exemplo ocorreempteridfita do gneroEquisetum, vulgarmente conhecida
como cauda-de-cavalo. Nessa espcie, a produo de flores femininas ocorre emcondies
de alta fertilidade, enquanto flores masculinas se desenvolvememplantas cultivadas emsolos
pobres.
Emvrios animais, especialmente rpteis e anfbios, a determinao do sexo se d por
influncia da temperatura durante o desenvolvimento embrionrio (Perodo de incubao).
Exemplos interessantes ocorrememrpteis. Emjacars, crocodilos e lagartos, por exemplo,
252
quando so submetidos a alta temperatura nascemmachos e sob baixa, nascemfmeas. Em
geral, a temperatura intermediria promove as propores mais semelhantes de machos e
fmeas. Emtemperaturas mais extremas pode ocorrer tambma produo de outros tipos
como o hermafrodita. Na verdade, o principal agente responsvel pela expresso sexual so
os hormnios sexuais, sendo os andrognios responsveis pelo sexo masculino e os
estrognios pelo feminino. Oefeito da temperatura, na realidade, consiste emalterar a atuao
fisiolgica desses hormnios.
Emtartarugas, osexo dasninhadastambm influenciado pelatemperatura deincubao
dosovos(MROSOVSKY, 1980). Temperaturasmaisaltasocasionammaiorproporodefmeas,
enquanto temperaturasmaisbaixas resultamemummaior nmerodemachos (MROSOVSKY,
1980; MROSOVSKY; PROVANCHA, 1992).Atemperatura determinante paraque ocorram
50%demachose50%de fmeas denominada de pivotal (29 C). Se a mdia da temperatura
durante oteromdio de incubaofor mais elevada queatemperatura pivotal, ha prevalncia
de nascimento de fmeas, ao passo que, se a mdia da temperatura for mais baixa, h
prevalncia de machos. Em um mesmo ninho, pode haver o nascimento de diferente
porcentagemde sexo, como 70%de fmeas e 30% de machos (HAMANNet al., 2003).
Empeixes, as caractersticas sexuais e o sexo gonadal podemser modificados pelo
tratamento ps-larval comhormnio por umperodo varivel, iniciando na fase larval da
maioria das espcies, quando as gnadas ainda esto emfase indiferenciada de organizao.
11.3 DETERMINAOGENTICADOSEXO
Um par de cromossomos citologicamente distintos proporciona a base para a
determinao do sexo na maioria dos animaissuperiores e emumnmero reduzido de plantas.
Tais cromossomos so conhecidos como cromossomos sexuais, enquanto os demais so
denominados de autossomos. Existembasicamente trs sistemas de determinao do sexo:
XY, XOe ZW.
11.3.1 Sistema Sexual XY
Sistema predominante entre animais vertebrados e tambmencontrados eminsetos,
como a Drosophila, e at mesmo em plantas dioicas, como o lpulo e o cnhamo. As
fmeas so homogamticas (XX), isto , produzemgametas de ums tipo comrelao aos
cromossomos sexuais, sendoos machosheterogamticos (XY), isto, seus espermatozides
segregampara o par de cromossomos sexuais. Dessa forma, o macho determina o sexo de
sua descendncia pela contribuio do cromossomo X para metade dos zigotos e do
cromossomo Ypara outra metade (Figura 11.1a).
Oque torna o cromossomo Yo determinante do sexo emmamfero a presena de
umgene, chamado SRY. Este codifica umfator de transcrio que faz comque a gnada se
253
Herana e Sexo
torne umtestculo. Otestculo produz andrgeno (testosterona) por meio das clulas de
Leydig que so secretadas no corpo e ativamo fator de transcrio receptor de andrgeno,
levando a ativao da expresso gnica especfica masculina.
Quando iniciaramos estudos da determinao de sexo emDrosophila imaginava-se
que o mecanismo era similar ao apresentado pelos mamferos e a espcie humana. Porm,
constataram que o sexo determinado por um balano entre a relao do nmero de
cromossomos Xe o nmero de conjuntos autossmicos. Ocromossomo Yno essencial
para o desenvolvimento do fentipo macho, embora determine fertilidade. Os genes que
determinama feminilidade esto localizados no cromossomo Xe os genes que determinama
masculinidade se distribuemnos autossomos, podendo originar, almde indivduos normais ,
vrios tipos sexuais como pode ser visto na tabela 11.1.
TABELA 11.1 Razo entre cromossomos X e autossomos e o tipo sexual correspondente em
Drosophila melanogaster (2n = 8).
Cromossomos X e complemento de
autossomos (A)
Razo X/A Sexo
1X 2A 0,50 Macho
2X 2A 1,00 Fmea
3X 2A 1,50 Superfmea
4X 3A 1,33 Superfmea
4X 4A 1,00 Fmea tetraplide
3X 3A 1,00 Fmea triplide
3X 4A 0,75 Intersexo
2X 3A 0,67 Intersexo
2X 4A 0,50 Macho tetraplide
1X 3A 0,33 Supermacho
Fonte: Bridges (1925)
11.3.2 Sistema Sexual XO
Sistema encontrado emalgumas espcies de insetos, pertencentes s ordens hempteros
(percevejos), ortpteros (baratase gafanhotos) e colepteros (besouros), almdos nematides.
Nesse caso, o macho apresenta apenas umcromossomo X, possuindo, portanto, nmero
mpar de cromossomos. Seus espermatozides, almdos autossomos, contmumcromossomo
sexual ou apenas os autossomos. Sendo assim, o macho heterogamtico, ou seja, quem
determina o sexo de seus descendentes. Afmea, por sua vez, contmdois cromossomosX,
homogamtica, e produz apenas umtipo de gameta. Oesquema da determinao do sexo,
nesse caso, mostrado na Figura 11.1b.
254
11.3.3 Sistema Sexual ZW
Sistema que ocorre em muitos pssaros, alguns peixes e em insetos da ordem
lepidpteros (borboletas, mariposas). Os machos tmdois cromossomos sexuais idnticos
(ZZ) produzindo, consequentemente, umnico tipo de gameta. Afmea heterogamtica e,
portanto, quemdetermina o sexo da descendncia (Figura 11.1c).
FIGURA 11.1. Sistemas de determinao do sexo em organismos superiores: a) sistema XY;
b) sistema XO; c) sistema ZW, em que X, Y, Z e W so os cromossomos sexuais e A os
autossomos.
c) Sistema WZ
255
Herana e Sexo
11.4GENESMASCULINIZANTESEFEMINILIZANTES
Apesar da determinaodo sexo ser explicada pelos cromossomos sexuais, entretanto,
existemevidncias emalgumas espcies da presena de genes masculinizantes e feminilizantes
localizados nos autossomos. Uma das evidncias est baseada nofato de que, emalguns casos,
o macho, geneticamentedeterminado, influenciado pelos hormniosfemininos ouvice-versa.
Umcasoextremocitadonaliteraturaemqueumagalinhabotouinmerosovosfrteis duranteo
estdioinicial de sua vida, masdepois, emrazo deuma doena nos ovrios, deixoude produzir
hormniosinibidoresdostestculos. Emconsequncia, elessedesenvolveram, passandoagalinha
a apresentar caracteres masculinos, terminando suavida como pai devrios pintinhos.
Umoutro caso o que ocorre emcaprinos - Capra hircus - determinao sexual do
tipo XY. As fmeas so representadas por 58A+ XXe os machos por 58A+ XY. Nessa
espcie, umgene autossmico P, almde controlar a presena ou ausncia de chifres, tem
efeito masculinizantecompenetrncia completa nasfmeas e incompleta nosmachos. Assim,
umanimal mocho pode ser portador dos gentipos PPou Pp, enquanto os recessivos ppso
chifrudos. Ohomozigoto PPcausa masculinizao de todas as fmeas, as quais so infrteis,
sendo 34%do tipo intersexo e 66%falso macho. J, aquelas que se reproduzemso mochas
heterozigticas (Pp) ou chifrudas (pp). Nos bodes, oalelo Pemhomozigose frequentemente
causa esterilidade. Os animais chifrudos (pp) ou mochos heterozigotos (Pp) aparentemente
so frteis. ATabela 11.2 resume os efeitos fenotpicos do geneP.
TABELA 11.2. Efeitos fenotpicos do gene P com relao presena ou ausncia de chifres
e expresso sexual de caprinos.
PP mochos Pp mochos pp chifrudos
Fmea
XX
100% estreis
34% interesexo
66% falso macho
100%
frteis
100%
frteis
Macho
XY
60% estreis
40% frteis
100%
frteis
100%
frteis
Fonte: Rodrigues e Espeschit(1987)
Umexemplo que difere dos casos apresentados anterioremente ocorre empeixes do
gnero Sarotherodon (tilpia). Adeterminao do sexo na tilpia depende tambmde um
gene autossmico, associado participao de trs cromossomos sexuais (X, W, Y). O
cromossomo Yatua mais emdireo masculinidade do que o cromossomo W. Por outro
lado, o cromossomo Xatua mais emdireo feminilidade do que o cromossomoW. Assim,
pode-se determinar uma ordemdos cromossomos comrelao masculinidade, ou seja:
Y > W > X. No caso do gene autossmico, o alelo dominanteA masculinizante, enquanto
o recessivo feminilizante.
256
TABELA 11.3. Expresso sexual em peixes do gnero Sarotherodon (tilpia) em funo dos
cromossomos sexuais e do gene autossmico.
Gentipos Cromossomos
Sexuais
AA Aa aa
YY
WY
XY
WW
WX
XX
Fonte: Avtalion e Hammerman (1978)
TABELA11.4. Nmero de acasalamentos produzindo prognies com propores variadas de
machos e fmeas.
Nmero de Acasalamentos 14 11 2 33 1 4 7 8 80
% de descendentes fmeas 100 75 62,5 50 43,8 37,5 25 0 Total
Sobo pontode vista da explorao comercial da tilpia, oscruzamentos que produzem
descendncia de 100%machos so altamente desejados, uma vez que os machos apresentam
ganho de peso muito mais rpido do que as fmeas (Figura 11.2). Observe que, com o
Considerando simultaneamente os cromossomos sexuais e o gene autossmico, so
possveis 18constituies genticas diferentes, as quais se encontramrepresentadas na Tabela
11.3. Os paresde cromossomos YYque tmuma forte influncia emdireo masculinidade,
e WX e XX que determinam a feminilidade, o sexo do indivduo independente do gene
autossmico. Entretanto, para os paresWY, XYe WW, ainfluncia do autossomo crtica na
determinao do sexo. Aimportncia do autossomo ainda realada pelo fato de que dos seis
fentipos recessivosaa, todosso fmeas, comexceo dos indivduos portadores do parYY.
Apartir dos dez gentipos femininos e oito masculinos apresentados na tabela 11.3, so
possveis obter oitenta acasalamentos diferentes. Nesses acasalamentos, a proporosexual
da descendncia varia desde 100%machos at 100%fmeas. Onmero de acasalamentos,
produzindo as diversas propores sexuais na descendncia, est apresentado na tabela 11.4.
O acasalamento envolvendo o macho AAYY produz descendncia toda do sexo
masculino, independente do gentipo da fmea usada para o acasalamento. Esse macho
pode ser obtido somente por inverso sexual induzida por hormnios de indivduosAAXY,
os quais so cruzados commachos AAXY.
257
Herana e Sexo
crescimento dos peixes, ocorre uma diferenciaocrescente dos pesos dos machos emrelao
s fmeas, indicando a vantagemcomercial do uso de machos na piscicultura. Emfuno
desse fato, tentativas tm sido realizadas visando reverso sexual por meio do uso de
hormniosmasculinizantes. Emtrabalho conduzidonaUniversidade FederaldeLavras, animais
no estdio de ps-larvas da espcie Orecchromis niloticus, foramtratados como hormnio
mesterolona e se conseguiu at 80%de machos.
FIGURA 11.2. Ganho de peso (g) de machos e fmeas de tilpia (BARD, 1978).
11.5 EVOLUODOSCROMOSSOMOSSEXUAIS
Sob o ponto de vista evolutivo, os cromossomos sexuais parecemter se diferenciado
mais recentemente porqueos rpteis, os anfbios, bemcomo a maioria dos peixes no possuem
cromossomos sexuais ou eles no so morfologicamente distintos. Como sabemos, esses
animais esto entre os seres vivos superiores mais antigos. Nessas espcies, a determinao
gentica do sexo se d por meio de genes responsveis pela produo de hormnios sexuais.
Deve ser mencionado que existemregies homlogas entre os cromossomos sexuais
morfologicamente diferentese os genes l existentes recombinam-se como osdos autossomos,
sendo, ento, aherana chamada depseudoautossmica. Porm, emgeral, a regio homloga
proporcionalmente menor do que a regio no homloga (Figura 11.3).
A distino entre os cromossomos sexuais ocorre em razo de uma restrio da
recombinao entre eles, isto , entre os cromossomosXe Ye tambmentre os cromossomos
Ze W. Emconsequncia, os cromossomos Ye Wpassama ter uma participaoreduzida na
recombinao, isto , envolvendo somente osgenes presentes na regio homloga. Acredita-
258
se, ento, que as mutaes vmacumulando alelos na regio no homolga dos cromossomos
You We aqueles desfavorveis seriamletais aoindivduo, a menos que sejameliminados por
deleo. Coma deleo, vemocorrendo a reduo emtamanho desses cromossomos, os
quais passama concentrar apenas alguns poucos genes responsveis pela expresso sexual
masculina, no caso do Y, ou feminina, no caso do W. H casos emque o cromossomo Y
chega a desaparecer como ocorreu provavelmente comas espcies coma determinao do
sexo do tipo XO. Embora a maioria das espcies dioicas possua o cromossomo You Wde
tamanho menor, h possibilidade de ocorrer o inverso, como o caso doMelandriumalbum,
ilustrado na Figura 11.3. O maior tamanho do cromossomo Y deveu-se, nesse caso,
provavelmente translocaode segmentos cromossmicos quecontmgenes masculinizantes,
aumentando, emconsequncia, o tamanho do cromossomoY.
FIGURA11.3. Esquemas de cromossomos sexuais ilustrando as regies homlogas, emescuro,
e as no homlogas, em claro. As espcies que possuem os cromossomos sexuais Z e W tm
este ltimo sempre de menor tamanho.
11.6 DETERMINAODOSEXOEMABELHAS
Umoutro tipo especial de determinao do sexo o sistema haplodiploide encontrado
emabelhas e outros insetos da ordemHymenoptera.
Estudos revelam a existncia do gene csd (complementary sex determiner) como
sinal primrio no desenvolvimento sexual de abelhas. O gene possui de onze a dezenove
alelos diferentes (MACKENSEN, 1955; LAIDLAWet al., 1956; ADAMS et al., 1977).
Indivduos hemizigotos haploides so machos, indivduos diploides so fmeas quando
heretozigotos, emachos quandohomozigotos. Essemodo de determinao desexo foi descrito
primeiramente emabelhas por Dzierzon (1845) e, somente em1905, o pesquisador Wilson
descobriu o cromossomo sexual.
259
Herana e Sexo
Uma vezfertilizada, a rainha conserva no receptculo seminal umaquantidade suficiente
de espermatozoides que podero ser utilizados durante toda a sua vida. Se os ovos forem
fertilizados e, portanto, o descendente herdar osdois alelos diferentes do genecsd, as protenas
codificadas por eles combinam-se para desencadear o desenvolvimento de uma fmea
diploide. Adiferenciao emrainha ou operria ir depender do tipo de alimentao que a
larva receber, se ela for alimentada comgelia real ser desenvolvida uma rainha. Osistema
falha quando umovo fertilizado herda duas cpias do mesmo alelo do gene, resultando em
ummacho diploide, porm, ele no chega fase adulta uma vez que as operrias os utilizam
como alimento ainda emfase larval (BEYEet al., 2003). Ozango haploide ser originado
de vulo no fertilizado, fenmeno conhecido como partenognese (Figura 11.4) e ter
apenas umalelo csd.
FIGURA 11.4. Determinao do sexo emabelha. Na espermatognese, a meiose anormal,
havendo a formao de espermatozoides com o mesmo nmero de cromossomos da clula
somtica (Adaptado de PETIT E PRVOST, 1973).
11.7 GINANDROMORFOS
Ocomportamento cromossmicoanormal emalguns animais poderesultar emmosaicos
sexuais denominadosginandromorfos. Esse fenmenoconsiste emo animal apresentar partes
comcaractersticasfemininas, e outras partescomcaractersticas masculinas. Emalguns casos,
tanto as genitliase gnodas masculinas quantoas femininas podemestar presentes no mesmo
animal. Afrequncia natural emalgumas moscas temsido de 1/2000 ou 1/3000.
260
Ograude ginandromorfismo varivel, podendo ir desde umabilateralidade sexual, ex.
Drosophila, isto , metade do corpo deumsexo e metadedo outro, at aexistncia de apenas
alguns traosdo sexo oposto (Figura11.5). Nos casosde bilateralidade sexual, asduas pores
so quase sempreseparadaslongitudinalmente, sendorarssimoo ginandromorfismotransversal.
Os ginandromorfos muitas vezes ocorrememrazo da ao de hormnios sexuais que so
reguladores qumicos. Estessoproduzidos por certasglndulasdocorpoeatuamemqualquer
parte dele, influenciando o desenvolvimento de tecidos e rgos.
Umcaso bemconhecido ocorre normalmente emgmeos de bovinos. Esses gmeos,
originados de dois ovos separados, podemconsistir de dois machos, duas fmeas ou um
macho e uma fmea. Quando os gmeos so do mesmo sexo, o desenvolvimento ocorre
normalmente. Mas quando um machoe o outro fmea, como o testculodo feto masculino
desenvolve-se antes do ovrio do feto feminino, os hormnios masculinos passampara o
organismo dafmea, emdecorrncia da conexo de vasos sanguneosnas placentas, tornando-
se intersexuada, estril. Tais fmeas anormais so conhecidas como vacas maninhas ou
freemartin(Figura 11.6)
Sempre que ocorrer conexo dos vasos sangunea dos fetos, as fmeas oriundas do
par de gmeos sero sempre afetadas, tendo os seus rgos sexuais modificados na direo
masculina. Emalguns poucos casos emque no ocorre conexo dos vasos sanguneos, as
fmeas desenvolvem-senormalmente. Emoutrosanimais, como carneiros esunos, os gmeos
nunca soligados por conexes vasculares, no se encontrando, assim, tais tipos intersexuados.
EmDrosophila o ginandromorfo se diferencia de umintersexo quanto origeme
constituio cromossmica. Oginandromorfo temorigemnuma irregularidade mittica,
enquanto que o intersexo formado por uma combinao gamtica que resulta numndice
sexual entre 0,5 e 1,0. Oginandromorfo apresenta emummesmo indivduo, clulas com
diferentes nmeros de cromossomos. No intersexo o nmero de cromossomos constante
para todas as clulas do indivduo.
FIGURA 11.5. Ginandromorfo em Drosophila.
261
Herana e Sexo
FIGURA 11.6. Ocorrncia de vaca maninha em bovinos (Adaptado de COLIN, 1956).
11.8 DETERMINAODOSEXOEMPLANTAS
Odimorfismo sexual emplantas superiores uma caracterstica de menor importncia
quando comparada comos animais. De fato, a grande maioria das plantas hermafrodita e,
portanto, apresentamos dois sexos emuma mesma flor. Existem, entretanto, outros tipos de
expresso sexual, tais como: monicas - possuemrgos masculinos e femininos emflores
separadas, porm, na mesma planta, e diicas - possuemrgos masculinos e femininos em
plantas diferentes.
Aexpresso sexual nas plantas est tambmsobcontrole gentico. Emalgumas espcies,
esse controle realizado por cromossomos sexuais, sendo o sistemaXYo mais comumente
encontrado. Como exemplo, pode-se citar as espcies Cannabis ruderalis (cnhamo),
Humulus lupulus (lpulo), Melandriumalbum, Asparagus officinalis (Aspargo) e Spinacia
oleracea (espinafre). Omorango silvestre (Fragaria vesca) segue o sistemaZW.
Outro tipo de controle gentico mais frequente emplantas aquele efetuado no por
cromossomos sexuais, mas sim por genes sexuais autossmicos. Na realidade, a grande
maioria das plantas superiores no apresenta os cromossomos sexuais. Umexemplo do
controle da expresso sexual por intermdio de genes autossmicos ocorre em pepino -
Cucumis sativus L. Nessa planta, o tipo sexual mais comum o monoico, ocorrendo tambm
os tipos ginoico, andromonico e hermafrodita. As plantas ginoicas produzemapenas flores
femininas, enquanto as andromonoicas possuemflores masculinas e hermafroditas na mesma
planta. Essas expresses sexuais so controladas por dois genes Fe M, que se interagemda
seguinte forma:
262
Os vrios tipos de expresso sexual no pepino permitem a produo de sementes
hbridas de uma maneira bastante simples. Para isso, basta que umdos genitores do hbrido
seja uma linha ginoica. Nesse caso, toda semente produzida pelas plantas ginoicas so
necessariamente hbridas, uma vez que as mesmas devemreceber plen de outras plantas
que possuamflores masculinas. Como as plantas ginoicas s possuemflores femininas, sua
manuteno feita pela aplicao de giberelina, a qual induz, temporariamente, a produo
de flores masculinas, permitindo, assim, a autofecundao da planta fmea.
11.9 HEREDITARIEDADEEMRELAOAOSEXO
Neste tpico, objetivou-se estudar o controle gentico de caracteres que se expressam
de forma particular emalgumaspecto nos indivduos de sexos diferentes. Tais caracteres
podemocorrer emdecorrncia de genes situados nos cromossomos sexuais, cuja herana
explicada pela passagemdos cromossomos sexuais dosgenitores para os filhose denominada
de herana ligada ao sexo. Porm, h tambmos caracteres controlados por genes situados
nos autossomos e que apresentamexpresses influenciadas pelo sexo, principalmente os
hormnios sexuais. Esses ltimos caracteres apresentamdois tipos de controle gentico: a
herana influenciada pelo sexo e a herana limitada ao sexo.
11.9.1 Herana Ligada aos Cromossomos Sexuais
Como jfoi comentado, comuma ocorrncia de cromossomossexuais, principalmente
nos animais, havendo umsexo homogamtico e outro heterogamtico. Apesar de serem,
esses cromossomos, os principais responsveis peladeterminao do sexo, elespodempossuir
tambm outros genes no diretamente relacionados com o sexo. Dessa forma, de se
esperar que o controle gentico dos caracteres, condicionado por genes situados nos
cromossomos sexuais, seja algo diferente dos casos estudados anteriormente.
Vejamosumexemplo emgalinceas, emque o sexohomogamtico -ZZ- o masculino
e o heterogamtico - ZW-, o feminino. Entre os genes situados no cromossomo Z, est o
responsvel pelo carter barrado - B - nas aves carij. O macho pode ser homozigtico
para barrado Z
B
Z
B
ou no barrado Z
b
Z
b
ou ainda heterozigtico Z
B
Z
b
. J, a fmea possui
apenas umalelo desse geneZ
B
WouZ
b
Wsendo, portanto, denominadahemizigtica. Assim,
ff MM; ff Mm: monoica
FF MM; FF Mm; Ff MM; Ff Mm: ginoica
FF mm; Ff mm: hermafrodita
ff mm: andromonoica
263
Herana e Sexo
cruzando-se um macho no barrado com uma fmea barrada, obtm-se o resultado
apresentado na Figura 11.7.
Observa-se que os descendentes do sexo masculino da gerao F
1
so barrados e os
do sexo feminino, no barrados. Os filhos - sexo masculino - manifestaramo fentipo herdado
da me e as filhas, o fentipo do pai. Houve, assim, uma transposio de fentipos e, por
isso, esse tipo de herana denominada de zigue-zague.
FIGURA 11.7. Herana da presena ou ausncia de barras nas penas da galinha carij, em
razo de um gene ligado no cromossomo sexual Z. Observe na gerao F
1
que os descendentes
do sexo feminino expressam o fentipo do pai e os do sexo masculino, o fentipo da me, da a
denominao de herana em zigue-zague.
No caso de umalelo recessivo situado no cromossomo X, por exemplo, teremos na
populao uma maior proporo de machos exibindo o fentipo, especialmente se o alelo for
raro. Isso acontece porque eles so hemizigticos e o recebemsomente das mes homo ou
heterozigticas. J, o menor nmero defmeas decorrente do fato de elas teremque receber
o alelo dos dois genitores para expressaremo fentipo recessivo.
264
Os caracteres ligados ao sexo podemser usados para separar os sexos - sexagem-
e so muito teis aos criadores, especialmente quando eles se expressamprecocemente no
indivduo. Como a separao dos sexos realizada combase nos prprios fentipos dos
indivduos, emprega-se tambmo termo auto-sexagem. No caso de aves, a vantagemda
sexagemprecoce evidente tanto para os animais destinados postura quanto para o corte.
Numa criao de aves para a postura, a manuteno dos machos at o aparecimento do
dimorfismo sexual acarreta enorme prejuzo. Igualmente, sabe-se que o ganho de peso dos
machos maior que o das fmeas. Assim, a separao precoce dos machos destinados ao
abate essencial para a viabilidade da avicultura de corte.
Por isso, vrias tentativas de sexagemtmsido feitas. Uma tcnica que vemsendo
usada a sexagemde pintos por meio do exame da cloaca. No entanto, uma operao que
demanda tempo, necessita de umtcnico especializado e no completamente eficiente.
Uma prtica alternativa, que menos dispendiosa e de grande eficincia, a autossexagem
por meio de caracteres ligados ao sexo e que se expressamna fase jovemdo animal. Um
exemplo empregado para esse fim a velocidade de empenamento em pintinhos, que
controlada por umgene situado no cromossomo Z, sendo o alelo dominante Kresponsvel
pelo empenamento lento, e o recessivo k responsvel pelo empenamento rpido. Os dois
fentipos podemser diferenciados empintos comoito a doze dias. Apartir do cruzamento de
machos comempenamento rpido Z
k
Z
k
comfmeas de empenamento lento Z
K
W, todos os
descendentes machos tero empenamento lento - Z
K
Z
k
- e todos os descendentes femininos
tero empenamento rpido - Z
k
W.
Outro exemplo de autossexagemempregado emnvel industrial acontece como bicho-
da-seda (Bombix mori) e envolve o cromossomo W. Nesse caso, o macho tambm o
preferido porque ele superior fmea como produtor de seda. Inicialmente, foi descoberto
umgene autossmico representado pelos alelos B, reponsvel por ovo preto e b, responsvel
por ovo incolor. Os cientistas japoneses conseguiramtransferir o aleloBpara o cromossomo
W por meio de translocao. Consequentemente, o cruzamento de fmeas que produzem
ovos pretos - ZW
B
bb - commachos do gentipo ZZbb, produzir descendentes fmeas que
sero sempre provenientes dos ovos pretos e os machos, dos ovos incolores. Essa
autossexagemvemsendo realizada por meio de mquinas de sexagemque reconhecema cor
do ovo.
Outra classe de caracteres ligados ao sexo refere-se ao cromossomo Yque possui
alguns genes que lhe so exclusivos, na poro encurvada que no homloga ao X.
Esses genes, tambm so conhecidos como genes holndricos (do grego holos,
completamente, e andros, masculino), os quais so quase na totalidade relacionados
expresso sexual masculina e somente so passados do pai para o filho. Todo homem
afetado filho de umhomemtambmafetado; todos os seus filhos sero afetados, e as
265
Herana e Sexo
filhas sero normais. O inverso ocorre comos genes situados na regio no homloga
do cromossomo W.
Umexemplo interessante relacionado comos cromossomos sexuais a manifestao
da cor da pelagem em algumas raas de gatos. As cores amarela e preta devem-se,
respectivamente, aos alelos Ee e, situados no cromossomo X, e ocorre tambma cor branca,
emrazo de umcontrole gentico autossmico. No caso da fmea, ela poder ser X
E
X
E
, ou
seja, amarela e branca; X
e
X
e
, preta e branca e X
E
X
e
, amarela, preta e branca. J, os machos
s podemser X
E
Y, amarelo e branco e X
e
Y, preto e branco. Dessa forma, explica-se o fato
amplamente conhecido pela comunidade de que todos os animais de trs cores so sempre
fmeas.
Uma indagao que poderia ainda ser feita com relao s cores desses gatos
como explicar a ampla variao no padro de cores, isto , como explicar o fato de que
duas fmeas X
E
X
e
tenhamas cores amarelo e preto empropores muito diferentes. Isso
pode ser esclarecido, considerando umfenmeno interessante que acontece nos mamferos,
que a inativao de umdos cromossomos X, emtodas as clulas somticas das fmeas,
a partir de umcerto estdio de desenvolvimento do embrio. Portanto, emcada clula
somente umcromossomo X fica descondensado e funcional, enquanto que o outro fica
condensado, constituindo a heterocromatina facultativa, referida no Captulo 4, e que recebe
o nome de cromatina sexual ou corpsculo de Barr. Por meio de exame citolgico, esse
corpsculo visvel no ncleo interfsico, aps corado, e permite identificar o sexo
determinado biologicamente. Isso acontece porque no momento da condensao de um
dos cromossomos X emcada clula somtica, ela ocorre ao acaso emtodo o corpo do
embrio, ou seja, pode ser inativado tanto o cromossomoXmaterno quanto o cromossomo
X paterno. Apartir desse momento, as mitoses sucessivas produzemclulas filhas que
tendema ficar prximas, formando grupos de clulas que possuemo mesmo cromossomo
X ematividade ou inativado.
As fmeas heterozigticas (X
E
X
e
) so geralmente malhadas, compartes docorpo pretas
e partes amarelas. Aexplicao para esse fato que, nas regies pretas, o cromossomo X
inativado portador doalelopara cor amarelaE, enquantonas regies amarelaso cromossomo
Xinativado o portador do alelo para cor preta e. Aproporo desigual de amareloe preto de
fmeas X
E
X
e
depende do tamanho e do nmero das reas da superfcie do corpo onde est
funcional o cromossomoX
E
ouo X
e
. Emconsequncia dainativao de umdos cromossomos
X, outro esclarecimentoque tambmdeve ser feito sobre otipo de interao entreos alelosE
e e, que primeira vista parece tratar-se da codominncia. Na verdade, no se conhece o tipo
de interao entre os alelos, pois eles expressam-se isoladamente e nunca juntos na mesma
clula. Como os machos tmsomente umcromossomo X, eles nunca tmessas duas cores
simultaneamente, poisapresentamapenas umououtro alelo.
266
11.9.2 Herana Influenciada Pelo Sexo
Aherana influenciada pelo sexo quando a expresso de umgene autossmico
afetada pelas condies fisiolgicas do sexo na qual se encontra. no comportamento dos
heterozigotos que detectamos essa influncia, pois, nos homozigotos, o alelo se manifesta
como deveria faz-lo emqualquer sexo. Mas, no heterozigoto, ele age como dominante num
sexo e como recessivo no outro.
Umexemplo interessante a esse respeito encontrado na raaAyrshire de bovinos.
Nessa raade gado leiteiro, oanimal branco commanchas vermelhas no pescoo e espduas,
podendo atingir os flancos. Diz-se, ento, que ele vermelho-branco. s vezes, porm, as
malhas so de cor mogno e o animal dito acaju - branco commogno. Oalelo que determina
essa modificao na cor dasmanchas simbolizado porM
1
, sendo queseualeloM
2
determina
a cor vermelha. Assimsendo, se o animal for M
1
M
2
, ele ser acaju, se macho, e vermelho-
branca, se fmea. Os trs gentipos possveis e seus respectivos fentipos esto apresentados
na Figura 11.8.
FIGURA11.8. Constituies genticas e fentipos dos dois sexos de bovinos da raa Ayrshire
relativos cor da pelagem.
MACHO FMEA
M
1
M
1
- Acaju M
1
M
1
- Acaju
M
1
M
2
- Acaju M
1
M
2
Vermelho-branco
M
2
M
2
- Vermelho-branco M
2
M
2
Vermelho-branco
267
Herana e Sexo
11.9.3 Herana Limitada Pelo Sexo
Encontram-se aqui includos todos aqueles casos de caracteres cuja expresso s se
manifesta em um dos sexos. De modo anlogo herana influenciada pelo sexo, os
caracteres limitados ao sexo so tambmcontrolados por genes autossmicos. Umexemplo
ocorre embovinos. Nesses animais, somente a fmea apresenta produo de leite. Contudo,
sabe-se que os touros tmumpapel fundamental na determinao da produo de leite de
suas crias fmeas. Isso quer dizer que, apesar de no expressar fenotipicamente o carter,
os touros so portadores de alelos para a produo de leite. Sendo assim, o maior ou
menor potencial para produo de leite dos touros avaliado pelo comportamento de suas
crias fmeas obtidas pelo cruzamento do referido touro comdiversas vacas. Outro exemplo
de herana limitada pelo sexo e que apresenta importncia econmica a produo de
ovos emgalinhas.
268
PROBLEMASPROPOSTOS
1. Em sunos, o nmero diploide de cromossomos 38. Apartir dessa informao,
pergunta-se:
a) Qual o nmero de autossomos emumespermatozoide de umcachao?
b) Qual a constituio cromossmica do sexo masculino e feminino?
c) Uma porca produziu uma leitegada com12 leites. Qual a probabilidade de todos
seremdo sexo feminino?
2. Qual o animal que temav, mas no tempai? Explique.
3. Setenta e oito cromossomos so encontrados nas clulas somticas de uma galinha.
a) Qual o nmero de autossomos e o tipo de cromossomo sexual encontrado nas
clulas somticas de uma fmea e de ummacho?
b) Numa ninhada foramobtidos 14 pintinhos. Qual a probabilidade de pelo menos
sete seremdo sexo feminino?
4. De uma vaca de excelentes qualidades, h possibilidade de seobter cinco descendentes.
a) Qual a probabilidade de todos seremdo sexo feminino?
b) Se quatro descendentes foremdo sexo feminino, qual a probabilidade do ltimo
tambmser do sexo feminino?
5. Umcriador deseja eliminar o seu touro de excelentes qualidades, porque os seus seis
primeiros descendentes foramtodos do sexo masculino. Adeciso do criador est
certa ou errada? Justifique sua resposta.
6. Emgalinhas, a altura do animal se deve a umgene ligado ao cromossomoZ. Oalelo
dominante Dconfere altura normal e o danimal ano. Do cruzamento de ummacho
normal com uma fmea an foram obtidos 10 descendentes. Qual a condio e a
probabilidade de que os 10 pintinhos sejamdo sexo feminino e anes?
7. Chifres so ausentes na raa de carneiro Suffolk, mas todos os animais so chifrudos
na raa Dorset. Quando uma fmea Suffolk semchifres cruzada commachos Dorset
chifrudos, as fmeas F
1
so todas semchifres, mas os machos so todos chifrudos.
Resultados idnticos ocorremquando uma fmeaDorset chifruda cruzadacommacho
Suffolk semchifres. Do cruzamento de animais F
1
, obtida a seguinte descendncia:3/
269
Herana e Sexo
4 das fmeas semchifres e 1/4 comchifres; 3/4 dos machos comchifres e 1/4 sem
chifres. Qual a sua explicao gentica para esses resultados?
8. Nas aves, a cor da pele umcarter de grande importncia, uma vez que interfere na
aceitao do produto pelo consumidor. Foi observado que o macho pode apresentar
pele preta, intermediriaouamarela, eafmea, apenas as coresintermediria ouamarela.
Qual a explicao gentica para esse carter?
9. Foi verificado emgatos que a cor branca da pelagemse deve a umgene autossmico
e que as cores amarelas e pretas so decorrentes de dois alelos ligados ao sexo. A
partir dessas informaes, por que apenas as fmeas podemapresentar as trs cores?
10. Os pecuaristas sempre se preocupam em selecionar touros, visando a uma maior
produo de leite. Como se sabe, apenas as fmeas produzemleite, dessa forma, qual
a razo para esse comportamento dos pecuaristas?
270
271
Gentica Quantitativa
12 GENTICAQUANTITATIVA
12.1 INTRODUO
Para as caractersticas, cuja herana foi examinada nos captulos anteriores, notamos
que as classes fenotpicas eramdistintas e facilmente separveis umas das outras. Asemente
do milho, por exemplo, enrugada ou lisa, os bovinos apresentamou no chifres, podemter
tambma pelagembranca, ruo ou vermelha e assimpor diante. Caractersticas como essas
apresentamsegregao descontnua e so denominadas qualitativas.
No entanto, nem todas as caractersticas apresentam segregao descontnua. A
produo de gros de plantas, emuma populao, pode variar amplamente, e, se for feito um
estudo de sua segregao, iremos encontrar uma distribuio essencialmente contnua, isto ,
entre os tipos mais extremos apareceminmeros fentipos intermedirios. Muitas outras
caractersticas se expressamdessa maneira. Alis, a maioria das caractersticas de interesse
econmico, que os geneticistas e melhoristas de plantas e animais normalmente trabalham,
apresenta segregao contnua, tais como produo de leite, altura e ciclo vegetativo de
plantas, converso alimentar, produo de ovos.
notrioque, parao estudodessas caractersticas, oprocedimentonormalmenteutilizado
emgenticaqualitativa -propores fenotpicas- nopode ser empregado. Essas caractersticas
so estudadas dentro de uma rea especializada denominada Gentica Quantitativa. Oestudo
dos caracteresquantitativosutiliza, emmuitassituaes, aestatstica. Issoporque, viaderegra, os
fentiposobservados- produodegros, deleite, alturadeplantas. - soobtidospor mensuraes,
nohavendopossibilidadedeseidentificar classesfenotpicasdistintas, comonocasodoscaracteres
qualitativos. Dessemodo, os estudos genticossorealizadosapartir dasestimativas das mdias,
varincias, coeficientesderegresso e correlao.
12.2 HIPTESEDOSFATORES MLTIPLOS- POLIGENES
Vamos exemplificar o estudo de umcarter quantitativo, utilizando os dados obtidos
na Universidade Federal de Lavras, para o peso das sementes do feijo (Tabela 12.1). Neste
estudo foramempregadas duas linhagens como genitores: Manteigo Fosco 11 - P
1
- com
umpeso mdio de sementes de 445 mg e Rosinha EEP125-19 - P
2
- com179 mgemmdia.
272
Observa-se, na Tabela 12.1, que, apesar de estaremsendo utilizadas duas linhagens
como genitoras e, portanto, homozigticas, ocorre variao dentro de cada uma delas.
Para a linhagemManteigo Fosco 11, por exemplo, o peso das sementes varia de 400 a
480 mg. Tambm entre as plantas da gerao F
1
, que apresentam todas a mesma
constituio gentica, ocorre variao. Essa variao, evidentemente, de origemambiental
e foi decorrentes de pequenas diferenas nas condies ambientais do campo experimental.
J, a gerao F
2
apresenta uma variao muito maior do que a dos pais e da gerao F
1
,
como pode ser constatada pela amplitude de variao e pela varincia -
2
7
- obtida para
essa gerao. Esta maior estimativa da variao , emparte, decorrente da influncia do
ambiente - variao ambiental - e tambm segregao e recombinao dos genes -
variao gentica.
Asimples inspeo dos dados apresentados na Tabela 12.1 evidencia que o estudo da
herana desse carter deve ser diferente dos anteriormente discutidos (Captulo 5), como,
por exemplo, aherana datexturadasementedo milho, que umcarter tipicamente qualitativo.
Emrazo das particularidades da herana de umcarter quantitativo, muitos pesquisadores
no incio do sculo acreditavamque esses tipos de caractersticas no eramcontrolados por
genes mendelianos. Contudo, a partir de 1910, Nilsson-Ehle e East, independentemente,
propuserama hiptese dos fatores mltiplos para explicar a herana dos caracteres que
apresentamdistribuio contnua.
Ahiptese dos fatores mltiplos fundamentada no fato de que uma caracterstica
influenciada por umgrande nmero de genes, cada qual contribuindo comumpequeno efeito
para o fentipo. Assim, para entendermos o controle gentico de umcarter quantitativo,
suponhamos, hipoteticamente, no nosso exemplo, que no exista influncia do ambiente. Os
dois genitores utilizados diferemem266 mg (445-179). Inicialmente vamos considerar que
a caracterstica seja controlada por umnico gene com2 alelos (A
1
e A
2
), semdominncia e
aditivo, isto , o efeito de umalelo se soma ao efeito do outro alelo para formar o fentipo.
Desse modo, na gerao F
2
so possveis 3 gentipos: A
1
A
1
, A
1
A
2
e A
2
A
2
. Nessa situao,
fcil visualizar que a contribuio de cada alelo efetivo, isto , o alelo que contribui
favoravelmente para o fentipo de 266/2 =133 mge corresponde superioridade do alelo
efetivo (A
1
) emrelao ao alelo no efetivo (A
2
). Assim, os trs gentipos corresponderiam
aos fentipos 445 mg, 312 mg e 179 mg, respectivamente. Se considerarmos 2 genes em
vez de um, j so possveis 5 fentipos diferentes na F
2
, e a contribuio de cada alelo efetivo
passa a ser de 66,5 mg (266/4 = 66,5).
Na realidade, pode-se demonstrar que com o aumento do nmero de genes a
segregao fenotpica da F
2
obedece ao desenvolvimento do binmio (a + b)
m
, emque m
representa o nmero de alelos segregantes, e a e b os alelos efetivos e no efetivos,
respectivamente.
273
TABELA 12.1. Distribuio de frequncia, mdias e varincias (7
2
), para o peso mdio de
sementes do feijo (Phaseolus vulgaris, L.) das linhagens Manteigo Fosco 11(P
1
) e Rosinha
EEP 125-19 (P
2
) e das geraes F
1
, F
2
, RC
1
e RC
2
, adaptada de Reis et al. (1981).
Classe
Peso mdio (mg)
Geraes
P
1
P
2
F
1
F
2
RC
1
RC
2
14 1
15 1
16 1 1
17 5 2 4
18 13 3 5
19 7 3 4
20 1 5 2
21 2 7
22 14 10
23 1 13 8
24 21 1 6
25 2 14 4
26 2 14 1 1
27 5 9 2
28 10 11 1
29 4 12 3 1
30 4 13 4
31 2 5
32 7 3
33 5 2
34 2 1
35 6 3
36 2 4
37 2 1
38 1
39 2 1
40 1 1
41 1 3
42 1
43 7
44 8 1
45 2
46 2
47 2
48 5
Total
Mdia
7
2
29 28 30 169 31 54
445,00 179,00 279,00 266,00 335,00 216,00
482,76 132,80 323,68 2220,98 2401,00 831,76
274
TABELA 12.2. Nmero de alelos efetivos e no efetivos das diferentes classes fenotpicas
da gerao F
2
e os respectivos fentipos.
Nmero de alelos
Frequncia fenotpica
Efetivos No efetivos
Fentipos(mg)
1/16 4 0 445,0
4/16 3 1 378,5
6/16 2 2 312,0
4/16 1 3 245,5
1/16 0 4 179,0
Para o caso de um gene com dois alelos, temos: m= 2 e o binmio ser
(a + b)
2
= a
2
+ 2ab + b
2
. Tomando a representativo do alelo A
1
e b do alelo A
2
, teremos
1A
1
A
1
+ 2A
1
A
2
+ 1A
2
A
2
ou 1/4 A
1
A
1
+1/2 A
1
A
2
+ 1/4 A
2
A
2
, que a segregao tpica de
herana monognica.
Generalizando, para malelos a expanso do binmio fornecida por:
& $
i m i
m
i
i
m
m
b a C b a
>
?
0
? @
0
emque, i equivale ao nmero de alelos efetivos emcada classe genotpica.
Sejam, por exemplo, 2 locos (Ae B), cada umcom2 alelos efetivos, A
1
e B
1
, e A
2
e
B
2
no efetivos. Nesse caso, m= 4, e o desenvolvimento do binmio fornece:
& $
4
4 4 0 3 3 1 2 2 2 1 1 3 0 0 4
4 4 4 4 4
4 3 1 2 2 1 3 4
a+b
a 4a b 6a b 4 b b
C a b C a b C a b C a b C a b
a
? @ @ @ @
? @ @ @ @
Essa expanso representa uma segregao 1:4:6:4:1 na gerao F
2
, ou seja, 1 em16
indivduos dever ter s alelos efetivos, o termo a
4
corresponde ao gentipo com4 alelos
efetivos A
1
A
1
B
1
B
1
, que ocorremcoma frequncia de 1/16. Otermo 4a
3
b
1
indica que so
esperados 4/16 de gentipos contendo 3 alelos do tipo a (efetivos) e um do tipo b (no
efetivo), ou seja, 2/16 dos gentipos sero A
1
A
2
B
1
B
1
e 2/16 sero A
1
A
1
B
1
B
2
e assimpor
diante. O fentipo produzido pelo gentipo A
1
A
1
B
1
B
1
a
4
evidentemente, o mximo e
equivale a 445,0 mg. Para a classe a
3
b
1
houve a substituio de umalelo efetivo por outro
no efetivo. Assim, o fentipo dessa classe ser reduzido por um valor equivalente
contribuio do alelo efetivo, isto , 445,0 mg 66,5 mg = 378,5 mg. Adotando-se esse
procedimento obtm-se os fentipos para as demais classes da gerao F
2
. Na Tabela 12.2,
apresentam-se as frequncias fenotpicas esperadas emF
2
para as diferentes classes e os
respectivos fentipos.
275
TABELA12.3. Contribuio de cada alelo efetivo e nmero de fentipos existentes na gerao
F
2
, com diferentes nmeros de genes controlando o carter peso de sementes do feijo.
Nmero de
genes
Nmero de
alelos totais
Nmero de
fentipos
Contribuio de cada alelo
efetivo* (mg)
1 2 3 133,00
2 4 5 66,50
3 6 7 44,30
4 8 9 33,25
5 10 11 26,60
10 20 21 13,60
100 200 201 1,33
B B B B
n m = 2n 2n + 1 266/m
* Considerandohipoteticamente ausncia do efeito ambiental e a diferena entre os genitores de 266 mg.
Agrande maioria dos genes envolvidos no controle de caracteres quantitativos no
pode ter os seus efeitos isolados e, portanto, no se enquadra na definio de genes ou
fatores. Por essa razo, foi proposta a substituio do termo fatores mltiplos por poligenes.
Cada gene que controla umcarter quantitativo possui pequeno efeito e pode suplementar
outros produzindo efeitos quantitativos que podemser mensurveis.
Resta ainda salientar que, almdo grande nmero de genes envolvidos, umoutro fator
que dificulta o estudo dos caracteres quantitativos o efeito acentuado do ambiente. Como
vimos na Figura 12.1, quando umcarter controlado por umgene comdois alelos, so
produzidos trs fentiposdistintos na gerao F
2
. Se, contudo, o ambienteestiver influenciando
a expresso do carter, fentipos adicionais aparecero. Quando o efeito do ambiente
muito pronunciado e mesmo estando presente apenas umgene, a segregao da F
2
pode, at
Com3genes, migual a 6e so possveis 7fentipos na proporode 1:6:15:20:15:6:1,
e a contribuio de cada efetivo passa a ser de 44,33 mg (266/6 = 44,33). Na Tabela
12.3, apresentado o valor da contribuio de cada alelo efetivo e tambmo nmero de
fentipos possveis como incremento do nmero de genes envolvidos. Podemos notar que,
medida que aumentamos o nmero de genes, h um incremento no nmero de classes
fenotpicas, diminuindo a diferena entre elas. Isso faz comque a segregao na F
2
tenda
para uma distribuio contnua, como pode ser constatado na Figura 12.1.
Na Tabela 12.3, possvel observar tambm que, com o aumento do nmero de
genes, diminui a contribuio de cada alelo efetivo para o carter. exatamente nesses dois
fatores, grande nmero de classes fenotpicas e pequena contribuio de cada alelo efetivo,
que se baseia a hiptese dos fatores mltiplos.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
276
mesmo, tender para uma distribuio contnua, o que, evidentemente, ircomplicar o trabalho
do geneticista que estiver envolvido emestudar este carter.
Emresumo, podemos dizer que a dificuldade do estudo dos caracteres quantitativos
reside emdois fatos: o grandenmero de genes envolvidose o pronunciado efeitodo ambiente.
Isso faz comque geneticistas e melhoristastenhamde trabalhar, via de regra, compopulaes
grandes e utilizar parmetros estatsticos para estudar este tipo de carter.
FIGURA 12.1. Distribuio de frequncia para o carter peso das sementes do feijoeiro,
considerando ausncia de efeito ambiental e diferentes nmeros de genes de efeito aditivo: A)
um gene; B) dois genes; C) quatro genes; D) oito genes.
277
BOX 12.1. PRIMEIRO TRABALHO DE ESTUDO DE CONTROLE GENETICO DE
CARTER QUANTITATIVO
Um dos primeiros trabalhos, para explicar o controle gentico de um carter
quantitativo, foi realizado por umgeneticista em1915, o Dr. EAST. Ele trabalhou como
carter comprimento da corola da flor deNicotianalongiflora, ele possua dois genitores
que diferiammuitonocomprimentodacorola. Acorolado P
1
tinha93,4mmde comprimento
e do P
2
40,60mm. Adistribuio de frequncia das geraes F
1
e F
2
e do cruzamento foi:
Fonte: East, 1916
Veja que ocorreu variao no comprimento da corola das plantas do P
1
e P
2
. Essa
variao deve ser toda ambiental, pois os genitores eramhomozigotos para o referido
Comprimento da corola (mm) P
1
P
2
F
1
F
2
34 1
37 4
40 28
43 16
46
49
52 1
55 4 5
58 10 16
61 41 23
64 75 18
67 40 62
70 3 7
73 25
76 1
79 6
82 4
85 22
88 2
91 16
94 32
97 6
100 1
Mdia 40,61 93,37 63,53 69,78
Desvio (s) 2,00 2,23 2,92 6,79
Total 49 57 173 190
278
carter. Amdiada gerao F
1
foi intermediria entre os genitores. Nessa gerao, tambm
ocorreu variao pelo efeito do ambiente, uma vez que na gerao F
1
todos os indivduos
devempossuir o mesmo gentipo. Na gerao F
2
a mdia foi semelhante a dos genitores
e da F
1
. Porma variao foi muito maior. Essa maior variao decorrente do efeito do
ambiente, como j comentado anteriormente, mas tambm segregao e recombinao
dos genes, que controlamo carter.
Agrande variao gentica, na gerao F
2
, pode ser explicada por meio da hiptese
dos fatores mltiplos. Ou seja, se o carter fosse controlado apenas por um gene, a
diferena entre os pais & $ 8 , 52 6 , 40 4 , 93
2 1
? > ? ? > D P P seria explicada por esse
nico gene. Nesse caso, na gerao F
2
, teramos trs gentipos e trs fentipos; A
1
A
1
=
93,4 mm; A
1
A
2
= 67,0mmeA
2
A
2
= 40,6 mm. Acontribuio de cada alelo efetivo seria
igual a D/m, emque, m o nmero de alelos, no caso dois. Ento, a contribuio de
cada alelo efetivo, favorvel para melhorar a expresso do carter, no exemplo maior
comprimento de corola, seria de 52,8/2=26,4 mm. Comdois genes (Ae B) controlando
o carter, a contribuio do alelo efetivo passaria a ser D/m= 52,8/4 =13,2. Usando o
mesmo raciocnio j comentado, tem-se na gerao F
2
.
Considerando mais genes podem-se obter os seguintes dados:
Nmero de genes Nmero de alelos
totais
Nmero de fentipos Contribuio de cada
alelo efetivo (mm)
1 2 3 26,40
2 4 5 13,200
3 6 7 8,800
4 8 9 6,600
5 10 11 5,280

10 10 21 2,640

100 200 201 0,264

n m = 2n m+1 52,8/m
Frequncia
fenotpica
Nmero de Alelos Fentipos
(mm)
Efetivos No Efetivo
1/16 4 0 93,4
4/16 3 1 80,2
6/16 2 2 67,0
4/16 1 3 53,8
1/16 0 4 40,6
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
279
Veja que o aumento no nmero de genes diminui a contribuio de cada alelo
efetivo para o carter. Ofundamento dahiptese dos fatores mltiplos o grande nmero
de classes fenotpicas e a pequena contribuio de cada alelo efetivo. Veja na figura 12.1
que, na gerao F
2
, avariao gentica decorrentedo grande nmero de genes associados
ao efeito do ambiente temuma distribuio quase contnua (normal).
12.3 INTERAESALLICAS
semelhana do que ocorre para os caracteres qualitativos, os poligenes apresentam
tambminteraes allicas, as quais podemser aditiva, dominante e sobredominncia. Para
mostrar como atuamesses trs tipos de interao allica, vamos considerar ummodelo de
umloco comdois alelos (B
1
e B
2
), em que B
1
representa o alelo efetivo e B
2
o alelo no
efetivo. Dessa forma, na populao, ocorrem trs gentipos B
1
B
1
, B
1
B
2
e B
2
B
2
, e que
podemser representados esquematicamente como na Figura 12.2.
Nesse modelo, mrepresenta o ponto mdio entre os dois gentipos homozigticos, a
mede o afastamento de cada gentipo homozigtico em relao mdia e d mede o
afastamento do heterozigoto emrelao mdia.
Utilizando esses desvios, podem-se avaliar os diferentes casos de interao allica, ou
seja, se d = 0, no h dominncia e a interao allica chamada aditiva; d = a, a interao
allica de dominncia completa; se 0 <d< a, a interao allica de dominncia parcial e,
finalmente, se d>a ocorre sobredominncia. Arelao d/a mede o que se denomina grau de
dominncia de umgene, o qual d idia da interao allica. Assim, se esse valor zero, a
interao allica aditiva; quando igual a 1,0, h dominncia completa; para valores
compreendidos entre zeroe um, ocorre dominnciaparcial e acima de1,0, h sobredominncia.
Como o carter quantitativo normalmente controlado por muitos genes, o que se
procura determinar o tipo de interao allica predominante, uma vez que, na prtica,
impossvel conhecer o tipo de interao allica de cada gene individualmente. Para se fazer
inferncia sobre o tipo de interao allica, existemalguns processos que podemutilizar tanto
mdias como varincias. No momento, nos interessa apenas mostrar o emprego das mdias
comessa finalidade.
$
280
FIGURA12.2. Valores genotpicos para o loco B. Acontribuio dos homozigotos fornecida
por , a e do heterozigoto por d, em relao mdia I.
12.3.1 InteraoAditiva
Nesse tipo de interao, cada alelo contribui comumpequeno efeito fenotpico, o qual
somado aos efeitos dos demais alelos. Por exemplo, considerando hipoteticamente dois
genes - A e B - de efeitos iguais comdois alelos cada, e comcontribuies A
1
= B
1
= 30
unidades e A
2
= B
2
= 5 unidades, e considerando tambm que os efeitos dos locos so
somados, assimos gentipos A
1
A
1
B
1
B
1
e A
2
A
2
B
2
B
2
tero fentipos de 120 e 20 unidades,
respectivamente.
Tomando o gene Bcomo exemplo, podemos representar seu efeito do seguinte modo:
Nesse grfico, fcil visualizar que a =25 unidades, que corresponde contribuio
do aleloefetivo e d =0, uma vez queo valor fenotpico do gentipo heterozigoto corresponde
mdia dos genitores. Veja que d/a = 0, o que equivale interao allica aditiva, como
j foi comentado.
Ocruzamento entre os indivduos mencionados produz:
P
1
x P
2
P:
Gentipos: A
1
A
1
B
1
B
1
A
2
A
2
B
2
B
2
Fentipos: 120 unidades 20 unidades
F
1
:
Gentipo: A
1
A
2
B
1
B
2
Fentipo 70 unidades
281
Como se observa, se a interao allica aditiva, a mdia da gerao F
1
igual
mdia dos genitores, ou seja:
Vejamos agora qual ser a mdia da gerao F
2
, considerando novamente os dois
genes. Os gentipos possveis na gerao F
2
comas suas respectivas frequncias e valores
fenotpicos esto apresentados na Tabela 12.4. Verifica-se que a mdia da gerao
2
F
tambm igual mdia dos genitores e da gerao
1
F . Outra caracterstica da interao
aditiva que a descendncia de qualquer indivduo ou grupo de indivduos temmdia igual
desse indivduo ou igual mdia do grupo. Seja, por exemplo, o gentipo A
1
A
2
B
1
B
1
, cujo
valor fenotpico 95, se esse indivduofor autofecundado ir produzir a descendncia mostrada
na Tabela 12.5, cuja mdia , tambmde 95,0.
Se, por outro lado, foremselecionados todos os indivduos da gerao F
2
comvalor
fenotpico igual ou superior a 95 unidades, isto , 1A
1
A
1
B
1
B
1
, 2 A
1
A
1
B
1
B
2
e 2 A
1
A
2
B
1
B
1
,
a descendncia obtida pelo intercruzamento mostrada na Tabela 12.6. Note que a mdia
dos trs gentipos selecionados e de seus descendentes a mesma, isto , 100 unidades.
TABELA12.4. Gentipos da F
2
com respectivas frequncias e valores fenotpicos, assumindo
interao allica aditiva.
Essa ltima observao de fundamental importncia no melhoramento. Vejaque, se a
interao allica aditiva, a seleo facilitada porque umindivduo ou grupo de indivduos
superiores, quando selecionados, produziro uma descendncia tambmsuperior. Como
veremos aseguir, nos outroscasosdeinteraoallicaissonoocorre. Almdisso, cominterao
allica aditiva, adistribuio emF
2
simtrica e se assemelhaa uma curva normal (Figura 12.1).
1 2
1
2
P P
F
@
?
Gentipos Frequncia (Fe) Valor fenotpico (F) Fe . F
A
1
A
1
B
1
B
1
1/16 120 7,500
A
1
A
1
B
1
B
2
2/16 95 11,875
A
1
A
1
B
2
B
2
1/16 70 4,375
A
1
A
2
B
1
B
1
2/16 95 11,876
A
1
A
2
B
1
B
2
4/16 70 17,500
A
1
A
2
B
2
B
2
2/16 45 5,625
A
2
A
2
B
1
B
1
1/16 70 4,375
A
2
A
2
B
1
B
2
2/16 45 5,625
A
2
A
2
B
2
B
2
1/16 20 1,250
Mdia da F
2
= 70,000
282
TABELA 12.6. Gentipos dos descendentes obtidos pelo intercruzamento dos indivduos
1 A
1
A
1
B
1
B
1
, 2 A
1
A
1
B
1
B
2
, 2 A
1
A
2
B
1
B
1
, com respectivas frequncias e valores fenotpicos,
assumindo interao allica aditiva.
TABELA 12.5. Gentipos dos descendentes obtidos por autofecundao do indivduo
A
1
A
2
B
1
B
1
com respectivas frequncias e valores fenotpicos.
A
1
A
1
B
1
B
1
9/25 120 43,2
A
1
A
1
B
1
B
2
6/25 95 22,8
A
1
A
1
B
2
B
2
1/25 70 2,8
A
1
A
2
B
1
B
1
6/25 95 22,8
A
1
A
2
B
1
B
2
2/25 70 5,6
A
2
A
2
B
1
B
1
1/25 70 2,8
Mdia da descendncia = 100,0
Considerandonovamenteque A
1
=B
1
=C
1
=D
1
=30unidadeseque A
2
=B
2
=C
2
=D
2
=5
unidades, a partir do seguinte cruzamento, teremos:
P
1
x P
2
P: Gentipos: A
1
A
1
B
1
B
1
C
2
C
2
D
2
D
2
A
2
A
2
B
2
B
2
C
1
C
1
D
1
D
1
F
1
: Gentipo: A
1
A
2
B
1
B
2
C
1
C
2
D
1
D
2
Fentipo 140 unidades
Novamente se constata que a interao allica aditiva, pois
& $
1 2
1
140
2
P P
F
@
? ?
unidades e infere-se tambmque a mdia da gerao
2 1
140 F F ? ?
unidades. Oque chama
ateno nesse caso que, na gerao F
2
, devero ocorrer 81 gentipos diferentes (3
n
), cujo
desempenho ir variar de240unidades, gentipoA
1
A
1
B
1
B
1
C
1
C
1
D
1
D
1
a 40unidades, gentipo
A
2
A
2
B
2
B
2
C
2
C
2
D
2
D
2
. Observe que aparecero em F
2
indivduos com desempenho fora do
limite dos genitores. Quandoisso ocorre, diz-se que ocorreusegregaotransgressiva. Esse
tipo desegregao que osmelhoristas de plantas eanimais esto sempre procurandopor meio
dos cruzamentos; isto, procuram-segenitores comonoexemplo, emqueumcomplementabem
outro aps o cruzamento e possibilita que na descendncia ocorra segregao transgressiva e
possamser selecionadosindivduos comnmerodealelosefetivossuperioresao dos pais.
A
1
A
1
B
1
B
1
1/4 120 30,0
A
1
A
2
B
1
B
1
2/4 95 47,5
A
2
A
2
B
1
B
1
1/4 70 17,5
Mdia da descendncia = 95,0
283
12.3.2 Interao Dominante
Nessa situao, utilizada a contribuio de cada loco e no de cada alelo. Assim
sendo, se a contribuio do gentipo AA=Aa =BB= Bb=60 unidades e a contribuio do
gentipo aa = bb = 10 unidades. Esquematicamente para o loco B, tem-se:
Como a =d, a relao d/a =1,0, mostrando que a interao de dominncia completa.
Nessa condio, seja o cruzamento:
Nota-se que a mdia da gerao F
1
pode ser igual ao valor de um dos pais, porm
ser sempre diferente da mdia dos pais.
Para se estimar a mdia da gerao F
2
, vamos proceder como no caso anterior,
colocando os gentipos possveis, os valores fenotpicos e as suas respectivas frequncias,
como mostrado na Tabela 12.7.
A mdia da gerao F
2
( F
2
= 95,00 unidades) diferente da mdia da gerao F
1
.
Comessetipode interao allica, aseleo de indivduos superioresnoleva, necessariamente,
produo de uma descendncia semelhante ao indivduo selecionado. Por exemplo, se o
indivduo AaBB(120 unidades) for autofecundado, produzir a seguinte descendncia: 1/4
AABB, 2/4 AaBB e 1/4 aaBB, cuja mdia ser igual a 107,5 unidades.
Contrariamente aoque foi mostrado para a interao aditiva, ainterao de dominncia
dificulta a seleo de indivduos superiores, uma vez que a descendncia desse indivduo ter
comportamento inferior a ele prprio. No caso de interao de dominncia, parangenes, a
segregao fenotpica dada pelo binmio (a + b)
n
, lembrando apenas que neste caso, no
se trata de frequncia allica e simde frequncia fenotpica, ou seja, a diferente de b, para
cada loco a=3/4 e b=1/4.
Verifica-se, tambm, que como aumentono nmerode genescresce concomitantemente
o nmero de classes fenotpicas, as quais so dadas por n + 1. No caso de dominncia, a
distribuio emF
2
, apesar de ser contnua, no simtrica e mostra uma inclinao para o
lado do fentipo conferido pelos alelos dominantes (Figura 12.3).
P
1
x P
2
P:Gentipos: AABB aabb
F
1
: Gentipo: AaBb
284
TABELA12.7. Gentipos da F
2
com respectivas frequncias e valores fenotpicos, assumindo
interao allica dominncia completa.
AABB 1/16 120 7,500
AABb 2/16 120 15,000
AAbb 1/16 70 4,375
AaBB 2/16 120 15,000
AaBb 4/16 120 30,000
Aabb 2/16 70 8,750
aaBB 1/16 70 4,375
aaBb 2/16 70 8,750
aabb 1/16 20 1,250
Mdia da gerao F
2
= 95,000
FIGURA 12.3. Distribuio de frequncia para o carter peso das sementes do feijoeiro,
considerando ausncia de efeito ambiental e diferentes nmeros de genes de efeito dominante:
A) um gene; B) dois genes; C) quatro genes; D) oito genes.
285
12.3.3 Interao Sobredominncia
Nesse caso, o desempenho do heterozigoto Aa ou Bb ultrapassa o limite dos pais.
Assim, a relao d/a superior a 1,0. Seja, por exemplo, AA=BB=60 unidades, aa =bb=
10 unidades e Aa = Bb = 80 unidades.
Esquematicamente, a contribuio de cada gentipo pode ser assimrepresentada:
Ovalor de d = 45, e a relao d/a = 45/25 = 1,8 e evidencia, como j comentado, a
ocorrncia de sobredominncia.
Apartir do cruzamento entre dois genitores homozigticos, obtm-se:
P
1
x P
2
P: Gentipos: AABB aabb
F
1
: Gentipo: AaBb
Verifica-se, assim, que a mdia da gerao F
1
tambm diferente da mdia dos
genitores, nesse caso, e superior do pai, commaior mdia. Amdia da gerao F
2
de 115
unidades e, portanto, tambminferior da gerao F
1
.
importante comentar que, na prtica, quase impossvel distinguir a ocorrncia de
interao allica dominante e sobredominante. Isso porque elas apresentampropriedades
semelhantes, tais como: a mdia da gerao F
1
diferente da mdia dos pais e da gerao F
2
,
a distribuio fenotpica da gerao F
2
assimtrica, e a descendncia de qualquer indivduo
heterozigtico, viade regra, apresenta mdiainferior ao prprio indivduo. Entretanto, poderia
se argumentar que a distino entre esses dois tipos de interao pudesse ser feita baseando-
se na mdia da gerao F
1
. Assim, se a mdia da gerao F
1
fosse superior do melhor
genitor, a concluso seria a de que a interao de sobredominncia, ao passo que na
interao de dominnciaa mdia da F
1
seria nomximo igual do paicommelhor desempenho.
Contudo, esse argumento vlido somente se os genitores so completamente contrastantes.
Se dois genitores no so completamente contrastantes, a mdia da F
1
superior dos dois
genitores, mesmo estando presente apenas a interao dominncia completa. Seja, por
exemplo: A_ = B_ = 60 unidades e aa = bb = 10 unidades.
286
Nesse exemplo, a mdia dos genitores :
445 179
312
2
@
? mg.
1 2 1 2
445mg; 179mg; 279mg; 266mg. P P F F ? ? ? ?
Se h sobredominnciano indivduo heterozigtico, uma hipteseconsiste na produo
de duas enzimas funcionais, cujo desempenho emtermos fenotpicos seria superior ao de
uma ououtra das enzimas produzidas pelos indivduos homozigticos.
necessrio salientar ainda que as interaes de dominncia e/ou sobredominncia
nemsempre atuamno sentido de aumentar o valor fenotpico. Elas podemocorrer reduzindo
a expresso do carter. Por exemplo, a cultivar de feijo Goiano Precoce floresce com
aproximadamente 35 dias, enquanto a Ricopardotemflorescimento com45dias. Agerao
F
1
, obtida pelo cruzamento entre essas cultivares, apresentou florescimento aos 35 dias, isto
, a mdia da F
1
inferior mdia dos pais, emcinco dias.
Vejamos aaplicao desses conceitos deinterao allica, relativos s mdias apresentadas
na Tabela 12.1. Para verificar o tipo de interao allica predominante, devemos comparar a
mdia dos genitores coma mdia das geraes F
1
e F
2
. Os dados obtidos foram:
P
1
x P
2
P:Gentipos: AAbb aaBB
F
1
:Gentipo: AaBb
Considerando que esses dados foramobtidos sob condies de campo e, portanto,
sujeitos a um erro experimental, a coincidncia exata entre os valores nunca ir ocorrer.
Devemos ento aplicar umteste de mdia para verificar se a variao do acaso ou no.
Nessa situao, foi verificado que o desvio das mdias foi decorrente do acaso e, portanto,
podemos considerar queas mdias no diferem(t =1,80NS) e, consequentemente, a interao
allica predominante aditiva.
12.3.4 Heterose
Finalmente, deve-se enfatizar que quando h predominncia de interao allica
dominante e/ousobredominante, a seleo de indivduos superiores no a melhor estratgia
a ser adotada numprograma de melhoramento. Ao contrrio, a ateno do melhorista deve
ser voltada para a obteno de hbridos. Asuperioridade dos hbridos deve-se ao fenmeno
denominado heterose (h) ou vigor hbrido, que definido pela expresso:
287
A mdia da gerao
g
F ser,
1 1
2
g g g
h
F F
> >
? >
em que g representa o nmero de
geraes.
Representando de outra forma, teremos:
h F F
g
g
g /
/
-
1
+
+
)
. >
> ?
>
>
1
1
1
2
1 2
Essa ltima frmula tema vantagemde facilitar o clculo, pois no h necessidade de
se obter a mdia da gerao F
g-1
.
Para ilustrar, veja o exemplo mostrado anteriormente emque ocorreu dominncia.
Naquela situao, tnhamos:
3 2
4
h
F F ? >
Por essa expresso, fcil entender que a heterose ocorre sempre que a interao
allica for no aditiva, ou seja, temque existir alguma dominncia. Pode-se visualizar tambm
que a heterose dependente do desempenho dos gentipos heterozigticos emrelao aos
homozigotos, isto , s h heterose seexistir heterozigose. Assim, paraummesmo cruzamento,
a heterose ser mxima na gerao F
1
quando houver o mximo de heterozigose. Na F
2
, a
proporo de heterozigotos de apenas 50%- lembre-se de que uma autofecundao reduz
a proporo de heterozigotos em 50%. Dessa forma, podemos determinar a mdia da
gerao
2
F pela expresso:
2 1
2
h
F F ? >
Nas demaisgeraes - F
3
, F
4
etc. -, aheterozigosereduzidametade dagerao anterior,
o mesmo acontecendo coma heterose. Assim, por exemplo, amdia da gerao F
3
ser:
1 2
1
2
P P
h F
@
? >
P
1
x P
2
P: Gentipos: AABB aabb
F
1
: Gentipo: AaBb
288
BOX 12.2. O QUE HETEROSE
Como foi comentadoa heterose o desempenho superior da gerao F
1
emrelao
a mdia dospais. Otermo foi criado no incio dosculo XXpor Shull. Tambm conhecido
como vigor hbrido. Foi a principal descoberta que possibilitou o desenvolvimento de
toda a indstria sementeira. Apresena da heterose depende do carter. Assimno caso
do milho, por exemplo, a heterose para a produtividade de gros muito grande. J, para
o nmero de folhas por planta, pode no ser to expressivo.
A mxima heterose observada na gerao F
1
. Nas demais geraes, ela ser
reduzida em funo da endogamia. O resultado de um dos primeiros trabalhos que
evidenciou esse fato foi obtido para a produtividade de gros de milho por Jones, em
1924. Otrabalho foi realizado no perodo de 1917 a 1923, o que possibilitou chegar at
a gerao F
8
. possvel notar que a produtividade mdia da gerao F
1
, embora variasse
entre os anos, efeito ambiental, foi sempre superior aos genitores e s demais geraes.
Na mdia dos anos, veja que a produtividade da gerao F
1
, 101,2g foi bemsuperior a
mdia dos genitores. Aheterose foi de
1 2
1 1
P P
h F 81, 65
2
@ . 1
? > ?
+ /
) -
. Jna F
8
a mdia passou
para 27,2 e a heterose nessa gerao foi de apenas 7,65 =
1 2
8 8
2
P P
h F
' @ * . 1
? >
D H + /
) - C G
. Fica
claro pelos resultados que a mdia foi mxima na gerao F
1
e decresceuacentuadamente
coma autofecundao, como pode ser visto a seguir:
Aheterose, nesse caso, :
120 20
120
2
h
@
? >
; 120 70 50 h ? > ? unidades. Amdia da
gerao F
2
:
2
50
120 95
2
F ? > ?
unidades. Ou seja, o mesmo valor estimado por meio dos
gentipos possveis dessa gerao (Tabela 12.7).
fcil inferir que o aproveitamento da heterose mxima s ser obtido se for utilizada
a gerao F
1
. No caso de plantas de propagao sexuada, isso s ser possvel produzindo
novamente anualmente a semente F
1
. Esse o procedimento adotado emvrias culturas
como a do milho, em que a semente hbrida deve ser adquirida todo ano. No caso das
plantas que possuempropagao assexuada como a cana-de-acar e eucalipto, a heterose
obtida por meio do cruzamento poder ser perpetuada empregando-se a propagao
assexuada do indivduo.
289
BOX 12.3. POR QUE OCORRE HETEROSE?
Existem algumas hipteses para explicar a ocorrncia da heterose.
Especialmente duas delas tm permanecido por vrias dcadas. As hipteses da
dominncia e da sobredominncia. Ade dominncia foi proposta por Jones, em1917.
Segundo ele, os genes responsveis pelo crescimento e desenvolvimento dos indivduos
apresentaminterao allica de dominncia ou pelo menos dominncia incompleta.
Nessa condio, os alelos responsveis pelo fentipo inferior ou at mesmo deletrio,
so recessivos. Como os caracteres quantitativos so controlados por muitos genes,
umindivduo ou linhagem, temvrios locos comalelos dominantes emhomozigose,
mas tambmpossui inmeros outros comalelos recessivos (prejudiciais). Quando se
cruzamduas linhagens diferindo nos locos comalelos recessivos emhomozigose, o
hbrido F
1
ter grande nmero de locos emheterozigose e ocorrendo dominncia, o
desempenho do F
1
ser superior as linhagens parentais, ocasionando o vigor hbrido
heterose. Veja que a heterose ser tanto maior quanto mais divergente forem as
linhagens parentais, ou seja, nos locos em que uma das linhagens tem alelos
desfavorveis a outra possui alelos favorveis. Nessa situao mencionado que
essas linhagens possuemboa capacidade de combinao, isto , se complementam
bem.
A perda do vigor na gerao F
2
e nas geraes subsequentes, quando
autofecundados, ocorre porque os locos em F
1
, que estiveremem heterozigose, iro
segregar, ocorrendo indivduos comlocos comalelos prejudiciais emhomozigose e o
desempenho mdio ser menor. Se isso for correto, como contesta o argumento dos
crticos da hiptese de dominncia, por que ainda no foi obtida a linhagemcomtodos os
Ano P
1
P
2
F
1
F
2
F
3
F
4
F
5
F
6
F
7
F
8
1917 5,5 21,5 64,5 56,0
1918 23,5 26,9 120,6 128,4 15,1
1920 27,8 16,2 127,6 47,6 34,8 29,0 9,9
1921 13,1 19,6 72,8 54,5 49,2 32,7 15,3 23,1
1922 26,1 20,0 160,4 83,2 73,7 67,5 48,8 35,7 22,7
1923 21,0 13,2 61,0 45,0 40,5 47,0 15,8 23,0 26,2 27,2
Mdia 19,5 19,6 101,2 69,1 42,7 44,1 22,5 27,3 24,5 27,2
Dados de produo de gros de milho em Bushels (B) por acre; (1B= 25,4 Kg)
Fonte: Jones, 1924 apud Merrell, 1975.
290
alelos favorveis emhomozigose, que ir ter desempenho igual ao do melhor hbrido F
1
existente? A resposta para essa indagao pode ser dada considerando que a
probabilidade de se obter essa tal linhagem infinitamente pequena. Seja, por exemplo,
umcarter controlado por 50 genes. Se umindivduo for heterozigoto para esses 50
genes a probabilidade emF
2
de que umindivduo possua todos os alelos favorveis em
homozigose ser de umem4
50
. Amagnitude desse nmero 4
50
tal que seria necessrio,
por exemplo, com a cultura do milho, cultivar uma rea muitas vezes superior a rea
agrcola do planeta para se ter essa populao. Apopulao de milho para se ter todos
os genotipos emF
2
considerando 30genes, ocuparia uma ara igual a 2000 vezes a ara
da terra. Adicionalmente, impossvel identificar, nessa populao a nica planta com
gentipo desejado. As informaes existentes atualmente, especialmente coma cultura
do milho, que o desempenho das linhagens, emprodutividade degros esta melhorando,
ouseja, est ocorrendo incremento gradativonos locos comalelosfavorveis nas linhagens
atuais (Troyer; Wellin, 2009). Contudo, o desempenho das melhores linhagens existentes
ainda no comparvel ao dos melhores hbridos.
Aoutra hiptese a da sobredominncia. Foi proposta tambm, no incio do sculo
XX, por East. Aidia que os locos emheterozigose teriamcomportamento superior a
ambos homozigotos. Por essa hiptese, a heterozigose, por si mesma, seria a responsvel
pela heterose. Como na gerao F
1
ocorre o mximo de heterozigotos, da a importncia
de se ter hbridos F
1
para se obter o mximo de heterose. Assim, a procura de bons
hbridos seriano sentido de obter o mximo de locos emheterozigose, o que seria possvel,
se as duas linhagens fossemcompletamente contrastantes, isto , nos locos emque uma
linhagem BBa outra bb. Para que essa hiptese fosse verdadeira, emnvel molecular
seria necessrio que o alelo B produzisse uma cadeia polipeptdica e o alelo b outra
cadeia. As duas cadeias, no indivduo hbrido se interagissempara originar uma enzima
hbrida com desempenho superior a derivada de BB ou bb. Apesar dos avanos em
biologia molecular, no foi encontrado, em nenhum loco, evidncia convincente da
ocorrncia da referida enzima hbrida. Imaginemos a ocorrncia dessa enzima hbrida
para todos os locos que iria ocorrer para se ter a heterose mxima. Como difcil separar,
na prtica, a ocorrncia de dominncia e sobredominncia, a dvida sobre qual dessas
duas hipteses mais plausvel ainda persiste.
Outras hipteses tmsido sugeridas. Merrell (1975), por exemplo, comenta um
caso interessante no tomateiro. Foi cruzada a linhagemAque tempoucos frutos, porm
grandes coma linhagemB, comfrutos pequenos, pormnumerosos. AF
1
apresentou
291
Linhagem/F
1
Nmero de frutos (n) Peso dos frutos (g) Produtividade por planta (g)
A 4,4 138 607
B 109,1 17 1868
F
1
(AxB) 44,5 55 2428
Fonte: Adaptado Merrell (1975)
Observe, contudo, que na produtividade por planta, tem-se heterose. Como a
mdia da F
1
foi de 2428g e a mdia dos genitores de 1237,5g, a heterose foi de 1190,5g.
Aprodutividade por planta na realidade o produto do nmero de frutos compeso dos
frutos. Veja que esses dois caracteres se complementarampara ter efeito emumterceiro
carter. Emprincpio, pode-se argumentar que, nesse caso, a heterose foi decorrente da
epistasia, interao dos genes dos dois caracteres.
nmero de frutos mais ou menos intermedirio ao observado nos genitores e o mesmo
ocorrendo como peso dos frutos. Nesse exemplo infere-se que a interao allica aditiva,
ou usando ummaior rigor cientfico poder-se-ia dizer que a dominncia parcial no sentido
do menor nmero e peso dos frutos, veja os resultados a seguir:
12.4 PREDIODAMDIADEUMCARTEREMPOPULAES
OBTIDASPORCRUZAMENTO
Como j foi explicado, uma das finalidades do conhecimento da gentica no
melhoramento de plantas e animais a de permitir que sejamfeitas predies de umdado
carter, comboa margemde segurana. Assim, ser mostrado como so feitas as predies
do rendimento de hbridos ou de qualquer populao proveniente de cruzamento. Para isso,
utilizada a expresso apresentada por Vencovsky(1987):
Y M X ?
emque:
M
a mdia da populao descendente do cruzamento.
Xe Y- representama proporo de alelos de cada umdos genitores que sero cruzados
para produzir a populao de mdia .
Aobteno de hbridos umprocedimento empregado emmuitas plantas e animais
porque, muitas vezes, apresentamo fenmeno de heterose ou vigor hbrido. Muito utilizado
principalmente na cultura do milho, a obteno dos denominados hbridos duplos, obtidos
292
X = (1/2)A + (1/2)B e Y = (1/2)C + (1/2)D
ou seja, X contm, emseu gentipo, metade dos alelos de A e metade de B, e Ycontm
metade dos alelos de Ce metade de D.
Substituindo Xe Yem M , tem-se:
& $ & $ & $ & $ 1/ 2 1/ 2 1/ 2 1/ 2 M A B C D ? @ @ ' * ' *
C G C G
& $
1/ 4 M AC AD BC BD ? @ @ @
emque:
NHD- nmero de hbridos duplos possveis
k - nmero de linhagens
Apenas para exemplificar, comdez linhagens, possvel a obteno de 630 hbridos
duplos diferentes. Oproblema do melhorista justamente descobrir, dentre os possveis
hbridos duplos, aquele que mais promissor. importante enfatizar que, para identificar o
melhor hbrido duplo, o melhorista deveria sintetizar todos os hbridos possveis e, o que
mais difcil ainda, avali-los emcondies de campo. Considerando, como j comentado,
que o melhorista sempre dispe de um nmero muitas vezes superior a dez linhagens, a
obteno e avaliao dos hbridos duplos possveis fica impraticvel. Para solucionar esse
problema, a nica opo vivel para o melhorista utilizar a expresso de predio de mdia
apresentada anteriormente. Com base nas predies, ele ir sintetizar e avaliar somente
aqueles hbridos que, de antemo, mostraremser agronomicamente superiores.
Vejamos uma aplicao: suponhamos o hbrido duplo (Ax B) x (Cx D). Se X o
hbrido simples (HS) Ax B e Yo (HS) Cx D, podemos escrever que:
3( !) ( 1)( 2)( 3)
4!( 4)! 8
> > >
? ?
>
k k k k k
NHD
k
(A x B) x (C x D) (A x C) x (B x D) (A x D) x (B x C)
Como o melhorista de milho no trabalha apenas comquatro linhagens, mas simcom
umnmero muito elevado, o nmero de hbridos duplos possveis enorme. Esse nmero
pode ser estimado pela expresso:
pelo cruzamentoentre quatro linhagens. Por exemplo, comas linhagensA, B, Ce Dpodemos
obter os seguintes hbridos duplos:
293
Assimsendo, a mdia do hbrido duplo (Ax B) x(Cx D) pode ser estimada a partir da
mdia dos hbridos simples no parentais, provenientes das mesmas quatro linhagens, ou
seja, das mdias AC, AD, BC, BD. Observe que para fazer a predio das mdias dos 630
HDprovenientes das dez linhagens, o melhorista dever obter, por meio de experimentos no
campo, as mdias de produo de todos os hbridos simples possveis.
O nmero de hbridos simples dado por
& $ 1
2
k k
NHS
>
? , que, nesse exemplo,
com k = 10 linhagens, corresponde a 45. Portanto, o nmero de hbridos simples a ser
sintetizado e avaliado no campo beminferior ao nmero de hbridos duplos. Esse menor
nmero de hbridos a seremavaliados facilita o trabalho do melhorista, pois permite uma
melhor preciso nos experimentos, emrazo da menor rea experimental requerida, almde
baratear o custo das avaliaes.
Consideremos os dados apresentados na Tabela 12.8 referentes produo de gros
(t/ha) de cinco linhagens de milho e dos dez hbridos simples produzidos comas mesmas.
Utilizando a expresso para estimar o nmero de hbridos duplos diferentes, verifica-se que
comcinco linhagens so possveis 15 hbridos duplos. Apartir dos dados da Tabela 12.8,
pode-seestimar aproduodetodoseles. Por exemplo, para o hbrido duplo (Ax B) x (Cx
D), a produo mdia ser fornecida por:
& $ & $ & $ & $ M= 1/2 A+ 1/2 B 1/2 C+ 1/2 D ' * ' *
C G C G
& $
M=1/4 AC+AD+BC+BD
TABELA12.8. Produo de gros de milho (t/ha) de cinco linhagens (na diagonal) e de seus
hbridos simples descendentes (acima da diagonal).
Linhagens A B C D E
A 1,43 4,93 2,40 6,11 4,51
B 1,58 5,14 4,23 4,17
C 1,40 5,12 5,15
D 1,38 2,21
E 1,26
Fonte: Vencovsky, 1977.
Uma pergunta comumente formulada : qual ser a produo mdia se o agricultor
plantar a semente do hbrido que ele colheu, ou seja, qual a produo esperada da gerao F
2
294
& $
1/16 2 2 2 2 2 2 M AA BB CC DD AB AC AD BC BD CD ? @ @ @ @ @ @ @ @ @
Observa-se que, nesse caso, as mdias das linhagens AA, BB, CC, DD tambm
contribuem para a mdia da gerao F
2
do hbrido duplo. Substituindo pelos valores
apresentados na Tabela 12.8, obtm-se 3, 85 M ? t/ha.
Constata-se, como esperado, que ocorre reduo na produo da gerao F
2
. Na
gerao F
1
, a mdia foi de 4,47 t/ha e na gerao F
2
, foi de 3,85 t/ha, ou seja, houve uma
reduo de cerca de 14,0%.
Na Tabela 12.9, esto apresentadas as estimativas do rendimento de gros, emt/ha,
da gerao F
1
e F
2
, bem como a percentagemde reduo na produo da gerao F
2
em
relao F
1
para os 15 hbridos duplos possveis. Observa-se que o hbrido duplo com
maior rendimento foi (AxC) x(BxD). Constata-se tambmque os hbridos duplos contendo
as mesmas linhagens apresentaramo mesmo rendimento na gerao F
2
, como, por exemplo,
os hbridos (Ax B) (Cx D), (Ax C) (Bx D) e (Ax D) (Cx B). Areduo na produo da
gerao F
2
em relao ao F
1
foi maior nos hbridos que apresentaram maior produo -
heterose - na gerao F
1
.
Na exploraoavcola, os pintinhos de umdia tambmso hbridos duplos semelhantes
ao que ocorre no milho. No Brasil, a maior parte do material melhorado proveniente de
outros pases, principalmente Canad e Estados Unidos. Nesses pases, ficamas denominadas
linhagens avs (Figura 12.4). Omacho da linhagemA cruzado coma fmea de B, obtendo-
se o hbrido simples AB. De modo anlogo, obtido o hbrido simples CD. Ummacho AB
cruzado comuma fmea CD, obtendo-se o hbrido duplo (ABCD). a gerao F
1
desse material que vendida aos avicultores - pintos de um dia. Veja que o segredo -
patente natural do hbrido - mantido pela empresa de melhoramento, por meio das linhagens
avs, que evidentemente nunca so comercializadas. Observe que nesse caso pode ser
comercializado o macho de uma linhagemcoma fmea da outra, porque a perpetuao da
sua combinao mantida s empresena da fmea da mesma linhagemque fica sobre sete
chaves na empresa.
do hbrido duplo? Aexpresso parapredioda mdiapermitetambmfornecer essa estimativa.
Nessa situao, a gerao F
2
dohbrido duplo (AxB) x(CxD) proveniente do cruzamento
[(AxB) x(CxD)] x[(AxB) x(CxD)]. Nesse caso, a contribuio dos gametas masculinos
efemininos amesma, umavezquepossuemamesmaorigem. Dessemodo, X=Ye
2
M X ? .
Como ohbridoduplopossui alelos das linhagensA, B, Ce D, comigual proporo, tem-seX=
(1/4)A+(1/4)B+ (1/4)C+(1/4)De a mdia ser obtida por:
295
TABELA12.9. Estimativa da produo mdia esperada dos 15 hbridos duplos obtidos a partir
de cinco linhagens.
Mdias (t/ha) % de reduo na produo
Hbrido duplo
Gerao F
1
Gerao F
2
da gerao F
2
(A x B) x (C x D) 4,47 3,85 13,87
(A x C) x (B x D) 5,33 3,85 27,77
(A x D) x (C x B) 4,17 3,85 7,67
(A x E) x (C x B) 4,16 3,64 12,50
(A x E) x (D x B) 4,36 3,62 16,97
(A x B) x (C x E) 4,06 3,64 10,34
(A x B) x (D x E) 4,76 3,62 23,95
(A x C) x (B x E) 4,93 3,64 26,17
(A x C) x (D x E) 5,22 3,53 32,28
(A x D) x (B x E) 3,97 3,62 8,82
(A x D) x (C x E) 3,56 3,53 0,84
(B x C) x (D x E) 4,67 3,60 22,91
(B x D) x (C x E) 4,16 3,60 13,46
(B x E) x (C x D) 4,18 3,60 13,88
(A x E) x (C x D) 3,97 3,53 11,08
Aexpreso para predio de mdia apresentada pode tambmser utilizada quando
so realizados cruzamentos entre duas raas diferentes produzindo a gerao F
1
, que
chamada de mestios. Existemmuitos tipos de cruzamentos possveis, por exemplo, a partir
da raa holandesa e uma raa zebuna, pode-se obter vrios tipos derebanhos, como mostrado
na Tabela 12.10.
296
TABELA12.10. Alguns tipos de rebanhos obtidos com base no cruzamento entre bovinos das
raas holandesa (H) e zebuna (Z).
Tipo de cruzamento Tipo de rebanho
H x Z (1/2 H + 1/2 Z)
(H x Z) x H (3/4 H + 1/4 Z)
[(H x Z) x H] x H (7/8 H + 1/8 Z)
[(H x Z) x H] x Z (3/8 H + 5/8 Z)
Otermo graude sangue comumente utilizado para indicar a percentagemmdia de
alelos de uma determinada raa que o rebanho possui. umtermo imprprio, uma vez que
do conhecimento de todos que no h relao entre sangue e transmissodecaracteres
hereditrios. Paramostrar que 3/4H+ 1/4 Z corresponde a umrebanho emque 75% dos
alelos so da raa holandesa e 25%da raa zebuna, vamos supor que a produo de leite
seja controlada por trs genes e que os gentipos dos genitores sejam:
FIGURA 12.4. Esquema da produo de hbridos de aves.
Hbrido (ABCD)
P: Holands x Zebu
Gentipos: AABBCC aabbcc
F
1
: Mestio
Gentipo: AaBbCc
297
Veja que o mestio possui 50%dos alelos que vieramdo holands - letras maisculas -
e 50%que provieramdo zebu- letras minsculas -, da, utilizar-se impropriamente a expresso
1/2 sangue. Se vacas mestias (AaBbCc) forem acasaladas com um touro holands
(AABBCC), obtm-se os descendentes mostrados na Tabela 12.11.
Os dados da Tabela 12.11 indicamque no rebanho (populao) 3/4 dos alelos so
provenientes da raa holandesa (36:48), e 1/4 da raa zebuna (12:48). Essa a razo do
zootecnista utilizar a expresso 3/4 de sangue do holands e 1/4 de sangue do zebu.
Achamos oportuno explicar o significado gentico do termo raas puras. Segundo
Lush (1964), essa expresso temsido usada no melhoramento dos animais para se referir
ascendncia e no corresponde ao termo gentico homozigose. Assim, umanimal puro-
sangue (POouPC) aquele que apresenta expresses fenotpicas dentro dos padres raciais
e so obtidos por acasalamentos, por tantas geraes quantas so exigidas pelas normas de
registro daraa. Ao contrrio do quesepossapensar, osanimaispuros-sanguessoaltamente
heterozigticos, apresentando homozigose, principalmente nos locos que controlam
caractersticas morfolgicasmarcantes. De fato, a endogamiaintensa(aumentodahomozigose)
grandemente evitada entre os animais domsticos e sua prtica constante, via de regra, traz
efeitos prejudiciais.
TABELA 12.11. Gentipos dos descendentes do acasalamento entre vacas mestias com um
touro holands, obtendo-se um rebanho 3/4 H + 1/4 Z.
Vejamos agora como fazer a predio de mdia de vrios tipos de rebanho, possuindo
apenas a produo observada dos genitores e da gerao F
1
(mestio). Para isso, sero
utilizados os dadosapresentados naTabela 12.12, para a produo de leitede animais mestio
e das raas holandesa e zebu.
Gentipos dos Nmero de alelos
Descendentes Holands Zebu
AABBCC 6 0
AABBCc 5 1
AABbCC 5 1
AABbCc 4 2
AaBBCC 5 1
AaBBCc 4 2
AaBbCC 4 2
AaBbCc 3 3
Total 36 12
registro da raa. Ao contrrio do que se possa pensar, os animais puros-sangue so altamente
298
TABELA 12.12. Produo de leite em litro/animal/ano para mestio e as raas holandesa e
zebuna.
Plantel Produo de leite (litro/animal/ano)
Zebu (Z) 1.582
Mestio (HZ) 2.527
Holands (H) 2.302
Fonte: Vencovsky, 1977.
Observe que na estimativa da mdia do rebanho 3/4 H+ 1/4 Zh a contribuio de
metade dos locos do holands mais metade do mestio (Tabela 12.11).
Do mesmo modo, pode ser feita a predio da 2 gerao do rebanho (3/4 H+1/4 Z).
Esse rebanho obtido pelo cruzamento de machos e fmeas (3/4 H+1/4 Z) entre si, ou seja:
No caso de bovinos, ummodo prtico de se saber a proporo allica do rebanho
obtido de umdeterminado acasalamento a seguinte: seja, por exemplo, o cruzamento
dos rebanhos [(3/4)H+ (1/4)Z] x [(1/2)H+ (1/2)Z]. Lembrando que o acasalamento
a unio de gametas, teremos no gameta do macho (3/8)H + (1/8)Z, isto , metade dos
alelos do genitor. Pela mesma razo, o gameta da fmea conter (1/4)H + (1/4)Z. Na
fertilizao, teremos a soma desses gametas, isto , & (3/8)H + (1/8)Z + @ (1/4)H +
(1/4)Z = (5/8)H + (3/8)Z.
interessante observar que assim procedendo, pode-se conhecer a constituio
resultante de qualquer rebanho obtido, possuindo apenas o desempenho dos paise do mestio.
Na Tabela 12.13, esto apresentadas algumas dessas estimativas.
Nota-se, por exemplo, que a produo da segunda gerao -bimestio- sempre
inferior da primeira gerao. Essa reduo na sua produo explicada em razo da
segregao e recombinao dos genes e presena da interao allica dominante e/ou
sobredominante no controle da herana desse carter, isto , emdecorrncia da reduo da
heterose.
Finalmente, importante salientar que esse processo de estimar a mdia de uma
populao vlido para qualquer carter quantitativo, mas, para isso, necessrio:
Comessesdados, pode-seprever,porexemplo, aproduodeumrebanho(3/4H+1/4
Z). Sabemos que esse rebanho obtido pelo cruzamento (1/2 H+ 1/2 Z) x H. Utilizando a
expresso Y X M ? e considerando X = (1/2)H + (1/2)Z e Y = H, tem-se:
& $ 2414 HZ HH 2 / 1 M ? @ ? litros/animal/ano.
& $
3/ 4 1/ 4 3/ 4 1/ 4 1/16 9 6 2341 M H Z H Z HH HZ ZZ ? @ @ ? @ @ ? litros/animal/ano.
M X Y ?
& $
M 1/ 2 HH HZ 2414 ? @ ?
#
!
299
Que no ocorra interao entre os locos que controlamo carter interao gnica;
Que as populaes originais - linhagens, variedades, raas etc. - devam ser
geneticamente estveis.
Que o hbrido ou mestio seja explorado nas mesmas condies de ambiente emque
os dados dos genitores ou raas foramobtidos.
TABELA 12.13. Produo mdia de leite estimada para vrios rebanhos com diferentes
propores de alelos das raas holandesas e zebunas.
Produo estimada de leite em litros/animal/ano
Rebanho
1 gerao 2 gerao
(1/8 H + 7/8 Z) 1.818 1.800
(1/4 H + 3/4 Z) 2.054 1.981
(3/8 H + 5/8 Z) 2.291 2.126
(1/2 H + 1/2 Z) 2.527 2.234
(5/8 H + 3/8 Z) 2.471 2.306
(3/4 H + 1/4 Z) 2.414 2.346
(7/8 H + 1/8 Z) 2.358 2.340
BOX 12.4. PREDIO MDIA NO PORQUINHO DA NDIA
Foi realizadoocruzamento entre duas linhagensde porquinho da ndiae osresultados
aos 500 dias aps o nascimento, foram:
Populaes Peso em gramas
Linhagem 39 (A) 780
Linhagem 2 (B) 910
F
1
(AxB) 1000
Veja que ocorre heterose, o peso do hbrido de 1000g superior a mdia dos
genitores .
1 2
P P 780 910
845
2 2
@ @ . 1 . 1
? ?
+ / + /
) - ) -
Assim, a estimativa da heterose h 1000 845 155g ? > ? . Pode-se, a partir desses
dados, estimar o que esperado para diferentes populaes derivadas da gerao F
1
. Se
cruzar os irmos da F
1
tem-sea gerao F
2
. Amdia da gerao F
2
podeser preditapor dois
estimadores. Umdeles seria
2 1
h
F F
2
? >
. Isso porque, a reduo na heterose dagerao F
1
para F
2
de 50%. Assim
2
155
F 1000 922, 5g
2
? > ?
. Outra opo usar a expresso
300
12.5 EMPREGODEVARINCIANOESTUDODOSCARACTERES
QUANTITATIVOS
As estimativas dos componentes da variabilidade existente nas populaes e, mais
ainda, quanto dessa variabilidade decorrente das diferenas genticas de fundamental
importncia emqualquer programa de melhoramento, porque permite conhecer o controle
gentico do carter e o potencial da populao para a seleo. Aqui sero apresentados
alguns exemplos de estimativas de parmetros genticos e tambmsero comentadas as
principais contribuies dessas estimativas para os geneticistas e melhoristas.
12.5.1 Estimativa dos Componentes da Varincia
Inicialmente, vamos utilizar parte dos dados obtidos emeucalipto por uma empresa
privada referente ao dimetro das rvores altura do peito (DAP), aos 78 meses de idade.
As rvores da populao foramoriundas de sementes e intercaladamente foramcolocadas
plantas de umclone. Odimetro, a mdia e varincia do clone e das rvores da populao
so apresentados na Tabela 12.14.
Veja que, no caso do clone, como foi propagao assexuada de uma nica planta, no
h variao gentica, apenas ambiental. Assim, a varincia ( =2,30) entre plantas do clone
toda ambiental (
2
E
7 ), isto , = . J, a varincia entre as plantas da populao, por
seremprovenientes de sementes, apresentamvariao gentica e tambmambiental. Assim,
a varincia fenotpica entre as plantas ( ) temuma parte gentica e outra ambiental, ou seja,
. . Desse modo, podemos estimar a varincia gentica entre as plantas como
sendo, , no caso, .
2
E
7
2
F
7
2
"
c
2
"
c
M X Y ? . No caso, o X a contribuio do genitor masculino e Ydo genitor feminino.
No caso como gerao F
1
, X Y 1/ 2A 1/ 2B ? ? @ . Ento
& $
2
2
F 1/ 2A 1/ 2B ? @ ?
1/ 4AA 2 / 4AB 1/ 4BB @ @ Assimteremos & $ & $ & $
2
F 1/ 4 780 2 / 4 1000 1/ 4 910 ? @ @ ?
922, 5g
Se oobjetivo for obter uma populaocom3/4dos alelos do genitor B, ouseja, obter
a populao & $ 3/ 4B 1/ 4A @ , ela pode ser obtida pelo cruzamento F
1
x B. Assim, a mdia
prevista para esse plantel seria:
(3/ 4B 1/ 4A)
M X Y
@
? , Xseria a contribuio allicada F
1
e o Ydo genitor B. Ento tem-se:
(3/4B 1/ 4A)
M 1/ 2A 1/ 2B B 1/ 2AB 1/ 2BB
@
? @ ? @
1/ 2(1000) 1/ 2(910) 955g ? @ ? . De modo anlogo, se desejamos estimar a mdia da
gerao F
2
desse plantel teramos:
2
F (3/4B 1/ 4A)
M X Y
@
? . Como j visto, nessa
condio, X Y 3/ 4B 1/ 4A ? ? @
. Ento
& $
2
2
F (3/4B 1/ 4A)
M 3/ 4B 1/ 4A
@
? @ ?
9 / 16BB 6 / 16AB 1/ 16AA @ @ ? 9 / 16(910) 6 / 16(1000) 1/ 16(780) 935, 652g @ @ ?
2 2 2
F E G
7 ? 7 @ 7
2 2 2
G F E
" " -"
2
G
" 8,33-2,306,03
.
301
TABELA12.14. Dimetro altura do peito (DAP) de rvores de uma populao de Eucaliptus
cloesiana obtido em Bocaiuva-MG.
N Planta
(DAP)
N Planta (DAP) N Planta
(DAP)
N Planta
(DAP)
N
o
Planta
(DAP)
1 10,50 21 12,10 41 12,73 61 13,37 81 7,96
2 13,37 22 14,64 42 9,23 62 11,14 82 6,68
3 7,32 23 10,82 43 13,05 63 9,23 83 11,46
4 8,91 24 14,01 44 11,14 64 9,23 84 11,78
5 15,92 25 11,14 45 9,87 65 10,50 85 10,19
6 6,05 26 10,50 46 11,46 66 10,82 86 12,41
7 12,73 27 12,10 47 11,78 67 8,59 87 9,87
8 10,50 28 14,64 48 12,41 68 7,96 88 13,05
9 14,32 29 13,05 49 12,10 69 8,91 89 13,05
10 11,46 30 12,73 50 10,50 70 12,41 90 15,60
11 10,82 31 11,46 51 10,50 71 7,32 91 10,50
12 8,28 32 11,14 52 5,41 72 10,82 92 12,73
13 17,83 33 13,68 53 15,60 73 12,41 93 13,05
14 12,41 34 13,05 54 8,59 74 4,46 94 14,01
15 18,78 35 14,96 55 9,87 75 11,78 95 10,50
16 16,23 36 13,05 56 9,87 76 16,23 96 11,14
17 13,05 37 10,50 57 14,96 77 6,68 97 12,10
18 13,05 38 12,10 58 9,23 78 14,96 98 3,50
19 7,00 39 9,55 59 12,10 79 13,37 99 4,46
20 9,55 40 13,05 60 14,64 80 9,23 100 4,77
Mdia = 11,30 cm
Varincia = 8,33cm
2
Mdia = 14,00cmeVarincia = 2,30 cm
2
, relativos aoDAPdeplantas de umclonecolocadointercalarmente
no plantio de E. cloesiana.
12.5.2 Estimativa da Herdabilidade e Ganho com a Seleo
Apartir dos resultados mostrados anteriormente, umoutro parmetro degrande utilidade
para os melhoristas a estimativa da herdabilidade (h
2
). Isso porque ela permite antever a
possibilidade de sucessocoma seleo, umavez que reflete a proporoda variao fenotpica
que pode ser herdada. Emoutras palavras, ela mede a confiabilidade do valor fenotpico
como indicador do valor reprodutivo e obtida pela expresso:
2 2 2
2
2 2
100 100
G F E
F F
h x x
7 7 > 7
? ?
7 7
. No caso,
2
6, 03
100 72, 39
8, 33
h x ? ?
%.
302
Esse valor significa que 72,39%da variao do dimetro das rvores de eucalipto de
natureza gentica.
Vejamos agora de que modo essa estimativa pode auxiliar o melhorista de Eucalipto.
Suponhamos que ele selecione, para propagao vegetativa, todas as rvores commais de
15 cmde dimetro, no caso as rvores de nmero 5 (15,92 cm); 13 (17,83 cm); 15 (18,78
cm); 16 (16,23 cm); 53 (15,60 cm); 76 (16,23 cm) e 90 (15,60 cm). Desse modo, a mdia
das rvores selecionadas (MS), ser:
Se apenas essas rvores forem utilizadas para propagao na etapa seguinte, qual
dever ser o dimetro mdio esperado das rvores na nova populao, isto , a mdia da
populao melhorada? Para responder a essas indagaes, vamos considerar a Figura 12.5.
Veja que a mdia da populao original (M
o
) 11,30 cm. Amdia da populao melhorada
(M
m
) ser a mdia original mais o ganho esperado coma seleo (GS), ou seja, M
m
= M
o
+
GS. Pode-se demonstrar que, nesse caso, o ganho esperado com a seleo poder ser
obtido pela expresso:
emque: ds o diferencial de seleo, isto , a superioridade dos indivduos selecionados em
relao a todos os indivduos da populao (Figura 12.5). Assim, ds = M
s
- M
o
. Nesse
exemplo, ds = 16,60 - 11,30 = 5,30 cm.
Depreende-se, desse modo, que o ganho esperado coma seleo dever ser:
GS = ds h
2
= 5,30 x 0,7239 = 3,84 cm. Se quisermos, poderemos estimar o ganho
esperado coma seleo empercentagem, para ser comparvel comoutras situaes:
Como pode ser observado, pela expressodo ganho, a estimativa de h
2
uma indicao
do sucessodo melhorista. Vejaque quanto menor for a sua estimativa menor ser a proporo
do diferencial de seleo (ds) que ser transmitido aos descendentes. Se h
2
, por exemplo,
for zero, no existindo variao gentica, a seleo ser efetuada, mas no ocorrer nenhum
ganho, pois toda a diferena entre as rvores ambiental. No outro extremo, se h
2
for de
100%, toda a diferena entre as plantas gentica e como a propagao vegetativa, ela
ser integralmente passada aos filhos, ou seja, M
m
= M
s
.
Nesse ponto, relevanteenfatizar que a h
2
de umcarter no umaestimativa imutvel.
Pelo contrrio, ela varia coma variao gentica presente e como efeito do ambiente.
possvel, desse modo, aumentar a estimativa de h
2
utilizando populao commaior variao
gentica e tambmrealizando umefetivo controle do ambiente.
15, 92 17,83 18, 78 16, 23 15, 60 16, 23 16, 23
16, 60 cm.
7
s
M
@ @ @ @ @ @
? ?
2
GS h ds ?
3, 84
% 100 100 33, 98%
11, 30
o
GS
GS x x
M
? ? ?
303
FIGURA 12.5. Efeito da seleo em uma populao de plantas de eucalipto, em que foram
selecionados todos os indivduos com dimetros superiores a 15 cm . M
o
- mdia da populao
original; M
s
- mdia dos indivduos selecionados; M
m
- mdia da populao melhorada; ds -
diferencial de seleo; GS - ganho esperado com a seleo.
possvel visualizar tambmque a eficinciada seleo pode ser incrementada por meio
do diferencial de seleo (ds). Quando ns selecionamos uma menor proporo de indivduos
mais extremos, isto , usamos uma maior intensidade de seleo, o valor do diferencial de
seleo aumentado e, como consequncia, tambm, o ganho comaseleo incrementado.
Uma questo que poderia ser levantada por que no se utilizar sempre a mxima intensidade
de seleo, ou seja, a escolha do melhor indivduo. No presente caso, por exemplo, por que
no selecionar apenas o indivduo de nmero 15, o demaior dimetro (18,78 cm)? Aresposta
a essa indagao pode ser dada considerando dois aspectos: o primeiro deles que como a
herdabilidade no de 100%, esse indivduo pode ter expressado o fentipo extremo por ao
do meio ambiente, no sendo o demelhor constituio gentica; o segundo que, normalmente,
o melhorista realizavrios ciclos seletivos e, desse modo, seria exauridaa variabilidade gentica
sempossibilidade de sucesso nos ciclos seletivos subsequentes.
No exemplo apresentado anteriormente, foi considerada uma planta que possvel
realizar a propagao assexuada. Nessa situao, toda a variao gentica transmitida
selecionados todos os indivduos com diametros superiores a 15 cm. M
0
304
Como j foi comentado, a varincia observada no P
1
, P
2
, e F
1
toda ambiental, uma
vez que todos os indivduos dentro dessas populaes apresentamo mesmo gentipo. As
diferenas observadas nas estimativas da varincia para o P
1
, P
2
e F
1
so decorrentes,
principalmente, da amostragem. Dessa forma, pode-se estimar a varincia ambiental (7
E
3
)
pela mdia das trs varincias dessas populaes, ou seja:
1 2 1
2 2 2
2

482, 76 132, 80 323, 68
313, 08
3 3
P P F
E
7 @ 7 @ 7
@ @
7 ? ? ?
2
2 2 2

G E
F
7 ? 7 @7
Avarincia fenotpica da gerao & $
2
2
2
F
F 7
possui, evidentemente, dois componentes:
o primeiro deles decorrente do efeito do ambiente, e o segundo, segregao e recombinao
dos genes que do origem variabilidade gentica. Como o efeito ambiental da gerao F
2
pode ser considerado da mesma magnitude do observado para o P
1
, P
2
e F
1
, pode-se,
assim, estimar a varincia gentica da gerao F
2
(
2
G
7 ) da seguinte forma:
emque:
2
2
F
7
- varincia fenotpica da gerao F
2
2
E
7 - varincia ambiental mdia
2
G
7 - varincia gentica
No nosso exemplo, a
2
G
7 ser:
descendncia. O que ocorre, no entanto, quando a propagao sexuada, por meio da
meiose e, posteriormente, fuso dos gametas? Para exemplificar, vamos utilizar novamente
os dados referentes ao peso dosgros do feijoeiro apresentadosna Tabela 12.1. As estimativas
das varincias obtidas para aquele experimento foram:
2
2 2 2
2220, 98 313, 08 1907, 90
G E
F
7 ? 7 >7 ? > ?
1
2
482, 76
P
7 ?
2
2
2220, 98
F
7 ?
2
2
132,80
P
7 ?
1
2
2401, 00
RC
7 ?
1
2
323, 68
F
7 ?
2
2
831, 76
RC
7 ?
305
Gentipos: B
1
B
1
B
1
B
2
B
2
B
2
Valor fenotpico: I + a I + d I - a
Frequncia: 1/4 1/2 1/4
Avarincia gentica, por sua vez, composta pelo efeito aditivo e de dominncia dos
genes. Para verificar oque est contido na
2
G
7 presente emuma populao F
2
, ser novamente
utilizado o esquema apresentado na Figura 12.2.
Como j foi comentado, $ representa o ponto mdio entre os dois gentipos
homozigticos; a mede o afastamento de cada gentipo homozigtico emrelao mdia; d
mede o afastamento do heterozigoto em relao mdia. Desconsiderando os efeitos
ambientais para uma gerao F
2
, pode-se escrever:
Amdia da gerao F
2
(
2
F ) , portanto, 1/4 ( + a) + 1/2 ( + d) + 1/4 ( - a), que,
resolvendo, resulta em
1
2 2
F d ? I @ . Da estatstica, sabemos que a varincia fornecida
pela expresso:
no caso da F
2
, tem-se ento:
2
F
2
7 = 1/4 [ + a - ( + 1/2 d)]
2
+ 1/2 [ + d - ( + 1/2 d)]
2
+ 1/4 [ - a - ( + 1/2 d)]
2
. Resolvendo, obtm-se:
Quando se consideramtodos os genes envolvidos no controle do carter, tem-se:
& $
2
2
1
n
i i
i
f X X
?
7 ? > 0
2
2 2 2
1 1
2 4
F
a d 7 ? @
I@ I @ I @
I @ I@
I @ I @ I @
I@
2
2 2 2
1 1
2 4
F
a d 7 ? @ 0 0 , substituindo
2
1
2
a 0 por 7
A
3
e
2
1
4
d 0 por
2
D
7 , tem-se:
2
2 2 2
A D
F
7 ? 7 @ 7
emque:
2
A
7 a varincia gentica aditiva
2
D
7 a varincia gentica de dominncia
Utilizando-se raciocnio anlogo, pode-se demonstrar que a soma das varincias
genticas dos dois retrocruzamentos fornecida por:
1 2
2 2 2 2
2
A D
RC RC
7 @ 7 ? 7 @ 7
.
Utilizando-se, assim, as estimativas da varincia fenotpica da gerao F
2
e dos
retrocruzamentos, possvel isolar os componentes da varincia gentica. Considerando o
caso do peso das sementes do feijoeiro, tem-se:
2
G
"
2
2
F
7
2
2
F
G
7
2
2
F
G
7
2
2
F
G
7
306
2
2 2 2 2
2220, 98
A D E
F
7 ? ? 7 @7 @ 7
& $
1 2
2 2 2 2 2
2401, 00 831, 76 3232, 76 2 2
A D E
RC RC
7 @7 ? @ ? ? 7 @ 7 @ 7
Sendo assim,
& $
2 1 2
2 2 2 2
2
A
F RC RC
7 ? 7 > 7 @ 7
2
1209, 20
A
7 ?
Como
2
313, 08
E
7 ? , pode-se obter tambma estimativa de
2
D
7 utilizando a
2
2
F
7
, isto :
2
2 2 2 2
698, 70
D A E
F
7 ? 7 >7 >7 ?
Nesse caso, pode-se estimar dois tipos de herdabilidade: herdabilidade no sentido
amplo (
2
a
h ), e herdabilidade no sentido restrito (
2
r
h ). Esses dois tipos de h
2
so obtidos a
partir das expresses que utilizama gerao F
2
como referncia:
2
2 2
2 2
2
2
2 2
100 100
E
F
G
a
F F
h x x
7 >7
7
? ?
7 7
2 1 2
2 2
2 2 2
2
2
2 2
2
100 100
F RC RC
A
r
F F
h x x
7 >7 >7
7
? ?
7 7
Como se observa, pelas expresses apresentadas, a diferena entre os dois tipos de
herdabilidade apenas no numerador das expresses. Aherdabilidade no sentido restrito
considera apenas a varincia gentica aditiva, aquela que fixada pela seleo, sendo
evidentemente, na maioria dos casos, a mais importante para os melhoristas. Aestimativa da
herdabilidade no sentido amplo, que envolve toda a varincia gentica -
2 2
A D
7 @ 7 -, tem
importncia emcaso de plantas que apresentampropagao vegetativa, como o caso visto
anteriormente, isso porque, nessa situao, o gentipo integralmente herdado.
Apartir dos dados do peso das sementes do feijoeiro (Tabela 12.1), pode-se obter as
duas estimativas da herdabilidade, ou seja:
2 1 2
2
2 2 2
2
2
2
2 ( )
100 100
2220, 98
7 > 7 @7
7
? ? ?
7
F RC RC
A
r
F
h x x
2
2
2 2
2
2
2220, 98 313, 08
100 100 85, 90%

2220, 98
7 > 7
>
? ? ?
7
F E
a
F
h x x
2
2 2220, 98 (2401, 00 831, 76)
100 54, 44%

2220, 98
> @
? ?
r
x
h x
307
Como se observa, h diferena entre as duas estimativas, isso porque na varincia
gentica total presente na F
2
existe uma certa proporo da varincia de dominncia, como
j comentado.
Como j salientado, a herdabilidade no apenas uma propriedade do carter, mas
tambmda populao e das condies ambientais a que foramsubmetidos os indivduos.
Por exemplo, o valor da
2
r
h indica que 54,44%da variao fenotpica do peso das sementes
do feijoeiro decorrente da variao gentica aditiva. Porm, essa estimativa vlida para
a populao F
2
utilizada e nas condies ambientais emque foramobtidos os dados. Com
base no que foi mencionado, pode-se concluir que a herdabilidade, de uma certa caracterstica,
no imutvel. Na realidade, a h
2
pode ser aumentada no somente pela introduo de mais
variao gentica na populao, mas melhorando as condies experimentais, de modo a
reduzir a contribuio da variao ambiental para a variao fenotpica total.
Apesar das diferenas que ocorremnas herdabilidades de uma dada caracterstica, as
estimativas apresentadas na literatura mostramque cada carter apresenta uma amplitude de
valores da herdabilidade que lhe peculiar. Assim que caractersticas, tais como: produo
de gros de uma planta, produo de ovos nas aves e produo de leite nos bovinos so
caractersticas muito influenciadas pelas condies ambientais e apresentamherdabilidades
baixas, normalmente inferiores a 30%; outras caractersticas como peso das sementes, altura
das plantas, peso do ovo so menos influenciadas pelo ambiente e apresentam, em
consequncia, herdabilidade mais elevada.
Uma das principais utilidades da herdabilidade, como j visto, permitir que se estime
o ganho coma seleo antes mesmo que ela seja realizada. Essa estimativa muito importante
porque permite, entre outras coisas, escolher o mtodo de seleo que seja mais eficiente e
tambmas alternativas para se conduzir o processo seletivo. Existemvrios mtodos de
seleo, os quais no sero tratados aqui. Ser considerada apenas mais uma situao para
ilustrar a estimativa do ganho gentico, considerando os dados do peso das sementes do
feijoeiro (Tabela 12.1).
Aseleo poder ser realizada na gerao F
2
, uma vez que essa populao apresenta
variabilidade gentica. Consideremos, por exemplo, que o objetivo seja obter uma nova
populao em que o peso mdio dos gros seja maior do que o da F
2
. Nessa gerao, o
peso mdio foi de 266 mg, e o intervalo de variao foi de 160 a 390 mg. Suponhamos que
sero selecionadas todas as plantas cujo peso mdio dos gros seja de 350 mg ou mais.
Assim, pode-se questionar: qual ser o peso mdio da nova populao (M
m
) descendente
dos indivduos selecionados? Emoutras palavras, qual ser o progresso gentico (GS)?
Como sero selecionadas as plantas cujos pesos mdios das sementes so maiores,
evidentemente a nova populao dever ter umacrscimo emrelao mdia da populao
que ser submetida seleo (M
o
), ou seja:
308
E o diferencial de seleo :
ds = M
s
- M
o
= 363,08 - 266,00 = 97,08 mg
Sendo assim, o GS :
GS = 0,5444 x 97,08 = 52,85 mg
E a mdia esperada da populao melhorada :
M
m
= 266,00 + 52,85 = 318,85 mg
Essa a mdia esperada da nova populao, se foremselecionados todos os indivduos
compesomdiodosgrossuperior a350mgeseomaterial for cultivadoemcondiesambientais
semelhantess dapopulao submetida seleo. Pode-seestimar tambmo ganho percentual
esperado, oquepermite compar-lo comoutrasestimativas deganho, ouseja:
M
m
= M
o
+ GS
O que se deseja mostrar a possibilidade de estimar GS antes que a seleo seja
realizada. Nesse exemplo, sero selecionadas as plantas compeso mdio das sementes
igual ou superior a 350 mg. Assim, a mdia dos indivduos selecionados - M
s
- :
(6 350) (2 360) (2 370) (1 380) (2 390)
363, 08
13
s
x x x x x
M mg
@ @ @ @
? ?
GS%= GS/M
0
x 100 = 19,86%
12.5.3 Estimativa do Nmero de Genes
O conhecimento do nmero de genes envolvidos na expresso de um carter de
grande importncia no estudo da herana dos caracteres quantitativos e tambm no
melhoramento de plantas e animais, principalmente no que se refere estimativa de
probabilidade de se obter determinado gentipo emuma populao segregante.
Umdosmodos para se estimar o nmero de genes envolvidos por meio da frequncia
comque so recuperados os fentipos extremos para a caracterstica considerada na gerao
F
2
. Na Tabela 12.15, encontram-se os valores que permitemobter a estimativa do nmero
de genes envolvidos. Esse mtodo, apesar da facilidade de aplicao, , porm, de pouca
utilidade quando cinco ou mais genes esto envolvidos, porque a partir da a populao
segregante deve ser muito grande para que ocorra os tipos extremos. Por exemplo, com
cinco genes, umdos fentipos extremos ocorrer comfrequncia de 1/1.024, j, com10
genes, a frao cai para 1/1.048.576 e com 20 genes somente 1 em 1.099.511.627.776.
309
2
2 2
(1/ 2)
F
G
na 7 ?
Obtendo-se o valor de a emfuno da diferena entre os homozigotos, e substituindo
na expresso da varincia teremos:
1 2
2
P P
a
n
>
?
Substituindo (2) em(1), temos:
2
2
1 2 2
1
2 2
F
G
P P
n
n
. 1
>
7 ?
+ /
+ /
) -
& $
2
2
1 2
2
1
8
F
G
P P
n
>
7 ?
(1)
(2)
TABELA12.15. Probabilidadedeocorrncia, na geraoF
2
, deindivduos manifestandoa expresso
extrema de um carter quantitativo.
Nmero de
genes
Nmero de alelos
segregantes
Frequncia com que recuperado um dos
fentipos extremos na gerao F
2
1 2 (1/2)
2
= 1/4
2 4 (1/2)
4
= 1/16
3 6 (1/2)
6
= 1/64
4 8 (1/2)
8
= 1/256
! ! !
! ! !
! ! !
n 2n (1/2)
2n
Alm do fato de se ter de trabalhar comuma populao muito grande, o principal
agravante o efeito do ambiente, que dificulta a identificao do gentipo desejado por
intermdio do fentipo. Como as evidncias tm mostrado que para a maioria das
caractersticas o nmero de genes envolvido muito grande, e tambmmuito influenciados
pelo ambiente, a aplicao desse mtodo no temsido eficaz.
Para contornar essas dificuldades, o mtodo proposto por Sewall Wright, que utiliza
varincias e mdias, pode ser empregado. Por exemplo, considerando o modelo de umgene
e dois alelos - B
1
e B
2
-, vimos (Figura 12.2) que a diferena entre os dois homozigotos
corresponde a 2a. Se estiveremenvolvidos n genes de ao aditiva, essa diferena entre os
homozigotos ser igual a P
1
- P
2
= 2na. Avarincia gentica estimada para a gerao F
2
,
considerando apenas genes aditivos, dada por
310
assim,
& $
2
2
1 2
2
8
F
G
P P
n
>
?
7
emque:
n: nmero de genes controlando o carter
1 2
: P P > diferena entre as mdias dos genitores
2
2
F
G
7
: varincia gentica da gerao F
2
Na aplicao dessa expresso, alguns requisitos so necessrios:
Osgenitores devemser homozigticos e completamente contrastantes, ouseja, todos
os alelos efetivos devemestar emumdos genitores e todos os no efetivos, no outro;
Ausncia de interao gnica;
Todososgenesdevemter efeitosiguaiseaditivossobrea expressofenotpicadocarter;
Ausncia de ligao.
No caso de no satisfeita algumas dessas condies, o nmero de genes envolvidos
ser subestimado.
Vejamos a aplicao dessa expresso aos dados apresentados na Tabela12.1, referentes
ao peso dos gros do feijo.
1
445 P mg ?
2
2
132, 80
P
7 ?
1
2
482, 76
P
7 ?
2
2
2220, 98
F
7 ?
2
179 P mg ?
1
2
323, 68
F
7 ?
Combase nesses dados, a estimativa do nmero de genes envolvidos no controle do
carter :
& $
2
445 179
4, 63 5
8 1907, 90
n genes
x
>
? ? ?
Esse nmero de genes est at certo ponto de acordo coma distribuio obtida para
a gerao F
2
(Tabela 12.1). Veja que coma populao F
2
de 169 plantas, indivduos como
fentipo dos genitores no foramrecuperados. Isso mostra, pelo menos, que devemestar
envolvidos mais de trs genes, e o nmero obtido pela expresso est coerente comessa
afirmativa.
311
BOX 12.5. ESTIMADOR PARA O NMERO DE GENES QUANDO OCORRE
DOMINNCIA
Quando a interao allica dos diferentes genes que controlamo carter aditiva a
expresso de Wright (1934) apresentada no item12.5.3 possibilita estimar o nmero de
genes. Na ocorrncia de dominncia Wright (1934) apresentou outro estimador para o
nmero degenes, ouseja:
F
2
2 2
2
G
1/ 4(3/ 4 )D
n
' *
>I@I
? D H
7
D H
C G
emque e D = P
2
-P
1.
1 1
2 1
F P
P P
. 1 >
I ?
+ /
>
) -
As mesmas pressuposies do estimador quandoa interao allica aditiva (item12.5.3)
so vlidas aqui. tambm necessrio que em todos os genes envolvidos o grau de
dominncia seja o mesmo. No satisfeitas as suposies, a expresso fornece uma
subestimativa do verdadeiro valor.
312
PROBLEMASPROPOSTOS
1. Na espcie de Eucaliptus grandis, a altura do fuste aos sete anos varia de 12,00 ma
20,00 m. Procurou-se determinar a herana desse carter por meio do cruzamento de
plantas de 12,00 mcomplantas de 20,00 m, ambas puras, e obtiveram-se as geraes
F
1
e F
2
. A altura mdia do fuste nessas duas geraes foi de 16,00 m. Na gerao
F
2
, observou-se 0,4% de plantas com 12,00 m e 0,4% de plantas com 20,00 m,
sendo que as demais plantas da F
2
apresentaramalturas de fustes entre esses extremos.
Desconsiderando o efeito ambiental e genes comefeitos iguais, determine:
a) Qual o nmero de genes que controla a altura do fuste?
b) Qual a contribuio de cada alelo efetivo? Quais os gentipos dos genitores e de
F
1
? Qual a heterose da F
1
e F
2
?
c) Quantas rvores comfuste igual ao da F
1
ocorrementre 20.000 plantas F
2
?
d) Quantas rvores comfuste de 18,00 m so esperadas entre 20.000 plantas F
2
?
e) Duas rvores puras com16,00 mde fuste foramcruzadas e observou-se na F
2
o
mesmo resultado da F
2
apresentado anteriormente. Quais so os gentipos das rvores
genitoras?
f) Se na F
2
, referida no iteme, as rvores comfuste de 12,00mtivessemocorrido na
frequncia de 0,024% cada uma, qual seria o nmero de genes e a contribuio de
cada alelo efetivo?
g) Qual a sua concluso quando se comparam os resultados dos itens a e b com o
resultado do itemf?
2. Considerando os resultados do problema 1 e a presena de dominncia completa em
todos os locos comefeitos iguais, pergunta-se:
a) Qual a contribuio de cada loco comalelo dominante e de cada loco homozigoto
recessivo?
b) Considerando o cruzamento (P
1
) AAbbccDDx (P
2
) aaBBCCdd, qual a altura do
fuste de P
1
, P
2
e F
1
e o nmero de fentipos esperados na F
2
coma respectiva amplitude
de variao?
c) Qual a heterose das geraes F
1
e F
2
?
3. Apartir do cruzamento de animais da raa Nelore comos da raa Holandesa, foram
obtidos os seguintes resultados para o nmero de carrapatos/animal:
313
Observou-se que entre os 2.000 descendentes bimestios, apenas 2 apresentaram3
ou menos carrapatos/animal e que tambm2mostraramcerca de30 carrapatos/animal.
Desconsiderando o efeito do ambiente na expresso do carter, pede-se:
a) Qual o tipo de interao gnica est envolvido no controle desse carter?
b) Qual o nmero de genes que controla o carter?
c) Qual a contribuio de cada alelo efetivo? Quais os gentipos dos genitores e dos
mestios?
d) Identifique todos os fentipos possveis entre os bimestios colocando a frequncia
de cada umdeles.
e) Quantos animais como mesmo nmero de carrapatos dos mestios ocorrementre
os 2000 descendentes?
4. Considerando que a produo de leite embovinos seja controlada por 10 genes - na
realidadeesse nmerodeveser bemmaior -, qual seria onmeromnimodedescendentes
necessrios na gerao F
2
para se obter 20 fmeas coma mxima produo, a partir
do seguinte cruzamento e considerando que ocorre apenas interao aditiva?
Touros x Vacas
AABBccddeeFFgghhIIjj aabbCCDDEEffGGHHiiJJ
5. Emfrangos de corte, uma linhagemAapresenta ganho de peso diriode 30g, enquanto
a linhagemBpossui ganho de 50 g/dia. Se a diferena dos ganhos de peso se deve a
8 genes de efeitos iguais, pergunta-se:
a) Qual a proporo de cada fentipo na gerao F
2
proveniente do cruzamento das
duas linhagens, admitindo que a interao allica seja somente aditiva?
b) Qual seria a resposta do itema se a interao allica fosse somente de dominncia?
raa Nelore x raa Holandesa
2 carrapatos/animal 30 carrapatos/ animal
Mestios
16 carrapatos/animal
Bimestios
16 carrapatos/animal
314
c) Represente graficamente as distribuies fenotpicas da gerao F
2
para os dois
tipos de interaes allicas.
6. Suponha que a produtividade de gros emarroz seja decorrente de 6 genes aditivos e
o teor de protena do gro decorrente de 4 genes tambm aditivos. Considere o
cruzamento de uma cultivar Acoma mxima produtividade e o menor teor de protena,
com outra B que apresenta a mnima produtividade, porm, com o maior teor de
protena conhecido.
a) Apartir desse cruzamento, qual a proporo esperada de plantas na F
2
com os
maiores valores para a produtividade de gros e teor de protena?
b) Qual seria essa proporo, se a produtividade de gros fosse decorrente de 60
genes e o teor de protena decorrente de 40 genes?
c) Quais as implicaes das respostas dos itens a e b para o melhorista?
d) Qual o nmero de linhagens esperado quando for atingida a homozigose completa,
isto , aps sucessivas geraes de autofecundao, considerando 10genes no controle
de ambos os caracteres?
7. No estudo da herana da porcentagemdo contedo de leo da semente de girassol,
foramobtidos os seguintes resultados por Fick, 1975 (Crop Science 15, 77-78).
Populao Nmero de indivduos Mdia Varincia
P-21 VR 1 (P
1
) 30 39,5 8,10
MENN RR-18-1 (P
2
) 30 27,7 4,34
F
1
21 34,7 3,83
F
2
145 33,4 21,43
RC
1
107 38,6 13,45
RC
2
81 35,0 16,43
a) Por que a varincia da gerao F
2
a maior de todas?
b) Por que as varincias dos retrocruzamentos so de valores intermedirios?
c) Qual o tipo de ao gnica predominante?
d) Qual o provvel nmero de genes envolvidos no controle do carter?
8. Utilizando os dados do problema 7, estime:
a) Herdabilidade no sentido amplo;
b) Herdabilidade no sentido restrito;
315
c) O ganho esperado com a seleo entre plantas da gerao F
2
considerando que
foram selecionados indivduos cuja mdia do contedo de leo na semente foi de
38%;
d) Por que a mdia da populao melhorada menor do que a mdia dos indivduos
selecionados?
9. Opeso final de abate aos 33 meses para novilhos das raas Santa Gertrudis e Hereford
e de seu mestio esto apresentados no quadro a seguir:
Raas Peso (kg)
Santa Gertrudis (SG) 175,34
Mestio (SG x H) 216,67
Hereford (H) 177,89
a) Qual ser o peso mdio esperado emanimais bimestios?
b) Se ummelhorista desejasse fazer seleo de animais visando obteno de rebanhos
commaior peso de abate aos 33 meses, o que seria prefervel, partir do plantel mestio
ou bimestio? Justifique.
c) Quais cruzamentos deveriam ser realizados para se obter plantis (3/4 H, 1/4
SG); (5/8 H, 3/8 SG); e (7/8 H, 1/8 SG)?
d) Quais seriamos pesos mdios esperados para os animais desses plantis?
10. Acapacidade de expanso no milho de pipoca uma medida dada pela relao entre
o volume da pipoca expandida e o volume de gros. Emumtrabalho realizado pelo
Dr. Eduardo Sawazaki, no InstitutoAgronmico de Campinas foramcruzadas, duas a
duas, 6 variedades de milho de pipoca e avaliada a capacidade de expanso dos
hbridos e das respectivas variedades. Os resultados obtidos foramos seguintes:
Variedades V
1
V
2
V
3
V
4
V
5
V
6
V
1
21,7 26,6 26,8 28,2 25,1 22,0
V
2
28,3 28,6 28,9 28,7 26,2
V
3
28,9 28,5 27,4 27,4
V
4
27,1 29,7 28,5
V
5
25,6 27,9
V
6
18,8
a) Estimar a heterose dos hbridos V
4
x V
5
e V
5
x V
6
.
b) Qual a mdia esperada para a gerao F
2
desses hbridos?
c) Qual a explicao gentica para a ocorrncia da heterose?
316
Linhagens A B C D E F
A 1,40 7,12 6,35 4,50 6,14 4,95
B 1,26 6,80 5,20 6,85 5,40
C 1,35 5,80 6,40 5,60
D 1,70 5,95 4,40
E 1,30 6,20
F 1,55
a) Qual o nmero de hbridos duplos possveis de seremsintetizados a partir dessas
seis linhagens?
b) Quais os hbridos simples que devemser intercruzados para a obteno do melhor
hbrido duplo?
c) Se o agricultor utilizar as sementes F
2
, provenientes desse melhor hbrido duplo,
qual ser a reduo esperada na produo? Por que ocorre essa reduo?
d) Considerando o itemc, quantas vezes o custo da semente hbrida deve ser maior
que o custo do gro produzido, para compensar a utilizao da semente do paiol?
Considere umgasto de 20 kg de semente por hectare.
12. Cinco linhagens de aves de corte de uma empresa de melhoramento foramcruzadas
duas a duas em todas as combinaes, sendo obtido os resultados dos pesos dos
animais (g/animal) aos 50 dias apresentados a seguir:
Linhagens A B C D E
A 1,3 2,4 2,8 2,0 1,8
B 1,0 2,0 2,3 1,6
C 0,9 2,2 1,8
D 1,4 1,7
E 1,6
Pede-se:
a) Qual o nmero possvel de hbridos duplos comessas linhagens?
b) Quais linhagens devemser cruzadas para se obter o melhor hbrido duplo?
d) Estime a mdia da gerao F
1
e F
2
dos hbridos triplos (V
1
xV
2
) xV
3
e (V
4
xV
5
) xV
3
.
e) Estime a mdia das geraes F
1
e F
2
do hbrido duplo (V
1
x V
2
) (V
5
x V
6
).
11. Seis linhagens de milho foram intercruzadas e obtiveram-se quinze hbridos. As
produes mdias de gros (t/ha) de cada hbrido simples e de cada linhagemobtida
emexperimento apropriado foramas seguintes:
317
Gentica de Populao
13 GENTICA
DE POPULAES
13.1 INTRODUO
Agentica depopulaes umramo da gentica de capital importncia porque fornece
subsdios para o melhoramento das populaes de plantas e animais e, ainda, as bases
necessrias compreenso de como se processa a evoluo. Os princpios mendelianos
continuamsendo vlidos, pormo que nos interessa agora como avaliar as propriedades
genticas em grupos de indivduos ou populaes. Isto , nos tpicos anteriores, os
cruzamentos eramsempre direcionados no sentido de produzir geraes F
1
, F
2
, etc, ao passo
que nesse tpico o estudo das propriedades genticas de uma populao baseado no
comportamento de uma amostra aleatria de indivduos, ou seja, a gentica de populaes
estuda os mecanismos da hereditariedade emnvel populacional.
Para maior clareza, necessrio conceituar o que vema ser uma populao sob o
ponto de vista do geneticista: populao umconjunto de indivduos damesma espcie, que
ocupa o mesmo local, apresenta uma continuidade no tempo e cujos indivduos possuema
capacidade de se acasalaremao acaso e, portanto, de trocar alelos entre si. Variedades de
plantas algamas, como a cebola ou omilho, por exemplo, queapresentampolinizao aberta,
ao acaso, enquadram-se, perfeitamente bem, dentro do que denominado de populao
pelo geneticista, ou seja, so grupos de indivduos - plantas que so cultivados no mesmo
local e que, em decorrncia da sua forma de polinizao, permitem que os cruzamentos
ocorraminteiramente ao acaso. Do mesmo modo, animais que secruzamlivremente tambm
formampopulaes. Toda populao temumreservatrio gnico que lhe particular e que
o caracteriza. Este transmitido por intermdio das geraes. Almdisso, fcil visualizar
que emuma populao, o indivduo temuma importncia transitria; o que, interessa mesmo
so os alelos que ele possui e que sero transmitidos para as geraes seguintes.
13.2 FREQUNCIASALLICASEGENOTPICAS
As propriedades genticas das populaes so determinadas a partir do conhecimento
de suas frequncias allicas e genotpicas. As frequncias allicas correspondem s
propores dos diferentes alelos de umdeterminado gene na populao. As frequncias
318
genotpicas, por sua vez, so as propores dos diferentes gentipos para o gene
considerado.
Para estimar as frequncias allicas e genotpicas, vamos utilizar, como exemplo, uma
populao de plantas de cebola e considerar o carter cor dos bulbos que pode ser branca,
amarela ou creme. Esse carter controlado por umgene comdois alelos apresentando
dominncia incompleta, ou seja, o gentipo B
1
B
1
condiciona bulbo branco; B
1
B
2
, bulbo
creme; e B
2
B
2
bulbo amarelo. Suponhamos que em um determinado campo existam
distribudas ao acaso 2.000 plantas, sendo 100 de bulbos brancos, 1.000 de bulbos creme e
900 de bulbos amarelos.
Sendo assim, podemos escrever que:
100 plantas de bulbos brancos - n
1
nmero de gentipos B
1
B
1
1.000 plantas de bulbos cremes - n
2
nmero de gentipos B
1
B
2
900 plantas de bulbos amarelos - n
3
nmero de gentipos B
2
B
2
De tal forma que n
1
+ n
2
+ n
3
= N (nmero total de indivduos da populao
considerada). Afrequncia genotpica , ento, obtida da seguinte forma:
A partir desses dados, podemos determinar a frequncia do alelo B
1
, que ser
representada por p, e a frequncia do alelo B
2
, representada por q, sendo p +q =1,0. Pelo
que foi apresentado, pode-se escrever que:
Isto , a frequncia de um certo alelo estimada pela frequncia dos indivduos
homozigotos mais a metade dos indivduos heterozigotos para o alelo emquesto.
1
n 100
0, 05
N 2.000
? ?
Frequncia do gentipo B
1
B
1
= D=
1
B
2
=H=
2
B
2
= R=
De modo que D+ H + R = 1,0
2
n 1.000
0, 50
N 2.000
? ?
3
n 900
0, 45
N 2.000
? ?
Frequncia do alelo B
1
=
Frequnciado alelo B
2
=
1
2 1 2 1 2
1
2
2n n n n
p D H
2N N
@ @
? ? ? @
1
2 3 2 3 2
1
2
2n n n n
q R H
2N N
@ @
? ? ? @ Frequncia do alelo B
2
319
Gentica de Populao
fcil entender o porque dessas expresses. Noindivduo homozigticoB
1
B
1
, existem
dois alelos B
1
, da o nmero de indivduos comesse gentipo ter sido multiplicado por 2. No
heterozigoto B
1
B
2
, s a metade dos alelos B
1
; portanto, multiplicado por um. Adiviso
por 2N porque esta espcie diplide e o nmero total de alelos duas vezes o nmero de
indivduos envolvidos. No exemplo empauta tem-se:
13.3 EQUILBRIOGENOTPICODAS POPULAES
Vimos que as propriedades genticas de uma populao so definidas pelas suas
frequncias allicas e genotpicas. Contudo, a seguinte pergunta pode ser formulada: o que
ocorre comessas frequncias comas sucessivas geraes de acasalamentos ao acaso? Para
responder a essa questo, vamos considerar a populao de cebolas referida anteriormente,
que apresenta as seguintes frequncias allicas e genotpicas.
Alelos Gentipos
B
1
B
2
B
1
B
1
B
1
B
2
B
2
B
2
Frequncias p q D H R
Da podemos afirmar que so produzidos apenas dois tipos de gametas, aqueles como
alelo B
1
e aqueles como alelo B
2
. O resultado do acasalamento ao acaso ir depender da
unio aleatriadesses gametas, produzindo afrequncia genotpica apresentada naTabela 13.1.
Gentipos: B
1
B
1
B
1
B
2
B
2
B
2
Frequncias: p
2
2pq q
2
TABELA13.1. Frequncias genotpicas, resultantes da unio aleatria dos gametas, contendo os
alelos B
1
e B
2
nas frequncias p e q.
GAMETAS (Frequncias)
Femininos
Masculinos B
1
(p)
B
2
(q)
B
1
B
1
B
1
B
1
B
2
(p) (p
2
) (pq)
B
2
B
1
B
2
B
2
B
2
(q) (pq) (q
2
)
1
=
2
=
2x100 1.000 100 500
p 0, 3
2x2.000 2.000
@ @
? ? ?
2x900 1.000 900 500
q 0, 7
2x2.000 2.000
@ @
? ? ?
320
Apartir dessas frequncias genotpicas, possvel estimar as novas frequncias allicas,
ou seja: a frequncia do alelo B
1
= p
1
obtida, como j foi apresentado, pela seguinte
expresso:
Isto , a nova frequncia allica - (p
1
) igual frequncia allica da gerao anterior
(p). Omesmo ocorre para a frequncia do alelo B
2
, isto , q
1
= q.
Sendo assim, nas sucessivas geraes de acasalamentos ao acaso, a frequncia allica
dever ser a mesma e, evidentemente, a frequncia genotpica tambmno ser alterada.
Esse fenmeno foi inicialmente demonstrado, independentemente, por Hardy e
Weinberg, em1908, e ficou conhecido como Equilbrio de Hardy-Weinberg, que pode
ser enunciado do seguinte modo: Em uma populao grande, que se reproduz por
acasalamentos ao acasoe onde no h migrao, mutao ou seleo, poistodos os indivduos
so igualmente frteis e viveis, tanto as frequncias allicas como genotpicas se mantm
constantes ao longo das geraes. Vejamos como isso funciona na prtica. Voltemos ao
exemplo da cor dos bulbos da cebola. Se for considerado que o agricultor colheu o mesmo
nmero de sementes de cada uma das plantas e as semeou no ano seguinte, qual ser a
proporo de cada um dos tipos de bulbos nesse novo plantio? Foi dito que no campo
existiam 2.000 plantas, sendo 100 de bulbos brancos (5%), 1.000 creme (50%) e 900
amarelos (45%). Afrequncia allica estimada foi p (B
1
) =0,3 e q (B
2
) =0,7. Pelo que foi
comentado, se no h seleo, mutao e migrao, esta frequncia allica no se alterar
comas sucessivas geraes, e a nova frequncia genotpica dever ser:
Isto , se o agricultor obtiver uma nova lavoura com2.000 plantas, ele dever ter 180
plantas combulbos brancos, 840 combulbos cremes e 980 combulbos amarelos. Apartir
desse plantio, a proporo esperada dever ser sempre a mesma. Embora tenhamos
demonstrado o estabelecimentodo equilbrio empregando apenas umgene, devemos enfatizar
que, se vrios locos estiverem envolvidos, o equilbrio tambm atingido, porm ser
necessrio ummaior nmero de geraes para que isso ocorra. Esse equilbrio, envolvendo
dois ou mais genes, denominado de equilbrio de ligao.
p
1
= D + 1/2H = p
2
+ 1/2 (2 pq) = p
2
+ pq = p (p + q) = p
Gentipos Freq. Genotpicas
B
1
B
1
p
2
= (0,3)
2
= 0,09
B
1
B
2
2pq = 2(0,3 x 0,7) = 0,42
B
2
B
2
q
2
= (0,7)
2
= 0,49
321
Gentica de Populao
13.4 TESTEDEEQUILBRIODEHARDY-WEINBERG
Para testar se uma populao se encontra emequilbrio de Hardy-Weinberg, utiliza-se
o teste de (Captulo 7). Nesse caso, as frequncias genotpicas esperadas so obtidas,
admitindo-se que a populao esteja emequilbrio, ou seja, as frequncias genotpicas so
dadas por p
2
, 2pq e q
2
. Se o calculado for significativo a populao considerada no se
encontra em equilbrio. Se, por outro lado, o valor de calculado for no significativo
conclui-se que osdesvios das frequnciasgenotpicasobservadasnodiferemsignificativamente
das frequncias genotpicas de uma populao em equilbrio. Voltando ao exemplo da
populao de cebola, temos a seguinte situao (Tabela 13.2).
TABELA 13.2. Teste de equilbrio de Hardy-Weinberg.
Como o valor de
2
c
= 72,56 maior que o
2
t
, conclui-se que a populao inicial,
composta por 100 plantas de bulbos brancos, 1.000 plantas de bulbos cremes e 900 plantas
de bulbos amarelos, no se encontrava emequilbrio de Hardy-Weinberg. Nota-se, porm,
que uma nica gerao de acasalamentos ao acaso seria necessria para a populao entrar
emequilbrio, comfrequncias genotpicas p
2
, 2pq e q
2
.
13.5. ESTIMATIVA DAS FREQUNCIAS ALLICAS COM
DOMINNCIACOMPLETA
At agora foi considerado umexemplo comdominncia incompleta. Oque ocorre
quando hdominncia completa? Narealidade, as frequncias, tantoallicas como genotpicas
das populaes emequilbrio, independemdo tipo de interao allica. Havendo dominncia
completa ea populao estando emequilbrio, as frequncias allicaspodero ser determinadas
apartir dafrequnciadofentipo recessivo, queequivale frequnciadogentipohomozigtico
recessivo - (q
2
) -, ou seja, a frequncia do alelo recessivo - (q) - dever ser a raiz quadrada
da frequncia do gentipo homozigtico recessivo. Seja, por exemplo, uma populao de
1.000plantas de milho emequilbrio que possua 190plantas normais e810plantas braquticas,
emdecorrncia do alelo recessivo br
2
. Apartir dessa informao, possvel determinar as
frequncias allicas e genotpicas da populao, ou seja:
5
5
2
c
5
2
5
2
5
Gentipos
Frequncias fenotpicas
Observadas Esperadas
B
1
B
1
100 (0,3)
2
x 2.000 = 180
B
1
B
2
1.000 (2 x 0,3 x 0,7) x 2.000 = 840
B
2
B
2
900 (0,7)
2
x 2.000 = 980
Total 2.000
322
Frequncia do gentipo braqutico, br
2
br
2
=
2
81 , 0
1000
810
q ? ;
Frequncia do alelo br
2
= q =
2
q = 90 , 0 81 , 0 ? ;
Frequncia do alelo Br
2
= p = 1 - q = 0,10;
Frequncia do gentipo Br
2
Br
2
= p
2
= (0,10)
2
= 0,01
Frequncia do gentipo Br
2
br
2
= 2pq = 2 x 0,10 x 0,90 = 0,18
O conhecimento de que as populaes atingem o equilbrio e, a partir da, no h
alteraes nas frequncias allicas e genotpicas, serve para explicar o porqu de quando o
agricultor utiliza uma variedade de polinizao livre, como o milho, por exemplo, ele no
precisa comprar sementes todos os anos, desde que ele tenha o cuidado de plantar esse
material isolado de outra variedade ou hbrido de milho e tomar a cada ano uma amostra
representativa da populao do ano anterior. Isso ocorre, porque a variedade j est em
equilbrio, no havendo alterao nas frequncias genotpicas e, portanto, o comportamento
do material no se altera.
13.6 FATORES QUE ALTERAM AS FREQUNCIAS ALLICAS E
GENOTPICASDEUMAPOPULAO
Vimos que uma grande populao, acasalando-se ao acaso, estvel comrespeito s
frequncias allicas e genotpicas, na ausncia de agentes, tendendo a modificar suas
propriedades genticas. Agora iremos discutir quais so esses agentes e como eles atuam.
Existemdois tipos de processos que atuamalterando as frequncias allicas. So eles:
Processos sistemticos: que tendem a modificar as frequncias allicas de uma
maneira previsvel, tanto emquantidade como emdireo. Entre os processos sistemticos
esto a seleo, a migrao e a mutao;
Processo dispersivo: que ocorre em pequenas populaes pelo efeito de
amostragem, sendo previsvel emquantidade, mas no emdireo.
13.6.1 Seleo
Aseleopode ser definida comoaeliminao de determinadosgentipos da populao.
Em razo dessa eliminao, h alteraes nas frequncias allicas e genotpicas e, em
consequncia, a populao afasta-se do equilbrio. Aseleo pode ser natural ou artificial. A
seleo natural ser tratada no Captulo15. Aqui sercomentado apenas que elase fundamenta
2
810
0,81 q ;
1000
? ?
2
q
323
Gentica de Populao
no fato de que os indivduos diferememviabilidade e fertilidade e, por isso, contribuemcom
nmeros diferentes de descendentes para a prxima gerao, sendo preservados os indivduos
que deixamo maior nmero de descendentes. Aseleo artificial, realizada pelo homem,
tem, como objetivo principal, o melhoramento gentico das populaes, sendo selecionados
os indivduos que mais atendems necessidades humanas. Os aspectosque sero comentados
a seguir independemde ser a seleo natural ou artificial.
Oefeito da seleo nas populaes dependedo tipo de interao allicae do coeficiente
de seleo. Com relao interao allica, vamos considerar aqui apenas o caso da
dominncia completa, sendo desvantajoso o alelo recessivo. Tambmser considerado
apenas umnico coeficiente de seleo, ouseja, todos os indivduos portadores do gentipo
homozigtico recessivo sero eliminados.
Consideremos, por exemplo, uma populaode milho comos alelosBr
2
(planta normal)
e br
2
(planta braqutica). Estando a populao em equilbrio, pode-se escrever que as
frequncias dos alelos Br
2
e br
2
so p
0
e q
0
, respectivamente. Afrequncia dos gentipos
Br
2
Br
2
, Br
2
br
2
e br
2
br
2
fornecida por
2 2
0 0 0 0
p , 2p q e q , respectivamente. Se o melhorista
eliminar todas as plantas braquticas, o que ir ocorrer comessa populao comrelao s
frequncias allicas e genotpicas?
Eliminando todas as plantas br
2
br
2
, devero ficar apenas as plantas Br
2
Br
2
e Br
2
br
2
.
Oalelo br
2
no eliminado completamente da populao, porque ele fica encoberto no
heterozigoto. Como h seleo, devemocorrer alteraes nas frequncias allicas e, para se
estimaremas novas frequncias, p
1
e q
1
, utilizam-se dos dados apresentados noTabela 13.3.
TABELA 13.3. Estimativa das frequncias allicas aps um ciclo de seleo em uma populao
emequilbrio.
Pode-se demonstrar tambm que aps t geraes de seleo, nessa populao, a
frequncia do alelo br
2
obtida por:
Gentipos
Frequncias genotpicas
Frequncias allicas
Antes da Seleo Aps a Seleo
Br
2
Br
2
2
0
p p
4
3
0 0 0
2
0
0 0
2
0
1
q 1
1
q p 2 p
q p p
p
@
?
@
@
?
Br
2
br
2 0 0
q p 2
0 0
q p 2
br
2
br
2
2
0
q 0
0
0
0 0
2
0
0 0
1
q 1
q
q p 2 p
q p
q
@
?
@
?
Totais 1
0 0
2
0
2 q p p @
2
0
p
0 0
2p q
2
0
q
2
0
p
0 0
2p q
2
0 0 0
p 2p q @
0 0 0
1 2
0 0 0 0
p q q
q
p 2p q 1 q
? ?
@ @
2
0 0 0
1 2
0 0 0 0
p p q 1
p
p 2p q 1 q
@
? ?
@ @
324
Utilizando-se a mesma populao de milho apresentada anteriormente, em que a
frequncia do alelo Br
2
(p
0
) 0,10e doalelo br
2
(q
0
) 0,90, pergunta-se: a) Qual a frequncia
do alelo br
2
(q
1
) na populao proveniente da eliminao de todas as plantas contendo o
gentipo br
2
br
2
? b) Qual o nmero de ciclos de seleo que ser necessrio para obter uma
populao com a frequncia do alelo br
2
= 0,10? c) Qual a estimativa da alterao na
frequncia allica nos vrios ciclos seletivos at atingir a frequncia do alelobr
2
= 0,10?
Por meio de expresses j apresentadas, pode-se responder a essas questes do
seguinte modo: frequncia do alelo br
2
(q
1
) aps a seleo ser
4737 , 0
90 , 0 1
90 , 0
1
0
0
?
@
?
@ q
q
;
ou seja, pela eliminao de todas as plantas como gentipobr
2
br
2
na populao, a frequncia
do alelo br
2
reduzida de 0,90 para 0,4737.
Onmero de ciclos de seleo para passar a frequncia do alelobr
2
de 0,90 para 0,10
pode ser obtido a partir da expresso,
0
t
0
q
q
1 tq
?
@
cujo desenvolvimento resulta em:
No exemplo empauta, q
t
=0,10 e q
0
=0,90. Substituindo esses valores na expresso,
obtm-se t = 8,9 indicando que aps aproximadamente 9 ciclos seletivos a frequncia do
alelo, br
2
passaria de 0,90 para 0,10.
Amudana na frequncia allica - q - dada pela diferena entre a nova frequncia
e a frequncia na gerao anterior, ou seja:
2
2q = q
t
- q
t-1
Assim, substituindo q
t
por q
1
e q
t-1
por q
0
, teremos q = q
1
- q
0
. Como
0
1
0
q
q
1 q
?
@
,
pode-se obter a expresso:
2
Veja que o sinal negativo indica que a seleo contra o alelo recessivo br
2
, que
evidentemente ter sua frequncia reduzida a cada ciclo.
No exemplo, a alterao no primeiro ciclo de seleo foi de -0,4263 (0,4737 - 0,90).
Esse valor emtermos percentuais corresponde a uma reduo de 47,4%da frequncia allica
original. Dessa forma, pode-se dizer que o ganho no primeiro ciclo seletivo foi de 47,4%.
0
t
0
q
q
1 tq
?
@
emque t o nmero de geraes de seleo realizadas.
t 0
1 1
t
q q
? >
2
0 0
0
0 0
q q
q q
1 q 1 q
2 ? > ? >
@ @
325
Gentica de Populao
Na Tabela 13.4, esto apresentados os valores das frequncias e ganhos esperados aps
nove ciclos seletivos. Observa-se que medida que a frequncia do alelo desfavorvel
reduzida, o ganho coma seleo tambmmenor.
A seleo reduz a frequncia do alelo indesejvel e, consequentemente, eleva a
frequncia do alelo favorvel. Quando a frequncia do alelo desfavorvel alta, ocorrem
muitos indivduos como gentipo homozigoto recessivo na populao. Afrequncia desse
gentipo vai sendo reduzida gradativamente, comos ciclos de seleo, porm, mais rpida
nas geraes iniciais (Figura 13.1).
necessrio salientar que, no exemplo considerado, o carter controlado por apenas
umgene, comumefeito marcante no fentipo. Quando se realiza a seleo emumcarter
quantitativo, controlado por umgrande nmero de genes, todos eles sofrero alteraes nas
suas frequncias allicas, de modo semelhantequela observada para umnico gene. Contudo,
como os caracteres quantitativos so muito influenciados pelo ambiente, podendo apresentar
baixa herdabilidade, oprogresso coma seleoser ainda mais lento, porque muitos indivduos
comalelosindesejveis, sendo favorecidos pelas condies ambientais, no sero eliminados
pela seleo. Almdisso, no possvel acompanhar as alteraes das frequncias allicas,
como as mostradas na Tabela 13.4 e Figura 13.1.
TABELA13.4. Estimativas das frequncias allicas esperadas com a seleo, considerando uma
populao com frequncia inicial do alelo recessivo de 0,9 e seleo contra todos os gentipos
homozigticos recessivos.
Ciclos Frequncias Alteraes nas frequncias allicas
seletivos allicas 2 q 2 q %
0 q
0
= 0,9000 - -
1 q
1
= 0,4737 -0,4263 -47,4
2 q
2
= 0,3214 -0,1523 -32,1
3 q
3
= 0,2432 -0,0782 -24,3
4 q
4
= 0,1957 -0,0475 -19,6
5 q
5
= 0,1636 -0,0321 -16,4
6 q
6
= 0,1406 -0,0230 -14,1
7 q
7
= 0,1233 -0,0173 -12,3
8 q
8
=0,1098 -0,0135 -11,0
9 q
9
= 0,0989 -0,0109 -9,9
Assimsendo, omelhoramento de plantas eanimais temcomo fundamento a seleo de
gentipos, visando a aumentar as frequncias dos alelos favorveis. Consequentemente,
uma populao ser superior a outraquando apresentar maior frequnciade alelos favorveis.
Almdisso, pelo que foi exposto, o melhoramento das populaes por meio da seleo vai
326
se tornando mais difcil, isto , comganhos menores como incremento das frequncias dos
alelos favorveis.
FIGURA 13.1. Frequncia de indivduos homozigotos recessivos ao longo de quinze geraes de
seleo contra o alelo recessivo indesejvel, cuja frequncia inicial era q
0
= 0,9.
13.6.2 MIGRAO
Emplantas, a migrao ocorre, por exemplo, quando se misturamsementes de duas
ou mais populaes e as plantas oriundas dessas sementes so cruzadas entre si. Outra forma
comumde migrao a entrada de plentrazido pelo vento ou polinizadores insetos, aves,
morcegos, etc. Emanimais, a migrao ocorre quando se introduzemanimais de outras
procedncias no rebanho,oumesmo smemadquirido de empresas de melhoramento animal.
Oefeito da migrao nas propriedades genticas de uma populao depende da diferena
nas frequncias allicas da populao original e de indivduos migrantes e da proporo de
indivduos que migram. Anova frequncia allica (q
1
) da populao aps a migrao
fornecida por:
q
1
= (1 - M) q
0
+ M.q
m
327
Gentica de Populao
emque:
q
1
a frequncia de umdeterminado alelo aps a migrao;
q
0
a frequncia do alelo considerado antes da migrao;
M a proporo de indivduos migrantes;
q
m
a frequncia do alelo considerado na populao de indivduos migrantes.
Amudana na frequncia allica da populao ( 2q) decorrente da migrao :
Isto , o efeito da migrao depende, como j foi dito, da proporo de indivduos
migrantes e da diferena nas frequncias allicas da populao receptora e da populao
migrante.
Como exemplo, voltemos populao de milho contendo o alelo braqutico. Foi
mostrado que, na populao emequilbrio, as frequncias dos alelos Br
2
e br
2
eramde 0,1e
0,9, respectivamente. Considerando que emuma amostra de 4.000sementes representativas
dessa populao fossemmisturadas 1.000 sementes de uma populao contendo apenas
indivduos normais homozigotos, qual seria a frequncia allica nesta nova populao? Para
responder a essa indagao, basta utilizar a expresso:
Desse modo, obtm-se: q
1
= 0,9(1 - 0,20) + 1 (0,00) = 0,72.
Assim, na nova populao, a frequncia do alelo br
2
dever ser de 0,72 e do alelo Br
2
de 0,28.
13.6.3 Mutao
Amutao o fenmeno gentico que origina novos alelos nas populaes. Asua
ocorrncia muito rara, da ordemde 10
-4
a 10
-8
mutantes por gerao, isto , umemdez mil
ou cem milhes de gametas mutante. Desse modo, a sua importncia em termos de
alteraes nas propriedades genticas de uma populao s ocorre se ela for recorrente, isto
, se o evento mutacional se repetir regularmente comuma dada frequncia.
2q = q
1
- q
0
2q = (1 - M)q
0
+ Mq
m
- q
0
2q = M (q
m
- q
0
)
q
1
= (1 - M)q
0
+ Mq
m
sendo: 2 , 0
000 . 5
000 . 1
M ? ? e q
m
= 0,0;
328
Convmsalientar que o efeito da mutao emuma populao s pode ser observado
a longo prazo. Alm disso, pode-se demonstrar que existemcondies emque, mesmo
ocorrendo mutao, a populao permanece emequilbrio.
13.6.4 Processo Dispersivo
O processo dispersivo est associado a problemas de amostragens empopulaes
pequenas. Aamostragemocorre quando os indivduos da populao produzemseus gametas
e estes se unem para formar a gerao seguinte. Os gametas que do origem gerao
seguinte so considerados uma amostra de todos os gametas da populao. Se, por qualquer
razo, o tamanho da populao muito reduzido, dificilmente todos os alelos estaro
representados coma mesma frequncia da gerao anterior.
Autilizao de populaes pequenas pode contribuir para dois fenmenos distintos: a)
Promover a fixao ou eliminao de determinados alelos da populao; b) Aumentar a
frequncia dos acasalamentos entre indivduos aparentados (endogamia). No primeiro caso,
o fenmeno se d inteiramente ao acaso e um dos maiores problemas da amostragem
deficiente. Oefeito dessas amostragens ao longo das geraes que as frequncias allicas
flutuamirregularmente emtorno da frequncia allica inicial, processo esse denominado de
deriva gentica. Oresultado dessa oscilao das frequncias allicas que eventualmente
pode ocorrer perda ou fixao de umcerto alelo (q = 0 ou q = 1). Nesse ponto, todos os
indivduos da populao seriamgeneticamente idnticos, impedindo progresso gentico com
a seleo para o loco emquesto. Avarincia da frequncia allica dada por
2
q
pq
2N
7 ?
,
emque Nrepresenta o nmero de indivduos amostrados.
Endogamia ouconsanguinidade
UmadaspressuposiesdoequilbriodeHardy-Weinbergqueosacasalamentos entreos
membros dapopulaosejamtotalmenteaoacaso. Contudo, emmuitasespcies, podehaver uma
tendnciadeosacasalamentosocorrerementreindivduosaparentados, oquecaracterizaaendogamia
ou consanquinidade. Assim, umindivduo endogmico aquele cujos pais so geneticamente
relacionados, ouseja, soaparentados. Doisindivduossoconsideradosparentesquandopossuem
ancestraiscomunsnasuagenealogia, ouquandoumdescendentedooutro.
Quando ocorre endogamia, h uma maior probabilidade na descendncia de que os
indivduos possuamcpias de ummesmo aleloancestral o que leva, consequentemente, a um
aumento na proporo de homozigotos (Tabela 13.5). Existemdiversas formas de ocorrer a
endogamia como, por exemplo, acasalamentos entre pais e filhos, entre irmos, entre primos,
etc. Quanto mais forte for o parentesco entre os indivduos que se acasalam, maior ser a
probabilidade de os descendentes possuremalelos que so cpias de umalelo ancestral
(Figura 13.2 e Box 13.1). Aforma mais drstica de endogamia a autofecundao, que
ocorre emmuitas espcies vegetais e apenas emalgumas espcies animais.
329
Gentica de Populao
BOX 13.1. COMO MEDIR A ENDOGAMIA OU CONSANGUINIDADE
Aendogamia ouconsanguinidade o acasalamento entre indivduos aparentados.
Ela medida pelo coeficiente de endogamia, que varia de 0 a 1. O coeficiente de
endogamia a probabilidade de doisalelos de umlocotomados, ao acaso, deumindivduo
serem idnticos por descendncia. O coeficiente de endogamia mede o aumento na
probabilidade de umindivduo possuir alelos idnticos por descendncia (homozigose)
emrelao a umindivduo de uma populao panmtica, onde os acasalamentos so
completamente ao acaso. Assim, se umindivduo temo coeficiente de endogamia de
0,25 ele tem cerca de 25% a mais de ser homozigoto em relao a indivduos no
consanguneos. Afrmula geral para se estimar o coeficiente de endogamia (ou de
consanguinidade) :
& $
A
n
X
F F @ /
-
1
+
)
.
?
0
1
2
1
emque, F
X
o coeficiente de endogamia do indivduo Xe F
A
o
coeficiente de endogamia do genitor comumemcada caminho que une os genitores do
indivduo X. n o nmero de indivduos que fazemparte do caminho entre os genitores do
indivduo X. Por exemplo, considere o seguinte pedigree:
O coeficiente de endogamia (consanguinidade) do ndivduo
X seria:
F
X
= ()
3
. (1 + F
A
) = 1/8. Nesse caso, n igual a 3, pois
so trs os indivduos que fazem parte do caminho que liga
os genitores de X (D, A, E) e F
A
(ancestral comum) zero.
Quandoexiste maisde umcaminho ocoeficientedeendogamiadado pelosomatrio
dos Fs de cada caminho. Por exemplo, considere o seguinte pedigree:
Nesse caso, ocorrem dois caminhos at X: o primeiro envolve o
genitor comum A, isto , C, A, D. O segundo envolve o genitor
comum B, isto , C, B, D. Assim, o coeficiente de endogamia seria:
& $ & $
4
1
8
1
8
1
1
2
1
1
2
1
3 3
? @ ? @ /
-
1
+
)
.
@ @ /
-
1
+
)
.
?
B A X
F F F , considerando
que os genitores comuns A e B no sejam endogmicos.
Empedigreesmaiscomplexos podemocorrer vrios caminhos. Cada caminhodever
ter pelomenosumindivduodiferente doscaminhosanteriores, almdisso, emcadacaminho
no se podepassar mais de umavez pelo mesmo indivduo. Finalmente, deve-se considerar
que emcada caminho h mudana na direo das setas apenas no ancestral comum.
330
Como exemplo do efeito da endogamia, vamos considerar novamente a populao de
plantas braquticas de milho, mencionada anteriormente. Qual seria oefeito nesta populao,
se todas as plantas foremautofecundadas?
TABELA 13.5. Estimativas das frequncias genotpicas, aps g geraes de autofecundao em
uma populao qualquer.
FIGURA 13.2. Curvas mostrando o aumento na porcentagem de homozigose em geraes
sucessivas sob vrios sistemas de acasalamentos.
No exemplo considerado, tm-se plantas homozigticasBr
2
Br
2
de altura normal (cerca
de 2,5m) comfrequnciade 0,01; plantas heterozigticasBr
2
br
2
dealtura normal (2,5m) com
frequncia de 0,18e plantas homozigticasbr
2
br
2
(braquticas, cerca de 1,5 mde altura) com
frequncia de 0,81. Autofecundando todos os indivduos teremos os descendentes Br
2
Br
2
,
Br
2
br
2
e br
2
br
2
nas propores de 0,055; 0,090 e 0,855, respectivamente (Tabela 13.6).
Gentipos
Frequncias genotpicas
Antes da Autofecundao Aps g Autofecundaes
AA D
0
g
g 0 0
1 1
D D 1 H
2 2
' *
. 1
? @ >
D H
+ /
) -
D H
C G
Aa H
0
g
g 0
1
H H
2
. 1
?
+ /
) -
aa R
0
g
g 0 0
1 1
R R 1 H
2 2
' *
. 1
? @ >
D H
+ /
) -
D H
C G
331
Gentica de Populao
TABELA13.6. Frequncias genotpicas nas populaes de milho emequilbrio e aps uma gerao
de autofecundao.
Populao Gentipos Altura
Mdia
Equilbrio Autofecundao
Br
2
Br
2
2,5 0,01 0,055
Br
2
br
2
2,5 0,18 0,090
br
2
br
2
1,5 0,81 0,855
Altura mdia na populao 1,69 m 1,645 m
oportuno mostrar que as frequncias allicas no se alteramcoma endogamia:
Populao emequilbrio:
10 , 0
2
18 , 0
01 , 0 ) (
2
? @ ? Br p
Populao aps a autofecundao: 10 , 0
2
09 , 0
055 , 0 ) (
2
? @ ? Br p
Por outro lado, observa-se que houve aumento na frequncia de homozigotos em
detrimento da frequncia de heterozigotos. Esse aumento na frequncia de indivduos
homozigotos responsvel tambmpela reduo da mdia populacional (1,69 mvs. 1,64
m), fenmeno este, que denominado de depresso por endogamia.
A depresso por endogamia um fenmeno amplamente conhecido em espcies
vegetais e animais e sua ocorrncia depende, entre outros fatores, da existncia de interao
allica de dominncia. Os resultados da endogamia podemser visualizados pelo aumento da
frequncia de fentipos recessivos e que so, frequentemente deletrios, tais como aumento
da taxa de mortes fetais e de mal- formaes, reduo do vigor, da fertilidade, do tamanho
do indivduo e da produo (Box13.2 e Box 13.3). Emmuitas espcies, como emalgumas
culturas eanimais domsticos, emquea endogamia no muito aparente, a seleo j eliminou
muitos desses alelos deletrios.
BOX 13.2. EFEITOS MALFICOS E BENFICOS DA ENDOGAMIA (OU
CONSANGUINIDADE)
Aconsanguinidade normalmente associada aefeitos malficos e, por muitos anos,
temsido condenada na espcie humana. Assim, casamentos entre indivduos aparentados
tmsidoproibidos por diversas sociedadesereligies.Asproibiescontraaconsanguinidade
so to profundamente enraizadas na Europa que, h 200 anos, os melhoristas de animais
so aconselhados a no us-la por seremcontra as Leisde Deus e da Natureza. Contudo,
os melhoristas de animais ignoraramessas recomendaes quando descobriramque a
consanguinidade era uma tcnica que poderia ser usada para desenvolver novas raas de
animais, melhorar os rebanhos e produzir animais comperformance superior.
332
A consanguinidade leva depresso por endogamia que uma reduo no
crescimento eviabilidade, associada a umaumento de anomalias. Emsunos, por exemplo,
diversos caracteres de importncia econmica tmsuas mdias reduzidas emfuno do
coeficiente de endogamia (ou consanguinidade). Quanto maior o grau de endogamia,
maior a reduo na mdia populacional. Trabalho realizado por Beres Kinet al. (1968)
obteve o sequinte resultado para mdia emfuno do coeficiente de endogamia (F).
F Nmero
nascidos
vivos
Peso ao
nascer (g)
Tamanho da
leitegada na
desmama
Peso na
desmama (g)
Pesos aos 154
dias (kg)
0,10 - 0,3 - 31,7 - 0,5 - 439,4 - 1,0
0,20 - 0,6 - 45,3 - 1,1 - 1.263,9 - 4,9
0,30 - 0,9 - 49,0 - 1,8 - 2.310,3 - 10,1
0,40 - 1,2 - 58,8 - 2,5 - 3.438,3 - 14,9
0,50 - 1,5 - 891,5 - 3,1 - 4.489,2 - 17,8
Emces, a consanguinidade temsido fortemente combatida, pois muitas raas
puras apresentaminmeros defeitos como displasia dos quadris, mau alinhamento das
mandbulas, luxao da patela, acalsia, aumento de partos por cesariana, fertilidade
reduzida, alta taxa de mortalidade de filhotes, aumento de infeces, etc.
Por outrolado, a endogamia tambmpode ser benfica, poisaumenta a prepotncia,
que a habilidade de umanimal emtransferir os seus fentipos para os descendentes.
Essa prepotncia resultado do aumento da homozigose. Como um indivduo
consanguneo possui maior nmero de locos emhomozigose comparado a umindivduo
no consanguneo, existe menor nmero de combinaes gnicas para a formao de
seus gametas. Como consequncia, a descendncia mais uniforme.
BOX 13.3. ENDOGAMIA (CONSANGUINIDADE) EM PORQUINHOS DA NDIA
Uma das investigaes mais extensivas e surpreendentes sobre consanguinidade foi
realizada emporquinhos da ndia (Caviaporcellus) pelo DepartamentodeAgricultura dos
EstadosUnidos emWashington, a partir de1906. Trinta ecincofmeassaudveise vigorosas
foramselecionadas e cruzadas comumgrupo menor de machos tambmselecionados,
gerando 35 famlias. Os acasalamentos foramnumerados e, a partir da, todos os demais
333
Gentica de Populao
cruzamentos foramrealizados entre irmos e irms de uma mesma famlia. Isso continuou
gerao apsgerao, sempre tomando osdois melhores indivduos. Dozedessas famlias
foramparalisadas, antesdofinal doexperimento, por vrias razes. Das23famlias restantes
uma se extinguiu aps 5 anos, uma aps 8 anos, trs aps 9 anos e trs aps 11anos. Em
1917, por faltade espao, apenas cincofamliasforamperpetuadas eas demais descartadas.
Dois resultados surpreendentes foramobservados aps umgrande nmero de
geraes de acasalamentos consanguneos: (1) cada famlia se tornou gradualmente mais
homognea, mas comuma notvel diferenciao entre as famlias. Algumas famlias se
tornaramextremamente homogneas para caracteres tais como: cor da pelagem, cor
dos olhos, proeminncia dos olhos, conformao do corpo e at mesmo temperamento.
(2) ocorreu umdeclnio acentuado emvigor pelos primeiros nove anos (cerca de 12
geraes). Apartir da, no houve mais reduo de vigor, indicando que as famlias se
tornaram puras, isto , homozigticas na maioria dos locos. Alm dos caracteres
morfolgicos j descritos, houve tambmgrande variao entre as famlias comrelao
aos rgos internos dos animais. Ofgado, pulmo e corao forammuito maiores na
famlia 13do que na famlia 2. Atireide, adenides e bao diferiramno s no tamanho,
mas tambmno formatado entre as duas famlias.
334
Assim, aautofecundaoantes daseleopropiciouumamelhorianaeficinciada seleo
pelo aumento dafrequnciado gentipo homozigtico, br
2
br
2
, de apenas 1,125 vezes em
relao populao em equilbrio. Suponha, agora, outra populao em equilbrio, cuja
2
de 0,05. Nesse caso, teremos gra/gre = 10,5, mostrando que a
frequncia do gentipobr
2
br
2
bemmaior na populao autofecundada do que na populao
emequilbrio. Fica assimevidenciado quea seleo ser muito mais eficiente nessa populao
autofecundada, uma vez que se podereliminar 10,5 vezes mais indivduos indesejveis.
Comoaautofecundaoantes da seleoexigemaisumagerao, oprocesso seletivofica
mais demorado. Desse modo, quando o melhorista possui uma populao que est pouco
melhorada, isto, onde afrequnciado alelo recessivoalta, elerealiza osciclosseletivos iniciais
semautofecund-la. Porm, quandoa populaojestcombaixa frequnciado alelo recessivo,
a melhoria daeficincia da seleo apsa autofecundao compensa otempo adicionalgasto.
gra/gre = 1,125
Essa razo mostra que se o alelo recessivo estiver emalta frequncia na populao em
equilbrio (q
0
) no compensa utilizar a autofecundao para a sua eliminao. Porm, quando
q
0
for pequeno, sua eliminao ser menos efetiva numa populao emequilbrio do que
numa autofecundada. Para ilustrar essefato, vamosutilizar novamente ocarter alturadaplanta
do milho, controlada pelos alelos Br
2
e br
2
. Suponha uma populao emequilbrio emque a
2
de 0,8. Pode-se aquilatar a eficincia da seleo praticada nessa
populao antes ouaps uma autofecundao (g=1) atravs da razo gra/gre, ou seja:
g
0 g
0
gra 1 2 - 1
1 + H
gre 2R 2
' *
?
D H
C G
As famlias diferiramainda, no peso e nmero dos descendentes, bemcomo na
resistncia tuberculose. Infere-se que essas diferenas foramprovenientes da segregao
e recombinao dos vrios genes que controlam esses caracteres e o aumento na
homozigose.
13.6.5 Seleo com endogamia
A eficincia da seleo em populaes em que a frequncia do alelo indesejvel
muito baixa, pode ser incrementada, empregando-se acasalamentos endogmicos. Considere,
por exemplo, a razo entre a frequncia do gentipo recessivo aps g geraes de
autofecundao (gra) e a frequncia do mesmo gentipo na populao emequilbrio (gre), ou
seja, pela Tabela 13.5, tem-se:
seleo
pelo aumento da frequncia do gentipo homozigtico,
335
Gentica de Populao
PROBLEMASPROPOSTOS
1. Em6.000animais da raa shorthornde bovino foramidentificadosos seguintes nmeros,
segundo a cor da pelagem:
Pede-se:
a) Determinar as frequncias genotpicas e allicas nessa populao.
b) Verifique se essa populao est emequilbrio de Hardy-Weinberg.
2. Na planta conhecida como Maravilha, a cor da flor pode ser vermelha (V
1
V
1
), rosa
(V
1
V
2
) ou branca (V
2
V
2
). Emuma populao panmtica, composta por 2.000 plantas
foramencontradas 125 comflores brancas.
a) Quais as frequncias dos alelos V
1
e V
2
nessa populao?
b) Entre os 2.000 indivduos, quais os nmeros esperados de plantas com flores
vermelhas e rosas?
3. Utilizando os dados do problema 2, se o jardineiro coletar sementes apenas das plantas
de flores rosas para formar umnovo jardim, qual dever ser a proporo fenotpica
esperada?
4. Numplantel emequilbrio com1.200animais da raa holandesa, 48apresentampelagem
vermelha-brancas, os demais animais so preto-brancos. Sabendo-se que a pelagem
vermelha-branca decorrente do alelo recessivo b, pergunta-se:
a) Qual a frequncia do alelo Bnesse plantel?
b) Se os indivduos vermelho-brancos foremeliminados, qual ser o nmero de animais
comesse fentipo, aps atingir o equilbrio e mantendo-se o plantel com1.200 animais?
5. Tomando-se, ao acaso, dois animais preto-brancos do plantel mencionado no problema
4 antes de sofrer a seleo, qual a probabilidade de se obter umdescendente vermelho-
branco?
6. Emcebolas, a cor do bulbo pode ser roxa, emdecorrncia do alelo dominante Ae
amarela pelo alelo recessivo a. Numa populao com10.000 plantas, emequilbrio
de Hardy-Weinberg, ocorrem1.600 plantas combulbos amarelos.
Fentipo Gentipos Nmero de animais
Branco B
1
B
1
516
Vermelho-branco B
1
B
2
2.628
Vermelho B
2
B
2
2.856
Total 6.000
336
a) Qual a frequncia do alelo a nessa populao?
b) Qual o nmero de plantas combulbos roxos e gentipo homozigtico que ocorre
entre as 10.000 plantas?
c) Se o agricultor realizar cinco geraes de seleo visando a obteno de umcultivar
que produza apenas bulbos roxos, qual a proporo esperada de plantas que ainda
apresentaro bulbos amarelos na populao descendente, emequilbrio?
7. Partindo-se da populao melhorada do item c, do problema 6, quantos ciclos de
seleo ainda devero ser realizados para se obter uma nova populao emque apenas
0,49% das plantas possuembulbos amarelos?
8. Considerando todas as populaes de cebola citadas nos problemas 6 e 7, emqual
delas a autofecundao contribuir para a eliminao mais rpida do alelo?
9. No milho, a textura do gro pode ser lisa (Su-) ou enrugada (susu). Acor amarela do
gro decorrente do alelo Ye abranca ao alelo y. Emuma populao emequilbrio foi
tomada uma amostra de 2.400 gros, sendo 816 lisos e amarelos, 776lisos e brancos,
408 enrugados e amarelos e 400 enrugados e brancos.
a) Quais as frequncias dos alelos Su e Y, nessa populao?
b) Qual a frequncia esperada de indivduos homozigticos lisos e amarelos?
10. Utilizando os dados do problema 9:
a) Quaissero as novas frequncias allicas para os dois caracteres se foremeliminadas
todas as sementes enrugadas ou brancas?
b) Qual ser a frequncia de sementes lisas e amarelas aps a populao atingir
novamente o equilbrio?
11. Acor da raiz da cenoura controlada por umgene, sendo o alelo Yresponsvel pela
cor branca e seu recessivo y por cor amarela. Umagricultor colheu 20.000 sementes
de uma populao panmtica que apresentava 64% de plantas comrazes brancas.
Como de seu interesse aumentar a proporo de plantas comrazes amarelas, ele
misturou s suas sementes 5.000 sementes de umcultivar homozigtico para razes
amarelas. Qual a frequncia esperada deplantas comrazes amarelas na nova populao
aps o equilbrio?
No milho, a textura dogro pode ser lisa
337
Aberraes Cromossmicas
14 ABERRAES
CROMOSSMICAS
14.1 INTRODUO
Consideramos noscaptulosanteriores que os cromossomosse comportamnormalmente
durante a mitosee meiose de modo quesua estrutura e nmero, isto, ocaritipodas espcies,
permanece inalterado atravs das geraes. Porm, emalgumas situaes, podemocorrer
irregularidades, que so denominadas aberraes cromossmicas. Essas aberraes podem
ocorrer tantononmeroquantonaestruturados cromossomos esochamadas, respectivamente,
de aberraes cromossmicas numricas e estruturais. Nestecaptulo, objetiva-se apresentar
as causas dessas aberraes e algumas de suas consequncias citolgicas e genticas.
14.2 ABERRAESCROMOSSMICASNUMRICAS
Ao se tratar das bases citolgicas da herana (Captulo 4), assumimos que as clulas
somticas apresentam um par de cada um dos cromossomos caractersticos da espcie.
Essas clulas, bemcomo os organismos que as possuem, recebemo nome de diploides. No
entanto, certos fenmenos anormais podemocorrer espontaneamente ou sereminduzidos
pelo homem, provocando alteraes da condio diploide. As mudanas no nmero de
cromossomos so de dois tipos bsicos: mudanas emconjuntos cromossmicos inteiros -
euploidia - e mudanas empartes de conjuntos cromossmicos aneuploidia.
14.2.1 Euplodia
Euploides so clulas ou organismos cujo nmero somtico - 2n - de cromossomos
mltiplo exato do nmero bsico - x- de cromossomos da espcie. Assim, espcies normais
diploides so aquelas que apresentam2n = 2x cromossomos, isto , o conjunto bsico de
cromossomos ou genoma repetido duas vezes (2x). Por outro lado, h espcies emque o
genoma repetido ummaior nmero de vezes, constituindo os chamados poliploides, por
exemplo, 2n=3x, 4x, 5x, 6x, que correspondem, respectivamente, aos triploides, tetraploides,
pentaploides e hexaploides.
Os poliploides so classificados emautopoliploides, quando umnico genoma bsico
repetido, e alopoliploides quando ocorremdois oumais genomas diferentes. Por exemplo,
usando uma letra maiscula para representar umgenoma, teremos para os autopoliploides
338
AAAA, enquanto para os alopoliploides seria AABB. Note que os autopoliploides tm
apenas umgenoma bsico - A-, havendo uma completa homologia entre os cromossomos
de cada grupo e um perfeito pareamento na meiose. Por outro lado, os alopoliploides
apresentam dois ou mais genomas bsicos diferentes - Ae B -, o que, provavelmente,
resultado da hibridao de genitores que possuamdiferenas marcantes emseus genomas.
Assim, a homologia e pareamento dos cromossomos se d normalmente apenas entre os
genomas idnticos.
Cerca de 40%das espcies cultivadas so poliploides (Simmonds, 1980), entre elas o
trigo (Triticum aestivum), alfafa (Medicago sativa), o algodo (Gossypium hirsutum), a
batata (Solanum tuberosum), o morango (Fragraria ananassa), o tabaco (nicotiana
tabacum), a cana de acar (Saccharumofficinarum), e o caf (Coffea arabica). Otriticale
a nica planta cultivada poliploide criada pelo homem.
14.2.1.1 Autopoliploides
Em geral, os autopoliploides, por possurem maior nmero de cromossomos,
apresentam, consequentemente, maior volume nuclear e celular. Esse aumento, se no
associado a uma reduo correspondente ao nmero de clulas, pode provocar o crescimento
exagerado de certas partes das plantas, o que pode ser vantajoso em alguns casos. Por
exemplo, maior tamanho de partes florais uma caracterstica que pode ser vantajosa em
plantas ornamentais. Emforrageiras, folhas maiores pode ser uma vantagem, enquanto em
fruteiras, frutos maiores so mais apreciados. Almdisso, a poliploidia tambmpode estar
associada aoutras caractersticas, tais comofertilidade reduzida, maturao tardiae alteraes
emconstituintes qumicos, como, por exemplo, alcaloides usados como drogas, vitaminas,
tipos e propores de carboidratos e protenas.
Aautopoliploidia pode ocorrer espontaneamente ou ser induzida. Como emalguns
casos a autopoliploidia vantajosa, diversos mtodos tmsido aplicados para a sua obteno.
Dentre estes, o mais empregado o tratamento como alcaloide colchicina. Acolchicina
afeta a diviso celular, inibindo a formao das fibras do fuso, impedindo, dessa forma, a
separao das cromtides irms durante a anfase mittica. Consequentemente, o ncleo
formadopossuirodobrodo nmerodecromossomosdasclulasdotecidotratado. Por exemplo,
otratamentodetecidosdiploides(2n=2x) darorigemaclulastetraploides(2n=4x), oucom
maior nvel de ploidia dependendo do tempo de exposio ao alcaloide. Durante as mitoses
subsequentes, na ausnciade colchicina, as divises so normais e dessa forma so produzidos
tecidos como nvel de ploidia desejado.
Os autotriploides (2n = 3x) podem ocorrer ocasionalmente entre a prognie de
indivduos diploides como resultado do funcionamento de gametas no reduzidos, isto ,
n =2x. Outra possibilidade a fertilizao do vulo por dois ncleos espermticos de um
339
Aseparao cromossmica do trivalente, durante a anfase I, irregular. Cada ncleo
filho receber umou dois cromossomos de cada trivalente, de modo que os dois ncleos
sero haploides comalguns cromossomos adicionais. Emconsequncia, a grande maioria
dos gametas resultantes de indivduos triploides no possui complementos cromossmicos
balanceados o que no , portanto, vivel, causando a esterilidade do indivduo. Aalta
esterilidade do autotriploide temsido utilizada comvantagemna produo de melancia sem
sementes bemcomo emalgumas plantas ornamentais, que apresentammaior longevidade
das flores pelo fato de que estas no so fecundadas por plen vivel. Como exemplo de
espcies triploides podem-se citar: alguns clones de bananas, mas, peras, limo taiti e uva.
gro de plen. Os triploides podemocorrer ainda na prognie de tetraploides cruzados com
diploides. Os indivduos triploides apresentamtrs cpias de cada umdos cromossomos
homlogos, de modo que seu comportamento meitico apresente algumas particularidades.
Assim, no paquteno poder haver a formao de bivalentes maisunivalentes - cromossomo
no pareado comseu homlogo - bemcomo trivalentes - trs homlogos pareados. Em
cada ponto de pareamento, apenas dois cromossomos podemse associar. Isso implica, que
para a formao de trivalentes, h necessidade de pelo menos duas regies de incio do
pareamento (Figura 14.1). Almdo mais, a manuteno do trivalente at a metfase I s
possvel se forem formados quiasmas entre os trs homlogos. Caso contrrio, os
cromossomos homlogos se separamdurante o diplteno.
FIGURA 14.1. Trs diferentes modos de incio de pareamento em trissmicos: A) quando
ocorre apenas um ponto de incio forma-se um bivalente mais um univalente; B) com dois
pontos de incio de pareamento h possibilidade de formao de trivalentes; C) com vrios
pontos de incio de pareamento h maior probabilidade de formao de trivalentes (Adaptado
de Sybenga, 1972).
A B C
340
Nos autotetraploides existem quatro cromossomos homlogos - 2n = 4x -, os
quais podem se parear de diferentes maneiras, dependendo dos pontos de incio do
pareamento. Assim, no paquteno so possveis a formao de dois bivalentes, ou um
trivalente mais umunivalente, ou ainda a formao de umtetravalente. Dependendo do
modo de orientao dos cromossomos pareados na placa equatorial, durante a metfase
I, haver ou no distribuio irregular dos cromossomos para os gametas, o que pode
torn-los inviveis. No entanto, o grau de esterilidade dos tetraploides sempre menor
do que nos triploides, sendo que os gametas funcionais possuemn = 2x cromossomos.
Entre as plantas cultivadas existemalgumas que so autotetraploides, como, por exemplo,
a batata e alfafa.
Emnveis mais elevados de ploidia, pode ocorrer a formao de multivalentes e, em
todos os casos, observam-se anormalidades meiticas, quase sempre acompanhadas de
esterilidade parcial outotal. Deve ser salientado, contudo, que durante o processo evolutivo
de algumas espcies poliploides deve ter ocorrido seleo de mecanismos que propiciema
maior formao de bivalentes ou a segregao regular dos cromossomos resultando baixos
nveis de esterilidade.
Sobo ponto de vista gentico, fcil visualizar que a segregao algodiferente da que
ocorre nos diploides. Isso porque cada gene estar representado por tantos alelos quantos
foremo nmero de cromossomos homlogos. Emrazo da complexidade das segregaes,
que so normalmenteobservadas nas prognies poliploides, esse assuntono ser tratado aqui.
14.2.1.2 Alopoliplides
Como j comentado, os alopoliploides ou aloploides so indivduos cujo complemento
cromossmico consiste em dois ou mais genomas provenientes de espcies diferentes.
Provavelmente, os alopoliploides surgemna natureza pela duplicao dos cromossomos aps
um cruzamento interespecfico. Vejamos como isso pode acontecer: quando ocorre um
cruzamento interespecfico, o descendente recebe apenas umgenoma de cada genitor e
denominado anfipoliploide ou anfidiploide, se as duas espcies parentais foremdiploides.
Como no anfidiploide existe apenas um genoma de cada espcie, nesses indivduos no
ocorre pareamentodos cromossomos durante a meiose, a menos queexista alguma homologia
entre os genomas das duas espcies. Assim, a produo de gametas no se d por um
processo normal resultando na esterilidade do anfidiploide.
Coma duplicao dos cromossomos, cada genoma passa a existir em dose dupla,
permitindo, desse modo, a ocorrncia de pareamentos - formao apenas de bivalentes - e
segregaes cromossmicas normais. Portanto, o alotetraploide resultante completamente
frtil e a produo de gametas perfeitamente normal. Na Figura 14.2, ilustram-se os passos
envolvidos para a formao de umalotetraploide hipottico.
341
FIGURA 14.2. Esquema de formao de um alotetraploide hipottico. O anfidiploide estril
em razo da falta de homologia entre os genomas A e B.
Os alopoliploides ocorremfrequentemente na natureza, sendo que inmeras espcies
agronomicamente importantes, tais como trigo, aveia, algodo, cana-de-acar e banana, se
enquadram nessa classificao. O trigo (Triticum aestivum), por exemplo, possui a
constituio AABBDD, sendo, portanto, umalohexaploide - 2n = 6x = 42 - derivado do
cruzamento das espcies Triticumurartu(genomaA) comAegilops speltoides (genoma B)
o qual deu origema espcie Triticumturgidum(genomaAB) que foi cruzada coma espcie
Aegilops tauschii (genoma D) originado a espcieTriticumaestivum(Petersenet al., 2006).
Os alopoliploides podemtambmser obtidos artificialmente, sendo que mais de mil
hbridos aloploides j foramproduzidos experimentalmente. Umdos exemplos de aloploides
sintetizado foi realizado por Georgi Karpechendo, em1928. Ele queria obter umhbrido frtil
que tivesse as folhas de repolho (Brassica oleracea, 2n = 18) e as razes de rabanete
(Raphanus sativus, 2n = 18) como objetivo de obter uma planta que produzisse raiz de
rabanete e parte area semelhante ao repolho. Entre essas duas espcies no existe nenhuma
afinidade de seus cromossomos, de modo que uma alta esterilidade ocorre no hbrido F
1
.
Nesse caso a obteno do alotetraploide s ocorreu em razo da formao e unio de
342
gametas no reduzidos. Infelizmente, o objetivo do pesquisador no foi atingido, pois, por
ironia, as plantas obtidas possuamraiz de repolho e folhas de rabanete.
Umoutro exemplo de grande interesse na agricultura o triticale, nico anfidiploide
sinttico usado comercialmente. Essa espcie artificial foi produzida visando a incorporar em
umnico tipo de planta as qualidades nutricionais e panificadoras do trigo coma resistncia
a doenas, adaptao a solos pobres e tolerncia seca do centeio. Os primeiros programas
de melhoramento do triticale (2n = 56) se basearam em alooctaploides, tais como
AABBDDRR, no qual trs genomas do trigo (Triticum, 6n=42) - ABD- foramcombinados
comumgenoma do centeio (Secale, 2n=14) - R. No entanto, descobriu-se posteriormente,
que combinaes hexaploides, do tipoAABBRR, erammais promissoras. Tais combinaes
foramproduzidas pelo cruzamento de Triticumdurum- AABB- comcenteio - RR.
Ocorrncia da poliploidia
Como sepode observar pelos exemplosapresentados, a poliploidia muito generalizada
entre as plantas, sendo raraasuaocorrncianos animais. Nas plantas, apoliploidianormalmente
ocorre no organismocomoumtodo, podendoser constatada tambmapenasemalguns tecidos
ou rgos. Essa ltima situao, no entanto, a mais frequente nos animais.
Espcies poliploides de platelmintos, sanguessugas e camares de gua salgada
reproduzem-se por partenognese. Drosophila triploides e tetraploides foramsintetizadas
experimentalmente. Entretanto, os exemplos no so limitados a essas chamadas formas
inferiores. Anfbios erpteis poliploides de ocorrncia natural so surpreendentemente comuns.
Eles tmvrios modos de reproduo: espcies poliploides de sapos e girinos participamde
reproduo sexual, enquanto salamandras e lagartos poliploides so partenogenticos. Os
Salmonidae (famlia de peixes que inclui o salmo e a truta) so umexemplo familiar das
numerosas espcies animais que parecemter se originado de poliploidia ancestral. Ostras
triploides foramdesenvolvidasporque tmumavantagemcomercial emrelaoa seus parentes
diploides. Os diploides passampor uma estao reprodutiva, quando no tmbomsabor,
mas os triploides estreis no desovame tmsabor o ano todo.
As razes para a baixa incidncia de poliploidia em animais ainda no esto
completamente elucidadas. Existemtrs hipteses que tmsido comumente utilizadas para
explicar esse fato; so elas: a) Distrbios nos mecanismos de determinao do sexo; b)
Barreiras para a fertilizao cruzada; c) Barreiras histolgicas. Aprimeira a que temsido
mais comumente aceita e se baseia no fato de que a determinao do sexo depende de um
perfeito balanceamento dos cromossomos sexuais.
14.2.2 Aneuploides
Organismos aneuploidesso aqueles que se caracterizampor possurememsuas clulas
somticas umoumais cromossomos adicionais ouemfalta, emrelao ao nmero normal de
cromossomos da espcie. Aaneuploidia pode ser causada por diversos fenmenos, tais como:
343
Movimento retardado dos cromossomos durante a anfase (Figura 14.3a);
No disjuno, isto , no segregao de cromossomos ou cromtides, durante a
meiose oumitose (Figura 14.3b);
Assinapse, ouseja, nopareamentodecromossomoshomlogosnameiose(Figura14.3c);
Irregularidades na distribuio de cromossomos durante a meiose de organismos
poliploides comnmero mpar do genoma bsico, tais como triploides, pentaploides, etc.
FIGURA14.3. Possveis alteraes meiticas que levam formao de aneuploides: A) nesse
caso o movimento retardado de cromossomo durante a anfase I provoca a sua perda dando
origem a um gameta com n-1 cromossomos; B) no disjuno dos cromossomos. Os
cromossomos homlogos passam juntos para o mesmo polo, resultando gametas n+1 e n-1
cromossomos. Na mitose as cromtides irms vo para o mesmo polo; C) assinapse ou no
pareamento dos cromossomos homlogos pode tambm formar gametas com excesso ou falta
de cromossomos, quando os homlogos assinpticos vo para o mesmo polo.
344
Existemdiversos tipos de aneuploides, sendo os mais comuns os monossmicos e
trissmicos. Monossmicos so organismos deficientes emumcromossomo, isto , 2n=2x
- 1, ou 3x - 1, ou 4x - 1 etc. Esse tipo de aberrao, apesar de rara, temsido encontrada na
espcie humana, emanimais, bemcomo emdiversas espcies vegetais. Arazo de ser um
fenmeno raro reside no fato de que a falta de umcromossomo parece ser letal, ocorrendo
eliminao dos gametas deficientes, ou at mesmo o aborto do descendente. Esse tipo de
aneuploidia detectadocommaior frequncia emorganismospoliploides. Nesses organismos,
a deficinciade umcromossomo no chega a ser letal pelo fato de queos demais cromossomos
que apresentamhomologia completa ou parcial - cromossomos homelogos - suprema
deficincia. Isso ocorre, por exemplo, no trigo, onde o nmero bsico de cada umdos trs
genomas de 7 cromossomos. Assim, temos cromossomos numerados de 1 a 7 para o
genomaA- 1A... 7A-, o mesmo ocorrendo para os demais genomas - 1B... 7Be 1D... 7D.
Se faltar, por exemplo, umcromossomo 2A, os homelogos 2Be 2Dpodemsuprir sua falta.
Os monossmicos tmsido extensivamente utilizados no melhoramento dessa espcie
coma finalidade de se realizaremsubstituies cromossmicas. Essa tcnica consiste em
substituir umsimples cromossomo ou umpar de cromossomos por outros de variedades
diferentes ou mesmo espcies ou gneros, por meio de retrocruzamentos sucessivos. Um
dos objetivos da substituio cromossmica assegurar que os vrios alelos favorveis, que
se localizamemummesmo cromossomo, sejamintegralmente transferidos para a cultivar a
ser melhorada. Mediante essa tcnica foi possvel, por exemplo, transferir alelos para
resistnciaferrugemestriadado trigo (Puccina striiformis) da cultivar Bersee para outros
gentipos promissores.
Para fornecer informaes a respeito da localizao de genes em cromossomos
especficos, tm se utilizado tambm monossmicos. Para se determinar em qual dos
cromossomos se encontra o gene de interesse, umindivduo monossmico cruzado com
outro normal. Por exemplo, suponhamos que dispomos de uma srie monossmica emtrigo
da seguinte forma: 20" + 1A; 20" + 1B; 20" + 1D;...; 20" + 7A; 20" + 7B; 20" + 7D, onde
20" + 1A umindivduo com20 bivalentes (20") mais uma cpia do cromossomo 1A, ou
seja, ele possui 41 cromossomos, emvez dos 42 normalmente encontrados nessa espcie.
Ao se cruzar o primeiro monossmico da srie acima comumindivduo normal, poderemos
obter umdos resultados apresentados na Figura 14.4.
Uma desvantagemdesse mtodo para localizar genes emcromossomos especficos a
necessidade de se ter disposio asrie monossmica para todos oscromossomos da espcie
emestudo. Essas sries monossmicascompletas jesto disponveisparao trigo, aveiae fumo.
Trissmicos so organismos que apresentamumdos cromossomos emtriplicata, em
vez de t-lo emdose dupla, como nos organismos normais, ouseja, 2n=2x+1. Geralmente,
os trissmicosde umaespcie diferemfenotipicamente dosindivduosnormaispor apresentarem
trissmicos.
345
uma mudana nobalano gnico decorrente da adio de umcromossomo. Evidentemente, o
tipo de mudana fenotpica depende dos genes presentes no cromossomo, o que significa que
o nmero de trissmicos igual ao nmero bsico de cromossomos da espcie. Por exemplo,
em Datura stramonium o nmero somtico de cromossomos 2n=2x=24, existindo,
portanto, 12 trissmicos fenotipicamente diferentes (Figura 14.5). Emcertas espcies, tais
comotrigo, fumoeoutras, as diferenasfenotpicas entreostrissmicosnosomuitomarcantes,
devendo a identificao dos mesmos ser feita pela anlise dos cromossomos.
FIGURA14.4. Localizao de genes pelo emprego de linhas monossmicas: A) se o gene no
se localiza no cromossomo em falta, o resultado da F
2
proveniente de todas as plantas F
1
sero
idnticos; B) se o gene em apreo estiver no cromossomo em falta, a F
2
proveniente de plantas
F
1
monossmicas dar apenas um fentipo. fcil deduzir que se o alelo dominante estiver na
linha monossmica a localizao do gene poder ser feita na gerao F
1
a qual apresentar
algumas plantas com fentipo recessivo.
Nos trissmicos, h trs homlogos de umcromossomo potencialmente capazes de se
parearem. Entretanto, o pareamento ocorre apenas entre dois dos homlogos emqualquer
ponto ao longo dos cromossomos, como j foi visto no incio desse captulo. Aprincipal
fonte de origemde trissmicos so os cruzamentos de triploides comdiploides. No entanto,
346
FIGURA 14.5. Trissmicos em Datura stramonium. Observe os diferentes fentipos dos frutos que
correspondem a cada um dos cromossomos adicionais, identificados pelos nmeros. (Adaptado de
Schulz-Schaeffer, 1980).
o fenmeno da no disjuno tambm responsvel por boa parte dos trissmicos que
surgemnaturalmente (Figura 14.3b). Os trissmicostm sido utilizados com sucesso para
a localizao de genes emcromossomos especficos, da mesma forma como foi descrito
para os monossmicos. De fato, esse parece ser o principal tipo de aneuploide usado com
essa finalidade e tendosido empregado emDatura, milho, espinafre, cevada, tomateePetunia.
Ametodologia semelhante dos monossmicos, sendo que uma segregao atpica emF
2
demonstra o grupo de ligao emque o gene emestudo se localiza.
347
TABELA14.1. Denominaes de alguns aneuploides e suas constituies cromossmicas, de
umdiploide 2n =2x= 8.
14.3 ABERRAESCROMOSSMICASESTRUTURAIS
Acomparao de caritipos de indivduos pertencentes a espcies relacionadas ou a
populaes isoladas dentro de uma espcie, temmostrado que eles podemdiferir na estrutura
dos cromossomos. Esta variao pode ocorrer espontaneamente, em decorrncia de
radiaes naturais, mas o fato que, na maioria das vezes, a sua causa obscura. So vrios
os tipos de alteraes que podemocorrer, no entanto a maioria delas deletria e, desse
modo, eliminada pela seleo natural. Sero tratados aqui aqueles tipos de aberraes
estruturais mais comumenteencontrados, os quais so classificados em: Deficincia (Deleo);
Duplicao; Inverso e Translocao.
14.3.1 Deficincia - Deleo
Deficincias so alteraes que correspondem quebra de fragmentos cromossmicos
e sua consequente perda. Essas perdas ocorrempelo fato de que o fragmento quebrado
desprovido de centrmero, no podendo, portanto, segregar normalmente para umdos polos
durante a anfase. As deficincias podemser terminal, havendo apenas uma quebra e perda
da extremidade normal do cromossomo telmero - bemcomo intersticial, sendo, nesse
caso, necessria a ocorrncia de duas quebras e perda do segmento intercalar (Figura 14.6).
Almdos aneuploides discutidos aqui, existemoutros que recebemdenominaes
especficas, de acordo com os cromossomos em falta ou excesso. Na Tabela 14.1, so
apresentados alguns exemplos.
Aneuploides
Constituio
cromossmica
Esquema dos cromossomos
Nulissmico 2n = 8 - 2
Monossmico 2n = 8 - 1
Monossmico duplo 2n = 8 - 1 - 1
Trissmico 2n = 8 +1
Trissmico duplo 2n = 8 + 1 +1
Tetrassmico 2n = 8 + 2
Monossmico-trissmico 2n = 8 - 1 + 1
348
Como pode ser observado na Figura 14.6, as informaes genticas contidas no
fragmento acntrico so perdidas. Por essa razo que apenas os indivduos portadores de
deficincias pequenas, isto , aquelas que envolvemapenas poucos genes, que conseguem
sobreviver. As deficincias maiores geralmente causama morte da clula, ou ento impedem
a reproduo sexuada do indivduo afetado. Quando a perda do fragmento cromossmico
resulta na perda do alelo dominante emumindivduo heterozigoto para aquele gene, o alelo
recessivo remanescente pode se expressar fenotipicamente, dando a ideia de ter umefeito
dominante. Esse fenmeno denominado pseudodominncia e pode ser empregado em
certas situaes para se localizar o grupo de ligao a que pertence o referido gene. Em
milho, por exemplo, o gene Pl que controla a cor da planta, foi localizado no cromossomo
nmero 6, usando-se o fenmeno da pseudodominncia. Para isso, gros de plen,
provenientes de uma planta de constituio yyPlPl, foramirradiados comraios Xe usados
para polinizar plantasYYplpl (Figura 14.7).
As duas plantas de sementes amarelas e de cor verdeforamanalisadas citologicamente,
sendo constatado que possuamuma deficincia no brao longo de umdos cromossomos 6.
Portanto, essa deficincia deve envolver o alelo Pl, permitindo assima expresso do
alelo recessivo pl. Verificou-se, tambm, nesse estudo que cerca de 54%dos gros de plen
foramabortados e que, portanto, deveriamconter deficincias de segmentos maiores.
FIGURA 14.6. Esquema das deficincias: A) terminal; B) intersticial.
349
14.3.2 Duplicaes
Duplicaes so mudanas estruturais que se referema ganhos extras de segmentos
cromossmicos. Elas podemocorrer devrias maneiras e recebemdenominaes especficas
(Figura 14.8).
As duplicaes cromossmicas podemocorrer de diferentes modos. Oprimeiro deles
por meiodeduas quebras emumcromossomonormal, resultandoemumfragmento acntrico.
Emseguida, pode ocorrer uma terceira quebra, no cromossomo homlogo ou emoutro
qualquer, acompanhada da insero do fragmento acntrico (Figura 14.9). Umsegundo
modo de surgir duplicaes por meio de permuta gentica desigual. Nesse caso, o
pareamento dos cromossomos homlogos menos especfico, principalmente onde ocorre
DNA altamente repetitivo, permitindo a troca de segmentos no completamente
correspondentes (Figura 14.10). Finalmente, as duplicaes podemsurgir emdecorrncia
da permuta gentica emindivduos heterozigticos para uma inverso ou translocao.
Emgeral, as duplicaes so menos deletrias que as deficincias, pelo fato de aqui
no haver perdade informaes genticas. No entanto, temsido verificadoque as duplicaes,
apesar demais toleradas pelos organismos, podemprovocar alteraes marcantesno fentipo.
Emalgumas espcies de plantas, existemevidncias genticas que sugerema presena de
duplicao. Tais duplicaes do origemaos chamados genes polimricos, que possuem
efeitos iguais e cumulativos e que segregamna gerao F
2
na razo de 15:1(Captulo 6). Um
outro efeito fenotpico que geralmente est relacionado comas duplicaes o chamado
efeito de posio, que resulta emumfentipo alterado, emrazo da nova posio que o(s)
gene(s) ocupa(m) no cromossomo. Umexemplo interessante o que ocorre no milho e que
foi descoberto por Barbara McClintock, em1953. Seu trabalho envolveu basicamente a
modificao fenotpica de alelos para a cor dos gros de milho emfuno da sua desativao,
decorrente da insero, prximo a eles, de segmentos duplicados. Essas modificaes
fenotpicas ocorriamde tal modo que os gros apresentavam-se manchados.
FIGURA 14.7. Manifestao da pseudodominncia na gerao F
1
proveniente do cruzamento
de plantas homozigticas de milho, decorrente da deficincia cromossmica causada pelo
tratamento do plen com raios X.
350
FIGURA 14.8. Esquema de quatro diferentes tipos de duplicaes. Note que em todos os
casos o segmento duplicado o cde.
FIGURA 14.9. Esquema da ocorrncia de duplicao por meio da quebra cromossmica e
reunio do fragmento acntrico.
351
14.3.3 Inverses
As inverses so, provavelmente, o tipo mais comumde aberrao cromossmica
encontrada empopulaes naturais. Umcromossomo invertido aquele cuja sequncia de
genes se encontraemordeminvertida, emrelao ao cromossomo normal. Isso pode ocorrer,
por exemplo, quando ummesmo cromossomo sofre duas quebras e o fragmento quebrado
reinserido na posio original, pormemordeminversa. Como ilustrado na Figura 14.11,
existemdois tipos principais de inverses que considerama posio das quebras emrelao
ao centrmero. Inverso paracntrica as duas quebras se do no mesmo brao do
FIGURA 14.10. Duplicao cromossmica proveniente de permuta desigual: A) observe que
o pareamento dos cromossomos homlogos no perfeito; B) a permuta entre estes
cromossomos homlogos resulta na troca de segmentos no completamente correspondentes;
C) em consequncia so produzidos cromossomos com regies deficientes e duplicadas.
352
Uma caracterstica que geralmente est associada inverso a esterilidade parcial. A
razo disso explicada pelo comportamento cromossmico durante a meiose. Por exemplo,
se um indivduo heterozigtico para uma inverso, durante o paquteno pode haver o
pareamento entre os cromossomos homlogos, sendo necessria para isso a formao de
uma ala no cromossomo invertido (Figura 14.12). Admitindo a ocorrncia de apenas uma
permuta, como mostrado na Figura 14.12, na anfase I, coma separao dos homlogos
cromossomo, ou seja, o centrmero fica fora da inverso, e pericntrica cada quebra se d
emumbrao diferente, neste caso, envolve o centrmero.
Ao contrriodas deficincias e duplicaes, as inverses no causamnenhuma mudana
na quantidade de material gentico e, dessa forma, geralmente no esto associadas com
alteraes fenotpicas. Consequentemente, indivduos comcromossomos invertidos no
podem, via de regra, ser distinguidos de indivduos normais. Contudo, emrazo da mudana
de posio de alguns genes, a ocorrncia de alteraes fenotpicas no deve ser descartada.
FIGURA 14.11. Esquema de formao de uma inverso paracntrica (A) e uma inverso
paricentrica (B). Note que em (A) o centrmero se encontra fora da regio invertida, enquanto
que em (B) o centrmero foi envolvido na inverso.
353
para os plos opostos, o cromossomo dicntrico resultante formar uma ponte. Almdisso,
haver tambma formao de umfragmento acntrico (Figura 14.13). Ao final da anfase I
teremos o rompimento da ponte emumponto qualquer. Aps a anfase II, coma segregao
das cromtides, teremos a formao de quatro clulas (Figura 14.13).
FIGURA 14.12. Pareamento cromossmico envolvendo uma inverso paracntrica. Observe
que o cromossomo invertido forma uma ala, possibilitando completa homologia com o
cromossomo normal. O X mostra a ocorrncia de uma permuta entre F e G.
Como se observa, das quatro cromtides resultantes uma perfeitamente normal,
outra apresenta uma regio invertida e as demais so deficientes para determinados
segmentos e duplicadas para outros. Emfuno disso, os gametas que receberemessas
cromtides anormais sero abortados, resultando emesterilidade. importante salientar
que a no ocorrncia de permuta gentica resulta apenas em cromtides normais ou
invertidas, sendo todos os gametas viveis. No caso das inverses pericntricas, no h a
formao de pontes ou fragmentos acntricos emqualquer uma das divises meiticas.
Entretanto, haver a formao de cromtides deficientes e duplicadas e, consequentemente,
de gametas inviveis.
Um outro efeito de inverses heterozigticas a alterao nas frequncias de
recombinao entre os genes envolvidos no segmento invertido ouprximo dele. Isso ocorre
porque, ao se formar a ala de inverso (Figura 14.12), as permutas genticas so
drasticamente reduzidas. Alm disso, como pode ser observado na Figura 14.13, as
cromtides permutadas so aquelas que formamo fragmento acntrico ou apresentam dois
centrmeros. Como j foi comentado, essas cromtides apresentamregies deficientes ou
duplicadas, gerando assimgametas inviveis. Como resultado desses acontecimentos, os
gametas viveis so aqueles que no sofreram permuta e possuem, portanto, a mesma
constituio gentica original. Assim, as combinaes gnicas so mantidas como umnico
bloco e no tendema se separar.
354
Finalmente, deve-se salientar que os efeitos das inverses aqui descritos se referem
apenas queles indivduos heterozigticos para essa aberrao cromossmica. Quando o
indivduohomozigtico, isto, ambososhomlogosapresentamomesmosegmentoinvertido,
o pareamento cromossmico perfeito, no havendo assimnenhuma anormalidade. Deve
ser enfatizado tambmque a mitose em indivduos heterozigticos para uma inverso
completamente normal pelo fato de que cada cromossomo passa pelo processo semter de
se associar comseu homlogo. Emoutras palavras, cada cromossomo independente dos
demais, at mesmo de seu homlogo.
14.3.4 Translocaes
As translocaessomudanasestruturais queenvolvema transferncia deumsegmento
cromossmico para outro cromossomo no homlogo. Otipo mais comum a translocao
FIGURA 14.13. Consequncias meiticas em um indivduo heterozigtico para uma inverso
paracntrica e apresentando uma permuta no segmento invertido: A) anfase I - observe a
ponte formada pelo cromossomo dicntrico e tambmo fragmento semo centrmero (acntrico);
B) anfase II - note que duas cromtides possuem todas as informaes genticas enquanto as
outras duas so deficientes e/ou duplicadas. O fragmento acntrico geralmente perdido.
A) Anfase I
B) Anfase II
355
recproca, que corresponde a uma troca mtua de fragmentos entre dois cromossomos no
homlogos (Figura 14.14).
De modo anlogo s inverses, as translocaes tambmno provocamalteraes no
contedo gnicodos indivduos portadores. Dessa forma, torna-se difcil a distino fenotpica
entre esses indivduos e os normais, a no ser pelo fato de que indivduos heterozigticos
para uma translocao recproca so parcialmente estreis. Diz-se que um indivduo
heterozigtico para uma translocao recproca quando este possui dois cromossomos
translocados, sendo seus homlogos perfeitamente normais. Como veremos aseguir, a causa
da esterilidadeparcial deve-se tambmaocomportamento dos cromossomos durantea meiose.
FIGURA 14.14. Esquema de uma translocao recproca. Observe que ocorremduas quebras
e os fragmentos acntricos se ligam aos cromossomos no homlogos.
Em um indivduo heterozigtico, para uma translocao recproca h quatro
cromossomos potencialmente capazes de se parear. Esses cromossomos apresentamuma
configurao emcruz durante o paquteno e que pode permanecer at o diplteno (Figura
14.15). Na diacinese, aps a terminalizao dos quiasmas, isto , aps os quiasmas serem
detectados nas extremidades dos cromossomos, podem-se formar diferentes figuras, como,
por exemplo, umanel ou uma cadeia de quatro cromossomos (Figura 14.15).
Durante a metfase, os cromossomos podemse orientar para os polos de diversas
maneiras, de acordo coma posio ocupada pelos quatro centrmeros. Essas orientaes
so: a) Alternada - 1; b) Alternada - 2; c) Adjacente - 1; d) Adjacente - 2; e) No
coorientao, e so representadas na Figura 14.16. Nas orientaes alternadas, os
centrmeros dos cromossomos normais - 1 e 2 - esto voltados para um mesmo plo,
enquanto os centrmeros dos cromossomos translocados - 1' e 2' - se voltampara o polo
oposto. J, nas orientaes adjacentes, os centrmeros de umcromossomo normal e um
translocado se dirigempara ummesmo polo 1 e 2 vs 1e 2' ou ainda 1 e 1' vs 2 e 2'. No
caso das orientaes alternadas - 1 e 2 e adjacente - 1, os centrmeros homlogos dirigem-
se para polos opostos, enquanto na orientao adjacente - 2 os centrmeros homlogos
dirigem-se para o mesmo polo. A no coorientao se refere situao em que dois
356
Observa-se, na Figura 14.16, que somente as orientaes alternadas possibilitama
formao de gametas viveis, uma vez que, nesses casos, todas as informaes genticas
estaro contidas nos mesmos. Por outro lado, as orientaesadjacentes contero informaes
deficientes e duplicadas, dando origema gametas inviveis e que sero abortados. Assim
sendo, o graude esterilidade de umindivduo qualquer ir depender da relao entre clulas
que apresentamcromossomos emorientao alternada e adjacente. Emmuitas espcies, a
proporo de gametasfrteis e abortados prxima de 1:1, indicandoque aquelas orientaes
ocorrem em igual nmero. Em outras espcies, como por exemplo cevada, o grau de
centrmeros se dirigempara polos opostos, enquanto os outros dois no se orientame,
aparentemente, no so ligados s fibras do fuso.
FIGURA14.15. A) Indivduo heterozigtico para uma translocao recproca. Os nmeros 1
e 2 marcam os centrmeros dos cromossomos no homlogos normais e 1 e 2 os centrmeros
de seus homlogos translocados; B) no paquteno o pareamento desses quatro cromossomos
assume uma forma de cruz; C) dependendo do nmero e posio dos quiasmas, na diacinese
so formadas figuras em forma de anel ou cadeia de quatro cromossomos.
357
esterilidade bemmenor emdecorrncia de umtipo preferencial de orientao, ocorrendo
cerca de 70% a 95% do tipo alternada. Tem sido verificado que fatores tais como,
comprimento dos cromossomos, posio dos pontos de quebra, nmero e posio dos
quiasmas e posio do centrmero, influenciamo tipo de orientao e, consequentemente, o
grau de esterilidade.
FIGURA 14.16. Tipos de orientao cromossmica de indivduos heterozigticos para uma
translocao recproca. Os nmeros 1 e 2 marcam os centrmeros dos cromossomos no
homlogos normais e 1 e 2 os centrmeros de seus homlogos translocados.
358
BOX 14.1. ABERRAES CROMOSSMICAS EM ANIMAIS
Alguns exemplos de aneuploides dos cromossomos sexuais e autossomos e suas
consequncias fenotpicas emanimais domsticos (Adaptado de NICHOLAS, 1999).
Caritipo Espcie Consequncias fenotpicas
37,X Sunos Intersexualidade; hipoplasia ovarina
63,X Equinos Hipoplasia ovarina
37,X Gatos Morte antes da puberdade
63,X/64,XX Equinos Hipoplasia ovarina
37,X/38,XX,38XY Sunos Intersexualidade
61,XXX Bovinos Nenhuma, ou hipoplasia ovarina
63,XXX Equinos Infertilidade
61,XXY Bovinos Hipoplasia testicular
55,XXY Ovinos Hipoplasia testicular
39,XXY Sunos Hipoplasia testicular
79,XXY Ces Hipoplasia testicular
39,XXY Gatos Hipoplasia testicular
61,XXY/60,XY Bovinos Hipoplasia testicular
61,XXY/60,XX Bovinos Intersexualidade
39,XXY/38,XX Sunos Intersexualidade
65,XXY/64,XX Equinos Intersexualidade
39,XXY/38,XX Gatos Hipoplasia testicular
61,XXY/60,XX/60,XY Bovinos Hipoplasia testicular
61,XXY/60,XY/59,X Bovinos Hipoplasia testicular
65,XXY/64,XY/64,XX/63,X Equinos Criptorquidismo
66,XXXY Equinos Intersexualidade
61,XYY/60,XY Bovinos Nenhuma
359
BOX 14.2. ABERRAES CROMOSSMICAS EM BOVINOS
Os bovinos (Bos taurus) possuem60 cromossomos, sendo 29pares de autossomos
e um par de cromossomos sexuais: XX nas fmeas e XYnos machos. Apresenta-se o
caritipodosbovinos como 60+XXou60+XY, casosejafmeaoumacho, respectivamente.
Todos os cromossomos autossmicos so acrocntricos. O cromossomo X
submetacntrico e o cromossomo Y acrocntricona raa Nelore e submetacntrico
nas outras raas. OX bemmaior que o Y.
Aberraes Cromossmicas Numricas
Se, emuma das clulas que sofrer o processo de meiose, ocorrer no disjuno
cromossmica, isto : (1) umpar de cromossomos homlogos no se separar na anfase
I ou (2) as cromtides irms de umcromossomo no se separaremna anfase II, poder
resultar na formao de dois gametas com 31 cromossomos e dois gametas com 29
cromossomos. Ambos numericamente incorretos e comcentenas de genes a mais ou a
menos, respectivamente.
O bezerro que se desenvolver de um espermatozoide ou de um vulo com 29
cromossomos ter uma monossomia, isto uma nica cpia de um determinado
cromossomo, ao invs dos dois homlogos normais, e morre muitoprecocemente durante
a gestao. Obezerro que se desenvolver de umespermatozoide ou de umvulo com31
cromossomos ter uma trissomia, isto , trs cpias de umdeterminado cromossomo,
ao invs dos dois homlogos normais, e morrer umpouco mais adiante, ainda durante o
perodo gestacional.
Oprocesso de espermatognese no touro, duracerca de 60dias, inicia na puberdade
e continua atuma idade relativamente avanada. Aovognese nas vacas inicia no perodo
fetal e interrompe umpouco antes do nascimento. Fica suspenso at a puberdade e no
se completa at que haja a fertilizao, quando o terceiro corpsculo polar formado e
expulso. Esselongo processode meiosesuspensa, provavelmente faz comque as ovognias
sejam mais suscetveis a apresentar alteraes cromossmicas numricas do que os
espermatozoides. Ataxa de anomalia parece comear a ser exponencial a partir da idade
de 9 anos da vaca, no entanto, o risco no maior que 1%(SCHMUTZ, 2003).
Amaioriadas anomalias numricas dos cromossomos sexuais no letal, mas afeta
a fertilidade. Umdos poucos casos de letais o da monossomia do cromossomo sexual,
em que o cromossomo sexual recebido o Y (caritipo 59,Y). Nesse caso, o feto
abortado, porque a falta dos genes do cromossomo X essencial vida.
360
Uma novilha com caritipo 59+X sobrevive, mas estril, pois ter somente
gnadas emfita, tipo embrionrias e no ovrios, portanto no ovular. Essa uma
condio semelhante Sndrome de Turner na espcie humana. Obezerro comcaritipo
61+XXYtemhipoplasia testicular, isto , testculos pequenos e usualmente estril,
mas eventualmente pode ser normal. Essa anomalia semelhante Sndrome de
Klinefelter da espcie humana.
Vacas comcaritipo 61+XXXso frteis e podemoriginar bezerros comcaritipos
normais ou com61+XXY.
Aberraes Cromossmicas Estruturais
Translocaes: emdecorrncia de seremos cromossomos autossmicos todos
acrocntricos, muito comuma ocorrncia de translocaes do tipo Robertsoniana ou
fuso cntrica, ou seja, dois cromossomos acrocntricos perdemseus braos curtos e se
unemprximo regio centromrica, formando umnico cromossomo derivado. Por
exemplo, o mais comumno gado bovino a fuso entre os cromossomos 1 (o maior do
caritipo) e 29(o menor do caritipo), essa translocao indicada comot(1;29). Como
essa translocao no altera a constituio gentica, apenas o rearranja, diz-se que uma
translocao equilibrada.
Como o cromossomo 1 e o cromossomo 29 fusionaram-se, a contagem
cromossmica passa a ser de 59 e no mais de 60 cromossomos, mas o animal portador
dessa translocao equilibrada temas mesmas caractersticas dos animais normais, no
entanto, sua fertilidade fica bastante diminuda.
Essa translocao parece ocorrer na maioria do gado de corte que veio da Europa
para cruzamento. Tudo indicada que uma alterao cromossmica bastante antiga ou
que surgiu ao longo da evoluo, ou ambas (SCHMUTZ, 2003).
Os resultados obtidos do cruzamento entre um animal normal com outro com
translocao normal do tipo Robertsoniana 1/29 o seguinte:
361
Alm da translocao Robertsoniana t(1,29) existem outras que ocorrem em
bovinos. Asegunda mais comum at(14;20), que observada quase que unicamente na
raa Simmental, mesmo assim, emapenas 1%dessa raa.
362
PROBLEMASPROPOSTOS
1. Emespcies do gnero Fragaria - morango - o nmero bsico de cromossomos x
= 7. Existemmorangos diploides, tetraploides, hexaploides e octaploides.
a) Qual o nmero somtico de cromossomos dessas espcies?
b) Como proceder para determinar se essas espcies so auto ou alopoliploides?
2. Uma espcie diploide 2n = 2x = 18 foi tratada com colchicina para obteno de
autopoliploides.
a) Quantos cromossomos so esperados nas clulas somticas dos poliploides
resultantes de uma, duas e trs mitoses sucessivas, na presena desse alcaloide?
b) Como atua a colchicina?
3. Otrigo comum(Triticumaestivum) uma espcie alohexaploide, 2n= 6x = 42. Ela
foi obtidanaturalmente a partir do cruzamento de trs espcies de gramneas diploides.
a) Qual o nmero de cromossomos nas clulas somticas de cada uma dessas espcies
diploides?
b) Sugira os provveis cruzamentos que ocorrerampara se obter o trigo cultivado.
4. Os melhoristas japoneses conseguiramobter melancias triploides, que apresentama
vantagemde no possuremsementes.
a) Sugira a metodologia que deve ter sido utilizada para a obteno desse triploide.
b) Qual a razo de essa melancia no produzir sementes?
5. Existemvrias espcies diploides do gnero Brassica que diferemno nmero bsico
de cromossomos, como, por exemplo, B. nigra (mostarda preta) x = 8, B. oleracea
(repolho) x=9 e B. campestris (nabo) x=10. Vrios anfidiploides podemser obtidos
a partir dessas espcies diploides.
a) Qual o nmero somtico de cromossomos das espcies diploides mencionadas?
b) Qual onmero somtico de cromossomos do hbrido F
1
proveniente do cruzamento
B. oleracea x B. campestris?
c) Ao se proceder a uma anlise citolgica das anteras desse hbrido, o que ser
observado: univalentes, bivalentes, trivalentes ou tetravalentes? Por qu?
d) Essas plantas F
1
sero frteis ou estreis? Se as plantas F
1
forem tratadas com
363
colchicina durante umciclo celular, quantos cromossomos so esperados nas clulas
somticas?
e) Oalopoliploide obtido ser frtil ou estril? Por qu?
6. Quando se cruza o alopoliploide referido no item(e) do problema 5 coma espcie
diplide B. nigra:
a) Qual o nmero de cromossomos nas clulas somticas do anfidiploide obtido?
b) Oque se espera na meiose deste anfidiploide?
c) Que tipo de alopoliploide ser obtido tratando-se o anfidiploide comcolchicina?
7. Oendosperma da semente de milho umtecido triploide formado pela fuso dos dois
ncleos polares do saco embrionrio comumncleo generativo do gro de plen.
Quais as constituies genticas dos endospermas das sementes descendentes a partir
dos cruzamentos seguintes?
a) ( ) YY x ( ) yy
b) ( ) yy x ( ) YY
c) ( ) Yy x ( ) yy
d) ( ) Yy x ( ) Yy
8. No milho, o alelo dominanteYcondiciona endosperma amarelo e y responsvel pelo
endosperma branco. No entanto, em razo de as clulas do endosperma serem
triploides, ocorremos fentipos alaranjado, amarelo, amarelo-claro ebranco, emfuno
do nmero de alelos Y. Utilizando os cruzamentos indicados no problema 7 quais as
propores fenotpicas das sementes descendentes de cada um?
9. Suponha queuma espcie diploide apresente emsuas clulas somticas 8cromossomos.
Alguns indivduos foramtratados comumasubstnciaqumica produzindo descendentes
comampla variao no nmero de cromossomos. Fornea os nomes corretos dos
descendentes representados a seguir: Qual o nome do f?
364
a. f.
b.
g.
c.
h.
d.
i.
e.
j.
10. A descendncia dos cruzamentos testes de duas plantas heterozigticas de milho
apresentou diferentes frequncias de recombinao entre os genes ts e su. Na planta
A (normal) a frequncia de recombinao foi de 15% e na planta B (anormal) a
frequncia de recombinao foi de 2%. Essa diferena nasfrequncias de recombinao
ocorreu emrazo da inverso ou deficincia? Justifique sua resposta.
11. Ocromossomo 10 do milho de uma planta normal possui, entre outros, os seguintes
genes:
r n w o s i k
R N W O S I K
Suponha que ocorreu uma quebra entre o centrmero e we outra entre i e k, dando
origema uma inverso.
a) Ilustre o pareamento dos cromossomos na meiose representando as quatro
cromtides.
b) Considerando a ocorrncia de uma permuta entre os genes Oe S, esquematize a
anfase I e a anfase II.
c) Qual porcentagemdos gametas seria funcional?
12. Considere o cromossomo 10 do milho apresentado no problema 11. Se ocorrer uma
quebra entre r e n e entre o e s, ter origemuma inverso pericntrica?
365
a) Ilustre o pareamento dos cromossomos na meiose, representando as quatro
cromtides.
b) Considerando a ocorrncia de uma permuta entre os genes We O, esquematize a
anfase I e a anfase II.
c) Qual porcentagemdos gametas seria funcional?
13. No cultivar Santa Cruz de tomate, os genes Ae C afetam a cor do hipoctilo e o
formato da folha, respectivamente, e apresentamdistribuio independente. No entanto,
algumas plantas dessacultivar apresentaramfrequncia de recombinaode 12%entre
os genesmencionados. Que tipo de aberrao cromossmica estrutural poderia explicar
esse resultado? Justifique.
14. Suponha que o melhorista de tomate tenha decidido cruzar os dois tipos de plantas do
problema 13 coma finalidade de comprovar o tipo de aberrao ocorrida. Esquematize
o tipo de pareamento que dever ser observado no paquteno do descendente desse
cruzamento.
15. Apartir do cruzamento de uma linhagemde cenoura de raiz amarela (yy) comoutra de
raiz branca (YY), que foi submetida a radiaes ionizantes, foramobservadas na F
1
algumasplantasde raiz amarela. Que tipode aberraocromossmica estrutural poderia
explicar esse resultado? Justifique.
366
367
Teoria Sinttica da Evoluo
15 TEORIASINTTICA
DA EVOLUO
15.1 INTRODUO
Agrande diversidade entre os organismos facilmente observada, bastando comparar
as espcies que conhecemos, pois j foramdescritas cerca de 8,7 milho de espcies, mas
h estimativas de que esse nmero seja bemsuperior.
Uma questo que poderia ser formulada se essa diversidade sempre existiu. Para
responder a essa indagao deve-se recorrer s informaes disponveis relativas aos mais
antigos fsseis. Essas informaes registramque a diversidade existente na natureza era muito
menor, ocorrendo apenas alguns tipos de bactrias e algas mais simples. Esses dados ilustram
que houve umaumento acentuado da diversidade, o que comprova a ocorrncia da evoluo.
Adefinio de evoluo pode ser fornecida por vrios ngulos. Sob o ponto de vista
gentico, elacorresponde a qualquer alterao das frequncias allicas dapopulao, visando
a torn-la mais adaptada. Dessa forma, os enfoques da evoluo, que sero discutidos
aqui, estaro relacionados aos fatores que alteramas frequncias allicas das populaes.
Esses fatores so agrupados no que se denomina teoria sinttica da evoluo e se fundamenta
nos seguintes processos: a) Processo que cria variabilidade - mutao; b) Processos que
ampliama variabilidade - recombinao gentica, hibridao, alteraes na estrutura e no
nmero de cromossomos e migrao; c) Processos que orientamas populaes para maior
adaptao - seleo natural, oscilao gentica e isolamento reprodutivo. Aseguir sero
discutidos sucintamente cada umdesses processos, almdisso, maiores detalhes podemser
obtidos, entre outros, nas publicaes de Stebbins (1970); Dobzansky(1973); Mayr (1977);
Strickberger (2000); Ridley(2006).
15.2 PROCESSOQUECRIAVARIABILIDADEMUTAO
Como j foi visto (Captulo 3), a mutao gnica a fonte original de variao gentica
e temcomo resultado a formao de novos alelos na populao. Almde ser umfenmeno
raro, tambmcasual, e, por esta razo, ela no ocorre no sentido de fornecer ao organismo
uma maior adaptao. Estima-se que emcada 1.000 mutaes uma provavelmente til
para a evoluo e, levando-se em conta o nmero de mutaes que ocorre na vida de um
368
organismo, apenas uma emummilho de mutaes teis necessita fixar-se para explicar a
intensidade de evoluo que vemocorrendo na populao. Apesar dessas estimativas, os
evolucionistas esto conscientes de que a mutao sozinha no determina a evoluo. Isso
se deve ao fato de que as mutaes favorveis geralmente ocorrememindivduos diferentes,
e necessrio ummecanismo para reuni-las numnico indivduo, para que a adaptao seja
realmente incrementada.
Oconceito de mutao til depende de cada populao. Emgeral, emespcies novas
emexpanso existe ummaior nmero de mutaes teis, enquanto naquelas mais velhas e
melhor adaptadas, um nmero considervel de mutaes j ocorreu e muitas foram
aproveitadas, de sorte que inovaes promovidas por mutao tmgrande chance de serem
prejudiciais. As mutaes teis emgeral so aquelas que promovemalteraes pequenas
nas caractersticas do organismo. Isso ocorre, porque as espcies j possuemcerta adaptao
ao seu ambiente e as trocas mais pronunciadas nas caractersticas promovemalteraes
bruscas na adaptao, sendo, normalmente, prejudiciais. Assim, a maioria das mutaes
teis aquela de pequeno efeito e que se acumula gradualmente no organismo, acompanhada
de uma vagarosa transio nas caractersticas.
15.3 PROCESSOSQUEAMPLIAMAVARIABILIDADE
15.3.1 Recombinao Gentica
Esse processo age no sentido de ampliar a variabilidade gentica criada pela mutao
gnica e se constitui no mecanismo que permite suprir a populao de indivduos comnovas
combinaes genticas. Estas so capazes de promover rpida adaptao s mudanas
bruscas que venhama ocorrer no ambiente.
Como jfoi comentado, a recombinaoconsiste na formao decombinaes novas de
alelos, tantopor meiodadistribuioindependentedoscromossomosnohomlogosnameiose,
comotambmpor meiodapermutagentica. Emconsequncia, arecombinaopermitequeum
nmeroenormedegentipos seja formado, mesmocomumpequenonmero degenes epoucos
alelosemcada. Relembrandooquefoivistoemalelismomltiplo, seonmerodegenessegregantes
n e cada umrepresentado por malelos, o nmero de gentipos que pode ser produzido por
recombinao[m(m+1)/2]
n
. Tomandocomoexemploomilhoquepossui n=10cromossomos
diferentes econsiderandoapenas umgeneporcromossomocomquatroalelosemcada, onmero
de gentiposdiplides possvel de10bilhes.
15.3.2 Hibridao
Ahibridao o processo que permite a unio de espcies relacionadas o que leva
formao de hbridos interespecficos. Ohbrido oriundo do cruzamento de duas espcies
geralmente estril e sua fertilidade normalmente s restabelecida aps a duplicao de seus
369
cromossomos. Almdisso, sua adaptao nas condies ambientais existentes nemsempre
imediata. Nessa situao, a melhoria na adaptao geralmente obtida por meio de
retrocruzamentos desses hbridos comos genitores. medida que os retrocruzamentos
ocorrem, os gentipos recombinantes tornam-se mais semelhantes s populaes paternais
e, assim, ficammais adaptados. Por esse processo, novos genes e novas combinaes de
genes so transferidos de uma espcie para outra, aumentando as possibilidades de formar
combinaes novas de genes e incrementar a variabilidade e adaptao. Esse processo
caracteriza o fenmeno da introgresso emplantas. Por exemplo, o milho uma espcie que
possui vriascaractersticas oriundas por introgresso, de umagramnearelacionada, oteosinto.
15.3.3 Alteraes na Estrutura e no Nmero de Cromossomos
Como os aspectos citolgicos sobre esse assunto so apresentados no Captulo 14,
sero feitosaqui apenas alguns comentrios relacionando as alteraes estruturais e numricas
dos cromossomos coma evoluo.
As alteraes estruturais dos cromossomos explicamgrande parte da variabilidade
potencial das populaes, que est encoberta na forma de heterozigotos. Ainverso e a
translocao so as alteraes mais importantes para a evoluo. O efeito principal da
inverso quandoela ocorre emheterozigoseno indivduo, pois dentrodo segmento invertido,
a permuta gentica no produz recombinantes emrazo de os gametas que os recebe serem
inviveis. Assim, todos os genes que ocorremnuma inverso so mantidos sempre juntos,
formando umsupergene. Atranslocao altera a relao de ligao entre genes e modifica a
frequncia de recombinao, pois os genes que eramligados aps a translocao passama
ter distribuio independente e vice-versa. Aduplicao, embora menos importante para a
evoluo do que a inverso e a translocao, contribui para aumentar a variabilidade. J, a
deficincia de importncia relativamente menor, emrazo das perdas de material gentico
que so geralmente letais.
Entre as alteraes numricas, a que apresenta maior contribuio para a evoluo a
euploidia. Issoporque ela contribui para o incremento no reservatrio gnico. Especialmente
no caso dasplantas, a euploidia teveumpapel preponderante no surgimento de vrias espcies,
entre elas o trigo, cana-de-acar, fumo, batata, caf, etc. Essas espcies normalmente tm
na sua constituio, cromossomos pertencentes a duas ou mais espcies diferentes, ou ento
apresentamvrias cpias do conjunto cromossmico bsico caracterstico da espcie. A
espcie nova oriunda desse incremento no reservatrio gnico pode possuir caractersticas
que permitama sua adaptao emcondies ambientais antes no exploradas pelas espcies
genitoras. Almdisso, emrazo da existncia de vrios complementos cromossmicos, um
indivduo qualquer, dessas espcies, pode possuir vriosalelos para cada geneo que possibilita
ampliar a variabilidade gentica por meio da recombinao.
370
15.3.4 Migrao
Como visto em gentica de populaes (Captulo 13), a migrao corresponde
incorporao de indivduos - alelos - numa certa populao. Consequentemente, a nova
populao ter frequncias allicas diferentes daquelas da populao original.
Aefetividade da migrao depende de sua quantidade e da divergncia gentica das
populaes participantes. Aquantidade de migrao muito maior empopulaes prximas
do que naquelas distantes geograficamente. Por outro lado, as populaes mais prximas
so tambmmais semelhantes geneticamente e a migrao no se constitui numinstrumento
importante de alterao das frequncias allicas. Assim, a migrao muito mais efetiva em
populaes isoladas, pois as frequncias allicas, via de regra, so mais contrastantes.
15.4 PROCESSOSQUEORIENTAMASPOPULAESPARAMAIOR
ADAPTAO
15.4.1 Seleo natural
Aseleo natural definida como umsucesso reprodutivo diferencial. Onmero de
indivduos emqualquer populao natural tende a aumentar geometricamente, quando as
condies ambientais permitema sobrevivncia de toda a prognie. Porm, o potencial para
esse aumento raramente se cumpre, porque ocorre uma competio pela sobrevivncia, onde
muitos indivduos no deixamdescendentes ou deixamuma quantidade proporcionalmente
menor. Essa seleo ocorre porque existe variao entre os indivduos emcada populao,
gerada pelos processos que criame ampliama variabilidade. Assim, aqueles indivduos que
tmcaractersticas favorveis para sua sobrevivncia e que tmcapacidade de deixar mais
descendentes so os mais adaptados. Emconsequncia, na prognie ocorre umaumento da
frequncia dos alelos dos indivduos mais adaptados e uma reduo das frequncias dos
alelos daqueles menos adaptados.
BOX15.1. DIFERENTESTIPOSDE SELEONATURAL
SELEOESTABILIZADORA
Uma populao de indivduos que permanece por umlongo perodo de tempo em
uma determinada condio ambiental desenvolve fentipos que so adaptados a essa
condio, isto , muitos dos fentipos tendema aglutinar-se ao redor de umvalor emque
a adaptao maior. Os indivduos extremos que desviam desse timo so menos
adaptados e, provavelmente sero eliminados, portanto so selecionados os indivduos
que apresentamdesempenho emtorno da mdia.
371
SELEODIRECIONAL
o tipo de seleo que favorece os fentipos localizados emumdos extremos da
curva . Como consequncia deve ocorrer mudana na mdia da populao no sentido da
mdia do grupo selecionado. Aseleo praticada pelos melhoristas de plantas e animais
desse tipo. Emtermos de evoluo, a seleo direcional importante quando o ambiente
alterado em apenas uma direo. Assim, os fentipos extremos devem ser os mais
adaptados para as novas condies.
SELEOCCLICA
Quando o ambiente varia muito emdiferentes direes entre geraes ou entre
estaes, o fentipo e, consequentemente, o gentipo podemser alterados de acordo
como ambiente. Esse tipo de seleo contribui para manter as diferenas genticas na
populao, desde que diferentes fentipos possamser vantajososemdiferentes condies.
SELEODISRUPTIVA
Quando a populao submetida a diferentes ambientes dentro de uma mesma
gerao ou estao, de modo que os gentipos mais divergentes so os mais adaptados,
ocorre a seleo disruptiva, ou seja, so selecionados os indivduos situados nos dois
extremos. o contrrio da seleo estabilizadora. Avariao fenotpica na populao
descontnua e favorece umintenso polimorfismo e, consequentemente, a divergncia.
372
Nas ltimas dcadas, surgiramvrios exemplos que comprovama teoria da seleo
natural proposta por Darwin, no final do sculo XIX. Umdos exemplos mais marcantes o
da resistncia da mosca domstica e de outros insetos ao DDT. Quando surgiuesse inseticida,
na dcada de 1940, sua eficincia no controle desses insetos era muito alta. Porm, poucos
anos aps o incio do seuuso, a sua eficcia no controle dos mesmos insetos foi sensivelmente
reduzida. Aprincpio poder-se-ia pensar que os atuais insetos resistentes aparecerampor
ao do DDT, isto , esse inseticida teria umefeito mutagnico. No entanto, o que ocorreu
no foi bemisso, o DDTfuncionou como umagente de seleo, permitindo que apenas os
indivduos portadoresde alelos de resistncia sobrevivesseme deixassemdescendentes. Dessa
forma, aps vrias geraes, a frequncia dos alelos de resistncia atingiu umcerto nvel que
o inseticida perdeu sua eficincia.
Na agropecuria existemvrios exemplos de seleo natural nas populaes de pragas
e patgenos quando controlados por defensivos qumicos, de modo idntico ao relatado
anteriormente. Como exemplo, pode-se citar o caso que ocorreu com duas pragas do
algodoeiro, a lagarta da ma resistente aos inseticidas base de DDT e da broca da raiz
resistente ao Aldrin. Para evitar esse efeito da seleo natural, recomendvel sempre a
alternncia de mtodos de controle eevidentemente a utilizao dedefensivos comprincpios
ativos diferentes. Essas prticas evitama seleo dos gentipos resistentes ao produto e,
principalmente, expor a cultura ao risco de ser destruda por uma grande incidncia da praga
ou patgeno.
Aseleo natural ocorre tambmempopulaes de pragas e patgenos quando se
utilizamcultivares geneticamente resistentes aos mesmos. Como exemplo, pode-se citar o
caso da antracnose do feijoeiro. As cultivares de feijo resistentes, como a Carioca 80,
possuemo alelo dominante Co-2. Cerca de quatro anos aps a utilizao dessa cultivar
pelos agricultores, ela se mostrou suscetvel. Isso aconteceu porque surgiu uma nova raa do
fungo que venceu a resistncia conferida por aquele alelo. provvel que o uso continuado
dessafonte deresistncia tenha funcionado comoagente seletivo e induzidoa seleo direcional
na populaodo patgeno, isto , o aumento de frequnciasdas raas que vencema resistncia
conferida pelo alelo Co-2.
Diante do exposto, nota-se que a seleo natural atua nas populaes para aumentar o
nvel de adaptao das mesmas, ajustando s modificaes ambientais. Emgeral, a alterao
da constituio gentica da populao pela seleo natural mais rpida quando o ambiente
alterado bruscamente pelo homem, como no caso dos exemplos comentados relativos ao
uso incorreto de defensivos ou o emprego de monocultura geneticamente uniforme contra
pragas e patgenos.
Aseleo natural considerada o processoque dirige a evoluo, porque, ao contrrio
dos outros processos, sua atuao no ao acaso, mas orientada no sentido de tornar as
populaes mais adaptadas.
373
Outro tipo de seleo muito utilizado na agropecuria a artificial. Esta se assemelha
seleo natural no sentido de que ambas alteramas frequncias allicas da populao,
mantendo alguns gentipos e eliminando outros. Esses dois tipos de seleo, no entanto,
podemser completamente opostos quanto aos seus objetivos, pois, como j foi comentado,
a seleo natural visa a maximizar a adaptao da populao, enquanto a seleo artificial
procura manter, principalmente, aqueles fentipos agronmicamente desejveis.
Omilho moderno umexemplo de uma espcie que o produto da seleo artificial,
pois suas espigas grandes comnumerosas sementes bemaderidas ao sabugo e protegidas
pela palha so fentipos agronmicos desejveis. Essa espcie moderna provavelmente se
extinguiria, caso ela deixasse de ser cultivada, pois as sementes no se dispersariam e a
consequncia seria a germinao de todas elas aderidas espiga, produzindo umelevado
nmero de plantas emgrande competio entre si e, possivelmente, no gerando nenhum
descendente. J, o milho primitivo, de acordo comevidncias fsseis, apresentava espigas
pequenas, comcerca de 12 mmde comprimento. Onmero de sementes nessas espigas era
reduzido e se soltava facilmente, facilitando assimsua disseminao e o desenvolvimento das
plantas em locais espaados, evitando, desse modo, a competio entre elas. Essas
caractersticas no milho primitivo foramreunidas pela seleo natural coma finalidade de
conferir quelas plantas capacidade adaptativa para sobreviver naturalmente. Portanto, no
milho, a direo de atuao da seleo natural foi completamente o inverso da artificial,
especialmente nos caracteres da espiga.
15.4.2 Oscilao Gentica
Foi visto (Captulo 13) que a oscilao gentica ocorre emdecorrncia de problemas
de amostragemquesurgemquando apopulao de tamanholimitado. Elaprovocaalteraes
aleatrias nas frequncias allicas, chegando mesmo a fixar determinados alelos. Oefeito da
oscilao tanto maior quanto menor for o tamanho das populaes e maior o nmero de
geraes transcorridas.
Aimportncia da oscilao gentica para a evoluo no muito clara. Ela temsido
considerada apenas como ummecanismo auxiliar da seleo natural. Outros efeitos atribudos
oscilao gentica so as alteraes nas frequncias allicas de uma populao que
temporariamente se reduziu de tamanho - efeitode afunilamento- e tambmnaquelas que
se desenvolveramemcertos locais, a partir de poucos indivduos migrantesde uma populao
maior - princpio do fundador. Nesses dois casos, ocorre uma reduo no tamanho da
populao e a amostra de gametas da populao maior, para formar aquela de tamanho
reduzido, contmdesvios, no mantendo as mesmas frequncias allicas da original.
Na preservao de espcies nativas oumesmo de plantas cultivadas, umdos aspectos
de maior importncia o nmero de indivduos necessrios para representar a variabilidade
374
existente na populao. Isso, porque se o nmero de indivduos for muito pequeno, o efeito
da oscilao gentica ser muito pronunciado, o que pode levar alterao drstica nas
caractersticas da populao que se deseja manter, ou at mesmo contribuir para que ocorra
a extino daquela populao.
15.4.3 Isolamento Reprodutivo
Oisolamento reprodutivo definido como sendo o processo que dificulta ou impede a
troca de alelos entre duas populaes e essencial para a formao de espcies novas, bem
como a manutenoda identidade de cadauma. Tomando como basea classificao proposta
por Stebbins (1970), esses mecanismos so:
a- Mecanismospr-zigticos - Impedemafertilizao e a formao do zigoto. Existem
vrios mecanismos que podemser includos nessa categoria, entre eles:
a
1
- Habitat - As populaes vivemna mesma regio, mas ocupamdiferentes condies
de ambientes.
Como exemplo, desse mecanismo, so citadas duas espcies de carvalho dos Estados
Unidos. Uma, o carvalho escarlate (Quercus coccinea), se desenvolve em brejos mal
drenados, comsolos cidos e a outra, o carvalho negro (Quercus velutina), que encontrado
emsolos secos, nos locais mais altos. Nas regies onde existemhabitats intermedirios,
encontram-se comfrequncia hbridos entre as duas espcies, no entanto, onde esses habitats
no existem, tambm no se observam os hbridos e as duas espcies permanecem
completamente isoladas.
a
2
- Sazonal ou temporal - As populaes ocorremna mesma regio mas apresentam
maturidade sexual empocas diferentes.
Um estudo da distribuio de espcies de orqudeas, na regio Sudeste do Brasil,
evidenciou umisolamento do tipo sazonal. Foi verificado que a espcieMiltoneamoreliana
se distribui nos estados de So Paulo, Rio de Janeiro e sul do Esprito Santo e somente no
norte desse ltimo ocorre uma populao de orqudea da mesma espcie, s que diferente
emalguns caracteres. Entre eles, o perodo de florescimento das duas populaes difere
cerca de dois meses, o queimpede o cruzamento entreelas. Duas outras espcies de orqudeas
permanecemisoladas reprodutivamente, mesmo quando se encontramna copa de uma mesma
rvore. Nesse caso, a Cattleya labiata floresce nos meses de janeiro e fevereiro, enquanto
a C. chocoensis de maio a junho.
a
3
- Etolgico (somente emanimais) -As populaes so isoladas por comportamentos
diferentes e incompatveis antes do acasalamento.
375
Um exemplo interessante observado entre vrias espcies de rs. Nestas, o
acasalamento s ocorre entre os indivduos machos e fmeas de uma dada espcie, emrazo
de estmulos auditivos especficos. Umdos critrios mais utilizados na identificao das
diferentes espcies o do somque cada uma emite.
a
4
- Mecnico - A fecundao cruzada impedida ou restringida por diferenas
estruturais dos rgos reprodutivos.
Entre espcies da falsa erva-de-rato (Asclepias spp), plantas txicas que ocorremem
pastagens, existe umisolamento reprodutivo do tipo mecnico. Isso acontece, porque as
flores de espcies distintas so estruturalmente diferentes, a tal ponto que mesmo comvisitas
sucessivas de uminseto emflores de duas espcies diferentes no se realiza o cruzamento.
a
5
- Incompatibilidade gamtica - Os gametas no sobrevivem em rgos
reprodutivos estranhos.
Existemmuitasevidncias deisolamento gamticoeminsetos e outrosanimais e tambm
emplantas. Dos exemplos emplantas, ocruzamento entre certas espcies de gneroNicotiana
incompatvel porque o plen de uma espcie abortado no estigma da outra, sendo que
essa reao apresenta umcontrole gentico monognico.
b- Mecanismos ps-zigticos - Afecundao ocorre e os zigotos hbridos so
formados, mas estes so inviveis ou do origema hbridos fracos ou estreis.
b
1
- Inviabilidade ou debilidade do hbrido.
O estudo mais detalhado sobre esse mecanismo de isolamento foi feito a partir da
inseminao artificial de rs de uma espcie comesperma de outra, na tentativa de se obterem
hbridos interespecficos. Ahibridao deRana pipiens xRana sylvaticaproduziu embries
que se desenvolveramapenas at o estgio de gstrula, mostrando portanto, ser invivel a
formao dohbrido. Umexemploemplantafoi observadoemlinho, ondeassementes hbridas,
provavelmente do cruzamento de Linumperene( ) x L. austriacum( ), no germinaram
porque o embrio no conseguiu romper o invlucro da semente nas condies naturais.
Esse tipo de incompatibilidade ocorre tambmemmuitas outras espcies vegetais.
Contudo, a incompatibilidade pode emalguns casos ser superada por meio de processo
artificial via cultura de embrio (Captulo 17). Esse processo temsido utilizado emmuitos
casos, especialmente nas cucurbitceas.
b
2
- Esterilidade do hbrido - Os hbridos so estreis porque os rgos reprodutivos
no se desenvolvemcompletamente ou o processo meitico anormal.
Na pecuria, emvrias ocasies j foi experimentada a obteno de certos hbridos
interespecficos visando a associar emummesmo animal caractersticas desejveis que esto
! #
376
separadas emindivduos de espcies diferentes. Umdos exemplos ocruzamento de bovinos
combfalos, visando a incorporar nos bovinos maior rusticidade. Nos casos em que os
descendentes foramobtidos, esses eramestreis, principalmente emrazo do desenvolvimento
incompleto dos testculos dos machos.
Aesterilidade pode ocorrer tambmpela falta de homologia entre os genomas das
espcies. Oexemplo mais marcante que se tem o cruzamento de jumento (Equus asinus)
coma gua (Equus caballus). Nesse caso, o hbrido obtido, burro ou mula, muito vigoroso,
apesar de estril. H, contudo, relatos especialmente no caso de mulas, emque estas foram
frteis.
Nas plantas, as segregaes cromossmicas anormais so tambmcausas frequentes
da esterilidade dos hbridos interespecficos. No entanto, as plantas suportama poliploidia
porque a esterilidade pode quase sempre ser suplantada por meio da duplicao do nmero
de cromossomos. Vrios exemplos obtidos desse modo, de alopoliplides frteis, so
apresentados no Captulo 14. Algumas espcies alopoliplides, e que hoje assumemgrande
importncia econmicaaps teremduplicado seuscromossomos, so o trigocomum(Triticum
turgidumx Aegilops tauschii), triticale (Triticumdurumx Secale cereale) e nabo (Brassica
oleracea x Brassica campestris), entre outras.
15.5 ESPECIAO
Aespeciao a formao de novas espcies e engloba todos osprocessos de evoluo
j comentados, geralmente associados a umisolamento geogrfico e, nessecaso, denominada
de especiao aloptrica. No entanto, quando a especiao ocorre dentro de uma mesma
regio geogrfica denominada simptrica.
De maneira geral, a especiao se processa do seguinte modo (Figura 15.1): os
mecanismos geradores de variabilidade gentica ocorrempara fornecer os recursos destinados
a tornar essa populao mais adaptada e sobreviver s alteraes ambientais. Acontece que
nemtoda a variabilidade til para a populao, nas suas condies ambientais, mas apenas
determinados genes ou conjuntos de genes que permitem a sua adaptao. Aparcela
restante da variabilidade pode permitir que alguns indivduos ocupem novas condies
ambientais, formando assimsubpopulaes. Estas, para adaptarem-se aos seus ambientes,
vo acumulando novos complexos gnicos adaptativos e, emconsequncia, ocorre uma
divergncia gentica entre as subpopulaes. Emvirtude de cada subpopulao ocupar um
habitat particular, os acasalamentos entre elas no ocorremto livremente quanto dentro de
cada uma, o que contribui para aumentar a divergncia gentica, e mesmoiniciar o surgimento
de mecanismo de isolamento reprodutivo. Porm, se por um motivo qualquer, as
subpopulaes ficaremisoladas geograficamente, o fluxo gnico entre elas fica mais restrito e
desenvolvem-se os mecanismos de isolamento reprodutivo, a tal ponto que, quando elas
377
forem reunidas novamente, permaneam isoladas, caracterizando o estdio de espcies
biolgicas diferentes.
FIGURA 15.1. Evoluo de uma populao resultando na formao de novas espcies: A)
populao geneticamente heterognea onde esto atuando os mecanismos que criam e ampliam
a variabilidade gentica e permite aos indivduos exploraremnovos ambientes; B) subpopulaes
oriundas da migrao da populao original para novos ambientes em decorrncia da atuao
dos mecanismos que as conduzem para canais adaptativos; C) espcies biolgicas distintas
convivendo no mesmo habitat, porm isoladas reprodutivamente.
Uma comparao interessante entre os processos de evoluo que atuamnuma linha
evolutiva de organismos que est variando atravs dos tempos, e umautomvel percorrendo
uma estrada foi feita por Stebbins (1970). Segundo o autor, a mutao corresponde ao
combustvel no tanque, pois a nica fonte de nova variao gentica, que essencial para a
progresso contnua, mas no afonte imediatade foramotriz. Esta, por suavez, corresponde
recombinao gentica, atuando pela mistura de genes e de cromossomos, que ocorre
durante o ciclo sexual. Uma vez que a recombinao fornece a fonte imediata de variabilidade
sobre a qual a seleo exerce sua ao primria, ela pode ser comparada ao motor do
automvel. Aseleonatural, que dirige a variabilidade gentica para aadaptao ao ambiente,
podeser comparadaao motoristadoveculo. Existemvriasevidnciasindicando quemudanas
estruturais nos cromossomos, que alterama sequncia dos genes ao longo deles, podemter
profundos efeitos sobre a inter-relao entre recombinao gentica e seleo natural, e
assimpodemcomparar-se ao cmbio eao acelerador do automvel. Finalmente, o isolamento
reprodutivo, que inclui todas as barreiras troca de alelos entre populaes, temumefeito
canalizador semelhante estrada que, comseus limites e sinalizaes, exercesobre o condutor
do automvel, permitindo assima movimentao de vrios veculos na mesma direo e ao
mesmo tempo.
378
15.6 CONCEITODEALGUNSTERMOS
Existe uma srie de termos que normalmente utilizada pelos evolucionistas e tambm
na agropecuria que muitas vezes gera confuso. Oprimeiro deles o prprio conceito de
espcie, que pode ser definido de vrias maneiras. Para o evolucionista e o geneticista,
espcie umgrupo de indivduos que possui a capacidade de trocar alelos naturalmente
entre si, porm no com indivduos de outra espcie. Esse conceito considera o
desenvolvimento de mecanismos de isolamento reprodutivo, que impede o fluxo gnico.
H tambmo que se denomina conceito tipolgico de espcie, que muito usado pelo
taxonomista. Este considera na definio de espcie principalmente caracteres morfolgicos.
Esses dois conceitos nemsempre so coincidentes porque as diferenas morfolgicas no
so completamente associadas com os mecanismos de isolamento reprodutivo. Em
decorrncia disso, muitas espcies consideradas diferentes pelos taxonomistas se cruzame
produzem descendentes frteis e, portanto, devem ser enquadradas numa nica espcie
biolgica. Os especialistas emessncias florestais, por exemplo, classificamcomo espcies
diferentes vrios tipos de eucaliptos (E. saligna, E. citriodora, E. grandis) que se cruzam
normalmente, no devendo assimseremconsideradas espcies biolgicas distintas.
O processo de especiao normalmente no envolve mudanas bruscas entre as
subpopulaes, ao contrrio, pequenas diferenas vo se acumulandogradualmente. Durante
o decorrer do processo, quando as subpopulaes atingemcerto graude diferenciao, sem
contudo, terem sido desenvolvidos mecanismos de isolamento reprodutivo, elas so
denominadas de raas. Est implcito nesse conceito que na diferenciao de raas esto
envolvidos normalmente umgrande nmero de diferenas genticas. As raas de bovinos
utilizadas pelos zootecnistas se enquadramdentro desse conceito. J, o conceito de raa
fisiolgica adotado pelos fitopatologistas para fungos difere completamente do apresentado
aqui. Nesse caso, as diferenas entre as raas so decorrentes, unicamente, da capacidade
de ser fitopatognico, ou no, em um dado hospedeiro, geralmente essa diferena na
capacidade controlada por um, ou poucos genes.
O conceito de variedade tambmmuito polmico. Os botnicos, por exemplo,
utilizam-no de modo semelhante ao comentado anteriormente para raa. J, na agricultura,
esse termo temuma utilizao muito diversificada. Assim, por exemplo, quemtrabalha com
a cultura do milho denomina de variedade uma populao melhorada emequilbrio. J, o
termo hbrido empregado para o material proveniente do cruzamento de duas ou mais
linhagens e como cultivar os dois grupos - hbridos e variedades. Para outras culturas, os
termos variedade e cultivar so na maioriados casos usados como sinnimos. Na fruticultura,
o termo variedade se confunde com clone - descendentes de um nico indivduo por
propagao vegetativa. Emplantas autgamas, por sua vez, como o caso do feijo, arroz
e trigo, o termo cultivar usado considerando a existncia de uma nica linhagem- gentipo
homozigtico - ouuma mistura de linhagens.
379
EfeitoMaterno e Herana Extracromossmica
16 EFEITO MATERNO E
HERANA
EXTRACROMOSSMICA
16.1 INTRODUO
Como j foi amplamente discutido nos captulos anteriores, os gametas masculinos e
femininos so equivalentes emrelao constituio de genes. Isso pode ser constatado,
por exemplo, quandoumdescendente bovino Shorthornruo - compelosvermelhos e brancos
- produzido a partir do cruzamento de umtouro vermelho comuma vaca branca ou de um
touro branco comuma vaca vermelha. Nesse caso, o alelo responsvel pela cor vermelha do
pelo do animal passado parao filho pelo gameta masculino ou feminino eo mesmo acontece
em relao ao alelo responsvel por pelo branco. Isso acontece porque a maioria dos
caracteres dos organismos superiores controlado por genes nucleares que segregamde
acordo como comportamento dos cromossomos na meiose.
Entretanto, umpequeno grupo de caracteres herdado graas aos genes ou produtos
gnicos presentes no citoplasma do gameta. Como o gameta feminino contribui comquase a
totalidade do citoplasma para o descendente, o modo de herana dessescaracteres, primeira
vista, processa-se de modo diferente daqueles controlados por genes nucleares. Assim, para
se constatar esse tipo de herana, deve-se verificar se existe diferena entre os resultados de
umcruzamento e de seu recproco. Entende-se por cruzamento recproco aquele emque
o genitor usado ora como fmea, ora como macho. Desse modo, se a herana de umdado
carter controlada por genes nucleares, os resultados de umcruzamento e de seu recproco
sero idnticos. Porm, se for um caso em que o carter decorrente de efeitos
citoplasmticos, os resultados dos cruzamentos recprocos sero diferentes, isto , os
descendentes de cada cruzamento tero sempre o mesmo fentipo do genitor feminino, que
contribui como citoplasma. Esse tipo de herana pode ser explicado por dois mecanismos:
o efeito materno e a herana extracromossmica.
16.2 EFEITOMATERNO
Oefeito materno umcaso especial de herana controlado por genes nucleares da
me, porm que so responsveis por certas condies do citoplasma do vulo -
provavelmente, produtos gnicos. Essas condies que determinama expresso fenotpica
380
de alguns caracteres do filho, independente dos genes doados pelo pai. Contudo, importante
salientar que o efeito materno na expresso desses caracteres nos descendentes se d apenas
por uma ou, no mximo, duas geraes.
Umdos exemplos mais comentados naliteratura sobre efeito maternorefere-se direo
de enrolamento da concha do caramujo Limnaea peregra. Oenrolamento da concha um
carter monognico, sendo que o alelo dominante, R, condiciona oenrolamento para a direita,
e o recessivo, r, para a esquerda. No entanto, quando se cruzamindivduos puros comas
duas direes de enrolamento, e se obtmtambmos recprocos, so obtidos os resultados
apresentados na Figura 16.1.
FIGURA 16.1. Efeito materno. Cruzamentos recprocos ilustrando a herana da direo de
enrolamento da concha do caramujo Limnaea peregra para a direita (D) ou esquerda (E).
Observe que o fentipo do filho sempre a expresso do gentipo da me. (Modificado de
Sinnot et al., 1975).
381
Nota-se (Figura 16.1) que o fentipo dos filhos depende do gentipo da me, o que
constatado, principalmente, pelas diferentes direes de enrolamento da concha da gerao
F
1
e do cruzamento recproco. Observa-se ainda que o fentipo da F
2
, nos dois cruzamentos,
expressa apenas o gentipo F
1
, que condiciona enrolamento para a direita e cuja segregao
monognica tpica 3D: 1E da gerao F
2
observada na gerao F
3
. Aexplicao para
esses resultados que o citoplasma do vulo deve ser afetado por um produto do gene
nuclear materno que, durante a primeira clivagemdo zigoto, determina o sentido das fibras
do fuso para a direita ou para a esquerda em relao ao eixo da clula e ocasiona,
respectivamente, o enrolamento da concha para a direita ou esquerda. Evidentemente, nesse
carter, o efeito do gene materno se expressa apenas na primeira gerao descendente.
Aherana de caracteres de grande importncia agronmica, como o teor de protena
do gro de soja e feijo, o teor de leo do gro de soja e o tamanho da semente da ervilha,
umdos exemplos conhecidos onde o efeito materno considerado a principal explicao
de resultados de cruzamentos recprocos. Como exemplo so apresentados na Figura 16.2
os valores obtidos para o teor de protena do gro de feijo.
FIGURA 16.2. Resultado de cruzamentos recprocos considerando o carter teor de protena
do gro de feijo, ilustrando tambm um caso de efeito materno (Leleji et al., 1972).
382
Como sabemos, o teor de protena do gro de feijo umcarter quantitativo, onde
esto envolvidos, provavelmente, vrios genes sendo afetados consideravelmente pelo
ambiente, o que difere do exemplo comentado sobre o enrolamento da concha deL. peregra,
que controlado por umnico gene comdois alelos. No entanto, nota-se que a herana do
teor de protena do feijo , principalmente, materna, emprimeiro lugar pelos diferentes
fentipos apresentadospelas duas F
1
, provenientes dos cruzamentos recprocos. Os fentipos
destas F
1
so, praticamente, iguais ao fentipo da me, o que equivale a dizer que o gentipo
materno se expressa no filho. Seguindo esse raciocnio, observa-se que os fentipos das
duas populaes F
2
so semelhantes. Como essas duas populaes so provenientes de
cruzamentos emque a F
1
participoucomo me, ento a semelhana de tais fentipos refere-
se expresso do gentipo F
1
. Essa concluso confirmada quando se verifica que as
varincias dos pais, F
1
e F
2
, so semelhantes e referem-se, portanto, varinica ambiental,
isto , os dados apresentados correspondems expresses dos gentipos dos genitores e
das F
1
.
O conhecimento desse tipo de herana imprescindvel para a eficincia de certos
programas de seleo. Por exemplo, possvel analisar o teor de protena ou leo de uma
nica semente de soja por meio de tcnicas no destrutivas e, posteriormente, efetuar o
plantio dessa semente para a obteno dos descendentes. Como a herana dessas duas
caractersticas , principalmente, materna, a seleo de sementes F
2
, colhidas de uma nica
planta, inteiramente ineficaz, pelo fato de os fentipos dessas sementes seremsemelhantes
e representarema expresso do gentipo da planta F
1
. Ogentipo de cada semente F
2
ir se
expressar, portanto, apenas nas sementes produzidas por sua prognie. Assim, o xito da
seleo s ocorrer quando se proceder seleo entre as prognies de cada semente F
2
,
que corresponde gerao F
3
.
Como se pode constatar a partir dos exemplos apresentados, os caracteres, cuja
herana denominada de efeito materno, so praticamente iguais aos caracteres mendelianos.
Aqui tambmestoenvolvidos genes situados nos cromossomos. Adiferenaque aexpresso
do gentipo de qualquer indivduo se manifesta nos seus descendentes quando o referido
indivduo for usado como genitor feminino. Ou seja, o gentipo da F
1
se expressa emF
2
, o
gentipo da F
2
na gerao F
3
e, assim, sucessivamente. Na realidade, existem, ento, duas
diferenas em relao herana mendeliana: a primeira que s o gentipo materno se
expressa na primeira gerao descendente, e isso a causa da segunda diferena que resulta
na expresso fenotpica sempre uma gerao atrasada.
16.3 HERANAEXTRACROMOSSMICA
Os caracteres comesse tipo de herana so decorrentes de genes situados emorganelas
do citoplasma, sendo que as principais portadoras desses genes so as mitocndrias que
383
ocorremnos eucariontes emgeral e os plastos, encontrados nas plantas. Como se sabe,
essas organelas possuemDNAcomfunes de replicao e transcrio independentes do
DNAnuclear. Emrelao aos procariontes, as caractersticas comherana citoplasmtica
so aquelas determinadas por genes localizados nos plasmdeos (Captulo 17, 16.1).
Como j foi comentado, o descendente de umcruzamento recebe essencialmente o
citoplasma dovulo; assim, os caracteresdecorrentes dos genes citoplasmticosse expressam
no filho, apresentando sempre o mesmo fentipo da me.
BOX 16.1 ORIGEM DAS MITOCNDRIAS E CLOROPLASTOS
Existemalgumas evidncias de que as mitocndrias e cloroplastos tmorigem
endossimbionte, ou seja, emumpassado distante alguma bactria se associou as clulas
primitivas e ocorreuumbenefcio mtuo endossimbiose. Apartir de ento, o organismo
endossimbionte passou a ser constituinte das clulas. No caso das clulas animais, as
mitocndrias eas clulas dos organismos que realizamfotossntese, almda mitocndrias,
os cloroplastos so organelas celulares. As principais evidncias so:
a) o DNAdas mitocndrias e dos cloroplastos diferememquantidade do existente
no ncleo celular e so mais semelhantes ao de bactrias;
b) o cdigo gentico utilizado pelas mitocndrias temalgumas especificidades que
diferemda clula hospederia;
c) a membrana das mitocndrias tmmaior semelhana coma dos procariotos do
que coma da clula hospedeira;
d) o sistema de multiplicao, fisso binria, dos cloroplastos e mitocndrias
semelhante ao das bactrias
e) a estrutura dos, cloroplastos como, por exemplo, a presena de tilacides e
tipos particularesdepigmentos, muitosemelhante aodas cianobactrias. Anlises
filogenticas debactrias, cloroplastos e genomaseucariticos tambmsugerem
que os cloroplastos esto relacionados comas cianobactrias;
f) tanto as mitocndrias como os cloroplastos possuemgenomas muito pequenos,
emcomparao comoutros organismos, o que pode significar umaumento da
dependncia dessas organelasdepois da simbiose se tornar obrigatria, oumelhor,
passar a ser umorganismo novo.
384
16.3.1 Genes do Plasto
Alguns genes localizados no plasto, comfunes j conhecidas, so os responsveis
por RNA ribossmico, que constitui os ribossomos do prprio plasto, e tambm os
determinantes de algumas enzimas que participamda fotossntese. Outro carter que poder
vir a ser amplamente utilizado no melhoramento de plantas resistncia a herbicidas.
Muitos herbicidas importantes atuam inibindo a fotossntese. Uma dessas classes de
herbicidas a das triazinas, que tmafinidade pelas membranas do tilacoide, onde bloqueia
o transporte de eltrons, desprovendo o cloroplasto da energia necessria para a
fotossntese.
Emreas agrcolas, onde herbicidas desse grupo vmsendo intensamente utilizados,
tmsurgido algumas ervas daninhas resistentes. Os estudos bioqumicos demonstraram
que tal resistncia se deve a uma nica protena constituinte do tilacide do cloroplasto.
Mediante o sequenciamento das protenas de uma planta suscetvel e de uma resistente,
ambas da espcie Amaranthus hybridus, pode ser constatado que a resistncia devida
presena do aminocido glicina, que substituiu a serina emumnico local da molcula.
Cerca de 30 espcies de ervas daninhas j mostraramresistncia s triazinas e foi constatado
que essa resistncia se deve a uma protena semelhante emtodas elas. Como esse herbicida
vemsendoaplicado continuamente, ele contribuiu, como agente de seleo, para o surgimento
de plantas daninhas resistentes sua ao. O interessante, no entanto, obter plantas
cultivadas que sejam resistentes ao herbicida, para que ele possa ser mais amplamente
usado. Aindagao que surge : como pode ser realizada a transferncia do gene de
resistncia da erva daninha para a espcie cultivada? Se fosse um gene situado nos
cromossomos, a transfernciapoderia ser realizada utilizando osprocedimentos j discutidos
(Captulo 5) e seria feita comrelativa facilidade, desde que as duas espcies apresentassem
cruzamentos compatveis. Entretanto, o gene de resistncia est situado nos plastos o que
torna a situao um pouco diferente daquela discutida anteriormente, porque aqui h
necessidade de se transferir o citoplasma. Vejamos como isto pode ser feito utilizando o
exemplo de transferncia, j realizado, envolvendo duas espcies de Brassicas. Aerva
daninha resistente da espcie B. campestris e a planta cultivada a B. napus, conhecida
vulgarmente como colza, utilizada como forrageira e de cujas sementes se extrai o leo. O
processo envolveu vrios retrocruzamentos emque se empregou a B. campestris como
genitor feminino, no primeiro deles, para fornecer o citoplasma gerao F
1
. Posteriormente,
foramrealizados vrios retrocruzamentos, sempre utilizando os descendentes de cada
retrocruzamento como genitor feminino, para manter o citoplasma comos cloroplastos
portadores da resistncia ao herbicida. Como genitor masculino, usou-se a B. napus que
cedeu os cromossomos. Aps vrios retrocruzamentos, obteve-se uma planta com o
citoplasma de B. campestris, portanto resistente ao herbicida e como ncleo de B. napus
385
FIGURA 16.3. Esquema de cruzamento das espcies B. campestris e B. napus, mostrando a
transferncia do alelo de resistncia s triazinas, presentes no cloroplasto da erva daninha. Observe
que a B. campestris, a gerao F
1
e os descendentes de cada retrocruzamento foramempregados
como fmea, porque so eles que possuem o alelo de resistncia localizado no citoplasma.
(Figura 16.3). Observa-se, na Figura 16.3 que, aps cinco retrocruzamentos, os
descendentes possuem 98,4% dos alelos da espcie cultivada, porm mantendo-se
integralmente o citoplasma de B. campestris, portadora da resistncia ao herbicida. Obtm-
se, assim, uma planta semelhante a B. napus e resistente ao herbicida.
386
BOX 16.2. DIFERENAS ENTRE O DNA NUCLEAR E O MITOCONDRIAL
16.3.2 Genes da Mitocondria
Existemalgumas diferenas entre o genoma DNAdas mitocndrias (mtDNA) e o
existente no ncleo das clulas (BOX16.2). O DNA mitocondrial responsvel,
principalmente, pelaproduo de enzimas queparticipamda respirao celular e pela produo
de RNAque constitui seus ribossomos.
Exemplos de caracteres cuja expresso fenotpica depende do DNAmitocondrial so
conhecidos. Umdos exemplos mais marcantes a esterilidade masculina citoplasmtica, em
plantas. Esseo fenmeno pelo qual plantashermafroditas oumonicas, apresentamo aparelho
reprodutivo feminino normal, mas no produzem plen vivel. No podem assimserem
autofecundadas e s iro produzir sementes por plen proveniente de outra planta no
relacionada comela. Esse carter, denominado macho esterilidade, de grande importncia,
pois possibilita a produo de sementes hbridas F
1
, sema necessidade de emasculao, que
encarece o custo de produo.
DNA
Nuclear Mitocondrial
Localizao
No ncleo da clula,
protegido pela membrana
nuclear
Nas mitocndrias, protegidas
pela membrana mitocondrial
influncia de radicais livres(??)
Conformao Dupla hlice linear Dupla hlice circular
Estrutua Protegido por histonas Desprovido de histonas
Nmero de genes Aproximadamente 30.000 37
Funcionamento Autnomo
Necessita de cooperao do DNA
nuclear
Regies codificantes
(xons) e no codificantes
(ntrons)
90% DNA codificante
Caracterstica do genoma
Diplide (materno/paterno)
sofre recombinao
Genoma haplide (herana
materna) no sofre
recombinao
Nmero de pares de bases
Bilhes de pares de
nucleotdeos
16.569 pares de nucleotdeos
Atividade de polimerase Grande Fraca
Sistema de reparo Presente Ausente
Nmero de DNA por
clula
1.000 a 10.000
387
Amacho esterilidade pode ser de origemde genes nucleares oucitoplasmticos. Ela j
foi registrada emmais de 80 espcies, envolvendo 25 gneros pertencentes a seis famlias
diferentes. Como j mencionado, o conhecimento desse fenmeno possibilitou o emprego
comercial na produode hbridos de algumas espciesagronomicamente importantes, como
o milho e a cebola.
Amacho esterilidade no milho foi descrita pela primeira vez em1931, por Rhoades,
a partir do cruzamento de uma planta macho estril originada do Peru, com outra do
Chile, cuja descendncia foi toda estril. Asua importncia, na produo de sementes
hbridas s ocorreu aps a dcada de sessenta. Atualmente, sabe-se que h vrios tipos
de citoplasmas envolvidos coma macho esterilidade, sendo os mais importantes os tipos
T, S e C. O tipo T foi descoberto no Texas, em1944. Da a denominao de citoplasma
T. Foi demonstrado que no caso do T, a mitocndria deficiente em umsegmento de
DNA de aproximadamente 2350 pares de nucleotdeos. O tipo S, foi o primeiro
citoplasma a ser identificado nos Estados Unidos e o citoplasma do tipo C, foi descoberto
no Brasil numa variedade denominada Charrua. Nesses dois casos a esterilidade est
associada presena de DNAnuclear junto ao DNAmitocondrial. Esse DNAadicional
de origem plasmidial. Como esse DNA extra afeta a macho esterilidade, ainda no foi
esclarecido.
Diante da importncia da esterilidade masculina citoplasmtica para a produo de
hbridos, imprescindvel conhecer o procedimento de sua transferncia de uma linhagem
para outra ou de umgenitor para outro, a fimde concretizar seu emprego no melhoramento
de plantas. Como a mitocndria de plantas macho estreis a organela responsvel pela
esterilidade, basta transferir para o citoplasma macho estril os cromossomos de uma
linhagem ou genitor macho frtil, por meio de retrocruzamentos sucessivos, de modo
semelhante transferncia de plasto, j apresentada. Na Figura 16.4, mostrada a
transferncia da macho esterilidade citoplasmtica - citoplasma T- da linhagemAde milho
para a linhagemBcomcitoplasma N. Como se observa, aps cinco retrocruzamentos a
planta resultante ter na sua constituio 100%do citoplasma da linhagemAe o ncleo
possui 98,4%dos alelos da linhagemB, ou seja, quase 100%do DNAnuclear, da linhagem
B. Portanto, obtida uma linhagemmacho estril B, praticamente idntica a linhagemmacho
frtil B.
388
FIGURA 16.4. Esquema de cruzamento de duas linhagens de milho mostrando a transferncia do
citoplasma Tcausador de macho esterilidade, presente na linhagemA, para a linhagemB. Observe que,
aps cinco retrocruzamentos, obtm-se uma linhagem macho-estril como citoplasma Tda linhagemAe
os cromossomos da linhagem B.
Na produo de hbrido simples de milho, deve-se utilizar uma das linhagens macho
estril e a outra macho frtil, pormcomos alelos dominantes restauradores da fertilidade.
Desse modo, a linhagemmacho estril ser o genitor feminino, sema necessidade de ser
realizada a operao de despendoamento, que muito trabalhosa e onerosa. Como j
mencionado, a semente hbrida colhida nesse genitor ter o citoplasma macho estril e, no
ncleo, o gentipo Rfrf, que permite a produo de plen. Para a produo de umhbrido
389
FIGURA 16.5. Esquema da obteno de milho hbrido duplo, utilizando a macho esterilidade
citoplasmtica e o alelo nuclear restaurador de fertilidade (Rf). O citoplasma para macho
esterilidade representado por E para macho fertilidade por N.
duplo, como jfoi comentado no Captulo12, empregam-se quatro linhagens. Nesse processo
de produo do hbrido, so necessrias linhagens comcitoplasma estril e normal e tambm
o alelo nuclear restaurador de fertilidade - Rf.
Observa-se que o hbrido duplo (Figura 16.5) produzido sem a necessidade de
despendoamento emtodas as etapas. Nota-se tambmque apesar de 50% das sementes
hbridas obtidas serem macho estreis no h problema com a cultura, uma vez que a
quantidade de plen produzida pelas plantas macho frteis suficiente para assegurar a
polinizao de todas as plantas.
390
16.4 DIFERENA ENTRE EFEITO MATERNO E HERANA
EXTRACROMOSSMICA
Foi visto nos tpicos anteriores que, no caso do efeito materno, esto envolvidos
genes nucleares; porm, o fentipo do descendente dependente do gentipo materno. Na
herana extracromossmica no esto envolvidos genes nucleares e simcitoplasmticos, e
aqui tambm o fentipo do descendente idntico ao da me. Considerando apenas os
fentipos dos descendentes dos cruzamentos recprocos, os dois fenmenos se confundem.
Como proceder ento para diferenci-los?
Oemprego de vrios cruzamentos sucessivos e a manuteno da mesma diferena
observada entre a F
1
de umcruzamento e a F
1
do recproco indicao de que o carter
controlado por genes citoplasmticos. Por outro lado, tratando-se de umcarter com
efeito materno, ele ir expressar numa gerao qualquer, o fentipo determinado pelo
gentipo nuclear materno da gerao anterior. Desse modo, no persiste a diferena entre
a F
1
de umcruzamento e a F
1
de seu recproco. Isso fica evidenciado, comparando-se as
Figuras 16.3 e 16.1.
391
PROBLEMASPROPOSTOS
1. Emcaramujo da espcie Limnaea peregra, o enrolamento da concha pode ser para a
direita, emdecorrncia do alelo dominante R, ou para a esquerda, condicionado pelo
recessivo r. Dois caramujos foramcruzados e produziramum descendente coma
concha enrolada para a esquerda. Este descendente foi autofecundado e produziu
uma prognie comtodos os indivduos apresentando a concha enrolada para a direita.
a) Quais os gentipos do pai, da me e de todos osdescendentes obtidos?
b) Se a prognie coma concha enrolada para a direita for autofecundada, quais as
propores genotpicas e fenotpicas esperadas?
2. Suponha que emarroz ocorra uma determinada anormalidade, qual procedimento deve
ser adotado para verificar se a anormalidade decorrente de genes nucleares,
citoplasmticos, efeito materno ou simplesmente algumefeito ambiental?
3. Emsoja, foi realizado o cruzamento entre duas linhagens visando ao estudo da herana
do teor de leo, sendo obtido o seguinte resultado:
Populaes Teor de leo (%)
Linhagem A 15
Linhagem B 25
F
1
Ax B 15
F
1
B x A 25
F
2
Ax B 20
F
2
B x A 20
Qual a concluso sobre a herana do carter?
4. Como pode ser diferenciado o caso de herana ligada ao sexo e herana
extracromossmica?
5. No tremoo, uma leguminosa forrageira, o cruzamento de uma linhagemamarga com
outra doce produziutodos os descendentes F
1
doce; o seu recproco apresentou todos
os descendentes amargos. Esse resultado s foi observado nas plantas jovens da F
1
,
quando atingiramo estgio adulto todas apresentaramfolhas amargas.
a) Sugira uma provvel explicao para esses resultados.
b) Quaisso as constituies genticasdos genitores masculinos efemininos envolvidos
nos cruzamentos, admitindo que o carter monognico?
392
c) Quais os resultadosesperados na gerao F
2
para ambos os cruzamentos, no estgio
de plantas jovens e tambmadultas?
6. No cruzamento de duas cultivares de feijo, contrastantes comrelao ao peso das
sementes, foramobtidos os seguintes resultados:
a) A herana extracromossmica uma hiptese plausvel para explicar esses
resultados?
b) Sugira os cruzamentos necessrios para comprovar sua hiptese.
7. Acor amarela numa planta pode ser causada por umalelo recessivo cromossmico e/
ou por umfator citoplasmtico. Quais os resultados seriamesperados nos seguintes
casos?
a) Cruzamentos recprocos de uma linhagemverde comoutra amarela.
b) Retrocruzamentos entre o produto de cada umdesses cruzamentos para as linhagens
paternais.
c) Autofecundao dos F
1
s dos cruzamentos recprocos.
d) Cruzamentos dos dois F
1
s.
8. Uma linhagemde cevada comfolhas amareladas e aristas longas recebeu plen de
outra linhagemque possua folhas normais e aristas curtas. As plantas F
1
foramde
folhas amareladas e aristas longas, na F
2
foram obtidas 309 plantas com folhas
amareladas e aristas longas e 98 plantas de folhas amareladas e aristas curtas. O
cruzamento recproco entre essas duas linhagens produziu, na F
1
, plantas comfolhas
verdes e aristas longas e, na F
2
, 328 plantas comfolhas verdes e aristas longas e 107
plantas comfolhas verdes e aristas curtas. Qual a explicao do controle gentico
desses dois caracteres?
9. Na cevada, a cor das folhas pode ser decorrente de um gene citoplasmtico (L
1
=
folhas normais, e L
2
=folhas amarelas), oua umgene nuclear (v), sendo oalelo recessivo
o responsvel por folhas amareladas. Possuindo o citoplasma L
2
a cor ser amarela,
Populaes Peso de 100 sementes (g)
P
1
- Small White (S) 18
P
2
Diacol Calima (D) 50
F
1
- S ( ) x D ( ) 18
F
1
- D ( ) x S ( ) 50
393
independente do gentipo do ncleo. Quais as propores fenotpicas esperadas a
partir dos seguintes cruzamentos?
10. Na planta ornamental conhecida por maravilha, as ramificaes podemser verdes,
variegadas e brancas. Agerao F
1
, proveniente do cruzamento de flores femininas
presentes em ramos verdes ou brancos, possui os mesmos fentipos maternos,
independente do genitor masculino. Isso se verifica tambm para a gerao F
1
de
qualquer retrocruzamento. Emqualquer cruzamentoemque a flor feminina se encontra
num galho variegado, a prognie apresenta plantas verdes, variegadas e brancas,
independente do fentipo do genitor masculino.
a) Qual a explicao para a herana da cor da folha?
b) Qual o resultado esperado dos seguintes cruzamentos?
a) ( ) Linhagem normal
x ( ) L
1
vv (amarelado)
b) ( ) L
1
vv (amarelado)
x ( ) Linhagem normal
c) ( ) Linhagem normal
x ( ) L
2
vv (amarelado)
d) ( ) L
2
vv (amarelado)
x ( ) Linhagem normal
e) ( ) F
1
do cruzamento a
x ( ) F
1
do cruzamento d
f) ( ) F
1
do cruzamento d
x ( ) F
1
do cruzamento a
Genitor feminino Genitor masculino
1. Galho branco Galho verde
2. Galho verde Galho branco
3. Galho variegado Galho branco
4. Galho branco Galho variegado
11. Um pesquisador descobriu uma planta de cebola macho-estril em sua plantao.
Como proceder para verificar se aesterilidade masculina decorrentede genes nucleares
ou citoplasmticos?
12. Supondo que a macho esterilidade referida no problema 11 seja decorrente de um
gene mitocondrial, como proceder para introduzir esse gene emumalinhagemque ser
usada na produo de hbridos, de modo que ela mantenha as mesmas caractersticas
da linhagemoriginal?
394
Nesse heredograma os animais identificados coma cor escura possuemuma anomalia
respiratria. Qual seria sua hiptese para o controle gentico dessa anomalia?
13. Uma das causas de macho-esterilidade no milho decorrente deumgene mitocondrial.
Existe tambmumalelo dominante (Rf) nuclear, que restaura a fertilidade, isto , plantas
Rf so frteis independentes do citoplasma.
a) Qual a constituio gentica de uma planta que ao ser autofecundada produz 75%
de descendentes frteis e 25% de descendentes macho-estreis?
b) Qual a constituio gentica de uma planta que usada como genitor masculino e que
cruzada comuma fmea macho-estril, os descendentes so sempre macho-frteis?
c) Estabelea um esquema de cruzamentos para a produo de milho hbrido
duplo, utilizando a macho-esterilidade.
d) Se for obtida uma linhagempromissora, como proceder para torn-la macho-estril?
Uma vez obtida essa linhagem,como mant-la?
14. Quais seriamos seus argumentos, para justificar que uma determinada anomalia em
sunos, seja controlada por genes citoplasmticos, a partir da anlise de uma rvore
genealgica?
15. Considere o seguinte heredograma para uma famlia de bovinos:
395
Biotecnologia
17.1 INTRODUO
Biotecnologia definida como qualquer tcnica que utilize organismos vivos ou
suas partes, para fazer ou modificar produtos, melhorar plantas ou animais, ou desenvolver
microrganismos para usos especficos. De certo modo, o homemtem usado tcnicas
biotecnolgicas desde o incio da agricultura, h cerca 12.000 anos. Os primeiros
agricultores, por exemplo, no processo de domesticao das plantas, foramcapazes de
desenvolver estratgias para manipular as plantas e seu ambiente, visando a maximizar a
utilizao da energia solar e transform-la em gros, forragens e fibras. Do mesmo
modo, quando os nossos antepassados iniciaram a produo de bebidas via
microorganismos que promoviama fermentao, estavamevidentemente empregando
uma tcnica biotecnolgica.
Entretanto, comos conhecimentos obtidos nas ltimas dcadas, especialmente em
biologia molecular, vislumbrou-se a aplicao de novas tcnicas biotecnolgicas na obteno
de novos produtos que o homemantes no imaginava. Por exemplo, muitos cruzamentos
que anteseramconsiderados pura ficocientfica hoje j semostramperfeitamente exequveis.
Neste tpico, pretendemos fazer um relato sucinto sobre algumas tcnicas
biotecnolgicas. Aquelesque desejareminformaes adicionais podemrecorrer, entre outras,
s seguintes literaturas: Phillips e Vasil (1994); Lewin (2008). Odirecionamento adotado
ser o de mostrar a importnica e, principalmente, algumas aplicaes das tcnicas da
biotecnologia para a agropecuria.
17.2 TCNICASBIOTECNOLGICASAPLICADASAOSVEGETAIS
17.2.1 Cultura de tecidos
Vimos, no Captulo 4, que uma clula aps a mitose origina duas clulas filhas coma
mesma constituio gentica. Foi tambmcomentadoque todas as clulasdo tecido somtico
de uma planta ou animal so oriundas da mitose. Assimsendo, toda clula do organismo
totipotente, ou seja, potencialmente capaz de originar umindivduo idntico quele de
onde foi retirada. O princpio bsico da cultura de tecidos a aplicao da totipotncia
17 BIOTECNOLOGIA
396
celular, isto , regenerar plantas a partir de clulas isoladas no diferenciadas, ou a partir de
rgos e tecidos vegetais. Tais clulas, colocadas emummeio apropriado, podemdividir-se
indefinidamente e at diferenciar-se, o que ir propiciar a regenerao de parte da planta ou
ento da planta inteira e, dessa forma, milhares de indivduos podemser produzidos a partir
de uma ou algumas clulas de ummesmo clone.
Como pode ser facilmente imaginado, a culturade tecidos umaforma de multiplicao
assexuada, semelhante adotada pelos agricultores h muitos anos, visando propagao
de determinadas plantas, tais como cana-de-acar, mandioca ou batata. A diferena
fundamental que a cultura de tecidos, como j mencionado, possibilita a multiplicao do
indivduo a partir de uma nica clulaou de umpequeno nmero de clulas. Dessa forma, ela
uma importante ferramenta, no s na gentica e no melhoramento deplantas como tambm
pode auxiliar eminmeras outras reas da agricultura.
Aprincipal dificuldade da cultura de tecidos identificar, para cada espcie, qual o
meio de cultura mais apropriado para que ocorra a diviso celular e, sobretudo, para ligar
e desligar os genes, no momento e no local apropriado, visando diferenciao celular e,
consequentemente, a obteno de uma planta idntica quela de onde a clula ou o conjunto
de clulas foi retirado. Para algumas espcies como fumo, batata, banana, morango e outras,
esses meios de cultura j so bemconhecidos. Algumas aplicaes sero apresentadas a
seguir:
17.2.1.1 Limpeza Viral - Cultura de Meristema
Umdos aspectos da cultura de tecidos que temfornecido as maiores contribuies a
limpeza de cultivares infectadas comvrus. Plantas de propagao vegetativa como batata,
morango, abacaxi entre outras, aps alguns cultivos simultneos, comeama apresentar
reduo de produtividade. Aprincipal razo a ocorrncia de algumas viroses que so
transmitidas por meio dos tubrculos oumudas. Aincidncia dessasviroses cresce rapidamente
e a cultura torna-se invivel se continuar sendo utilizado aquele propgulo anterior. Aopo
promover uma limpeza de vrus para reiniciar o processo. Acultura de tecidos contribui
enormemente para essa limpeza. Para isso, preciso utilizar de uma minscula parte do
meristema daplanta, tecido responsvel pelocrescimento do vegetal, masainda no totalmente
diferenciado. As razes pelo qual a cultura de meristemas permite a obteno de plantas livre
de vrus, no est completamente elucidada. Acredita-se que, em razo da rapidez da
multiplicaodasclulas meristemticas, aspartculasvirais no consegueminfectar tais tecidos.
Almdo mais, o sistema vascular dessas regies no seencontra completamente desenvolvido,
o que dificulta o transporte do vrus para essas partes. necessrio salientar que, no Brasil,
algumas empresas j esto utilizando eficientemente essa tcnica emalgumas culturas, como
batata, morango, abacaxi e banana.
397
Biotecnologia
17.2.1.2 Multiplicao Clonal - Cultura de Gemas ou Segmentos
Nodais
Uma outra aplicao da cultura de tecidos que temsido intensamente pesquisada no
Brasil a multiplicao de plantas emgrande escala. Umdos setores que estmais desenvolvido
oda cultura do eucalipto. Nesse vegetal, a multiplicao via semente, que o processo ainda
empregado, temcomodesvantagema grande desuniformidade nos povoamentos florestais. O
eucalipto de polinizao cruzada e, provavelmente, deve possuir grande parte dos locos em
heterozigose. Assim, a reproduo sexuada contribui para uma enorme variabilidade gentica.
As empresas que produzemcelulose, carvo ou at mesmo maderia serrada, desejamque as
rvoressejamasmaisuniformespossveis.Asrazesparasedesejar auniformidadesoinmeras,
uma delas a maior produtividade e a facilidade de transporte.
Para reduzir a variabilidade nos povoamentos florestais so selecionadas rvores
matrizes, que so multiplicadas por macroestaquia, isto , brotaes que surgemna base das
rvores matrizes cortadas. Uma das desvantagens da macroestaquia a baixa taxa de
multiplicao, isto , conseguem-se apenas 200 a 400 mudas a partir de uma planta. Assim,
foi necessrio desenvolver tecnologias para tornar o processo mais eficiente. Esses processos
foramdesenvolvidospor pesquisadores brasileiros, apartir dos anos oitentado sculo passado
(Assis e Mafia, 2007). Inicialmente, tentarama micropropagao in vitro. O processo
mostrou-se tecnicamente vivel, mas economicamente invivel. Apartir desse conhecimento
desenvolveramduas novas estrtegias, a microestaquia e a miniestaquia. Adiferena bsica
da miniestaquia emrelao ao sistema tradicional (macroestaquia), diz respeito produo
de brotos emplantas de menor porte, obtidas emminijardins clonais.
Adiferena entre microestaquia e miniestaquia que na primeira as microestacas so
obtidas a partir da micropropagao invitro, enquanto na miniestaquia, ocorrememplantas
dos minijardins clonais. As miniestacas, so coletadas dos pices caulinares da prpria estaca
enraizada pelo mtodo convencional de macroestaquia (Assis e Mafia, 2007).
17.2.1.3 Manuteno de Germoplasma - Cultivo em Meio Mnimo
Tambm tem sido utilizada a cultura de tecidos para a manuteno de bancos de
germoplasma. Essa tcnica especialmentepromissora para aquelas espciescuja reproduo
predominantemente assexuada. Nesse caso, as plantas so perpetuadas em tubos de
ensaio ocupando umespao muito pequeno. Almdisso, a movimentao de germoplasma
mais fcil e commenor risco de introduo de patgenos, uma vez que, no sistema invitro,
a ocorrncia dedoenas praticamente nula. No Centro Internacional deAgriculturaTropical
(CIAT), situado na Colmbia, o germoplasma de mandioca temsido mantido dessa forma, o
mesmo acontecendo no caso da batata no Centro Internacional de La Papa (CIP), situado
no Peru. Tambm, no Brasil, na Embrapa Recursos Genticos e Biotecnologia ou Centro
398
Nacional de Recursos Genticos (CENARGEN), da EMBRAPA, essa tcnica est sendo
implantada coma mesma finalidade.
17.2.1.4 Obteno de Haplides Cultura de Anteras e vulos
Muitas vezes emprogramas de melhoramento h necessidade de se obteremlinhagens,
ou seja, indivduos coma maioria dos locos emhomozigose. Como j foi comentado, para
se ter umgentipo coma maioria dos locos emhomozigose, necessrio que as plantas
sejam submetidas a sucessivas autofecundaes, normalmente por seis a oito geraes.
Portanto, esse umprocesso demorado. Para reduzir esse tempo, pode-se utilizar da cultura
de anteras ou dos vulos. Nas espcies diplides os gros de plen e a oosfera so clulas
haplides, emrazo da ocorrncia da meiose. Sendo assim, por intermdio da cultura desses
rgos, so obtidas plantas haplides, que, aps seremsubmetidas a umtratamento com
colchicina, tero o nmero de cromossomos duplicado, restabelecendo a condio diplide.
Essas plantas assimobtidas sero homozigticas para todos os locos. Especialmente para
aquelas espcies, cujo ciclo reprodutivo longo, essa tcnica muito promissora.
Na literatura, so encontradas referncias sobre o emprego da cultura de anteras com
relativo sucesso emalgumas culturas, especialmente arroz, trigo e fumo. No melhoramento
do trigo, vemsendo utilizada a cultura de oosfera ncleo reprodutivo do saco embrionrio
visando obteno de plantas haplides. Oprocedimento utilizado nesse caso consiste em
polinizar plantas de trigo complen de milho que, evidentemente, no fertiliza a oosfera,
entretanto, estimula o desenvolvimento do embrioa partir da oosfera, permitindo a obteno
de planta haplide.
Oemprego de duplo haplides (DH) temdespertado grande ateno na cultura do
milho. Como foi visto, no captulo 12, na obteno do milho hbrido, necessrio de sete a
oito geraes de autofecundao para a obteno de linhagens. Essas so cruzadas
posteriormente visando obteno dos hbridos comerciais. Especialmente as grandes
empresas multinacionaisrealizammilhes deautofecundaespor ano. Para acelerar o processo
e reduzir ocusto, esto desenvolvendo DH. Oprocesso foi facilitadoporque foramidentificados
genes que induzema ocorrncia de plantas haplides. Essa induo, pode ser tanto do lado
feminino como masculino. Umdesses genes indutor foi encontrado na linhagemStock 6, que
indutor do lado materno (Zhang et al., 2008). Quando a planta que se deseja obter o
haplide polinizada com poln da Stock 6, de 1 a 2% dos descendentes so haplides.
Para identificar as plantas haplides das normais utilizado umalelo marcador. Por exemplo,
o genitor feminino possui o gentipo aleurona incolor, emdecorrncia de umalelo recessivo
do gene R-navajo. J, o genitor masculino, a Stock 6, possui o alelo dominante, Rnj que
confere a cor roxa na semente. Aps a fertilizao, toda a semente, que for incolor, rnj
porque ela foi produzida sema interferncia do gameta Rnj do indutor. Portanto, haplide.
Todas que foremroxas (Rnj rnj), so diplides.
399
Biotecnologia
As plantas haplides posteriormente tero seus cromossomos duplicados, ainda bem
jovens, utilizando, por exemplo, colchicina. Obtendo-se assim, indivdiuos completamente
homozigticos (DH). As empresas esto investindo muito nessa tecnologia, obtendo alguns
milhares de plantas DHpara acelerar o programa de obteno de hbridos.
17.2.1.5 Obteno de Hbridos Interespecficos - Cultura de Embries
Para solucionar alguns problemas, tais como: tolerncia a patgenos ouinsetos e estresse
ambiental, omelhorista, no encontrando variabilidadedentro da espcie, obrigado a recorrer
aos cruzamentos interespecficos. Como j foi mencionado (Captulo 15) existembarreiras
que podemdificultar o sucesso desses cruzamentos. Essas barreiras so emgrande nmero
do tipo ps-zigticas, e costumamser superadas por meio da tcnica de cultura de embries
in vitro. Acultura de embries vem sendo usada h longo tempo, envolvendo espcies
relacionadas. Existem relatos de mais de 80 hbridos interespecficos ou at mesmo
intergenricos obtidos por esta tcnica.
17.2.1.6 Seleo in vitro Variao Somaclonal
Como j foi mencionado, o uso da cultura de tecidos para a propagao clonal
baseado na pressuposio de que os tecidos permanecemgeneticamente estveis quando
retirados da planta matriz e colocados emmeio de cultura. Essa suposio vlida quando
a multiplicaoocorre por meio do desenvolvimento de gemas axilares oubrotos adventcios,
retirados diretamente da planta matriz. Entretanto, emcasos emque a formao de brotos
induzida a partir de calos, plantasaberrantes so frequentemente produzidas.Avariabilidade
fenotpica observada entre clulas e plantas regeneradas - variao somaclonal - no pode
ser assumidacomo resultante apenas de causas genticas. Respostasfisiolgicas s anomalias
ambientais bemcomo alteraes epigenticas podemtambmcontribuir para tal variabilidade.
Eventos epigenticos refletemalteraes na expresso gnica, que so relativamente estveis,
podendo persistir por meio da mitosee se expressar nasclulas filhas. Entretanto, emcontraste
comalteraes fenotpicas, decorrentes de causas genticas, aquelas resultantes de fatores
epigenticos tendema no se expressar emplantas regeneradas ou sua prognie.
Avariabilidade entre plantas regeneradas de cultura de calos aproximadamente dez
vezes maior que entre plantas desenvolvidas de gemas cotiledonares. Aimportncia desse
fato que a abundncia de variabilidade decorrente da cultura detecidos fornece perspectivas
de seleo para fentipos novos. Almdo mais, o tratamento commutagnicos qumicos ou
fsicos pode aumentar ainda mais a variabilidade existente, permitindo o aparecimento de
mutantes compotencialidades agronmicas.
Para isolar esses mutantes, tcnicas aplicveis aos microrganismos devemser utilizadas.
Por exemplo, seleo para resistncia aHelminthosporiumsacchari foi realizada emplantas
de cana-de-acar regeneradas a partir de calos provenientes de suspenso de clulas
400
cultivadas emmeio de cultura contendo a toxina do fungo. Generalizando esse procedimento,
pode-se dizer entoque a incorporao nomeio de cultura de substncias txicas ouinibidoras
do crescimento, permite o desenvolvimento apenasde poucas clulas resistentesda populao,
as quais podemser regeneradas, dando origema uma planta mutante (Figura 17.1).
FIGURA 17.1. Representao esquemtica de um procedimento geral para seleo de
mutantes em cultura de tecidos vegetais. (Adaptado de Chaleff, 1983).
17.2.2 Obteno de hbridos somticos - fuso de protoplastos
D-se o nome de protoplasto parte viva da clula. Emoutras palavras, protoplasto
uma clula que temsua parede removida. J em1910, foi constatado que protoplastos
mantidos emsolues comsais de clcio podiamentrar emcontato e, eventualmente, fundir
seus contedos. Esse processo denominado fuso de protoplastos.
401
Biotecnologia
Com o desenvolvimento de mtodos enzimticos eficientes para o isolamento de
protoplastos, na dcada de 70dosculo passado, grandes quantidadestornaram-se disponveis
para estudosde fuso. Essa fuso se inicia por meio da adeso de membranas de protoplastos
adjacentes. Nos pontos de contato entre as membranas ocorre dissoluo das mesmas, o
que permite a mistura dos dois citoplasmas comos dois ncleos - dicrion.
Um dicrion chamado homocaricito se os dois ncleos so idnticos e
heterocaricito se os dois ncleos so geneticamente diferentes. Numerosos compostos
qumicos ou condies fsicas tmsido testados para induzir a fuso de protoplastos, mas o
maior avano ocorreu coma descoberta do composto polietileno glicol - PEG-, que tem-se
mostrado eficiente paratodas as espcies vegetais. Uma outra tcnica eficiente a eletrofuso,
pela qual a fuso de protoplastos se d numcampo eltrico desuniforme por meio de um
pequeno pulso de corrente eltrica.
Adescoberta de que protoplastos podemse fundir comrelativa facilidade propiciou o
desenvolvimento de uma metodologia gentica que recebeuo nome dehibridaosomtica.
Aimportncia da hibridao somtica que espcies sexualmente incompatveis podemse
recombinar por meio da fuso de protoplastos, possibilitando assim, o surgimento de novas
combinaes genticas. Deve ser salientadoque combinaes entre genomas no aparentados
so regularmente seguidas de eliminao de cromossomos dos genitores, oque impede muitas
vezes a formao de hbridos. Para espcies relacionadas, geralmente a eliminao de
cromossomos parcial, de modo que a introduo de certas caractersticas genticas se
torna possvel. necessrio enfatizar que a eliminao dos cromossomos aleatria, o que
torna muito difcil o direcionamento do processo visando a incorporar somente aqueles
cromossomos de maior interesse.
Existem muitos exemplos citados na literatura de hbridos somticos. Um caso
interessante o hbrido entre a batata - Solanum tuberosum ssp tuberosum, 2n = 48 - e
tomate Solanum lycopersicum, 2n = 24. Essas duas espcies pertencem famlia
Solanaceae, mas no so sexualmente compatveis. Em1978, hbridos somticos foram
obtidos mediante a fuso de protoplastos de clulas di-haplides de batatacomclulas foliares
de tomate. Algumas plantas formaramestoles parecidos comtubrculos, mas nenhuma
produziufrutos.
Hbridos somticos tais como esses produzidos entre batata e tomate no possuem
valor imediato. No entanto, elesso o ponto departida para umfuturoesquema de introduo
de genes e formao de novas combinaes genticas. Evidncias tm-se acumulado,
principalmente embatatas, indicando que translocaes cromossmicas so frequentes em
plantas regeneradas deprotoplastos, permitindo, desse modo, que segmentos cromossmicos
de uma espcie sejamintroduzidos emoutra espcie diferente. Acredita-se que, numfuturo
prximo, a fuso de protoplastos oferea oportunidade para a criao de hbridos somticos
402
entre espcies afins. Desse modo, cultivares comerciais de batata, as quais no se cruzam
com muitas espcies do gnero Solanum, poderiam receber, por exemplo, genes de S.
etuberosa, que conferemresistncia ao vrus do enrolamento das folhas.
No Brasil, a tcnica de fuso de protoplastos temsido empregada comsucesso em
alguns microorganismos, como foi o caso do melhoramento gentico do fungoMetarhizium
anisopliae, utilizadono controle biolgico deinsetos. Tambmno melhoramento de fruteiras,
especialmente citrus ela temsido avaliada. Carvalho et al. (2007) procurou obter hbridos
interspecficos entre tangerina (Citrus reticulata) e toranja (Citrus grandis), visando
obteno de novos porta-enxertos. Como fonte de protoplastos foramutilizadas suspenses
celulares embriognicas e folhas jovens de seedlings. Foramregeneradas 17 plantas com
fentipo bemdistinto de ambos os genitores. Essa uma estratgia que se espera os melhores
resultados, pois realizada a fuso de protoplastos de espcies bemsemelhantes. Nessa
condio, a rejeio deve ser menor, e haver chance de recombinao entre os cromossomos
das duas espcies. Contudo, o processo nodeixa de ser aleatrio, mistura-se os cromossomos
na esperana de que apareamboas combinaes.
Outro exemplo de sucesso dos geneticistas brasileiros foi obtido como fumo. Ofumo
cultivado pertence a espcie Nicotiana tabacum suscetvel ao nematoide Meloidogyne
javanica e no se conhece fonte de resistncia dentro da espcie. J plantas da espcie
Nicotiana repanda apresentam resistncia a esse nematoide. Contudo, as duas espcies
no se crusampelo mtodo tradicional. Por meio da fuso de protoplastos foi possvel obter
plantas bemsemelhantes a tabacume resistentes ao nematoide M. javanica.
17.2.3 Tecnologia do DNA recombinante - transgnicos
Como sabemos, na natureza, os seres vivos so organizados emgrupos distintos e o
menor nvel de organizao a espcie. Vimos no captulo sobre Evoluo que as espcies
se mantmindividualizadas, pois os indivduos de uma mesma espcie s se cruzamentre si
deixando descendentesfrteis e viveis, nohavendo, portanto, troca dealelos entre indivduos
de espcies diferentes.
Utilizandotcnicas especiais, especialmente culturadeembrio, alguns cruzamentos entre
indivduos deespcies diferentesforamrealizadospelo homem. Contudo, aintroduo de genes
entreespcies norelacionadas, pertencentes agnerosdiferentes esvezesatreinosdiferentes,
s se tornou possvel a partir da dcada de setenta, por meio da manipulao da molcula de
DNA, constituindo uma nova rea da gentica que denominada de tecnologia do DNA
recombinanteouengenhariagentica. Comoresultado dessanovareadeatividades, tornou-
se possvel a criao de combinaes gnicas inexistentes na natureza e, principalmente, a
transferncia de genes entre espcies isoladas reprodutivamente, sendo produzidos os
transgnicos, tambmchamados de organismos geneticamente modificados(OGM).
403
Biotecnologia
Atecnologia dos transgnicos umbomexemplo, que uma nova tcnica surge a partir
de inmeros conhecimentos bsicos. Nesse caso particular, alguns deles comentados
anteriormente, tais como o trabalho de F. Griffth, em1928 eAvery, MacLeod e McCartyem
1944, mostrando que o DNAera o responsvel pela transmisso da informao biolgica. A
estrutura da molcula elucidada por Watson e Crick, em 1953, que foi a base de todo o
desenvolvimento da biologia molecular. Adescoberta das enzimas de restrio, por Arber em
1968, como ser comentado a seguir, corta o DNAempontos especficos. Pouco tempo
depois, em1973, Stanley, Chene Brownmostraramque era possvel, utilizando as enzimas
de restrio, isolar umgene e introduzi-lo emoutro organismo. Anteriormente, em1972, nos
EUA, Paul Bergconseguiu unir a sequncia do DNAde Escherichia coli do vrus Semius
pampiloma. Esse pode ser considerado o marco zero da era da tecnologia do DNA
recombinante. Oprimeiro exemplo, bemsucedido de umproduto comercial produzido foi a
insulina humana (BOX17.1).
As tcnicas utilizadas na produo de umtransgnico tem-se alterado ao longo do
tempo. Contudo, todas elas tmcomo princpioidentificar e isolar o gene da espcie doadora,
preparar esse gene e proceder sua transferncia para espcie receptora. Deve-se certificar
que ele seja transmitido para os descendentes de modo anlago aos demais genes e que a sua
introduo proporcionea vantagemesperada. Adicionalmente, temquepassar por umprocesso
regulatrio, antes de ser recomendado comercialmente.
BOX 17.1 PRIMEIRO CASO DE SUCESSO NA OBTENO DE UM PRODUTO
COMERCIAL VIA TECNOLOGIA DO DNA RECOMBINANTE: Insulina Humana
At as duas primeiras dcadas do sculo XX, a ocorrnia de diabetes era
normalmente letal. Opncreas interrompe aproduo de insulina. Nessacondio, mesmo
comjejume outras alternativas, ocorria aumento da glicose nosangue. Emconsequncia
havia diurese macia, desidratao, fraqueza profunda do organismo e fome. Isso ocorre
porque a insulina que transporta a glicose para dentro das clulas (armazena nutrientes).
Ainsulina foi descoberta em1921. As primeiras insulinas produzidas emescala
comercial eramretiradas de pncreas de bovino e suno. Embora ela solucionasse o
problemana maioriadosindivduos, algunsapresentaramalergia, sobretudoemdecorrncia
das impurezas. Na dcada dos anos sessenta, do sculo passado, as insulinas produzidas
erammais puras. Contudo, como crescimento da populao e o aumento dos casos de
diabetes, a demanda total por insulina dificilmente poderia ser conseguida por meio do
pncreas de animais mortos de sunos e bovinos.
404
17.2.3.1 Obteno de plantas transgnicas
Ser utilizado como referncia o processo que originou o primeiro transgnico com
enorme repercusso na agricultura, isto , a planta de soja tolerante ao herbicida glifosato,
tambmconhecido como roundup. O modo de ao do glifosato apresentado no BOX
17.2. Oprocesso foi apresentado comdetalhe por Padgette et al. (1995) e ser suscintamente
descrito a seguir. Aao do herbicida ocorre emuma enzima, a 5-enolpiruvil chiquimato-
3fosfato sintase(EPSPS). uma enzimaenvolvida na biossintese dos aminocidos aromticos
(tirosina, fenilalanina e triptofano). Oglifosato inibe a ao da EPSPS, impedindo a produo
dos aminocidos mencionados. Semeles, o indivduo morre. Assim, a ao desse herbicida
s ocorre nos vegetais; bactrias e fungos. Nos animais que no sintetizamesses animocidos
no h ao do herbicida. Nas plantas, a enzima EPSPS est localizada nos cloroplastos ou
plastdeos.
Foi constatado na natureza, que algumas bactriase at mesmo plantas como a petnia
possuambomnvel de tolerncia aoherbicida. Verificaram, por exemplo, que aAgrobacterium
sp. CepaCP4 tinha alta tolernciaao glifosato. Identificaramo gene que foi isolado e clonado,
utilizando as enzimas de restrio (BOX17.3).
Uma vez identificado e clonado, o gene foi preparado, engenheirado, utilizando a
expresso de Padgette et al., (1995). Para isso, o gene foi colocado emplasmdeo junto com
vrios outros genes ou regies do DNAde outros organismos que so indispensveis para a
transcrio e atuao do transgnico. Um desses genes o CTP, derivado da petnia e
produz umpeptdeo indispensvel ao trnsitoda enzima produzida. Issofoi necessrio porque
Uma das empresas farmacuticas envolvida na produo de insulina a Eli Lilly
and Company, emconjunto coma empresa de biotecnologia GenentechInc. que isolaram
os genes da insulina humana, e tiveram sucesso na obteno da insulina por meio da
tecnologia do DNArecombinante. Johnson (1982) ento vice-presidente da empresa
farmaceutica relatou o que foi realizado para a produo comercial. Os genes das duas
cadeias polipeptdicasque constituema insulinaforamintroduzidas emumcepa da bactria
Escherichia coli, denominada K-12. Essa bacteria passou a produzir as duas cadeiasA
e B e secret-las. Aps o isolamento e purificao as cadeias proticas Ae B foram
aglutinadas por meio de pontes de dissulfeto, in vitro, originando a insulina humana
transgnica. Osucesso do processo foi anunciado em6/09/1978. Demoroualgumtempo,
emdecorrncia de, sobretudo, alguns processos regulatrios para que ela fosse produzida
emescala comercial.
405
Biotecnologia
a sntese da enzima EPSPS ocorre no citoplasma e ela atua no cloroplasto e, portanto, deve
migrar para esse local. Semesse peptdeo de trnsito, ela no temcomo atuar. Almdo mais,
a construo gnica, tambmdenominada cassete de transferncia, continha ainda uma regio
promotora derivada do vrus do mosaico da couve-flor (CAMV). Semessa regio, no h
como a RNApolimerase transcrever o gene no hospedeiro. Outro segmento de DNAfoi o
NOS 3, a regio no traduzida do gene da nopalina sintetase, que uma marca de seleo
(BOX17.4), gene npt 11, que confere resistncia ao antibitico canamicina. Foi adicionado
tambma origemde replicao para se ter maior nmero de cpias do gene e o gene GUS,
gene reprter (BOX17.5). Esse ltimo gene codifica para -glucuronidase, conferindo a
cor azul nos tecidos que possuem o gene. Na Figura 17.2, apresenta-se o esquema do
cassete do gene que foi introduzido naplanta de soja transformada. Essecassete foi construdo
emumplasmdeo (PV-GMGT04) que foi mantido embactria.
FIGURA 17.2. Parte de como foi construdo o gene.
Uma vez obtida a construo gnica necessrio introduzi-l no hospedeiro. No
caso, a planta de soja. Isso pode ser realizado por meio de umvetor ou veculo do gene.
Existemvrios vetores (BOX17.6). No caso, foi empregado o processo de microprojtil,
ou acelerador de partculas ou biobalstica. Acultivar A5403 de soja foi empregada como
hospedeira. No foi relatado o nmero de projteis utilizados para inserir o gene no
cromossomo de clulas de tecidos embrionrios de soja. Provavelmente, foi umnmero
expressivo. Apresena do gene nos tecidos do hospedeiro pode ser constata pela ocorrncia
da cor azul no tecido, decorrente do gene GUS, mencionado como reprter, pois fornece
a notcia que o gene foi inserido.
Umtotal de 316 plantas de soja foramtransformadas no perodo de junho de 1990
a agosto 1991. Dessas, 14 plantas R
0
primeira gerao aps a transformao, foram
avaliadas emcasa de vegetao comrelao tolerncia. Uma dessas plantas originou a
prognie 40.3 - gerao R
1
- que apresentou o mais expressivo nvel de tolerncia. Essa
prognie foi selecionada e avaliada novamente, junto comoutras prognies. Aprognie
40.3 s produziu quatro sementes, que originaramas prognies na gerao R
2
, 40.3.1,
40.3.2, 40.3.3 e 40.3.4. Aprognie 40.3.2 se destacou e foi ento novamente avaliada e
cruzada, pelo mtodo convencional, comoutras linhagens comerciais visando introduo
do gene para outras linhagens (Figura 17.3). Essa planta 40.3.2 foi a genitora de todas as
plantas de soja, denominadas RR, resistentes ao Roundup cultivadas no planeta.
%
406
FIGURA 17.3. Como foi realizada a introduo do gene da resistencia ao roundup em soja.
Fonte: Padgette et al. (1995).
Eles fizeramposteriormente vrias anlises moleculares e verificaramque apenas parte
do cassete do gene permaneceu na planta 40.3.2. Aparte final do gene que continha o gene
de resistncia ao antibitico, por exemplo, foi perdida. Uma enorme sorte, pois facilitou o
processo de liberao comercial do transgnico obtido.
As vantagens que esse transgnico proporcionouno manejo da cultura da soja foram
enormes. As questes regulatrias atrasaramemmuito a liberao comercial da soja RRno
mundo. No Brasil, por exemplo, a liberao comercial ocorreu efetivamente apartir de 1998.
Contudo, o cultivo no foi possvel, emrazo de inmeras liminares judiciais que impediram
a liberao por vrios anos. Apartir do momento emque ocorreu a liberao comercial a
407
Biotecnologia
adoo foi muito rpida. J, em2009, mais de 16 milhes de hectares foramutilizados com
cultivares de soja resistentes ao glifosato.
Outras alternativas de obteno de plantas transgnicas esto sendo criadas. Oavano
no sequenciamento do DNAe estudo do genoma, tempermitido que inmeros genes sejam
identificados. Desse modo, o potencial de se utilizar transgnicos no futuro enorme. Uma
tendncia que temocorrido fazer construo gnica a partir do gene da prpria espcie. A
resistncia ao glifosato emmilho, por exemplo, mais recentemente temsido obtida desse
modo. Os geneticistas sequenciaramo gene da enzima EPSPS do milho e compararamcom
o mutante, toleranteao herbicida. Amudana normalmente ocorre emumoudois aminocido.
Desse modo, induzema mutao do gene isolado e o reintroduz na planta hospedeira.
BOX 17.2. O HERBICIDA GLIFOSATO
As plantasinvasoras, ouseja, todasas aquelas plantas diferentesda espcie cultivada,
esto entre os maiores problemas da agricultura emtodo mundo. Elas competem, coma
planta cultivada, emnutriente, luz e gua reduzindo a produtividade. Adicionalmente,
dificultammanejo, especialmente a colheita, de grande parte das plantas cultivadas. Entre
as alternativas decontrole, a mais utilizadapor inmeras razes soos herbicidas. Produtos
qumicos, normalmenteseletivos para planta cultivada. Umdos herbicidas demaior impacto
na agricultura em todo planeta o glifosato. Antes mesmo de se obterem plantas
transgnicas resistentes aoglifosato, ele j representavamais de 60%detodos os herbicidas
comercializados no mundo.
Oglifosato foi criado pela multinacional Monsanto, em1970 e obteve registro nos
Estados Unidos, em1974. Apatente j espirou em1991 e atualmente inmeras empresas
produzeme comercializamo glifosato. umherbicida que aplicado aps a emergncia
da planta invasora, sistmico e no seletivo, ou seja, mata todas as plantas. Por isso, o
seu uso antes do advento das plantas trangnicas, especialmente no Brasil, era nas reas
de plantio direto como dessecante, em plantios comerciais, especialmente de plantas
perenes emaplicaes direcionadas s plantas invasoras.
Ele atua no metabolismo de aminocidos aromticos emuma rota conhecida como
Chiquimato. Dessa forma, temao emtodas as plantas e microrganismos. Nos animais,
que no possuemessa rota de metabolismo de aminocidos, ele no atua. umcido
orgnico cujo nome N-fosfonometil glicina.
408
BOX 17.3. OQUESOENZIMAS DE RESTRIO?
So enzimas capazes de cortar o DNAempontos especficos.Assim, elas funcionam
como tesouras biolgicas. Cada uma capaz de reconhecer uma sequncia especifica do
DNA. As enzimas de restrio so denominadas emfuno do nome da bactria que a
possui como pode ser visto a seguir.
Cada enzima, ao reconhecer uma sequncia especfica de DNA, realiza o corte da
sequncia na posio indicada pelas setas. Quando as duas cadeias do DNAso cortadas
Bactria Nome da Enzima Sequncia alvo no DNA
1
Arthrobacter luteus Alu I 5 A G
9
C T 3
3 T C
;
G A 5
Bacillus amyloliquefaciens Bam HI 5 G
9
GATCC 3
3 CCTAG
;
G 5
Escherichia coli Eco RI 5 G
9
AATTC 3
3 CTTAA
;
G 5
Haemophilus aegyptius Hae II 5 PuGCGC
9
Pi 3
3 Pi
;
CGCG Pu 5
Haemophilus aegyptius Hae III 5 GG
9
CC 3
3 CC
;
GG 5
Haemophilus haemolyticus Hha I 5 GCG
9
C 3
3 C
;
GCG 5
Haemophilus influenzae Hind II 5 GTPi
9
PuAC 3
3 CAPu
;
PiTG 5
Haemophilus influenzae Hind III 5 A
9
AGCTT 3
3 TTCGA
;
A 5
Haemophilus
parainfluenzae
Hpa I 5 GTT
9
AAC 3
3 CAA
;
TTG 5
Haemophilus
parainfluenzae
Hpa II 5 C
9
CGG 3
3 GGC
;
C 5
Serratia marcencens Sma I 5 GGG
9
CCC 3
3 CCC
;
GGG 5
Streptomyces albus Sal I 5 G
9
TCGAC 3
3 C AGCT
;
G 5
Xanthomonas oryzae Xor II 5 C GATC
9
G 3
3 G
9
CTAGC 5
409
Biotecnologia
na mesma posio, so produzidas extremidades rombudas e quando so cortadas em
posies diferentes, as extremidades geradas so chamadas de coesivas. As enzimas de
restrio reconhecemsequncias comdiferentes nmeros de pares de base, geralmente
de quatro a seis. Assim, as enzimas que reconhecemsequncias comquatro pares de
base cortamo DNAgenmico emummaior nmero de fragmentos menores e aquelas
que reconhecemsequncias de seis pares de base, cortam o DNA genmico em um
menor nmero de fragmentos maiores. Isso acontece porque se essas sequncias se
distribuissemao acaso no genoma, uma sequncia especfica comquatro pares de base
ocorreria a cada 256 pares de base, e uma sequncia especfica comseis pares de base
seria esperada no genoma a cada 4096 pares de base.
BOX 17.4. O QUE SO MARCAS DE SELEO?
Aps a obteno do cassete de transformao ele precisa ser clonado. Para isso,
ele inserido emumplasmdeo que se multiplica geralmente emE. coli. Nessa etapa, a
marca de seleo permitir a clonagemsomente das E. coli transformadas.
Quando se realiza a transferncia de umgene para uma populao de clulas ou
de protoplastos de uma espcie receptora, necessrio selecionar somente as clulas
que foram transformadas. Tais clulas so, ento, cultivadas em meios de culturas
apropriadas para regeneraremapenas as plantas transformadas. Aidentificao das clulas
transformadas feita por meio da marca de seleo. As mais comumente usadas so
genes para resistncia aos antibiticos, como a canamicina e, mais recentemente,
principalmente herbicidas. Quandose adiciona o DNArecombinante para a transformao
das clulas receptoras, aquelas efetivamente transformadas iro expressar resistncia
canamicina ou herbicida, a qual causar a morte das outras clulas no transformadas.
410
BOX 17.5 - O QUE GENE REPRTER?
Quando se realiza a transferncia de genes entre espcies, umteste essencial
verificar se a espcie receptora transformada est expressando o gene de interesse, No
entanto, a transformao feita emclulas isoladas ou emtecidos embrionrios, os quais
devem regenerar plantas. Assim, imprescindvel checar se eles esto realmente
transformados, para, emseguida, proceder regenerao de plantas.
Para contornar essa dificuldade vemsendoutilizado umgene reprter, que codifica
para uma enzima, facilmente detectada e que no um produto natural da planta
transformada. Portanto, o gene reprter ligado junto como gene de interesse, e ambos
so regulados pelo mesmo promotor constitutivo. Umdos genes reprteres o gene
GUSquecodifica a enzima glucuronidase, cuja expresso pode ser facilmente detectada
mesmo emuma nica clula, bastando, para isso, a adiona clula ou tecido do substrato
da enzima que, aps metabolizado, produz uma substncia que se cora de azul. Portanto,
constatando-se a expresso do gene reprter, deduz-se que o gene de interesse tambm
deve estar se expressando e pode-se ento promover a regenerao da planta que dever
expressar o gene de interesse.
BOX 17.6 - VETORES E SUA APLICAO NA TECNOLOGIA DO DNA
RECOMBINANTE.
Atransferncia dos genes para o interior do hospedeiro realizada por meio de
vetores. Esses vetores podemrealizar a transferncia indireta ou direta.
Transferncia indireta
Umdosprocedimentos de transferncia degenes para plantasa partir dousodeuma
bactria, a Agrobacterium tumefaciens, por meio de seu plasmdeo chamado de Ti. O
plasmdeo semelhante a um pequeno cromossomo, e ocorre na bactria alm do seu
cromossomo normal. geralmente circular, autnomopara se replicar eportador de alguns
genes. Arazopara o usodo plasmdeo Ti comovetorde genes emengenharia gentica,
porque j se sabia da capacidade da Agrobacteriumcausar galhas nas dicotiledneas em
geral. Almdisso, a formao de galha ocorre mesmo aps a bactria j estar ausente do
tecido comsupercrescimento. Isso ocorre porque o plasmdeo possui umfragmento de
DNA(DNAT) comcerca de 23kb, que possui nas suas extremidades uma sequncia de
bases que so reconhecidas por enzimas que realizama sua incorporao no cromossomo
%
411
Biotecnologia
da planta. Como o DNATpossui genes para fitohormnios, eles continuamestimulando o
supercrescimento do tecido, mesmo na ausncia da bactria. No entanto, os genes para
fitohormniospodemserretiradosdoDNAT, eoplasmdeoresultantecontinuacomhabilidade
paraintegrar-seaocromossomodaplanta, pormseminduziraformaodegalha. Esseplasmdeo
artificial, ditodesarmado, vendidonocomrcioepodeser utilizadocomovetor degenes.
Para se fazer transferncia de genes utilizando o plasmdeo Ti desarmado, em
primeiro lugar realiza-se a construo do gene de interesse, inclundo stiospromotor e de
termno de transcrio e os genes para marca de seleo e reprter. Alm disso, nas
extremidades desse gene de interesse, adiciona-se umligador sinttico, que reconhecido
por uma enzima de restrio, por exemplo aEco RI. Emseguida, o plasmdeo Ti circular
linearizado, utilizando-se a mesma enzima de restrio. Quando se misturar ao gene
construdo com o plasmdeo linearizado, eles se ligaro por meio das extremidades
coesivas, formando, agora, umplasmdeo Ti como gene integrado. Se esse plasmdeo
for colocado na A. tumefaciens e, emseguida, a bactria for usada para infectar a planta
que queremos transformar, o plasmdeo recombinante ir integrar-se no cromossomo
vegetal de algumas clulas juntamente como gene de interesse, produzindo assimalgumas
clulas transformadas. Quando essas clulas foremmultiplicadas emummeio de cultura,
sero produzidos calos, dos quais sero regeneradas plantas transformadas.
Umdos problemas da A. tumefaciens a sua incapacidade de infectar algumas
dicotiledneas e quase todas as monocotiledneas, tornando-se assimumvetor limitado
para uso emapenas algumas espcies de dicotiledneas.
Transferncia direta
Nesse caso, a construo gnica colocada no DNAdentro de clulas intactas,
com parede celular. Entre os procedimentos, um dos que vm sendo mais usado a
biobalstica, tambmdenominado canho de genes.
Abiobalstica realizada por meio de umequipamento que realiza umtiro com
esferas de ouro ou de tungstnio, com um dimetro de cerca de 2mm. Para isso, o
aparelho usa ar comprimido, o que imprime uma alta velocidade nas esferas que atingem
o tecido vegetal a ser transformado - normalmente embries imaturos - atravessando-os,
e so coletadas emumanteparo. Para isso, prepara-se umasoluo contendo espermidina
e cloreto de clcio, que auxilia na adeso do DNAemtorno das partculas. Emseguida,
elas so atiradas, atravessando embries imaturos ou outro tipo de tecido, no trajeto,
deixamo DNAno interior de algumas clulas. Uma pequena porcentagemdas clulas
atingidas pelos microprojteis integramo gene nos cromossomos.
412
17.3 TCNICAS BIOTECNOLGICAS APLICADAS AOS ANIMAIS
DOMSTICOS
17.3.1 Cultura de Tecidos Animais. Emprego de Clulas Tronco
As clulas tronco (CT) a semelhana das clulas meristemticas dos vegetais, so
clulas somticas indiferenciadas e totipotentes. Aateno nesse tipo de clulas, nos ltimos
anos temsido enorme pelas possibilidades teraputicas, tanto no homemcomo emoutros
animais (Okamoto e Moreira Filho, 2004; Del Carlo et al., 2009). As CT podemser de
vrios tipos. Contudo, elas podemser agrupadas emclulas tronco embrionrias e clulas
tronco somticas. O emprego de clulas tronco embrionrias emhumanos temgerado
muita controvrsia, sobretudo, no que se refere aos aspectos ticos (Del Carlo et al.,
2009).
As perspectivas do emprego dessas clulas, tanto na soluo de problemas de sade
humana, como de outros animais domsticos enorme. Contudo, conforme destacado por
Del Carlo et al. (2009), ainda no h resultados conclusivos a respeito do seu emprego
especialmente emhumanos. As pesquisas bsicas tmsido realizadas comanimais modelos.
Essas pesquisas tmpossibilitado testes de drogas invitroemalguns animais.
17.3.2 Clonagem de Animais
Apalavra clone deriva do grego klon e foi criada para denominar indivduos que se
originamde outros por reproduo assexuada (Azevedo et al., 2009). Esse processo at
recentemente era restrito aos vegetais. Emmamferos, ocorre naturalmente, umtipo de clone,
que so denominados de gmeos idnticos ou univitelinos. Ocorre, quando o embrio no
incio dodesenvolvimentosofre umadiviso, originando dois oumaisindivduos geneticamente
iguais.
A perspectiva de obter vrias cpias de um animal surgiu a partir da obteno da
ovelha Dolly, por meio da clonagemde uma clula somtica de umanimal adulto (Wilmut et
al., 1997). Atcnica consiste emtransferir o ncleo de clulas do tecido mamrio de uma
ovelha adulta, para o vulo semncleo da me de aluguel (receptora). Omaterial resultante
foi implantado emoutra fmea. Ataxa de sucesso foi pequena, obtiveramumnico animal em
277 tentativas. Esse trabalho, gerou enorme discusso, coma participao intensa da mdia
sobre os aspectos ticos, sobretudo, a respeito da possibilidade de se ter clones humanos.
Utilizando procedimento semelhante foramobtidos clones de vrios outros animais. Inclusive
no Brasil, a Embrapa, produziu o primeiro clone de bovino, a bezerra Vitria. Oprocesso foi
semelhante ao de Dolly, exceto que ao invs de utilizar o ncleo de uma clula adulta, retiram
o ncleo de clulas embrionrias de cinco dias (Figura 17.4).
Oemprego da clonagemanimal temalgumas perspectivas beminteressantes (Martinez
et al., 2000 eAzevedo et al., 2009). Uma delas, a mais propalada seria a multiplicao em
413
Biotecnologia
grande escala de animais, por exemplo, uma vaca comprovadamente de grande produo
leiteira. Desse modo, aumenta a taxa de ganho gentico. Teepker e Smiter (1989) mostraram
teoricamente que a seleo de clones, pode propiciar ganhos que necessitariamde 15 a 17
anos se fossemutilizados os testes de prognies tradicionalmente utilizados. Entretanto, a
escolha do animal para ser multiplicado no pode ter erro. Se o carter for de baixa
herdabilidade o erro ocorre e pode ser grande. Por isso, o emprego de clone para acelerar o
melhoramento gentico no aconselhvel (Martinez et al., 2000).
Existem outras perspectivas dos clones. Uma delas a multiplicao de animais
transgnicos. Emrazo do ao alto custo de obteno de umanimal transgnico, obter vrias
cpias por meio de clones mais vantajoso economicamente. Esse interesse, ao que parece,
ir seconcentrar na obteno deanimais transgnicos cominteresses farmacuticos (Azevedo
et al., 2009).
FIGURA 17.4. Esquema do processo de obteno da ovelha Dolly. A- Ovelha com o fentipo
desejvel. B So isoladas as clulas do bere. C Ovelha com o fentipo no necessariamente
desejvel me substituta. D Da clula ovo retirado o ncleo. E Fuso das clulas, apenas
o ncleo, do bere mais clula embrionria semo ncleo. F Embrio em desenvolvimento com
o ncleo da ovelha desejvel que ir crescer e se desenvolver na me substituta.
414
17.3.3 InseminaoArtificial
Ao que tudo indica quemaplicou a tcnica pela primeira vez foi ummonge italiano,
Lazro Spallanzani, em1779, que aplicou a tcnica emumcachorro. Durante o sculo XX,
especialmente em bovinos, ela avanou substancialmente. A aplicao generalizada da
inseminao artificial (IA) tornou-se possvel graas ao desenvolvimento de mtodos para a
armazenagemde smenpor perodos prolongados. Esses mtodos envolvembasicamente
sua armazenagemsob temperatura muito baixa (-196C), utilizando para isso o nitrognio
lquido. Nessa condio, o smenpode ser conservado por umperodo quase que indefinido
sem perder a viabilidade. O uso da inseminao artificial tem sido considerado uma das
principais causas do aumento na produo de leite emmuitos pases. Nos Estados Unidos,
por exemplo, o rebanho leiteiro diminuiu, porma produtividade passou de 2.500kg de leite
por lactao para 6.500 kg nos ltimos quarenta anos. No Brasil, o uso da inseminao
artificial crescente. Porm, dado o tamanho do nosso rebanho, h umenorme potencial
para a sua utilizao. preciso salientar, contudo, que para a adoo da IAh necessidade
de melhoria das condies de manejo e da existncia de mo-de-obra qualificada para essa
operao.
Dentre as suas vantagens est a contribuio para acelerar o melhoramento gentico.
No caso da bovinocultura de leite a utilizao emgrande escala de touros comprovadamente
superiores, maior aproveitamento de reprodutores dealta qualidade. Umtouro, por exemplo,
pode produzir smenpara cobrir at 20.000 vacas por ano, enquanto, no sistema de monta
natural de, no mximo, 50. Ainseminao melhora o controle de doenas transmissveis
pela monta natural, entre essas doenas esto: Trichomonose e Vibroses; possibilita tambm
o controle reprodutivo dos animais muito mais eficiente; promove a reduo dos problemas
de partos dos novilhos por meio de touros commaior facilidade de parto; permite o emprego
de touros testadosa baixo custo, e possibilita a obteno de descendentesde umdeterminado
pai, mesmo aps sua morte.
Com relao a limitaes da inseminao artificial esto a falta de mo-de-obra
especializada, que no possibilita o emprego correto da IA. Nos bovinos, a maior limitao
na aplicao da IA a baixa eficincia na identificao dos cios das vacas (Martinez et al.,
2000). como j mencionado, no Brasil, o emprego da inseminao artificial crescente,
porma sua taxa de adoo ainda muito inferior ao de outros pases. Anecessidade de
assistncia tcnica especializada, onerando o custo de produo, inviabiliza sua adoo por
grande parte dos pecuaristas de menor poder aquisitivo.
17.3.4 Transferncia de Embries
Atransferncia de embries (TE) o processo que envolve remoo do embrio do
trato reprodutivo de uma fmea doadora e transferido para uma oumais fmeas receptoras.
415
Biotecnologia
Essa tecnologiafoi empregada pela primeira vez, no final do sculo XIX, emcoelhos. Contudo,
foi apenas em1949 que a transferncia foi avaliada no contexto dos programas de seleo
de animais (Rodrigues; Rodrigues, 2009). Oprimeiro bezerro obtido por meio da transferncia
de embries ocorreu nos Estados Unidos em1951. Embora tivesse algumsucesso a TE
ainda tinha srias restries. Foi s por volta de 1970 que a TE tornou-se comercial nos
EUAe Canad. No Brasil, foi utilizada comsucesso pela primeira vez em1979.
Em princpio, essa tcnica tem o mesmo objetivo da inseminao artificial, isto ,
aumentar o nmero de descendentes de umanimal comfentipos desejveis para vrios
caracteres. Apesar de se denominar transferncia de embrio, o que realmente se transfere
uma massa de clulas no diferenciadas resultantes das primeiras divises ocorridas logo
aps a formao do zigoto. Emsntese, a tcnica consisteemretirar o embriono incio do
desenvolvimento de uma vaca comexcelentes qualidades e introduzi-lo emoutra fmea, que
ir funcionar apenas como receptora para complementar o desenvolvimento do zigoto.
A associao entre a TE e a superovulao, isto , o tratamento da fmea com
hormnios visando produo de ummaior nmero de vulos - 8 a 10 por ovulao - ir
propiciar queumanimal geneticamente superior produza umenorme nmerode descendentes,
o que no normalmente possvel (Figura 17.5). Comentando a respeito da tecnologia
disponvel de transferncia de embries, Rodrigues; Rodrigues (2009) salientamque os
tratamentos supervulatrios apresentamresultados extremamentevariveis, independentemente
do preparado hormonal utilizado. Emmdia, so obtidas 12 estruturas por superovulao,
das quais so embries viveis, que aps a transferncia para as fmeas receptoras resultam
emcinco prenheses. Levando-se emconsiderao que as fmeas podemse superovular em
intervalos de dois meses, podemser obtidas emumano, 30 descendentes de uma doadora.
Atransferncia de embrio, por si s, no ummtodo de melhoramento gentico.
Ela no cria combinaes novas, mas simplesmente possibilita que fmeas consideradas
geneticamente superiores possam produzir um maior nmero de descendentes, o que,
evidentemente, pode contribuir para acelerar o processo de seleo no rebanho.
Alm da possibilidade de uma fmea de bovino, por exemplo, produzir vrios
descendentes por ano, a tecnologia temoutrasvantagens. Ocriador pode adquirir descendentes
de genitores superiores ainda no incio do desenvolvimento, eliminando o problema do
transporte de animais adultos a longa distncia. Uma vantagemadicional a reduo do
risco da introduo de algumpatgeno.
Transferncia de embries teve maior avano a partir da produo de embries in
vitro. Uma fmea de bovino dificilmente produz mais de oito bezerros durante sua vida.
Entretanto, estimado que cada ovrio, ao nascimento, possua 150 mil folculos que sero
utilizados na reproduo. Portanto, o potencial de descendentes muitas vez superiores ao
efetivamente realizado. Imaginaramento a possibilidade de aproveitamento de folculos de
416
fmeas comdesempenho superior emmaior intensidade. Para isso, inicialmenteeramcoletados
os ovrios nos matadouros, para coleta dos ovcitos. Em 1980, no Canad, iniciaram a
coleta dos ovocitos invivo. Apartir desses ovocitos realizada a fertilizao invitro (FIV).
Os embries produzidos passampor uma etapa de maturao para posterior implante nas
vacas receptoras. Essa tecnologia desenvolveu muito no Brasil, que atualmente a maior
usurio mundial da tcnica de produo de embries invitro.
FIGURA 17.5. Transferncia de embrio e superovulao em bovinos: A) vaca doadora de
alto valor gentico encontra-se no cio, dia 0; B) dez dias aps, estimulada a superovulao da
vaca doadora pela aplicao do hormnio estimulador folicular (FSH); C) de 2 a 4 dias aps a
aplicao do FSH sincronizado o ciclo estral da doadora e receptora pela aplicao em
ambos os grupos da droga prostaglandina; D) dez horas aps a manifestao do cio na doadora
feita a inseminao artificial, sendo normalmente realizadas duas comintervalos de 12 horas.
Sete dias aps, so coletados os embries, que sero transplantados para as vacas receptoras.
Essas iro completar o perodo de gestao.
417
Biotecnologia
17.3.5 Sexagem de Espermatozides e Embries
Umoutro anseio dos criadores, que temdespertado o interesse da pesquisa h longo
tempo, o desenvolvimento de uma tcnica que permita o controle do sexo do descendente
no momento da fertilizao. altamente desejvel ter no mercado smencontendo apenas o
cromossomo Xou Y, isto , para a produo s de fmea ou de macho, de acordo coma
necessidade dos criadores. Uma das tcnicas utilizada a identificao dos cromossomos
nos embries, via exame citolgico. Como essa operao s pode ser realizada aps 14 a
15 dias da fertilizao, isso reduz a probabilidade de sucesso na implantao desse embrio
na fmea receptora.
Uma das tcnicas mais promissoras a citometria de fluxo que permite a separao,
por meio da composiao do DNA, do gameta contendo o cromossomo XouY(Chastant-
Maillard e Druat, 2005). Segundo os autores, essa metodologia permite 90%de acerto. Ela
temsido utilizada predominantemente embovinos, mas o maior problema a fertilidade do
gameta ps-sexagem. Ela altamente dependente do processamento do smen. Pode-se
realizar tambm a sexagem de embries nos programas de transferncia de embries
(Deschamps et al., 2000), utilizado tcnica de PCR. Segundo os autores mencionados
anteriormente, a sexagemde embries simples e rpida. Amplifica-se regies especficas
do cromossomo Y. Os embries so biopsiados para retirar algumas clulas para a sexagem
e, enquanto a reao de PCR realizada, eles podemser mantidos emcultivo ou congelados,
para, posteriormente, seremimplantados nas fmeas receptoras. Abiopsia dos embries
ainda a etapa que merece maior ateno, e exige muita habilidade na operao.
418
PROBLEMASPROPOSTOS
1. Qual o significado de biotecnologia para os dias atuais?
2. Qual o princpio envolvido na cultura de tecidos? Qual a principal dificuldade para se
obter sucesso coma cultura de tecidos? Quando a cultura de tecidos funciona como
umprocesso de clonageme quando ela funciona como ummecanismo de gerao de
variabilidade que pode ser utilizada no melhoramento?
3. Qual a base gentica da variao somaclonal?
4. Quais as alternativas de recombinar genes de espcies sexualmente incompatveis?
5. Uma molcula de DNAfoi digerida parcialmente comduas enzimas de restrio, a
Eco RI e a Hae III, sendo produzidos os seguintes fragmentos, aps determinada a
sequncia de cada um:
5AGTATG
3TCATACTTAA
5AGTATGAATTCCGATGCTGGCCCTGACACACAG
3TCATACTTAAGGCTACGACCGGGACTGTGTGTCTTAA
5AGTATGAATTCCGATGCTGG
3TCATACTTAAGGCTACGACC
5AATTCCGATGCTGGCCCTGACACACAGAATTCATAGAC3
GGCTACGACCGGGACTGTGTGTCTTAAGTATCTG5
AATTCATAGAC3
GTATCTG5
CCCTGACACACAGAATTCATAGAC3
GGGACTGTGTGTCTTAAGTATCTG5
AATTCCGATGCTGGCCCTGACACACA
GGCTACGACCGGGACTGTGTGTTTAA
a.Qual a sequncia da molcula original?
b.Suponha queoobjetivo seja realizar aclonagemdeumfragmentode DNAproveniente
do corte de uma das enzimas de restrio, emumplasmdeo cortado coma mesma
enzima. Qual das enzimas permite mais facilmente atingir o objetivo? Por qu?
419
Biotecnologia
c.Suponhaque umgenoma possua 10
8
pares de nucleotdeos. Utilizando as duas enzimas
de restrio mencionadas, qual o nmero de fragmentos de DNA esperado coma
digesto completa do DNAgenmico emcada uma das enzimas, admitindo que as
sequncias por elas reconhecidas ocorramao acaso?
6. Na sua opinio, qual tecnologia mais especfica para se utilizar no melhoramento, a
variao somaclonal; a fuso de protoplastos, ou a engenharia gentica? Justifique
cada uma.
7. Oque voc acha da clonagemde animais?
420
421
Marcadores Moleculares
18.1 INTRODUO
Otermo marcador indica que sua funo , entre outras, identificar ou etiquetar
alguma coisa. No presente contexto, os marcadores genticos so utilizados para marcar
alelos cuja expresso seja de difcil identificao. Nesse caso, pode-se selecionar o alelo de
interesse de forma indireta, por meio do marcador. Adicionalmente, ele pode ser utilizado em
estudo de divergncia gentica, como intuito, por exemplo, de estudos evolutivos, teste de
paternidade e identificao de gentipos.
Aprimeira idia de se utilizar ummarcador gentico, visando a auxiliar na seleo de
umcarter quantitativo, ocorreu em1923 no feijo. Naquela poca, foi constatado que o
alelo responsvel pela ausncia de pigmentao escura no tegumento da semente, est ligado
a alelos de alguns genes responsveis pelo maior tamanho da semente. Consequentemente,
pensou-se na possibilidade de selecionar linhagens de feijo comgros grandes de forma
indireta, isto , selecionando-se aquelas de colorao clara, uma vez que a expresso da cor
maisfacilmente avaliada do queo tamanho do gro. Portanto, o tegumento claro foi utilizado
como marcador dos alelos responsveis pelos gros grandes.
Umponto essencial que o marcador seja herdvel e de fcil avaliao, isto , que o
seu gentipo seja fcil e eficientemente identificado por meio do seu fentipo, o que equivale
possuir umvalor de herdabilidade prximo de1,0. Outro ponto fundamental para ummarcador
ser eficiente na seleo estar intimamente ligado ao alelo que desejamos selecionar, pois
assim, eles tendema ficar juntose sempre que umindivduo expressar o fentipo do marcador
ele dever tambm ser portador do alelo de interesse. Essas propriedades tornam os
marcadores mais eficientes para a seleo indireta de alelos, cujos fentipos so avaliados
commenor preciso, do que a seleo direta, isto , a seleo dos prprios fentipos de
interesse.
18.2 MARCADORESMORFOLGICOS
Os marcadores genticos podem ser morfolgicos e moleculares. Um marcador
morfolgico umfentipo de fcil identificao, normalmente determinado por umnico
18 MARCADORES
MOLECULARES
422
alelo e herdabilidade prxima de 1,0. Porm, como j mencionado, para ser ummarcador
necessrio que ele esteja intimamente ligado ao alelo de interesse. Por exemplo, no milho
temos o alelo v
1
, responsvel por planta jovem verde-clara, que pode ser usada como
marcadora do aleloms
2
, responsvel pela esterilidade masculina, que umfentipo importante
para auxiliar na produo de hbridos, mas de difcil identificao. Os alelosv
1
ems
2
ocorrem
no cromossomo 9, respectivamente, nos locos 63 e 64, estando, portanto, distantes em
apenas 1cM. Por essa razo, eles tmgrandes chances de ficaremjuntos e pode-se selecionar
o alelo de interesse, que confere a esterilidade masculina, por meio da cor das plantas jovens.
Aeficincia mxima do marcador ocorre quando ele se constitui no prprio alelo de
interesse. Como vimos no captulo 9, isso acontece quando umalelo afeta a expresso de
mais de umcarter - pleiotropia. Umexemplo que ilustra esse fato o aleloY, responsvel
pela cor amarela da semente do milho e que tambmcondiciona maiores teores de vitamina
A. Se o melhorista est interessado emselecionar milho comalto teor dessa vitamina, sem
dvida, a melhor estratgia selecionar, indiretamente, as sementes mais amarelas. Aseleo
direta, por meio da avaliao dos teores da vitamina na semente, almde exigir a anlise de
laboratrio, tornando-a mais trabalhosa e cara, comcerteza sofre mais erros de quantificao
e, por isso, menos eficiente.
Agrande limitao do marcador morfolgico a sua ocorrncia emnmero reduzido e,
consequentemente, noser suficiente para marcar alelosdeinteresse de vriosgenes da espcie.
Isso acontece porque existemcentenas a milhares de genes, para os quais existemalelos de
interesse que necessitamser marcados e, obviamente, seria necessrio o mesmo nmero de
marcadores intimamente ligados a esses alelos. Ocorre que os genes responsveis pelos
caracteres dealta herdabilidade nemsempreesto ligados queles quenecessitamser marcados
e, portanto, no se consitituememmarcadores. Assim, seriamnecessrios vrios milhares de
caracteres de altaherdabilidade para se ter a chance de uma parcelafuncionar como marcador.
Como sabemos, o nmero de caracteres de alta herdabilidade no to grande assim.
18.3 MARCADORESMOLECULARES
Os marcadores moleculares mais utilizados so aqueles base de protenas e os que
usamo prprio DNA. Como j enfatizado, a necessidade de ser herdvel continua valendo
para essas novas classes de marcadores, pois os de protenas so os produtos diretos dos
alelos e osmarcadores de DNAso os prprios alelos ouos seus vizinhos, isto, as sequncias
de DNAsituadas prximas aos alelos que queremos marcar.
18.3.1 Marcadores de Protenas - Bioqumicos
Os marcadores de protenas so tambmdenominados marcadores bioqumicos, e os
mais usados so representados pelas isoenzimas - esterase, fosfatase, peroxidase, etc. - e
423
pelas protenas de reserva de sementes. Como eles so os produtos diretos dos alelos, basta
identific-los para selecionarmos o indivduo como fentipo desejado, que produzido pelo
alelo de interesse.
Oprocedimentoparausodesses marcadoresconsistebasicamentenaextraodaprotena
e no uso de reaes apropriadas que a identifique. No caso de o marcador ser uma isoenzima,
por exemplo, primeiramente ela deve ser isolada do indivduo que queremos avaliar e, em
seguida, colocada emcontato como seusubstrato especfico para ser transformado. Oproduto
normalmente identificadopor colorao. Emdiversas espcies, tantovegetaisquanto animais,
esses marcadores vmsendo empregados, especialmente por serem de menor custo. Em
cevada por exemplo, temsido utilizada a isoenzima esterase para selecionar, de forma indireta,
plantas resistentes ao vrus do mosaicoamarelo, decorrente do alelodominanteYm.
Entretanto, semelhana dos marcadores morfolgicos, os bioqumicos possuem
reduzidavariabilidade, isto, o nmerodemarcadores emumaespcierelativamentepequeno.
Portanto, os alelos responsveis pelas protenas facilmente identificveis, no ocorremem
nmero suficiente para marcar umgrande nmero de alelos de interesse de vrios genes. Em
consequncia, a utilidade dos mesmos torna-se reduzida.
18.3.2 Marcadores que utilizam o Prprio DNA
Os marcadores de DNA comearama ser utilizados na dcada de 1980 e j foram
desenvolvidos mais de uma dezena de procedimentos. Amaior vantagemdo DNA a grande
variabilidade que se observa entre os indivduos de uma espcie, o que equivale dizer que
utilizando o DNAconsegue-se umnmero de marcadores ou etiquetas suficientes para
marcar todos os alelos de todos os genes da espcie. Adesvantagemdos marcadores de
DNA o fato de que as tcnicas laboratoriais so mais caras quando comparadas comos
marcadores bioqumicos. Evidentemente, os marcadores morfolgicos soosideais emrelao
a esse aspecto, pois sendo um fentipo da planta, no tm nenhum custo a no ser o de
obteno da planta.
Existemalgumas estimativas emhumanos mostrando, a partir de duas molculas
homlogas de DNA, que umemcada 100 nucleotdeos deve ser diferente - polimrfico.
Infere-se facilmente ento, a magnitude do polimorfismo na espcie humana. Isso porque,
como j mencionado no captulo 4, nessa espcie h cerca de 2,9 x 10
9
pares de
nucleotdeos emseu genoma. Como entre cada 100 umdeve ser polimrfico, espera-se
ento, cerca de 2,9 x 10
7
pares de nucleotdeos diferentes, quando se comparam dois
indivduos tomados ao acaso na populao. As plantas so mais tolerantes variao
ambiental do que os animais, pois tmde se adaptarems maiores amplitudes de variao
do ambiente, semse movimentarem, o que indica que elas devempossuir mais variao
emnvel de DNAdo que os animais. Os marcadores de DNAtm-se mostrado altamente
424
eficientes para identificar variabilidade em plantas e, em milho, tem sido constatado
polimorfismo de nucleotdeos cada 70 pares de bases do genoma, quando se comparam
gentipos no aparentados.
Emrazo damaior variabilidade dos marcadoresde DNAe, portanto, da maior utilidade
deles como marcadores de alelos de interesse, ser dada maior nfase aos mesmos. No
entanto, emrazo da existncia de mais de uma dezena de procedimentos alternativos, sero
descritos com mais detalhes apenas os mais comuns. O primeiro deles o RFLP, que
corresponde expresso emingls Restriction Fragment Length Polymorphisme significa
polimorfismo de comprimentos de fragmentos de restrio. O outro a PCR, tambm
proveniente de expresso emingls: Polymerase Chain Reaction, que significa reao de
polimerizao emcadeia. Tambmser comentado sobre o AFLP, da expresso Amplified
Fragment LengthPolymorphism, que significa polimorfismo de comprimento de fragmentos
amplificados e , simplificadamente, o resultado da associao do RFLPe PCRcomalgumas
modificaes. Outromarcador muito popular o microssatlite, tambmreferido comoSSR,
da expresso Simple Sequence Repeat e que se baseia no DNAaltamente repetitivo. Um
breve comentrio tambm ser realizado sobre o SNP, da expresso Single Nucleotide
Polymorphism. A pronncia do nome desse marcador snip e ele corresponde ao
polimorfismo mononucleotdeo.
18.3.2.1 RFLP
Atcnica RFLP foi uma das mais usadas, emrazo da sua grande eficincia e tambm
porque j conhecida h mais tempo. Entretanto, dada a sua complexidade e impossibilidade
de automao ela vemsendo deixada de lado, embora seja importante conhec-la, porque
h muita informao na literatura com esse tipo de marcador, alm de parte de seu
procedimento ainda ser largamente utilizado emoutros marcadores como oAFLPe o SNP.
ORFLPsebaseia essencialmente no cortedo DNAgenmico por umaoumais enzimas
de restrio, gerando milhares de fragmentos. Emseguida, os fragmentos so separados por
meio da eletroforese, combase no tamanho dos mesmos. Alguns desses fragmentos so, em
seguida, identificados por meio de uma sonda que possui uma sequncia de bases
complementares ao fragmento, como visto no captulo 3.
Para entendermosa aplicao da tcnicaRFLP, vamos considerar quese deseja verificar
o polimorfismo de dois indivduosAe B, dequalquer espcie, tomados ao acaso na populao.
Para isso, inicialmente, deve-se extrair o DNAdos dois indivduos - DNAgenmico. Essa
uma operao relativamente simples e na literatura existemprotocolos de extrao de DNA
para todas as partes dos organismos de umgrande nmero de espcies.
Emseguida, osDNAdosdoisorganismossotratadoscomumamesmaenzimaderestrio,
por exemplo, aEco RI, que corta o DNAna seguinte sequncia: 5GAATTC3(Tabela 17.1).
425
Como em qualquer espcie h bilhes de nucleotdeos, esperado que a sequncia
mencionada ocorra inmeras vezes, ou seja, os DNAdos indivduos A e B, sero cortados
emalguns milhares de fragmentos. Ocorre que alguns fragmentos de DNAdos organismos
podemdiferir emtamanho, pelas das seguintes razes: a) Mutao no stio de restrio em
umdos indivduos, impedindo o corte do DNAnesse ponto; b) Ocorrncia de aberraes
como deleo ou duplicao na regio entre dois stios sucessivos de corte da enzima,
alterando o seu tamanho. Por exemplo, imagine dois fragmentos homlogos de DNAdos
dois organismos com3000 pares de base (pb). Imaginemos ainda que esse fragmento seja
cortado em suas extremidades pela enzima Eco RI, nos dois organismos e que, emum
deles exista adicionalmente mais umstio de corte, dividindo o fragmento emdois, sendo
umcom500 pb - fragmento 2 - e o outro com2500 pb - fragmento 3 (Figura 18.1A). Em
consequncia, ser observado umpolimorfismo de fragmentos nos dois indivduos, isto ,
a presena de fragmentos de tamanhos diferentes. Esse polimorfismo ocorreu porque em
umdos indivduos, provavelmente ocorreu uma mutao no stio que seria reconhecido
pela enzima Eco RI, na posio intermediria do fragmento considerado, impedindo sua
clivagem.
Para se observar o polimorfismo de fragmentos resultantes dos cortes nos pontos ,
eles so separados emeletroforese (Figura 18.1.B). Oindivduo Ater trs fragmentos e o
indivduo B, quatro fragmentos. Se os DNAdosindivduosforemhibridizados comoutroDNA
complementar (sonda), marcadoradioativamente, no local ( ), aautorradiografia(fotografia)
dos produtos da eletroforese mostrar somente os fragmentos marcados coma sonda, isto , o
fragmento 2+3do indivduo A, com3000 pbe apenas o fragmento 2 do indivduoB, com500
pb. Observe que somente esse ltimo fragmento o complementar sonda.
Para realizar a hibridizao da sonda, necessrio transferir os fragmentos de DNA
genmico, separados pela eletroforese e que esto no gel, para uma membrana de nylon ou
de nitrocelulose. Fragmentospreviamente desnaturados comumasoluoalcalinade hidrxido
de sdio so transferidos para uma membrana de nylon. Para se realizar essa transferncia,
coloca-se o gel sobre duas folhas de papel de filtro e, posteriormente, coloca-se a membrana
de nylon e sobre ela uma pilha de papel toalha de cerca de 40cm, pressionados por umpeso
de aproximadamente 1kg, durante uma noite (Figura 18.2). Essa tcnica chamada de
Southernblottinge o que ocorre a absoro, por capilaridade, da soluo onde se encontra
o gel, pelo papel toalha. Juntamente coma soluo, os fragmentos de DNAtambmso
arrastados e se fixamna membrana de nylon. Amembrana ento imobiliza os fragmentos de
cadeia simples nas posies emque eles foramseparados pela eletroforese.
Amembrana de nylon, agora comos fragmentos de DNA, colocada emcontato com
a sonda radioativa de DNAqueir se parear apenascomo fragmento quelhe complementar;
no caso, o fragmento 2, da Figura 18.1.A, presente nos dois indivduos e que corresponde
!
426
ao fragmentode 500pb. Amembrana de nylon, emseguida, coberta comumfilmefotogrfico
prprio - filme de raio X-, ocorrendo a autorradiografia. Isso significa que a sonda, por
ser radioativa, emite radiaes que sensibilizamo filme, que ao ser revelado, mostra o local
onde ela ocorria e tambmo fragmento de DNAque lhe complementar. Asonda radioativa
mais amplamente usada umfragmento de DNAsintetizado, utilizando-se uma das quatro
bases nitrogenadas como fsforo radioativo -
32
P. Ouso desse elemento radioativo constitui-
se em uma dificuldade nos pases onde ele necessita ser importado, como o caso do
Brasil. Isso acontece porque a meia vida do referido elemento corresponde a cerca de 15
dias e o tempo gasto com as complicaes de importao ocasionam, geralmente, a
inviabilidade do mesmo.
Para evitar a dificuldade de se trabalhar como
32
P, outra opo realizar a marcao
da sonda a frio. Uma opo a sntese da sonda de DNA com o trifosfato de
desoxiuridina(dUTP), juntamente comdTTP, dATP, dCTPe dGTP. Ouso de dUTPna sonda
porque ele se une como esteride digoxigenina. Esse esteride, por sua vez, reconhecido
por umanticorpo a anti-digoxigenina, que, posteriormente, unido enzima fosfatase alcalina.
Essa enzima, estando presa sonda, quando emcontato comuma substncia chamada de
AMPPD, h emisso de luz captada pelo filme de raio X, identificando a sua posio e
tambmdo fragmento complementar de DNAgenmico, na membrana de nitrocelulose ou
nylon.
Asonda, tambmchamada de DNAprova, , emgeral, umfragmentogenmico clonado
- biblioteca genmica - ou umcDNA- biblioteca de cDNA-. Abiblioteca genmica consiste
emmilhares de fragmentos de DNAgenmico de uma espcie, cada umclonado emum
plasmdeo por meio de uma bactria, geralmente a Escherichia coli. J, a biblioteca de
cDNA semelhante genmica, s que os fragmentos de DNAno so de origemaleatria
do genoma, mas derivados de mRNAs de diferentes genes. Da, o termo cDNA que
corresponde ao DNAcomplementar ao mRNA. ODNAprova pode ser da espcie a ser
analisada - homloga - ou de outra espcie relacionada - heterloga. Este ltimo, no entanto,
mais difcil de ser usado, emrazo da complementariedade menos perfeita, ocasionando
menor estabilidade do DNAhbrido. Oideal, a sonda que identifica fragmentos de cpias
simples, pois apresenta herana monognica.
Como visto, a tcnica RFLPpode ser resumida basicamente nos seguintes passos: 1)
Isolamento do DNAde cada indivduo; 2) Corte do DNAde cada indivduo comuma ou
mais enzimas de restrio (Tabela 17.1); 3) Separao dos fragmentos de DNApor meio de
eletroforese; 4) Transferncia dos fragmentos de DNApara uma membrana de nylon ou de
nitrocelulose; 5) Hibridizao de umou mais fragmentos desnaturados de DNAcomuma
sonda, que corresponde a um fragmento de DNA de cadeia simples complementar; 6)
Fotografia do fragmento identificado pela sonda.
427
FIGURA18.1. Na letra Aesto representados os DNAde dois indivduos homozigticos e os
locais da molcula que so cortados pela enzima de restrio (!), resultando na produo de
trs fragmentos a partir do DNA do indivduo A e quatro a partir do indivduo B. Observe que
apenas o fragmento de 3000 pb do indivduo A (fragmento 2 + 3) reconhecido pela sonda ( ),
enquanto somente o de 500 pb (fragmento 2) o reconhecido no indivduo B. Na letra B,
observa-se a separao dos fragmentos de DNApor meio da eletroforese, combase no tamanho
do fragmento, onde aqueles de menor tamanho migram mais rpido. No entanto, apenas um
fragmento reconhecido pela sonda marcada pode ser visualizado em cada indivduo, sendo o
fragmento maior do indivduo A e o menor do B.
Como j foi comentado, o marcador necessita ser herdvel. No caso do RFLP, se os
dois indivduos considerados na Figura 18.1.Aforemcruzados, ser obtida a gerao F
1
.
Quando se analisamos genitores e a gerao F
1
por meio de RFLP, observa-se no indivduo
F
1
a herana dos dois tipos de bandas, para as quais os genitores diferem, caracterizando
codominncia (Figura 18.3).
428
FIGURA 18.2. Tcnica Southern blotting, que consiste da transferncia por capilaridade dos
fragmentos de DNA que se encontram no gel, para a membrana de nylon. A fora capilar
produzida pela pilha de papel toalha que absorve a soluo embebida pelo papel de filtro.
Admitindo-se que o fragmento de DNAidentificado pela sonda esteja intimamente
ligado a umalelo de interesse, pode-se selecionar esse alelo por meio desse fragmento. Isso
equivale dizer que emuma populao segregante, toda planta que possuir o fragmento de
DNAidentificado pela sonda dever ter tambmo alelo de interesse, porque ambos esto
intimamente ligados etendema ficar juntos. , portanto, nessa condio, que o RFLPfunciona
como ummarcador ou uma etiqueta de umalelo de interesse.
FIGURA 18.3. Herana de um carter de RFLP, representado por um loco identificado pela
sonda complementar ao fragmento 2 da Figura 18.1 e que se expressa como dois fentipos
alternativos, isto , um fragmento grande de DNA (fragmento 2+3) presente no genitor A e um
fragmento pequeno, representado apenas pelo fragmento 2, presente no genitor B. Note a
ocorrncia dos dois fentipos no indivduo F
1
, caracterizando a codominncia.
Outra propriedade importantedos marcadores apresentar amplo polimorfismo. Como
visto, o RFLPconsiste basicamente no uso de uma enzima de restrio que corta o DNAem
stios especficos, produzindo milhares de fragmentos. Entre esses, algumas dezenasoumesmo
Papel absorvente
429
centenas podemser identificados, pois existemcentenas a milhares de sondas disponveis
para diversas espcies. Adicionalmente, so conhecidas mais de 500 tipos de enzimas de
restrio. Assim, existe a possibilidade de identificar umnmero praticamente infinito de
fragmentos de DNA, havendo, portanto, a chance de ocorrer pelo menos umfragmento
prximo de todos os alelos de qualquer espcie. Da o grande potencial do RFLPcomo um
marcador.
18.3.2.2 PCR
No final da dcada de 80surgiua tcnica PCR, que tambmusa oDNAcomo marcador.
No entanto, difere do RFLP, porque ao invs de marcar umsegmento de DNAgenmico
com uma sonda, o que ocorre a replicao de certos segmentos especficos do DNA
genmico, invitro. Isso foi possvel, porque como foi visto no captulo 3, a DNApolimerase,
a enzima que sintetiza o DNA, s funciona quando umpequeno segmento da molcula a ser
sintetizada j existe. Esse segmento chamado de primer. Assim, quando se conhece a
sequncia de bases de umalelo de interesse, pode-se usar as sequncias complementares
das extremidades 3' de um segmento desse alelo, geralmente com20 a 25 nucleotdeos,
como primers epromover a sntese domesmo, artificialmente, por vrios ciclos (n) sucessivos,
gerando umgrande nmero (2
n
) de molculas idnticas (Figura 18.4)
Porm, no caso da PCRtemos de considerar, como j mencionado, que nemtodo o
DNAde umorganismo replicado, e sim, apenas as sequncias cujas extremidades foram
identificadas pelo par de primers. Portanto, nas molculas de DNAde umindivduo, as quais
so geralmente muito longas, apenas umou poucos segmentos sero replicados. Para se
conseguir esse resultado necessrio preparar uma reao que consiste basicamente em
misturar os seguintes componentes: 1) DNAdo indivduo de onde queremos amplificar um
fragmento; 2) umpar de primers; 3) os quatro desoxirribonucleotdeos 5 trifosfatos (dNTPs);
4) umtampo de reao no qual deve conter cloreto de magnsio. Areplicao do fragmento
de DNAocorrer emumequipamentochamado de termociclador, quefornece as temperaturas
de desnaturao do DNAmolde (91 a 94
0
C), de anelamento do primer (50 a 62
0
C) e de
extenso, de 72
0
C, cada qual durante umcerto tempo. Esse conjunto de temperaturas e
respectivos tempos constituemumciclo.
No caso de utilizarmos o par de primers que reconhecem um alelo de interesse e
procedermos a sua replicao por meio da PCR, usando 40 ciclos, o nmero de molculas
do referido alelo ser cerca de 2
40
, que equivalema 1,099512 x 10
12
cpias e correspondem
ao nmero de vezes que ele estar mais concentrado do que o restante do DNAgenmico,
que no foi replicado. Usando a eletroforese, todos os fragmentos de DNAde diferentes
tamanhos sero separados, tanto aquele que foi amplificado quanto os que no foram. Como
a concentrao de DNAutilizada emcada reao de PCR muito baixa, cerca de 2 x10
-8
g,
430
FIGURA 18.4. Na replicao do DNA in vitro cada molcula produz duas molculas filhas
idnticas aps cada ciclo. Observe que aps trs ciclos sucessivos, uma nica molcula resultou
na sntese de oito molculas idnticas (2
3
= 8).
somente o alelo que foi amplificado na reao, que pode ser visualizado como uma banda
no gel, aps tratado combrometo de etdeo e iluminado por luz ultravioleta. Como ele tema
propriedade de apresentar uma colorao alaranjada ao ser iluminado por luz ultravioleta, ele
funciona ento como umcorante de DNA.Vale mencionar que o brometo de etdio um
agente mutagnico capaz de causar adio oudeleo de nucleotdeos captulo 3 -, porque
a sua molcula insere-se dentro da molcula de DNA. Assim, ele deve ser manuseado com
cuidado, evitando-se que entre emcontato como corpo, pois umagente cancergeno. H
outras substncias que tambmpodemser usadas como corante de DNAemgel de agarose.
431
Asntese de DNAin vitro emalta velocidade - 40 ciclos durante 1,0 a 4,0 horas -, s
foi possvel graas descoberta de uma DNApolimerase especial, que resiste temperatura
de 95
o
C, necessria para a desnaturao do DNA durante o processo de replicao. A
enzima mais usada a Taq DNApolimerase, extrada da arquibactriaThermus aquaticus,
que vive emguas naturais quentes.
Aprincipal desvantagemda tcnica PCR o fato de ela requerer o isolamento e o
sequenciamento de umdado alelo, para se obter o par de primers, tornando a tcnica onerosa.
Entretanto, com a disponibilidade de grande nmero de sequncias de alelos embancos
pblicos de DNA, essa dificuldade vemsendo eliminada.
Uma das primeiras modificaes da PCRsurgiu em1990, pela utilizao de primers
de sequncia aleatria, dispensando-se assima necessidade de informao de sequncia
para a sntese do primer. Oprocedimento passou a ser chamado deRAPD, do ingls Random
Amplified Polymorphic DNA, que significa DNApolimrfico amplificado e aleatrio.
Milhares de primers aleatrios j so comercializados. Os primers usados emRAPD
so na grande maioria de 10 nucleotdeos e os que tmproduzido polimorfismo emplantas
possuemde 50%a 80% de guanina mais citosina. Essa amplitude de composio de bases
implica na possibilidade de se obteremmais de 600.000 tipos de primers. Da surge o grande
potencial do RAPDemidentificar variabilidade gentica, pois os resultados experimentais
tmdemonstrado que no mnimo 10%dos primers aleatrios identificampolimorfismo nas
espcies cultivadas, dependendo, evidentemente, do nvel de variabilidade gentica de cada
espcie. Almdisso, temsido constatado que o nmero mdio de bandas ou marcadores
polimrficos por primer trs. Portanto, esses resultados experimentais evidenciamque h a
possibilidade de se obterem no mnimo 180.000 marcadores polimrficos, nas espcies
cultivadascommenor variabilidade gentica, utilizando-seapenasumprimer por reao RAPD.
Adicionalmente, podem-se tambmutilizar pares de primers emcada reao RAPD. Assim,
os 600.000 primers possveis podemser combinados dois a dois, emcada reao e tem-se
a partir da uma quantidade enorme de combinaes de primers capazes de identificar novos
polimorfismosnaespcie. Constata-seassim, queo potencial do RAPD praticamente ilimitado
para identificar polimorfismo gentico.
Tanto a PCR quanto o RAPD so marcadores cujas bandas apresentam herana
dominante. Essetipo de interao allica pode ser compreendida considerando-se a herana
de umfragmento de DNAa partir do cruzamento de dois genitores diplides e contrastantes
(Figura 18.5).
Emrelao ao RAPD, necessrio mencionar que, emrazo de se usar primers de
apenas 10 bases, os produtos do RAPDnemsempre so to confiveis quanto os da PCR.
Isso significa que algumas bandas de RAPD, especialmente aquelas mais fracas, podemno
se repetir quando se repete uma reao. Isso ocorre principalmente quando se mudamos
432
reagentes e o termociclador. Outra razo pela menor estabilidade das bandas de RAPD
porque as condies de reao so menos drsticas emrelao PCR, isto , necessita-se
utilizar uma menor temperatura de anelamento do primer e maior concentrao de cloreto de
magnsio. Entretanto, tambmnecessrio frisar que as bandas fortes so mais estveis,
especialmente repetindo-se as mesmas condies de reao.
FIGURA 18.5. Cada retngulo representa uma molcula de DNA. O sinal corresponde
ao stio reconhecido pelo primer nas posies 3 das duas cadeias complementares de DNA,
que serviro de moldes para sua replicao durante as reaes de PCR ou RAPD. O sinal <
indica umstio no reconhecido pelo primer emrazo da mutao por exemplo. Emconsequncia,
quando uma molcula de DNA possui o stio reconhecido pelo primer em apenas uma das
extremidades 3, fcil perceber que somente essa cadeia de DNA poderia ser replicada.
Entretanto, a cadeia complementar, portadora do stio mutante, no consegue ser replicada e
impede que a molcula de DNAcompleta tambmseja replicada. Assim, as duas molculas de
DNAdo genitor A e do indivduo F
2
da primeira combinao sero amplificadas. Areplicao
tambm ocorre a partir de apenas uma molcula de DNA dos indivduos F
1
e dos indivduos F
2
das combinaes dois e trs. J os DNAdo genitor B e dos indivduos F
2
da quarta combinao
no sero amplificados. Ser ento observada banda no gel, relativa ao genitor A, gerao F
1
e em trs das quatro combinaes F
2
, caracterizando a dominncia completa.
433
Quando uma banda RAPD identificada prxima, ou mesmo dentro de umalelo de
interesse, isto , ummarcador do alelo, h possibilidade de transformar essa banda emuma
PCR, tornando-a mais estvel. Nesse caso, o procedimento consiste emisolar do gel o DNA
da banda RAPD de interesse, sequenci-lo e, a partir da sequncia, desenhar um par de
primers comcerca de 20 bases. Esse novo marcador denominado deSCARda expresso
Sequence Characterized Amplified Region, que significa regio amplificada de sequncia
caracterizada. Umexemplo de SCAR o que amplifica umsegmento do alelo Co-4
2
que
confere resistncia do feijo a vrias raas do fungo que causa a antracnose. Abanda desse
SCARpossui 950 pares de bases e amplificada pelo par de primers 5CACGGACCG
AATAAGCCACCAACA3 e 5CACGGACCGAGGATACAGTGAAAG3. Note
que a sequncia emnegrito comumno par de primers corresponde ao primer RAPDutilizado
na identificao original da banda. As sequncias adicionais foram obtidas aps o
sequenciamento da banda.
Outra variao da PCR o marcador CAPS, da expresso Cleaved Amplified
Polymorphic Sequence ou sequncia amplificada e polimrfica aps a clivagem. Esse
procedimento empregado quando umpar de primer amplifica umfragmento de DNAem
todos os indivduos, portanto, no gerando polimorfismo. Porm, quando se trata o produto
da reao comuma enzima de restrio, emalguns indivduos nota-se a sua diviso emumou
mais locais, decorrente da presena de umou mais stios de restrio. Emconsequncia,
possvel detectar polimorfismo, isto , diferenciar os indivduos que tmdiferentes nmeros
de stios de restrio dentro do fragmento de DNA(Figura 18.6), ou ainda, ocorrer stio de
restrio em um indivduo e no ocorrer em outro. Aocorrncia do stio de restrio
decorrente da mutao por substituio de nucleotdeo, ou mesmo adio ou deleo. O
CAPS tambmdenominado de PCR/RFLP.
434
FIGURA 18.6. Resultados idnticos da PCR em trs gentipos so identificados pelo fragmento
gerado pelo par de primers (
:=
). Uma enzima de restrio corta o fragmento de DNA em dois
locais no gentipo A
1
A
1
, gerando trs novos fragmentos e em dois locais diferentes no gentipo
A
2
A
2
, gerando mais trs novos fragmentos. Os seis fragmentos observados no heterozigoto
caracteriza a codominncia do CAPS.
Se o marcador for importante para identificar umalelo de interesse, o fragmento de
DNAoriginal pode ser sequenciado e identificado o stio de restrio, para o qual poder ser
confeccionado novopar de primers queidentificar opolimorfismo deinteresse, transformando
o CAPSemuma PCRe dispensando o uso da enzima de restrio. As vantagens do CAPS
so: a. Codominante; b. confivel; c. identifica polimorfismo emPCRmonomrficos.
18.3.2.3 AFLP
Amplified Fragment LengthPolymorphism(AFLP) corresponde ao polimorfismo de
comprimento de fragmentos amplificados e uma tcnica que utiliza as enzimas de restrio
citadas na Tabela 17.1, para clivar o DNAde umindivduo. Como a maioria das enzimas de
restrio produz extremidades coesivas, o passo seguinte consiste emligar umfragmento de
DNAcomcerca de 25 pares de bases, chamado de adaptador, comsequncia conhecida
emcada extremidade coesiva. Emuma terceira etapa so utilizados primers complementares
aos adaptadores e procede-se a uma reao de PCR.
Surge a questo de como selecionar entre os milhares de fragmentos produzidos pela
clivagem do DNA por meio da enzima de restrio, para se conseguir umnmero de
=
435
bandas vivel de ser identificado no gel de eletroforese, que em torno de 50. Para isso
normalmente cliva-se o DNA, emprimeiro lugar, comuma enzima que reconhece stios de
seis bases como a Eco RI 5 G
9
AATTC 3, onde a seta indica o local de clivagem. Essa
enzima corta o DNAem fragmentos grandes, os quais no so facilmente separveis na
eletroforese, porque so, emgeral, muito longos. Emseguida, esses fragmentos so clivados
comuma segunda enzima que reconhece stios de quatro bases, como Hpa II - 5 C
9
CGG3.
Conclui-se, assim, que sero produzidas trs classes de fragmentos: 1) Os grandes so
produzidos pela clivagemsomente coma enzima Eco RI; 2) os mdios so produzidos pela
clivagemde umlado coma enzima Eco RI e do outro lado coma enzima Hpa II; 3) e os
pequenos so provenientes do corte somente coma enzima Hpa II. Somente os fragmentos
de tamanhomdio so compatveis paraseremseparados por meioda eletroforese. Entretanto,
o nmero dessesfragmentos ainda muito grande para seremdiscriminados emumnico gel.
Assim, procede-se seleo de uma pequena parcela dos mesmos emduas reaes sucessivas
de PCR.
A seleo realizada por meio do emprego de primers degenerados, isto , um
primer complementar s extremidades do fragmento de tamanho intermedirio, porm, que
possui uma base da extremidade 3 aleatria. Aprimeira PCR chamada de pr-seletiva.
Assim, ao invs do primer possuir em3 exatamente a base complementar ao fragmento
intermedirio, ele possui, ao acaso, uma das quatro bases que participam do DNA.
Consequentemente, esse primer degenerado emuma base ir se parear apenas comumdos
quatro fragmentos de tamanho intermedirio que possuir a base complementar. Por exemplo,
suponha que o primer tenha na extremidade 3 a baseA. Ele ir se parear somente comos
fragmentos intermedirios que tiverema base correspondenteT. Os demais fragmentos de
tamanhos intermedirios, que tiveremna posio correspondente base 3do primer a A,
ou C, ou G, no sero reconhecidos e, consequentemente, no sero replicados. Portanto,
so selecionados apenas dos fragmentos por umdos membros do par de primer e pelo
outro membro, totalizando uma seleo de 1/16, isto , apenas 1 em16 fragmentos ser
amplificado (Figura 18.7).
Os produtos dessa primeira PCRso utilizados numa segunda PCR, aseletiva, onde
so utilizados primers degenerados emtrs bases na extremidade 3, essastrs bases aleatrias
vo reconhecer somente (1/64)
2
, ou seja, 1/4096 fragmentos de comprimentos mdios que
sero amplificados. Ovalor 1/64 corresponde a (1/4)
3
, que a probabilidade de trs bases
aleatrias da extremidade 3 do primer reconhecer uma das cadeias do DNAexatamente
complementar. Como o DNAtemduas cadeias que servemde molde para seremreplicadas
por meio das duas PCRs, temos o produto (1/64) x(1/64) ou (1/64)
2
que equivalem1/4096
(Figura 18.7). Os produtos da PCRseletiva so ento separados emgel de poliacrilamida e
os melhores resultados so produzidos emgel de poliacrilamida desnaturante.
436
Para visualizar as bandas no gel, marca-se a extremidade 5do primer, que reconhece
a extremidadedofragmento cortado comaenzima deseis bases comumnucleotdeo radioativo
como o
32
Pseguido daautorradiografia do gel comumfilme de raio X. Ummtodo alternativo
a marcao a frio e umdos procedimentos mais usados a colorao comnitrato de prata.
H tambma possibilidade de seutilizar nucleotdeos marcados comfluorocromos e identificar
os fragmentos de DNAcommaior poder de resoluo. Nesse caso, normalmente utilizam-se
os sequenciadores de DNAque j possuemo dispositivo para a leitura dos comprimentos de
ondas emitidos pelos fluorocromos.
FIGURA 18.7. Ilustrao da digesto do DNA por meio de duas enzimas de restrio, uma de
corte raro e outra de corte frequente, gerando um fragmento de tamanho intermedirio com as
extremidades coesivas de cada enzima. Nota-se em seguida a ligao dos dois adaptadores com
nucleotdeos representados emminscula, que so os stios do par de primers. Faz-se em seguida a
PCR pr-seletiva comos primers degenerados emuma base em3 e, o produto utilizado na PCR
seletiva, com os primers degenerados em trs bases em 3. O produto dessa segunda PCR o que
ser observado aps a eletroforese.
437
Como a operao final consiste na PCR, o AFLP um marcador dominante.
importante enfatizar que a grande vantagemdesse marcador a confiabilidade dos resultados
produzidos pela PCR e pelas enzimas de restrio, e o enorme potencial de identificar
variabilidade gentica. Esse potencial advmdas vrias combinaes possveis de pares de
enzimas de restrio, cada uma comuma enzima de corte raro e outra de corte frequente e
para cada par de enzimas pode-se usar 64 pares de primers degenerados emtrs nucleotdeos
em3.
18.3.2.4 MICROSSATLITEOUSSR(Simple Sequence Repeat)
Omicrossatlite uma classe de sequncias de DNArepetitivo que ocorre emtodos
os organismos, incluindo os eucariontes e procariontes. Eles consistememrepeties de
sequncias geralmente de dois a seis nucleotdeos, ocupando uma extenso de at 100 pares
de bases. As sequncias mais comumente repetidas emplantas so (AT)
n
, (GT)
n
e (AG)
n
e,
emanimais mais comuma (AC)
n
. Essas sequncias so distribudas emtodo o genoma e
so flanqueadas por sequncias altamente conservadas. As sequncias de microssatlites
ocorremtanto nas regies que codificamquanto naquelas que no codificam, porm, suas
frequncias so maiores nas sequncias transcritas.
Os microssatlites so originados durante a replicao do DNA, em razo do
pareamento desalinhado de sequncias repetidas, tambmdenominado de escorregamento
(Figura 18.8). Emconsequncia desse pareamento desalinhado, ocorre umreparo decorrente
do pareamento errado, o qual est associado a uma taxa de mutao muito elevada, cerca
de 10
-6
a 10
-2
por gerao (Trojanowska e Bolibok, 2004). Esse pareamento desalinhado
emeucariontes tambmresponsvel pela permuta desigual que est esquematizada na Figura
18.9. Emconsequncia da permuta desigual ha produo de nmeros variados das unidades
repetidas, de forma que cada fragmento de microssatlite assume comprimentos diferentes
que podemser identificados emeletroforese. Cada umdesses fragmentos de umdado loco
equivalente a um alelo de um gene, tornando assim um dos marcadores com maior
variabilidade allica.
Os microssatlites podemser perfeitos, isto , seremarranjados de modo simples com
vrias repeties, geralmente de dois at seis nucleotdeos como (N
1
... N
6
)
n
. Eles podem
tambm ser imperfeitos com unidades diferentes ocorrendo juntas e repetidas como
(CA)
n
(GT)
n
e pode ainda ocorrer regies espaadoras entre as unidades repetidas como
(CA)
n
(N)
n
(GT)
n
. Os fragmentos utilizados como marcadores devemser aqueles flanqueados
por sequncias conservadas. Assim, so sequenciados esses flancos e construdos primers
complementares a eles e que amplificamos microssatlites por meio de uma reao de PCR.
Emdecorrncia do processo laborioso de obteno dos primers, os microssatlites
ainda possuemuso restrito s espcies mais importantes, embora sejamconsiderados um
438
dos marcadores mais eficientes. Basicamente existemduas estratgias para se identificar os
microssatlites de uma dada espcie: a. Deteco de sequncias que possuemmicrossatlites
nas bases de dados disponveis na internet; b. Construo e seleo de livraria genmica ou
outra como de ESTs (Expressed Sequence Tag), que correspondema sequncias de cDNA
provenientes de RNAs que se expressam(mRNAs).
FIGURA 18.8. Pareamento desalinhado durante a replicao (escorregamento = slippage) de
sequncias repetidas, resultado em molculas com duplicao (acima) e deficincia (abaixo).
439
FIGURA 18.9. Permuta desigual entre cromossomos homlogos, cada um representado por uma
cadeia de DNA, resultando na produo de cromtides duplicadas em itlico e deficientes.
Aprimeira estratgia menos onerosa e rpida, uma vez que as sequncias j esto
disponveis nosbancos de dados, embora tais sequncias sejammais abundantes para aquelas
espcies de maior importncia econmica oucientfica. Almdisso, quando essas sequncias
so derivadas de genes expressos, considervel nmero de microssatlites deixaro de ser
identificados, porque grande parte dos microssatlites ocorre emregies que no codificam
e que representamde 95%a 99%do genoma.
Aconstruo de livraria pode ser enriquecida ou no enriquecida. Oprocedimento de
livraria enriquecida temsido preferido atualmente e umdos mtodos mais usados a sua
construo por meio de hibridizao seletiva com fragmentos de DNA, usando esferas
magnticas cobertas com estreptoavidina ou membranas de nylon. O procedimento
compreende os seguintes passos: a. digesto doDNAe ligao dos fragmentos a adaptadores;
b. hibridizao comsondas de microssatlites combiotina, seguida pela ligao s esferas
comestreptoavidina; c.eluio dos fragmentos de DNAligados s esferas e amplificao por
meio de PCR, utilizando-se primers complementares aos adaptadores; d. clonagem dos
produtos amplificados emvetores; e. transformao deE.coli; f. sequenciamento dos clones
positivos. Embora esse mtodo tenha apresentado eficincia de mais de 50%, uma deficincia
o uso de apenas uma ou poucas sondas de microssatlites presas s esferas. Uma alternativa
o uso de membranas de nyloncommuitas sondas de oligonucleotdeos de microssatlites,
resultando emuma eficincia de 50% - 70%.
Muitos microssatlites vmsendo identificados a partir de ESTs. Para se ter idia do
trabalho envolvido nessafase inicial de obteno dos primers, uma livraria deESTs de centeio,
contendo mais de 8000 cDNAs teve cada fragmento sequenciado. Entre esses fragmentos,
528 possuiammicrossatlites comunidades di, tri e tetranucleotdeos. Como o fragmento
adequado para constituir ummarcador necessita estar flanqueadopor sequncias conservadas
440
e ter umtamanho vivel de ser identificado emeletroforese, apenas 157 sequncias foram
teis para o desenho de primers.
Espcies que tiveram seus genomas sequenciados permitiram que aumentasse
significativamente onmerode primers SSR. Esse o casodo arroz que teveo sequenciamento
do genoma concludo em2002 e, em2004, o nmero de primers SSRpassou de cerca de
1000 para 25.000 (Edwards e McCouch, 2007).
Os microssatlites possuemherana codominante como ilustrado na Figura 18.10.
Observa-se que o indivduo P
1
homozigoto, pois possui duas sequncias com10 repeties
do dinucleotdeo CA, ou seja, representando apenas uma cadeia de cada molcula do DNA
tem-se (CA)
10
/(CA)
10
. J o P
2
, tambm homozigoto, possui duas sequncias com 13
repeties do dinucleotdeo, isto , (CA)
13
/(CA)
13
. Nota-se que cada fragmento de DNAa
ser amplificado constitudopor duas sequncias situadasnas extremidades, que correspondem
aos segmentos conservados e onde esto situados os stios do par de primers. Essas
sequncias estoflanqueando a sequncia de DNAaltamente repetitivo. Emcada homozigoto
existe apenas umtamanho de fragmento a ser amplificado e corresponde a umalelo. Nos
dois indivduos P
1
e P
2
esses fragmentosdiferememtamanho, emrazodos diferentes nmeros
de repeties das unidades repetidas, ocorrendo assim, dois alelos diferentes. Portanto, o
nmero de alelos diferentes que pode ser identificado emuma populao de indivduos varia
em funo da alterao do nmero de unidades do DNA repetitivo e que podem ser
distinguidas emeletroforese.
Quando os dois genitores P
1
e P
2
so cruzados produzido o descendente F
1
que
heterozigoto e pode ser representado por (CA)
10
/(CA)
13
. Na gerao F
2
espera-se de
descendentes (CA)
13
/(CA)
13
, (CA)
10
/(CA)
13
e (CA)
10
/(CA)
10
. Observa-se na Figura
18.10 que os gentipos dos genitores, da F
1
e as trs classes genotpicas da F
2
podemser
diferenciadas na eletroforese dos produtos das reaes de microssatlites, caracterizando
uma interao allica do tipo codominante. Dada essa possibilidade de se poder identificar
todos os gentipos pelo fentipo (padresde bandas), o microssatlite torna-se ummarcador
molecular mais informativo do que os marcadores dominantes, especialmente quando se
analisa vrios gentipos diferentes e pode-se identificar vrios alelos.
Os microssatlites apresentamdistribuio aproximadamente aleatria no genoma,
embora existam regies com maiores abundncias dessas sequncias, como as regies
prximas do centrmero e dos telmeros. Entretanto, como j citado, atualmente vrios
microssatlites vmsendo identificados dentro degenes. H uma tendnciados microssatlites
genmicos serem ligeiramente mais polimrficosdo que os derivadosde ESTs, provavelmente
porque as regies genmicas que no codificamso menos afetadas pela seleo natural.
Outra classe de marcadores que se baseia no DNA altamente repetitivo o ISSR
(Inter-simple sequence repeat). Nesse caso usa-se um nico prmer comcerca de 16b
441
18b de DNA com sequncia repetida, que complementar aos stios invertidos de
microssatlites e que amplificamfragmentos de 100-3000pb. Os resultados de uma reao
de PCRconstamgeralmente de 25 a 50 fragmentos amplificados, de diferentes locos. Esse
nmero de bandas detectado emgel com4% a 6% de poliacrilamida. Avantagemdesse
procedimento dispensar o laborioso trabalho de obteno dos primers de microssatlites e
o grande nmero de bandas que pode ser obtido. Entretanto, como desvantagem, os ISSR
apresentamherana principalmente dominante e, as vrias bandas derivadas de umprimer
podemser oriundas de diferentes locos, isto , os produtosde umprimer podemser mapeados
emdiferentes locais no mapa molecular, dificultando o seuuso nos trabalhos de mapeamento.
FIGURA 18.10. Cruzamento de dois genitores puros e contrastantes em um loco microssatlite,
com os respectivos padres de banda em um gel, juntamente com os descendentes F
1
e F
2
,
caracterizando a interao allica codominante.
442
Entre todos os marcadores os SNPsso os que permitemidentificar mais polimorfismos
entre indivduos e, por isso, eles j vmsendo amplamente utilizados emhumanos. Cerca de
3,1 milhes de SNPs j foramidentificados emuma populao de 270 humanos amostrada
emquatro regies do mundo (Frazer et al., 2007).
18.3.2.5 SNP Polimorfismo Mononucleotdeo
O polimorfismo mononucleotdeo ou SNP da expresso Single Nucleotide
Polymorphism, uma pequena variao gentica emumnico nucleotdeo, por exemplo,
quando a A substituda por uma das trs outras bases nitrogenadas (G, C ou T). Um
exemplo de umSNP a alterao do segmento de DNAAAGGTTAparaATGGTTA, onde
o segundoAda primeira sequncia foi substitudo por T. Almda substituio, tambmpode
ocorrer adio ou deleo de uma nica base (indels). Tanto a substituio quanto a adio
ou deleo ocorremraramente, cerca de 10
-7
alteraes por local e por gerao. Adiferena
desse marcador emrelao aos demais a sua maior abundncia. Emhumanos estima-se a
ocorrncia deuma alterao entre cada1000bases. Emmilho, constatou-se umpolimorfismo
a cada 70 bases. Evidentemente, a maioria desse polimorfismo ocorre emregies que no
codificam, uma vez que a parcela do genoma que codifica corresponde de 1%a 5%.
Ao se sequenciar vrias sequncias homlogas, podemser identificados polimorfismos
entre elas, decorrentes dos nucleotdeos nicos ou SNPs, e, a partir da, ter-se idia das
mutaes de ponto que ocorreram(Figura 18.11). Caso essas sequncias homlogas sejam
alelos de umgene, pode-se ter idia das mutaes que os geraram. Por isso, os SNPs vm
sendo muito empregados na anlise de ESTs, isto , das sequncias expressas identificadas,
que so provenientes de mRNAs.
FIGURA18.11. Esquema do resultado de sequenciamento de dois segmentos homlogos de DNA
comumSNP, a substituio da quinta base T a partir da esquerda por G.
443
Emhumanos os SNPs vmsendo muito usados na identificao de alelos relacionados
vrias doenas. Uma delas o mal deAlzheimer e foi identificado por meio de dois SNPs,
trs alelos, E2, E3 e E4, que codificam, cada umpara uma protena (cadeia polipeptdica
ApoE) que difere emapenas umaminocido. Constatou-se que a protena derivada do alelo
E4 aumenta a probabilidade do indivduo desenvolver o mal de Alzheimer, mesmo que ele
receba apenas umalelo E4 de seus genitores. J, os indivduos que recebemo alelo E2 tm
menos chance de desenvolver a doena. Assim, a verificao do SNPque identifica o E4 em
umindivduo indica que ele temmaior pr-disposio de desenvolver a doena. Entretanto,
apenas esseresultado no implica queele ter a doena, a qual por ser umcarter quantitativo,
tambmdepende de outros genes.
Atualmente, os SNPs vmtambmsendo usados emplantas dado ao seu enorme
potencial de identificar polimorfismo. Umexemplo do emprego dos SNPs o trabalho
realizado por Quirino (2003) emcana-de-acar visando a identificar alelos de resistncia
de duas doenas, causadas pela Xanthomonas albilineans e pela Puccinia
melanocephala. Para isso, foraminicialmente identificados dois ESTs da cana-de-acar
comsequncias semelhantes de genes de resistncia patgenos. Os genes de patgenos
utilizados como referncia foi o alelo Xa1de arroz, que confere resistncia Xanthomonas,
e o alelo Rp1-D de milho, que confere resistncia ao agente da ferrugem. Apartir deles
foramconstrudos primers que amplificaramsequncias homlogas emvrias cultivares de
cana-de-acar, resistentes e suscetveis aos patgenos. As bandas geradas foramclonadas
emplasmdeos de bactrias e, posteriormente, foramsequenciadas. Apartir da comparao
das sequncias, quatro a seis diferentes nucleotdeos foramencontradas entre as cultivares
para cada uma das doenas. Essas diferenas podemexplicar os alelos para resistncia e
suscetibilidade.
Entretanto, emrazo do custo do sequenciamento, tcnicas alternativas vmsendo
propostas para reduzir o custo de identificar os SNPs (Soleimani et al., 2003). Uma dessas
tcnicas a AS-PCRou PCRalelo especfico (Figuras 18.12 e 18.13).
Essa tcnica tem a vantagem da simplicidade e confiabilidade da PCR. Alm
disso, coma disponibilidade nos bancos pblicos de sequncias, inmeros ESTs esto
disponveis para vrias espcies importantes. Podemser obtidas sequncias homlogas
de ESTs, portanto, derivadas de alelos diferentes de um dado gene, as quais, quando
alinhadas, podem ser desenhados os primers que permitem a identificao de SNPs
emalelos especficos, bemcomo a identificao desses alelos emgentipos especficos
da espcie.
444
Como citado na figura 18.12, no possvel identificar os outros alelos SNPs na
mesma reao PCR. Uma alternativa seria construir outros primers que identificariamos
outros alelos do SNP.
Coma identificao de umconjunto de alelos importantes de diferentes genes de uma
espcie, algumas empresas de melhoramento tmutilizado os SNPs para realizar a seleo
FIGURA18.12. Diagrama mostrando a PCR alelo especfico, AS-PCR (Allele-Specific PCR)
para identificar SNPs. a. Alinhamento das sequncias dos ESTs de duas cultivares (CL1 e
CL2) com a transio G/A (SNP). Os primers PE1 e PE2 foram desenhados a partir da
sequncia de consenso dos ESTs. O primer PS1 foi desenhado para detectar o polimorfismo no
SNP, porque ele tem C na sua posio 3 e amplifica o alelo com G mas no o comApela no
complementaridade. O alelo de CL2 poderia ser detectado com um primer que difere do PS1
apenas em 3 com T em vez de C. b. Perfil de bandas resultante da amplificao da AS-PCR.
Note que CL1 tem duas bandas indicando a presena de G no loco do SNP, enquanto a CL2
tem apenas uma mostrando a falta do G naquele loco (Soleimani et al., 2003).
FIGURA 18.13. Perfil de bandas geradas para identificar o SNP066, em 8 cultivares de
cevada, usando os primers EST21L 5-ATCAATGGAGATTTGCTTAC-3 e EST21R 5-
GTGTTTACATGCTTGTCATA-3. Alm desses, foi usado tambm na reao o primer 5-
TGAAGCTGTTCAAACTAGAGCA-3 que amplifica o SNP que tem T na posio
correspondente 3 do primer. As colunas 1 e 10 tm os DNAs marcadores de tamanho de
bandas (DNAladders). As colunas 2-9 so as 8 cultivares de cevada e o S indica a presena do
SNP com T em 3 nas cultivares, enquanto a ausncia indica outros alelos que podem ter no
lugar do T, o Aou G ou C. Abanda E corresponde a amplificao do loco do EST e serve como
controle positivo.
445
assistida nos programas de melhoramento. Isto , as plantas de uma populao segregante
que reunirem o maior nmero de marcadores estariam mais prximas do ideal e seriam
selecionadas.
18.4 EMPREGODOSMARCADORESMOLECULARES
18.4.1 Estudo de parentesco
Aobteno de marcadores distribuidos aleatoriamente no genoma, permite que eles sejam
utilizados para identificar o parentesco entre dois ou mais individuos.
18.4.1.1 Teste de paternidade
Atualmente, o testede paternidade vemsendo rotineiramenteempregado emhumanos
para fins judiciais. Uma aplicao semelhante tambmvemsendo feita na identificao de
cultivares emdisputa judicial e mesmo no melhoramento de plantas e animais, para eliminar
dvidas sobre paternidade.
Omarcador maisutilizado para esse fim o microssatlite pois, bastaobter uma pequena
quantidade deDNAdos indivduos, cujoparentesco precisa ser determinadoe realizar reaes
de PCR com alguns pares de primers especficos da espcie sob jdice. Portanto,
simplesmente uma aplicao de conhecimentos de gentica mendeliana para se interpretar os
resultados. Por exemplo, suponhamos que umhomemquestione se umfilho de uma mulher
tambmseu filho. Para isso, toma-se uma amostra de DNAdos trs indivduos e realiza-se a
PCRcom10 pares de primers SSR. Suponhamos que dois pares de primers identifiquem
quatro alelos nos dois provveis genitores, por exemplo, P
1
(A
1
A
2
) e P
2
(A
3
A
4
). Cinco
pares identifiquem trs alelos, por exemplo, P
1
(A
1
A
2
) e P
2
(A
1
A
3
). Para os trs pares
restantes de primers identifiquemdois alelos, por exemplo, P
1
(A
1
A
2
) e P
2
(A
1
A
2
). Apartir
da, pode-se prever os gentipos (fentipos ou padres de bandas) esperados nos filhos
comas respectivas frequncias. Se o padro de bandas do filho sob dvida for igual a umdos
padres esperados, o homem o pai. Como podemocorrer vrias combinaes de alelos
nos genitores nos 10 locos, pode-se afirmar que o homem o pai com 99,80469% a
99,9999046%de certeza. Portanto, o marcador uma ferramenta de grande utilidade para
esse fim, pois, no caso de humanos, antes do surgimento dos marcadores, utilizava-se o teste
dos tipos sanguneos dos indivduos envolvidos e somente emalguns casos conseguia-se
provar a paternidade.
Uma aplicao semelhante vemsendo adotada pela Universidade Federal de Minas
Gerais (UFMG) para identificar o trfico de papagaios. No caso, o procedimento consiste
emcadastrar todas as matrizes dos criadouros autorizados commicrossatlites. Apartir do
perfil de bandas dessas matrizes possvel prever os filhos. Se os animais apreendidos forem
diferentes desses previstos significa que so oriundos de trfico (Kalapothakis, 2007).
446
Emplantas, o teste de paternidade realizado de forma semelhante. Porm, outra
aplicao verificar o fluxo gnico, nocaso de transgnico, ou verificar misturas de sementes
transgnicas e no transgnicas, ou mesmo, verificar traos de transgnicos misturados em
qualquer alimento. Nesse caso de mistura de transgnicos, basta tomar amostras de DNAdo
material sob dvida e utilizar apenas um par de primer de PCR que amplifica todo ou
normalmente parte do gene do transgnico. Atcnica denominada de PCRemtempo real
permite que esses testes sejamfeitos rapidamente para se determinar a contaminao. Essas
tnicas so utilizadas emalgumas alfndegas oubarreiras de fiscalizao.
Uma aplicao importante no melhoramento a identificaode descendentes zigticos
emespcies que possuempoliembrionia como emCitrus. Emtais espcies, alguns descentes
so derivados do cruzamento e, portanto, herdamalelos de ambos os genitores, enquanto
que outros descendentes so derivados exclusivamente da me, geralmente de umembrio
diferenciado deuma clula da nucela, umtecido do ovrio. Umexemplo umestudo realizado
na UFLAvisando identificao de descendenteszigticos a partir docruzamento de Ponkan
comuma cultivar de citrus denominada Folha Murcha (Figura 18.14).
FIGURA 18.14. Identificao de prognies zigticas descendentes do cruzamento de Ponkan
x Folha Murcha por meio de marcadores microssatlites. Os descendentes zigticos so os
portadores da banda polimrfica nos genitores e derivada do genitor masculino (seta).
Umprocedimento denominado impresso digital (fingerprinting) consiste emutilizar
vrios marcadores que identificam um gentipo particular. Ele vem sendo empregado
atualmente para auxiliar na identificao de cultivares e linhagens melhoradas de plantas.
Para isso, utilizam-se vrios marcadores como o AFLP e os microssatlites, que esto
entre os mais confiveis. A impresso digital pode ser um dos meios de auxiliar na
identificao da cultivar ou linhagemdurante o seu registro no Ministrio daAgricultura e
tambmserve para o proprietrio questionar o uso indevido das mesmas, como roubo,
por exemplo.
No exemplo mencionado sobre a pirataria de papagaios no Brasil, o cadastramento
das matrizes commicrossatlites o fingerprinting dessas aves, permitindoa genotipagemde
cada uma, a distino entre elas e a identificao de seus filhos.
M ? ? 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22
447
18.4.1.2 Determinao da pureza varietal e do fluxo gnico
Na certificao decada cultivar, so utilizados os caracteres descritores, especialmente
os que se expressamna semente. Ocorre que esses caracteres, como cor de tegumento ou
listra na semente, podemmudar de tonalidade, por influncia ambiental econdicionar a rejeio
do lote de sementes, sob a alegao que ele no puro e sim uma mistura de diferentes
gentipos. Ouso de marcadores, especialmente os codominantes como os microssatlites,
que no so afetados pelo ambiente, pode auxiliar na verificao da ocorrncia ou no de
misturas.
Para a reprovao de umlote de sementes de soja, por exemplo, necessrio ocorrer
mais de cinco sementes fora do padro em0,5 Kg(4000 a 5000sementes). Umprocedimento
usado por Schuster et al. (2004), consistiu emavaliar entre 5 e 25 sementes atpicas de 21
lotes de sementes de oito cultivares, por meio de marcadores microssatlites.
Para reduzir o nmero de reaes SSR e custo de cada lote, as sementes atpicas
tiveramo DNAextrado de cada umae, posteriormente, foi realizadaamistura (bulk) equitativa
de DNAs de 5 a 8 sementes. Os autores mostraramque se dois DNAs diferentes (Ae B) so
misturados nas propores de 1A:1Bat 1A:15B, detecta-se o alelo mais raro de SSRat
na mistura de 1A:7B(Figura 18.15).
Para se detectar quais sementes atpicas so decorrentes da misturagentica, verificam-
se duas ou mais bandas (alelos) a partir do uso de umpar de primer. Se as sementes atpicas
no so decorrentes da mistura gentica observa-se apenas uma banda, aquela correspondente
a da semente padro da cultivar (Figura 18.16). Quando se observa a mistura emumbulk, os
DNAs das sementes so analisados separadamente para se comprovar a mistura.
FIGURA18.15. Amostras de DNAde soja contendo dois alelos (A
1
=banda superior eA
2
=banda
inferior) para o loco Satt181. As canaletas 1 a 15 apresentam o resultado da amplificao das
misturas na proporo 1A
1
:1A
2
(canaleta 1) at 1A
1
:15A
2
(canaleta 15). Gel de agarose 3%
corado com brometo de etdeo (Schuster et al., 2004).
Uma questo qual o nmerode sementes que deveser analisado por lote?Isso depende
do graude preciso que se pretende na anlise, porque a probabilidade de no se observar um
alelo derivado de mistura, que est presente na populao (probabilidade de falso negativo)
dada pela expressoP=(1-f)
n
emque: P a probabilidade de falso negativo; f a frequncia do
448
FIGURA 18.16. Anlise de pureza varietal em sementes de soja, variedade CD 209, utilizando
amplificao de DNA de sementes: a. Bulks de sementes (canaletas de 1 a 14, 23 e 24) e sementes
individuais (canaletas 15 a 22). Canaletas 1 a 3: amostra padro; 4 a 9: lote no 1; 10 a 12: lote no 2;
13 e 14: lote no 3; 23: mistura das amostras 15 a 18; 24: mistura das amostras 19 a 22. As canaletas
15 a 22 contmDNAde 8 cultivares utilizadas como controle de polimorfismo; b) Amplificao do
DNA de cada uma das sementes constituintes dos bulks que apresentaram variao. Acanaleta 1
contm DNAde 5 sementes da amostra padro. As canaletas seguintes contm DNAde sementes
individuais utilizadas na construo dos bulks analisados (Schuster et al., 2004).
alelo misturadono lote de semente; n o nmero de indivduos da amostra.Ainda segundo os
autores, comumaamostra de 15 sementesdetecta-se umalelo comfrequncia igual oumaior
de 26%com99%de probabilidade. Se for adotada a probabilidade de 95%, nas mesmas 15
sementes, pode-se detectar umalelo comfrequncia igual ou maior de 18%.
Umprocedimento semelhante pode ser usado para a deteco de fluxo gnico de um
transgnico (T) emuma cultivar no transgnica (NT). Para isso, pode-se usar o esquema
experimental ilustrado naFigura 18.17. Nessa reacoloca-se a cultivar transgnicano centro e
nos crculos concntricos so os locais aonde iro se tomar amostras de sementes da cultivar
no transgnica. As distncias entre os crculos dependem, evidentemente, da capacidade de
disperso de plenda espcie. Emcada crculo concntrico deve-se tomar uma amostra de,
por exemplo, 20 sementes, extrair o DNA de cada e realizar uma PCR para o primer do
transgnico. Para reduzir o custo, pode-se realizar a reao embulks de DNAde 8 sementes.
Umprocedimento alternativo e at mais simples, no caso de transgnico para resistncia
herbicida, consiste emgerminar as sementes coletadas naqueles crculos e trat-las como
herbicida, identificando, assim, a frequncia de plantas que receberamo plendo transgnico.
449
FIGURA 18.17. Esquema experimental que pode ser utilizado para se avaliar a extenso
de fluxo gnico. No centro da rea, semeia-se a cultivar transgnica e nos crculos
concntricos toma-se amostra de uma cultivar no transgnica para se avaliar a ocorrncia
de fluxo gnico.
18.4.1.3 Estimativa da taxa de cruzamento
Determinar a taxa de cruzamento de uma espcie de grande importncia tanto para
fins de conservao da variabilidade e, principalmente, para orientar os trabalhos de
melhoramento. Emespcies cultivadas umprocedimento consiste emtomar duas linhagens e
seme-las emlinhas alternadas. Pode-se determinar a taxa de cruzamento analisando-se um
carter qualitativo qualquer contrastante nas duas linhagens ou utilizando-se ummarcador
dominante oucodominante.
Com um marcador dominante, identifica-se uma banda polimrfica nas duas
linhagens. Colhe-se uma amostra de 100 sementes na linhagemque no possui a banda,
extrai-se o DNAdelas, ou germine-as e extraia o DNAde folhas jovens de cada planta
(seedling). Ataxa de cruzamento o dobro da porcentagem de plantas F
1
combanda
(Figura 18.18). Por exemplo, se entre as 100 plantas 3 possuem a banda, a taxa de
cruzamento de 6%. Arazo de se multiplicar por dois porque entre as plantas da
Quando no for possvel usar o transgnico, podem-se utilizar duascultivares diferentes
emumcarter monognico de fcil identificao, como cor de hipoctilo ou cor de flor. No
centro do esquema experimental ilustrado a seguir, deve-se semear a cultivar portadora do
fentipo dominante.
450
FIGURA 18.18. Resultado esperado na F
1
derivada do cruzamento de duas linhagens puras e
contrastantes para um marcador dominante ou codominante.
H tambma possibilidade de se estimar a taxa de cruzamento de uma espcie at
mesmo selvagem, a partir de uma amostra de plantas e a utilizao de umconjunto de
marcadores polimrficos nessas plantas. Os marcadores podem ser dominantes ou
codominantes. Se a amostra for de prognies com parentesco conhecido, como por
exemplo, umconjunto de prognies de meio-irmos, juntamente com as mes dessas
prognies, consegue-se estimar a taxa de cruzamento de forma mais precisa. Emtodos
esses casos utiliza-se umsoftware apropriado, como o MLDT (Ritland, 2011), para se
obter a estimativa.
Outra aplicao dos marcadores muito til no melhoramento a confirmao da
obteno de umhbrido a partir de umcruzamento. No melhoramento sempre necessrio
cruzar dois ou mais genitores para se obter o hbrido. Especialmente no caso de espcies
autgamas necessrio realizar cruzamento artificial, o qual leva falha, isto , certa
porcentagemdos supostos hbridos so, na verdade, produto de autofecundao do genitor
feminino. Parase distinguir essas plantasautofecundadas das F
1
, pode-seutilizar ummarcador
dominante ou codominate e comparar o padro de bandas das plantas F
1
comos padres
dos genitores (Figura 18.18).
18.4.1.4 Diversidade Gentica Estimativa da Similaridade ou
Dissimilaridade Gentica
Adiversidade gentica o polimorfismo entre indivduos de uma populao, emumou
mais fragmentos deDNA, identificados na formade presena de bandasde tamanhos diferentes
(alelos), derivadas de ummesmo loco, no caso de ummarcador codominante, ou na presena
e ausncia de bandas, no caso de marcadores dominantes. Umprocedimento amplamente
linhagemsembanda, tambmse espera ter havido a mesma taxa de cruzamento que no
foi detectada pelo marcador.
No caso de se utilizar ummarcador codominante polimrfico, a amostrade 100 plantas
pode ser colhida emqualquer das linhagens e a planta F
1
ter as duas bandas das linhagens
genitoras. Tambm, aqui, a taxa de cruzamento o dobro da porcentagemde plantas F
1
(Figura 18.18).
451
utilizado no estudode diversidade consiste emobter umgrande nmerode bandas polimrficas
entre os indivduos de uma populao, sem se preocupar se a variabilidade allica ou
gnica. Isto , ao se analisar uma populao de gentipos, comum marcador molecular
qualquer, cada banda polimrfica estar presente emalguns gentipos e ausente emoutros.
Esse resultado registrado por meio de uma matriz de dados de 0 e 1, correspondentes aos
vrios gentipose as vrias bandas, onde a presena da banda emumindivduo representada
por 1 e a ausncia por 0. Como a anlise dessa matriz fica difcil para se tirar qualquer
concluso sobreo parentesco dos indivduos, ento estima-se, comesses dados, a similaridade
gentica entreos indivduos. Existemvriasfrmulas alternativas para se estimar a similaridade
gentica (sg
ij
) entre os indivduos i e j. Uma expresso geralmente utilizada a proposta por
Jaccard, a partir da comparao de todas as bandas dos gentipos, dois a dois, por meio da
expresso sg
ij
= a/(a+b+c). Nessa expresso, a significa o nmero de combinaes coma
presena de uma determinada banda nos indivduos i e j; b as combinaes coma presena
da banda no indivduo i e ausncia no j; e c, as combinaes coma ausncia da banda no
indivduo i e presena no j.
A partir da estimativa de sg
ij
pode-se obter a dissimilaridade gentica (dg
ij
) = 1 -
sg
ij
. Como as estimativas de sg
ij
variamde 0 at 1, estimativas prximas de 0 indicamque
dois indivduos so geneticamente muito diferentes e prximas de 1, so muito similares.
No caso de se usar a dg
ij
interpreta-se de forma inversa, ou seja, estimativas prximas de
1 indicamque dois indivduos so geneticamente muito diferentes e prximas de 0, so
muitos similares.
Por exemplo, analisando-se g gentipos obtm-se g(g-1)/2estimativas de similaridade
gentica. Portanto, se fossemanalisados 100 gentipos, seriamobtidas 4950 estimativas.
Fica novamente claro que impossvel tirar qualquer concluso sobre os parentescos dos
indivduos, analisando-se umgrande nmero de estimativas. Para contornar esse problema,
utilizam-se os procedimentos estatsticos de agrupamento de dados como, por exemplo, a
anlise dosvizinhos, ouestimativa dos componentes principais, oudas coordenadas principais,
ou o uso da escala multidimensional. Os resultados dessas anlises normalmente so
representados emgrficos ou emdendrogramas.
Nas estimativas das similaridades feitas emuma amostra de gentipos considera-se o
parentesco decorrentes dos locos amostrados, as quaisdevemvariar se for repetida a amostra
da variabilidade gentica, ou seja, emcada amostra h umerro amostral. Assim, se comparo
duas estimativas de valores diferentes, so elas realmente diferentes ou podemser iguais, em
razo do erro de amostragemdos locos?Assim, pode-se usar o teste t para verificar se duas
estimativas de similaridade gentica so estatisticamente iguais ou diferentes, por meio da
expresso: t = (sg
1
- sg
2
)/s
sg
. Nessa expresso sg
1
e sg
2
correspondems duas estimativas
quaisquer desimilaridadegentica, es
sg
aoerromdiodasimilaridadegentica. Paracadaestimativa
452
TABELA 18.1. Similaridades genticas observadas e estimadas entre os genitores e as
populaes descendentes por retrocruzamento.
Genitores
RC
1
RC
2
Observada Esperada Observada Esperada
ESAL 696 0,72 0,80 0,68 0,62
G2333 0,41 0,40 0,36 0,33
CI140 - - 0,63 0,70
Quando se usam marcadores codominantes, pode-se estimar a similaridade ou
dissimilaridade gentica considerando a variabilidade allica e gnica. Nesse caso, almdas
estimativas de similaridade cujo significado o mesmo j vistoanteriormente, pode-se estimar
tambmas frequncias allicas e inclusive o valor de cada loco marcador para se estimar a
diversidade gentica. Ovalor de ummarcador ou loco ser to maior quanto maior for o
nmero de alelos e suas frequncias.
de similaridade gentica sg
ij
estima-se oseu erro pela expresso: s
sg
=[sg
ij
(1- sg
ij
)/n 1]
1/2
em
que n o nmero de dados utilizados na estimativa de sg
ij
isto , a+b+c na expresso de
Jaccard proposta anteriormente.
Asimilaridade ou dissimilaridade gentica corresponde ao parentesco entre dois
indivduos, denominados por alguns autores de parentesco por estado, isto , considera
o parentesco com base na amostra de locos entre os indivduos e no na origem dos
alelos desses locos. Os marcadores moleculares tmsido considerados mais teis para
esse fim, pois fornecem o relacionamento com maior preciso em razo do maior
polimorfismo e nmero de locos que podem ser amostrados, estabilidade ambiental,
natureza genotpica e simplicidade prtica. Estimativas de parentesco com base nos
marcadores mostramestaremprximas da realidade quando comparadas comdados de
genealogia, como ilustramos resultados obtidos por Hagiwara et al. (2001), utilizando
duas populaes de feijo obtidas por ume dois retrocruzamentos (RC), como indicado
na Tabela 18.1.
Estudos de diversidade gentica entre cultivares de feijo de diferentes origens foram
realizados no Departamento de Biologia da UFLA(Duarte et al., 1999). As estimativas de
dissimilaridade gentica entre as cultivares permitemconfirmar a origemde todas e inclusive,
predizer o nvel de parentesco entre elas, como ilustra-se na Figura 18.19. Nota-se, nessa
figura, que os dois grupos de cultivares mais discrepantes pertencema dois subcentros de
origemdo feijo, umAndino e outro Mesoamericano, que inclui o maior nmero de cultivares
estudadas.
453
FIGURA 18.19. Dissimilaridade gentica entre cultivares de feijo de origem andina e
mesoamericana. Observe o dendrograma na parte superior da figura, onde se utilizou o mtodo
de agrupamento UPGMA (ou mtodo com base na mdia dos vizinhos) e, na parte de baixo da
figura o uso da escala multidimensional.
Escolha de genitoras
Emgeral, nos programas de melhoramento j emandamento, os melhoristas utilizam
as linhagens selecionadas como parentais paradar continuidade ao programa. Uma dificuldade
que ocorre o fato das linhagens seremnormalmente muito aparentadas, o que implica em
reduzida variabilidadegentica nas populaes segregantese pequeno sucesso coma seleo.
Oideal seria utilizar as linhagens melhoradas como parentais, porm, cruzando-se aquelas
geneticamente mais contrastantes. H sugestes do uso de marcadores moleculares que
possuemalta variabilidade para auxiliar na escolha daquelas linhagens deinteresse. Entretanto,
454
alguns resultados so desencorajadores como os encontrados por Machado et al. (2000),
que verificaramque a diversidade gentica combase nos marcadores no mostrou associao
comprodutividade degros de feijo. Outraaplicao da diversidade gentica para selecionar
entre umconjunto de linhagens aquelas que melhor se combinampara formar umhbrido de
alta produtividade. Vrios trabalhos jforamfeitos, principalmente commilho. Os resultados
dos vrios estudos no so concordantes, isto , emalguns casos os marcadores conseguem
identificar as linhagens ideais, porm, emoutros no conseguem, como observouAmorim
(2005). Assim, comos resultados disponveis infere-se que a diversidade gentica estimada
pelos marcadores moleculares no prev, confiavelmente, os genitores ideais.
Organizao de germoplasma
Adiversidade gentica tambmutilizada para auxiliar no manuseio dos bancos de
germoplasma. Germoplasmauma amostra davariabilidade gentica ouallicade uma espcie,
como visto no captulo 2. Essa variabilidade preservada nos bancos para a maioria das
espcies cultivadas e, como passar do tempo, a tendncia o nmero dos representantes
(acessos) da amostra ficar muito elevado e de manuseio impraticvel. Esse grande aumento,
emparte se deve a acessos duplicados ou muito similares.
Como o interesse amostrar a variabilidade da espcie, o conhecimento do parentesco
dos acessos de umbanco de grande utilidade, pois, permite eliminar acessos duplicados ou
orientar na obteno de outros no representados no banco. Para esse fim, os marcadores so
muito eficientes, pois, asimilaridade oudissimilaridadegentica corresponde variao gentica
total entre os acessos e , normalmente, correlacionada coma variao dos vrios caracteres.
Outra aplicao da diversidade gentica estimada por meio dos marcadores na
amostragemdos acessosdo prprio banco parase obter uma coleonuclear de germoplasma.
Esta corresponde a 5%a 20%dos acessos de umbanco e que deve representar cerca 80%
da diversidade gentica. Autilidade emobter uma coleo nuclear para facilitar o manuseio
de ummenor nmero de acessos, que podemser melhores caracterizados e torn-los mais
disponveis para uso no melhoramento.
Seleo assistida emretrocruzamento
No melhoramento de plantas, esporadicamente necessrio utilizar genitores no
adaptados, portadores de alelos favorveis como os de resistncia patgenos. Nesse caso, as
geraes descendentes tero50%dos alelos decada genitor e, portanto, daquele no adaptado
sonamaioria, alelosindesejveis, excetoofavorvel. Assim, ummtodogeralmenteempregado
oretrocruzamento, queconsisteemcruzar aF
1
novamentecomogenitor adaptado(recorrente),
assimcomo as vrias geraes descendentes, para aumentar emcada uma a porcentagemde
alelos do recorrente. Oesquema seguinte representa a transferncia do alelo de resistncia
antracnose Co-4 do genitor doador To emfeijo, para o recorrente Carioca, que suscetvel.
455
Nesse esquema, observam-se as porcentagens de alelos dos genitores doador e
recorrente emcada gerao de retrocruzamento (RC). Onmero de geraes RC tanto
maior quanto menos adaptado for o genitor doador, podendo-se chegar at a seis ou mesmo
mais se o doador for selvagem. Nota-se que uma desvantagemdesse mtodo o tempo e
trabalho gasto emtodas essas geraes de RC.
Entretanto, importante frisar que as porcentagens de alelos do recorrente emcada
gerao de retrocruzamento uma mdia. Mesmo no primeiro retrocruzamento (RC
1
), onde
emmdia espera-se 75% de alelos do recorrente, teoricamente, dependendo do tamanho
dessa populao, h a possibilidade de ocorrer planta comat prximo de 100%. aqui que
a similaridade gentica pode auxiliar na seleo dessas plantas. Basta estim-la entre cada
planta de RC
1
e o genitor recorrente. As maiores estimativas de similaridade indicam as
plantas com maiores porcentagens de alelos do recorrente e que devem ser usadas num
prximo retrocruzamento ou selecionadas.
A preciso dessa previso aumenta com o uso de maior nmero de marcadores
distribudos o mais homogneo possvel emtodos os cromossomos. Emmilho, foi verificado
que trs marcadores emcada brao cromossmico, portanto, 60 marcadores, o nmero
ideal. Almda similaridade, uma alternativa estimar a porcentagemde alelos marcadores
do recorrente que ocorre emcada planta de retrocruzamento.
Proporo de alelos Semeaduras Gerao Cruzamento
--- 1
a
Genitores e Sem. F
1
To (Co.4Co.4) x Carioca(co.4co.4)
50%To e 50% Carioca 2
a
Planta F
1
Co.4co.4 x Carioca(co.4co.4)
25%To e 75% Carioca 3
a
Planta RC
11
(Inoculao)
50% co.4co.4 (eliminadas)
50%Co.4co.4 x Carioca(co.4co.4)
12,5%To e 87,5%
Carioca
4
a
RC
21
(Inoculao)
50%Co.4co.4 x Carioca(co.4co.4)
! ! ! !
! ! ! !
! ! ! !
(1/2)
m+1
To e
1-(1/2)
m+1
Carioca
m + 2
RC
m1
(Inoculao)
50% Co.4co.4 (autofecundada)
idem m + 3
RC
m2
(Inoculao)
75%Co.4___ (autofecundadas)
idem m + 4
Prognies 100%
resistentes
selecionadas
456
18.4.2 Uso de marcadores na identificao de genes
18.4.2.1 Construo de mapa molecular e identificao de QTL
semelhanados mapas genticos, pode-se tambmconstruir ummapade marcadores
moleculares ou de etiquetas. Aprincipal diferena emrelao ao mapa gentico, onde se
usamapenas caracteres qualitativos, o fatoda quantidade de marcadores ser muito elevada,
especialmente os de DNA, e pode-se emumcurto espao de tempo, conseguir ummapa
gentico molecular saturado. Isso quer dizer que se pode conseguir colocar marcadores
prximos, por exemplo, distanciados de 10 cMemmdia, ou idealmente menos, emtodos
os cromossomos da espcie. Essa possibilidade cria uma grande expectativa, que poder
utilizar esse mapa para etiquetar todos os alelos dos genes de interesse, mesmo os responsveis
pelos caracteres quantitativos.
Oprocedimento para se construir ummapa molecular consta emprimeiro lugar em
cruzar genitores, fenotipicamente contrastantes ao mximo. Aanlise para a obteno dos
marcadores pode ser realizada na F
2
, retrocruzamentos, em linhagens descendentes de
cruzamentos biparentais e mesmo nos dihaploides (Figura 18.20). Podem-se utilizar tanto os
marcadores dominantes quanto os codominantes, devendo-se preferir aqueles mais confiveis
ou reproduzveis etambmos de menor custo e que produzemresultadosmais rpidos. Alm
disso, os codominantes so mais informativos especialmente quando se utiliza populao
segregante onde ocorremheterozigotos (Figura 18.20).
Analisando-se uma populao segregante e obtendo-se o conjunto de marcadores,
necessrio construir o mapa molecular como auxlio de umsoftware adequado, e um
dos mais usados o Mapmaker. Basicamente o que o programa faz calcular as distncias
- frequncias de recombinao - entre as centenas de marcadores que se obtm. Com
esses dados, os marcadores so colocados nos cromossomos da espcie, isto , so
mapeados.
Os mapas moleculares mais completos j existentes so para o milho, tomate e
Arabidopsis. Esta ltima uma das espcies vegetais mais usadas emgentica molecular em
razo do seu ciclo de vida ser extremamente curto, de 20 a 30 dias, agilizando a obteno
dos dados. Apartir de 2500 primers foramcolocados, por meio do RAPD, 100 marcadores
somente no cromossomo 1 dessa espcie. Um exemplo de um mapa molecular est
representado na Figura 18.21.
De posse do mapa, necessrio proceder a avaliao fenotpica da populao
segregante, combase nos caracteres de interesse, isto , os caracteres cujos genes se deseja
marcar. No caso de caracteres quantitativos, geralmente controlados por vrios genes, cada
unidade do genoma marcada denominada de QTL(Quantitative Trait Loci). Cada QTL
no significa necessariamente umpoligene, pois, ele pode estar representado por mais de um
intimamente ligado, ouumbloco gnico.
457
Aavaliao fenotpica, especialmente dos caracteres quantitativos, deve ser feita da
forma mais precisa possvel, pois ela ir determinar a preciso de identificao dos QTLs
pelos marcadores. Por isso, a populao segregante deve ser avaliada emexperimentos com
repetio e, se possvel emvrios ambientes.
FIGURA 18.20. Eficincia dos marcadores em diferentes populaes segregantes. Note que
apenas o marcador dominante no informativo em F
2
quando o marcador est em repulso em
relao a outro marcador ou o alelo de interesse (Reiter et al., 1992).
458
FIGURA 18.21. Mapa molecular de uma espcie hipottica com n=x=5 cromossomos.
Almdesses pacotes especficos, a identificao de QTLs tambmpode ser feita por
meio da regresso linear mltipla, que utiliza vrios procedimentos de seleo dos QTLs
ligados aos marcadores e, umdos mais usados o Stepwise. Vrios pacotes estatsticos
podemser usados para esse fimcomo o SAS. Umexemplo da identificao de umQTLest
representado na Figura 18.22, derivada da Figura 18.21 e ummapa molecular parcial de
feijo est representado na Figura 18.23.
Como mapa molecular e a avaliao fenotpica da populao segregante procede-se
a identificao dos QTLs. Atualmente, existemvrios pacotes estatsticos (softwares) que
realizam essa identificao. O prprio Mapmaker j foi e continua sendo muito usado,
entretanto, existemoutros mais eficientes como o QTLCartographer. Adiferena bsica
desses dois pacotes o mtodo que eles utilizam. OMapmaker utiliza omtodoporintervalo,
que significa que o programa analisa para cada dois marcadores vizinhos ligados a existncia
de umQTLentre eles. Entretanto, pode haver QTLs prximos e fora desse intervalo, cujos
efeitos afetamo valor do QTLidentificado no intervalo. J o Cartographer usa omtododo
intervalo compostoeliminando essa deficincia. Almdesses pacotes existemvrios outros,
entre eles o GQMOL, de autoria do Prof. Cosme Damio Cruz da Universidade Federal de
Viosa e que est disponvel no site da universidade.
459
FIGURA 18.22. QTL fortemente ligado ao marcador E e fracamente ligado ao marcador H.
FIGURA 18.23. Identificao de quatro QTLs de feijo de resistncia ao odio, sendo dois
para resistncia e dois para suscetibilidade. Veja a linha de corte indicando a significncia de
seus efeitos e a direo dos mesmos na legenda abaixo do grfico.
460
Fontes de variao Graus de liberdade Quadrado mdio (varincia)
Gentipos 2
Aditivo 1 (MM - mm)
2
/2
Dominante 1 [Mm - (MM + mm)]
2
/2
Erro N
0
plantas F
2
3
Total N
0
plantas F
2
1
TABELA 18.2. Esquema geral da anlise de varincia entre gentipos de um marcador
codominante(M), com a respectiva decomposio dos efeitos aditivo e dominante, baseada na
avaliao de um carter qualquer na F
2
.
Se o efeito de gentipos for significativo indica que h diferenas genticas do carter
quantitativo explicada pelo marcador molecular. Tais diferenas podemser decorrentes dos
efeitos genticos aditivos ou dominantes. Veja que o efeito aditivo corresponde a diferena
entre a mdia de todas as plantas MM e a mdia de todas as plantas mm. J o efeito de
dominncia a diferena entre a mdia de todas as plantas Mme a mdia dos homozigotos.
evidente que as mdias dos gentipos dos marcadores referem-se ao carter avaliado na
Atualmente, nova abordagemvemsendo feita para a construo de mapa molecular,
denominada demapeamento por associao. Esseprocedimento dispensa o usode populaes
derivadas de cruzamento como as mencionadas na Figura 18.20. Emvez disso, procura-se
utilizar umgrande nmero de marcadores polimrficos emuma populao de indivduos que
podemser linhagens ou cultivares. Ouso de procedimentos estatsticos apropriados permite
identificar umdesequilbrio de ligao nessa populao e a realizao do mapeamento.
18.4.2.2 Identificao de QTL por meio da anlise por ponto
Embora os procedimentos mencionados sejamos mais eficientes na identificao de
QTLs, a anlise por ponto foi a primeira utilizada e comela fica mais fcil compreender o
processo de identificao de umQTL. Como os caracteres quantitativos so medidos pela
mdia e varincia, pode-se ter idia da participao do marcador para explicar o efeito do
QTLmedindo-se a varincia gentica do carter explicada pelo marcador. Almdisso, a
varincia gentica pode ser aditiva e/oudominante. Assim, o marcador pode tambmexplicar
essas duas varincias.
Para se realizar a anlise por ponto, aps a genotipagemda populao segregante com
os marcardores, realiza-se uma anlise de varincia para cada marcador como indicado na
Tabela 18.2. Nessa tabela, MM o homozigoto para umdos alelos do marcador, mm o
homozigoto para o segundo alelo do marcador e Mm o heterozigoto.
461
0MM = 1,98; 0MM/10 = 1,98/10 = 0,198; 0Mm = 5,66; 0Mm/20 = 5,66/20 = 0,283;
0mm = 3,64; 0mm/10 = 3,64/10 = 0,364;
0MM + 0Mm + 0mm = 11,28; (0MM + 0mm) = 5,62;
populao segregante. Se para umloco marcador o efeito de gentipos for no significativo na
anlise de varincia, implica que as mdiasde todos os gentipos domarcador so semelhantes,
isto : MM=Mm=mm. Isso acontece quando omarcador no est ligado aos QTLs do carter
avaliado. Veja o exemplo da anlise por ponto, utilizando os dados hipotticos da Tabela 18.3.
0
TABELA 18.3. Peso mdio da semente de feijo de 40 plantas F
2-
.
PLANTA GENTIPO PESO (g) PLANTA GENTIPO PESO (g)
1 MM 0.18 21 Mm 0.28
2 MM 0.20 22 Mm 0.26
3 MM 0.20 23 Mm 0.27
4 MM 0.21 24 Mm 0.26
5 MM 0.21 25 Mm 0.26
6 MM 0.18 26 Mm 0.27
7 MM 0.19 27 Mm 0.28
8 MM 0.21 28 Mm 0.30
9 MM 0.21 29 Mm 0.30
10 MM 0.19 30 Mm 0.28
11 Mm 0.28 31 Mm 0.35
12 Mm 0.30 32 Mm 0.38
13 Mm 0.29 33 Mm 0.36
14 Mm 0.29 34 Mm 0.35
15 Mm 0.30 35 Mm 0.38
16 Mm 0.28 36 Mm 0.36
17 Mm 0.31 37 Mm 0.36
18 Mm 0.28 38 Mm 0.37
19 Mm 0.26 39 Mm 0.37
20 Mm 0.31 40 Mm 0.36
Para se realizar a anlise de varincia fazem-se os seguintes clculos em que .
corresponde soma:
462
TABELA 18.4. Resumo da anlise de varincia por ponto (marcador M) considerando o
peso da semente do feijo.
FV GL SQ QM F
Gentipos (2) 0,13782 0,0689 336,3**
Aditivo 1 0,13778 0,1378 672,6**
Dominante 1 0,00004 0,0000
Resduo 37 0,00758 0,0002
Total 39 0,1454
Comesses clculos representam-se os resultados da anlise de varincia e realizam-se
os testes Fdos quadrados mdios (QM) como indicados na Tabela 18.4, dividindo-se cada
quadrado mdio peloresduo. Nota-se que todavariao gentica entre ospesos das sementes,
explicada pelos diferentes gentipos dos marcadores, decorrente do efeito gentico aditivo.
Portanto, o marcador eme est ligado ao carter peso da semente, sendo que o alelo Mdo
marcador identifica o alelo do QTL, responsvel pelo menor peso da semente e o alelomdo
marcador identifica o alelo do QTLresponsvel pelo maior peso.
Como a variao do carter quantitativo explicada pelo marcador emfuno de sua
ligao como QTL, quanto maior for a intensidade de ligao, maior ser a varincia entre os
gentipos dos marcadores. Inversamente, quanto menor for a intensidade de ligao, menor
ser a variao entre os gentipos dos marcadores e maior ser a variao entre indivduos
como mesmo gentipo do marcador, considerando o carter quantitativo.
Como mencionado, a anlise por ponto facilita o entendimento da identificao de
marcadores ligados a QTLs, porm, considerado umdos mtodos mais falhos, pois, alm
do QTL que est sendo marcado, outros podemocorrer prximos e afetar as mdias dos
gentipos marcadores, superestimando o efeito do QTL.
Assim, a soma de quadrados (SQ) para total =(0,18)
2
+...+(0,36)
2
(11,28)
2
/40 = 0,1454;
SQ
gentipos
= (1,98)
2
/10 + (5,66)
2
/20 + (3,64)
2
/10 - (11,28)
2
/40 = 0,13782;
SQ
Aditivo
= (1,98)
2
/10 + (3,64)
2
/10 (5,62)
2
/20 = 0,13778;
SQ
Dominante
= (5,66)
2
/20 + (5,62)
2
/20 - (11,28)
2
/40 = 0,00004.
SQ
resduo
= SQ
total
SQ
gentipos
= 0,1454 0,13782 = 0,00758
463
18.4.2.3 Eficincia da seleo assistida por marcador
Embora um enorme nmero de QTLs de vrios caracteres e de vrias espcies j
tenha sido identificado por vrios tipos de marcadores, so poucos os exemplos de uso
desses marcadores para auxiliaremna seleo, isto , a seleo assistida por marcadores
(SAM). Isso temacontecido porque a contribuio dos marcadores, na maioria dos casos,
no temsido aquela esperada para aumentar os ganhos coma seleo fenotpica.
H alguns poucos exemplos onde se obteve ganho elevado como uso de marcadores,
como no estudo realizado por Stuber (1994) emmilho. No trabalho, objetivou-se transferir
QTLs para maior produtividade de hbridos de milho existentes emduas linhagens elites, a
Oh43 e a Tx303 (Figura 18.24). Esses QTLs foramtransferidos para melhoraremos hbridos
derivados das linhagens B73 e Mo17, de duas populaes muito utilizadas nos Estados
Unidos, pertencentes a grupos heterticos diferentes. Para isso, as linhagens Oh43 e Tx303
foramcruzadas e, da F
2
foramobtidas 216 prognies F
2:3
. Essas foram genotipadas com
RFLP e, simultaneamente, foram avaliadas por meio da produtividade de gros, sendo
identificados 6 QTLs de cada linhagem.
Para transferir esses QTLs para as linhagens B73 e Mo17, elas foramcruzadas com
cada uma das 216 prognies F
2:3
eforamrealizados retrocruzamentos comesses dois genitores
recorrentes at RC
3
. Em RC
2
foram identificadas as plantas que eram portadoras dos
marcadores de QTLs desejados para serem cruzadas com os recorrentes e obter o RC
3
.
Cada planta RC
3
foi autofecundada por duas geraes e obtiveram-se 141 RC
3
S
2
comB73
e 116 RC
3
S
2
comMo17. Essas prognies foramdenominadas de melhoradas. Emseguida,
foramrealizados os seguintes top crosses:
464
FIGURA 18.24. QTLs (retngulos nos cromossomos) para maior produtividade de gros,
identificados por marcadores RFLP, da linhagemTx303 para transferir para a linhagemB73 ema e
da linhagemOh43 para a linhagem Mo17 emb (Stuber 1994).
141 RC3S
2
x Mo 17 (testador) 116 RC3S
2
x B73 (testador)
9 9
141 hbridos 116 hbridos
465
Aprodutividade mdia de gros dos 141 hbridos derivados do B73 melhorado foi
32%superior produtividade do hbridotestemunha Mo17xB73no melhorado. Igualmente,
a produtividade mdia dos 116 hbridos derivados do Mo17 melhorado foi 44%superior
produtividade do hbrido testemunha Mo17 xB73 no melhorado. Nota-se, nesse exemplo
commilho, grande contribuio da seleo assistida por meio de marcadores de QTLs da
produtividade de gros. Entretanto, na maioria dos estudos os resultados no so favorveis
como nesse exemplo.
As principais razes para o insucesso do uso de seleo assistida por meio de
marcadores de QTLsso, segundo Bernardo (2002): a. forteinterao deQTLs por ambientes,
isto , ummarcador identifica umQTLemumambiente e no o identifica emoutro; b. uso de
populaes pequenas que geramproblemas na estimativa do nmero de QTLs e de seus
efeitos; c. emgeral os QTLs explicamuma porcentagemda variao fenotpica menor do
que a variao gentica do carter. Esses problemas so ilustrados na Tabela 18.5 e nas
Figuras 18.25 e 18.26.
TABELA 18.5. A maior porcentagem dos QTLs se expressa em apenas um ambiente.
Interao QTLs por ambientes
1. Milho: 476 topcrosses S
2
; 11 locais - EUA (Rumin 2005)
N
0
marcas T
1
T
2
T
3
T
4
Total
nicas 27 19 33 53 95
Amplas 8 8 9 5 34
Total 35 27 42 58 129
% nicas 77,1 70,4 78,6 91,4 73,6
% amplas 22,9 29,6 8,6 8,6 26,4
2. Feijo: 336 linhagens; 15 ambientes MG (Melo 2000 e Teixeira 2004)
N
0
marcas
Produo de gros Peso 100 sementes
SSR RAPD SSR RAPD
nicas 9 15 6 12
Amplas 5 13 8 6
Total 14 28 14 18
% nicas 64,3 53,6 42,9 66,7
% amplas 35,7 46,4 57,1 33,3
466
FIGURA 18.26. A maioria dos QTLs identificados em vrios caracteres tem pequeno efeito
(Bernardo 2002).
Em razo desses problemas, uma estratgia geralmente adotada na maioria dos
programas de melhoramento praticar a seleo assistida apenas para os QTLs de grande
FIGURA 18.25. Simulao da superestimativa do efeito do QTL na ordenada em funo da
complexidade do carter (maior ou menor nmero de QTLs) e do tamanho da populao na
abcissa.
0
467
efeito. Por exemplo, foi identificado umQTLpor ummarcador microssatlite que explica
70%da variao da resistncia do feijo ao crestamento bacteriano.
18.4.2.4 Ligao de marcadores a alelos especficos
Aconstruo de ummapa molecular saturado e, principalmente, a sua associao com
os fentipos uma atividade cara, trabalhosa e que demanda muito tempo. Uma alternativa
para os geneticistas e melhoristas, consiste emfocalizar somente algumas regies do genoma,
identificando marcadores ligados apenas aos alelos de interesse. Isso acontece principalmente
para caracteres monognicos ou qualitativos e tambmos quantitativos que possuemum
gene de grande efeito.
Comesse objetivo, o procedimento considerado mais eficiente a anlise de bulks
segregantes, tambmdenominado de BSAda expresso Bulked Segregant Analysis. Ele
consiste emcruzar dois genitores contrastantes para o carter de interesse. Por exemplo, na
Universidade Federal de Lavras, foi utilizado o RAPD no feijo visando a identificar
marcadores ligados a umalelo de resistncia Colletotrichum lindemuthianum, que o
agente causal da antracnose, uma das doenas mais importantes da cultura. Para isso, foi
cruzada a cultivar Ouro, portadora do alelo dominante Co.9 de resistncia, como genitor
Carioca, que suscetvel. Foramobtidas as geraes F
1
e F
2
e as prognies F
2:3
de plantas
F
2
. As prognies F
2:3
tma finalidade de identificar as plantas F
2
homozigticas e contrastantes
para o carter de interesse. Isto , cada prognie F
2:3
foi semeada emuma linha e foi inoculada
como patgeno. Foramencontrados trs tipos de prognies: aquela com100%das plantas
resistentes, que indica que a prognie foi proveniente de uma planta F
2
homozigtica para o
alelo de resistncia, que dominante; aquelaque segregounaproporo de3plantas resistentes
e uma suscetvel, que indica que a prognie foi proveniente de uma planta F
2
heterozigtica;
e aquela prognie 100%suscetvel, porque foi descendente de uma planta F
2
homozigtica
para o alelo de suscetibilidade, que recessivo (Figura 18.27).
Previamente, foi extrado o DNA dos genitores, da F
1
e de cada planta F
2
. Com o
resultado de inoculao das prognies F
2:3
foram identificados os DNAs das plantas F
2
homozigticas, tanto aquelas como alelo dominante como aquelas como recessivo. Os
DNAs das plantas homozigticas de cada alelo foramequitativamente misturados e foram
ento obtidos dois bulks de DNA, umproveniente das plantas homozigticas como alelo de
resistncia e outro proveniente das plantas homozigticas como alelo de suscetibilidade.
Teoricamente, espera-se que emcada bulk, homozigtico para o alelo de interesse,
ocorra tambm homozigose para os segmentos de DNA que flanqueiam tal alelo.
Evidentemente, nas demais regies do DNA no ligadas ao gene de interesse, ocorre
recombinao dos segmentos de DNAdos parentais, durante a formao da gerao F
2
,
resultando na ocorrncia dos mesmos nos dois bulks. Consequentemente, os bulks
468
FIGURA18.27. Esquema do cruzamento visando a identificar as plantas F
2
homozigticas a partir
da inoculao das prognies F
2:3
provenientes de plantas F
2.
diferem- so polimrficos - apenas para os marcadores ligados ao alelo de resistncia ou de
suscetibilidade esero monomrficos para todasas outras regies dogenoma. Opolimorfismo
ocorre quandoomarcador apresentaligaocompletacomumdos alelos. Por exemplo, quando
se utilizamos DNAsdos genitores, da F
1
e dos bulks, eos analisampor meio de ummarcador,
como o RAPD, por exemplo, pode-se obter umresultado como o que ocorre naTabela 18.6.
Observa-se queo primer utilizado naanlise deRAPDproduziutrs bandas polimrficas
entre os genitores. Entre elas, a banda Bfoi tambmpolimrfica nos dois bulks, indicando
que ela corresponde a umfragmento de DNAque deve estar ligado ao alelo de resistncia.
As bandasAe Ccorrespondemaos fragmentos situados distantes do alelo de resistncia, ou
F
2:3
469
TABELA18.6. Resultado hipottico dos genitores, F
1
e dos dois bulks, analisados comRAPD, por
meio do qual umprimer produziu trs marcadores (bandas) polimrficos nos genitores. O marcador
Best ligado ao alelo de resistncia presente no genitor 1, pois ele ocorreu apenas no bulk resistente.
J as bandas Ae C so independentes do alelo de resistncia, porque ocorreramnos dois bulks, em
consequncia das recombinaes durante a produo da gerao F
2
.
Marcador
Genitor 1
(Ouro)
Genitor 2
(Carioca)
F
1
Bulk
(Resistente)
Bulk
(Suscetvel)
A
B
C
Omarcador foi identificado por meio do primer OPF10 e a frequncia de recombinao
entre ele e o alelo Co.9 de resistncia foi de 11,10%, com erro padro de 3,7%. Assim,
pode-se fazer seleo de plantas resistentes, na gerao F
2
, por exemplo, por meio do
marcador, sema necessidade de inoculao. Como o marcador se encontra a 11,10 unidades
de distncia do alelo Co.9, cerca de 4,8% das plantas selecionadas como marcador sero
suscetveis. Observa-se, na Figura 18.28, a presena do marcador nas plantas 22, 25 e 26,
onde ele no era esperado, porque so plantas suscetveis. Esses resultados inesperados
acontecemporque o marcador est ligado ao alelo de resistncia de forma incompleta, isto ,
ocorreu permuta gentica entre o marcador e o alelo de resistncia, durante a produo dos
gametas das plantas F
1
que geraram as plantas F
2
. Aconsequncia dessa permuta foi a
separao do marcador em relao ao alelo Co.9 e a observao do mesmo em plantas
suscetveis ou a ausncia nas resistentes.
Aidentificao de marcadores ligados a umdado alelo pode tambmser realizada a
partir do uso de retrocruzamento. Nesse caso as plantas da populao segregante, como a
mesmo emcromossomos diferentes, pois recombinaramcomos alelos de reao ao fungo e
por isso ocorreramnas plantas homozigticas resistentes e suscetveis, isto , nos dois bulks.
Portanto, essas bandas no tmvalor como marcador para o alelo de resistncia.
Lembre-se que foramextrados os DNAde todas as plantas F
2
. Portanto, utilizando o
primer que produziu o resultado apresentado na Tabela 18.6 e considerando apenas a
banda B, pode-se estimar a frequncia de recombinao entre o alelo responsvel pela
resistncia e o marcador B. Para o cruzamento Ouro xCarioca, foi encontrado ummarcador
ligado ao alelo de resistncia C. lindemuthianum, como ilustra a Figura 18.28.
470
FIGURA18.28. Anlise RAPD dos componentes dos bulks resistente e suscetvel, dos genitores e
dos prprios bulks como primer OPF10 - 5GGAAGCTTGG 3; a banda indicada pela seta est
ligada ao alelo de resistncia; genitor Carioca (Col. 1), Ouro (Col. 2), bulk resistente (Col. 3 e 15),
bulk suscetvel (Col. 4 e 16), plantas homozigticas componentes do bulk resistente (col. 5 a 14) e
plantas homozigticas componentes do bulk suscetvel (col. 17 a 28).
Utilizando esse procedimento, foi identificado ummarcador RAPDamplificado pelo
primer OPL04, comcerca de 1000 pares de bases (pb) ligado ao alelo de resistnciaCo-4
2
do feijo, contra o mesmo fungo C. lindemuthianum. Para isso, foi cruzado o genitor
resistente G2333 como suscetvel ESAL696 e a gerao F
1
foi novamente cruzada como
genitor suscetvel (recorrente). Foi utilizado esse retrocruzamento porqueo genitor resistente
uma linhagemno adaptada, isto , possui muitos alelos desfavorveis s condies de
cultivo emMinas Gerais. J, a linhagemESAL 696 muito mais favorvel para o cultivo.
Assim, na populao de retrocruzamento obtida existememmdia 75%de alelos da ESAL
696 e 25% de G2333 (Figura 18.29). Observa-se nessa figura o polimorfismo da banda
indicada comuma seta nos dois genitores e tambmnos bulks. Almdisso, observa-se que a
banda ocorreu emtodos os componentes do bulk resistente (figura do meio) e no ocorreu
emnenhumcomponente do bulk suscetvel (figura inferior). Portanto, no foramidentificadas
plantas recombinantes nos dois locos, o do gene de reao ao patgeno e do loco marcador.
Essa a situao ideal, pois, o marcador est muito prximo do alelo de resistncia e implica
em100%de eficincia na seleo de plantas resistentes, emuma populao segregante, por
meio do marcador.
Entretanto, quando o marcador ideal encontrado do tipo RAPD, como j mencionado,
ele temoproblema de baixa repetibilidade. Para eliminar esse problema, realiza-se o isolamento
do DNA apenas da banda ideal, a qual clonada em um plasmdeo e, posteriormente,
sequenciada. Apartir da sequncia desenha-se umpar de primers comcerca de 20 bases
gerao F
1
de um retrocruzamento um (RC
1
), por exemplo, devem ser avaliadas para o
carter de interesse, como fimde se construir os bulks segregantes de DNA. No caso de
no se conseguir realizar uma avaliao eficiente emplantas individuais pode-se obter uma
prognie F
2
de cada planta F
1
, isto , realizar a avaliao na populao de prognies F
1:2
do
RC
1
.
471
para se amplificar essa banda commaior fidelidade. Isto , transforma-se o RAPDemPCR.
Esse procedimento chamado de SCAR, que significa regio amplificada de sequncia
caracterizada, como comentado no incio desse captulo.
Se houver permuta entre o marcador e o gene de interesse a banda aparecer nos dois
bulks, pormcomdiferentes intensidades. Quanto mais distantes foremo marcador e o gene,
menos distintos sero os dois bulks at no ponto emque eles so independentes e a banda
aparecer comigual intensidade nos dois bulks. Entretanto, importanteutilizar-se umnmero
adequado de indivduos emcada bulk, pois, se o nmero for muito pequeno, h a possibilidade
de se identificar polimorfismo nos bulks, mesmo se o marcador e o gene foremindependentes.
Nesse caso, Mackaye Caligari (2000) fornecemas expresses estimadoras das probabilidades
de ocorrerem polimorfismo por acaso, em funo do nmero de indivduos do bulk de
populaes segregantes F
2
ou do primeiro retrocruzamento (RC
1
) (Tabela 18.7). Observa-
se queo polimorfismo por acasopode ser evitado utilizando-serelativamentepoucos indivduos
F
2
como a partir de quatro. Porm, no caso de retrocruzamento necessrio utilizar pelo
menos 10. Isso acontece porque uma F
2
uma populao segregante proveniente de
recombinaes dos locos nos dois genitores, enquanto que no retrocruzamento, a
recombinao que se expressa fenotipicamente ocorre somente no genitor F
1
.
FIGURA 18.29. Padro de bandas dos produtos de amplificao comoprimer OPL04
1000
dos bulks
resistente e suscetvel (B
1
e B
2
, respectivamente) e dos genitores G2333 e ESAL 696 (P
1
e P
2
,
respectivamente) (figura superior), dos componentes do bulk resistente (figura do meio) e do bulk
suscetvel (figura de baixo). Aseta indica a banda de 1000 pb, ligada ao aleloCo-4
2
, presente emB
1
e
P
1
e nos componentes do bulk resistente. M o marcador de tamanho de fragmentos de DNA.
472
TABELA18.7. Probabilidade (%) de identificar polimorfismo por acaso emfuno do nmero de
gentipos (n) do bulk (Mackay e Caligari , 2000).
n 4 5 6 10 Estimadores
F
2
0,80 0,20 0,05 0,0002 2[1-(1/4)
n
](1/4)
n
RC
1
11,72 6,05 3,08 0,20 2[1-(1/2)
n
](1/2)
n
473
PROBLEMASPROPOSTOS
1. Considere os fragmentos de DNAresultantes da digesto parcial de uma molcula
com duas enzimas de restrio, a Eco RI e a Hae III, conforme representados no
problema 5 do Captulo 17.
a) Se as sequncias reconhecidas pelas duas enzimas de restrioforemutilizadas como
sonda para marcar os fragmentos, quais sero identificados por meioda tcnica RFLP?
2. Emumprograma de melhoramento de bovinos uma vaca(V) de alta qualidade deveria
ser inseminada comsmende umtouro (P
1
) paraa produo de umhbrido. Entretanto,
houve dvida sobre uma possvel mistura entre vrios frascos de smen, no caso com
os dos touros P
2
, P
3
e P
4
. Aps obtido o descendente da vaca inseminada procurou-
se identificar o verdadeiro pai por meio do RFLP. Os resultados de padres de bandas
de cada indivduo esto representados a seguir:
Qual o provvel pai do descendente? Justifique.
3. Emumprograma de melhoramento de equinos, uma gua deveria ser cruzada comum
garanho A. Entretanto, dois outros garanhes (B e C) escaparamde suas baias e
estiveramemcontato coma gua, na poca emque ela estava no cio. De posse do
smen coletado da gua, visando a descobrir quem ser o pai do descendente, foi
realizada a anlise de RFLP a partir do DNA de todos os animais envolvidos. Os
resultados esto apresentados a seguir:
Odescendente a ser obtido ser o esperado no programa de melhoramento? Justifique.
474
a) Qual o controle gentico da reao ao fungo e da presena/ausncia do marcador?
b) Ser que o marcador est ligado ao alelo de resistncia? Justifique.
c) Qual a distncia entre o marcador e alelo de resistncia?
4. Foi realizado umestudo semelhante ao doexerccio 4. S que foi utilizado o cruzamento
da cultivar Ouro (resistente) coma linhagemP24 (resistente). Asegregao emF
2
foi
de 127 plantas resistentes e 9 suscetveis. Qual o controle gentico da reao do feijo
ao patgeno?
Foramidentificados dois marcadores RAPD, possivelmente ligados a umdos alelos
de resistncia. Ummarcador o amplificadopelo primer Fe outro foi amplificado pelo
primer R. As segregraes observadas emF
2
considerando: a. Reao e o fragmento
de DNAamplificado pelo primer F; b. Reao e o fragmento de DNAamplificado
pelo primer R, foramas seguintes:
a. REAO E PRIMER F b. REAO E PRIMER R
Fentipos Freq. observadas Fentipos Freq. observadas
Resistente, com marca 111 Resistente, com marca 100
Resistente, sem marca 15 Resistente, sem marca 24
Suscetvel, com marca 2 Suscetvel, com marca 2
Suscetvel, sem marca 9 Suscetvel, sem marca 6
Fentipo Nmero de plantas F
2
Resistente e com marcador 63
Resistente e sem marcador 4
Suscetvel e com marcador 7
Suscetvel e sem marcador 16
4. Foi realizado o cruzamento entre a cultivar de feijo Carioca(suscetvel ao agente da
antracnose) e a linhagemP45(resistente). As plantas F
2
foraminoculadas coma raa
89 do fungo patognico e, simultaneamente, foramanalisadas por meio do RAPD
utilizando-se a tcnica do bulk segregante. Foi identificado um marcador que
possvelmente esteja ligado ao alelo de resistncia. Os resultados obtidos esto na
tabela seguinte:
475
As frequncias observadas emF
2
considerando somente os dois marcadores foramas
seguintes: 86 plantas comF
+
R
+
, 17 plantas comF
+
R
-
, 19 plantas comF
-
R
+
e 11 plantas
comF
-
R
-
, onde o +significa a presena do marcador na planta e o significa a ausncia.
a) Ser que os marcadores Fe Resto ligados, cada uma umalelo de resistncia, ou
os dois marcadores a umdos alelos de resistncia? Justifique.
b) Comente sobre a utilidade desses doismarcadores para auxiliar naseleo de plantas
resistentes empopulaes segregantes.
c) Emumestudo prvio foi constatado que o marcador amplificado pelo primer Fest
ligado ao alelo de resistncia da cultivar Ouro. Assim, quais as concluses sobre os
resultados apresentados?
5. Como se sabe a quantidade de DNAnos genomas das plantas superiores varia de 10
8
a 10
11
, na maioria das espcies cultivadas. Foi realizado um estudo com AFLP,
empregando-se umpar de enzimas de restrio, uma que reconhece sequncia de seis
pares de base e a outra que reconhece sequncia de quatro pares de base, para digerir
o DNA de uma espcie com 10
8
pares de base no genoma e de outra espcie com
10
11
pares de base no genoma. O par de primers deve ser degenerado em quantas
bases para amplificar cerca de 50 fragmentos de DNAemcada espcie?
476
477
Regulaoda ExpreoGenetica
19 REGULAO DA
EXPRESSOGNICA
19.1 INTRODUO
Quando estudamos as bases citolgicas da herana, no Captulo 4, vimos que, por
meio da reproduo sexuada qualquer organismo eucarioto se origina a partir do zigoto, que
possui todos os genes necessrios para a expresso de todos os caracteres durante a sua
vida. Vimos tambmque as clulas de todos os tecidos e rgos so provenientes do zigoto
por mitose, sendo, portanto, geneticamente idnticas. No entanto, cada tecido possui clulas
comforma e funes particulares. Aparentemente, essa diversidade morfolgica e fisiolgica
das clulas geneticamente idnticas uma incoerncia biolgica. Tomando uma planta de
milho como exemplo, qual a explicao para que clulas geneticamente iguais produzamas
clulas da raiz comfunes de absoro de nutrientes, as clulas do caule comfunes de
sustentao e transporte de nutrientes, as clulas das folhas que fazema fotossntese e as
clulas das flores comfuno reprodutiva? Perguntado de outra forma, qual a causa para
que clulas geneticamente iguais adquiramformas e funes diferentes? Oque ocorre que
entre as clulas do corpo de um indivduo, cada uma utiliza apenas algumas de suas
informaes, pois se utilizassemtodas, elas seriammorfolgicae funcionalmente semelhantes.
Este fato conhecido por diferenciao celular.
Podemos perguntar emseguida, como a diferenciao celular acontece?Aresposta
que nemtodos os genes se expressamemtodas as clulas. Esses genes pertencema dois
grupos principais. Oprimeiro grupo corresponde aos genes que se expressamemtodas as
clulas e que so responsveis por funes comuns, como os genes de rRNA, tRNA, das
protenas ribossmicas e de umgrande nmero de enzimas, sendo, por isso, chamados de
genes constitutivos oudomsticos. Osegundo grupo corresponde aosgenes responsveis
por funes especficas, que s se expressamemalgumas clulas e apenasemcertos momentos
da vida do indivduo, e so chamados de induzidos ouespecficos. Por exemplo, nas folhas
do milho, almdos genes constitutivos, esto funcionando tambmos genes responsveis
pela fotossntese, que so especficos para os rgos verdes e no se expressamemoutros
tecidos, comoos da raiz. Demodo anlogo, os genesresponsveis pela meiose sse expressam
no pendo e na boneca, durante umcurtssimo perodo da vida da planta e, portanto, tambm
se enquadramna categoria de genes induzidos. Assim, nota-se que alguns genes no esto
478
funcionando em todas as clula, isto , esses genes esto desativados. Podemos ento
compreender adiferenciaocelular, de uma formamuito simplificada, como ofatodediferentes
genes expressarem-se emdiferentes tecidos e emdiferentes estdios de desenvolvimento do
indivduo, ouseja, como se existisse ummecanismo semelhante a uminterruptor e os genes
emquesto correspondessems lmpadas, ora ligados ora desligados.
Para entendermos diferenciao celular necessrio conhecermos quais so os fatores
responsveis pela ativao de alguns genes especficos e desativao de outros, nos vrios
tecidos e rgos de umindivduo. Tais fatores incluemdesde os externos ao indivduo, como
luz, temperatura, at as vrias protenas que se associamao DNAe induzema transcrio de
umdado alelo ou a sua desativao. Como a regulao da expresso gnica muito mais
complexa nos eucariotos, mais uma vez vamos comentar commais detalhes como ela ocorre
nos procariotos, nos quais ela mais simples e melhor compreendida, para, emseguida,
fazermos alguns comentrios sobre a regulao naqueles organismos mais complexos.
19.2 PROCARIOTOS
Como j conhecido, os procariotos so organismos unicelulares sem ncleo
diferenciado. Apesar de seremmuito mais simples do que os eucariotos, eles so semelhantes
emrelao aos dois grupos principais de genes, isto , os domsticos e os especficos.
Nos procariotos, os genes domsticos so os que se expressamemuma taxa relativamente
constante, e so tambm chamados de constitutivos. J os especficos, correspondem
queles que s se expressam sob certas condies, visando a adaptar o organismo ao
meio onde ele se encontra, e so chamados de induzidos. Esses ltimos codificamprotenas
e enzimas que variamacentuadamente emconcentrao e suas expresses so, portanto,
reguladas.
Os genes mais conhecidos comexpresses reguladas so de dois grupos. Oprimeiro
corresponde aos responsveis pela produo de enzimas, as quais permitems bactrias
obteremnutrientes e energia, como a utilizao de lactose pela E. coli, e referido como
sistema indutivo ou represso catablica. Osegundo grupo de genes produz as enzimas
envolvidas na biossntese de substncias essenciais, como os aminocidos, e denominado
de via biossinttica ou anablica.
19.2.1 Sistema Indutivo - O Uso da Lactose pela Escherichia coli
As primeiras evidncias experimentais que elucidarama regulao da expresso gnica
foramobtidas por dois pesquisadores franceses, Franois Jacobe Jacques Monod, utilizando
a bactria E. coli e explicando a base bioqumica da utilizao da lactose. Eles receberamo
prmio Nobel de Fisiologia e Medicina, em1965, como reconhecimento de suas descobertas.
Ogrande mrito dessa descoberta deveu-se no somente ao entendimento do uso da lactose
479
pela E. coli; mas, principalmente por ter despertadoo interesse dos pesquisadores emexplicar
os processos gerais de regulao da expresso gnica emdiversos sistemas biolgicos.
Emseus trabalhos foi utilizada a bactria E. coli, que, evidentemente, necessita de
energia do meio de cultura para se desenvolver. Como qualquer organela biolgica, ela
econmica, isto , a bactria utiliza a fonte energeticamente menos dispendiosa, no caso, a
glicose. Se no meio de cultura existe a glicose e tambmoutros carboidratos, ela ser utilizada
emprimeiro lugar.
Otrabalho desses autores consistiu emesclarecer como aE. coli utiliza o dissacardeo
lactose como fontede energia. Para abactria usar esse carboidrato elanecessita produzir trs
enzimas, a % -galactosidase, a permeaseea transacetilase. A A % -galactosidase hidrolisaa lactose
emdois monossacardeos, a galactose e a glicose. Apermease auxilia no transporte da lactose
atravs damembranadabactria, noprocessodeabsoroparaointerior daclula.Atransacetilase
tema funode transferir o grupoacetil da acetil co-enzimaApara os % -galactosdeos.
Se houver disponibilidade de glicose no meio de cultura, como j comentado, aE. coli
no precisa sintetizar as enzimas. por essa razo que emummeio s comglicose, cada
bactria possui apenas cerca de dez molculas de % -galactosidase. No entanto, se a bactria
colocada emoutro meio emque a lactose a nica fonte de carbono, onmero de molculas
de % -galactosidase aumenta aceleradamentee chega a representar 10%das protenas solveis
da bactria. Juntamente com essa enzima, a permease e a transacetilase so tambm
sintetizadas. Foi a observao desse comportamento da bactria que levou os pesquisadores
franceses a perguntaremcomo a E. coli capaz de alterar bruscamente a concentrao das
trs enzimas para permitir o uso da lactose?
Aresposta foi obtidaapartir de engenhososexperimentosrealizadosnofinal dadcadade
1950 e incio da dcada de 1960, que mostraramque a % -galactosidase codificadapelo alelo
z
+
, a permease pelo alelo y
+
e a transacetilase pelo alelo a
+
. Oexpoente +indica que o alelo
funcional, isto, codifica umacadeiapolipeptdica. J, o expoente- indica umalelomutantee, em
vrias ocasies, elenofuncional, portanto, noproduzumacadeiapolipeptdica. Foi constatado
tambmque os trs genes so mapeados juntos na ordemz, y, a e so denominados de genes
estruturais (Figura 19.1). Adescoberta dos trs genes e a disposio deles no cromossomo
bacterianofoi feitautilizando-semutantes deficientes paraumadas trs enzimas, por exemplo, oz
-
y
+
a
+
, que noutilizava a lactose, porque noproduzia a % -galactosidase.
FIGURA 19.1. Segmento do cromossomo (DNA) da E. coli com a disposio dos genes
estruturais z, y e a, responsveis pelo metabolismo da lactose.
480
Entretanto, a questo ainda no esclarecida era como os trs alelos z
+
, y
+
e a
+
so
induzidos a seremtranscritos para formao das enzimas? Ofato de as enzimas no serem
sintetizadas na ausncia da lactose levouos pesquisadores a imaginaremque alguma substncia
impedia a transcrio dos genes que as codificam. Tal suspeita foi esclarecida a partir da
descoberta de ummutante que produzia as trs enzimas necessrias para o uso da lactose,
mesmo na ausncia desse carboidrato, isto , ummutante onde os genes responsveis pelas
trs enzimas no estavamimpedidos de seremtranscritos. Apartir do momento emque foi
adicionado nesse mutante umplasmdeo comuma cpia no mutante dos genes da lactose,
foi restabelecido o controle da produo das trs enzimas, isto , elas somente passarama
ser sintetizadas na presena da lactose. Portanto, o mutante realmente no produzia alguma
substncia cuja funo era impedir a transcrio dos genes que codificamas trs enzimas.
necessrio esclarecer que a palavra plasmdeo, utilizada neste pargrafo, refere-se a um
pequeno cromossomo bacteriano que, normalmente, contmumreduzido nmero de genes,
nessecaso, osgenes responsveis pela utilizaodalactose. Observe queo mutante, juntamente
como plasmdeo, transformou-se emuma bactria semidiploide, pelo menos para os genes
da lactose e, por isso, ela chamada de merozigoto. No caso de um merozigoto ser
heterozigtico, ele recebe o nome de heterogenoto.
Utilizando a bactria mutante e tambmportadora do plasmdeo comos genes normais
da lactose, portanto com duas cpias - alelos - desses genes, foi descoberto um gene
regulador denominado i, que est situado antes do ponto de incio da transcrio dos genes
responsveis pelas trsenzimas, portanto, montante ouesquerda do genez. Posteriormente,
foi descoberto queo aleloi
+
codifica aprotenarepressora, cujafuno impedir a transcrio
dos alelos z
+
, y
+
e a
+
.
Somente podemos entender a regulao da expresso dos genes estruturais se
conhecermos como atua a protena repressora. Para isso, descobriu-se tambmque entre
os genes estruturais e o regulador existemdois stios contguos, o stio promotor - p - e o
stio operador - o -(Figura 19.2a). Ostio promotor o local onde se liga a RNApolimerase
e o stio operador onde se liga a protena repressora, na ausncia de lactose no meio de
cultura.
Aprotena repressora possui alta afinidade pelo stio operador, ocupando cerca de 24
pares de nucleotdeos do DNA, dos quais 8 so comuns ao stio promotor. Portanto, se a
bactria est crescendo emum meio de cultura semlactose, ela no transcreve os genes
estruturais, simplesmente porque a protena repressora bloqueia a passagem da RNA
polimerase para transcrever os genes estruturais (Figura 19. 2b).
Quando a bactria cresce emummeio s comlactose, esse carboidrato se combina
coma protena repressora inativando-a e, por essa razo, tal protena perde afinidade pelo
stio operador. Simultaneamente, a RNApolimerase ligada no stio promotor liberada para
481
realizar a transcrio dos genes estruturais. Esses genes so transcritos emumnicomRNA
policistrnico - mRNAque possui sequncias de alelos de vrios genes intimamente ligados
ou contguos - que, aps traduzido, resulta na produo das trs enzimas que permitemaE.
coli utilizar a lactose (Figura 19.2c). Alactose , portanto, a indutora da expresso dos
genes estruturais e, por essa razo, esse mecanismo de regulao chamado de sistema
indutivo.
Como j salientamos, a E. coli tempreferncia pela glicose, por ser uma fonte de
carbono que requer menos energia para sua utilizao como, por exemplo, deixar de
sintetizar as trs enzimas do operonda lactose. Assim, emummeio de cultura onde ocorrem
glicose e lactose, primeiro a bactria utiliza a glicose, ao mesmo tempo emque reprime o
operon da lactose. Vimos que a represso do operon da lactose pode ocorrer quando
esse carboidrato est ausente. No entanto, na presena de glicose e lactose, qual mecanismo
de represso estaria atuando, para permitir que a bactria seja mais eficiente e utilize primeiro
a glicose?
necessrio lembrar que a lactose presente no meio de cultura, inativa a protena
repressora proveniente do alelo i
+
, no sendo, portanto, a causa de represso do operon.
Dessa forma, como se processa ento essa nova regulao?
Constatou-se que a glicose participa do mecanismo de represso, reduzindo a
afinidade da RNApolimerase pelo stio promotor do operonda lactose. Consequentemente,
o operon no transcrito. A atuao da glicose nesse mecanismo de regulao ficou
conhecida aps ter sido descoberto que o stio p possui duas regies. Aprimeira o local
onde se ligam dois cofatores de transcrio e a segunda, o local onde se liga a RNA
polimerase propriamente dita. Os dois cofatores so a protena ativadora do catabolismo
- CAP - e o monofosfato de adenosina cclico - AMPc. Aprotena CAP o produto de
outro gene regulador, o crp, que se situa distante do operon da lactose. O AMPc
proveniente doATP. Esses dois cofatores se combiname formamo composto CAP-AMPc
que se liga ao stio p, criando assim um ambiente qumico com afinidade para a RNA
polimerase se ligar (Figura 19.3). Opapel da glicose, quando presente no meio de cultura,
reduzir a quantidade de AMPc e, consequentemente, o composto CAP-AMPc no se
forma e a RNApolimerase no se liga no stio p, reprimindo assima sntese das enzimas
que permitemo uso da lactose. Tal represso permanece at que toda a glicose do meio de
cultura seja utilizada pela bactria.
482
Considerando o que foi exposto, observa-se que a expresso dos genes do operon da
lactose est sob dois mecanismos regulatrios. Um aquele que inibe a transcrio dos
genes estruturais por meio da protena repressora codificada pelo aleloi
+
. Emrazo de esse
FIGURA 19.2. A. Operon da lactose que compreende os stios p e o e os genes estruturais z,
y e a. So indicados os pares de base que limitam os stios p e o. O par de base +1 o primeiro
transcrito. O gene regulador i no considerado parte do operon. B. Nas bactrias crescendo
em meio de cultura sem lactose o operon est reprimido pela protena repressora que se ligou
ao DNA entre as posies -5 at +21, portanto, sobrepondo o stio p e impedindo a passagem
da RNA polimerase. Se as bactrias esto crescendo em um meio com lactose, o complexo
repressor-lactose perde afinidade pelo stio o e a RNA polimerase ento liberada para
transcrever os genes estruturais, resultando na produo das trs enzimas. mRNApolicistrnico
corresponde ao mRNA que possui uma cpia de alelos de dois ou mais genes diferentes, sendo
de trs genes no presente exemplo.
483
FIGURA 19.3. Operon da lactose com destaque do stio p subdividido no stio do CAP-AMPc
e no stio da RNApolimerase propriamente dita. Ocomposto CAP-AMPc forma-se na ausncia
de glicose no meio e liga-se no stio p, aumentando a sua afinidade para ligar-se com a RNA
polimerase, promovendo a transcrio dos genes que permitem a utilizao da lactose.
19.2.2 A Sntese de Triptofano em Escherichia coli
Otriptofano umaminocido importante para a bactria crescer no meio de cultura.
Quando ele estpresente no meio, abactria, evidentemente, utiliza aqueleque est disponvel.
Entretanto, emmeio de cultura semtriptofano, ele necessita ser sintetizado pela bactria.
Nesse caso ele o produto final de uma via metablica onde participamcinco enzimas. Tais
enzimas so sintetizadas a partir dos cinco genes estruturais do operondo triptofano (Figura
19.4). Podemos constatar que o operondo triptofano semelhante ao da lactose, isto , ele
possui os stios promotor e operador seguido de cinco genes estruturais.
alelo ser responsvel pela represso do sistema ele chamado de regulador negativo. O
segundo mecanismo responsvel pela induo da transcrio dos genes estruturais, sendo,
por isso, chamado de regulador positivo.
FIGURA 19. 4. Operon do triptofano em E. coli. O stio promotor representado por p e o
operador por o. Os cinco genes estruturais so representados por E, D, C, B e A e so
transcritos em um mRNA policistrnico.
484
Aconcentrao das enzimas da via metablica do triptofano varia emuma amplitude
de 700 vezes, quando a bactria cresce em meio com ou sem triptofano. Tal variao
conseguida pela bactria, para adaptar-se rapidamente emdiferentes meios de cultura, por
meio da regulao da expresso dos genes estruturais do operon.
Umdos processos de regulao consiste na atuao de uma protena repressora, que
codificada pelo alelo regulador trpRe que est situado distante do operon do triptofano.
No entanto, ao contrrio do que ocorre com o operon da lactose, tal protena somente
funciona como repressora quando complexada como triptofano, adquirindo assimafinidade
pelo stio operador. Por isso, esse processo chamado de regulao pelo produto final e
o triptofano umco-repressor. Comoo stio operador sobrepe o stio promotor, o repressor
- triptofano + protena repressora - impede a ligao da RNA polimerase no stio p e,
consequentemente, no ocorre a transcrio dos genes estruturais.
De acordo comesse mecanismo de regulao, se a E. coli encontra-se emummeio
semtriptofano, no ocorre a formao do repressor - triptofano + protena repressora - e a
RNA polimerase liga-se ao stio p, promovendo a transcrio do operon que resulta na
sntese de triptofano. Como aumento do nvel desse aminocido no meio de cultura, ele se
complexa coma protena repressora e forma o repressor ativo, que reprime a transcrio e
impede a sntese de triptofano.
Ocorre que apenas a regulao pelo produto final no proporciona o nvel adequado
de triptofano na clula, isto , a E. coli sintetiza umexcesso do aminocido, quando emum
meio de cultura semtriptofano, oque no coerentecoma economia dossistemas biolgicos.
Para atender a esse requisito a evoluo selecionou umsegundo processo de regulao, que
executado pelo stio atenuador. Tal stio situa-se no operon, jusante ou logo aps o stio
o e dentro do segmento transcrito, que corresponde sequncia lder do mRNA
policistrnico. Como foi comentado no captulo 3, o mRNA constitudo de trs partes
transcritas, emsequncia, que so as seguintes: a. a parte no traduzida, denominada de
sequncia lder e que se situa na extremidade 5' do mRNA; b. a parte traduzida emposio
intermediria; c. e a terceira parte, tambmno traduzida, que se situa na extremidade 3'.
Portanto, o stio atenuador parte do mRNAsituado antes do ponto inicial - 5AUG3'- e
prximo da extremidade 5' (Figura 19.5).
Asequncia lder possui 162 nucleotdeos, dentro da qual ocorremduas sequncias de
bases, uma rica emGCe outra rica emAU, que so muito semelhantes s sequncias que
determinamo final de transcrio do mRNA. Podemos ento perguntar: Qual seria a funo
de umstio de final de transcrio logo no incio do mRNAtranscrito?
485
FIGURA 19.5. Operon do triptofano em E. coli salientando a sequncia lder, L, que
transcrita e faz parte da extremidade 5' do mRNA, antes do ponto inicial de traduo, o cdon
5AUG 3. Dentro da sequncia lder ocorre o stio atenuador, a e que tambm participa da
regulao da expresso dos genes estruturais E, D, C, B e A.
Como vimos, quando a quantidade de triptofano no meio alta, o prprio triptofano
combinado coma protena repressora, impede a transcrio dos genes estruturais. Quando o
nvel de triptofano se reduz, esse mecanismo repressivo deixa de atuar. Porm, ocorre a
transcrio do mRNApolicistrnico completo, com7.000 nucleotdeos, emapenas algumas
bactrias e deuma pequena sequncia domRNA, com130 nucleotdeos, emoutras. Portanto,
nessas bactrias est atuando o final de transcrio logo aps seu incio. Consequentemente,
as bactrias que transcrevemsomente esse pequeno mRNA, no sintetizamo triptofano.
Assim, por que esse stio de final de transcrio funciona emalgumas bactrias e no funciona
naquelas que produzemo mRNApolicistrnico completo?
Foi constatado que emmeios de cultura comnveis maiores de triptofano, a maioria
das bactrias produz apenas o incio do mRNA, com 130 nucleotdeos, portanto, no
transcrevendo os genes estruturais e, consequentemente, no sintetizando mais molculas de
triptofano. Coma reduo da quantidade de triptofano no meio, aumenta a proporo de
bactrias que transcrevemo mRNAcompleto, aumentando, assim, a sntese de triptofano.
Portanto, a concentraode triptofano no meiode cultura determina a proporo de bactrias
que deve produzir o mRNApolicistrnico e a proporo que deve transcrever apenas o
incio do mRNA. Essa concluso nos levaa outra pergunta: Como aconcentrao de triptofano
no meio de cultura realiza esse controle?
Para responder aessapergunta, temos derelembrar que emprocariotos j conhecido h
longo tempo que a transcrio e a traduo ocorremsimultaneamente, isto , enquanto a RNA
polimeraseesttranscrevendoumalelo, apartedomRNAformadovemsendotraduzida. Nocaso
dooperondotriptofano, foiconstatadoqueessefatoocorre, squeatraduoseinicianasequncia
lder. Comoresultadodatraduodessasequnciaproduzidoumpeptdeode 14aminocidos.
Ento, para elucidar esse segundo mecanismo de regulao, que capaz de medir
commaior preciso quando a bactria deve iniciar ou parar a sntese de triptofano, foram
486
FIGURA 19.6. Parte da sequncia lder do mRNA policistrnico que traduzida para regular
a expresso dos genes estruturais.
V-se assim, que a regulao da produo de triptofano emE. coli pelo atenuador
umprocesso engenhoso e capaz de medir a concentrao do aminocido no meio. Essa
percepo rigorosa e habilita a bactria dosar a concentrao ideal do triptofano. Tal
mecanismo exemplifica o papel da regulao da expresso gnica para aumentar a eficincia
e economia biolgicas na explorao dos recursos do meio.
sequenciadas a parte da sequncia lder que traduzida, bem como o peptdeo de 14
aminocidos (Figura 19.6). Observe que os aminocidos de nmero 10 e 11do peptdeo so
dois triptofanos, exatamente o produto final da via metablica emque participamas enzimas
desse operon. Assim, a quantidade disponvel de triptofano no meio de cultura, determina a
traduo completa ou parcial da sequncia lder. Essa traduo, por sua vez, ir determinar
se o restante do operon ser ou no transcrito, da seguinte forma: Se o triptofano estiver
escasso no meio, no momento emque o ribossomo, traduzindo a sequncia lder, atingir o
cdon 5' UGG 3', que codifica o triptofano, ele ficar emperrado, em razo da falta do
aminocido. Esse fato ocasiona a formao de uma estrutura secundria na sequncia do
mRNAj transcrito, e permite que a RNApolimerase continue a transcrio de todos os
genes estruturais. Emconsequncia, ser produzidotriptofano pela via metablica e aumentar
sua concentrao no meio. Oaumento da quantidade de triptofano no meio, por outro lado,
impedir queo ribossomo fique emperrado, e a sequncia lder ser traduzida completamente.
Atraduo completa dessa sequncia ocasiona uma mudana na estrutura secundria do
segmento do mRNAj transcrito - stio de trmino de transcrio - e tal estrutura impede que
a RNA polimerase continue a transcrio, parando, assim, a produo de triptofano em
excesso para a bactria (Figura 19.7). Por isso, a parte da seqncia lder envolvida na
regulao chamada de atenuador.
487
FIGURA 19.7. Regulao da sntese de triptofano em E. coli pelo stio atenuador. A. A
sequncia lder, incluindo o stio atenuador (retngulos), subdividida em quatro segmentos. B.
No meio de cultura com baixa concentrao de triptofano, o ribossomo fica emperrado no
segmento 1, pela falta deTrp, impedindo a traduo dos dois cdons 5 UGG3. Emconsequncia
ocorre o pareamento dos segmentos 2 e 3, e a RNA polimerase, que se encontra no segmento
4, continua transcrevendo o operon. Oresultado a formao do mRNApolicistrnico completo,
que leva sntese de triptofano. Tal sntese ocorre, provavelmente, por meio de outro ribossomo,
uma vez que o primeiro est emperrado no segmento 1. C. No meio de cultura com alta
concentrao de triptofano, o ribossomo traduz o peptdeo lder completo, com14 aminocidos,
at parte do segmento 2. Por isso, ocorre a pareamento dos segmentos 3 e 4, e desloca a RNA
polimerase que encontrava-se no segmento 4, resultando no fim da transcrio do operon.
Aregulao pelo atenuador umfenmeno comumna sntese de alguns aminocidos
emprocariotos. Asequncia lder do mRNApolicistrnico da histidina possui sete cdons
emfila do aminocido, e a do mRNApolicistrnico da fenilalanina possui uma sequncia de
cdons que traduzida emPhe-Phe-Phe-Ala-Phe-Phe-Phe-Tyr-Phe. Portanto, tambmna
488
sntese desses aminocidos a percepo de suas concentraes no meio, determina a
transcrio ou no de seus operons.
19.3 EUCARIOTOS
Como j salientamos, a completa regulao da expresso gnica emeucariotos s
ser conhecida quando todos os passos que resultamna diferenciao celular tambmforem
compreendidos. Tal regulao muito mais complexa do que emprocariotos. Entretanto, a
regulao emprocariotos plenamente conhecida emdiversas vias metablicas, como os
mencionados operons da lactose e do triptofano e, por essa razo, elas servemcomo ponto
de referncia para facilitar o entendimento da regulao nos eucariotos.
Para se ter idia da maior complexidade dos eucariotos, basta comparar os dois
organismos. Por exemplo, os eucariotos possuemuma quantidade acentuadamente maior de
DNA, cerca de 500 a 1000 vezes mais do que a E. coli. Isso significa, por exemplo, que
eles possuemmais sequncias de DNAque funcionamcomo stios regulatrios, uma vez
que o aumento do nmero de genes nos eucariotos emcomparao comos procariotos ,
proporcionalmente, muito menor do que o aumento da quantidade de DNA(Capitulo 3).
Alm disso, o DNA eucarioto encontra-se complexado com protenas, formando os
cromossomos que ocorremno ncleo. Portanto, almde as informaes genticas estarem
complexadas comas protenas da cromatina, elas so transcritas no ncleo, ficando ento
separadas do local onde ocorre a sntese protica, que o citoplasma.
Adicionalmente, sabemosque maioria do RNAtranscrito possui sequncias que no so
traduzidas, os ntrons, que necessitamser retirados para produzir o RNAfuncional como o
mRNA. Finalmente, emrazo da maioria dos eucariotos seremmulticelulares, os genes com
expresses especficas, portanto, os regulados, somente se expressamnos tecidos especficos
de cada rgo, onde so induzidos por fatores ambientais externos e internos ao indivduo. J,
os genes constitutivos, que se expresso emtodas as clulas, tambmso regulados para
expressarememtaxas ideais, como o caso de genes para as protenas ribossmicas.
Apesar da maior complexidade dos eucariotos, muitos trabalhos vm sendo
desenvolvidos sobre o assunto, e vrios pontos j esto sendo elucidados. Esses pontos so
identificados por meio de pesquisas que estudamdesde as condies emque a informao
hereditria contida no DNA liberada ou reprimida, at nas alteraes das protenas ou
enzimas formadas aps a traduo. Esses vrios pontos constituemos vrios locais na clula
e etapas onde pode haver umcontrole da expresso gnica, e so conhecidos comonveis
de regulao.
19.3.1 Nveis de Regulao
Retornando ao exemplo do milho, sabemos que no zigoto, os genes responsveis pela
fotossntese estoreprimidos. Quando uma sementede milho germina, oembrio proveniente
489
do zigoto, por mitose, ir produzir a parte area da planta onde os genes da fotossntese
iro se expressar nas partes verdes. Podemos ento perguntar: O que necessrio para
esses genes se expressarem? De uma forma geral podemos afirmar que, inicialmente, eles
devemser expostos, porque estavamcomplexados comas histonas nos cromossomos.
Para isso, ocorre a influncia de fatores externos e, entre eles, sabemos que a luz essencial.
Aps a transcrio dos genes empr-mRNAs, eles so processados formando os mRNAs
e so transportados para o citoplasma, onde so traduzidos. Os polipeptdeos formados
so tambmprocessados at chegaremaos cloroplastos, onde vo realizar a fotossntese.
Esse exemplo ilustra de uma forma muito simples as vrias etapas que ocorrem para a
expresso dos genes da fotossntese. Portanto, uma forma de facilitar o entendimento da
regulao consiste emcompreender os mecanismos que atuamnos diferentes estgios que
afetama expresso gnica. Assim, para os genes regulados emeucariotos, as vrias etapas
que levam expresso, so emgeral classificadas pelos seguintes nveis de regulao: a)
Estrutura da cromatina e rearranjamento do DNA; b) Controle da transcrio; c)
Processamento de transcritos primrios para formar o RNA funcional; d) Controle da
traduo; e) Controle aps a traduo.
19.3.1.1 Estrutura da cromatina e rearranjamento do DNA
Emrazo do DNAestar complexado comhistonas para formar a cromatina, como nos
nucleossomos, como vistono captulo 2, e tambma outras protenas, emgeral elas dificultam
ou impedem a ligao de fatores de transcrio, que tambm so protenas, no DNA e
diminuemou reprimema expresso gnica. Essa represso ocorre principalmente nos stios
promotores, embora a associao de grande quantidade de protenas na cromatina leve
formao de cromatina mais condensada, a heterocromatina, emgrandes extenses ou em
todo o cromossomo e causa a represso de vrios genes.
A expresso gnica, em geral, ocorre na eucromatina, que est parcialmente
condensada. Mesmo assim, necessrio que ela altere sua estrutura para que os fatores de
transcrio tenhamacesso aos stios do DNA. Essa alterao realizada por meio de um
processo ativo de remodelamento da cromatina, especialmente no stio promotor, que consta
da retirada de alguns nucleossomos ou o reposicionamento dos mesmos, liberando os stios
do DNApara ligao dos fatores de transcrio. Esse remodelamento realizado por um
complexo enzimtico de remodelamento da cromatina.
Aatuao do complexo de remodelamento emgeral promove a acetilao das histonas
para tornar a cromatina ativa ou ametilao para torn-la inativa. Portanto, a acetilao torna
a cromatina menos condensada, especialmente no stio promotor. Quemrealiza a acetilao
a acetilase e que pode ter a sua ao induzida por alguns ativadores de transcrio. Nesse
caso, a acetilase considerada umcoativador. Por outro lado, a retirada do grupo acetil de
490
histonas, adesacetilao, realizada por desacetilase que induz aformao de heterocromatina
e reprime a expresso gnica. Aliada a desacetilao, tambmocorre a metilao ou adio
do radical metil, por meio das metilases, tanto nas histonas quanto no prprio DNAe causam
tambma represso gnica. Quando a metilao ocorre no DNA, ela se d principalmente
nas bases Ge Cdo stio promotor, tornando a cromatina mais condensada.
Emgeral, uma sequncia de eventos que ocorrempara a ativao gnica so: a. fatores
de transcrio ligam-se em sequncias especficas no DNA e recruta o complexo de
remodelamento da cromatina; b. esse complexo altera a estrutura da cromatina, retirando ou
reposicionando alguns nucleossomos; c. emseguida ocorre a acetilao de histonas ficando
a cromatina ativa para que a expresso gnica ocorra.
Almda participao da estrutura da cromatina na regulao da expresso gnica, em
eucariotos, como os animais de sangue quente, h umprocesso de criao de novos alelos e
at mesmo genes. Umexemplo bemilustrativo a capacidade de produzir anticorpos, as
imunoglobulinas, para reagiremcontra uma infinidade de antgenos que os atinge, como
estudado no Captulo 8. Como o nmero de anticorpos diferentes, necessrios durante a
vida de umorganismo extremamente grande, ummecanismo que eles usam a criao de
novos alelos para anticorpos. O anticorpo constitudo, em geral, por quatro cadeias
polipeptdicas, duas pequenas e duas grandes (capitulo 8). Cada uma das quatro cadeias
possui duas partes, uma varivel e outra invarivel. Avarivel corresponde ao segmento que
varia por recombinao de vrias sequncias de DNA, cada qual correspondendo, emgeral,
a umxondiferente. Almda recombinao, nessa poro do DNAemgeral ocorre tambm
alta taxa de mutao. Em consequncia dessa recombinao e mutao, os animais so
capazes de produzir anticorpos para praticamente todos os tipos de antgenos.
19.3.1.2. Controle da transcrio
Humconsensodequeoprocessoprincipalderegulaodaexpressognicaemeucariotos
atua durante a transcrio, que inclui todaa sntese de RNAa partir do DNA. Emeucariotos, o
DNAnuclear transcrito por trstipos de RNApolimerase; a I, a II e a III. ARNApolimerase I
transcreve genes para rRNAe atua junto ao nuclolo. ARNApolimerase III sintetiza RNAs
pequenos incluindo ostRNAs. ARNApolimerase II transcreve os genes quecodificampara a
sntesedas cadeiaspolipeptdicas. Oprodutodesua transcrio opr-mRNA, queprocessado
para formar o mRNA, cada um, em geral monocistrnico, responsvel por uma cadeia
polipeptdica. Nestetpico, sertratadaapenas aregulaodaexpressodosgenes quecodificam
para cadeiaspolipeptdicas. Porm, antes, necessrio entender commaisdetalhe o mecanismo
envolvido comatranscrioe, principalmente, oseuincio.
Para ocorrer a transcrio de umalelo so necessrias duas classes de fatores, osCIS
e os TRANS. Os fatores CIS so segmentos de DNA e incluem o stio promotor e as
491
sequncias estimuladoras, tambmconhecidas como enhancers. Ostiopromotor constitudo
por vrias sequncias conservadas que ocorrem montante (antes) do alelo a ser transcrito
e engloba uma regio commais de 200 pares de nucleotdeos, que so fundamentais para
que ocorra a transcrio. Os enhancersso similares ao stio promotor, porm, localizam-
se grande distncia, at 10.000 pares de nucleotdeos, montante ou jusante (aps) do
alelo a ser transcrito, e esto envolvidos na regulao da expresso no tempo e no espao,
isto , emtecidos ou pocas especficas da vida do indivduo.
Fator TRANSou fator de transcrio qualquer protena necessria para que ocorra
o incio da transcrio. Almdesses fatores, a RNApolimeraseII quemrealiza a transcrio.
Aprincipal diferena entre a transcrio de procarioto e eucarioto que no primeiro a RNA
polimerase, almde ser nica, liga-se diretamente no stio promotor pararealizar a transcrio.
Nos eucariotos, osfatores de transcrio soos primeiros a reconheceremas vrias sequncias
conservadas do stio promotor, criando umambiente comafinidade para a RNApolimerase
II seligar. Essa RNApolimerase sozinha no consegue seligar no stio promotor para realizar
a transcrio. Aps o incio da transcrio, a maioria dos seus fatores liberada. Oconjunto
de fatores TRANS chamado de complexo basal que inclui, na maioria das vezes, os fatores
de transcrio II D (TF
II
D), TF
II
A, TF
II
B, TF
II
E, TF
II
F, TF
II
H e TF
II
J. S para se ter uma
idia desse complexo, o TF
II
D constitudo de uma protena (TBP) que liga-se no stio TATA
presente no promotor e mais 11 cadeias polipeptdicas auxiliares. Os demais TF
II
so tambm
constitudos de vrias cadeias polipeptdicas e que se ligamprximas e, principalmente,
jusante do TF
II
D. OTF
II
Do responsvel direto parareconhecer o stio promotor e posicionar
nele a RNApolimerase II.
D para notar que o TF
II
Dumdos que sedestaca para viabilizar oincio da transcrio.
Para entendermos a sua participao fundamental conhecermos o fator CISTATA. TATA
uma simplificao da sequncia TATAAATATAT, na cadeia senso do DNA, situada na
posio -25, isto , sua posio mediana corresponde ao 25
0
nucleotdeo montante do
primeiro transcrito. Ostio TATA ladeado por sequncias ricas emGC, onde, emmuitos
genes, ocorremmetilaes queinibemoureprimemaexpresso gnica. importantemencionar
que emvrios genes no ocorre o stio TATA, que substitudo por outro stio mais jusante
emtorno de +30.
OTF
II
Dalmde reconhecer o stio TATA, tambmreconhece o stio Inr (Iniciador) e
sua sequncia na maioria dos promotores Py
2
CAPy
5
, que se estende a partir de -3. Por
isso que a grande maioria dos pr-mRNAs inicia-se comA. Nessa sequncia, Py uma
pirimidina, Tou C, e o ndice 2 corresponde a dois desses nucleotdeos. Portanto, essas duas
sequncias so as necessrias para que a transcrio de umalelo possa se iniciar emnvel
baixo. Vrias outras sequncias CIS fazem parte do promotor e posicionam-se mais
montante, em torno de -100, onde se ligam os fatores de transcrio denominados de
492
ativadores, queaumentama eficincia detranscrio. Exemplos de algumasdessas sequncias
CIS so a 5' CCAAT3' situada a cerca de -80 e a 5' GGCGGG3', comumente chamada
de stio GC, e que ocorre emtorno de -90.
Nas sequncias estimuladoras tambmligam-se fatores de transcrio. Como essas
sequncias estosituadas mais distantes dopromotor, nelas ligam-se ativadores que interferem
na transcrio por meio da participao de outras protenas, chamadas de coativadores,
que fazemcontato comos ativadores ou mesmo como complexo basal do stio promotor.
Esses coativadores no se ligamno DNA.
Aregulao da expresso gnica se d por meio da ligao de vrias molculas nos
ativadores, denominadas de ligantes e que ativam ou reprimema expresso gnica. Isso
ocorre porque nemsempre os ativadores so funcionais. Eles somente se tornamativados
aps a ligao dos ligantes. Uma classe de ligante muito conhecida so os hormnios. Por
exemplo, em animais, os hormnios esterides esto envolvidos com a regulao do
desenvolvimento de tecidos e crescimento do corpo. Eles so os ligantes dos ativadores que
so receptores de esterides. Emplantas, vrios hormnios realizamatividades similares.
Esses hormnios, emgeral, so molculas pequenas que ligam-se nos ativadores, isto , nos
receptores de hormnios, e ativama transcrio. Na ausncia do hormnio o ativador fica
ligado geralmente a uma molcula repressora da expresso gnica. Diz-se, ento, que o
ativador est inativo. J, a presena do hormnio retira o repressor e o substitui no ativador,
ativando-o.
Uma classe de protenas envolvida coma regulao do desenvolvimento da maioria
dos eucariotos so as protenas comhomeodomneo. Esse homeodomneo uma sequncia
com60aminocidos, conservada emvrias protenas regulatrias, e a sequncia responsvel
para reconhecer o stio do DNAaonde a protena ativadora ou repressora ir se ligar. As
protenascomhomeodomneossocodificadaspor genes hometicos, osquais, evidentemente,
tm a sequncia que codifica para o domneo conservado de 60 aminocidos e que
denominada de homeobox. Aps a protena ativadora ou repressora ligar-se no stio
correspondente nopromotor ounas sequnciasestimuladoras, ela ir interagir como complexo
basal, diretamente ou coma participao de coativadores.
Outros ativadores tmstios conservados de reconhecimento do DNA. Entre eles
esto as protenas HLH(de Helix-Loop-Helix), que so sequncias de 40-50 aminocidos
que criamuma estrutura comafinidade para o ativador ligar-se no stio do DNA. As protenas
HLHvariamsuas sequncias e regulama expresso tanto de genes constitutivos, quanto
daqueles com expresso em tecidos especficos. Outra classe de ativadores possui o
domneo chamado de zper de leucina, que umsegmento de aminocido rico emleucina.
Esse zper tema funo de formar umdmero da protena ativadora para que ela possa se
ligar no stio do DNA.
493
Retornando ao exemplo da fotossntese emplantas, existemgenes que so induzidos a
se expressarempela luz, como os responsveis pela formao da clorofila. Nesse caso, o
efeito da luz para ativar uma protena sensvel, o fitocromo, que desencadeia o processo de
reconhecimento dos fatores CIS especficos desses genes e promove o incio da transcrio
dos mesmos.
19.3.1.3 Processamento do pr-mRNA para formar o mRNA
Como sabemos, o produto da transcrio de um alelo eucarioto qualquer uma
molcula de pr-mRNA, emgeral 5 a 10 vezes mais longa do que o mRNA. Isso acontece
porque o pr-mRNA possui ntrons que precisam ser retirados, para restabelecer a
mensagemcodificada na sequncia de bases, por meio da unio dos xons. Ocorre que a
retirada de ntrons de ummesmo pr-mRNAnemsempre igual nos diferentes rgos ou
indivduos. Emconsequncia, ummesmo pr-mRNAir originar cadeias polipeptdicas
diferentes (Figura 19.8).
Aexpresso de caracteres sexuais masculinos ou femininos emDrosophila, um
exemplo interessante de processamento alternativo, durante a retirada de ntrons do pr-
mRNA, para formar diferentes mRNAs.
Nesse exemplo, o alelo dsx da Drosophila possui seis xons e cinco ntrons, e
responsvel pela expresso de caracteres sexuais secundrios masculinos ou femininos.
Quando o pr-mRNAdesse alelo processado no macho, so retirados os cinco ntrons
e tambmo quarto xon. O mRNAformado codifica uma protena, que responsvel
pela expresso de caracteres sexuais secundrios masculinos. Na fmea, o processamento
do pr-mRNA resulta na produo de um mRNA que possui s os quatro primeiros
xons e traduzido emoutra protena, que responsvel pela expresso de caracteres
sexuais secundrios femininos. O processamento do pr-mRNAno macho feito pelo
sistema normal de processamento de outros genes, enquanto na fmea, almdo sistema
normal tambmparticipa a protena Tra. Essa protena codificada pelo alelo tra, que
s se expressa na fmea e responsvel pelo processamento alternativo do pr-mRNA
do alelo dsx.
494
Umfato interessante a ocorrncia do alelo tra nos dois sexos. No entanto, ele s se
expressa na fmea, emrazo de umprocessamento alternativo de seupr-mRNA. No macho,
o pr-mRNA processado e produzido ummRNAcomquatro xons, sendo que o segundo
possui umponto final de traduo. Emconsequncia, quando o mRNA traduzido, no
produz nenhumaprotena. J, na fmea, durante o processamento dopr-mRNAso retirados
os ntrons e tambmo xon 2, exatamente aquele que possui umponto final de traduo.
Portanto, o mRNAformado possui os xons 1, 3 e 4, que traduzido na protena funcional
Tra. Possivelmente, processamentos alternativos como esse em Drosophila, tambm
expliquema expresso limitada ao sexo de vrios caracteres emdiversas espcies, por meio
da retirada do xon portador de ponto final no sexo onde o alelo deve se expressar.
Aretirada dos ntrons do pr-mRNA feita coma participao de RNAnucleares
pequenos, chamados de snRNA. Sabe-se que vrios snRNApossuematividade enzimtica,
e so, por isso, chamados de ribozimas. Elas so comuns na natureza, pois tm sido
encontradas emplantas, animais, fungos e procariotos. No sistema geral de processamento
do pr-mRNA participam5 snRNAs que ligam-se no ntron. Uma das razes porque os
snRNAs reconhecemexatamente a sequncia do ntron, porque todos tmna extremidade
5 a sequncia GUe na extremidade 3, a sequncia AG. Aunio dos 5 snRNAs no ntron
resulta na sua retirada emuma estrutura semelhante a umlao, seguida, simultaneamente, da
unio dos xons vizinhos (Figura 19.9).
As ribozimas mais recentes foramdescobertas a partir de anlises de plantas infectadas
por virides - RNAde umacadeia. Esses RNAs se autoclivam, isto , utilizamas suas prprias
FIGURA 19.8. A. Representao de processamento do pr-mRNA com a retirada de todos
os ntrons e unio dos xons; B. Representao de dois processamentos alternativos do mesmo
pr-mRNA.
495
sequncias de bases para realizar o corte e produzir as vrias cpias, o que importante para
suas replicaes nos eucariotos.
Uma ribozima tanto pode ser parte de umntron, como pode ocorrer isolada, na forma
de umsnRNA, que reconhece osntrons a seremretirados. Para isso, ela possui uma sequncia
chamada de guia com6 bases - 5' GGAGGG3' -, que comumnas ribozimas conhecidas.
Asua sequncia guia reconhece o ntron, pareando-se comumstio complementar para, em
seguida, promover as reaes que resultamna sua retirada.
FIGURA19.9. A. Ilustrao das extremidades 5 e 3 100% conservadas de um ntron, na cadeis
senso do DNAe no pr-mRNA. No DNA, Py pode ser T ou C e N pode ser Aou G ou C ou T. B.
Retirada de um ntron na forma de um lao, seguida da unio dos xons vizinhos. A sequncia
UACUAAC no tero final do ntron mais conservada para garantir o processo de sua retirada.
496
FIGURA19.10. Esquema de uma ribozima cabea de martelo. Asequncia situada no quadrante
superior direito representa o stio do ntron reconhecido pela ribozima. As 13 bases representadas
por A, G, C e U, conectando o centro dos eixos, so comuns todas as ribozimas e representam
o seu stio cataltico juntamente com os trs eixos.
19.3.1.4 Controle da traduo
Aquantidade produzida de umpolipeptdeo qualquer pode ser controlada durante a
traduo e depende de vrios fatores, sendo umdos mais importantes o controle do perodo
de vida do mRNA.
Umdos mecanismos que controla o perodo de vida do mRNA a regulao de sua
prpria degradao. Adegradao do mRNAvaria de minutos a meses, e ela pode afetar de
modo significativo a taxa de sntese protica. vantajoso para a clula regular a degradao
do mRNA, pois, quando ela necessitar de uma protena especfica, preciso parar a sntese
As sequncias de vrias ribozimas so altamente conservadas e formamuma estrutura
secundria como stio cataltico prximo ao local de clivagem. Esse grupo de ribozimas
recebe o nome de cabea de martelo. Esse nome devido ao fato de o RNApossuir trs
sequncias emhlice dupla e onze bases emfita simples altamente conservadas, gerando uma
estrutura secundria semelhante a ummartelo (Figura 19.10). Essa ribozima pareia-se com
uma segunda molcula de RNA e gera uma estrutura semelhante cabea de martelo,
promovendo o corte do RNA. Um ponto comum de todas as ribozimas que elas no
gastamenergia proveniente de trifosfatos de nucleotdeos, pormgastammagnsio. Uma
verso artificial da ribozima cabea de martelo comercializada e tem sido utilizada na
produo de transgnicos, quando o interesse promover a degradao do mRNA, isto ,
reprimir a expresso do gene que o codifica.
497
daquelas desnecessrias. Aclula faz isso de duas maneiras: a. para a sntese de mRNA; b.
reduz a estabilidade dos mRNAs de vida longa j existentes, sendo ento eliminados
rapidamente.
Sabe-se que a degradao do mRNA controlada emparte pela sua prpria estrutura
e tambmpor meio de diversas outras substncias, como protenas e ribonucleases que se
associama ele. Emrelao estrutura do mRNA, so importantes os quatro segmentos que
o constituem, isto , a extremidade 5' no traduzida, a seqncia traduzida representada
pelos xons, a extremidade 3' e a cauda de poli A. O envolvimento dessas estruturas na
degradao do mRNAconsiste na maior ou menor afinidade de cada uma s protenas e
ribonucleases.
H evidncias de que os vrus desestabilizam os mRNAs das clulas infectadas,
reduzindo a vida dos mesmos para liberar a maquinaria da clula para seu uso. No caso das
histonas, elas prprias aumentama degradao de seus mRNAs, nas clulas onde elas no
so mais necessrias. Asua quantidade 50 vezes maior na fase S do que na G1. Quando a
replicao termina, tambmtermina a trancrio de mRNApara histonas e a degradao se
acelera. Sabe-se que a histona livre no meio celular est relacionada coma degradao do
mRNApara histona. Foi constatado que a adio de histona emummeio livre de clulas que
contmpolirribossomos de mRNApara histonas, quadruplica a sua degradao. Sabe-se
tambm, que a histona sozinha no degrada o mRNA. Assim, supe-se que ela se liga ao
mRNAna extremidade 3', a parte que degrada primeiro, e torna a regio mais acessvel s
ribonucleases.
Emrelao regulao da traduo propriamente dita, emcondies naturais, vrias
evidncias tm indicado que ela ocorre com a participao do RNA antissenso. Como
visto no Captulo 3, o mRNA o RNA senso, que cpia e, portanto, complementar
cadeia antissenso do alelo. J o RNAantissenso cpia e complementar cadeia senso do
alelo. O RNA antissenso um RNA complementar do pr-mRNA senso. No existem
evidncias da ocorrncia de RNAantissenso para todos os genes, mas j conhecido um
grande nmero de RNAantissenso naturais, tanto emplantas como emanimais.
Oprincipal efeitodo RNAantissenso paraimpedir a traduo, por meio do pareamento
de 15 a 20 bases em cada lado do ponto inicial, 5' AUG 3'. Portanto, o seu efeito no
impedimento da unio da subunidade menor doribossomo coma maior, que ocorre no ponto
inicial. Tal unio no ocorre, principalmente porque a subunidade menor no consegue
deslocar-se sobre mRNAquando emhlice dupla, para atingir o ponto inicial e ocorrer a
formao do ribossomo funcional. Foi constatado que, a partir do momento em que o
ribossomo funcional se forma, ele capaz de separar as cadeias pareadas. Portanto, o
pareamento do RNAantissenso como mRNA, aps o ponto inicial no sentido 3', no causa
sua degradao.
498
Oconhecimento do RNAantissenso temlevado alguns pesquisadores a utilizaremsua
propriedade para inativar alguns genes cuja expresso indesejada. Por exemplo, umtrabalho
realizado emuma empresa de biotecnologia nos Estados Unidos, resultou na produo de
umtomate que capaz de permanecer umtempo mais longo aps colhido semse amolecer.
Como se sabe o amolecimento do fruto do tomate aps colhido, temcomo uma das causas
a sntese daenzima poligalacturonase que degradaa parede celular. Assima estratgia utilizada
pelos pesquisadores foi, por meio de engenharia gentica (Captulo 17), introduzir umstio
promotor na extremidade 3 da cadeia senso do gene da poligalacturonase do tomate. Em
consequncia, foi transcrito umpr-mRNAcomplementar e idntico cadeia antissenso, isto
, a cadeia molde que normalmente transcrita para formar a enzima poligalacturonase.
Como resultado desse trabalho de engenharia gentica, foi produzida uma planta onde o
alelo responsvel pela enzima foi transcrito nas duas cadeias de DNAe foramproduzidas
duas molculas de pr-mRNAcomplementares. Tais molculas pareiam-se, formando um
RNAde hlice dupla, o que no normal nas clulas do tomate e so, emconsequncia,
degradadas. Portanto, aenzima poligalacturonase temsua produo acentuadamente reduzida
e o fruto permanece firme por umtempo mais longo aps a colheita.
Outra classe desnRNAs tambmencontrada emvrias clulas e que regula a expresso
gnica, a de RNAinterferente, tambmdenominado de RNA
i
. Este consta de uma pequena
sequncia de RNA, originalmente de hlice dupla que, posteriormente, transforma-se em
cadeia nica coma associao de uma enzima. Essa sequncia de cadeia nica viabiliza a sua
unio commRNAe a enzima associada promove o corte do mRNA, reprimindo a expresso
gnica. Essa estratgia tambmtemsido utilizada na obteno de transgnicos, quando o
objetivo eliminar a expresso gnica.
19.3.1.5 Controle aps a traduo
Nesta etapa podemocorrer vrias alteraes dos polipeptdeos formados coma adio
de alguns radicais emalguns aminocidos e a retirada emoutros. Almdisso, pode ocorrer
tambma degradao de protenas, ora quando elas esto emexcesso, ora para participar
de outros processos metablicos do organismo.
Adegradao de protenas que se encontramemexcesso necessria, porque elas se
tornamprejudiciais clula. Por exemplo, no caso de algumas das protenas que constituem
os ribossomos, quando elas ocorrememquantidades maiores do que os rRNAs aos quais
elas vo se unir, elas podemtambmse associar ao mRNAinterferindo assimna sua traduo.
Por isso, elas so degradadas pela clula. De modo semelhante, a subunidade menor da
RuBisCO- da expresso Ribulose Bifosfato Carboxilase Oxigenase -, que uma enzima
importante durante a fotossntese, quando ocorre emexcesso dentro do cloroplasto, e no
existe quantidade suficiente da subunidade maior para ela se unir, ela ento degradada.
499
Adegradao de uma protena pela clula tambmpode ser necessria para participar
do metabolismo do indivduo. Umexemplo interessante ocorre emndulos radiculares de
soja comRhizobium. Durante odesenvolvimento do ndulo, observa-seumacmulo mximo
de ferro. O acmulo na verdade, de uma protena que contm ferro, a ferritina, que
sintetizada no citoplasmae, posteriormente, absorvida pelo plasto. Durante o amadurecimento
do ndulo, so acumuladas grandes quantidades de nitrogenase e leghemoglobina que
consomemferro. Afonte de ferro para essa fase de desenvolvimento do ndulo exatamente
a ferritina que necessita ser degradada para liberar o tomo de ferro.
500
501
Respostas dos Problemas Propostos
RESPOSTAS DOS
PROBLEMAS PROPOSTOS
Captulo 3
1. Espcie 1. DNAde hlice dupla
Espcie 2. DNAde hlice dupla
Espcie 3. RNA
Espcie 4. RNA
Espcie 5. DNAde fita simples
2. a) 22% de citosina
b) 4,72 bilhes de nucleotdeos
c) 0,40 m
3. 4
1,18 bilho
Tipos de DNA
4. a) E1 I1 E2 I2 E3 I3 E4 I4 E5 I5 E6 I6 E7 I7 E8 3
b) 402
5. 15% de A; 15% de T; 35% de G e 35% de C
6. 10
5
vezes emmdia
7. 21960 pares de nucleotdeos
9. a) 201 aminocidos
b) 606 bases
c) 201 tRNAs
d) 1 ribossomo
10. a) A5AUGCACCGAAGAAUUCCACCACCACCACAAUAGA3
b) 10 animocidos
502
c) 100 tRNAs e 10 ribossomos
d) Met His Arg Arg Ile Pro Pro Pro Pro Gln
e) Met His Arg Arg Ile Arg Tre Tre Tre Tre
Captulo 4
3. a) 4 orientaes
b) 15 clulas
c) 30 gros de plen
d) 8 tipos
5. a) 12 cromossomos
b) 4096 gametas diferentes
7. a) 1/2
19
b) 17,62%
Captulo 5
1. a) Herana monognica, havendo dominncia do alelo que controla sementes lisas em
. relao ao alelo que condiciona sementes enrugadas.
c) 900 sementes
d) Por meio do cruzamento teste
e) 1/2 SuSu: 1/3 Susu : 1/6 susu
5/6 lisas : 1/6 enrugada
2. 82,5% lisas: 17,5% enrugadas
3. Cruzar machos e fmeas de pescoo pelado da gerao F
2
comfmeas e machos de
pescoo normal. Observar a descendncia de cada cruzamento; aquelas que no
segregamso provenientes de indivduos da F
2
de gentipo NN, que o desejado.
4. a) Touro: Mm; vacaA: mm; vaca B: mm; vaca C: Mm
b) Cruzar os descendentes machos e fmeas mochos com animais chifrudos. As
descendncias desses cruzamentos que no segregamidentificamos machos e fmeas
homozigticos mochos. Estes devero ser intercruzados at se obter os 20 animais
desejados.
503
5. 15/32 CC; 1/16 Cc; 15/32 cc
17/32 crespa: 15/32 lisa
6. 1/4 CC; 1/2 Cc; 1/4 cc
3/4 crespa: 1/4 lisa
7. a) Herana monognica, havendo dominncia do alelo que controla folha normal em
relao ao alelo que condiciona folha batata.
b) 1. BB x bb 2. Bb x Bb 3. bb x bb 4. Bb x bb 5. BBx B_
8. a)
2
2
F
5 = 1,55 n.s. Herana monognica, havendo dominncia do alelo que controla
florescimento precoce emrelao ao alelo que controla florescimento tardio. Utilize
esse resultado e explique os dados das demais populaes.
b) 600 sementes
9. a) Cada carter apresenta herana monognica comdominncia completa dos alelos
que condicionamhipoctilo roxo (A) e folha normal (C). Adistribuio destes genes
independente.
b) F
1
: AACC x aacc
F
2
: AaCc x AaCc
RC
1
: AaCc x AACC
RC
2
: AaCc x aacc
10. a) F
2
e RC
2
b) Metfase I e Anfase I dos meicitos da gerao F
1
11. a) (1/4)
12
b) (1/2)
12
c) (3/4)
12
d) (3/8)
12
; (1/4)
12
; (5/8)
12
12. Genitores: BbLL e bbll
Descendentes: 1/2 BbLl: 1/2 bbLl
13. Cruzar o cavalo comtodas as guas. Cruzar os descendentes F
1
machos e fmeas e
obter na gerao F
2
animais marchadores e baios (ttA_). Esses animais devero ser
cruzados com testadores de fentipos marchador e preto, para identificar os
marchadores e baios homozigticos.
504
14. a) 1/256
b) 81/256
c) 1/16
d) as mesmas
15. a) (7/16)
4
b) (9/16)
4
c) 1/4096
16. 5 autofecundaes
17. Considerando queos pais nomanifestarama anomalia, a suaocorrncia na descendncia
s pode ser explicada considerando que o alelo recessivo.
18. a) A anomalia 1 condicionada por 1 gene, sendo a resistncia devido ao alelo
dominante. Amesma constatao vlida para a anomalia 2.
c) 3/8 resistente s duas doenas
1/8 resistente 1 e suscetvel 2
1/8 resistente 2 e suscetvel 1
1/8 suscetvel s 2 doenas
AaB_ AaB_
AaBb ? aaBb aabb A_B_ A_B_ A_bb A_bb A_B_
aabb A_Bb A_bb A_B A_bb A_B A_bb A_B_
A_ B_ A_B_ A_Bb Aabb A_bb A_bb A_Bb
aaBb AAbb
I
II
III
b)
505
Captulo 6
1. FF, FF Ff
2. a) 3/16 mochos vermelhos: 6/16 mochos rues : 3/16 mochos brancos: 1/16 chifrudos
vermelhos: 2/16 chifrudos rues : 1/16 chifrudos brancos.
b) 320
c) 4/18 mochos vermelhos: 8/18 mochos rues : 1/18 chifrudos rues : 4/18 mochos
brancos : 1/36 chifrudos brancos : 1/36 chifrudos vermelhos
3. a) dominncia incompleta
b) facilita porque pode-se identificar qualquer gentipo atravs de seu fentipo.
c) r
1
r
1
v
1
v
1
X r
2
r
2
v
2
v
2
ou r
1
r
1
v
2
v
2
x r
2
r
2
v
1
v
1
d) 800 plantas
4. a) segregao fenotpica da F
2
de 12:3:1, indicando que o carter controlado por
dois genes comdistribuio independente, os quais apresentama interao do tipo
epistasia dominante. Admitindo, por exemplo, os locosAe Be o alelo Bo episttico
aos alelos Ae a.
b) Gentipo da planta de frutos amarelos: Aabb
Gentipo da planta de frutos brancos : aaBb
5. Asegregao fenotpica da F
2
de 9:7, indicando que o carter controlado por dois
genes com distribuio independente, os quais apresentama interaodo tipo epistasia
recessiva dupla. No caso, podemos adotar comexemplo os locos L e H, sendo os
epistticos os alelos recessivos l e h.
Gentipos dos genitores: LLhh x llHH
6. a) Aexplicao da herana do carter considerado semelhante s dos exerccios 5.4
e 5.5, s que no presente caso trata-se da epistasia recessiva, isto , apenas o alelo
recessivo de umdos locos episttico.
b) Considerando os locos Ce Be como episttico recessivo o alelo c, a via metablica
ser:
506
7. a) Branco; branco; branco; prpura; vermelho
b) 52/64 branco : 9/64 prpuro : 3/64 vermelho
8. a) Planta A: AaBb
Planta B: aabb
b) 100% aabb brancas
9. a) Planta alta e resistente s duas raas: AaBbC
1
C
2
Planta baixa e resistente s duas raas: aabbC
1
C
2
b) Reao ao patgeno: herana monognica com interao allica do tipo
codominncia. Porte da planta: herana dignica comdistribuio independente e
interao gnica do tipo epistasia dominante, sendoo alelo epsttico oA, por exemplo.
10. a) Acor da plumagem controlada por trs genes, sendo os seguintes os gentipos das
trs raas:
Wyandotte Branca: iiccRR
Leghorn Branca: IICCRR
Silkie Branca: iiCCrr
Para ocorrer a cor da plumagem, podemocorrer trs epistticos, sendo umdominante
I e dois recessivos c e r, os quais condicionamplumagembranca. Emqualquer outra
combinao genotpica, a ave ser colorida.
b) F
1
: 100%brancas
F
2
: 13/16 brancas: 3/16 coloridas.
Captulo 7
1. a) 1/2
b) 1/4
c) 1/2
d) 1/2
Alelo C Alelo B
Substrato Branco
Enzima C
Pigmento
Amarelo
Enzima B
Produto Final
Roxo
507
2. a) 1/4096
b) 1/2048
c) 924/4096
d) 2510/4096
3. a) 1/128
b) 7/128
c) 99/128
4. 94,37%
5. 31,15%
6. a) 1/4096
b) 1/16777216
c) 7,05%
7. a) 557 e 856
b) 269 e 414
c) 124 e 192
8.
a) 5
2
= 3,60 n.s. d) 5
2
= 0,29 n.s.
b) 5
2
= 0,38 n.s. e) 5
2
= 0,36 n.s.
c) 5
2
= 0,95 n.s. f) 5
2
= 3,23 n.s.
Captulo 8
1. a) 3
b) 2
c) 3
d) 55; 10; 55
e) 10
2. Porque sendo umindivduo diploide ele s pode possuir no mximo dois alelos.
3. a) 6
b) 78
508
4. a) 5 gentipos homozigotos e 10 gentipos heterozigotos.
b) 5 fentipos
p
g
p
g
, p
g
p
s
, p
g
p
o
, p
g
p
t
, p
g
p vagemprpura comsuturas verdes
p
s
p
s
, p
s
p
o
, p
s
p
t
, p
s
p vagemverde comsuturas prpuras
p
o
p
o
, p
o
p
t
, p
o
p vagemverde comsutura ventral prpura
p
t
p
t
, p
t
p vagemcomextremidade prpura
pp vagemverde.
5. a) 3 gentipos heterozigotos e 3 homozigotos.
b) 4 fentipos
c) 15gentipos heterozigotos, 6 homozigotos e 8 fentipos.
6. RR 12,25% - vermelha
Rr 14,00% - vermelha
Rr 31,50% - vermelha
rr 4,00% - manchas avermelhadas
rr 18,00% - manchas avermelhadas
rr 20,25% - vermelho claro
7. Oagricultor que plantou as cinco cultivares ter mais sucesso porque haver no pomar,
por ocasio da polinizao, plens comdiferentes alelos, o que ir permitir a produo
de frutos. Aquele que plantouapenas uma cultivar no ter frutos no seu pomar, porque
ter apenas dois alelos diferentes da srie S.
8. a) 15 gentipos
b) 33,33%
10. a) 3/9
b) Obter linhagens que sejam S
1
S
1
, S
2
S
2
, S
3
S
3
ou S
4
S
4
. Semear no campo
alternadamente duas dessas linhagens que tenhamboa capacidade combinatria. Toda
semente produzida ser hbrida, pois dentro da mesma linhagemno h possibilidade
de ocorrer cruzamentos. Omais difcil manter as linhagens. Existem, para isto, duas
alternativas, fazer a autofecundao no estdio de boto, quando provavelmente ainda
no se formoua substncia de incompatibilidade no pistilo ou ento utilizar a cultura de
tecidos para propagar as plantas vegetativamente.
509
Captulo 9
1. a) 72,25 de cada fentipo
b) Os genes no apresentamdistribuio independente, portanto eles esto situados
no mesmo cromossomo.
2. b)Aproximadamente7meicitos apresentaramquiasma entre osdoisgenesconsiderados
e 93 no apresentaram.
3. a) 24,96 cM
b) Genitores:
ic
ic
e
ic
IC
Descendentes:
ic
iC
e
ic
Ic
,
ic
ic
,
ic
IC
c) Atrao
4. a) Apartir do resultado do RC
2
, identifica-se mais facilmente que os genes esto ligados.
b) Atrao
c) 40 cM
5. a) 52,89% aqunios pretos e folhas lisas
22,11% aqunios pretos e folhas onduladas
22,11% aqunios brancos e folhas lisas
2,89% aqunios brancos e folhas onduladas
b) 17% aqunios pretos e folhas lisas
33% aqunios pretos e folhas onduladas
33% aqunios brancos e folhas lisas
17% aqunios brancos e folhas onduladas
6. a) Planta 1:
2
2
PTs
pts
; Planta 2:
2
2
Pts
pTs
b) 1,3% em mdia
c) 0,32%
7. a) Os genes q e f esto situados no mesmo cromossomo e so independentes de c
b) A frequncia de recombinao entre os genes g e f nula porque no ocorreram
descendentes recombinantes para eles.
510
8. a) 4% folhas estreitas, normais e resistentes ao Fusarium
4% folhas estreitas, normais e suscetveis ao Fusarium
21% folhas estreitas, onduladas e resistentes ao Fusarium
21% folhas estreitas, onduladas e suscetveis ao Fusarium
21% folhas largas, normais e resistentes ao Fusarium
21% folhas largas, normais e suscetveis ao Fusarium
4% folhas largas, onduladas e resistentes ao Fusarium
4% folhas largas, onduladas e suscetveis ao Fusarium
b) 0,16%
9. a)
b) 35,01%das permutas duplas esperadas no ocorreram
c)
v Gl lg
V gl Lg
10. a)
b) 12 cM, 18 cM, 4 cM, 7 cM, 1 cM, 3 cM
11. a) 1 20,79%
2 1,26 x 10
-4
%
b) 1 0,046%
2 0,046%
12. a)
H A Id h a id
X
h a id h a id
3 %#'& 14 0/ #$'! 14
/* . 14 0/ % 14 ),
(
# 14 ,+ ( 14 2- "
b) 327 pilosa, com antocianina e flores deiscentes,
73 pilosa, com antocianina e flores indeiscentes,
14 pilosa, sem antocianina e flores deiscentes,
86 pilosa, sem antocianina e flores indeiscentes,
86 sem plos, com antocianina e flores deiscentes,
14 sem plos, com antocianina e flores indeiscentes,
73 sem plos, sem antocianina e flores deiscentes,
327 sem plos, sem antocianina e flores indeiscentes,
V 41,3 cM gl 19,0 cM lg
lu 5 cM gl 4 cM vp
2
1cM ps 2cM bm 6cM bv
511
13. a) 20,5% Cr
1
d
1
a
20,5% cr
1
D
1
A
4,5% Cr
1
D
1
A
4,5% Cr
1
D
1
a
4,5% cr
1
d
1
A
4,5% cr
1
d
1
a
20,5% Cr
1
d
1
A
20,5% cr
1
D
1
a
b) 3253 plantas
14. a) Existemduas hiptese para explicar o resultado: a primeira a existncia de dois
genes muito prximos numcromossomo e, como consequncia, no foramproduzidos
descendentes recombinantes. Asegunda a reao de caupi aos dois organismos ser
controlada por apenas umgene e nesse caso ele pleiotrpico.
b) Para discriminar as hipteses deve-se realizar umcruzamento teste ou obter uma
gerao F
2
. Emambos os casos, necessrio utilizar uma populao de maior tamanho
possvel, a fimde se incrementar a chance de ocorreremrecombinantes , caso estejam
envolvidos dois genes ligados.
Captulo 10
1. Ogene influenciado pelo ambiente. No caso, o alelo responsvel pela produo da
enzima tirosinase s se manifesta emtemperaturas baixas.
2. a) Os genes responsveis pela produo de clorofila so influenciados pelo ambiente
e s se manifestamempresena da luz
b) Deve ser algummutante do alelo que condiciona a produo de clorofila.
c) Fenocpia de alelo mutante.
3. a) As mdias dos locais
b) As mdias das cultivares
c) Ocomportamento das cultivares nos vrios locais no foramconsistentes. Observe,
por exemplo, que a cultivar commaior mdia emPonte Nova ESAL 502 -, foi a
que apresentou o pior rendimento emMachado;
d) Devido ocorrncia de interao, para cada local deve-se identificar a cultivar mais
apropriada.
512
4. Cultivar Machado Caldas
ESAL 502 91 1825
ESAL 505 595 2329
ESAL 506 482 2216
ESAL 508 465 2199
Carioca 40 1774
Mdia 335 2069
5. a) No ocorreu interao
b) Houve interao
c) Houve interao entre os locais 1 e 2 e no houve interao dos locais 2 e 3.
6. a) Sim
b) Que a recomendao das cultivares de feijo deva considerar o sistema de plantio
7. a) Sim. Observe que a melhor prognie em1954 C 376 1 foi a pior no ano de
1959
b)Arecomendao de cultivares decaf no deve ser baseadano desempenho deumou
poucos anos. Na realidade, a mdia de vrios anos fundamental para uma espcie,
perene, como o caso do cafeeiro.
8. a) Oalelo que controla suscetibilidade deve apresentar penetrncia incompleta.
b) O alelo em questo apresenta expressividade varivel. Nesse caso o alelo deve
apresentar penetrncia incompleta e expressividade varivel.
9. Tomar um certo nmero de sementes, de cada tipo, e plant-las em uma mesma
condio ambiental, pormisoladas e de preferncia emumlocal que no havia sido
cultivado comfeijo anteriormente. Se dentro de cada lote ocorreremos mesmos
padres de variao das manchas, umcaso de expressividade varivel. Se por outro
lado as manchas foremdistintas para cada lote, deve ser umcaso de alelos diferentes
variao gentica, provavelmente devido mistura varietal.
Captulo 11
1. a) 18 autossomos
b) Macho 36A+ XY; Fmea 36A+XX
c) 1/4096
2. O zango das abelhas. Por qu?
513
3. a) Macho 76A+ ZZ; Fmea 76A+ZW
b) 60,47%
4. a) 1/32
b) 1/2
5. Aprobabilidade de que esse fato ocorra de 1,6%. Essa probabilidade, apesar de
baixa, perfeitamente vivel. Sendo assim, aconselhvel obter mais alguns
descendentes antes de tomar a deciso de sacrificar o touro.
6. Acondio que o macho seja Z
D
Z
d
, ouseja, heterozigtico. Tendo ele esse gentipo,
a probabilidade de se obter o fentipo desejado emtodos os 10 descendentes ser: 1/
1048576.
7. Esse um carter cuja herana influenciada pelo sexo. Observe que o alelo para
ausncia de chifres funciona como dominante nas fmeas e recessivo nos machos, e o
alelo para a presena de chifres atua como recessivo nas fmeas e dominante nos
machos.
8. Ocarter tema expresso fenotpicacondicionada por umgeneligado aos cromossomos
sexuais. Ainterao allica nesse caso de dominncia incompleta; assim, o macho,
por ser o sexo homogamtico, pode conter os dois alelos nos cromossomos Z e,
portanto, pode ter uma das trs cores da pele. Afmea s possui umcromossomo Z
e, portanto, no apresentar a cor preta, que depende do gentipo homozigtico para o
alelo que condiciona pele preta.
9. As fmeas nos gatos, por seremXX, podemcarregar os alelos B
1
B
2
, que conferemas
cores amarela e preta ao mesmo tempo. Omacho, por ser XY, s pode ser preto ou
amarelo.
10. O touro no produz leite, mas transmite os alelos para essa caracterstica aos seus
descendentes do sexo feminino.
Captulo 12
1. a) 4 genes;
b) Contribuio de cada alelo efetivo 1m;
Gentipos do genitores: P
1
12mA
1
A
1
B
1
B
1
C
1
C
1
D
1
D
1
;
514
P
2
20m A
2
A
2
B
2
B
2
C
2
C
2
D
2
D
2
F
1
A
1
A
2
B
1
B
2
C
1
C
2
D
1
D
2
Heteose nula
c) 5468,75 rvores
d) 2187,50 rvores
e) A
1
A
1
B
1
B
1
C
2
C
2
D
2
D
2
X A
2
A
2
B
2
B
2
C
1
C
1
D
1
D
1
f) 6 genes contribuio de cada alelo efetivo de 0,6667
g) medidaqueseaumentaonmerodegenes, humadiminuionacontribuiode
cadaalelo efetivo.
2. a) Contribuio de cada loco recessivo aa = bb = cc = dd = 3m
Contribuio de cada loco dominante A_ = B_ = C_ = D_ = 5m
b) Altura
1 2 1
P P 16m; F 20m ? ? ?
Onmero de fentipos esperado emF
2
ser de 5 comuma amplitude de variao de
12 a 20m.
c) F
1
= 4m e F
2
= 2m
3. a) Interao aditiva
b) 5 genes
c) 2,8 carrapatos/animal
Gentipos dos genit ores: Nelore A
1
A
1
B
1
B
1
C
1
C
1
D
1
D
1
E
1
E
1
; Holands
A
2
A
2
B
2
B
2
C
2
C
2
D
2
D
2
E
2
E
2
Mestios: A
1
A
2
B
1
B
2
C
1
C
2
D
1
D
2
E
1
E
2
d)
Fentipos (n
o
de carrapatos/animal) Proporo fenotpica
30,0 1/1024
27,2 10/1024
24,4 45/1024
21,6 120/1024
18,8 210/1024
16,0 252/1024
13,2 210/1024
10,4 120/1024
7,6 45/1024
4,8 10/1024
2,0 1/1024
e) 492 indivduos
4. 41.943.040 animais
515
5. a) 0,0015% - 50g : 0,02% - 48,75g : 0,18% - 47,50g : 0,85% - 46,25g :
2,78% - 45g : 6,67% - 43,75g : 12,22% - 42,5g : 17,46% - 41,25g :
19,64% - 40g : 17,46% - 38,75g : 12,22% - 37,5g : 6,67% - 36,25g :
2,78% - 35g : 0,85% - 33,75g : 0,18% - 32,5g : 0,02% - 31,25g :
0,0015% - 30g .
b) 10,01% - 50g : 26,67% - 47,5g : 31,15% - 45g : 20,76% - 42,5g :
8,65% - 40g : 2,31% - 37,5g : 0,38% - 35g : 0,04% - 32,5g :
0,001% - 30g .
6. a) 1 planta em1.048.576 plantas da gerao F
2
b) 1 planta em1,606938 x 10
60
c) Quanto maior o nmero de genes controlando o carter, maior deve ser a populao
para se selecionar o fentipo desejado. Observe que como aumento do nmero de
genes, almda necessidade de uma populao enorme, h uma grande dificuldade em
identificar o fentipo desejado na populao de plantas obtidas.
d) 1024 linhagens.
7. a) Porque nessa gerao, almda variao ambiental, ocorre a maior variao gentica,
devido segregao e recombinao dos genes.
b) Nos dois retrocruzamentos ocorre tambmvariao ambiental e gentica, porma
variao gentica menor que a da gerao F
2
.
c) Como
1 2
P +P
2
~
1
F ~
2
F , a ao gnica deve ser aditiva.
d) 1 gene.
8. a) 74,69%
b) 60,57%
c) 2,79%
d) Porque a herdabilidade no sentido restrito no carter no de 100%.
9. a) 196,6425 kg
b) Partir do plantel bimestio no qual ocorre maior variao gentica.
c) Cruzando-se (1/2H ; 1/2SG) x(H) obtm-se o plantel (3/4H ; 1/4SG).
Cruzando-se (1/2H; 1/2SG) x (3/4H; 1/4SG) ou (3/4SG; 1/4H) x (H), obtm-se o
plantel.
516
(5/8H; 3/8SG).
Cruzando-se (3/4H; 1/4SG) x (H), obtm-se (7/8H; 1/8SG).
d) Plantel (3/4H; 1/4SG) mdia esperada = 197,28 kg
Plantel (5/8H;3/8SG) mdia esperada no cruzamento (1/2H;1/2SG) x (3/4H;1/4SG)
=196,96kg e no cruzamento (3/4SG; 1/4H) x (H) a mdia ser =206,975 kg.
Plantel (7/8H; 1/8SG) mdia esperada = 187,585 kg.
10. a) Heterose V
4
x V
5
= 3,35
Heterose V
5
x V
6
= 5,70
b)
2
F hbrido V
4
x V
5
= 28,025
2
F hbrido V
5
x V
6
= 25,05
c) Ocarter deve ser controlado por genes cuja interao allica predominante de
dominncia e/ou sobredominncia.
d) Mdia do hbrido (V
1
x V
2
) x V
3
=
1
F = 27,7 ;
2
F = 27,525
Mdia do hbrido (V
4
x V
5
) x V
3
=
1
F = 27,95 ;
2
F = 28,206
e) Mdia do hbrido duplo
1
F = 25,5 ;
2
F = 25,4625
11. a) 45 hbridos duplos
b) (Bx C) x (Ax E)
c) Areduo ser de 20,8%. Essa reduo ocorre porque na gerao F
2
h segregao
e recombinao dos genes, e a frequncia de locos em heterozigose reduzida
metade. Emconsequncia a heterose manifestada na gerao F
1
reduzida tambm
em50%.
d) 69,5 vezes.
12. a) 15 hbridos duplos
b) (AD) x (BC)
Captulo 13
1. a) Frequncias genotpicas: B
1
B
1
= 0,086; B
1
B
2
= 0,438; B
2
B
2
= 0,476
Frequncias allicas: B
1
= 0,305; B
2
= 0,695
b) O
2
5 foi significativo, portanto a populao no est emequilbrio
2. a) V
1
= 0,75; V
2
= 0,25
b) Vermelhas = 1125 e Rosas = 750
3. Este problema pode ter duas respostas
517
a) Eliminando as plantas de flores vermelhas e brancas antes da polinizao: Vermelhas
= 1/4; Rosas = 1/2 e Brancas = 1/4
b) Coletando as sementes sem haver eliminao das plantas de flores vermelhas e
brancas: Vermelhas = 3/8; Rosas = 1/2 e Brancas = 1/8
4. a) B = 0,80
b) 33 animais
5. 2,78%
6. a) 0,4
b) 3600 plantas
c) 1,78%
7. 7 ciclos de seleo
8. Na populao emque apenas 0,49% das plantas ainda apresentambulbos amarelos
9. a) Su = 0,4198 e Y= 0,30
b) 1,59%
10. a) Su = 0,6328; su = 0,3672; Y= 0,5882; y = 0,4118
b) 71,84%
11. 46,24%
Captulo 14
1. a) 2n = 14; 2n = 28; 2n = 42; 2n = 56
b) Uma das maneiras por meioda anlise meitica das espcies, procurando identificar
a ocorrncia de multivalentes. Emcaso positivo, teramos umautopoliploide; emcaso
negativo, teramos umalopoliploide.
2. a) 2n = 36; 2n = 72; 2n = 144
b) Impedindo a formao das fibras do fuso
3. a) 14
518
b) Triticummonococcum genomaA xAegilops speltoides genoma B produziu
o anfidiploideAB. Aps a duplicao dos cromossomos, obtido o indivduoAABB.
Do seu cruzamento comAegilops squarrosa genoma D e aps a duplicao dos
cromossomos, foi obtido o Triticumaestivumcoma constituio AABBCC.
b) Devido ao alto grau de esterilidade dos triploides e formao de gametas
no balanceados quanto ao nmero de cromossomos
5. a) B. nigra 2n = 2x
1
= 16; B. oleracea 2n = 2x
2
= 18;
B. campestris 2n = 2x
3
= 20
b) 2n = x
2
+ x
3
= 19
c) Principalmente univalentes, devido falta de homologia entre os cromossomos s
duas espcies.
d) Estreis; 2n = 2x
2
+ 2x
3
= 38
e) Frtil , porque cada genoma ser constitudo por duas cpias de cada cromossomo,
o que permitir uma meiose normal
6. a) 2n = x
1
+ x
2
+ x
3
= 27
b) Dever ser anormal devido falta de homologia entre os cromossomos das trs
espcies
c) Alohexaploide, sendo 2n = 2x
1
+ 2x
2
+ 2x
3
= 54
7. a) YYy
b) Yyy
c) 50%YYye 50% yyy
d) 25%YYY; 25%YYy; 25%Yyy; 25% yyy
8. a) Amarelo
b) Amarelo-claro
c) 50%Amarelo e 50%Branco
d) 25%Alaranjado; 25%Amarelo; 25%Amarelo-claro; 25% Branco
4. a) Espcie diploide Colchicina Tetraploide
Triploide
519
10. Inverso. Este tipo de aberrao reduz sensivelmente a frequncia de permutaoentre
os genes situados na regio invertida ou prxima a ela, devido formao de uma ala
durante o paquteno.
11. a)
b)
Anfase I
Anfase II
c) 50%
12. a)
9. a) Haploide f) Monossmico
b) Triploide g) Trissmico
c) Tetraploide h) Tetrassmico
d) Nulissmico i) Trissmico duplo
e) Monossmico- trissmico j) Monossmico duplo
520
b)
Anfase I
Anfase II
c) 50%
13. Translocao. Este tipo de aberrao cromossmica envolve a quebra de dois
cromossomos no homlogos e a subsequente unio dos segmentos aos cromossomos
no correspondentes.
14. Pareamento emforma de cruz
15. Deficincia. As radiaes ionizantes podemprovocar quebras cromossmicas e perda
do segmento se este no possuir centrmero. No caso de ter ocorrido quebra no
segmento onde se encontrava o alelo Y, o fentipo da F
1
poder ser correspondente
ao alelo y
Captulo 16
1. a) Pai: RR; Me: rr; F
1
: Rr; F
2
: 1/4 RR: 1/2 Rr : 1/4 rr
b) 3/8 RR: 1/4 Rr : 3/8 rr
3/4 enrolada para a direita : 1/4 enrolada para a esquerda
2. O procedimento consiste em cruzar plantas normais com anormais e analisar os
descendentes. Se os genes foremnucleares, temos duas situaes e necessitamos obter
pelo menos as geraes F
1
e F
2
: a primeira situao a mais comume neste caso os
521
genes se expressam apenas nos indivduos que os possuem; na Segunda, temos o
fenmeno denominado efeito materno, na qual o fentipo do filho ser sempre idntico
ao da me, independente do seu gentipo. Se a anormalidade foi devida a genes
citoplamticos, temos de obter pelo menos at a gerao F
3
e o fentipo de todas as
geraes descendentes ser idntico ao do genitor feminino. Porm, se tratar de efeito
ambiental, o procedimento dispensa o cruzamento. Basta avaliar a planta anormal ou
seus descendentes emoutro ambiente e a anormalidade desaparecer.
3. Aherana de teor de leo explicada pelo efeito materno, porque o fentipo de
qualquer descendente a expresso do gentipo da me.
4. Apartir de umcruzamento de genitores puros contrastantes para umdeterminado
carter, se o fentipo do pai no ocorrer emnenhuma gerao descendente, trata-se
de herana extracromossmica. Porm, se o fentipo do genitor masculino ocorrer
pelo menos at a segunda gerao, porque se trata de genes ligados aos cromossomos
sexuais.
5. a) umcaso de efeito materno emque o gentipo da me expressa apenas na fase
juvenil dos filhos
b) 1 ( ) dd x DD ( ) e ( ) DD x dd ( )
c) 1. Jovens: 100%amargos
Adultos: 3/4 amargos : 1/4 doces
2. Jovens : 100% amargos
Adultos: 3/4 amargos : 1/4 doces
6. a) Sim
b) Obtm-se a gerao F
3
. Se ocorrer apenas o fentipo do genitor feminino, a
hiptese sugerida fica comprovada
7. a) Uma das possibilidade : 1. V V(N) x v v (A)
2. v v (A) x V V(N)
Nestes casos, os resultados seriam100% verdes e 100% amarelas, respectivamente
b) Utilizando as F
1
como fmeas nos retrocruzamentos, so esperados:
1) RC
1
e RC
2
100% verdes
2) RC
1
e RC
2
100% amarelas
522
c) 1) 3/4 verdes : 1/4 amarelas;
2) 100% amarelas
d) 3/4 verdes : 1/4 amarelas ou 100% amarelas, dependendo de qual F
1
foi a me
8. Acor da folha controlada por gene citoplasmtico. Ocomprimento da arista um
carter monognico, sendo dominante o alelo para arista longa e recessivo o alelo par
arista curta.
9. a) 100 % normais
b) 100 %normais
c) 100 % normais
d) 100 %amarelados
e) 3/4 normais : 1/4 amarelados
f) 100%amarelados
10. a) devida a gene citoplasmtico
b) 1) 100% brancos;
2) 100% verdes;
3) verdes, variegados e brancos;
4) 100% brancos
11. Cruza-se a planta macho-estril. Se todas as geraes descendentes desta planta
apresentaremsomente indivduos macho-estreis, porque o carter se deve a gene
citoplasmtico. Por outro lado, se ocorreremsegregaes de indivduos macho-frteis
e macho-estreis, porque se trata de gene nuclear
12. Por meio de retrocruzamentos sucessivos, utilizando-se sempre a linhagemdesejada
como genitor recorrente. Maiores informaes so fornecidas no texto
13. a) Rfrf(E)
b) RfRf independente do citoplasma
c) Obteno dos hbridos simples (HS):
1) rfrf(E) x Rfrf(E) = Rfrf(E) HS macho-frtil
2) rfrf(E) x rfrf(N) = rfrf(E) HS macho-estril
Obteno do hbrido duplo:
rfrf(E) x Rfrf(E) = 1/2 Rfrf(E) = macho-frtil
1/2 rfrf(E) = macho-estril
523
d) Alinhagempromissora macho-frtil, se obtida de populao semo alelo restaurador,
a sua constituio deve ser rfrf(N). Atravs de retrocruzamentos sucessivos comuma
planta macho-estril, transfere-se o gentipo da linhagemdesejada para o citoplasma
macho-estril. Desse modo, consegue-se a linhagem desejada com a constituio
macho-estril. Ocruzamento delas ir produzir sempre a linhagemmacho-estril.
15. A anomalia causada provavelmente por genes citoplasmticos. Isso porque a
descendncia sempre apresentou o fentipo da me que contribui como citoplasma
no cruzamento.
524
525
Glossrio
GLOSSRIO
A
Aberraes cromossmicas Qualquer tipo de alterao na estrutura ou no nmero de
cromossomos.
Aborto Interrupo da vida de umindivduo na fase embrionria ou de umgameta.
Acasalamento ao acaso Acasalamento entre indivduos de uma populao emque os
parceiros unem-se aleatoriamente. Oresultado na descendncia equivale unio aleatria
de gametas da populao.
cido desoxirribonuclico (DNA) Material gentico primrio, da maioria dos organismos,
constitudo de duas fitas complementares constitudas pelos desoxirribonucleotdeos deA, T,
Ge C. de polinucleotdeos.
cido ribonuclico (RNA) cido nuclico envolvido na transferncia da informao
gentica e sua decodificao emuma cadeia polipeptdica. Emalguns vrus, ele o material
gentico primrio.
Acrocntrico Cromossomo cujo centrmero se localiza prximo a uma das extremidades,
dividindo-o emdois braos de tamanhos bemdistintos.
ADP Difosfato de adenosina.
Adaptao Ajustamento de umorganismo oupopulao ao meio ambiente. Oorganismo
ser tanto mais adaptado quanto maior for a sua descendncia.
Adenina Base nitrogenada purnica, que ocorre nos cidos nuclicos e que se pareia com
a timina no DNAe comuracila nos segmentos de fita dupla do RNA.
Agente alquilante So agentes qumicos que podemadicionar, por exemplo, umgrupo
etlico oumetlico a outras molculas. Muitos mutagnicos so agentes alquilantes.
Agente intercalante So substncias que se inserem na molcula de DNA causando
mutao por adio ou deleo de bases.
Ala Aminocido alanina.
526
Albino Indivduo - plantas ou animais - caracterizado pela ausncia de pigmentos.
Alelos Formas alternativas de umgene, situadas emummesmo loco emcromossomos
homlogos e responsveis pelas diferentes manifestaes fenotpicas do carter.
Alelo fixado a denominao dada quando todos os indivduos da populao so
homozigticos para umdado alelo.
Alelo letal Aquele que provoca a morte do indivduo que o possui quando emhomozigose.
Alelo recessivo Veja Recessivo.
Alelos mltiplos Quando umgene representado por mais de dois alelos.
Algama Veja espcie algama.
Alopoliploide ou aloploide Organismo que possui dois ou mais genomas provenientes
de espcies distintas, repetidas duas ou mais vezes.
Alotetraploide Organismo que possui dois genomas diferentes, cada umrepresentado
duas vezes.
Ambiente Conjunto das condies externas ao organismo e que afetamo seu crescimento
e desenvolvimento.
Ambguo Cdon compropriedade de codificar mais de umaminocido.
Aminocido Substncia orgnica que contmgrupamentos carboxila (COOH) e amina
(NH
2
) e que so os constituintes das protenas. Existemvinte aminocidos diferentes que
participamda sntese de protenas.
Aminoacil tRNA sintetase - Enzima especfica para cada aminocido e que participa da
sua ativao e do carregamento dos tRNAs, durante a biossntese protica.
Amostra Subconjunto de uma populao por meio do qual se estimamas propriedades e
caractersticas dessa populao.
Amplificao Aproduo de muitas cpias de fragmentos de DNA.
Amplificao gnica Processo de regulao da expresso gnica pelo qual o nmero de
cpias de certos genes aumentado nas clulas somticas.
Anfase Uma das fases da diviso celular emque ocorre a segregao cromossmica ou
cromatdica para os plos opostos da clula.
Anlogo de base Bases nitrogenadas compropriedades semelhantes quelas que ocorrem
normalmente nos cidos nuclicos e que geralmente so causas de mutao.
Andromonoico Expresso sexual observada em algumas espcies em que as plantas
produzemno mesmo indivduo flores masculinas e hermafroditas.
527
Glossrio
Anelamento Pareamento espontneo de duas fitas do DNApara formar a hlice dupla.
Aneuploide Organismo cujo conjunto somtico temexcesso ou falta de determinados
cromossomos.
Anfidiploide Indivduo proveniente da hibridao de duas ou mais espcies diplides.
Eles so normalmente estreis pela falta de homologia dos cromossomos.
ngstron Unidade de medida de comprimento, equivalente a 10
-10
m. muito utilizada no
dimensionamento de estruturas celulares. simbolizado por .
Anticdon Sequnciade trs nucleotdeos no tRNA, complementares ao cdonno mRNA,
sendo responsvel pelo correto posicionamento dos aminocidos na cadeia polipeptdica.
Anticorpo Tambmchamado de imunoglobulina. uma protena produzida pelo sistema
imunolgico de animaise que possui a capacidade de reconhecer, ligar e inibir uma substncia
especfica, denominada antgeno.
Antgeno Substncia, normalmenteprotena, que estimula a produode anticorpos quando
introduzida emumanimal.
Antiparalelas So as fitas complementares da molcula do DNAque apresentamdirees
opostas.
Arg Aminocido arginina.
Asn Aminocido asparagina
Asp Aminocido cido asprtico
Assexuada Forma de multiplicao ou reproduo que no envolve a fuso de gametas.
Caracteriza-se por produzir descendentes geneticamente idnticos ao genitor.
Assinpse Fenmeno gentico responsvel pelo no pareamento dos cromossomos
homlogos durante a prfase I da meiose.
Atenuador Regio adjacente aos genes estruturais de alguns operons. Essa regio atua
para determinar a taxa mais adequada de transcrio do operon.
ATPTrifosfato de adenosina - molcula energtica da clula sintetizada principalmente nas
mitocndrias e cloroplastos.
Atrao Quando emumcromossomo esto presentes os alelos dominantes ou recessivos
de dois genes diferentes.
Autofecundao Modo de reproduo sexuada emque os gametas masculinos e femininos
so oriundos do mesmo indivduo. Ocorre predominantemente nos vegetais.
528
Autofertilidade Capacidade para produzir sementes por autofecundao.
Autgama Veja espcie autgama.
Auto-incompatibilidade Mecanismos gentico-fisiolgicos que impedema autofecundao
das plantas que produzemgametas de ambos os sexos.
Autopoliploide Organismo que possui umnico genoma repetido mais de duas vezes.
Autossomo So todos os cromossomos de umorganismo no diretamente relacionados
coma determinao do sexo.
B
Bacterifago Partcula viral que infecta as bactrias para sua multiplicao, ocasionando a
destruio do seu hospedeiro.
Banco de germoplasma Local onde so mantidas colees de indivduos visando a
preservar a variabilidade gentica existente em uma ou mais espcies. No banco de
germoplasma, a manuteno da variabilidade pode ser feita utilizando sementes, propgulos
ou o prprio indivduo.
Biblioteca de DNA Coleo de fragmentos de DNA clonados, provenientes de uma
espcie qualquer, a partir da fragmentao do DNAgenmico por enzimas de restrio.
Biblioteca de cDNA Uma coleo de cDNAs de uma espcie no necessariamente
representando todos os mRNAs.
Biometria a aplicao da estatstica aos dados biolgicos para que os mesmos possam
ser interpretados.
Bivalente Par de cromossomos homlogos pareados durante a meiose por meio do
complexo sinaptonmico.
Brao cromossmico Corresponde a cada uma das partes dos cromossomos separados
pelo centrmero.
C
CAP Protena ativadora do catabolismo, cuja presena necessria para a ativao do
operon da lactose.
CaloConjuntodeclulasnodiferenciadasdeumaplantaobtidapor meio deculturadetecidos.
Capacete Estrutura situada na extremidade 5 do mRNA, sendo o primeiro nucleotdeo
uma metil guanosina, unindo-se s demais por uma ligao 5 : 5 fosfato s encontrado
nos eucariontes.
529
Glossrio
Carter Conjunto de informaes biolgicas que identificamos indivduos.
Carter qualitativo Aqueles que apresentamdistribuio descontnua.
Carter quantitativo Aqueles que apresentamdistribuio contnua.
Caritipo Representao de todos os cromossomos constituintes de um genoma
considerando a sua morfologia, principalmente tamanho e posio do centrmero.
Cauda de poli A Segmento de RNAformado somente com nucleotdeo que contm
adenina e que adicionado na extremidade 3do mRNAaps a transcrio.
cDNA o DNAtranscrito a partir de umRNAusando a enzima transcritase reserva.
Centimorgan (cM) Unidade de distncia entre genes localizados em um mesmo
cromossomo e que representa a frequncia de recombinao entre os mesmos.
Clula somtica Todas as clulas de umorganismo, exceto os gametas.
Centrmero Constrio primria dos cromossomos. Regio onde ocorre o cinetcoro no
qual se prendemas fibras do fuso durante as divises celulares.
Ciclo celular Conjunto de eventos que incluema intrfase e a diviso celular.
Cis Aminocido cistena.
Cistron Sequncia de DNAque codifica uma cadeia polipeptdica - unidade de funo
gentica.
Citocinese Denominao dada ao processo de diviso do citoplasma no final da diviso
celular.
Citogentica Ramo da biologia que estuda as estruturas e mecanismos celulares associados
gentica.
Citologia Ramo da biologia que estuda a estrutura e funes celulares.
Citoplasma Material entre as membranas nuclear e plasmtica. Inclui a parte fluda, as
organelas e as estruturas macromoleculares.
Citosina Base nitrogenada pirimdica que ocorre nos cidos nuclicos e pareia-se coma
guanina quando a molcula temduas fitas complementares.
CloneUmgrupode clulas ouindivduos geneticamenteidnticosderivadospor multiplicao
assexuada de umancestral comum.
Clone de DNA Fragmento de DNAque foi inserido emumvetor, tal como umplasmdeo
ou cromossomo de umfago, passando a se replicar para produzir vrias cpias.
530
CloroplastoOrganelacelular, encontrada nos vegetais, que est envolvida coma fotossntese.
Cdigo degenerado Propriedade do cdigo gentico em que um mesmo aminocido
pode ser codificado por mais de umcdon.
Cdigo gentico o processo pelo qual a informao presente no DNA utilizada para
ordenar os diferentes aminocidos na sntese de uma cadeia polipeptdica, por meio das 64
trincas possveis arranjadas a partir dos quatro diferentes nucleotdeos do mRNA.
Codominncia umtipo de interao emque ambos os alelos expressamseparadamente
seus produtos enzimas na produo do fentipo do heterozigoto.
CdonSequncia de trs nucleotdeos no mRNAque codifica umdeterminado aminocido.
CdonsemsentidoAs trincas UAA, UAGe UGAque no codificamnenhumaminocido.
Sua ocorrncia no mRNAdetermina o final da traduo.
Coeficiente de correlao Simbolizado pela letra r, uma medida estatstica do grau de
associao entre duas variveis.
Coeficiente de sedimentao Unidade da velocidade de sedimentao de partculas que
considera o seu formato e sua massa. Aunidade simbolizada por S de Svedberg.
Coeficiente de seleo (s) Excesso ou deficincia proporcional de adaptabilidade de um
gentipo emrelao a outro.
Coincidncia Aproporo de duplas permutas esperadas que so observadas.
Colchicina Alcaloide que interfere no processo de diviso celular impedindo a formao
das fibras do fuso. usada principalmente para induzir a poliploidia.
Colinearidade Diz-se da correspondncia entre a sequncia linear de nucleotdeos do
DNAe da sequncia linear de aminocidos emumpolipeptdeo.
Complexo sinaptonmico Estrutura que formada entre os cromossomos homlogos,
permitindo o pareamento de regies exatamente correspondentes.
Configurao cis Veja atrao.
Configurao trans Veja repulso.
Conjugao bacteriana Forma de recombinao entre bactrias, em que h troca de
material gentico por meio de contato fsico entre as bactrias receptoras e doadoras do
DNA.
Conjunto gnico Ototal de informao gentica dos indivduos de uma populao.
Consanguinidade Fenmeno que caracteriza indivduos que possuempelo menos um
ancestral comum.
531
Glossrio
Covarincia Parmetro estatstico utilizado para a estimativa da variao simultnea de
duas variveis.
Crescimento Aumento de tamanho dos organismos. Nos eucariontes devido
principalmente ao incremento no nmero de clulas via processo mittico.
Cromtide Cada umdos dois filamentos de umcromossomo duplicado que so observados
durante as divises celulares e que esto unidos por umcentrmero comum.
Cromatina Material nuclear que constitui os cromossomos descondensados, isto , na
interfse. uma nucleoprotena que se cora comfacilidade empresena de corantes cidos.
Crommero Pequenas regies mais condensadas distribudas ao longo dos cromossomos
e observadas no incio do processo meitico.
Cromossomo Estrutura nucleoprotica situada no ncleo e observada durante as divises
celulares, e onde se situamos genes nucleares, numa disposio linear. Cada espcie possui
umnmero que lhe peculiar.
Cromossomo acrocntrico Veja acrocntrico.
Cromossomo dicntrico So cromossomos com dois centrmeros. Eles ocorrem
temporariamente e normalmente so produtos da permuta na regio invertida de indivduos
heterozigticos para a inverso.
Cromossomos homelogos Cromossomos que so parcialmente homlogos.
Cromossomos homlogos So cromossomos que apresentama mesma morfologia e so
portadores dos mesmos genes. Pareiam-se durante o processo meitico e entre os quais
ocorre a permuta.
Cromossomos sexuais Cromossomos envolvidos na determinao do sexo.
Cromossomo telocntrico Veja telocntrico.
Cromossomo X Umdos cromossomos sexuais encontrado principalmente nos mamferos.
Cromossomo Y Umdos cromossomos sexuais responsvel pela determinao do sexo
masculino principalmentenos mamferos.
Cromossomo Z Umdos cromossomos sexuais encontrado principalmente emaves, alguns
peixes e insetos.
Cromossomo W Umdos cromossomos sexuais responsvel pela determinao do sexo
feminino principalmente emaves, alguns peixes e insetos.
Crossing over Veja permuta gentica.
Cruzamento o ato de se acasalar indivduos previamente escolhidos.
532
Cruzamento recproco aquele emque o genitor usado ora como macho ora como
fmea. Ocruzamento AAXaa recproco do cruzamento aa XAA.
Cruzamento teste umtipo de cruzamento cuja finalidade identificar se umindviduo
desconhecido homozigtico e comprovar a segregao ou a distribuio de dois ou mais
genes. Para isso, cruza-se este indivduo com um testador homozigtico para os alelos
recessivos envolvidos no estudo.
Cultivar Forma cultivada de alguma espcie. Emagricultura, normalmente utilizada
como sinnimo de variedade.
Cultura de tecidos o ato de promover o crescimento e desenvolvimento de tecidos ou
rgo in vitro utilizando ummeio de cultura apropriado.
D
Deficincia Perda de umsegmento cromossmico que altera a sua estrutura.
Deleo Perda de uma ou mais bases do DNAe que pode causar mutao.
Deriva genticaAlteraes nas frequncias allicas decorrentes de amostragemdeficiente
emnmero de gentipos ou do modo emque eles so escolhidos na gerao ancestral.
Desnaturao Fenmeno de separao das fitas de um DNA de hlice dupla quando
submetida a altas temperaturas ou tratamento qumico.
Desoxirribose Acar de cinco carbonos que participa da constituio do DNA.
Desvio padro Parmetro estatstico que expressa o desvio mdio de umconjunto de
dados emtorno da mdia. Corresponde raiz quadrada da varincia.
Diacinese Conjunto de acontecimentos que caracterizam o final da prfase I da meiose,
em que os cromossomos se encontram completamente condensados e os quiasmas
terminalizados.
Diferenciao o ato de ativar ou desativar os genes no local certo e momento correto.
Aativao significa que o gene foi transcrito e ser traduzido emuma cadeia polipeptdica.
Diferencial de seleo Diferena entre a mdia da populao e a mdia dos indivduos
selecionados para seremos genitores da prxima gerao.
Dimorfismo Quando uma populao apresenta indivduos com duas formas ou dois
fentipos distintos, como o dimorfismo sexual: macho ou fmea.
Dimorfismo sexual Quando os indivduos de uma espcie so unissexuais e distintos.
DNA estranho DNAoriundo de umoutro organismo de espcie diferente.
533
Glossrio
Dioico Espcie emque cada indivduo possui umnico sexo.
Diploide Indviduo ouclula que possui umgenoma emduplicata, ouseja, os cromossomos
homologos ocorremaos pares.
Diplteno Uma das subdivises da prfase I da meiose. a fase emque aparecemos
quiasmas.
Disjuno Separao de cromtides ou cromossomos homlogos durante a anfase.
Distribuio contnua Ocorre quando um conjunto de fentipos de um determinado
carter no forma classes distintas.
Distribuio descontnua Ocorre quando umconjunto de fentipos de umdeterminado
carter pode ser agrupado emclasses distintas.
Distribuio independente Ocorre quando dois ou mais genes esto situados em
cromossomos diferentes, ou no mesmo cromossomo a uma distncia de 50 cMou mais, o
que possibilita o comportamento aleatrio dos mesmos durante a meiose.
Distribuio normal a propriedade de um conjunto de dados de se distriburem
simetricamente emtorno da mdia. Isto , o dado mais frequente tem o valor da mdia,
enquanto os demais, comvalores menores e maiores, decrescememfrequncia medida
que se afastamda mdia.
Diviso celular Ver meiose e mitose.
DNApolimerase Enzimas envolvidas no processo de replicao do DNA.
DNA prova Segmento de DNA de fita simples utilizado para identificar a sequncia
complementar, geralmente por autorradiografia, como empregado na tcnica RFLP.
DNArecombinante Molcula de DNAnova construda a partir de segmentos de DNA
derivados de duas ou mais origens.
DNA repetitivo Sequncia de nucleotdeos que se repetemat ummilho de vezes por
clula.
DNAsatlite Tipo de DNAaltamente repetitivo e que se caracteriza por possuir densidade
diferente do restante do DNAgenmico.
DNase ou Desoxirribonuclease Qualquer enzima que hidrolisa o DNA.
Dominncia completa Interao allica emque o fentipo do heterozigoto o mesmo do
homozigoto para o alelo dominante.
Dominncia incompleta Interao allica emque o fentipo do heterozigoto situa-se no
intervalo estabelecido pelos fentipos dos homozigotos.
534
Duplicao Aberrao cromossmica emque uma parte do cromossomo est repetida.
Duplicao semiconservativa do DNA Processo de replicao do DNAem que cada
uma das fitas de uma molcula funciona como molde para produzir a fita complementar. No
final do processo, so geradas duas molculas filhas idnticas.
E
Efeito materno Denominao dada ao fenmeno pelo qual o fentipo dos filhos
determinado por elemento citoplasmtico materno devido a seus genes nucleares.
Eletroforese Tcnica para a separao de molculas, principalmente protenas ou DNA,
por meio de umcampo eltrico emumgel.
Emasculao Ato de eliminar os gametas masculinos antes da fecundao.
Embrio Conjunto de clulas diferenciadas nos estdios iniciais do desenvolvimento
derivadas do zigoto. Nos vegetais, constituemos primrdios da planta, possuindo esboadas
suas partes fundamentais: raiz, caule e folhas.
Endogamia Fenmeno que corresponde perda de vigor quando se acasalamindivduos
relacionados por ascendncia. Omximo de endogamia ocorre coma autofecundao.
Endomitose Duplicao dos cromossomos sema consequente diviso celular.
Endonuclease Enzima que corta o DNAno interior da cadeia.
Endopoliploidia Aumento no nmero de genomas provocado pela replicao dos
cromossomos sema diviso celular.
EndospermaTecidotriplide encontrado nas sementes de muitas angiospermas. formado
pela unio dos dois ncleos polares do vulo comumdos ncleos do gameta masculino.
Enzimas de restrio Nucleases que reconhecem uma sequncia especfica no DNA
promovendo o seu corte. So produzidas por bactrias como um mecanismo de defesa
contra DNAestranho.
Epigentico Processo pelo qual ocorre modificaes no funcionamento do gene, mas que
no so devidas a trocas na sequncia de bases do DNAdo organismo.
Epistasia Interao no allica emque a expresso de umgene inibida por outro.
Episttico Alelo de umgene que inibe a expresso de outro gene.
Equilbrio de Hardy-Weinberg Uma populao est em equilbrio quando as suas
frequncias allicas e genotpicas, de umdado gene, no se alteramnas sucessivas geraes.
Espcie Grupo de indivduos que possui a capacidade de trocar alelos livremente entre si,
pormno comindivduos de outro grupo.
535
Glossrio
Espcie autgamas Aquela emque as plantas se reproduzempredominantemente por
autofecundao.
Espcie algamas Aquelas emque as plantas se reproduzem predominantemente por
intercruzamento.
Espermatozoide Denominao dada ao gameta masculino animal.
Esterilidade Incapacidade de o indivduo produzir descendentes.
Esterilidade masculina Veja macho esterilidade.
Esterilidade parcial Fentipo de indivduos heterozigticos para certos tipos de aberraes
cromossmicas, expresso como umnmero reduzido de gametas viveis, apresentando
fertilidade reduzida.
Estrutura primria do DNA a sequncia linear de nucleotdeos na molcula de DNA.
Estrutura secundria da protena Dobramento da cadeia polipeptdica por meio de
pontes de hidrognio entre aminocidos prximos.
Estrutura secundria do DNA a associao das duas fitas em forma helicoidal
estabilizadas por pontes de hidrognio.
Estrutura terciria da protena Dobramento da estrutura secundria da protena para
formar umamolcula funcional.
Eucarionte Clulas queapresentamncleo e organelasdiferenciadas. Organismo constitudo
por essas clulas.
Eucromatina Regies da cromatina que se encontrammenos condensadas e, por isso,
coram-se mais levemente. Acredita-se seremas regies onde esto situados os genes ativos.
Euploide Clula que apresenta umgenoma ou vrias cpias deste. Organismo constitudo
por essas clulas.
xon Aporo dos genes dos eucariontes que traduzida emuma cadeia polipeptdica.
Exonuclease Enzima que degrada o DNAa partir das extremidades da molcula.
Expressividade Modo de expresso do gene. Pode ser uniforme ou varivel.
F
F
1
Primeira gerao filial proveniente do acasalamento de genitores homozigticos.
F
2
Segunda gerao filial proveniente do intercruzamento ou autofecundao de indivduos
da gerao F
1
.
536
F
n
Ensima gerao proveniente da autofecundao de indivduos da gerao F
n 1.
Fago Veja bacterifago.
Famlia Grupo de indivduos diretamente relacionados por descender de um ou mais
ancestrais comuns.
Fase S Parte da intrfase do ciclo celular quando ocorre a sntese de DNA.
Fenocpia Fentipo induzido por fatores ambientais e semelhante a outro determinado
geneticamente.
Fentipo Formas alternativas de expresso de uma caracterstica. Essa expresso depende
do gentipo e do ambiente.
Fentipo recessivo Fentipo de umindivduo homozigtico para o alelo recessivo.
Fertilidade Capacidade de umindivduo produzir descendentes viveis.
Fertilizao Unio dos ncleos dos gametas masculino e feminino.
Fixao allica Numa populao ocorre fixao quando a frequncia do alelo igual a
um. Nesse caso, todos os indivduos so homozigticos para aquele alelo.
f.Met Metionina formilada no radical amina. o primeiro aminocido adicionado durante
a sntese protica emprocariontes.
Fragmento acntrico Segmento de umcromossomo desprovido de centrmero.
Fragmentos ou peas de Okazaki Pequenos fragmentos de DNAformados durante a
replicao descontnua de uma das fitas da molcula.
Frequncia allica Proporo de umdeterminado alelo emuma certa populao.
Fuso de protoplastos Fuso de clulas, de organismos distintos, aps retiradas suas
paredes.
Fuso Conjunto de fibras microtubulares que so formadas a partir do centrmero para
mover os cromossomos durante a diviso.
G
Gameta Clula reprodutiva que normalmente contm metade dos cromossomos
caractersticos da espcie.
Gametognese Mecanismos que promovema produo dos gametas.
Garfo de replicao Local onde as duas fitas de DNA so separadas para permitir a
replicao de cada uma delas.
537
Glossrio
Gmeos Denominao dos descendentes oriundos de ummesmo parto, emindivduos de
espcies que normalmente produzemumnico descendente por gestao.
Gene Segmentode DNA, situado numaposio especfica de umdeterminado cromossomo,
que participa da manifestao fenotpica de umcerto carter.
Gene estrutural Geneque codifica a sequnciade aminocidos de umacadeia polipeptdica.
Gene ligado ao sexo Gene localizado no cromossomo sexual.
Gene modificador Gene que afeta a expresso de outro gene.
Gene reprter Gene cuja expresso fenotpica fcil de ser monitorada e que usado
para identificar a presena de transgenes.
Genes reguladores Genes que esto envolvidos como processo de ligar ou desligar a
transcrio de genes estruturais.
Genes ligados So aqueles situados no mesmo cromossomo e que apresentamsegregao
dependente por se situar a menos de 50 cM.
Gentica Cincia que estuda a hereditariedade e a variao.
Gentica qualitativa Ramo da gentica que estuda os caracteres que apresentam
distribuio descontnua.
Gentica molecular Parte da gentica que estuda a base molecular da estrutura e
funcionamento domaterial gentico.
Genticaquantitativa Ramo da gentica que estuda caracteres que apresentamdistribuio
contnua.
Genitor Indivduo envolvido na produo de uma descendncia.
Genoma Conjunto haploide de cromossomos portando todos os genes de uma espcie.
Gentipo Constituio gentica de umindivduo.
Germoplasma Emumsentido mais restritogermoplasma o conjuntode linhagens, hbridos
ou populaes melhoradas que so preservadas para utilizao em programas de
melhoramento.
Ginandromorfos Indivduos compartes masculinas e femininas.
Ginoico Expresso sexual observada emalgumas espcies emque as plantas s produzem
flores femininas.
GlnAminocido glutamina.
Glu Aminocido cido glutmico.
538
Gly Aminocido glicina.
Grupo de ligao Conjunto de genes existentes emumdeterminado cromossomo.
Guanina Base nitrogenada purnica que ocorre nos cidos nuclicos e que se pareia com
a citosina quando a molcula temduas fitas complementares.
H
Haploide Clulas quepossuemo nmero bsico de cromossomos. Organismos portadores
dessas clulas.
Hardy-Weinberg Veja equilbrio de Hardy-Weinberg.
Hemizigoto Condio na qual o indivduo diploide portador de apenas umdos alelos de
umgene. Pode ocorrer no caso de herana ligada ao sexo ou emconsequncia de deleo.
Hemoglobina Protena sangunea responsvel pelo transporte de oxignio na maioria dos
animais.
Herana citoplasmtica Veja herana extracromossmica.
Herana cruzada umcaso especial de transmisso de genes ligados ao cromossomo X
ou Zemque o fentipo do pai se manifesta nas filhas e o da me se manifesta nos filhos.
Herana extracromossmica Herana determinada por genes de DNA situados em
organelas citoplasmticas como os cloroplastos e mitocndrias.
Herdabilidade no sentido amplo Proporo da variao fenotpica que devida a causas
genticas.
Herdabilidade no sentido restrito Proporo da varincia fenotpica que devida
varincia gentica aditiva.
Hereditariedade Fenmeno pelo qual os descendentes se assemelham aos seus
ascendentes.
Heredograma Veja pedigree.
Hermafrodita Espcievegetal emque osrgos masculinos e femininosocorremna mesma
flor. usado tambmno caso de animais emque umindivduo portador dos rgos sexuais
masculino e feminino.
Heterocrio So clulas constitudas de ncleos diferentes emumnico citoplasma.
Heterocromatina Regies da cromatina mais densamente condensadas e que se coram
commaior intensidade. Acredita-se que sejamgeneticamente inertes.
539
Glossrio
Heterocromatina constitutiva Regies especficas de heterocromatina que sempre se
mantmcondensadas nos cromossomos homlogos.
Heterocromatina facultativa Heterocromatina localizada em posies que so
eucromticas emoutrosindivduos damesmaespcie, oumesmoemcromossomos homlogos.
Heterogamtico Indivduo que produz gametas diferentes comrelao aos cromossomos
sexuais.
Heterose Desempenho superior do hbrido emrelao mdia dos genitores.
Heterozigoto Indivduo que apresenta alelos diferentes de ummesmo gene.
Hexaploide Clula ou indivduo cujo ncleo contmseis cpias do genoma.
Hibridao Processo de obteno de hbridos.
Hibridao somtica Processo de hibridao mediante a fuso de protoplastos.
Hbrido Indivduo resultante do acasalamento de dois genitores comgentipos diferentes.
Hiposttico Gene que inibido por umalelo de outro gene.
His Aminocido histidina.
Histona Protena bsica que se associa molcula de DNAnos eucariontes para formar a
cromatina.
hnRNA Veja RNAheterogneo nuclear.
Homogamtico Indivduo que produz gametas iguais com relao aos cromossomos
sexuais.
Homlogo Veja cromossomos homlogos.
Homozigoto Indivduo que apresenta alelos iguais.
Hospedeiros Em engenharia gentica, consideram-se como hospedeiras as clulas
receptoras do DNAa ser clonado.
I
Idiograma Representao diagramtica do caritipo de umorganismo.
Ile Aminocido isoleucina.
Incompatibilidade Mecanismos gentico-fisiolgicos que tornam impossvel ou
extremamente difcil a fertilizao.
Indutor Substncia responsvel para ativar a transcrio de outros genes.
540
Inibidor Veja episttico.
Interao allica Ao combinada dos alelos de ummesmo gene emumheterozigoto
que resulta na expresso de seu fentipo.
Interao gnica Veja interao no allica.
Interao no allica Ao combinada de alelos de genes diferentes que participamda
expresso fenotpica de umcarter.
Intercinese Perodo entre as duas divises da meiose observada emalguns organismos.
Nessa fase no ocorre sntese de DNA, apenas de RNA.
Intrfase Sequncia de eventos que ocorre entre o final de uma diviso celular e o incio da
outra.
Interferncia Influncia de permuta gentica emumlocal sobre a ocorrncia de outra nas
proximidades e corresponde proporo de permutas duplas esperadas que no so
observadas.
Interferon Grupo de protenas que aumenta a resistncia de clulas animais a muitos vrus.
So sintetizadas e secretadas pelas clulas aps a infeco virtica.
Intersexo Indivduos pertencentes a espcies bissexuais que apresentamcaractersticas
sexuais intermedirias entre o macho e a fmea.
Introgresso Genes introduzidos em uma espcie, provenientes de outra espcie
relacionada, geralmente por meio de retrocruzamentos.
ntron Segmento do gene dos eucariontes que transcrito e que parte do hnRNA,
porm eliminado durante o processamento para formar o mRNA, no sendo, portanto,
traduzido.
Inverso cromossmica Cromossomo com inverso aquele com certa sequncia de
genes emordeminvertida emrelao ao cromossomo normal.
Invitro Ambiente fora do corpo do organismo utilizado para se realizar funes biolgicas.
Isoenzima Protena formada por duas ou mais cadeias polipeptdicas diferentes, as quais
ocorremempropores variadas, gerando molculasalternativas estruturalmente equivalentes,
porm, funcionalmente diferentes.
Isolamento reprodutivo Barreiras que impedem ou restringem o fluxo gnico entre
populaes.
541
Glossrio
L
Leptteno Aprimeira subdiviso da prfase I da meiose, quando os cromossomos esto
emincio de condensao.
Leu Aminocido leucina.
Ligao Veja genes ligados.
Ligao peptdica Ligao qumica que se forma entre o radical amino de umaminocido
e o radical carboxila do seguinte, durante a sntese de uma cadeia polipeptdica.
Ligase Enzima que catalisa a unio de dois segmentos de DNA.
Linhagem Indivduo ou grupo de indivduos comumnico gentipo homozigtico em
todos os locos.
Linha pura Ver linhagem.
Lise Destruio de uma clula bacteriana apsa infeco e multiplicaode umbacterifago
para a liberao de sua prognie.
Lys Aminocido lisina.
Loco Local no cromossomo onde se localiza umdeterminado gene.
M
Macho esterilidade Ausncia ou no funcionamento do plen emplantas.
Mapa gentico Idiograma representando a posio relativa dos genes ao longo dos
cromossomos. Nestes mapas, as distncias entre dois genes correspondem frequncia de
recombinao entre eles.
Mapa molecular Disposio de fragmentos de DNAao longo dos cromossomos de uma
espcie, de acordo comas frequncias de recombinao estimadas entre eles.
Marca gentica Gene marcador. Alelo usado para identificar a presena de alelos
de outros genes ou fentipo de interesse. usado como uma prova experimental para
verificar a ocorrncia de cruzamento ou a insero de um transgene nas clulas ou
tecidos.
Meicito Clula que se diferenciou para sofrer meiose. Recebe denominaes especficas
emanimais e vegetais e de acordo como sexo- espermatcito emanimais do sexo masculino,
ovcito emanimais do sexo feminino; microsporcito na flor masculina; e magasporcito na
flor feminina.
542
Meiose Processo de diviso celular responsvel pela formao dos gametas. Caracteriza-
se por promover a reduo do nmero de cromossomos da espcie metade.
Melhoramento gentico Arte e cincia para alterar geneticamente as plantas e animais de
modo a atender s necessidades do homem.
Mendelismo Denominao dada aos procedimentos que explicama herana de caracteres
como segregao e distribuio independente.
Meristema Tecido vegetal onde ocorre uma ativa taxa de diviso mittica.
Mestio Animal ou populao de animais descendentes do cruzamento de indivduos de
raas diferentes.
Met Aminocido metionina.
Metacntrico Cromossomo que possui o centrmero na posio mediana dividindo-o em
dois braos de tamanhos aproximadamente iguais.
Metfase Uma das fases da diviso celular quando os cromossomos ficamalinhados na
posio equatorial da clula e presos s fibras do fuso.
Metilao Alterao de uma molcula de cido nuclico ou protena pela adio de um
grupo metil.
Micrmetro (mm) Unidade de medida comumente usada emmicroscopia; igual a 1 x10
-6
metro, ou 1 x10
-3
milmetro. Sinnimo antigo: mcron.
Migrao Movimento de indivduos de uma populao para outra, podendo alterar as
frequncias allicas da nova populao.
Mitose Processo de diviso celular responsvel pelo aumento do nmero de clulas nos
tecidos somticos. Caracteriza-se pela produo de clulas filhas idnticas clula me.
Molde Fita de DNAque serve para determinar a sequncia de nucleotdeos de outra fita
que est sendo sintetizada ou que ser transcrita.
Monoicas Espciesde plantas que possuemflores masculinas e femininasseparadas, porm
no mesmo indivduo.
Monoplide Veja haplide.
Monossmico Tipo de aneuplide em que falta umdos seus cromossomos. representado
por 2x - 1.
Mosaico Indivduo que apresenta diferentes fentipos emfuno de possuir dois ou mais
tipos de clulas geneticamente diferentes.
543
Glossrio
Mosaico sexual Veja ginandromorfos.
mRNA Sigla do RNAmensageiro que traduzido para originar uma cadeia polipeptdica.
Nos eucariontes proveniente do processamento do hnRNA.
mRNAmonocistrnico Molcula de mRNAque codifica apenas uma cadeia polipeptdica.
mRNA policistrnico Molcula de mRNA que codifica mais de um tipo de cadeia
polipeptdica.
mtDNA DNAmitocondrial.
Mutao Processo responsvel pela produo de novos alelos por meio da alterao na
sequncia de bases do DNA.
Mutao de sentido errado Processo que produz um alelo mutante que codifica uma
cadeia polipeptdica compropriedades diferentes da original, ocasionando uma alterao
fenotpica.
Mutao espontnea Alterao da seqncia de nucleotdeos da molcula de DNApor
causas desconhecidas.
Mutao neutra Processo que produz um alelo mutante que codifica uma cadeia
polipeptdica compropriedades semelhantes s do alelo original, no ocasionando alterao
fenotpica e na adaptao do indivduo.
Mutao reversa Mutao no alelo mutante reconstituindo o alelo original
Mutao sem sentido Mudana na sequncia de nucleotdeos do DNA, resultando na
formao de umcdon que no codifica nenhumaminocido. Provoca assima terminao
prematura da cadeia polipeptdica.
Mutao silenciosa Mudana na sequncia de nucleotdeos do DNA, resultando na
formao de umcdon que codifica o mesmo aminocido do cdon anterior, emrazo da
degenerescncia do cdigo gentico.
Mutao somtica Mutao que ocorre nos alelos presentes nas clulas somticas.
Mutagnico Qualquer agente, qumico ou fsico, capaz de promover mutaes.
Mutante Uma clula ou organismo portador de alelos provenientes de mutao.
N
Nanmetro (nm) Unidade de medida de comprimento igual a 1 x 10
-9
metro. Sinnimo:
milimcron.
No disjuno cromossmica Quando os cromossomos homlogos no se separam
durante a anfase I da meiose.
544
Nucela Tecido somtico formado na parede interna do ovrio.
Ncleo Organela celular onde est situada a maioria das informaes hereditrias.
Nuclolo Estrutura formada no ncleo e que contmrRNA.
Nucleoprotena Estrutura formada de cido nuclico e protena e que constitui os
cromossomos.
Nucleossomo Primeira unidade de condensao da cromatina. Contmaproximadamente
200 pares de nucleotdeos associados a oito molculas de histonas.
Nucleosdeo Molculaorgnica constituda de umabase nitrogenada, ligada a uma pentose.
Nucleotdeo Monmero dos cidos nuclicos constitudo de uma base nitrogenada, uma
pentose e umgrupo fosfato.
Nulissmico Aneuploide emque h perda de todos os cromossomos de umdeterminado
tipo. Nos diploides tema forma 2x - 2.
Nmero bsico de cromossomos (x) Nmero gamtico de cromossomos nas espcies
diplides ancestrais dos poliploides.
O
Oligonucleotdeo Pequeno segmento de cido nuclico sinttico.
Ontogenia Histrico do desenvolvimento completo de umorganismo a partir do zigoto.
Operador Segmento de DNAemuma extremidade do operon que corresponde ao local
de unio da protena repressora.
Operon Conjunto de stios regulatrios da transcrio e de cstrons que so transcritos em
uma nica molcula de mRNA.
Organela Estrutura celular possuindo membrana e que apresenta funes especficas.
Organismo transgnico Indivduo que recebe um ou mais genes de outro organismo
sexualmente incompatvel.
Organizador nucleolar Constrio secundria de alguns cromossomos dos eucariontes,
onde esto localizados os genes que codificampara os rRNAs. Tambmdenominada de
regio organizadora do nuclolo.
Origem de replicao Sequncia especfica onde inicia a replicao do DNA.
Oscilao gentica Mudanas aleatrias nas frequncias allicas que ocorrem
predominantemente empopulaes pequenas emconsequncia de erro amostral.
545
Glossrio
vulo Nos animais, a clula sexual feminina formada no ovrio. Nos vegetais, um
corpsculo encontrado no interior do ovrio, dentro do qual ocorre a clula sexual feminina,
oosfera, que ao ser fertilizada, desenvolve-se na semente.
P
P Agerao parental emumdeterminado cruzamento.
Panmtica Populao grande que se reproduz por acasalamento ao acaso.
Paquteno Uma das subdivises da prfase I, quando os cromossomos homlogos
encontram-se completamente pareados formando os bivalentes. Acredita-se que nessa fase
ocorra a permuta gentica.
Partenognese Desenvolvimento de umindivduo a partir de umvulo no fertilizado.
Paterno Concernente ao pai.
Patgeno Organismo que causa doena.
PCR Sigla de Polymerase Chain Reaction, corresponde reao de polimerizao em
cadeia, e ummtodo utilizado para amplificar, in vitro, uma sequncia especfica de DNA.
Pedigree Diagrama que mostra a histria ancestral de umindivduo.
Penetrncia Frequncia comque umalelo se expressa fenotipicamente nos indivduos
que o possuem.
Peptdeo Molcula constituda de aminocidos.
Permuta desigual Permuta gentica entre cromossomos homlogos que no esto
perfeitamente pareados.
Permuta gentica Mecanismo que possibilita a recombinao de genes ligados por meio
da troca de partes entre cromtides no irms de cromossomos homlogos.
Phe Aminocido fenilalamina.
Pirimidina Base nitrogenada, sendo as mais comuns nos cidos nuclicos a timina, citosina
e uracila.
Plamdeo Ti Segmento circular de DNAencontrado emAgrobacterium tumefasciens, o
qual possui propriedades de se inserir no cromossomo da planta hospedeira, possibilitando,
assim, o seu uso como vetor na engenharia gentica.
Plasmdios Pequenos segmentos de DNAque se replicamautonomamente emclulas de
procariontes e eucariontes. usado como vetor na engenharia gentica.
546
Pleiotropia Fenmeno pelo qual umgene afeta vrias caractersticas.
Pleiotropia sidrmica Fenmeno pelo qual umgene afeta umcarter e este interfere na
expresso de vrios outros, dando origema uma sndrome.
Plen Estrutura que contmo gameta masculino das plantas que florescem.
Poligenes So genes compequeno efeito emumcarter particular, podendo suplementar
uns aos outros provocando alteraes quantitativas mensurveis.
Polimorfismo Ocorrncia na populao de vrios fentipos de um carter associados
comdiferentes alelos de umgene, ou polimorfismo de fragmentos de DNA.
Polinucleotdeo cido nuclico constitudo de vrios nucleotdeos.
Polipeptdeo Cadeia de aminocidos ligados.
Poliploide Clula que possui umoumais genomas repetidos vrias vezes. Organismo que
possui essas clulas.
Polirribossomo Veja polissomo.
Polissomo Conjunto de vrios ribossomos associados a ummRNA.
Populao Conjunto de indivduos da mesma espcie que apresentamcontinuidade no
tempo e possuem a capacidade de se interacasalarem ao acaso e, portanto, de trocarem
alelos entre si.
Primeira lei de Mendel Veja segregao.
Pro Aminocido prolina.
Probabilidade Aprobabilidade de ocorrncia de umevento dada pelo nmero esperado
de vezes que esse evento ocorre emrelao ao nmero total de eventos.
Procarionte Clula semncleo e organelas diferenciadas.
Prfase Primeiro estgio da diviso celular, quando se nota no ncleo uma condensao
progressiva da cromatina, que se transforma emcromossomos visveis e individualizados.
Prognie Omesmo que descendncia.
Progresso com a seleo obtido pelo produto do diferencial de seleo (ds) e a
herdabilidade (h
2
).
Prole Veja prognie.
Promotor Veja stio promotor
Protena Molcula formada por uma ou mais cadeias polipeptdicas.
547
Glossrio
Protena repressora Molcula protica que se liga ao stio operador e impede a transcrio
de umoperon.
Protoplasto Parte viva da clula, isto , clula cuja parede foi removida.
Pseudodominncia Dominncia aparente de umalelo recessivo, quando este se encontra
sozinho no indivduo, emconsequncia de deficincia cromossmica.
Purina Base nitrogenada, sendo a guanina e adenina as mais comuns nos cidos nuclicos.
Puro Veja homozigoto.
Q
QTL Locos de umcarter quantitativo identificado por marcadores moleculares.
Quadro de Punnett Mtodo tabular utiizado para determinar os gentipos descendentes
a partir da fuso dos gametas de seus genitores.
Quiasma Pontos de contato entre cromtides no irms e que representamos locais onde
ocorreu a permuta gentica.
Qui-quadrado Simbolizado por
2
5
. Ver teste de
2
5
Quilobase (kb) Unidade de comprimento dos cidos nuclicos que equivale a mil
nucleotdeos emmolculas de fita simples ou a mil pares de nucleotdeos emmolculasde fita
dupla.
Quimera Veja mosaico.
R
Raa Subpopulao comcaractersticas distintas e que mantma capacidade de trocar
alelos comindivduos de outras raas.
Raa fisiolgica Termo empregado para fungos patognicos e indica diferentes grupos
de virulncia.
Raa pura Termo utilizado pelos criadores de animais para caracterizar as populaes
comexpresses fenotpicas dentro dos padres raciais exigidos pelas normas de registro da
raa. No corresponde ao termo gentico homozigose.
RAPD (Randon Amplified Polymorphic DNA) Polimorfismo de fragmentos de DNA
aleatoriamente amplificados.
Reanelamento Ligao espontnea de duas fitas de DNApara formar umDNAde fita
dupla que havia sido desnaturado.
548
Recessivo Alelo que no se expressa no heterozigoto.
RecombinaoProcesso meitico que resulta na formao denovas combinaes genticas.
Recombinante Umindivduo ou clula cujo gentipo produzido por recombinao.
Renaturao Reassociao de fitas simples complementares de DNArestaurando a hlice
dupla.
Replicao semi-conservativa Processo de sntese de DNAemque cada uma das fitas
de uma molcula funciona como molde para produzir a fita complementar. No final do
processo, so geradas duas molculas filhas idnticas. Ver duplicao semiconservativa.
Replicon Segmento de DNAque se replica a partir de uma origemde replicao.
Represso catablica Ainativao do operoncausada pela presena de grande quantidade
do produto metablico produzido pelo operon.
Reproduo assexual Veja assexuada.
Repulso Quando emumcromossomo esto presentes o alelo dominante de umgene e o
recessivo de umsegundo gene.
Retrocruzamento Cruzamento de umindivduo comumdos seus genitores.
RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism) Polimorfismo de comprimento de
fragmentos de DNA, resultante da fragmentao de DNAgenmico por meio de enzimas de
restrio.
Ribose Acar de cinco carbonos encontrado emcada nucleotdeo que participa do RNA.
Ribossomo Estrutura comduas subunidades macromoleculares constitudas de RNAe
protena. Local onde se realiza a biossntese protica.
RNA Veja cido ribonuclico.
RNAheterogneo nuclear uma molcula de RNAtranscrita da fita anti-senso do alelo
nos eucariontes.
RNApolimerase Enzima que catalisa a sntese de uma molcula de RNAutilizando uma
das fitas do DNAcomo molde.
rRNA RNAque participa da constituio dos ribossomos.
S
S(Svedberg) Veja coeficiente de sedimentao.
Saco embrionrio Clula proveniente de meiose localizada no vulo vegetal, que possui
oito ncleos oriundos de endomitose, sendo duas sinrgidas, trs antpodas, dois ncleos
polares e a oosfera que o gameta feminino.
549
Glossrio
Satlite Parte terminal de um cromossomo, separado da sua parte principal por uma
estreita constrio.
Segregao Separao dos cromossomos homlogos na anfase I da meiose ou das
cromtides irms na anfase II. Nos indivduos diploides, resulta na formao de gametas
contendo apenas umdos alelos de cada gene.
Segregao Adjacente Na meiose de indivduos com translocaes cromossmicas
recprocas, h passagempara cada plo de umcromossomo normal e outro translocado.
Segregao allica Separao dos alelos durante a formao de gametas na anfase II
da meiose. Corresponde separao das cromtides irms para os plos opostos da clula.
o fundamento da primeira lei de Mendel.
Segregao alternada Na meiose de indivduos com translocaes cromossmicas
recprocas, h passagempara umdos plos da clula de ambos os cromossomos normais, e
para o outro os cromossomos translocados.
Segregao fenotpica Ocorrncia defentipos diferentes na descendnciade umindivduo
ou grupo de indivduos.
Segregao genotpica Ocorrncia de gentipos diferentes na descendncia de um
indivduo ougrupo de indivduos.
Segregao transgressiva Aparecimento emgeraes segregantes de alguns indivduos
comfentipos mais extremos do que os dos genitores.
Segunda lei de Mendel Veja distribuio independente.
Seleo artificial Seleo realizada pelo homem, permitindo a reproduo apenas dos
indivduos de seu interesse.
Seleo natural Sucesso reprodutivo diferencial, isto , nas populaes, indivduos com
maior sucesso reprodutivo deixammaior nmero de descendentes.
Sequncia palindrmicaSequncia de nucleotdeos do DNAqueapresenta ordemidntica
das bases quando lida na mesma direo nas fitas complementares.
Sequncia sinal Asequncia N-terminal de uma protena secretada e que necessria
para o seu transporte atravs da membrana do retculo endoplasmtico.
Ser Aminocido serina.
Sexo homogamtico Veja homogamtico.
Sinapse Pareamento dos cromossomos homlogos durante o zigteno e paquteno da
meiose atravs do complexo sinaptonmico.
550
Sistema imune Clulas e tecidos animais responsveis pelo reconhecimento e inibio de
antgenos que penetramno seu corpo.
Stio ativo Aparte da protena que deve ser mantida emuma forma especfica para ser
funcional Por exemplo, emuma enzima, a parte onde o substrato se liga.
Stio A Local no ribossomo ocupado por tRNAcarregando um aminocido que ser
adicionado cadeia polipeptdica emcrescimento.
Stio P Local noribossomo ocupado por umtRNAno qual est presa a cadeia polipeptdica
emcrescimento.
Stio promotor Stio regulatrio de tamanho pequeno, situado antes do inciode transcrio
e o local onde liga-se a RNApolimerase.
Solenoide Arranjamento espiralizado do DNAemcromossomos eucariticos produzidos
pela espiralizao de umconjunto de nucleossomos.
Somtico Veja tecido somtico.
Sonda Veja DNAprova.
Southern blot Transferncia de fragmentos de DNA, separados por eletroforese em
umgel, para uma membrana especial.
Substituio cromossmica uma tcnica que utiliza aneuploides e que consiste em
substituir umsimples cromossomo ou umpar por outros, de indivduos diferentes, por meio
de retrocruzamentos sucessivos.
T
Tautmero Ismero espontneo de uma base nitrogenada que altera as condies de
formao depontes de hidrognio mudandoas propriedades normais depareamento, podendo
levar mutao.
Tecido somtico Formado por clulas provenientes da mitose.
Telocntrico Cromossomo cujo centrmero est situado emuma de suas extremidades.
Nesse caso, o cromossomo apresenta apenas umbrao.
Telfase ltima fase da diviso celular caracterizada, entre outras coisas, pela
descondensao dos cromossomos e reaparecimento da membrana nuclear.
Telmero As extremidades de umcromossomo.
Terapia gnica Acorreo de uma deficincia gentica na clula pela adio ou insero
de umnovo segmento de DNAno genoma.
551
Glossrio
Terminalizao do quiasma Mudana do quiasma da sua posio original para a
extremidade do cromossomo.
Testador Indivduo homozigtico para umoumais alelos recessivos, usadoemcruzamentos
testes.
Teste de qui-quadrado (
2
5
) Teste estatstico no paramtrico utilizado para verificar se
as frequncias observadas ajustam-se s esperadas combase emuma hiptese.
Teste dos trs pontos Cruzamento teste envolvendo umgenitor heterozigtico para trs
genes ligados.
Ttrade Quatro clulas filhas haploides resultantes da meiose.
Tetraploide Clula que contmquatro genomas. Organismo formado por essas clulas.
Tetrassmico Tipo de aneuploide que possui quatro representantes de um mesmo
cromossomo, sendo o restante do complemento diploide. representado por 2x + 2.
Thr Aminocido treonina.
Timina Base nitrogenada pirimdica que ocorre no DNAe que se pareia coma adenina.
Tipo selvagem Gentipo ou fentipo que mais encontrado na natureza para umdado
organismo.
Totipotncia Fenmeno pelo qual uma clula potencialmente capaz de originar um
indivduo semelhante quele de onde ela foi retirada.
Traduo Decodificao da informao existente na sequncia de nucleotdeos do mRNA
emuma sequncia de aminocidos da cadeia polipeptdica.
Transcrio Processo de sntese de uma molcula de RNAutilizando uma das fitas de
DNAcomo molde.
Transcrio reversa Processo de sntese de DNAa partir de uma molcula de RNA.
Transcritase reversa Enzima que catalisa a sntese de uma cadeia de DNAutilizando uma
molcula de RNAcomo molde. Ocorre emalguns vrus.
Transduo Recombinao gentica embactrias mediada por umbacterifago.
Transformao bacteriana Recombinao gentica embactrias onde umDNAexgeno
absorvido e incorporado ao genoma da clula.
Transgene Gene preparado pela tcnica do DNArecombinante para ser introduzido em
outro organismo no relacionado.
Transio Mutao no material gentico causada pela substituio de uma purina por
outra ou de uma pirimidina por outra.
552
Translocao Movimento do ribossomo em relao ao mRNAdurante a biossntese
protica, resultando na transferncia do polipeptdio-tRNAdo stioApara o P.
Translocao cromossmica Aberrao estrutural em que um segmento de um
cromossomo transferidopara outro local nomesmocromossomo ouemoutrono homlogo.
Translocao recproca Translocao de dois segmentos cromossmicos, emque cada
cromossomo troca partes comoutro cromossomo no-homlogo.
Transverso Mutao no material gentico causada pela substituio de uma purina por
pirimidina, ou vice-versa.
Trinca Veja cdon.
Triploide Clula que contmtrs genomas. Organismo que contmessas clulas.
Trissmico Tipo de aneuploide que possui trs representantes de ummesmo cromossomo,
sendo o restante do complemento diploide. representado por 2x+ 1.
Tritium Istopo radioativo do hidrognio.
tRNA RNAque transporta os aminocidos durante a biossntese de protenas.
Trp Aminocido triptofano.
Tyr Aminocido tirosina.
U
Univalente Cromossomo no pareado durante o paquteno.
Uracila Base nitrogenada pirimdica que ocorre no RNAe pareia-se coma adenina nos
segmentos de fita dupla.
V
Vaca maninha Fmea de bovino, sexualmente no desenvolvida e gmea de ummacho.
Val Aminocido valina.
Variabilidade Capacidade de uma espcie, de uma populao ou de uma prognie para
expressar diferentes fentipos.
Variao Diferenas fenotpicas ou genotpicas entre indivduos de uma populao.
Variao ambiental Variao fenotpica que ocorre devido a diferenas nas condies
ambientais a que os indivduos so submetidos.
Varincia Veja desvio padro.
553
Glossrio
Varivel Emgentica, corresponde aos diferentes fentipos de ummesmo carter.
Variedade Taxonomicamente uma subdiviso de espcie. Nas algamas, utilizada para
identificar uma populao cultivada emequilbrio de ligao. Ver cultivares.
Variegao Veja mosaico.
Vetor Termo empregado na engenharia gentica para designar os veculos utilizados para a
introduo de umDNAexgeno emumhospedeiro.
Viabilidade Probabilidade de o zigoto se desenvolver e atingir o estdio adulto.
X
Xnia Efeito do plen nas expresses fenotpicas do embrio e do endosperma.
5
2
Veja teste de qui-quadrado.
Z
Zigteno Uma das subdivises da prfase I da meiose, caracterizada pelo incio do
pareamento dos cromossomos homlogos.
Zigoto Clula proveniente da fertilizao.
554
555
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