Electrofiziologia membranei celulare

Proteine membranare
Canale ionice Pompe ionice Sisteme de cotransport

K+e
4 mM/l

Na+e Ca++e
140 mM/l 2 mM/l

ext

+ + + + +

int

K+i

Na+i

Ca++i

- - - - -

140 mM/l 10 mM/l 0.001 mM/l

-90 mV

Electrofiziologia membranei celulare

dQ I= dt
K+e
4 mM/l

RT [ Xe ] x lg Veq x= V [ X ] i

Na+e Ca++e
140 mM/l 2 mM/l

1 g= R

R
Ca++i

+ + + + +

ext

C
int

K+i

Na+i

- - - - -

140 mM/l 10 mM/l 0.001 mM/l

-90 mV

Electrofiziologia membranei celulare

Canale ionice
ioni transportati selectivitate curenti realizati cinetic de activare ++ mod de activare (cationice / anionice) (selective / neselective) (depolarizant / repolarizant) (rapide / lente) (voltaj / mediatori / strech)

K+e
4 mM/l

Na+e Ca
140 mM/l

2 mM/l

ext

+ + + + +

int

K+i

Na+i

Ca++i

- - - - -

140 mM/l 10 mM/l 0.001 mM/l

-90 mV

Evolutia canalelor ionice

Subunitate Kmin Canal Kir
(Rectificator spre interior)

Canal Kv
(Voltaj(Voltaj-dependent)

exterior H5 2

2 3

H5

interior
Kmin

K+ K+
1 2 5 6

exterior

interior
Kmin

Familia canalelor Kir

Canal de K+ activat de mediator
Porul canalului Kir
Adenozina Acetilcolina K+

Canal de K+ ATP senzitiv

Porul canalului Kir

A1

M2

H5

H5

Gi

K+

Receptor de sulfoniluree

Fixare ATP

Canalul de Na+ dependent de voltaj: de la structur la modele

exterior 1
2 3 4 5 6

+
Senzor voltaj
interior Filtru selectiv Poarta de inactivare
P

NH2

Na+ Senzor voltaj

P P

Poarta de activare

COOH

Voltaj

Na+
exterior

Repaus

+
interior

Activ

+
Poarta de inactivare

Inactiv

ATP-aza Na+ - K+ dependent

Digitalis purpurea

Dinamica fenomenelor din cadrul cuplului electro-contractil

Antiportul Na+ - Ca+2

Ca+2 3Na+

2K+

Studierea electrofiziologiei celulare

potenial de repaus

timp Extracel.

Intracel.

50 - Tehnica microelectrozilor (Hodgkin & Huxley)

Pr. Nobel -1963

80 - Tehnica patchpatch-clamp (Neher & Sakmann)

Pr. Nobel -1991

90 Inginerie genetic

Tehnica microelectrozilor (Ling & Gerard, 1949)

nclzire tractionare electrod metalic (AgCl)
potential de repaus

vrf (<1m)

timp

sol.electrolitic (KCl 3M)

Extracel.

canal

K+

Intracel.

Tehnica patch-clamp
The Nobel Prize in Physiology and Medicine (1991)

Erwin Neher

Bert Sakmann

"for their discoveries concerning the function of single ion channels in cells"

Tehnica patch-clamp

Genetica n studiul canalelor ionice

Antman - 2007

Potentialul de repaus
Canal Kir
(Rectificator spre interior)
porul canalului= 4 x H5

RT Veq K= V

x lg

[ Ke ] = - 94 mV [ Ki ]

AAAA-

K +i
140 mM/l

K+e
4 mM/l

+ +

ATP Na+e
140 mM/l

+ +

Na+i
10 mM/l

+ +

porul canalului= 4 x H5 inactivare

-90 mV
RT Veq Na= V
x lg

Canal voltaj-dependent

reactivare

[ Nae ] = + 63 mV [ Nai ]

Tipuri de potentiale de actiune n diferite regiuni ale inimii

Nod sinusal

Miocard atrial

Nod atrioventricular atrio

Sistem HisHis-Purkinje Miocard ventricular

Fibrele miocardice cu rspuns rapid vs lent

PA lent
+40 +20 0

PA rapid

Em (mV)

-20 -40 -60 -80

-100 0 200 400 600 800 1000 2000

Timp (ms)

Potentialul de actiune de tip rapid

0 mV

-90 mV

Depolarizarea:
efectul curentului de Na+

Tetrodotoxina Lidocaina

Repolarizarea:
efectul curentilor curentilor de K+

Curentul Kir: pactul naturii cu diavolul

Denis Noble, 2004

Na+
n repolarizare:

Na+ K+

Ca+2 K+ K+

-conductanta K+ se mentine -absenta curentilor depolarizanti

-conductanta K+ devine -prezenta de curenti depolarizanti

Celula nervoas

Celula miocardic

* HERG = human ether-a-go-go-related gene

Heterogenitatea curentilor la nivelul miocardului

Endo M

RV LV
Epi

Ito IKs

++ ++ -

+ +

Ito + I K r ++ IKs ++

++ ++ +

+++ ++ ++

Medicamentele antiaritmice

Clasa I - scad viteza de conducere prin blocarea INa Ia - prelungesc PA

ex. Chinidina Procainamida

Ib - scurteaz PA
ex. Lidocaina Mexitil

Ic - nu modific PA
ex. Flecainida Propafenona

Clasa II - BetaBeta-blocante
ex. Propranolol Metoprolol

Clasa III - prelungesc PA

ex. Amiodarona Sotalol

ClasaIV - Calciu-blocante
ex. Verapamil Diltiazem
dup VAUGHAN WILLIAMS (1970)