Sunteți pe pagina 1din 21

Lucrarea N 1 Tema: Introducere n cromatografia gaz-lichid a toxicilor volatili.

Cercetarea substanelor toxice care se izoleaz din materialul biologic prin metoda antrenrii cu vapori de ap. Scopul lucrrii: Studierea metodelor de identificare a toxicilor volatili aplicnd metoda cromatografiei gaz- lichide. Planul Controlul cuno!tinelor practice. #ucrul de sinestttor asupra identificrii toxicilor volatili prin metoda C$#. Concluziile lucrrii !i controlul deprinderilor practice. 'formarea proceselor verbale.

. ". %. &.

Subiectele ce stau la baza pregtirii teoretice . (nsu!irea tehnicii de lucru cu cromatograful) a regula parametrii de baz * temperatura+ viteza gazului vector+ a controla lucrul principiilor de dozare. ". (nsu!irea tehnicii de analiz a probelor lichide !i gazoase cu coninut de substane toxice. %. ,relucrarea cromatogramelor+ calculnd timpul de retenie corectat !i relativ. &. Identificarea toxicilor volatili prin metoda cromatografiei gaz-lichide. -. ,rincipiile de baz ale C$#. .. Schema cromatografului gaz-lichid. /. Camera de evaporare !i funciile ei. 0. Coloanele cromatogafice !i rolul lor n separarea substanelor. 1aza staionar !i cerinele fa de ea. 2. 3ipurile de detectori !i sensibilitatea lor. 4.5oiune de cromatogram !i pic cromatografic. .3impul de retenie n coloan. ".6etodele de determinare calitativ n analiza cromatografiei gaz-lichide. %.1actorii care acioneaz asupra separrii substanelor n coloana cromatografic eficacitatea coloanei+ selectivitatea fazei staionare. &.7tapele de baz n identificarea toxicilor volatili izolai din materialul biologic prin metoda C$#. . Ce factori acioneaz la separarea componentelor n coloana C$#8 ". 7xplicai noiunea de eficacitate a coloanei cromatografice.

%. Care sunt parametrii ce caracterizeaz nlimea echivalent talerelor teoretice8 &. Cerinele+ care se atribuie ctre faz lichid staional. -. 9efiniia coeficientului de repartiie componentelor n cercetare prin metoda C$#. .. 5atura formelor de interaciune ntre substanele de cercetare !i faza staionar. /. :eciprocitatea dintre coeficientul de repartiie !i forele de interaciune a componentului cu faza staionar lichid. 0. Care sunt parametrii de care depinde timpul de reinere !i corectat n coloana cromatografului8 2. ,rincipiile de baz pentru identificarea toxicilor volatili n lichidul biologic prin metoda C$#. . Rspundei argumentat la urmtoarele ntrebri . (n ce compartiment al cromatografului se efectueaz separarea substanelor. ". Care este prioritatea metodei C$# fa de metodele chimice pentru analiza toxicilor ;volatili<. %. Cum nelegei definiia ;nlime<+ ;talere teoretice echivalente<. &. Ce dozatore se folosesc pentru transmiterea probelor gazoase !i lichide n coloana cromatografului8 -. Cum se schimb mrirea tipului de retenie a substanelor n coloan n timpul analizei calitative8 a. 9e la momentul introducerii probei. b. 9e la maximum picului de aer. c. 9e la maximum picului vecin8 .. Ce este timpul de retenie corectat !i timpul de retenie relativ !i de ce parametrii ai cromatografului depind ei8 . Cum se va petrece repartiia pe coloana cromatografic+ care conine "4 = glicerin a urmtorilor amestecuri8 Metanol, etanol, propanol, butanol ,ropanol+ benzen 'ctan+ benzen ". >rgumentai rspunsurile la acelea!i ntrebri dac n calitate de sorbent ar fi "4 = ulei de vaselin. %. 9ai explicaie expresiilor) - timpul reinerii - distana de reinere - volumul de reinere
"

&. ,rin ce se determin selectarea fazei staionare lichide8 -. Cu a?utorul crei faze staionare lichide @A$- -44 ori 3riton B- 44 este mai eficient rfepartiia amestecurilor eterilor metilici ai acizilor gra!i8 >rgumentai rspunsul. Ce proprietate a substanelor de cercetat determin cantitatea necesar a bazei lichide staionare n coloana cromatografic8 >rtai aproximativ cantitatea fazei lichide staionare pentru repartiia amestecurilor hidrocarburilor aromatice+ alcoolilor alifatici+ substane medicamentoase Rspundei n scris la urmtoarele ntrebri Problema 1. ,entru separarea substanelor folosirea ca detector n caterometru se folosesc diferite gaze-vectori- azot+ heliu+ hidrogen+ argon. Ce gaz-vector asigur o sensibilitate mai mare a catarometrului. >rgumentai rspunsul alctuind urmtoarea tabel. Gaz onductibilitate termic !. !ol

Problema ". (n secia chimico-?udiciar e necesar de determinat cantitatea metanolului n urin prin metoda cromatografiei gaz-lichide. Ce detector trebuie s folosim+ ca la determinarea metanolului s nu mpiedice apa8 Problema #. (n secia chimico-?udiciar trebuie de efectuat analiza-express a materialului biologic asupra microcantitilor de cloroform n snge. Ce tip de detector trebuie s folosim pentru soluionarea acestei probleme8 Problema $. Ceteanul > fost internat n centrul pentru tratarea intoxicaiilor acute cu presupunere de intoxicare cu fenol. > fost efectuat analiza gaz-cromatografic a urinei acidulate a pacientului. ,e coloana polar timpul relativ de reinere corespundea etilenglicolului !i fenolului+ iar pe cea nepolar fenolului !i toluolului. Ce concluzii a fcut chimistul-expert8 Problema %. ,entru identificarea picului cromatografic se folosesc urmtoarele caracteristici) a. ,unctul iniial al picului b. 6aximul picului c. #imea picului d. (nlimea picului. e. Suprafaa picului. Lucrul practic al studenilor n cadrul lucrrii de laborator
%

Studenii fac cuno!tin cu tehnica de securitate. #ucrul practic const din " etape) I. 9eterminarea timpului de reinere relativ a substanelor pure pe coloane de polaritate diferit !i completarea tabelei generale. II. Identificarea toxicilor ;volatili< n amestecul-model. . 1iecare student prime!te substan o cromatografiaz pe coloane cu polaritate diferit. Se prelucreaz cromatogramele obinute. ". 1iecare student prime!te amestecul model+ coninnd " substane necunoscute !i le cromatografiaz pe ambele coloane cu polaritate diferit n acelea!i condiii.Cromatogramele se prelucreaz+ calculnd timpul de reinere corectat !i relativ. >poi identificarea se efectuaz dup schema aplicat n cercetarea cromatogramelor model. .% 9eterminarea timpului de retenie relativ a componentelor pure pe coloana cu faz staionar lichid de polaritate diferit !i alctuirea tabelei generale. C#ucrarea ID. &. Identificarea toxicilor volatili n amestecul model C#ucrarea IID. . ". %. &. -. . ". %. &. . &paratura 'i detaliile aucziliare Cromatograful gaz-lichid cu detector !i termostat la t 44 !i m.m. 6icrosering pentru mcl !i 4mcl. 1laconul cu lichide pentru splarea microseringelor) cu alcool+ cu eter. #inia de msurare+ triunghi+ lupa. Colba cu ap de spun !i periua Regulile pentru studeni la (olosirea microseringilor #a sfr!itul lucrului seringa se spal cu alcool+ eter+ lund fiecare solvent n sering de "-% ori !i elibernd pe hrtie de filtru. Seringa se aran?az n penal. Se interzice de a in?ecta n coloan acul pn a fi colectat proba. 5u se admite colectarea rapid a probei. Pregtirea ctre analiza cromatografic (nainte de a ncepe lucrul verificm ermeticitatea camerei de evaporare. ,entru aceasta cu a?utorul periei !i soluiei de spun se unge deschiztura evaporatorului+ unde ar trebui s troducem acul siringei. 7rmeticitatea se constat prin lipsa vaporilor de gaz n aceast regiune. Controlul ermeticitii se efectuaz !i n timpul lucrrii. Controlul eficacitii siringii de l se face prin colectarea 4+- l aceton !i dozarea lui pe hrtia de filtru. (n timpul dozrii apare o micropictur

".

&

pe vrful acului+ iar la atingerea ei pe hrtie de filtru * apare un spot umed. 9ac pictura lipse!te atunci se ntre!te acul de siring. (n procesul lucrului ermeticitatea microseringii se controleaz de fiecare dat dup /- 4 probe. ndeplinirea analizei cromatografice >naliza gaz-cromatografic ncepe cu aran?area bandei de autonscriere. >poi n microsering se colecteaz 4+-l solvent organic !i se introduce n camera de evaporare a cromatografului. Se nseamn cu creionul momentul introducerii probei. 9up aceasta se nregistreaz picul aerului+ care se nseamn prin ;>er<+ dup care urmeaz s fie picul probei de analizat compusului standard ori amestecul standard propus de profesor. >naliza aerului !i la toate celelalte probe se interpreteaz consecutiv nu mai puin de " ori pe aceea!i coloan. >stfel se controleaz suprapunerea cromatogramelor paralele dup timpul de reinere+ adic dup distana de la momentul introducerii pn la apariia maximului !i dup mrimea nlimii lui. 9ac rezultatele obinute de pe ambele cromatograme nu se suprapun se repet experiena pn la suprapunerea rezultatelor. (n cazuri contrare calitatea cromatogramelor paralele se analizeaz cu profesorul. >naliza substanelor lichide se ndepline!te cu a?utorul microseringei de l ori 4 l .6rimea probei -4+- l. Sensibilitatea pentru fiecare substan se alege individual. 9up ndeplinirea analizelor paralele seringa se spal de cteva ori cu soluia de analizat !i numai atunci este gata de colectat proba pentru ndeplinirea experienei urmtoare pentru aceea! prob. Analiza cromatogramelor Iniial se msoar cu a?utorul riglei distana CmmD de la momentul introducerii probei pn la maximul picului de aer Cfig. D. >ceast distan corespunde timpului de gsire a componentului n interiorul cromatografului n stare mobil. 6rimea 3 este distana de reinere a gazului neabsorbit. Se msoar ea cu a?utorul riglei n mm. 9istana obinut n mm raportat la viteza mi!crii corespunde timpului de reinere a gazului neabsorbit n sec ori min. 9istana de la maximul picului aerului pn la maximul picului compu!ilor de analizat+ raportat la viteza lentei corespunde timpului de retenie corectatat al amestecului de analizat C3 D. 9ac nu se menioneaz ;!trih< atunci este timpul de reinere a gazului neabsorbit+ care nu e adecvat pentru calcule. ,entru calculele de identificare se folose!te numai timpul corectat C3D+ a!a cum numai el determin timpul+ n care moleculele

substanei de analizat a ;toxicului volatil< se gsesc n stare de absorbie CdizolvareD n faz staionar. 5umai timpul staionrii este diferit pentru fiecare toxic ;volatil<+ dup cum numai el caracterizeaz solubilitatea diferit a toxicilor n una !i aceea!i faz staionar+ ori absorbia diferit in unul !i acela!i absorbent. 9atele valorilor # !i 3 a fiecrui component se nscriu n tabel 3abelul 9enumirea compusului Coloana cu sorbentul polar # ) 3sec ) 3rel Coloana cu sorbent polar # ) 3sec ) 3rel

- Cloroform - >lcool propilic - 7tanol #x 3: E ---------------------C Cviteza lenteiD Faloarea 3rel se calculeaz cu exactitate pn la 4+4 . 9up efectuarea calculelor !i ndeplinirea tabelului n procesul verbal studentul nscrie o tabel o singur pagin+ care conine date despre condiiile cromatografice a tuturor substanelor cercetate.

1ig. . 9eterminarea distanei de reinere pe cromatogram a * momentul introducerii probeiG b * maximum picului de aerG c * maximum picului substanei de cercetatG #x * distana de reinere total #x * distana cercetat de reinere # * distana de reinere a gazului neabsorbit )biectele de cercetare - amestec model din " toxici volatili din urmtoarele componente) cloroform+ alcool * metilic+ etilic+ butilic+ izobutilic+ aceton+ etilacetat+ toluen+ dioxan+ benzen+ tetraclorur de carbon+ dicloretan+ hexan. Etapele de lucru: I. 9eterminarea timpului de retenie relativ a componentelor pure pe coloana cu faz staionar lichid de polaritate diferit !i alctuirea tabelei generale. C#ucrarea ID. II. Identificarea toxicilor volatili n amestecul model C#ucrarea IID. 1iecare student prime!te amestecul model coninnd " substane necunoscute !i efectueaz cromatografierea pe dou coloane de polaritate diferit n acelea!i condiii ce se refer la substanele pure. C#ucrarea ID. Cromatogramele se prelucreaz+ calculnd timpul de retenie corectat !i relativ. >poi identificarea se efectueaz dup schema dat. ,e cromatogram se arat parametrii+ care se folosesc pentru identificare. *ndicaii pentru e(ectuarea identitii to+icelor ,-olatili. Identificarea toxicilor ;volatili< prin metoda cromatografiei gaz lichide se reduce la 3rel pe " coloane cu polaritate diferit. 9ac componentul nu se separ pe o coloan sub form de pic+ numaidect separarea are loc pe a II coloan. 9eaceea analiza amestecurilor se efectueaz pe dou coloane cu sorbent de polaritate diferit. ,e cromatogramele obinute se calculeaz timpul de retenie relativ pentru fiecare pic cromatografic. ,arametrii obinui se aran?az n dou tabele. (n prima tabel se includ parametrii de reinere pe coloana cu sorbentul polar+ a doua * pe coloana cu sorbent nepolar. >ici se finiseaz I etap de lucru. (n etapa II se folosesc datele individuale din tabel obinute pentru toxicii ;volatili< (n tabelul " includ parametrii de reinere !i denumirile corespunztoare+ la care timpul de retenie relativ nu se deosebe!te dect cu 4+4-+ determinat experimental prin analiza amestecurilor de toxici neconoscui. 7xemplu de tabel. 9atele experimentale !i tabelare despre parametrii de reinere a toxicilor ;volatili< necunoscui pe coloana cu sorbent polar.
/

Calculele timpului relativ de reinere este ndeplinit n raport cu benzenul Cori alt solventD. Tabelul 2 Datele despre parametrii de reinere a to icilor !"olatili# necunoscui pe coloana cu sorbentul polar 5r pic pe 9atele experimentale 9atele din 9eterminarea cromatogram tabel substanei # CmmD 3rel 3rel .% 4+0& 4+/2 Hutilformiat 4+0 ,ropoxibutan 4+06etanol " "4+22 +44 Henzen +44 Hutilizobutirat +4 Cloroform +4% 9ibutoxibutan 9atele din tabele despre parametrii de reinere !i determinarea toxicilor ;volatili<+ care pot asista n problema de control e necesar s se continu n tabela completat dup rezultatele determinrii timpului de reinere relativ a toxicilor pure * substane de comparare * pe dou coloane cu polaritate diferit. >ceste tabele sunt rezultatele lucrului practic a lucrrii precedente. ,entru etapa urmtoare lucrul const n compararea tabelelor completate pentru coloanele cu diferit polaritate coninnd date concrete timpul de reinere a toxicilor ;volatili< necunoscui din problema de control !i denumirile propuse. 9e aici rezultat+ c componentele care au pic comun pe o coloan s fie n aceea!i msur orientate !i pe alt coloan. >ceste condiii se respect. 9ar cu toate acestea sunt abateri+ cnd nectnd la polaritatea diferit+ ambele coloane nu sunt selective pentru perechea dat de substane. (n acest caz aceste substane urmeaz s fie excluse din ambele tabele !i necesitatea identificrii lor se rezolv separat dup cum n amestecul de analizat ar putea s existe n mod separat ori mpreun. (n rezultat ambele componente se nscriu n rspunsul problemei ;convenional identificate<. 9up excludere se funcioneaz compararea tabelelor. >ceste denumiri corespund toxicilor+ care persist n obiectul de cercetare. ,entru finalizarea acestei etape de lucru urmeaz s completm tabela final+ forma creia este dat mai ?os.

3abel ul % 9enumirea toxicilor ;volatili< determinai pe fiecare coloan cu polaritate diferit Coloana polar Coloana nepolar 9enumirea toxicului identificat

,rima rubric a tabelei se completeaz cu toate denumirile+ gsite pe coloana polar+ a II cu denumirile de pe coloana nepolar. 9enumirile subliniate se nscriu n rubrica II. >cestea vor fi la rndul lor denumirea toxicilor cercetai. >!a dar+ n procesul identificrii+ efectuat pe coloane paralele+ denumirea toxicului+ care se conine n prob e necesar+ ca s fie determinat dup totalitatea parametrilor de repartiie obinui pe fiecare coloan folosit. 9ac denumirea toxicului e gsit numai dup datele unei coloane+ acest toxic n prob de cercetat nu se conine. Inii !i aceea!i toxici pe diferite coloane pot fi repartizai n ordine diferit. 9ac pe cromatograme se nregistreaz numai un pic !i nu este exclus prezena lui n prob n calitate de toxic ;volatil< apare necesitatea de a schimba benzenul cu un alt solvent de exemplu) butilacetat+ alcool propilic. ontrolul total . >precierea rezultatelor obinute n urma efecturii lucrului practic. ". Semnarea proceselor verbale. /ibliogra(ie . 6aterialul prelegerilor ". JKLMNOP Q.R.+ STUVMWXYK S.@. ZK[\]M^_\`aYKU bT\cKa\dTKeMU P eKTcKWOPaMfO`_\c KYKNM[O. gMhMYOP+ ;iaMMYWK<+ 2/0+ T. &- 4+ -2. "4-"-. %4--%. %. R.Q. gTKcKTOY_\ j S\_`M_\N\dMfO`_KU bMcMUk+ gMOP+ RXlK h_\NK+ 202 &. Z.mK_. nOoT+ p.J\VONNM. RPO^OYMO P dK[\]M^_\`aYqr bT\cKa\dTKeMr. m.+ mMT+ 2/4. s. "2-%2. -. RMd^OTdKM[ m.t. gKfO`aPOYYXo dK[\bT\cKa\dTKeMfO`_Mo KYKNM[+ dN. %+ m.+ ;uMcMU<+ 2/2+ T. %-.. .. n.@OTWOP. n. g\TWOP. tVTKP\fYM_ V\ dK[\P\o bT\cKa\dTKeMM. m\`_PK+ ;mMT<+ 20/+ T."&..

Lucrarea N" Tema: !etoda cromatogra(iei gaz0lic1ide n analiza c1imico0 to+icologic. 2eterminarea cantitati-. Scopul lucrrii: > nsu!i metodele de determinare cantitativ a toxicilor ;volatili< prin metoda C$#. > studia teoretic !i a asimila practic metodica de analiz a C$# asupra alcoolul etilic n snge !i urin aplicat n laboratoarele Centrului de medicin legal+ !i laboratoarele chimice. Planul . Controlul cuno!tinelor teoretice. ". #ucrul de sinestttor asupra metodei de determinare calitativ !i cantitativ a alcoolului etilic n lichidele biologice. %. Concluziile lucrrii !i controlul deprinderilor practice. &. 'formarea proceselor verbale. . $ubiectele ce stau la baza studierei temei: Hazele teoretice ale C$#. - eficacitatea coloanei cromatografice !i fazei staionare lichide - selectivitate fazei staionare - detectorii cromatografului 9eterminarea cantitativ prin metoda cromatografiei gaz-lichide. 6etodele de calculare a suprafeei picurilor) - normrii a ariilor - standardului intern - calibrrii absolute Ce reacie st la baz identificrii !i dozrii alcoolului etilic n lichidele biologice prin metoda C$#. Condiiile de identificare a alcoolului n lichidele biologice prin C$#. 'biectele de cercetare asupra alcoolului etilic n analizele chimico?uridiciare !i chimice. Cum se msoar valoarea ;timpului de reinere< pe cromatogram * de la momentul introducerii probei+ de la maximul picului de aer8 Ce numim timp de reinere corectat !i relativ8 Ce detector se folose!te la determinarea alcoolului etilic n snge !i urin prin metoda C$#8

". %.

. ". %. &. -. ..

/. (mpiedic oare determinrii alcoolului etilic n lichidele biologice prin metoda C$# alte componente ;volatile<8 0. 7xplicai construirea curbei de calibrare pentru determinarea etanolului n snge !i urin. 2. Ce lum n calitate de standard intern la determinarea alcoolului etilic8 4.9e ce se calculeaz coeficienii de calibrare la determinarea etanolului n snge !i urin8 Rspundei argumentat la urmtoarele ntrebri: . Ce proprieti ale componentelor separate acioneaz la timpul de reinere n baza staionar. ". 7xplicai de ce compu!ii organici nesaturai posed un timp de reinere mai mare n faza staionar polar dect n cea nepolar8 %. Cum are loc cromatografierea n faza staionar lichid benzenul !i fenolul8 C3:D8 &. 7xplicai prioritatea metodei C$# fa de celelalte metode. -. 9e ce depinde eficacitatea repartiiei componentelor n coloan8 .. Ce parametrii ai picului se folosesc n determinarea cantitativ8 /. Ce se soluioneaz efectund analiza cantitativ prin metoda cromatografiei gaz-lichide. 0. Cum se construie!te graficul de calibrare prin metoda standardului intern+ calibrrii absolute8 2. 9e ce prin aplicarea metodei de dozare a standardului intern se ntroduce n cromatograf diferite volume de prob8 4.Cum determinai coninutul etanolului n urin+ dac dup analiza cromatogramei nlimea picului de etilnitrat hxE 4 mm+ nlimea picului de propilnitrat - mm+ :E + vuE +4%. .9eterminai coninutul etanolului n snge+ dac nlimea picului etilnitrat "- mm+ propilnitrat / mm+ :E + vsE +24. ".9eterminai CuECs Cdup problema +"D !i tragei concluzie de gradul de alcoolizare. Lucrul practic al studenilor la lucrarea de laborator Studenii primesc cromatograme pentru rezolvarea & situaii. Cromatogramele se nscriu n caiete. ,e una din ele se demonstreaz ce parametri pe cromatograme se determin. Studentul e dator s cunoasc diferite moduri de calcul a suprafeei picurilor) H unde h * nlimea picului S E h --------H * baza triunghiului sub pic.

" S E h nlimii unde h * nlimea picului - limea picului la ?umtatea

h H
Studenii ndeplinesc & nsrcinri dup cromatogramele expuse. Metoda normrii ariilor 1iecare student determin componena procentual a amestecului Co cromatogramD prin metoda normrii ariilor de dozare a cromatogramelor. ,entru acesta se calculeaz suprafeele tuturor picurilor. 1ormula de calcul) S> > E ----------- 44 S Metoda standardului intern Calculai coninutul n = a unui component din amestecul medicamentos prin metoda standardului intern Ccalculele se efectueaz conform formuleiD) Sx vx >= E ----------- : 44 Sst vst (n cazul dat Sst !i vst E + iar m standardului : E ------------------------------------------------m amestecului de analizat Cfr standardD 1iecare student calculeaz independent+ reie!ind din datele cromatogramei+ formula avnd urmtorul aspect) Sx >= E ---- : 44 Sst

"

Cromatograma se prelucreaz calculativ. 3oate datele se includ n tabel. 5r Com >naliza cantitativ >naliza calitativ cro h S = 6etoda # Fiteza 3: ma- pone normei standardulu lentei 3rel togr nt a interne i aamemei stec Calcularea vitezei optime a gazului vector pentru repartiia componenelor. 1iecare student prime!te cromatograme a substanei de analizat la diferite viteze a gazului vector-heliu. aD pentru fiecare cromatogram calculai numrul talerelor teoretice dup ecuaia) x x 5 E . C----D" w

y
bD Calculai (733 dup formula urmtoare ) # cm (733E -------5 unde (733- nlimea eficacitii talerelor teoreticeG # lungimea coloanei cromatografice Cartat pe cromatogramDG 5 * numrul talerelor teoretice. cD Construii graficul dependenei (733 Caxei ordinatelorD n raport cu viteza gazului vector Caxei absciselorD. 9eterminai viteza maxim a heliului dup grafic+ corespunztor (733 minime pe grafic. >lctuii tabela. Fxe B w B B 5 (733 " ----C----D w w

Calcularea reproductibilitii metodei C$#. 1iecare student prime!te % cromatograme a unii component+ scrie condiiile experimentului !i msoar nlimea picului n mm+ calculeaz nlimea medie+ gre!ala determinrii separate+ abaterea relativ medie. >baterea determinrii separate) hmed * h E a hmed * h" E a" hmed * h% E a% >baterea medie a z a" z a% --------------------- E H %

>baterea relativ medie H ----------- 44 hmed >baterea medie relativ nu trebuia s dep!asc %-& =.

Tema: 2eterminarea alcoolului etilic n s3nge 'i urin prin metoda GL Prelucrarea metodic %ucrul practic al studenilor &n laborator Condiiile de lucru) >parat * Crom-&) coloan de oel CsticlD " m+ faza staionar * ,7$- -44+ umplutura * cromaton cu argint 5->{-96>S+ 34coloanei - .04+ 34 termostatului * /44+ 3 catarometrului * 444+ intensitatea curentului n detector * 44 am+ gazul vector * heliu "+& l|or+ sensibilitatea nscrierii "+ mrimea probei " ml. Cloralhidratul+ formaldehida+ acidul acetic+ fenolul+ dioxanul+ acidul cianhidric+ metilsalicilatul+ metilmercaptofos+ tiofos picuri nu formeaz. ,icurile metilnitrilului+ hexanului+ pentanului se nregistreaz naintea etilnitrilului+ cloroformul+ tetraclorura de carbon+ dicloretanul+ acetona+ eterul+ benzenul+ toluenul+ xilolul+ octanul+ propil-+ izopropil-+ butil-+ izobutil+ amil-+ izoamilnitriii se nregistreaz dup etilnitrit !i nu mpedic identificrii. ,entru a dovedi prezena alcoolului etilic ne folosim att de timpul de reinere corectat ct !i de timp de reinere relativ.

&

'dentificarea alcoolului etilic &n amestecul model (scriei c)imismul reaciilor* (n flacon de penicilin se introduc 4+- ml sol acid tricloracetic -4=+ ml sol n-alcoolpropilic C& =D !i 4+- ml snge ori urin Cori C "x-'xD+ flaconul se nchide cu un dop de cauciuc !i se fixeaz n cilindru metalic. Capacul cilindrului se nchide n a!a mod ca dopul de cauciuc s nchid ermetic flaconul. Coninutul flaconului se agit cu precauie. In flacon se ntroduce cu seringa de ml+ 4+"- ml soluie nitrit de sodiu %4 =. 1laconul se agit !i peste minut cu o alt sering se colecteaz " ml prob gazoas !i se introduce n in?ectorul cromatografului. ,e cromatograma nregistrat se determin timpul de reinere corectat !i relativ. 3impul de reinere relativ se determin dup n-alcool propilic. 9eterminarea cantitativ prin metoda standardului intern. 6etoda grafic. Construirea curbei de calibrare a soluiei standard de alcool etilic n lichidele biologice ori soluie apoas de etanol. 1iecare student prime!te & cromatograme ale etilnitritului+ corespunztor coninutului de etanol n lichidele biologice Csnge ori urinD. 1iecare cromatogram se prelucreaz dup calculele de determinare calitativ !i cantitativ a alcoolului etilic n lichidele biologice. ,entru aceasta se calculeaz timpul de retenie relativ a etilnitrilului. ,entru determinarea cantitativ se determin nlimea picurilor de etilnitrit Ch xD !i standard - n-propilnitrit ChstD !i se calculeaz raportul hx | hst 44. Se construie!te graficul * pe axa ordinatelor se nscrie raportul h x | hst 44+ pe axa absciselor * concentraia etanolului n lichidele biologice n promile Co|ooD. Soluiile standarde ale etanolului n snge !i urin nu sunt stabile !i pe ele n practica de lucru e nevoie s le renovm. 6ai corect ar fi s folosim soluiile standarde apoase ale alcoolului etilic pentru construirea curbei de calibrare. ,rin folosirea datelor acestui grafic se folosesc numaidect coeficienii de calibrare+ care pentru determinarea etanolului n snge este egal 4+2-+ n urin * +4-. Cs E CCx"' D 4+2-+ Cur E CCx"'D +4- CCx"' * valoarea concentraiei etanolului gsit dup curba de calibrare a soluiei apoase de etanolD. Metoda de calcul pentru determinarea cantitati" a etanolului &n cazul aplicrii standardului intern

>naliza cantitativ a etanolului dup metoda standardului intern se efectueaz !i prin metoda de calcul fr a construi graficul de calibrare+ conform urmtoarei formule) Sx t} E ------- v : G : E Sst v - coeficientul de corecie relativ a suprafeelor picurilor CS x+ SstD+ determinat pentru fiecare component n raport cu standardul n condiiile date. C1#S+ temperatura de evaporare. 3emperatura de termostatare+ detectorul+ viteza gazului+ vectorD. 9e aici reiese calculul coeficientului de corecie care se exprim dup formula) Sst v E ------- t}+ ori suprafaa lui se nlocue!te cu nalimea picului. Sx hst Cnlimea picului propilnitritD v E ------------------------------------------ tC"x-'x hx Cnlimea picului etilnitritD ,entru calcularea v folosim soluiile apoase de etanol C }+ "}+ %}+ &}D cu standardul intern * alcoolul propilic. Soluiile apoase a etanolului se prelucreaz dup metodic pentru dozare !i se cromatografiaz. ,e cromatogram se msoar nlimea picului etilnitrit !i propilnitrit Cn soluie apoas de etanolD !i se calculeaz v + apoi se nmule!te la 4+2- ori +4-. (n rezultat coeficientul final+ care va fi folosit n formula de calcul pentru snge vs E vmed 4+2-+ pentru urin vur E vmed +4-. 7xemplu de prelucrare a rezultatelor obinute) Conc. (nli (nlimea hst etanol Cx mea picului v E ------- tx vs vur vmed piculu propilnitr hx i it etilnitr it } ." %%-|." E "+ 0 "} 04 22 22|04 " E "+&0 %} &4 42 vmed vmed +442| 4& % E &} 2" 4. 4+2.

-}

/0

/0

"+%& 40| 2" & E "+"4 /0| /0 - E "+"-

"+"2 "+

"+&

7xemplu de calcul) Problema + * Calculai cantitatea de etanol n snge+ dac) ht"x-'5' E .4 mm hC%x/'5' E %4 mm .4 t} t"x-'x E ------ "+ E 4+2/ = %4 Problema 2 * Calculai coninutul etanolului n urin+ dac ) ht"x-'5' E /- mm hC%x/'5' E 04 mm /t} t"x-'x E ------ "+& E -+"/ = 04 v * coeficientul de corecie pentru fiecare concentraie v- coeficientul mediu pentru determinarea coninutului alcoolului etilic n snge !i urin ontrolul total %. >precierea rezultatelor obinute n urma efecturii lucrului practic. &. Semnarea proceselor verbale. /ibliogra(ie /. 6aterialul prelegerilor 0. JKLMNOP Q.R.+ STUVMWXYK S.@. ZK[\]M^_\`aYKU bT\cKa\dTKeMU P eKTcKWOPaMfO`_\c KYKNM[O. gMhMYOP+ ;iaMMYWK<+ 2/0+ T. &- 4+ -2. "4-"-. %4--%. 2. R.Q. gTKcKTOY_\ j S\_`M_\N\dMfO`_KU bMcMUk+ gMOP+ RXlK h_\NK+ 202 4.Z.mK_. nOoT+ p.J\VONNM. RPO^OYMO P dK[\]M^_\`aYqr bT\cKa\dTKeMr. m.+ mMT+ 2/4. s. "2-%2. .RMd^OTdKM[ m.t. gKfO`aPOYYXo dK[\bT\cKa\dTKeMfO`_Mo KYKNM[+ dN. %+ m.+ ;uMcMU<+ 2/2+ T. %-.. ".n.@OTWOP. n. g\TWOP. tVTKP\fYM_ V\ dK[\P\o bT\cKa\dTKeMM. m\`_PK+ ;mMT<+ 20/+ T."&..
/

Lucrarea N # Tema: 4+pertiza c1imico0 to+icologica a to+icilor -olatili din materialul biologic.
2eterminarea alcoolului etilic n lic1idele biologice prin metoda cromatogra(iei gaz0 lic1ide. ,!etoda cromatogra(iei gaz0lic1ide n identi(icarea 'i dozarea to+icilor ,-olatili.. 5ndeplinirea buletinului de e+pertiz. . Scopul temei) (ntrirea cuno!tinelor teoretice !i practice asupr analizei chimicotoxicologice a toxicilor volatili din materialul biologic. > studia metodica de dozare a etanolului n snge !i urin prin aplicare metodei cromatografiei de gaze. 9eterminarea gradului de alcoolizare n organism. Scopuri practice: . > deprinde efectuarea izolrii toxicilor volatili din materialul biologic+ aplicnd metoda antrenrii cu vapori de ap. ". > studia metodele de identificare a toxicilor volatili din distilatul obinut. %. 9eterminarea cantitativ a toxicilor volatili. &. > studia biotransformarea toxicilor volatili. -. > studia metodica de dozare a etanolului n snge !i urin prin aplicare metodei cromatografiei de gaze. .. 9eterminarea gradului de alcoolizare n organism. 5ntrebrile teoretice: . Care este principiul metodei de izolare a toxicilor volatili8 ". 7xplicai prepararea probelor preliminare n analiza chimico- toxicologica a toxicilor volatili. %. Cum se izoleaz etilenglicolul !i acidul acetic din materialul biologic8 &. ,articularitile izolrii alcoolului izoamilic+ etilic+ metilic+ fenolului+ dicloretanului+ aldehidei formice. -. >naliza chimico- toxicologic a acidului cianhidric !i a srurilor lui n extrasele biologice. .. (nsemntatea toxicologic+ mecanismul aciunii toxice !i metabolismul acidului cianhidric !i srurilor lui. /. >naliza chimicotoxicologic+ identificarea !i dozarea halogenderivailorCcloroform+ dicloretan+ cloralhidrat+ tetraclorura de carbonD n materialul biologic. 0. >ciunea toxicologic a derivailor halogenai ai hidrocarburilor. 2. Caracteristica alcoolului metilic+ etilic+ izoamilic !i etilenglicolului. ,articularitile izolrii+ identificrii !i dozrii alcoolilor n dependen de obiectul de cercetare. 4. ,articularitile aciunii alcoolului etilic. Coma alcoolic. . 6etodele chimice de confirmare a prezenei formaldehidei n organele cadaverice. ". >ciunea toxic !i biotransformarea formaldehidei n organismul uman. %. >cetona !i acidul acetic. 3oxicocinetica !i toxicodinamica.
0

&. >naliza chimico- toxicologic a acidului acetic !i acetonei. -. ,articularitile cercetrilor chimico- toxicologice asupra fenolului !i derivailor si. .. Hiotransformarea fenolului !i aciunea toxic a lui. /. 7xpertiza intoxicaiilor alcoolice n materialul cadaveric. 1actorii ce influeneaz asupra determinrii etanolului. 0. 3etraetilul de ,b !i particularitile cercetrii produselor petroliere asupra acestui toxic. 6ecanismul aciunii toxice. 2. >naliza ch.- toxicologic a nitrobenzenului+ anilinei. "4. 6ecanismul aciunii toxice a nitroderivailor. " . >bsorbia+ repartiia !i eliminarea cianurilor !i acidului cianhidric+ cloroformului+ cloralhidratului+ tetraclorurii de carbon+ dicloretanului+ formaldehidei+ acetonei+ ac. acetic+ alcoolilor alifatici+ etilenglicolului+ fenolului+ nitrobenzenului. "". Hiotransformarea ac. cianhidric+ derivailor halogenai+ ac. acetic+ formaldehidei+ etilenglicolului+ hidrocarburilor saturate. "%. >bsorbia+ distribuia !i eliminarea alcoolului etilic n organismul uman. "&. Hiotransformarea alcoolului etilic. "-. Simptomatologia intoxicaiilor cu alcool etilic. ".. 7xpertiza intoxicaiilor cu alcool etilic. aD Interpretarea rezultatelor expertizei n dependen de materialul biologic. "/. Intoxicaiile mixte de alcool etilic. "0. Caracteristica metodei gaz-cromatografice n vederea determinrii toxicilor ;volatili<. ,rile componente ale cromatografului. "2. 3ipurile de detectori. ,rincipii de lucru. %4. 7xplicai eficacitatea coloanei. % . 9e ce depinde selectivitatea fazei staionare8 %". 9ai definiia timpului corectat !i timpului relativ n coloan. %%. ,rincipiu de identificare a toxicilor volatili prin metoda cromatografiei de gaze. %&. 9ozarea toxicilor volatili prin metoda cromatografiei de gaze. ,rincipiu de lucru !i metodele de calcul. %-. 9ozarea etanolului n lichidele biologice * chimismul+ metodica+ calculele.

ndeplinirea scopului practic


Condiiile experimentului) aparatul ;Crom-&<+ coloana de sticl * " m+ faza staionar ,7$- -44 4 =+ 34 colanei * .44C+ 34 camerei de evaporare /44 C+ 34 catarometrului * 444C+ intensitatea curentului * 44 am.+ gazul purttor * xeliu+ viteza "+& l|or+ mrimea probei * " ml.

Problema + 2eterminarea coe(icientului de corecie pentru analiza cromatografic a lichidelor biologice la prezena alcoolului etilic prin metoda de calcul. 1iecare student prime!te soluie n ap Ccu conc. -- }D !i prelucreaz soluia dup metodica ~%+ dup aceea cromatografiaz amestecul de gaze n aparatul ;Crom-&<. ,e cromatograma obinut se msoar nlimea picului etilnitrit !i propilnitrit. 9up datele obinute se efectueaz calculele coeficientului de corecie relativ dup formula) hst Cnlimea picului propilnitritD D v E ------------------------------------------ tC"x-'x } hx Cnlimea picului etilnitritD "D Se calculeaz vmed %D Se calculeaz coeficientul de corecie pentru determinarea etanolului n snge n condiiile cromatografice date lund n vedere coeficientul de calibrare. v snge E vmed 4+2&D Se calculeaz coeficientul de corecie pentru determinarea etanolului n urin n condiiile experimentului+ lund n vedere coeficientul de calibrare. v ur E vmed +4Problema 2 2ozarea alcoolului etilic n s3nge 'i urin prin metoda de calcul. 1iecare " studeni primesc problem * dou flacoane cu lichid biologic * urin !i snge cu coninut de alcool etilic. ,robele se prelucreaz pentru dozarea alcoolului etilic C,roblema D !i se cromatografiaz produsele gazoase ale reaciei n aparatul ;Crom-&<. Cromatograma obinut se prelucreaz calitativ Cdistana de reinere #DG 3: * corectat+ 3rel * timpul relativ. Se efectueaz dozarea alcoolului etilic prin metoda de calcul+ pentru care se msoar nlimea etilnitritului !i propilnitritului !i se efectueaz calculele. (nlimea picului propilnitrit t etanoluluiCsngeD }E --------------------------------------- vsnge (nlimea picului etilnitrit (nlimea picului propilnitrit t etanoluluiCurinD }E --------------------------------------- vurin (nlimea picului etilnitrit Problema , 9eterminarea etanolului prin metoda standardului intern dup graficul de calibrare. aD ,entru ndeplinirea acestei probleme studenii folosesc datele din I problem+ ndeplinesc tabela+ dup datele obinute construiesc graficul de calibrare.

"4

Conc. etanolului n } } "} %} &}

(nlimea picului etilnitrit h -C"x-'5'

(nlimea picului propilnitrit h *C%x/'5'

h C"x-'5' ----------------- h *C%x/'5'

44

bD 9eterminarea etanolului n lichidele biologice dup graficul de calibrare. Se prelucreaz sngele !i urina dup metodica soluiei apoase de etanol. Se msoar pe cromatogram h -C"x-'5' !i h *C%x/'5' !i se gse!te pe grafic concentraia corespunztoare a etanolului CCx"'D. 9eoarece graficul de calibrare e cunoscut dup soluia apoas de etanol+ concentraia adevrat a etanolului n snge Csnge E Cx"' 4+2n urin Curina E Cx"' +4(n sfr!it se compar datele obinute dup graficul de calibrare !i metoda de calcul. Se fac concluzii despre coninutul etanolului n snge !i urin !i gradul de alcoolizare.

/ibliogra(ie
. Conspectul leciilor ". 3.Hrodicico+ F.Falica ;Curs de Chimie toxicologic<+ Chi!inu+ "44% %. gTKcKTOY_\ R.Z. S\_`M_\N\dMfO`_KU bMcMU. * gMOP) RXlK h_\NK+ 202+ `. %-&%. &. q]YM_\P A.. gNMYMfO`_KU a\_`M_\N\dMU. m. jmO^MWMYKk+ 22&+ `. --" -. JON\PK .R. sq_\P\^`aP\ _ VTK_aMfO`_Mc [KYUaMUc V\ a\_`M_\N\dMfO`_\o bMcMM. m\`_PK) jmO^MWMYKk+ 2/.+ `. %/-&&

"

S-ar putea să vă placă și