11

CAPITOLUL 1

STRUCTURI CELULARE CU ROL GENETIC

Celula este elementul fundamental al vieii, aceasta reprezentnd
unitatea de structur i funcie pentru toate organismele.
Numrul celulelor din organismul animal este de aproximativ
cteva zeci de mii de miliarde, fiecare dintre aceste celule fiind rezultatul
unui proces de diviziune, aa cum sesiza R. Virchow nc din 1858. Cu
toate c iniial toate celulele provenite din segmentarea zigotului au o
form sferic, forma acestora se modific n cursul diferenierii i matu-
rizrii celulelor, pentru a fi adaptate ct mai bine funciilor (fusiforme,
stelate, flagelate, discoidale, cubice etc.).
Orice celul la organismele eucariote este alctuit din trei compo-
nente de baz: membran plasmatic, citoplasm i nucleu (figura 1).
Citoplasma este sediul unor organite celulare delimitate de
membrane, cum ar fi mitocondriile, lizozomii, aparatul Golgi, reticulul
endoplasmatic, centrosomul, ribozomii. Pe lng aceste organite, n cito-
plasm se mai gsesc acizi nucleici i aminoacizi liberi.
Nucleul celulelor la eucariote are o structur foarte variabil n
funcie de perioadele ciclului celular. Astfel, n interfaz nucleul este
nconjurat de o membran dubl, proprie, prevzut cu pori avnd n
interior nucleolul, cromatina i carioplasma sau nucleoplasma.
Dintre aceste componente ale celulei, numai o parte ndeplinesc
rolul de material genetic sau sunt implicate n diferite procese genetice.

1.1. STRUCTURI CITOPLASMATICE CU ROL GENETIC

1.1.1. Mitocondria a fost descris de Kliker nc din 1850 i
considerat unitate fundamental a materiei vii de Altmann n 1890.
Aceast formaiune este prezent sub diferite forme (granular, sferic,
baghetiform), n toate tipurile de celule animale, cu excepia globulelor
roii.

12



Fig.1. Structura celulei eucariote animale

Mitocondriile prezint o membran dubl, care la exterior are aspect
neted iar n partea interioar este pliat, membran ce delimiteaz la exte-
rior matricea, care poate s aib un aspect granular sau de filamente foarte
fine, fiind zonat cu teritorii mai puin dense sau chiar spaii vacuolare.
Mitocondriile posed nsuirea de autoreplicare i reprezint
sediul reaciilor oxido-reductoare, fiind astfel specializate n ndeplinirea
funciilor energetice ale celulei.
Rolul genetic este conferit de acidul deoxiribonucleic ce se gsete
n structura acestor elemente citoplasmatice. ADN-ul mitocondrial se
prezint sub form circular, reprezint aproximativ 1-5% din totalul
ADN-ului celular i este implicat n ereditatea citoplasmatic. La mami-
fere ADN-ul mitocondrial codific 2 tipuri de ARN ribozomal i 22 tipuri
de ARN de transfer, care servesc la translaia unui numr mic de molecule
de ARN-m, care la rndul su codific sinteza a 13 proteine (figura 2).
ADN-ul mitocondrial difer ca structur de ADN-ul nuclear prin
aceea c nu prezint introni, adic zone neinformaionale (secvene de
spaiere). La captul fiecrei secvene ce codific ARN-r sau ARN-m
13
exist o gen pentru ARN-t care are rol de semnal de recunoatere pentru
enzime.



Fig.2. Structura genomului mitocondrial la animale (15000-20000 pb)

Analiza succesiunii bazelor din structura ADN-ului mitocondrial,
a relevat mici deosebiri ntre dicionarul codului genetic din mitocondrii i
cel al codului genetic din nucleu, n senul c anumii codoni nu codific
aceiai aminoacizi. Codonii din ARN-ul mesager mitocondrial sunt
recunoscui ntr-un mod particular de tipurile de ARN-t mitocondrial,
respectiv aceleai tipuri de ARN-t pot recunoate mai muli codoni
specifici pentru un singur aminoacid. Astfel, pentru procesul de translaie
mitocondrial sunt necesare numai 22 tipuri de ARN-t n comparaie cu
procesul de translaie universal, pentru care sunt necesare minim 32 tipuri
de ARN-t.

1.1.2. Ribozomii
Denumii mai nti granule ribonucleoproteice sau granulele lui
Palade, aceste structuri citoplamatice sunt prezente la toate organismele
animale, numrul lor n celul i forma de prezentare (ataai reticulului
endoplasmatic sau liberi n citoplasm), variind n funcie de stadiul de
difereniere, precum i de specificul activitii celulare. Astfel, ribozomii
sunt foarte numeroi n celulele tinere i n cele care realizeaz sinteza de
proteine (celulele acinare ale pancreasului, neuroni, plasmocite, reticulo-
cite, hepatocite).
14
Din punct de vedere chimic, ribozomii conin ARN ribozomal
(80-85% din totalul ARN-ului celular), proteine cu un coninut crescut de
arginin, lizin, acid glutamic i aspartic, ioni de Mg i Ca, ap.
n funcie de coeficientul de sedimentare sau valoarea S (rata de
accelerare Svedberg), ribozomii din celulele organismelor eucariote au
fost denumii de tip 80S. Acest tip de ribozomi se caracterizeaz printr-o
greutate molecular de 4x10
6
, diametru de 200-300 i un coninut n
ARN de 45%. Sub influena unor concentraii diferite de Mg, acetia au
capacitatea de a disocia (concentraie redus) n subuniti de tip 40S i
60S sau de a forma structuri dimere sau polimere prin unire (concentraie
ridicat). Astfel ribozomii se pot gsi ca granule solitare sau n grupe in-
tacte ce poart numele de poliribozomi sau polisomi. Ribozomii dintr-un
polisom, sunt legai ntre ei prin intermediul unei molecule de ARN-m i
au un rol fundamental n procesul de sintez a proteinelor: cei aflai liberi
n citoplasm, au rol n special n sinteza proteinelor necesare procesului
de difereniere celular, a proteinelor legate de unele funcii specifice sau
a proteinenzimelor, iar cei ataai de reticulul endoplasmatic, au rol n
sinteza proteinelor destinate secreiei celulare.
La animale, ribozomii prezeni n mitocondrii (mitoribozomi) au
un coeficient de sedimentare de 55S, comparativ cu cei citoplasmatici
care au un coeficient de sedimentare de 80S.
Ribozomul ca unitate de sine stttoare este considerat form
inactiv.

1.1.3. Centriolii
Descrii de Boveri n 1895, aceste structuri citoplasmatice au
form de cilindru, cu diametru de 300-500 nm i nlimea de 150 nm.
Peretele cilindric este alctuit din 27 fibre organizate n 9 triplete.
Fiecare din cei trei tubuli din triplet au o zon central
transparent cu diametrul de 12-15 nm i un perete dens de 5 nm. Tubulii
ce formeaz un triplet vin n contact ntre ei avnd n anumite puncte un
perete comun. Tripletele spre extremitatea distal sunt aezate n cerc, dar
spre mijloc i extremitatea proximal iau o poziie oblic.
La majoritatea indivizilor, centriolii prezint continuitate de la o
generaie de celule la alta, ei avnd proprietatea de a se duplica.
Fiecare celul conine o pereche de centrioli, care formeaz o
unitate caracteristic denumit centrosom, poziionat n apropierea
nucleului. n timpul diviziunii celulare mitotice, spre sfritul profazei i
nceputul metafazei, cei doi centrioli se separ i migreaz spre polii opui
15
ai celulei, ntre ei formndu-se filamentele fusului nuclear de care se
ataeaz cromozomii. Centriolii sunt prezeni i n procesul de diviziune
meiotic. Astfel, pri din centrioli reprezentnd particule minuscule,
constituie singurele resturi de proteine gsite n capetele spermatozoizilor
la diferite animale.

1.2. STRUCTURI NUCLEARE CU ROL GENETIC

1.2.1.Nucleolii
Aceste formaiuni se gsesc n toate celulele eucariote cu excepia
celor embrionare, din care lipsesc atta timp ct embrionul se hrnete cu
vitelus (cnd nu exist sintez proprie de proteine). Aspectul nucleolului
este globular, structura sa fiind constituit din elemente filiforme.
Nucleoli se formeaz n timpul telofazei n zona constriciei secundare a
cromozomilor, fiind asociai cu aceast regiune care este denumit i
organizator al nucleolului. Acei cromozomi la care se ntlnesc nucleoli
sunt denumii cromozomi nucleolari.
Nucleolul este de regul acoperit de un strat de cromatin
condensat denumit cromatin asociat nucleolului. mpreun cu
nucleolul, aceast cromatin formeaz aa-zisul aparat nuclear.
Numrul nucleolilor variaz n funcie de specie, iar mrimea n funcie
de mrimea nucleului i funcia celulelor. Astfel, la sfritul secolului
XIX s-a observat c nucleolul este mai mare n celulele secretorii i n
ovocite i dimpotriv este mai mic sau absent n celulele musculare i
spermatozoizi.
Exist un raport ntre volumul nucleolului i al nucleului numit
raport nucleolo-nuclear. n general nucleolul reprezint aproximativ 30%
din volumul nucleului, ns cu ct celula este mai activ n sinteza
proteinelor, cu att raportul nucleolo-nucleolar este mai mare. Acest
raport, reprezint astfel un criteriu important n stabilirea vrstei celulei i
n determinarea malignitii acesteia.
Cu excepia speciilor caracterizate prin nucleoli persisteni,
nucleolii dispar n prima parte a diviziunii celulare, apar n telofaz i pot
fi astfel vizibili numai n anafaz i interfaz.
Din punct de vedere chimic nucleolii sunt alctuii din proteine,
ADN i ARN n proporie de aproximativ 90%, 3%, 7%.
ARN-ul ce se sintetizeaz la nivelul nucleolilor este n principal
ARN ribozomal n diferite grade de maturare. La ARN-ul ribozomal
sintetizat se ateaaz proteine formndu-se astfel precursori ai
16
ribozomilor, care ulterior strbat porii nucleolari i ajung n citoplasm
unde se maturizeaz devenind ribozomi capabili de a sintetiza proteine.

1.2.2. Cromozomii
Cromozomii denumii astfel de W. Waldeyer n 1888, reprezint
structuri de natur nucleoproteic, avnd ca fundament fizic fibra de
cromatin, aflat iniial ntr-o stare de despiralizare extrem n interfaz i
care se organizeaz n urma unor procese de spiralizare progresiv i
condensare pe parcursul ciclului celular.
Condensarea progresiv a cromatinei ncepe de la debutul
diviziunii celulare, n profaz, cnd are loc individualizarea cromo-
zomilor, gradul maxim de condensare fiind atins n metafaz cnd
cromozomii prezint cea mai constant dimensiune i morfologia tipic
fiecrei specii.
Decondensarea ncepe n telofaz i este deplin la nceputul
interfazei, moment propice proceselor replicative i transcripionale.
Cromozomii sunt purttori ai unor secvene liniare de gene strns
nlnuite (linkate), care controleaz proprietile ereditare ale organis-
mului. Importana cromozomilor n procesul ereditar, este dat de
capacitatea de autoreplicare a acestora (descoperit de W. Flemming n
1882), proprietate ce le confer continuitate fizic de la o generaie la alta.

Structura morfologic a cromozomilor la eucariote

Unitatea de structur
a unui cromozom poart
numele de cromatid. Cro-
matida este compus din
dou filamente, denumite
cromoneme, nconjurate de
o mas de material bogat n
proteine, denumit matrix,
care spre exterior devine mai
dens dnd aspectul unei
membrane (figura 3).
Cromonemele au un
diametru de 0,3-0,5 m,
sunt rsucite sub form de
Fig.3. Schema structurii cromozomului
17
spiral, formnd astfel un helix cu diametru de 1 m. Spirala este mai
mult sau mai puin condensat n funcie de faza ciclului celular.
n structura cromonemelor exist din loc n loc poriuni puternic
spiralizate, care au aspectul unor mici granule intens pigmentate numite
cromomere. Mrimea, forma i distribuia cromomerelor de-a lungul
cromonemelor este caracteristic fiecrui cromozom. Aglomerrile de
cromomere stau la baza apariiei benzilor cromozomale.
Fiecare cromozom prezint o constricie primar denumit
centromer. Aceast zon are ca trstur structural caracteristic
simetria. Poziia centromerului n structura cromozomului confer forma
cromozomilor.
n 1939 Darlington clasific cromozomii n funcie de poziia
centromerului n:
metacentrici cromozomii al cror centromer este poziionat
median;
submetacentrici cromozomii al cror centromer este
poziionat n regiunea submedian;
subtelocentrici cromozomii al cror centromer este
poziionat n regiunea subterminal;
telocentrici cromozomii al cror centromer este poziionat
la una din extremiti. Pentru aceast categorie de cromozomi
n 1945 White propune folosirea termenului de acrocentrici.
n 1964 A. Levan i colaboratorii, propun o alt clasificare a
cromozomilor bazat pe raportul dintre braele cromozomilor:
tip M cromozomii al cror centromer este plasat exact n
punctul central, raportul dintre brae fiind 1;
tip m cromozomii al cror centromer este plasat n regiunea
submedian, raportul dintre brae fiind cuprins ntre 1-1,7;
tip sm cromozomii al cror centromer este plasat submedian,
raportul dintre brae fiind cuprins ntre 1,7-3;
tip st cromozomii al cror centromer este plasat n regiunea
subterminal, raportul dintre brae fiind cuprins ntre 3-7;
tip t cromozomii al cror centromer este plasat n regiunea
terminal, raportul dintre brae fiind >7;
tip T cromozomii al cror centromer este plasat la una din
extremiti, practic aceti cromozomi au un singur bra.
Prin intermediul centromerului cromozomii, n timpul diviziunii
celulare, se ataaz de filamentele fusului nuclear, iar apoi prin replicarea
18
acestora, cromatidele surori devin la sfritul procesului de diviziune,
cromozomi de sine stttori.
Unii cromozomi prezint i o a doua constricie denumit
constricie secundar (figura 4).

Fig.4. Diagrama unui cromozom la eucariote

Poriunea distal a cromozomului, plasat ntre constricia secundar
i extremitatea cromozomului a fost denumit satelit sau trabant, de unde i
denimirea cromozomilor ce prezint constricie secundar, de cromozomi
sateliformi.
Extremitile cromozomilor sunt denumite telomere. Ele au unele
proprieti asemntoare cu ale centromerului, ns au i unele proprieti
speciale cum ar fi proprietatea de a stabiliza cromozomii. Telomerele au o
structur particular care le confer o anumit polaritate, care face s fie
evitat unirea cu extremitile similare ale altor cromozomi, sau unirea cu
diferite fragmente cromozomale.
Telomerele pot deveni labile sub influena anumitor factori mutageni
i astfel se pot uni cu alte fragmente cromozomale putnd da astfel natere
la anomalii cromozomale.
19

nsuirile fundamentale ale cromozomilor

Stabilitatea relativ a numrului cromozomilor
La animale exist un numr variabil de cromozomi, care este ns
caracteristic fiecrei specii. n nucleul celulelor somatice exist un numr
dublu de cromozomi (2n), denumit i numr somatic, zigotic sau diploid,
comparativ cu celulele gametice n nucleul crora exist un singur set de
cromozomi, denumit numr haploid (n) sau gametic.
Numrul zigotic i respectiv gametic de cromozomi variaz foarte
mult de la o specie la alta (tabelul 2), ns n toate celulele (somatice i
respectiv gametice), este acelai pentru indivizii unei specii, cu excepia
petilor, caz n care la unele rase diferite din cadrul aceleiai specii se
poate ntlni un numr diferit de cromozomi (tabelul 1).

Tabelul 1
Numrul de cromozomi din nucleul celulelor la diferite specii i rase de peti
Specia sau rasa
Nr. zigotic
(2n)
Nr. gametic
(n)
Pstrv indigen 80 40
Pstrv fntnel 84 42
Pstrv curcubeu 60 30
ipar 48 24
Pisica de mare 40-54 20-27
Lin 24 12
Avat 34 17
tiuc 50 25
Oble 52 26
Babuc 52 26
Vduvi 52 26
Roioar 54 27
Pltic 52 26
Porcuor 52 26
Biban 48 24
Ghibor 48 24
alu 46 23
Sorete 48 24
Coregon 80 40
Lipan 102 51
Crap 104 52
Caracud 96-104 48-52
Ceg 60 30
20
Tabel 2
Numrul de cromozomi din nucleul celulelor la diferite specii de animale

Specia
Nr. zigotic
(2n)
Nr. gametic
(n)
Nurc 30 15
Albin 32 16
Porc slbatic 36 18
Porc domestic 38 19
Pisic 38 19
oarece 40 20
obolan 42 21
Hamster 44 22
Iepure 44 22
Bubaline 50 25
Ovine 54 27
Vierme mtase 56 28
Taurine 60 30
Caprine 60 30
Mgar 62 31
Cobai 64 32
Cabaline 64 32
Cal slbatic 66 33
Cine 78 39
Gin 78 39
Curc 82 41
Nutrie 42 21
Lup 78 39
Coiot 78 39
Vulpe 38 19
Iepure slbatic 48 24
Capr slbatic 60 30
Bizon 60 30
Tigru 38 19
Iak 60 30
Maimu 42 21

Stabilitatea relativ a mrimii i formei
Mrimea i forma cromozomilor variaz de la specie la specie i
de asemenea de la o pereche de omologi la alta. Astfel cromozomii pot
avea lungimi cuprinse ntre 0,1 i 25, limi cuprinse ntre 0,1 i 2 i
diferite forme n funcie de poziia centromerului.
21
De asemenea cromozomii din acelai nucleu, difer ca mrime i
form de la o pereche la alta de cromozomi omologi, ns acelai tablou
cromozomal se regsete la toi indivizii aceleiai specii. De exemplu,
cromozomii din perechea a treia de omologi, sunt identici ca form i
mrime n toate celulele i la toi indivizii aceleiai specii.
Mrimea i forma cromozomilor este stabil de la o generaie la
alta ceea ce permite recunoaterea i individualizarea lor.

Dispunerea cromozomilor n perechi de omologi
n nucleul celulelor somatice cromozomii sunt dispui n perechi.
Cromozomii pereche sunt identici ca form, mrime, structur i au fost
denumii cromozomi omologi. O singur pereche de cromozomi face
excepie n sensul c cei doi cromozomi pereche nu sunt identici (situaie
ntlnit numai la unul dintre sexe, mascul sau femel n funcie de
specie). Cromozomii pereche care difer la cele dou sexe, sunt denumii
heterosomi. Restul cromozomilor omologi care sunt identici la cele dou
sexe au fost denumii autosomi. De exemplu, n nucleul celulelor
somatice de taurine exist 60 cromozomi dispui n 30 perechi de omologi
dintre care 29 reprezint perechi de autosomi i una de heterosomi.
Cromozomii omologi sunt unul de provenien matern iar cellalt
de provenien patern, astfel c n nucleul celulelor somatice exist dou
seturi de cromozomi, fiecare set (genom) fiind compus din cte un
membru al fiecrei perechi de omologi.
Cele trei nsuiri fundamentale ale cromozomilor permit realizarea
tabloului cromozomal sau cariotipului (figura 5) fiecrei specii.
Cariotipul este definit conform raportului Conferinei Internaio-
nale de la Denver din 1963 privind standardizarea cromozomilor astfel:
Termenul de cariotip se aplic unei aranjri sistematizate a cromozo-
milor unei singure celule, preparai prin desenare sau fotografiere, aa
nct cromozomii unei singure celule pot reprezenta cromozomii unui
individ sau chiar ai unei specii [179].
Reprezentarea cariotipului prin aezarea cromozomilor n funcie
de aspectul morfologic (figura 6), este denumit idiogram sau
cariogram.
Cele trei caracteristici fundamentale ale cromozomilor pot fi
considerate relative, ntruct sub influena diferiilor factori, se pot
nregistra la unii subieci modificri ale cromozomilor, de numr, mrime
sau form.

22

Fig.5.Cariotipul unui individ din specia
ovine
Fig.6. Cariograma (idiograma) unui
individ din specia cabaline

1.2.3. Genele
La sfritul secolului XIX a fost intuit existena unor particule la
nivelul nucleului denumite atunci ,,factorii (determinani), care erau
responsabile de diferite caractere ereditare. n 1909, Wilhelm Johannsen
nlocuiete termenul de factor ereditar cu cel de gen. Meritul de a stabili
legtura dintre factorii ereditari descoperii de G. Mendel i cromozomi ca
purttori ai acestor formaiuni, a revenit cercettorilor W.S. Sutton (1902)
i T. Boveri (1904), cei doi emind aproape concomitent ipoteza c
genele sunt plasate n structura cromozomilor.
Ulterior Morgan i colaboratorii si aduc dovezi c genele se
gsesc dispuse liniar n structura cromozomilor. Tot Morgan, bazndu-se
pe procesul de recombinare genetic n experienele sale, reuete s
descopere calea de stabilire a distanei dintre dou gene oarecare.
Poziia pe care o ocup o gen n structura cromozomului se
numete locus. Genele care ocup acelai locus n structura cromozomilor
omologi au fost denumite de Johannsen, gene alelice.
Dup ce Avery i colaboratorii, n 1944, au descoperit c
substratul material al formaiunilor purttoare de informaie genetic este
reprezentat de acidul deoxiribonucleic, conceptul de gen a fost asociat cu
acizii nucleici. Astfel, s-a considerat c genele plasate n structura
cromozomilor sunt structuri celulare specializate pentru stocarea i
transmiterea informaiei genetice. Azi se cunoate c gena reprezint un
segment dintr-o macromolecul de acid nucleic (ADN sau ARN n cazul
23
virusurilor), segment ce constituie informaia genetic ce st la baza
realizrii unui anumit caracter sau nsuire. La procariote structura
informaional este continu, n sensul c gena este alctuit numai din
secvene informaionale denumite exoni, n timp ce la eucariote structura
informaional este discontinu, gena fiind alctuit din secvene
informaionale care alterneaz cu secvene noninformaionale denumite
introni.
Rezultatele cercetrilor ntreprinse n 1955 de Benzer,
demonstreaz c gena este subdivizat n mai multe uniti de funcie,
recombinare i de mutaie, pe care acesta le denumete cistroni, reconi sau
mutoni.
Toate aceste descoperirii au contribuit la nelegerea mecanismului
ce st la baza obinerii diferitelor caractere. Azi este unanim recunoscut
faptul c la baza unui anumit caracter st un genotip constituit dintr-una
sau mai multe perechi de alele.
Atunci cnd genotipul este alctuit din dou alele, n funcie de
efectul lor acesta poate fi genotip homozigot, atunci cnd cele dou alele
au acelai efect sau genotip heterozigot, cnd cele dou gene au efect
diferit.