Sunteți pe pagina 1din 15

Enzime

Enzimele sau biocatalizatorii sunt catalizatorii reaciilor din sistemele biologice. Proprieti comune cu catalizatorii chimici: Catalizeaz numai reacii termodinamic posibile Nu influeneaz echilibrul reaciei, mrind doar viteza de reacie (107 -1014 ori) Nu se consum i nu se produc n timpul reaciilor Sunt sensibile la aciunea inhibitorilor

Se disting prin: o Au structur proteic o Eficien remarcabil (103 ori mai mare) ex. 1 mg catalaz care catalizeaz descompunerea apei oxigenate are activit. echivalent cu 2 kg de Fe o Specificitate nalt o Cinetic specific

1. Activitatea catalitic i structura enzimelor Din punct de vedere structural ele se mpart n dou categorii: proteine simple care sunt formate numai din resturi de aminoacizi proteine complexe care conin i o component neproteic Majoritatea enzimelor sunt heteroproteine, fiind alctuite dintr-o protein simpl, inactiv -apoenzima sau apoproteina- i o component neproteic-cofactor. apoenzim + cofactor= holoenzim Cofactorii: Se gsesc n vecintatea centrului activ Au rolul de a transfera diferite grupri de la donori la acceptori Natura chimic este diferit: Cofactori care transfer hidrogen: NAD+ , NADP+, FAD, FMN, CoQ Cofactori care transfer alte grupri: TPP+ , CoA, etc

Dup natura leg dintre cofactor i apoenzim: Coenzime (leg slabe, covalente sau necovalente) care sunt considerate al doilea substrat: NAD+ , NADP+ Grupri prostetice (legate prin leg puternice covalente de apoentim): hemul (citocromi), biotina (carboxilaze) Unii cofactori sunt ioni metalici: Fe+2 , Fe+3, Zn+2, Cu+, Mg+2, Mn+2, Ni+2, Mo, Se

Molecula asupra creia acioneaz enzima se numete substrat. Substratul se combin doar cu o anumit poriune din enzim, care se numete centru activ sau centru catalitic. Centrul activ conine resturi de aa: Ser, Thr, Cys, Lys, Glu Legarea E de S se realizeaz prin leg necovalente i este nevoie de o complementaritate ntre geometria centrului activ i substrat. Specificitatea legrii i aciunii enzimei este explicat prin dou modele: 1. Modelul lact-cheie al lui Ficher- centrul activ al enzimei este complementar n conformaie cu substratul, E i S se recunosc reciproc

2. Modelul centrului indus al lui Koshland- enzima i schimb conformaia dup legarea substratului. Centrul activ devine complementar cu S numai dup legarea S

Activitatea enzimatic se exprim n: UI uniti internaionale- cantit de E care determin transformarea 1mol S per min la 25C, n cond optime Activitate specific- nr de UI per mg protein (enzima)

2. Nomenclatura i clasificarea enzimelor enzima= denumirea substratului + sufixul az (maltaz, ureaz) Denumiri particulare: pepsina, tripsina Clasificarea dup tipul de reacie pe care o catalizeaz: 1. Oxidoreductaze- cataliz reacii n care au loc transf de electroni sau protoni. Ex. dehidrogenaze (transfer hidrogenul de pe un donor pe un acceptor), oxidaze, peroxidaze, dioxigenaze. 2. Transferaze- cataliz transferul unei grupri de pe un donor pe un acceptor AX + BH = AH + BX (amino, acil, glicozil)
3. Hidrolaze - catalizeaz reacii de hidroliz (ex: fosfoesteraze, tioesteraze, glicozidaze, peptidaze) AB + H2O AH + BOH 4. Liaze -cataliz reacii de scindare nehidrolitic a unor leg covalente (C-C, C-S, C-N) 5. Izomeraze- cataliz reacii de izomerizare 6. Ligaze (sintetaze)- cataliz reacii n care se formeaz leg covalente noi (C-C, C-S, CO, C.N) prin cuplare cu ATP (glutamin sintetaza)

3. Specificitatea enzimelor
-Abilitatea unei enzime de a distinge ntre dou substratesa de a cataliza numai anumite reacii i numai ntre anumii compui Specificitate absolut- enz cataliz o anumit reacie, acionnd asupra unui anumit substrat ( ex. ureaza) Uree + HOH
ureaz

CO2 + NH3

Specificitate de grup enz cataliz acelai tip de reacie (ex. carboxipeptidaza, fosfataza alcalin) Specificitate larg- enz acioneaz asupra unui anumit tip de legtur din compui cu structuri diferite(ex: esteraze, proteaze, lipaze) Stereospecificitatea enz acioneaz asupra unui anumit stereoizomer sau determin formarea acestuia (ex. fumaraza cataliz reacia de adiie a apei la ac fumaric cu formarea de acid malic)

4. Cinetica reaciilor enzimatice


-Studiaz viteza reaciilor enzimatice i relaiile dintrea acetia i diferii parametrii -Puterea catalitic a enzimelor se realizeaz prin scderea energiei de activare (energia necesar formrii strii de tranziie)a reaciilor prin dirijarea reaciilor pe ci noi. Cu ct energia de activar este mai mic, cu att un nr mai mare de molecule pot atinge aceast energie i reacia este accelerat.

Se consider o reacie n care substratul S este transformat n produi de reacie P sub aciunea enzimei E. Ptr ca reacia s se desfoare, este nevoie s se formeze complexul de activare ES.

Creterea vitezei de reacie n funcie de conc S devine tot mai redus la conc mai mari de s i atunci cnd se atinge Vmax corespunztoare saturrii E, V este independent de conc S. Fenomenul de saturare apare deoarece E conine un anumit nr de centrii catalitici care pot interaciona cu un nr fix de molec de S. La conc mici ale S, E prezint o cinetic asemntoare catalizei chimice v= K (S)

Reprezentarea grafic a vitezei de reacie n funcie de conc substratului este o hiperbol.

Ecuaia Michaelis-Menten teoria Michaelis-Menten urmtoarele premize:

se

bazeaz

pe

1. Conc S este mult mai mare dect conc E, deci toat E este legat ptr a forma complexul ES; 2. Reacia de transf a ES n P i E este practic ireversibil; 3. Reversibilitatea formrii complexului ES va determina o con constant a ES Din ecuaie i reprez grafic rezult c la conc mici V este direct proporional cu conc S, n timp ce la conc mari de S, V este maxim i indepentent de conc S. Teoria Michaelis-Menten introduce parametrii: KM =eficiena enzimei i vmax=puterea catalitic

Reprezentarea grafic este o hiperbol, care ilustreaz efectul conc S asupra vitezei de reacie.

Semnificaia i determinarea KM i vmax


dac nlocuim n ec M-M v=Vmax/2, rezult KM = [S] , KM este conc S la care viteza reaciei este jumtate din Vmax Ptr majoritate enzimelor KM variaz ntre 10-1-10-7M, valoarea ei fiind apropiat de conc S. KM permite determinarea afinitii unei E ptr S , care este invers proporional cu KM ; Turnoverul enzimatic (Kcat) reprezint nr de molecule de S transformate/secund/ molecula de E saturat cu S

Ecuaia Lineweaver-Burk reprezint transformarea liniar a ec Michaelis-Menten -aceasta necesit mai puine valori pentru determinarea Vmax i KM

5. Inhibiia activitii enzimatice Se realizeaz prin molecule mici i ioni; Este f important deoarece servete ca un mecanism de control n sistemele biologice Numeroase toxine i medicamente acioneaz ca inhibitori Dup modul de legare la E exist 2 clase de inhibitori: reversibili i ireversibili
A. Inhibiia reversibil 1. Inhibiia competitiv- inhibitorul este un analog al substratului i se leag la situsul activ al enzimei. Deoarece I comp se leag reversibil la E, aciunea lui poate fi anulat prin creterea conc S. KM crete iar Vmax nu se modific Ex: etanolul ca S competitiv n intoxicaiile cu metanol, penicilina

2. Inhibiia necompetitiv I necompetitiv se leag la E n alt situs dect cel catalitic; Legarea blocheaz activit cat dar nu afecteaz legarea S la E Vmax scade iar KM nu se modific

3. Inhibiia acompetitiv I se leag la complexul ES Vmax i KM scad

B. Inhibiia ireversibil I ireversibil se leag covalent de E i complexul format disociaz f lent; E este inactivat; Ex. Ioni divaleni ai metalelor grele (Hg, Ag) care se leag de gruprile tiolice ale centrului activ, aspirina- inhibitor ireversibil al COX

6.Complexe multienzimatice Sunt enz diferite asociate specific, care catalizeaz reacii succesive dintr-o anumit cale metabolic; Eficiena E din complex este realizat prin transferul rapid al produsului de reacie al primei E la E urmtoare, ptr care devine S, amd; Ex. Comlexul enz al piruvat DHazei, al acid gras sintazei

Izoenzime -forme multiple ale unei E, care cataliz aceeai reacie, dar sunt diferite dpdv structural i al proprietilor; -Au rolimportant n diferenierea celular; -Sunt enz oligomere alctuite din protomeri diferii aflai ntr-un raport bine determinat i specific

Lactatdehidrogenaza (LDH)
Exist 5 izoenzime LDH Sunt tetrameri care conin 2 tipuri de protomeri H i M: -LDH1 (H4) i LDH2 (MH3) -n muchiul striat; -LDH3 (M2H2) i LDH4 (M3H)-n muchii scheletici; -LDH5 (M4)- n ficat Toate catalizeaz aceeai reacie:

Conc LDH n plasm este crescut n infarctul miocardic, leziuni hepatice i n anemia hemolitic.

LDH1 transf mai usor lac n pir i predomin n muchiul cardiac; LDH5 favorizeaz transf pir n lac, predominnd n muchii scheletici i ficat; Proprietile diferite ale LDH reflect deosebirile metabolismului oxidativ al miocardului (intens i aerob) fa de cel al muchilor scheletici (anaerob)

Creatin fosfokinaza (CPK) Enz intracelular cu funcie n metabolismul energetic; Este un dimer (M i B) sub forma a 3 izoenzime: -M2- miocard i muchi; - MB- miocard; - B2- creier i muchi

Este prima enz a carei activitate ste crescut n snge (n 6 ore) n infarctul miocardic.