NOIUNI INTRODUCTIVE

Enzimele sunt catalizatorii lumii vii - biocatalizatori

o catalizeaz reaciile biochimice din organism

ENZIME

o rol esenial n biosinteza i degradarea substanelor din materia vie

Exist peste 2000 de enzime diferite Primele enzime izolate = fermeni Sinteza enzimelor are loc n interiorul organismelor i pot exercita aciunea i atunci cnd sunt extrase din organism, i n afara acestuia
1

NOIUNI INTRODUCTIVE
forma inactiv proenzime trec n stare activ cnd celula
are nevoie endoenzime i desfoar activitatea chiar n celulele n care sunt biosintetizate

ENZIME

exoenzime dei biosintetizate n celule, sunt eliminate n lichidele din organism, exercitndu-i aciunea la acest nivel
d.p.d.v. chimic enzimele sunt PROTEINE cu rol funcional

i pierd puterea catalitic sub aciunea:

- cldurii; - acizilor i a bazelor tari; - solvenilor organici

substana asupra creia acioneaz enzimele = SUBSTRAT

ENZIME
CARACTERISTICI
o permit ca reaciile biochimice s fie considerabil accelerate
De exemplu: o reacie - n prezena unei enzime poate dura o secund - n absena enzimei dureaz 12 zile

o acioneaz n cantiti extrem de mici o le regsim intacte la sfritul reaciei

o se disting printr-o caracteristic - specificitate

o mresc viteza reaciilor prin scderea Eactivare a substratului
3

ENZIME
CARACTERISTICI
Substraturile (A i B) n condiii normale necesit o cantitate de energie considerabil (E1) pentru a atinge starea de tranziie A...B, dup care produsul de reacie (AB) se poate forma.

Enzima (E) creaz un microclimat propice n care A i B pot s ating starea de tranziie (A...E...B) mai uor, reducnd astfel cantitatea de energie necesar (E2).
4

ENZIME
NOMENCLATURA
denumire constituit din 3 pri:
o denumirea substratului o tipul de reacie

o sufixul -az

exemplu: lactat-dehidrogenaza

COOH H C-OH CH3

5

lactatdehidrogenaza -2H2

COOH C=O CH3

acid lactic

acid piruvic

ENZIME
STRUCTURA
edificiu macromolecular complex determinat de nivelurile de organizare structural ale proteinelor

numeroase enzime au o structur binar

o componenta proteic - APOENZIMA
o componenta neproteic - COFACTORI

HOLOENZIMA

Activ d.p.d.v. catalitic

prin ndeprtarea cofactorului rmne componenta proteic inactiv n form liber
6

ENZIME
STRUCTURA
componenta proteic - APOENZIMA
o manifest proprietile generale ale proteinelor o stabilete legtura enzimei cu substratul

o manifest diferite grade de afinitate pentru cofactor

o imprim specificitate de substrat

componenta neproteic - COFACTORI

o sunt indispensabili pentru manifestarea activitii catalitice o imprim specificitate de aciune
7

ENZIME
STRUCTURA
componenta neproteic - COFACTORI
1. COENZIME

derivai de la vitamine se ataeaz temporar de apoenzim uor disociabile de apoenzim NAD+, NADP+, FMN, FAD, ATP
substane organice fixate pe apoenzim greu disociabile de apoenzim leg. cov. piridoxalfosfatul, hemul

2. GRUPRI PROSTETICE 3. IONI METALICI

8

- enzimele ce conin ioni metalici = metal-enzime - Mg2+, Mn2+, Cu2+, Zn2+, Fe2+(3+), Mo2+

SPECIFICITATEA ENZIMELOR
o difer de catalizatorii neproteici
o proprietate caracteristic - specificitatea DEFINIIE Prin specificitatea unei enzime se nelege proprietatea sa de a aciona preferenial numai asupra unui substrat sau grup de substraturi cu caractere chimice comune.

ENZIME

o specificitatea de reacie
o specificitatea de substrat
9

- specificitate absolut

- specificitate de grup
- stereospecificitatea

SPECIFICITATEA ENZIMELOR
o specificitatea de reacie (aciune)
- se manifest asupra unui singur substrat de ctre mai multe enzime, fiecare cataliznd o anumit reacie - exemplu: un -aminoacid poate constitui substratul pentru mai multe enzime oxidaza H R C COOH + NH3

ENZIME

H R C COOH NH2

OH
decarboxilaza R C NH2 + CO2 H2

transaminaza
10

CO COOH

SPECIFICITATEA ENZIMELOR
o specificitatea de substrat
- se refer la activitatea care o manifest enzimele fa de anumite substraturi

ENZIME

SPECIFICITATE ABSOLUT
- unele enzime nu acioneaz dect asupra unui singur substrat fiind inactive fa de altele cu structur asemntoare - exemplu: ureaza hidrolizeaz numai ureea NH2 ureaza O=C CO2 + 2NH3 NH2 H2O
11

SPECIFICITATEA ENZIMELOR
o specificitatea de substrat
SPECIFICITATE ABSOLUT

ENZIME

- exemplu: arginaza hidrolizeaz numai arginina

NH2 C=NH NH (CH2)3 HC NH2 COOH

12

NH2 arginaza H2O (CH2)3 HC NH2 COOH ornitina +

NH2 C=O NH2 uree

arginina

SPECIFICITATEA ENZIMELOR
o specificitatea de substrat
STEREOSPECIFICITATEA - unele enzime au stereospecificitate fa de izomeria cis-trans - exemplu: fumaraza acioneaz numai asupra acidului fumaric i este inactiv asupra izomerului su cis acidul maleic
HOOC H
13

ENZIME

H COOH

fumaraza

HOOC H

H H OH COOH

H2O acid fumaric acid malic

SPECIFICITATEA ENZIMELOR
o specificitatea de substrat
STEREOSPECIFICITATEA - unele enzime manifest o aciune specific fa de o anumit form stereoizomer a substratului exemplu: L-aminoacid-oxidazele nu recunsoc dect L-aminoacizii - unele enzime fac distincie ntre conformaiile i din legturile glicozidice

ENZIME

exemplu: maltaza hidrolizeaz numai legtura (1-4) glicozidic din molecula de maltoz i nu atac legtura (1-4) glicozidic din celobioz
14

SPECIFICITATEA ENZIMELOR
o specificitatea de substrat
SPECIFICITATE de GRUP - unele enzime acioneaz asupra substraturi apropiate ca structur unei serii de

ENZIME

- exemplu: amilaza hidrolizeaz amidonul, dextrinele, glicogenul hexokinaza catalizeaz fosforilarea unei serii de hexoze n prezena de ATP

15

ENZIME
MECANISM DE ACIUNE
o pentru ca o reacie s aib loc cu o vitez apreciabil, moleculele reactanilor trebuie s fie activate

o enzima are capacitatea de a cobor nivelul energetic care condiioneaz reacia o astfel moleculele reacioneaz cu o vitez apreciabil ENZIMELE SCAD NIVELUL ENERGIEI DE ACTIVARE necesar ca o reacie s aib loc

16

ENZIME
MECANISM DE ACIUNE
o scderea energiei de activare se datoreaz formrii unui complex activat ntre enzim (E) i substrat (S) K1 K2 K3

o ipoteza formrii complexului intermediar activat ES a fost emis de Michaelis i Menten

17

ENZIME
MECANISM DE ACIUNE
o la formarea complexului activat, substratul se fixeaz pe centrul activ al enzimei o enzima particip cu o poriune limitat din structura sa o pe aceast poriune exist grupri capabile s atrag i s fixeze molecula substratului o ansamblul acestor grupri chimice = centru activ = centru catalitic
18

ENZIME
MECANISM DE ACIUNE
o ntre centrul activ i molecula substratului exist complementariti conformaionale i chimice care permit asamblarea lor
o ipoteza LACT-CHEIE

19