5.

- Metabolismo Energtico celular:

1*Experimento Presencia de pigmentos Fotosintticos

Se ponen en un tubo de ensayo los pigmentos fotosintticos extrados de la hoja de cardenal. Cabe destacar que los pigmentos fotosintticos fueron hervidos con alcohol, por lo tanto en la mezcla estn presente tanto los pigmentos como el alcohol de 95. Al tubo de ensayo se le agrega un volumen, inferior al del extracto de pigmentos, de Bencina blanca. Como sabemos, la Bencina blanca es un compuesto de tipo apolar o Hidrofbico y por lo tanto se unirn a l, molculas de tipo apolar. En cambio, el alcohol etlico es de tipo polar, es decir, hidroflico y por ende se unirn a l todos los componentes polares.

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Cloroplastos
CLOROPLASTOS

Propsito: Observar los cloroplastos Tincin: S/T Descripcin: Se ven los cloroplastos pegados o muy cerca a la pared celular esto porque esta la gran vacuola que tira a los cloroplastos a los extremos, llama la atencin que son una gran cantidad de cloroplatos.

PARED CELULAR

VACUOLA

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Mini Manual de Biologa!!!

Tabla Comparativa entre Apoptosis y Necrosis

Apoptosis
Mecanismo Restos Celulares Fragmentacin celular Programada Genticamente Son reconocidos y fagocitados En cuerpos apoptticos por membrana Temprana, Fragmentos oligonuclesomales Se preservan Se mantiene Disminuye

Necrosis
Accidental Inducen inflamacin local Los contenidos de los orgnulos se liberan Tarda, Fragmentos grandes

Fragmentacin del DNA

Orgnulos Membrana Tamao celular

Se desintegran Se rompe Aumenta 41

ndice:
1.- Microscopia..1 2.-Morfologa de los seres vivos...3 3.-Mtodos de estudio de biologa celular10 4.- Organizacin celular Eucarionte.14 5.- Metabolismo energtico celular.21 6.- Ciclo celular y Apoptosis.28 7.- Meiosis 34 8.- Gametognesis..36

Nombre preparacin: Aplastado de Meristemo de Cebolla Propsito: Observacin de nucleolos Tincin: Argntica (Sales de plata) Aumento Total: 400X Descripcin : Se observan clulas de color caf claro, con hasta cuatro nuclolos y un ncleo caf oscuro. Las clulas alargadas son producto del mismo aplastado. Las clulas se ven cuadradas y bien definidas gracias a su pared celular.

La Mayora de las clulas estn en interfase, esto se sabe por la presencia de nuclolos.

Las clulas pueden tener uno o varios nuclolos en su ncleo, esto por la necesidad de sntesis de protenas. Depende del momento de interfase en el que se encuentre.

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Nombre preparacin: Aplastado de Meristema de Cebolla Propsito: Observacin de estados Mitticos Tincin: Orcena Actica 2% Aumento Total: 400X Descripcin: Se ve interfase, profase, metafase, anafase, telofase e incluso una citocinesis. Los cromosomas se distinguen de un color violeta, mientras que el contenido citoplasmtico es calipso.

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Nombre preparacin: C.T. de lombriz de tierra Propsito: Fase S (inicial o terminal) Tincin: H/E con tcnicas de radioautrografia y sales de plata Aumento Total: 400X Descripcin : Se ven regiones de color negro que corresponden a la presencia de la fase S. Se reconoce gracias a la Timidina Tritiada, pues reconoce a su base complementaria en el ADN y acta como un marcador. Como sabemos, la fase S es aquella en la que se sintetiza material gentico

A la lombriz se le inyecto Timidina Triteada en exceso (Timina marcada con tritio H3)

G1 S G2 M

2C 4C 4C 2C

30

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Nombre preparacin: C.T. de Prostata de rata Propsito: Observar clulas Apoptticas Tincin: Hematoxilina Frrica Aumento Total: 400X

La Clula en apoptosis se encuentra rodeada de una porcin blanca y tiene puntitos ms oscuros(el ncleo)

Descripcin : Se indujo apoptosis de la clula, en donde se observa el contenido celular deteriorado y cuerpos apoptticos, los cuales son fagocitados por clulas vecinas y degradados por los lisosomas de stas. Las clulas se observan de color negro, ya que la hematoxilina frrica reconoce la cromatina.

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35

7.- Meiosis:
Nombre preparacin: C.T. del Lilium Propsito: Observacin de las etapas de Profase I (Leptonema, Paquinema y Diplotema) y Metafase I Tincin: Hematoxilina Safranina Aumento Total: 400X Descripcin : Hay clulas de la periferia que se tien de color calipso, en las cuales se observan ncleos de color morado, mientras que hacia el lumen, estn las clulas violeta, en las cuales fijaremos nuestra atencin. Estas clulas miden cerca de 15 micrones y en su interior podemos ver las distintas etapas de la profase: Leptoteno, paquiteno, diploteno.

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8.- Gametognesis:
Nombre preparacin: C.T. de Testiculo de rata Propsito: Observacin Gametognesis Masculina Tincin: Hematoxilina Aumento Total: 400X Descripcin : Observar distintos tipos celulares, y observar los tres tipos de compartimentos en las gnadas masculinas. Descripcin: Se ven tres grandes compartimentos tubulares. El borde externo del tbulo se llama compartimiento peritubular y el contenido se llama compartimiento intratubular. Entre cada tbulo existe un compartimento llamado Intersticial. Dentro de las capas de un tbulo podemos distinguir en orden las siguientes clulas: Espermatogonias, Espermatocitos I, Espermtidas (redondas y alargadas) y espermios. En el compartimento intersticial se ven clulas de Leydig y en el compartimento intratubular, luego de las clulas Mioides, se ubican en forma triangular, las clulas de Srtoli.

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Nombre preparacin: C.T. de Ovario de rata Propsito: Observacin Gametognesis Femenina Tincin: Hematoxilina - Eosina Aumento Total: 400X Descripcin : Observar distintos tipos celulares, y observar los tres tipos de compartimentos en las gnadas masculinas. Descripcin: Se ven folculos primordiales, Primarios (28 micrones) an sin antro, secundarios (30 micrones) o en formacin y Terciarios (35-36 micrones) con un antro ya formado.

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Tabla Comparativa entre Mitosis y Meiosis

Mitosis
Conservativa 2n 2n (2n=Diploide; n=Haploide) 1 Divisin Producto: 2 Clulas Hijas No hay Apareamiento de cromosomas Homlogos Clulas NO Gamticas No hay Variabilidad Gentica

Meiosis
Reducida 2n n (2n=Diploide; n=Haploide) 2 Divisiones Producto: 4 Clulas Hijas Hay Apareamiento de cromosomas Homlogos Clulas Gamticas Hay Variabilidad Gentica

40

CLULAS MIOIDES

CLULAS DE LEYDIG CLULAS DE SERTOLI

ESPERMATOZOIDES

ESPERMTIDAS REDONDAS
ESPERMATOCITO I ESPERMATOGONIAS
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Folculo de Graff

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Bencina+ clorofila Hidrofbico Alcohol+ carotenos + antfilas Hidroflico

Pigmentos fotosintticos: carotenoides, antfilas, clorofila. Bencina: naturaleza apolar / Clorofila: naturaleza Antiptica
Finalmente, la mezcla de alcohol, pigmentos y bencina blanca se bate, para que sus componentes se separen en dos capas: La capa Superior corresponde a la Bencina blanca de tipo apolar, a la cual se han unido los pigmentos de Clorofila. En la fase inferior a sta se observa una gran cantidad de alcohol etlico, al cual se han unido los carotenos, es decir, pigmentos fotosintticos de otra naturaleza. stos son los pigmentos que a la luz se ven de color rojo.

Sin embargo han quedado algunos pigmentos verdes de clorofila en la fase inferior. Esto ocurre debido a que la cantidad de bencina blanca fue mnima en relacin con la gran cantidad de clorofila que haba en el tubo de ensayo , por lo tanto, la bencina blanca se satur y no pudo aceptar ms clorofila.

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2*Experimento Fermentacin Alcohlica

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Este experimento consiste en un matraz conectado a un tubo de ensayo que contiene Agua de Barita Ba(OH)2. En el matraz se ha puesto cierta concentracin de glucosa, agua y levadura. Como el matraz se encuentra sellado hermticamente, la levadura comienza a consumir el O2 y se desprende alcohol etlico y CO2 como consecuencia de la actividad metablica de la levadura. El CO2 liberado llega mediante una conexin al tubo de ensayo que contiene agua de Barita y reacciona con ella, de manera que se forman un precipitado de color blanco, que corresponden a Carbonato de Bario BaCO3, el nuevo compuesto formado por la reaccin.

Nombre preparacin: C.T. de Pncreas Propsito: Observar RER Tincin: Galocianina Aumento Total: 400X Descripcin : Se identifican acinos (colonias celulares pancreticas), con lumen, ncleo y RER, dispuesto hacia el lumen para la sntesis proteica. Grupos de ergastoplasmos forman el acino

El RER se ubica en el ergastoplasmo

Islotes Pancreticos

*Glicosilacin(es el proceso de adicin de carbohidratos a una protena) ocurre en el RER y posteriormente en el Golgi. 18

Nombre preparacin: C.T. de Trquea de rata Propsito: Observar cilios Tincin: Hematoxilina Frrica(Tie de negro el ncleo) Aumento Total: 400X Descripcin: Se ven Condrocitos (clulas cartilaginosas que conforman la trquea) de los cuales se suspenden prolongaciones largas llamadas Cilios. (cilios: estructura bsica del axolema). Se observan cilios, clulas caliciformes, tejido cartilaginoso, etc Tejido Cartilaginoso

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3*Experimento Reconocer el almidn en la hoja

Para decolorar la hoja de cardenal se sumerge en alcohol etlico (95) y agua, contenidos en un vaso precipitado, hirviendo a bao mara, as se extraen sus pigmentos fotosintticos. Una vez decolorada la hoja de cardenal se tie con Yodo Yodurado (lugol) para reconocer los depsitos de almidn (amiloplastos), que se observan de un color caf ms oscuro en relacin con el tejido vegetal de la hoja. Esto quiere decir, que la hoja tena una funcin fotosinttica, pues por alguna razn, fue capaz de sintetizar carbohidratos. 25

5*Experimento

En un tubo de ensayo hay Agua de Barita (1). Al insuflar aire en ella, se forma el mismo precipitado de carbonato de Bario que se formaba al experimentar con la levadura, pues cuando se insufla aire, tambin se recibe CO2. Por lo tanto, se ve la misma ecuacin que en la reaccin anterior.

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4*Experimento

Medio Basico Hidroxido de sodio+rojo fenol +CO2

Se agrego CO2 y se hizo un medio ms acido

En un tubo de ensayo se contiene una solucin de Ba(OH)2 al 5% que adems, tiene como indicador Rojo Fenol (1). Es importante comprender, que la mezcla est en estado bsico pues se encuentra en agua y que el rojo fenol reacciona en soluciones cidas. Al insuflar aire en el tubo de ensayo, el rojo fenol cambia su color a beige (2), pues al captar CO2 ste reacciona con la molcula de agua y finalmente el agua se disocia para formar un cido llamado cido Carbnico H2CO3. 26

6.- Ciclo Celular y Apoptosis:

Nombre preparacin: C.T. de Hgado Propsito: Observacin de ncleos Tincin: H/E Aumento Total: 400X Descripcin : Se ven Hepatocitos humanos, con ncleos teidos de un color morado. El borde ms oscuro del ncleo corresponde a sitios en donde se encuentra la Heterocromatina. En el centro del ncleo, se observan unos grnulos morados oscuros que tambin corresponden a Heterocromatina, mientras que las porciones transparentes del ncleo corresponden a Eucromatina. Ncleo Vesiculoso Ncleo Intermedio Ncleo Macizo He: Heterocromatina Eu:Eucromatina 28 Eu > He

Eu = He

Eu < He

Los Hepatocitos tienen ncleos principalmente intermedios

Nombre preparacin: C.T. de intestino delgado Propsito: Observar diferenciacin de membranas Tincin: H/E Aumento Total: 400X Descripcin : Se identifican microvellosidades Microvellosidades

Apical

Basal Lumen
Chapa Estriada: Conjunto de microvellosidad es Clulas Caliciformes: Secretan mucus

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Nombre preparacin: C.T. de Epiddimo Propsito: Observar Complejo de Golgi Tincin: Mtodo de Elfman Aumento Total: 400X Descripcin : : Es posible reconocer prolongaciones de color negro que corresponden al complejo de golgi, sitio de modificaciones proteicas Lumen

* El mtodo de elfman aplica una solucin de sales de plata (plata metlica) que tie el golgi de color negro. Esto porque posee azucares reductores.

Lumen
Se pueden observar: ncleos, estereocilios, aparato de golgi, etc... 19

: Ms soluto

4.- Organizacin Celular Eucarionte:

Nombre preparacin: Epidermis de catafilo de cebolla

Osmosis

: Menos Soluto

jos Propsito: Observacin de permeabilidad clulas vegetales

Tincin: Sin tincin Aumento Total: 400X

0,2 M

Ingresa Agua.

0,4 M

Hipertnico Sale agua Plasmlisis Hipotnico entra agua Turgencia Concentracin 0,2 0,4 0,6 0,8 Medio hipotnico isotnico hipertnico hipertnico Comportamiento turgencia -----------------plasmlisis incipiente plasmlisis total

0,6 M

0,8 M

Sale Agua .

Se acerca al medio isotnico Comienza la plasmlisis Plasmolisis avanzada

14

Nombre preparacin: Frotis sanguneo a diferentes concentraciones Propsito: Observacin de permeabilidad clulas vegetales Tincin: Sin tincin Aumento Total: 400X

Hipotnico

Hipotnico

0,1% No hay zona bicncava

0,5% Zona Bicncava

0,9%

1,1% Crenacin: Deshidratacin de los Eritrocitos

Hipertnico

Isotnico

En clulas vegetales Plasmlisis Lisis Celular 16

En Glbulos rojos Crenacin Hemolisis

Nombre preparacin: Pellet 1,2 o3 Propsito: Pellets obtenidos por fraccionamiento celular Tincin: Azul de Metileno Aumento Total: 400X Descripcin: Se observa: En el Pellet 1: La clula en s. (Clulas completas) En el Pellet 2: Ncleos En el Pellet 3: Componentes del citoplasma (Restos de membrana y nuclolos) Procedimiento: Moler en 1 mortero, se deja descansar y se traspasa el sobrenadante Pellet1 (se
obtuvo dejndolo decantar). Se saca el sobrenadantePellet2 Centrifugar 10min 1200RPM Pellet 3 10min. 5000 RPM , descartar el portanadante.

13

0,2 M

0,4 M

0,6 M

0,8 M 15

Reino Protista
Diatomeas

Nombre preparacin: Mezcla de Diatomeas Propsito: Observacin representante del reino Protista Tincin: Vital Aumento Total: 400X Descripcin: Se observan dos tipos de diatomeas: unas que tienen forma de hoja llamadas Pennales y otras que tienen forma de esfera, llamadas Centrales.
Naviculares Penales Centrales

Filamentosas

Pinularias

Frustula: Capa externa de la Diatomea compuesta de slice. Rafe: Funcin entrada y salida de agua 5

Reino Fungi Nombre preparacin: Penicillium Sp. Propsito: Observacin representante del reino Fungi Tincin: Vital Aumento Total: 400X Descripcin: Se observa una madeja de hilos (Hifas) de las cuales las que estn en el centro del cuerpo se llaman hifas vegetativas. Las hifas que llegan a la periferia corresponden a hifas que contienen en su extremo terminal un esporangio, estas son las hifas reproductivas. Levadura (Saccharomyces cerevisiae) nico Hongo unicelular que existe Micelio: Conjunto de Hifas (reproductivas + vegetativas)

Nombre preparacin: Hilos entrecruzados Propsito: Uso y manejo del microscopio, poder de penetracin Tincin: Sin tincin Aumento Total: 400X

El Poder de Penetracin es inversamente proporcional al poder del aumento

Nombre preparacin: Oscillatoria Sp Propsito: Observacin representante del reino monera Tincin: Vital(Tie cuando el organismo esta vivo) Aumento Total: 400X Descripcin: Se observan compartimentos o celdas unidas entre s, formando una especie de hilo bacteriano que tiende a enrollarse u oscilar. Esta especie es llamada Oscillatoria sp. La bacteria se tie de un color verde azulado.

Septo (divisin) Oscillatoria

Colonia 4

Nombre preparacin: Amoeba Sp. Propsito: Observacin reino Protista Tincin: Vital Aumento Total: 400X Descripcin: Se ven Amebas de color violeta y rosado, las cuales poseen brazos llamados pseudpodos. Tambin posee: una vacuola contrctil y una vacuola alimenticia.

Pseudpodos: Extensiones del citoplasma + el citoesqueleto

Liquen (No pertenece a ningn reino) Asociacin de 2 organismos diferentes en el que ambos se ven beneficiados.
Nombre preparacin: Lichen tallus Propsito: Organismo simbionte entre un representante del reino protista o monera y un representante del reino fungi. Tincin: Vital Aumento Total: 400X Descripcin: El hongo degrada minerales de la roca, para que estos sean utilizados por las algas (ya que normalmente la simbiosis es con una alga) y el alga fotosintetiza para alimentar al hongo.

Capa Rizoide: Pertenece al hongo la funcin es adherirse al sustrato Capa Fngica: Hifas modificadas

8 El liquen aparenta ser un tejido, pero en

realidad es un Pseudo-tejido.

Reino Plantae

Estomas= Clulas oclusivas + poro + cmara subestomtica.

Nombre preparacin: Corte Transversal de hoja Propsito: Observacin representante del reino plantae Tincin: Vital Aumento Total: 400X Descripcin: Se observa una capa celular superior, que corresponde a la epidermis superior. Luego, se observan lneas celulares que corresponden al clornquima. Y para finalizar, una capa que almacena aire y en la cual se ubican las estomas llamada neumatenquima, la que inferiormente es sellada por una capa celular llamada epidermis inferior.

Clornquima: Posee gran cantidad de cloroplastos. Funcin: fotosntesis Neumatenquima: Almacenamiento de gases(ej: vapor de agua,co2...) Estomas: Permite el intercambio gaseoso 9

Mtodo Mediato
Se pueden ver los leucocitos NO

Mtodo Inmediato
NO Se puede observar el proceso de crenacin (cambios fisiolgicos) Ms Rpido, Menos Costoso Duran Horas
Se observa apilamiento de Eritrocitos

Menos Rpido, Ms Costoso Duran Aos NO In Vitro Mtodo Mediato

Ventajas: se logra ver con mayor detalle, gracias a su tincin. Dura + tiempo

Proceso de crenacin Los glbulos rojos se estn deshidratando. En la clula vegetal a este proceso se le llama plasmlisis.

In Vivo
Desventaja: No se observan procesos biolgicos (como crenacin) En el otro Preparacin ms compleja Mucho ms costoso
mtodo es lo mismo pero al revs.

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3.-Metodos de estudio de biologa celular

Nombre preparacin: Frontis de sangre humana Propsito: Ventajas y desventajas del mtodo Inmediato Tincin: Sin tincin Aumento Total: 400X Descripcin: Se presentan gran cantidad de glbulos rojos y se aprecia su forma, se notan todas las clulas iguales. Entrega la informacin de la agrupacin en pilas de monedas Nombre preparacin: Frontis de sangre humana Propsito: Ventajas y desventajas del mtodo Mediato Tincin: May grundwold giemsa Aumento Total: 400X Descripcin: Permite observar glbulos blancos, rojos y plaquetas. El glbulo blanco es polimorfo nuclear ms grande que el glbulo rojo y mide de 9 a 10 micrones.Tambin es posible diferenciar un linfocito, ya que su ncleo es grande y la clula se tie prcticamente completa.

Glbulo rojo crenado --> deshidratado

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Al fijarse los glbulos rojos no se superponen entre s, estn fijados. Esto sucede por la tcnica histolgica

Nombre preparacin: Aplastado de Hgado Propsito: ventajas y desventajas del mtodo inmediato Tincin: sin tincin Aumento Total: 400X Descripcin: Se observan hepatocitos y el espacio intersticio. Nombre preparacin: C.T. de Hgado de rata Propsito: ventajas y desventajas del mtodo mediato Tincin: H/E Aumento Total: 400X

Descripcin: Se observan hepatocitos teidos, los ncleos de estos y se logra diferenciar el espacio intersticio.

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H/E: Hematoxilinacolorante bsico tie de azul o purpura los elementos cidos ej:Ncleo. Eosina Tie de Rosado o Rojo los elementos bsicos Ej: Citoplasma.

1.-Microscopia
Nombre preparacin: N6 en papel milimetrado Propsito: Uso y manejo del microscopio. Poder de las lentes Tincin: Sin tincin Aumento Total: 40X, 100X, 400X

Nombre preparacin: Frotis de Sangre Humana Propsito: Calculo del tamao celular. Uso del aumento de inmersin Tincin: May Grundwald Giemsa(MGG) Aumento Total: 400X 1

2.- Morfologa de los Seres Vivos

Reino Monera Nombre preparacin: Frotis Bacteriano Propsito: Observacin representante del reino Monera Tincin: Gram Aumento Total: 1000X Descripcin: Se observan clulas teidas(Gram+) de color violeta. Revelando morfologa en forma de bastn, llamadas Bacillus y en forma esfrica llamadas Coccus Espirilos Cocaceas Bacilos Streptococcusp 3 Stafilo sp Gram(+) Violeta Gram(-) Rosado