STERILIZAREA, operatie de baza a industriei alimentare

Microorganisme: - Utile - Patogene

 Sterilizarea- eliminarea tuturor microorganismelor vialbile, inclusiv virusii si endosporii Dezinfectia eliminarea patogenilor vegetativi, nu si a endosporilor Antiseptic compus chimic de uz extern cu rol in eliminarea microorganismelor Pasteurizarea- distrugerea microorganismelor prin nclziri repetate sub 100OC.
63C - 66C / 30 minutes 71.6C / 15 seconds

METODE DE STERILIZARE IN BIOTEHNOLOGII

a) metode termice: - sterilizare cu aer cald la 140 - 200C; - sterilizare cu vapori de ap sub presiune la 120 - 140C; - sterilizare prin nclziri repetate la 70 - 100C. - flambarea: sterilizare termica uscata ce presupune trecerea probei prin flacara cateva secunde b) metode fizice: - filtrare prin umpluturi fibroase; - filtrare prin materiale poroase; - filtrare prin membrane; - utilizarea radiaiilor UV, IR, raze X, , etc. c) metode chimice: - utilizarea agenilor chimici: oxid de etilen, formaldehid, fenol, azotiperit, ozon etc. d) metode de preparare pe cale aseptic.

Radiatiile ionizante (X, ): putere mare de penetrare, produc ruperea AND-ului celular

Radiatiile neionizante (UV): interfera in replicarea AND-ului prin formarea unor dimeri; putere mica, deci necesita expunere directa a materialului sterilizat

Filtrarea= retinerea fizica a microorganismelor in pori sau pe suprafete filtrante

Agenti chimici= actioneaza rapid in concentratii mici

1. Microbiostatic

2. Microbicid

Detergenti, halogeni, alcooli, metale grele, agenti oxidanti (H2O2, O3, acizi si peracizi, etc), agenti de reticulare a proteinelor (dialdehide)

STERILIZAREA TERMIC 1. Temperaturi ridicate 2. Temperaturi scazute (conservare)

INCLZIREA USCAT - INCLZIREA UMED

(oxidare, respectiv aciunea hidratant, coagulant i hidrolizant a apei i a aburului asupra proteinei microbiene)
Denumire microorganism nclzire uscat Temperatura, Timp C 100 30 min 100 45 min 120 30 min 120 90 min 170 10 min 180 30 min nclzire umed Temperatura, Timp C 65 20 s 65 10 s 65 60 s 80 30 min 100 10 min 120 30 min

Salmonella typhi Mycobacterium tuberculosis Staphylococcus pyogenes Spori fungici Spori de Bacillus anthracis Spori nativi din sol

Punctul termic mortal acea valoareaa temperaturii la care sunt omorte toate celulele unei anumite specii, n timp de 10 minute.
Timpul termic mortal acea valoare a timpului de expunere la o anumit temperatur necesar distrugerii tuturor celulelor sporulate.

STERILIZAREA MEDIILOR DE CULTUR

metode mecanice (filtrare, centrifugare, flotaie) metode chimice cu agenti bactericizi metode fizice: radiaii X, , radiaii UV metode termice

Dezavantajele metodelor termice - denaturarea proteinelor i inactivarea lor; - denaturarea vitaminelor i a unor factori de cretere; - supranclziri (reacii de oxidare a fenolilor i a acidului ascorbic, de polimerizare a aldehidelor nesaturate, de caramelizare a hidrailor de carbon i brunificare a mediului) - formare bazelor Schiff (reacia Maillard) toxice sterilizarea separat a hidrailor de carbon i a compuilor cu azot.

CINETICA PROCESULUI DE DISTRUCIE TERMIC A MICROORGANISMELOR Distrucia termic logaritmic

dN kN d

N - numrul de microorganisme viabile/ml mediu; k - constanta vitezei de distrucie termic, min-1; - timpul de sterilizare, min.

k ko e

Ea RT

N No e

No 2,303 sau lg k N
microorganisme cu a zecea parte)

D= 2,303/k = reducerea decimal (timpul necesar reducerii numrului de

viteza specific de distrucie termic a microorganismelor, k, depinde de temperatur- ecuaia Arrhenius:

Distrucia termic a sporilor de E. Coli

Distrucia termic a sporilor de B. stearothermophilus

STERILIZAREA DISCONTINU A MEDIILOR DE CULTUR

E

a dN k N k o e RT N d

a No ln k o e RT d N 0
E

Timpul total de sterilizare= suma timpilor de nclzire, meninere, rcire.

ln

No N N N ln o ln 1 ln 2 N N1 N2 N

Diagrama timp-temperatur pentru sterilizarea discontinu ti - temperatura iniial tf - temperatura final ts - temperatura de sterilizare

STERILIZAREA CONTINU A MEDIILOR DE CULTUR AVANTAJE conservarea mai bun a proprietilor nutritive; control superior al calitii procesului; aparatur cu gabarit redus; reducerea duratei ciclului de sterilizare; productivitate i eficien sporit; control automat; realizarea de randamente superioare n faza de fermentaie

Profilul vitezelor de curgere ale mediului de cultur

INSTALAIA DE STERILIZARE CONTINU LA 120 125oC

(1) Coloana de sterilizare (2) Vas de meninere (3) Racitor

Diagrama timp - temperatur pentru sterilizarea continu la 120 -125C

INSTALAIA DE STERILIZARE PRIN INJECIE LA 140OC

(1) (2) (3) (4)

Ventil de injectie serpentina de meninere valva de expansiune n vasul de destindere

INSTALAIA DE STERILIZARE PRIN SCHIMBTOARE DE CLDUR CU PLCI (PELICULARE)

1 rcitor 2 prenclzitor 3 sterilizator 4 - serpentin de meninere

N INSTALAII CU SCHIMBTOARE DE CLDUR PELICULARE I INJECIE DE ABUR