Farmacologie Lucrri practice

Facultatea de MedicinaDentara

FARMACOLOGIE - Lucrari practice Lucrarea practic nr.1 Farmacopeea. Criterii de individualizare a planului terapeutic. Riscul terapeutic. Instruirea i norme de protecia muncii

FARMACOPEEA :reprezinta cadrul oficial specific unei tari prin care se stabilesc denumirile - conditiile de calitate - reguli de preparare - controlul medicamentelor - conservarea medicamentelor - prescrierea medicamentelor. Prima FARMACOPEE ROMANA a aparut in anul 1863 redactata de farmacistul Constantin Hepites in limba latina si romana Farmacopeea este lucrarea principala ce ghideaza activitatea farmaceutica ,unele din prevederile ei interesand in egala masura pe medici si farmacisti. In Farmacopee sunt cuprinse substante folosite in farmacie pentru prepararea medicamentelor: # oficinale

Farmacologie Lucrri practice

# tipizate doar cele ce contin o singura substanta activa care are o utilizare mai larga in tara noastra Farmacopeea cuprinde monografii ale : - substantelor medicamentoase simple organice sau anorganice - produselor vegetale si animale - formelor farmaceutice - preparatelor oficinale sau galenice. Aceste monografii asezate in ordine alfabetica au ca titlu principal denumirea in limba latina urmat de titlu tradus in limba romana si eventualele sinonime : 1. ACIDUM ACETILSALICILICUM 2. ACID ACETILSALICILIC 3. ASPIRINA.

Farmacopeea mai contine : - monografii generale ce trateaza liniile generale privind prepararea formelor farmaceutice in farmacii si industrie si stabilirea conditiilor generale de calitate . - metode generale folosite in controlul medicamentelor - conditiile de calitate ale reactivilor folositi pentru controlul calitatii medicamentului - indicatii asupra toxicitatii medicamentului ;doze maxime ce pot fi prescrise. Farmacopeele se tiparesc la cativa ani . Actualmente utilizam FR X .Din cauza editarii rare a acestora apar anual suplimente ce completeaza editia. Anual se elaboreaza cu caracter de lege Nomenclatorul de medicamente si produse biologice de uz uman in care sunt cuprinse toate substantele

Farmacologie Lucrri practice

medicamentoase si specialitatile farmaceutice din tara si din import admise a fi folosite in practica medicala precum si substantele si preparatele farmaceutice scoase din uz.

NOTIUNI INTRODUCTIVE

DEFINITII Cea mai generala definitie a farmacologiei este aceea de stiinta ce se ocupa cu studiul medicamentului Denumirea de Farmacologie deriva de la grecescul pharmaken =medicament (remediu)

FARMACOLOGIA:stiinta care studiaza toate aspectele interactiunii dintre biosisteme si substantele chimice ,cuprinzand notiuni privind originea ,structura chimica,proprietati fizico-chimi ce ,utilizarile terapeutice si modul de administrare a substantelor studiate . Medicamentul a aparut de la inceputul medicinii si a avut drept scop suprimarea durerii si ameliorarea unor procese ce puteau duce la moarte. Medicamentele erau utilizate ca atare sau ca extracte naturale . Studiul medicamentului si a efectelor sale s-a perfectionat mult in timp ,ajungand ca acestea sa joace rolul unei adevarate sonde moleculare in explorarea organismului si a mecanismelor vietii.(pompa de ioni,receptori)

Farmacologie Lucrri practice

MEDICAMENTUL Se admite in general ca medicamentul este o substanta care ajuta la : vindecarea care reprezinta scopul final al terapiei - ameliorarea ce este realizata de majoritatea medicamentelor - prevenirea bolilor (vaccinurile,vitaminele) - diagnosticarea bolilor (in anii `70,`80 a fost o epoca de aur a diagnosticarii radiologice prin utilizarea substantelor de contrast actualmente se mai utilizeaza pentru CT) DEFINITIA OMS : orice substanta sau amestec de substante ,biologic active care potrivit datelor stiintei medicale ,atunci cand este folosita conform regulilor ,permite: a) - prevenirea - indepartarea - atenuarea unor simptome patologice b) - identificarea sau influientarea structurilor unor organe , a unor functii organice sau a comportamentului in masura in care toate acestea servesc unui scop medical recunoasterea

FARMACOTERAPIA Studiaza indicatiile medicamentului In scopul prevenirii vindecarii sau ameliorarii bolilor sau pentru stabilirea diagnosticului. Ea poate fi : # etiologica se trateaza cauza bolii # patogenica tratament care are la baza reechilibrarea mecanismelor fiziopatologice implicate in manifestarile morbide

Farmacologie Lucrri practice

# simptomatica tratamentul se adreseaza acuzelor subiecti ve ale bolnavului(algeziologia) Terapia prin medicamente se poate face prin: - monoterapie adica folosirea in tratament a unui singur medicament - terapie complexa combinarea mai multor tipuri de terapie (terapie medicamentoasa ,dietoterapie,fizioterapie)pentru aceeasi boala dischinezia biliara - polipragmazia utilizarea mai multor medicamente sau tipuri de terapie pe baza unor criterii nestiintifice

Terapia poate fi : - de baza folosita in mod curent pentru o mare parte din bolnavii cu acelasi diagnostic - de atac - de intretinere ultimile doua tin de momentul administrarii si de doze

PLANUL TERAPEUTIC Intotdeauna terapia se va efectua dupa un plan de actiune. El trebuieste a fi individualizat dar obligator se urmaresc cateva obiective : 1. 2. PRIMUM NON NOCERE bilantul sa fie pozitiv adica tratamentul sa aduca beneficii terapeutice

3. eficacitatea maxima a medicamentului folosit tratamentul sa aiba ca efect ameliorarea starii generale a bolnavului 4. sa se realizeze o concentratie plasmatica eficienta a

Farmacologie Lucrri practice

camentului ales in conditiile in care momentul ,locul administrarii si perioada de tratament sunt cele mai adecvate pentru bolnavul respectiv.(cronoterapia) 5. 6. 7. efectele secudare sa nu puna in pericol viata bolnavului tratamentul sa poata fi supravegheat de bolnav tratamentul sa fie economic.

RISCUL TERAPEUTIC - inevitabil (imprevizibil) caracterisic oricarui medicament, indiferent de calea de administrare sau forma medicamentoasa. - acceptat in cazul substantelor active dar cu efecte toxice (citostaticele) calculat care insumeaza riscul administrarii medicamentului respectiv ,forma de boala ,afectiunile asociate pe care le prezinta bolnavul Terapia medicamentoasa poate fi utilizata in scop : curativ tratamentul afectiunilor de baza si a complicatilor profilactic pentru prevenirea declansarii diferitelor forme de boala (vaccinarile ,vitaminoterapia ,antibiotico terapia profilactica) diagnostic pentru precizarea diagnosticului a diagnosticului diferential ,stabilirea stadiilor evolutive ale bolilor. Trebuie facuta diferentierea dintre medicament si toxic

TOXIC sau OTRAVA se intelege in general orice substanta conceputa sau aleasa in scopul de a provoca tulburari functionale ,leziuni organice sau moartea organismului care vine in contact cu ea . De retinut ca orice medicament administrat in cantitate mai mare decat cea permisa sau in conditii necorespunzatoare poate deveni toxic. De asemenea substante folosite in procesul de productie daca sunt introduse in cantitati mai mari decat normele de securitate a muncii devin toxice.

Farmacologie Lucrri practice

Doze i uniti de msur utilizate n farmacologie.

DOZE 1. n funcie de efectul therapeutic: doza minim terapeutic doza maxim terapeutic doza toxic doza letal doza optim

Diferena dimtre doza minim i maxim terapeutic= latitudine terapeutic 2. n funcie de modul de administrare: - doza parial - doza pe zi (pro die) - doza total - doza de atac - doza de ntreinere + doza unic doza de deposit La copii doza se calculeaz dup formula:

Farmacologie Lucrri practice

Factorul de corecie este: La btrni: Peste 60 ani doza se calculeaz la o treime sau la jumtate din doza adultului 0 1 an: 1,8 1 6 ani: 1,6 6 10 ani: 1,4 10 14 ani: 1,2 Adult: 1

Experimental se utilizeaz urmtoarele tipuri de doze: DE50 eficace 50% DL05 letal minim DL50 letal medie DL100 letal absolut

Indicele terapeutic

UNITI DE MSUR Precise: 1g ap distilat Gramul Miligramul Pictura XX picturi

Farmacologie Lucrri practice

1g tinctur 1g alcool absolut 1g alcool 95 1g eter -

L picturi LXVIII picturi LXIV picturi XC picturi

aproximative: linguria: 5 g ap 6,5 g sirop 4,5 g ulei

Lingura de sup: 15 g ap = 15 ml soluie apoas 20 g sirop 13 g ulei

Phrelul de lichior = 25 30 ml Ceaca de cafea = 50 ml Paharul de vin = 75 100 ml Paharul de ap = 150 200 ml O linguri ras = 1,5 2,5 g pulbere O linguri cu vrf = 2,5 5 g pulbere Un vrf de cuit = 0,5 1g

Farmacologie Lucrri practice

FARMACOGRAFIE Lp 4 Principiile prescrierii raionale a medicamentelor. Redactarea reetei medicale.

Reeta medical Reeta reprezint un document legal, uneori cu importan medico-judiciar, de coresponden ntre medic i farmacist referitor la eliberarea medicamentelor. Reguli generale de prescriere a reetelor

1. Reetele se prescriu n limba oficial a rii sau n limba latin. Se scriu cu pix, cerneal. Se vor scrie cite, far tersturi sau adausuri ulterioare.

Farmacologie Lucrri practice

2. Dozele se prescriu ca doze terapeutice, cantitatea se scrie cu cifre arabe iar unitatea de masur este gramul. Dozele se scriu una sub alta de preferin aliniate. 3. Dac se folosesc doze mai mari dect dozele maxime admise de farmacopee, n dreptul acestora se trece expresia "sic volo!" din latin, adic "aa vreau!". 4. Dac dou substane se prescriu n aceeai doz se bareaz vertical iar n dreapta se trece "aa" i doza din fiecare o singur dat. 5. Dac dorim ca excipientul s fie completat pn la o anumit cantitate se va folosi cuvntul "ad" adic "pn la". Dac vrem ca farmacistul s completeze att ct tie el, folosim prescurtarea "q.s." adic "n cantitate suficient". 6. Pe acelai exemplar de reet folosim notaia Rp./ n dreptul fiecrui medicament. Denumirile medicamentelor i substanelor medicamentoase se noteaz cu liter mare fr prescurtri sau folosirea formulelor chimice. 7. Prile unei reete medicale nu se despart. Dac se dorete scrierea reetei i pe a doua fa, atunci pe prima fa, jos, se scrie "verte!" adica "ntoarce!" n limba latin, i se continu scrierea reetei i pe a doua fa. Medicamentele se separ ntre ele prin simbolul "#" sau "-//-" iar spaiul ramas liber pe reet se umple cu un semn de forma lui "Z", pentru a nu permite adugarea de alte medicamente. 8. Dac reeta este scris pentru uzul medicului, la instrucie se poate scrie "Pro me" adic "pentru mine" iar farmacistul va ti c reeta este scris pentru uzul medicului i nu mai trebuie s transcrie pe ambalaj modul de administrare al medicamentului. 9. Cantitatea total de doze, la subscripie, se trece n reet cu cifre romane. 10. Doza substanelor toxice se scrie n cifre i litere, iar n plus, pentru stupefiante, se folosete un formular special de reet, imprimat cu timbru sec. Pe acest formular se poate prescrie numai un medicament stupefiant. Cantitatea maxim prescris obinuit este doza maxim pe 3 zile. Excepie n durerile din neoplasme, infarct miocardic, arterita obliterant. Reetele cu reducere sau cu gratuitate se scriu n dublu exemplar, maxim trei medicamente pe un formular de reet. 11. Orice reet se ncheie cu data eliberrii, semntura i parafa medicului. Dac se dorete repetarea reetei, de un numr de ori, se va scrie "Repetatur Nr.", urmat de numrul de repetri cu cifre romane, dac nu se dorete repetarea reetei se va scrie "Non repetatur".

Farmacologie Lucrri practice

Prescurtri din limba latin folosite la redactarea reetei aa = ana = din fiecare ad. = pn la D.I.D. aeq. = divide in doses aequale = mparte n doze egale D.S. = detur signetur = d i eticheteaz D.T.D. = detur tales doses = d asemenea doze M.f. = misce fiat = amestec i f m.f.p. = amestec i prepar pulbere m.f.s. = amestec i prepar soluie m.f.supp. = amestec i prepar supozitoare m.f.ung. = amestec i prepar unguent p.c. = post cibum = dup mese p.r.n. = pro re nata = ocazional, dup mprejurri pro me = pentru mine q.s. = quantum satis = n cantitate suficient repetatur = a se repeta Rp. = recipe = ia, primete sic volo = aa vreau

Redactarea reetei medicale Putem mpari didactic reeta, n forma ei integral, n urmatoarele pari: 1 - Inscripia

Farmacologie Lucrri practice

2 - Invocaia 3 - Prescripia 4 - Subscripia 5 - Instrucia 6 - Adnotaia. Distingem trei tipuri de reet: (1) magistral, (2) oficinal si (3) tipizat, ce difer ntre ele doar prin prescripie i subscripie (prile 3 i 4), celelalte pari fiind identice la toate cele 3 tipuri de reet. Vom ncepe prin a descrie aceste pri la reeta magistral: 1. Inscripia (sau antet) denumit uneori i superscripie, cuprinde: a) Informaii referitoare la unitatea de unde se elibereaz reeta: - denumirea i tampila unitii de unde s-a eliberat reeta, b) Informaii referitoare la pacient: - numele i prenumele bolnavului - vrsta pacientului - sexul pacientului - adresa pacientului - numarul fiei pacientului, sau cel din registrul de consultaii sau al foii de observaie - diagnosticul bolii pacientului c) date referitoare la medic (n partea de jos sau la sfiritul retetei): - semntura i parafa medicului, uneori i numrul de cod al medicului d) data eliberrii reetei

Farmacologie Lucrri practice

Observaie: toate acestea sunt absolut necesare, pentru evitarea oricror erori ce sar putea ivi, n legtura cu predarea reetei, sau cu concordana dintre vrsta pacientului i doza indicat, sau concordana dintre diagnostic i medicamentele recomandate etc. Aceste date sunt importante pentru securitatea pacientului, medicului i n anchetele medico-judiciare. Ele permit evitarea unor ncercri de fraud, i dau posibilitatea farmacistului s sesizeze eventualele erori n tratamentul prescris (ex.: n caz de dubiu, farmacistul poate lua legtura cu medicul ce a emis reeta sau poate sesiza prezentarea tardiv a pacientului, cu reeta la farmacie, cnd boala a evoluat, iar medicamentele prescrise iniial nu mai corespund etc). 2. Invocaia este reprezentat de prescurtarea Rp./ a cuvntului latinesc "recipe" care nseamn "ia" sau "primete" i care marcheaz nceputul reetei propriu - zise. Prin acest cuvnt medicul se adreseaz farmacistului solicitnd onorarea reetei. 3. Prescripia. La reeta magistral, este partea n care se indic substanele ce intr n componena medicamentului i cantitile necesare din fiecare. Dup rolul pe care l au n tratament, substanele se scriu ntr-o anumit ordine: a) Substana activ de baz sau "remedium cardinale" n limba latin, cu rol principal n tratament i care se afl obligator n orice reet magistral. Doza uzual, obinuit a substanei active ce se trece n reet este DozaTerapeutic/1dat = 1/2 din DozaMaxim/1dat, aceasta din urm fiind trecut n Farmacopee. b) Adjuvantul (ajuttorul) sau "remedium adjuvans" n limba latin, este substana activ care completeaz sau ntarete efectele medicamentului de baz, sau atenueaz unele efecte nedorite; el poate lipsi din retet. Doza uzuala ce se trece n reet pentru substana cu rol adjuvant este de obicei cuprins ntre 1/3 -1/5 din DozaMaxim/1dat.

Observaie: La asocierea a doua substane medicamentoase (ex. substana A si substana B) putem obine urmatoarele situaii:

Farmacologie Lucrri practice

- efectul final C este egal cu efectul substanei A plus efectul substanei B (C = A + B), este efectul de sumaie sau adiie simpl. - dac efectul final C este mai mare dect suma simpl a efectelor celor dou substane A si B luate separat, atunci efectul este de potenare (C>A+B) i este de obicei un efect dorit, atunci cnd asociem dou substane medicamentoase. - dac efectul C este mai mic dact efectul substanei A plus efectul substanei B (C<A+B), atunci efectul este de inhibiie reciproc, efect nedorit n tratament. c) Corectivul (corectorul) sau "remedium corigens" n limba latin, se include n reet pentru a corecta unele proprieti nedorite ale substanelor active n ceea ce priveste gustul, mirosul, culoarea, aciunea iritant; de asemenea, poate avea rol n solubilizarea, omogenizarea, emulsionarea unor soluii; poate lipsi din reet. n cazul medicamentelor sub form de soluie volumul corectorului este de 20% sau 1/5 din volumul final al soluiei. Corectivul este inactiv din punct de vedere farmacodinamic. d) Excipientul sau vehicolul este substana care determin consistena formei farmaceutice (lichid, semisolid, solid) i este n mod obinuit lipsit de activitate farmacodinamic; de regul nu poate lipsi din reet. n ceea ce privete ocuparea ultimului loc n prescripie, exist i excepii cum ar fi infuzia si decoctul. Observaii: - Substanele se scriu unele sub altele, cu liter mare la nceput, n denumirea romna sau latin, far prescurtari i nu n formule chimice (ex.: scriem Clorur de sodiu i nu NaCl). Cantitile de substane se exprim n grame (simbolul pentru gram n reete este un g simplu, far punct) iar la cele n doze foarte mici, se trece doza n cifre i litere pentru a evita erorile. Cantitile trecute n reet reprezint fie doza parial fie doza total, pentru toat durata tratamentului. - Cnd dou sau mai multe substane medicamentoase se prescriu n doze egale, nu se va trece de dou ori aceeai cantitate, ci se va trage o linie verticala n dreptul acelor substane, iar n dreapta liniei, la mijloc, se va scrie prescurtat "aa", de la cuvntul latinesc "ana" care nseamn "din fiecare". Apoi doza se va scrie o singur dat; reiese c din fiecare substan se va lua doza indicat, o singur dat. - Indicarea cantitii de excipient se face n funcie de forma farmaceutic; n unele cazuri se specific exact cantitatea de excipient necesar; n alte cazuri n dreptul excipientului se indic greutatea sau volumul total al formei farmaceutice, precedat de

Farmacologie Lucrri practice

cuvntul "ad" din limba latin, adic "pn la" (exprimare frecvent folosit n reet, i care permite medicului s nu mai calculeze efectiv cantitatea exact de excipient). Cnd se prescriu forme medicamentoase pe care bolnavul le primete sub form divizat (ex.: supozitoare, comprimate, capsule etc.) n loc de cantitatea prescris de excipient se poate scrie "qs" prescurtare de la latinescul "quantum satis" i care nseamn "cantitate suficient". n acest din urm caz, ne bazm pe experiena farmacistului, care va ti s completeze reeta cu att excipient ct cere forma farmaceutic respectiv. - Scrierea dozelor se face cu cifre arabe cnd unitatea de masur este gramul i cu cifre romane cnd unitatea de masur este mililitrul sau pictura (aceast ultim regul este frecvent nclcat, n practic, folosindu-se doar cifrele arabe). - Cantitile se scriu unele sub altele, de preferin aliniate, pentru estetica reetei. 4. Subscripia la reeta magistral este partea de reet n care medicul indic farmacistului: a) forma farmaceutic dorit b) numrul dozelor pariale necesare ntregului tratament i care se noteaz cu cifre romane c) multiplicarea sau divizarea dozei indicate la prescripie Aceste indicaii se dau n reet sub forma unor prescurtri: - termenul convenional de introducere a subscripiei este prescurtarea M.f. de la latinescul "misce fiat" adic "amestec s fie", urmat imediat de forma farmaceutic (ex.: pulbere, soluie, unguent, supozitoare, clism etc.) - cnd medicamentul trebuie preparat ntr-un numr de doze pariale (ex. n 15 doze), iar la prescripie s-a trecut doza pentru o dat, se va specifica acest numr cu cifre romane ntotdeauna (ex. XV) i se va folosi formula: "D.T.D. Nr." de la latinescul "detur tales doses" adic "da aceste doze" urmat de numrul de doze scris cu cifre romane. Dac la prescripie cantitile de substant reprezint doza total, pentru toat perioada tratamentului, la subscripie se va indica n cte doze pariale trebuie s fie mprit acea cantitate, folosind formularea "D.I.D. aeq. Nr." de la latinescul "divide in doses aequales" adic "mparte n pri egale" urmat de numrul de doze scris cu cifre romane.

Farmacologie Lucrri practice

Cnd la subscripie nu avem ceva deosebit de indicat (situaie frecvent ntlnit la scrierea reetelor oficinale) se poate folosi o formulare general, ca de exemplu F.s.a. de la latinescul "fiat secundum artem" adic "s fie dup regulile artei" (profesiunii), prin care se arat toat ncrederea medicului n farmacist c va ti s efectueze reeta corect, fr a mai avea nevoie de alte indicaii. 5. Instrucia cuprinde indicaiile ce se dau bolnavului pentru urmarea corect a tratamentului. Aceast parte ncepe cu iniialele D.S. de la latinescul "detur signetur" adic "d i eticheteaz", ceea ce implic responsabilitatea farmacistului, ca n cazul n care a acceptat reeta s o efectueze, s o elibereze i s transcrie pe eticheta de pe ambalaj modul de administrare al medicamentului. Indicaiile la instrucie se trec ntr-o anumit ordine: Astfel dup iniialele D.S. se va trece calea de administrare ex.: oral, extern (pe tegumente i mucoase), injectabil, inhalaii, intrarectal, intravaginal, instilaii (administrare prin picurare) etc., apoi doza parial, de cte ori pe zi i cte zile. Cifrele vor fi notate cu cifre arabe, iar toate indicaiile se dau ct mai pe nelesul pacientului. Dup aceste date se dau, n continuare, indicaiile ct mai clar, pentru administrarea corect a medicamentului (ex.: nainte de mas, seara la culcare, se va agita nainte de ntrebuinare etc.). Dac tratamentul medicamentos trebuie repetat, se va scrie pe reet n partea de sus "Repetatur Nr." urmat de numrul de repetri, scris cu cifre romane, iar dac tratamentul nu trebuie repetat i se dorete reinerea reetei pacientului la farmacie, se va scrie n partea de sus "Non repetatur", adic "Nu se va repeta". Reeta se ncheie cu data, semntura i parafa medicului. 6. Adnotaia este partea ce apare pe reet cnd aceasta a fost executat la farmacie i cuprinde: - tampila farmaciei; - calculul preului medicamentelor; - eventualele adausuri fcute de farmacist, pentru prepararea corect a reetei (farmacistul poate face modificri sau nlocuiri doar ale corectivului i excipientului, substanele inactive farmacodinamic din reet);

Farmacologie Lucrri practice

semntura farmacistului.

DEMONSTRAREA EXPERIMENTAL A ACIUNII MEDICAMENTELOR

Lp 9 - Demonstrarea experimental a aciunii neurolepticelor i tranchilizantelor asupra capacitii de explorare la oareci. 1. Testul plcii perforate Se folosete o plac cu dimensiunile de 40-40 cm i groas de 2 cm cu 16 guri avnd fiecare diamentrul de 3 cm dispuse regulat.

Farmacologie Lucrri practice

Placa se aeaz pe un taburet rsturnat nct gurile s apar fr fund. Marginile planetei trebuie s fie la 30 cm de orice obstacol. Experiena se execut la lumina artificial i n linite. Se folosesc trei animale tratate cu : - diazepam 10 mg/kg.c. intraperitoneal - clorpromazin 5mg/kg.c. intraperitoneal - ser fiziologic 0,5 ml/kg.c. intraperitoneal Dup 10-15 minute se plaseaz cte un animal pe planet i se numr cte guri exploreaz n 5 minute. Martorul cu ser fiziologic exploreaz toate gurile, cel cu diazepam este mai puin activ, iar cel cu clorpromazin este complet dezinteresat. 2. Testul evaziunii Experiena se face pe oareci. ntr-o cutie paralelipipedic se introduce un plan nclinat (o scndur), acoperit cu o sit fin. Se trateaz 3 animale ca la experiena anterioar. Se plaseaz apoi pe fundul cutiei i se menin 10 secunde fiind separate de planul nclinat timp de 5 minute. Ceilali doi sunt mai leni, iar cel cu clorpromazin nu exploreaz aproape deloc.

Farmacologie Lucrri practice

Demonstrarea experimental a aciunii neurolepticelor asupra motilitii spontane

TESTE DE INCAPACITATE MOTORIE 1. Testul traciunii ( JOLOU- COURVOISIER) Este nevoie de un dispozitiv simplu dintr-un fir metalic cu diametrul de 2 - 3 mm fixat pe 2 supori la o distan de 25 cm i la 30 cm de planul mesei. Experiena se face pe oareci care se trateaz astfel : - primul cu clorpromazin de 5mg/kg.c. intraperitoneal - al 2-lea cu ser fizilogic 0,5 ml intraperitoneal Animalul ( oarecele ) prins de pielea spatelui i de ceaf se plaseaz pe acest fir cu labele anterioare i lsat liber. Animalul normal va efectua o redresare rapid n 5 minute i anume se prinde cu cel puin o lab posterioar de fir. Animalul cu clorpromazin nu se mai poate redresa. Testul indic fie o deprimare a unor reflexe normale , fie o miorelaxare. 2. Testul emineului ( BOISIER ) Se folosete un tub de sticl de 30 cm lungime i 22-28 mm diametru ( n funcie de mrimea oarecelui ) care la 20 de cm de unul dintre capete are un reper marcat

Farmacologie Lucrri practice

n tubul orizontal introducem un oarece care este mpins cu o vergea de lemn sau de sticl pn la cellalt capt. n acest moment tubul se aeaz n poziie vertical nct animalul se afl cu capul n jos. Animalul normal urc cu spatele i ajunge la reper n mai puin de 30 secunde. oarecele tratat cu clorpromazin nu mai are putere s urce.

Demonstrarea experimental a aciunii anticonvulsivante.

Se poate face urmrind efectul protector fa de convulsii care pot fi produse din variate substane sau administrare de ocuri electrice. Vom arta modul de evideniere a efectului protector fa de convusiile induse de : - stricnin - pentetrazol - ocuri electrice MATERIAL I METODA Se lucreaz pe loturi de oareci albi 10 20 de ambele sexe. Lotul 1 primete stricnin 0,1 mg / kg.c. intraperitoneal Lotul 2 primete stricnin 0,1 mg / kg.c. intraperitoneal

Farmacologie Lucrri practice

fenobarbital 50 mg / kg.c. intraperitoneal cu or nainte de stricnin. Lotul 3 primete pentetrazol 100mg / kg.c. subcutan. Dozele administrate de stricnin i pentetrazol sunt 100% convulsivante la oarece. Animalele din Lotul 1 i 3 care au primit numai substane convulsivante fac n totalitate convulsii tonico-clonice i mor. Animalele din Lotul 2 care au primit i substan anticonvulsivant sunt protejate i pot face uneori contracii clonice slabe, dar nu tonico-clonice generalizate. Pentru evidenierea efectului protector fa de convulsiile induse de ocurile electrice se utilizeaz dou loturi de oareci : Lotul 1 - primete fenobarbital 50 mg / kg.c. intraperitoneal cu o 1 or nainte de oc. Lotul 2 - nu primete nici o substan. ocurile electrice se aplic pe urechile oarecilor cu ocuri rectangulare cu durat i intensitate reglabil. Lotul 2 - va face convulsii tonico-clonice n totalitate mortale. Lotul 1 protejat face uneori convulsii clonice dar niciodat mortale. Convulsiile la oareci se mai pot produce cu :

Farmacologie Lucrri practice

- picrotoxin - nicotin - convulsii audiogene

Lp 10-Evidenierea aciunii anestezicelor locale

Efectul anestezic local se poate evidenia prin oricare din urmtoarele metode de administrare : - topic - intrarahidian - troncular - intravascular MATERIAL I METODA A. PE MUCOASE ( testul REGNIER) Se utilizeaz iepuri aduli.

Farmacologie Lucrri practice

Acestora li se instileaz n unul din sacii conjunctivali a unui ochi cteva picturi dintr-o soluie de xilin 1%. Dup cteva minute cu ajutorul unui tampon de vat efilat se atinge mucoasa conjunctival ( tamponul se manevreaz din lateral pentru a nu speria animalul ) La ochiul unde nu s-a instilat anestezic se observ apariia reflexului de clipire. La ochiul care a fost anesteziat se observ absena reflexului de clipire ceea ce denot anestezierea terminaiilor nervoase libere la acest nivel.

B.PE TEGUMENTE Se utitlizeaz broate decapitate care sunt atrnate de un stativ cu ajutorul unui crlig ascuit ( de manibul ). Dup cteva minute se introduce una din labele posterioare ntr-un pahar Berzelius care conine un acid tare ( clorhidric sau sulfuric ). Se constat apariia unor contracii ample ale membrelor i trunchiului animalului ce caut reflex s nlture agentul nociv (contraciile se produc n relaie cu intensitatea excitantului dup legile lui Pflger ). Dup aceea se spal bine laba broatei de mai multe ori cu ser fiziologic pn la ndeprtarea complet a acidului de pe tegumentul labei.

Farmacologie Lucrri practice

Laba se introduce apoi ntr-o soluie de xilin i se repet introducerea n soluie de acid ( la aceeai concentraie ). Se observ c nu se mai produc contracii ale musculaturii labei introduse n acid ( sau dac se produc sunt mai slabe ) . Se poate efectua experimentul i cu cocain, dar efectul este mult mai bun ( anestezic ). Se observ deci c anestezicul protejeaz prin blocarea receptorilor periferici ai durerii. Efectul anestezic este mult mai evident pe mucoase. Lipsa sau scderea amplitudinii contraciilor musculare ( sub anestezic ) arat c efectul local asupra terminaiei libere tegumentare mpiedic receptarea stimulilor nociceptivi.

Lp12- Utilizarea sistemului Biopac MP 100 pentru validarea unui model experimental de hipertonie cu ketamin
Sistemul BIOPAC MP100 este un sistem de achiziionare de date bazat pe ordinator (PC) care ndeplinete dou funcii simultane: nregistrare de date i sistem de afiaj electronic, dar care depete limitele fizice ale unui sistem uzual. Achiziia datelor implic preluarea semnalelor (de obicei analogice) i trimiterea lor la ordinator, unde sunt afiate pe ecran i nmagazinate n memoria calc ulatorului pentru examinri ulterioare. Reprezentrile grafice sau numerice ale datelor pot fi de asemenea reproduse n vederea utilizrii cu alte programe.

Farmacologie Lucrri practice

Sistemul MP100 este alctuit din mai multe componente majore clasificate n hardware i software. Softul inclus AcqKnowledge permite editarea datelor i afiarea grafic sau numeric a datelor pe ecran i are patru funcii generale: controleaz procesul de achiziie de date; efectueaz calcule n timp real (cum ar fi determinarea ratei, filtrarea i medierea analogic sau digital n timp real: on-line sau dup achiziie: offline); efectueaz transformri postachiziie (funcii matematice); efectueaz comenzi de management a documentelor (salvare, printare etc.). Hardul are ca i component esenial unitatea de achiziie de date MP100A care preia semnalele de la electrozi i le convertete n semnale digitale care pot fi procesate de ordinator. Sistemul se conecteaz la ordinator printr-o interfa inclus: cardul ISA.

Fig. 13: Sistemul BIOPAC MP 100 Sistemul mai include un modul de interfa universal UIM 100A utilizat pentru conectarea unor alte dispozitive externe. Acest modul se conecteaz la unitatea MP100A prin dou cabluri: unul analogic i altul digital, care au conectori diferii (36).

Farmacologie Lucrri practice

Tot din hard face parte i transformatorul curent alternativ/curent continuu care asigur i protecia n utilizarea sistemului. Ordinatorul (PC) utilizat de sistem ndeplinete condiiile: este echipat Windows, are minimum 50 MBii spaiu liber pe hard disc plus nc 4 MBii pentru programul AcqKnowledge, procesorul are frecvena minim 66 MHz, cu coprocesor matematic, conine cel puin 8MB RAM memorie, slot ISA pe 8 sau 16 Bii, mouse, tastatur, monitor color, imprimant color. Dac se dorete stocarea de date complexe pentru perioade mai lungi poate fi necesar mai mult spaiu liber pe hard disc. Pentru modelul animal s-au utilizat obolani albi Wistar n greutate de 20020 g, pstrai n condiii standard de hran, cu ap ad libidum i cu un ciclu lumin ntuneric de 12 ore. Animalele au fost mprite pe loturi i injectate cu Ketamin folosindu-se preparatul Vetased, soluie injectabil, Ketamin clorhidrat 10%, produs de A&S International pentru uz veterinar. S-au utilizat doze de 2 - 4 mg/100g. S-au ales astfel loturile ca s se poat compara efectul hipertonizant al Ketaminei utilizat ca anestezic comparativ cu alte anestezice barbiturice (Methohexitone sodium). Celelalte loturi verific efectul miorelaxantelor pe hipertonia produs de Ketamin, validnd astfel modelul de spasticitate propus de noi.

n mod special s-au studiat loturile de animale anesteziate cu ketamin, n condiiile descrise, demonstrndu-se potenarea efectului miorelaxant prin combinarea unor ageni farmacologici ce acioneaz la diferite nivele (Diazepam + Baclofen i Baclofen + Dantrolen).

Dup anestezia cu Ketamin s-a executat, pe animalul fixat pe un suport, o incizie oblic pe faa intern a coapsei, punndu-se n eviden muchiul gracilis. S-a

Farmacologie Lucrri practice

procedat apoi la izolarea nervului femural printr-o disecie atent a aponevrozei i a muchiului gracilis pentru a evita sngerrile masive. Dup izolare nervul a fost ncrcat pe ansa electrodului de stimulare, la aproximativ 5mm profunzime n grupul muscular format din muchii vastus lateralis i rectus femori (fig. 14).

Fig. 14: Modelul animal S-au folosit electrozi de culegere: - aciculari - au fost inserai la 2 - 3 mm profunzime n grupul muscular format de vastus lateralis i rectus femori, - de suprafa - utilizai pentru electromiograma global, electrozii au fost plasai pe suprafaa aceluiai grup muscular, - pentru potenialele evocate corticale au fost confecionai, n acest scop, electrozi de suprafa concentrici, focali, din argint. n cazul culegerii electromiogramei globale, electrozii (confectionai special) au fost plasai pe suprafaa aceluiai grup muscular (fig.15).
10.0000

0.05924

5.00000

0.03949
Magnitude EM G1 mV

0.01974

-5.00000

0.00000

1.0000

2.0000

3.0000 seconds

4.0000

0.0000

122.50

245.00 Hz

367.50

Fig. 15: Tonus muscular crescut evideniat pe traseul EMG nregistrat cu electrod coaxial monofilar; anestezie cu Ketamin. Analiza spectrala a semnalului arata creterea numrului de componente de frecven.

mV

0.00000

Farmacologie Lucrri practice

nregistrarea electrofiziografic a modificrilor contraciei musculare s-a fcut simultan: a potenialului evocat periferic - PEM i a potenialului evocat central PEC (fig.16, 17)
0.88751 0.44375

Analog input

0.00000

-0.44375

0.51001

Analog input

0.00000

-0.51001

-1.02003 50.000 100.00 milliseconds 150.00 200.00

Fig. 16: nregistrarea simultan a potenialului evocat muscular (PEM) i a potenialului evocat central (PEC) tehnica medierii on-line. PEM : latena 2.5 ms . Potenialele cu laten de 45 ms ar putea fi poteniale H declanate pe calea arcului reflex

6.23996

3.11998

Channel 1

0.00000

-3.11998

0.0000

6.5000

13.000 milliseconds

19.500

Fig. 17: Potenial evocat muscular mediat: laten 2,1 ms, amplitudine 7,2 mV. Tehnica medierii off line

Pentru a putea valida modelul experimental s-au urmrit strict diferenele dintre civa parametri n hipertonia produs de ketamin i modificrile acestora dup administrarea de miorelaxante (fig. 18 i 19): nregistrarea activitii spontane arat o cretere a acesteia n cazul anesteziei cu ketamin, n timp ce dup administrarea de diazepam, arat o activitate spontan diminuat. Indicele de integrare a semnalului (aria cuprins de semnal) arat o diferen: n anestezia cu ketamin de 0,0553 mV/s, iar dup administrarea de diazepam scade pn la 0,0404 mV/s.

mV

Volts

Volts

Farmacologie Lucrri practice

Puterea medie a componentelor de frecven pentru primul semnal (ketamin) este de 1,2 x 10-3, iar dup administrarea de diazepam, puterea medie a componentelor de frecven din spectru scade la 1,22 x 10-5.
2.00000 0.01123

1.00000

0.00749

Magnitude

EMG1

mV

0.00000

0.00374

-1.00000

0.00000

A. Fig. 18:

14.500

15.000 seconds

15.500

16.000

B.

0.0000

122.50

245.00 Hz

367.50

A. Electromiograma dup anestezia cu ketamin (cretere a activitii spontane). Indicele de integrare al semnalului este 0.0553 mV/s B. Spectrul de putere frecven al acestui semnal: puterea medie a componentelor de frecven este de 1.2 x 10 3.

2.00000

mV

0.01033

1.00000

0.00688
EM G1

mV

0.00344

-1.00000

0.00000

A Fig. 19:

28.000

28.500

29.000 seconds

29.500

0.0000

122.50

245.00 Hz

367.50

A. Dup administrarea de diazepam: activitate spontan diminuat - scderea indicelui de integrare pn la 0,0404 mV/s. B. Puterea medie a componentelor de frecven din spectru scade la 1,22 x 10-5. *** n concluzie, programele de calculator ofer astzi o larg palet de aplicaii n cercetarea farmacologic, de la producerea de noi medicamente i simularea mecanismelor intime de interaciune medicament-receptor la

mV

0.00000

Magnitude

Farmacologie Lucrri practice

procesarea seriilor de date obinute din studiul experimental i clinic din farmacocinetic, farmacodinamic i toxicologie. Dei facilitile oferite de aceste programe sunt numeroase, ele trebuie utilizate n cunotin de cauz, avnd permanent n vedere mai ales limitele utilizrii computerului n cercetare; orice folosire neadecvat sau n exces poate masca fenomenele reale sau poate duce la interpretri eronate. Principalul scop al utilizrii programelor de computer este de a ptrunde n intimitatea proceselor de interaciune medicament-receptor care reprezint un mare pas spre obiectivul major al farmacologiei - tratamentul intit.

Lp 13-Teste de comportament pentru studiul durerii. Evaluarea capacitii de explorare la oarece; influena comportamentului spontan; parametric fiziologici modificai de durere (respiraia, temperatura)
D. TESTE IN VIVO D.1. Evaluarea experimental a algeziei i analgeziei prin mecanism periferic
D. 1.a. Introducere
Multe din aa numitele analgezice periferice prezint proprieti antiinflamatoare, iar n unele cazuri prezint i efect antipiretic, pe lng efectul analgezic. Pentru multe dintre ele, a fost elucidat mecanismul de aciune ; acesta const n inhibarea ciclooxigenazei din calea de sintez a prostaglandinelor. Fr ndoial, noile analgezice periferice trebuie s fie testate nu numai pentru activitatea in vitro asupra ciclooxigenazei, dar i pentru activitatea in vivo. Cele mai comune metode

Farmacologie Lucrri practice

de msurare a activitii analgezice periferice sunt testele writhing la oarece, cu diferite modificri, i testul Randall-Selitto la obolan.

D.1.b. Testul contorsionrii (writhing test)

Durerea este indus prin injectare de substane iritante n cavitatea peritoneal la oareci. Animalele reacioneaz cu o modificare caracteristic a comportamentului, de ntindere, numit contorsionare. Testul este potrivit pentru detectarea activitii analgezice, dei unii ageni psihoactivi au efecte asemntoare. Un agent iritant, cum ar fi fenilquinona sau acidul acetic, este injectat intraperitoneal la oareci, dup care se evalueaz reacia de ntindere. Reacia nu este specific pentru substanele iritante. Experienele se efectueaz prin observarea i contorizarea numrului de contorsiuni la lotul tratat, cu un eventual analgezic, fa de lotul de control i calcularea procentului de inhibiie obinut la momentul cu numr maxim de manifestri. De regul, nu sunt considerai utili ca analgezice produii ce determin inhibiie sub 70%. Testul nu este deosebit de specif ic pentru analgezicele periferice, deoarece i unele analgezice centrale determin rspuns pozitiv. Metoda a fost adaptat i la obolani. Observaiile se pot face i prin tehnici video cuplate la computer.

D. 1.c. Testul evalurii durerii n esutul inflamat (Randall-Selitto)

Aceast metod pentru msurarea activitii analgezice este bazat pe principiul creterii sensibilitii la durere n inflamaie i a modificrii sensibilitii sub aciunea analgezicelor. Inflamaia scade pragul de reacie la durere i acest prag de reacie sczut poate s creasc uor, att sub aciunea analgezicelor nenarcotice de tipul salicilai -amidopirin, ct i sub aciunea analgezicelor narcotice. Drojdia de bere a fost utilizat ca inductor al inflamaiei, prin care durerea crete dup compresia zonei inflamate. Experienele se fac pe obolani, care primesc intraplantar substana inductoare a inflamaiei i per os sau sc, substana potenial analgezic. Evaluarea se face cu un algezimetru (analgimetru) pe intervale bine definite de timp, iar gradul de inhibiie este apreciat comparativ fa de valorile maxime din lotul de control. Prin acest test sunt discriminate analgezice le periferice, care influeneaz pragul durerii numai n laba inflamat, de analgezicele centrale (tip morfinic) care influeneaz pragul durerii i n adjuvant Freund, prostaglandine, interleukine etc.).

D.1.d. Evaluarea durerii viscerale

Modelele animale, desemnate s testeze eficacitatea agenilor analegezici mpotriva durerii viscerale, se bazeaz n mod tipi c pe iritaia chimic nociceptiv a peritoneului de exemplu, testele bazate pe acid acetic i fenilquinon. Considerente de ordin etic mpiedic repetarea evalurii la un singur animal, aceste constituind o dificultate n evaluarea apariiei toleranei la agenii analgezici. Pentru a depi aceste constrngeri, a fost pus la punct un model de durere mecanic viscerala bazat pe distensia repetat i reversibil a duodenului la obolan (Coburn i colab., 1989) Se utilizeaz un balona cateter introdus n duoden prin gastrostomie la un obolan anesteziat. Cateterul este tunelizat la piele i poate fi cuplat la dispozitive de msurare presiunii n urmtoarele zile dup intervenie. Se aplic o distensie calibrat asupra duodenului, pr in umflarea balonaului, i se urmresc modificrile comportamentale ce trdeaz durerea, dup un scor standard. Se apreciaz, comparativ, loturi de control (cu ser fiziologic i/sau cu indometacin), fa de lotul cu substana de cercetat. Testul s-a dovedit a fi pozitiv la indometacin i morfin i negativ la aspirin.

D.1.e. Antagonizarea efectelor locale la bradikinin

Bradikinina poate fi utilizat ca stimul nociceptiv, dac este administrat intraarterial. De trei decenii, acest test ce se poate efectua pe obolani (dar i pe oareci, ip ; cobai, id; iepuri, pisici i cini, ia) a fost utilizat prin testarea unor produi potenial analgezici. Substana de cercetat se administreaz sc sau ip, cu 15 minute nainte de injectarea dozei prag de bradikinin (testat anterior). Rspunsuri pozitive se nregistreaz att la opiacee, ct i la derivaii salicilici sau pirazolonici.

D.1.f. Efectele unor analgezice periferice la nivel spinal

Pentru analgezicele sus-menionate, n ultimii ani, s-au adunat date care tind s arate si mecanisme spinale i supraspinale de aciune. Aceast ipotez a fost verificat prin metode electrofiziologice ce culegeau informaii de la pisici i obolani ane steziai, la care se provocase artrit acut, animalele fiind stimulate mecanic. Potenialele de aciune erau culese de la nivelul neur onilor spinali (dup laminectomie), amplificate, filtrate si analizate pe PC. Aa s-a pus n eviden o aciune antinociceptiv la nivelul spinal a metamizolului (Algocalmin). S-a mai descris i un model ce utiliza preparate cuprinznd mduva spinrii - coada la obolani nou-nscui. Stimularea se fcea cu bradikinina, capsaicin sau ser fiziologic cald (50 C).

Farmacologie Lucrri practice

D.2. Evaluarea experimental a algeziei i analgeziei prin mecanism central

D.2.a. Introducere
Sunt numeroase testele care evideniaz aciunea analgezic, obinute prin mecanisme centrale. Nu se poate face ns o discriminare uoar (net) ntre diferitele tipuri de analgezice i de aceea au fost imaginate teste ce pot nuana n cadrul acestor mecanisme. laba intact. Au fost utilizai i ali ageni proinflamatori, n afar de drojdia de bere (carrageenan, adjuvant Freund, prostaglandine, interleukine etc.).

D.1.d. Evaluarea durerii viscerale

Modelele animale, desemnate s testeze eficacitatea agenilor analegezici mpotriva durerii viscerale, se bazeaz n mod tipi c pe iritaia chimic nociceptiv a peritoneului de exemplu, testele bazate pe acid acetic i fenilquinon. Considerente de ordin etic mpiedic repetarea evalurii la un singur animal, aceste constituind o dificultate n evaluarea apariiei toleranei la agenii analgezici. Pentru a depi aceste constrngeri, a fost pus la punct un model de durere mecanic viscerala bazat pe distensia repetat i reversibil a duodenului la obolan (Coburn i colab., 1989) Se utilizeaz un balona cateter introdus n duoden prin gastrostomie la un obolan anesteziat. Cateterul este tunelizat la piele i poate fi c uplat la dispozitive de msurare presiunii n urmtoarele zile dup intervenie. Se aplic o distensie calibrat asupra duodenului, pr in umflarea balonaului, i se urmresc modificrile comportamentale ce trdeaz durerea, dup un scor standard. Se apreciaz, comparativ, loturi de control (cu ser fiziologic i/sau cu indometacin), fa de lotul cu substana de cercetat. Testul s-a dovedit a fi pozitiv la indometacin i morfin i negativ la aspirin.

D.1.e. Antagonizarea efectelor locale la bradikinin

Bradikinina poate fi utilizat ca stimul nociceptiv, dac este administrat intraarterial. De trei decenii, acest test ce se poa te efectua pe obolani (dar i pe oareci, ip ; cobai, id; iepuri, pisici i cini, ia) a fost utilizat prin testarea unor produi potenial analgezici. Substana de cercetat se administreaz sc sau ip, cu 15 minute nainte de injectarea dozei prag de bradikinin (testat anterior). Rspunsuri pozitive se nregistreaz att la opiacee, ct i la derivaii salicilici sau pirazolonici.

D.1.f. Efectele unor analgezice periferice la nivel spinal

Pentru analgezicele sus-menionate, n ultimii ani, s-au adunat date care tind s arate si mecanisme spinale i supraspinale de aciune. Aceast ipotez a fost verificat prin metode electrofiziologice ce culegeau informaii de la pisici i obolani anesteziai, la care se provocase artrit acut, animalele fiind stimulate mecanic. Potenialele de aciune erau culese de la nivelul neur onilor spinali (dup laminectomie), amplificate, filtrate si analizate pe PC. Aa s-a pus n eviden o aciune antinociceptiv la nivelul spinal a metamizolului (Algocalmin). S-a mai descris i un model ce utiliza preparate cuprinznd mduva spinrii - coada la obolani nou-nscui. Stimularea se fcea cu bradikinina, capsaicin sau ser fiziologic cald (50 C).

D.2. Evaluarea experimental a algeziei i analgeziei prin mecanism central

D.2.a. Introducere
Sunt numeroase testele care evideniaz aciunea analgezic, obinute prin mecanisme centrale. Nu se poate face ns o discriminare uoar (net) ntre diferitele tipuri de analgezice i de aceea au fost imaginate teste ce pot nuana n cadrul acestor mecanisme. D2b Testul compresiei COZII Metoda tail-clip - Haffner) Aceast venerabil metod mecanoanalgezic, publicat acum 70 de ani, se bazeaz pe principiul scderii sensibilitii la durere a cozii oarecelui, dup administrarea de analice opioide. Se utilizeaz o pens arterial pe treimea superioar a coz ii oarecelui la baza cozii). Se compar timpul de reacie (mucarea pensei) la animalele pretratate fat de lotul de control. Testul este caracteristic pozitiv pentru opioizi i negativ pentru derivaii salicilici. O variant tardiv a testului s-a realizat prin clamparea lbuei de cobai (Collier, 1965).

Farmacologie Lucrri practice

D2 c, Testul retragerii cozii la temperaturi ridicate (tail-flick)

Este un test util pentru difereniere ntre analgezicele opioide i neopioide i const n proiectarea pe coada animalului (oarece, obolan) a unui fascicol concentrat de lumin, generator de cldur, care determin animalul s retrag coada n interval de secunde. Testul este foarte fidel pentru opioizi i aproape nesemnificativ la derivaii fenilacetici sau salicilici.

El a fost modificat n timp i adaptat i la alte zone ale corpului (suprafaa plantar, ureche) sau la alte surse de cldur (laser).

D.2.d. Testul plcii nclzite (hot plate)

oarecii sau obolanii plasai pe o plac nclzit la temperatura de 55 -56 C tind s sar i s-i ling lbuele posterioare, dei temperatura aceasta nu d leziuni cutanate. Timpul de reacie este mult prelungit dup administrarea de analgezice centrale" i mult mai puin afectat n preadministrarea de analgezice de tip periferic. Animalele sunt urmrite timp de 90 de minute, comparndu -se cu lotul de control. Rezultatele fals pozitive pot s apar la utilizarea de substane cu proprieti sedative, miorelaxante sau psihotomimetice.

D.2.e. Testul imersiei

Se msoar timpul de retragere a cozii obolanului plasat cu ultimii 5 cm n apa de 55 C, timp de 15 s. n mod obinuit,
animalul retrage coada n cteva secunde. Animalele sunt testate periodic, timp de 6 ore, comparndu-se lotul tratat cu lotul martor. Testul este pozitiv pentru derivaii opioizi cu aciune central. S-au ncercat i variante ale testului: a) de specie (oarece, maimu); b) de temperatur (58C sau - 10 C ; ap + etilenglicol).

D2.f. Testul electrostimulrii cozii

O pereche de electrozi plasai pe coada unui oarece, electrozi prin care se transmite curent electric (sub form de ocuri sau prin amplificare) determin o reacie de rspuns in 3-4 secunde. Analgezicele de tip opioid prelungesc n mod semnificativ acest interval, fa de cele neopioide. O variant a metodei utilizeaz ultrasunetele n locul curentului electric. P.2.g. Testul electrostimulrii labelor (testul grilajului - Grid shock test) Camerele de plastic prevzute cu un perete inferior sub form de grilaj de srm, prin care circul un curent electric reglabil, sunt folosite ca spaiu pentru experimentele pe oareci sau obolani. Curentul electric determin tresriri de durere sau tendina de a sri, reacii nregistrate pe osciloscop. Timpul de reacie apare mrit la opioizii agoniti i la acidul acet ilsalicilic. O alt variant ce utilizeaz benzi metalice n loc de srm (Charlier, 1961), n vederea stimulrii dureroase a labelor, a fost numit pododolometrie".

D.2.h. Testul electrostimulrii pulpei dentare

Metoda, aplicat iniial la iepuri, a fost apoi adaptat pentru cini i obolani i se bazeaz pe stimulri electrice ale pu lpei dentare dup plasarea de electrozi la acest nivel (sub anestezie). Fiecare animal este propriul su martor. Dup determinarea pragului de rspuns (lingere, muctur, retragerea capului), se administreaz substana de cercetat i se apreciaz diferen a la timpul de reacie, ntr-un interval de 120 minute, la administrri orale, i 60 minute, dup administrare iv. Derivaii opioizi

dau un rspuns intens pozitiv, dar testul apare pozitiv i pentru ketamin i pirazolone.
D.2.i. Testul electrostimulrii progresive la maimu
Maimua este aezat pe un scaun electric i primete 29 de ocuri electrice progresive, cuprinse ntre 0 i 4 mA. Animalul este condiionat s opreasc ocul prin apsarea unui levier. Dup o testare martor n ziua urmtoare, acelai animal este testat dup administrarea substanei de cercetat. Testul este utilizat pentru stabilirea eficacitii unui nou analgez ic, nainte de a fi administrat la om. Acest test este sofisticat i scump.

D.2.j. Testul cu formalin la obolan

Este un test chimic, bazat pe activitatea iritant dat de soluia de formalin 5 -10%, injectat intraplantar la obolan. Animalele sunt observate timp de 60 de minute, urmrindu-se un scor ce traduce modificrile comportamentale ce nsoesc durerea (lins, muctur, ridicarea labei etc.). Se consider aciunea analgezic, situaia n care animalul nu ridic lbuele de la sol. Testul este pozitiv Ia analgezicele centrale i negativ pentru cele cu mecanism periferic. El este un model de durere cronic i permite disocierea ntre durerea inflamatorie i neinflamatorie. Unii autori insist asupra rspunsului bifazic, tipic pentru acest test, i arat c, n timp ce morfina inhib ambele faze, analgezicele neopioide inhib numai faza tardiv.

Farmacologie Lucrri practice

E. EVALUAREA DURERII LA OM
Dou aspecte principale vor fi tratate n acest capitol, i anume : evaluarea durerii provocate la voluntari sntoi i apre cierea caracteristicilor acesteia la bolnavul cu dureri. Metodologia pentru voluntarii sntoi include teste asemntoare cu cele utilizate uneori la animale, doar c aici intervine factorul psihic, ceea ce deplaseaz investigaiile n domeniul psihofiziologiei. Deoarece, de regul, experimentul se efectueaz dup ce s-au obinut date de la alte specii, inclusiv primate, devine necesar de a corobora aceste date cu experienele senzoriale exprimate de fiine umane la care se aplic acelai tip de stimul. O astfel de investigaie are valoare: _ teoretic - permite acumularea de cunotine privitoare la sistemele nociceptive; _ practic - acumuleaz date fiziologice i psihologice privitoare la eficiena terapeutic a unor noi ageni analgezici.

E.1. Pragul durerii. Tolerana la durere

Iniial, s-a considerat important a se determina doar pragul dureros, adic doar acel minim nivel de stimulare care determin subiectul s confirme durerea. Ulterior, s-a introdus i conceptul de toleran Ia durere, care traducea fie tipul n care putea fi suportat un stimul dureros continuu, fie intensitatea maxim tolerabil a unui stimul. Cu toate c aceti parametri sunt relativ simplu de determinat, totui metoda are limite care in att de aprecierea subiectiv, ct i de dificultatea de a discrimina sensibilitile supraliminale. Aprecierea unidimensional se face cu urmtoarele metode: - metoda limitelor (Fruhstofer, 1976). Se utilizeaz un stimul termic care pleac dintr -o zon neutr, fie n ordine cresctoare, fie descresctoare, pn se termin pragul dureros la cldur sau la frig; - teoria deciziei senzoriale (SDT) st la baza unor metode de scalare a comportamentului la durere mai sofisticate, n care analiza se face att asupra pragului dureros, ct i asupra senzaiilor observate la stimulii supraliminali. Se apreciaz ast fel att criteriile subiective de apreciere a durerii, ct i capacitatea de discriminare ntre doi stimuli; - procedeul dozrii stimulului (sus-jos"). n acest procedeu de determinare a pragului dureros se procedeaz interactiv, i anume un rspuns pozitiv determin scderea intensitii stimulului urmtor i invers. Exist mai multe tipuri de scri utilizate: - scara vizual analog (VAS) - const ntr-o rigl care la un capt are marcat un punct reprezentnd lipsa de durere", iar la cellalt capt, durere insuportabil" (unele scale evolueaz de la alb la rou intens). Subiectul apreciaz cu ajutorul unui cursor intensitatea durerii percepute. Reversul riglei este prevzut cu o scar numeric pe care observatorul poate citi cifr a de control, ce va permite cuantificarea i ulterior analiza statistic (vezi anexele). Aceste tipuri de scri au fost utilizate nu numai pentru studiul intensitii senzaiilor dureroase, ci i pentru evaluarea eficacitii unor ageni farmacologici sau nefarmacologici. Ele au nlocuit foarte limitatele scri verbale cu patru trepte (durere uoar, moderat, intens, foarte intens). - estimarea magnitudinii este un procedeu n care subiectul apreciaz magnitudinea senzaiei evocate de ctre primul stimul printr-un numr i a stimulilor urmtori printr-un coeficient aplicat acestora (de exemplu, este de dou ori mai intens sau de dou ori mai slab). Metoda este util n cazul stimulilor negradai. Aprecierea bidimensional se bazeaz pe scri concepute pentru a rspunde la urmtoarele ntrebri: 1. Ct de intens este senzaia de durere pe care o simii ? 2. Ct de mult v deranjeaz aceast senzaie ? S-a introdus astfel noiunea de scar hedonic", ce funciona pe baza senzaiilor de plcere -neplcere, investigndu-se astfel componenta afectiv prin introducerea de aprecieri ca: disconfort, extenuare, suferin etc. Acest tip de apreciere are avantajul de a utiliza un limbaj comun pentru diversele tipuri de durere, precum i faptul c poat e fi aplicat att n modelele de durere acut, ct i cronic. Aprecierea multidimensional se realizeaz cu diferite scri ce apreciaz nu numai pragul durerii, ci i diversele reacii motorii, vegetative, verbale i psihoafective. Iniial conceput pentru a investiga multiplele faete ale personalitii subiectului (n psihiatrie), testul Minessotta Multiphasis Personality Inventory (MMPY) a fost apoi adaptat la evaluarea durerii. Sunt cuprinse n acest chestionar cele 550 de ntrebri, grupate pe domenii, ce includ starea somatic, starea psihic i comportamentul social. Este mai puin folosit n studiile pe voluntari, fiind util n analiza durerilor cronice.

Farmacologie Lucrri practice

Mai utilizat a fost chestionarul McGill (McGill Pairi Questionnaire - MPQ) propus de Melzack i Torgerson (1978), ce urmrete 20 de categorii generale de caracterizare a durerii n care sunt cuprinse 78 de itemuri, toate aceste permind aspectele de evaluare, caracteristicile senzoriale i cele afective. Chestionarul a fost utilizat pentru caracterizarea durerii acute i cronice. Ulterior, autorii (McGill i Melzack) au elaborat i o form mai redus a chestionarului, care permite n clinic o economie de timp. Acest chestionar are avantajul de a permite o difereniere mai fin ntre diferitele tipuri de senzaii ce caracterizeaz var iate sindroame dureroase i de a obine i un index de clasificare.

Evaluarea durerii acute si cronice la bolnavi

*

Principiile i metodologia descrise anterior pentru evaluarea experimental a durerii sunt utilizate i n clinic, dar trebu ie menionat c aici este necesar s se ia n calcul i aspectele subiective, cognitive, motivaionale, aspecte care uneori includ raportri false, discordante, exagerate. De aceea metodologia folosit, bazat pe teste psihologice de finee, este astfel conceput nct s poat reduce sau exclude exagerrile, devierile psihice, stimularea etc.. Se utilizeaz sistemele de scalare (vizual analog, numeric, verbal, descriptiv de tonalitate, pictural sau mixte) - vezi anexele - dar i sistemele de evaluare comporta mental sau chestionarele menionate (MMPY sau MPQ), precum i altele alctuite anterior. O astfel de scar este DDS (Decriptor Differential Scale), care cuprinde tehnic sofisticate care s elimine deficienele celorlalte metode. DDS are dou pri, una
ALGEZIOLOGIE GENERAL

apreciind intensitatea durerii i cealalt, dimensiunea hedonic"(senzaia de neplcere). Bolnavul are posibilitatea de a urmri 12 caracteristici ale durerii pe care le apreciaz, pentru fiecare, pe o scar cu 21 de puncte de la minus la plus (0 -20), valoarea 10 reprezentnd aprecierea intensitii i suferinei la debutul investigaiei. Determinri fcute de autori (Gracely, 1988) n cazul durerii postoperatorii au confirmat valoarea de obiectivare i reproductibilitate a metodei. Dincolo de aceste metode ce evalueaz aspectele comportamentale sau intensitatea durerii, exist metode clinice i paraclinice care pot da informaii asupra procesului dureros. Astfel, menionm: - frecvena cardiac; - presiunea arterial; - frecvena i amplitudinea respiraiilor; - diametrul pupilar; - electrocardiograma; - termografia electronic n infrarou; - cervicotomografia (numai pentru evaluarea mobilitii cervicale la durere); - dozare endorfinelor n LCR (acestea scad n durerea acut i cronic). Ne exprimm convingerea c nceputul mileniului urmtor i va nzestra pe algeziologi cu metodologii mai selective pe msur ce cunotinele despre fiziologia sistemului nervos se vor completa i mecanismul complex al producerii i evoluiei fenomenului algezic se va clarifica.

Demonstrarea experimental a aciunii analgezice a unor substane.

Aciunea analgetic att a analgeticelor narcotice ct i a celor nenarcotice se poate evidenia prin urmtoarele teste :

1. TESTUL PLCII FIERBINI ( hot-plate; Woolfe- Mc Donald)

Farmacologie Lucrri practice

Se utilizeaz o incint metalic cu pereii dubli ntre care circul ap fierbinte cu ajutorul unei rezistene electrice termostatate. Temperatura este meninut la 56-580. Se lucreaz cu trei loturi de oareci albi de ambele sexe. Lotul 1- martor i nu primete nici o substan Lotul 2- primete morfin 20 mg / kg.c. intraperitoneal Lotul 3- primete noraminofenazon adic algocalmin 100 mg / kg.c.Testarea se face la o or dup administrarea celor dou substane. Se cronometreaz timpul de la introducerea animalului n incinta metalic i pn cnd se ridic pe labele posterioare i i linge labele anterioare semn c a perceput o senzaie dureroas acut. Rezultate Lotul martor : oarecii reacioneaz Loturile pretratate au o durat de toleran mai mare, iar cel tratat cu morfin mult mai mare dect cel tratat cu noraminofenazon. intraperitoneal

2. TESTUL PERIOADEI DE LATEN LA DURERE Pentru a msura timpul de laten pn la apariia durerii atunci cnd coada unui oarece este inut n ap fierbinte se plaseaz animalele tratate ca la experiena anterioar astfel nct numai coada animalului s rmn afar. Ea se va introduce n ap la 580C. n funcie de intensitatea durerii exist trei faze de micare a cozii: prima faz format din 1-3 micri lente a doua faz din cteva micri rapide a treia faz micare brutal i intens a cozii nsoit sau eventual precedat de un ipt.

Farmacologie Lucrri practice

Animalele care au fost tratate cu analgezice suport mult mai bine i au o perioad lung de laten la durere. 3.TESTUL DE TOLERAN LA STIMULII MECANICI Se utilizeaz 3 loturi de obolani pretratai ca n experienele anterioare. Coada oarecelui se introduce ntr-un dispozitiv ce permite comprimarea gradat cu ajutorul unui piston asupra cruia se exercit o presiune ce poate fi mrit sau micorat cu ajutorul unui aparat de tip tensiometru dotat cu manometru ( se poate efectua experiena i cu o clem simpl cu sistem de cremaliere). Se determin presiunea cea mai mic aplicat asupra cozii obolanului la care el scoate un ipt de durere. La animalele cu medicamente analgetice se constat c scot iptul la o presiune superioar celei la care percep durerea animalele martori. n cazul n care sunt inute la presiunea la care lotul martor scoate imediat iptul de durere, suport un timp mai ndelungat aceast presiune fr a resimi durerea.

Demonstrarea experimental a aciunii antiinflamatoare nesteroidiene Vom evidenia aciunea antiinflamatoarelor , a unor substane asupra edemului inflamator acut al labei de obolan. MATERIAL I METODA Se lucreaz pe dou loturi de obolani albi de ambe sexe, aduli cu greutatea de 150 - 160 gr. La ambele loturi se provoac un edem inflamator acut la una din labe prin injectarea subcutan n partea lipsit de pr a labei GARAGENINA

Farmacologie Lucrri practice

( soluie 1% ) 0,1 0,2 ml sau terebentin sau drojdie de bere suspensie 20% n ap 0,1 0,2 ml. La toate animalele se produce edemul cu aceeai cantitate de substan inflamatorie. La unul dintre loturi se administreaz parenteral de regul intraperitoneal: 1. Indometacin sodic 15 mg / kg.c. 2. Fenilbutazon 40 mg / kg.c. Volumul labei obolanului se determin pletismometric prin introducerea labei piciorului ( pn la articulaia gleznei ) ntr-un rezervor cu mercur aflat n legtur cu un sistem tubular gradat ( se poate determina modificarea de volum a labei obolanului).

Se determin volumul labei la fiecare obolan nainte i dup administrarea substanei cu aciune antiinflamatorie ( imediat dup producerea edemului). Se determin apoi la o or, 2 ore, 3 ore, etc., 24 ore dup producerea edemului. Se determin volumul labei att la lotul tratat ct i la cel netratat (martor). Rezultatele sunt interpretate statistic : - se observ c dup o or, dar mai ales dup dou, trei ore apar diferene semnificative de volum la lotul martor i la lotul tratat cu antiinflamatoare. - reducerea volumului labei semnific o aciune antiinflamatoare de diminuare a loc ca urmare a creterii permeabilitii vasculare). extravazrii de lichid ( ce are

Lp 14-Interaciuni i incompatibiliti medicamentoase. Farmacovigilena. Interaciuni medicamentoase

Farmacologie Lucrri practice

Curent, n terapie se asociaz medicamentele: - separate (tipizate 3 4 tipuri de medicamente) - fie cuprinse n aceeai form farmaceutic Interaciunile pot aprea: - naintea ptrunderii n organism ca urmare a unor fenomene de ordin fizico-chimic - dup ptrunderea n organism prin: - interferene de ordin farmacocinetic - interferene de ordin farmacodinamic

Interferene de ordin farmacocinetic 1. Asupra procesului de absorbie: - Modificarea cantitii (fraciei F) din doza total D - Scderea F duce la scderea biodisponibilitii Creterea F duce la creterea cantitii absorbite, creterea efectului i a riscului de
Exemplu: - digoxina - anticoagulantele orale

toxicitate latitudinea terapeutic mic i pot

deveni repede toxice)

(au indicele terapeutic mic i

- Modificarea procesului de absorbie a unui medicament de ctre alt medicament se poate datrora: - Inactivrii

Farmacologie Lucrri practice

- Complexe neabsorbabile - Modificrii motilitii gastro-intestinale - Modificarea pH ului sucului gastric sau intestinal care favorizeaz ionizarea, deci scade absorbia (forma ionizat este neliposolubil, deci trece greu prin membrane) Exemplu: acidul acetilsalicilic se absoarbe mai bine cnd pH-ul este mai ridicat deoarece se dizolv mai bine n mediu alcalin - Medicamentele se pot combina n tubul digestive formnd complexe ce influeneaz pozitiv sau negative absorbia Formeaz chelai cu calciu, fier, magneziu i aluminiu -nu se administreaz concomitant cu antiacide i cu preparate de fier Trisilicatul de magneiu Absoarbe digoxina mpiedicnd dizolvarea i diminundu-I biodisponibilitatea Hidroxidul de magneziu Formeaz cu furosemidul un complex neresorbabil -Formeaz cu dicumarolul un complex mult mai nuor absorbabil dect anticoagulantul singur - Flora intestinal influeneaz unele medicamente (ex. Salazopirina este inactivat, iar unele antibiotic ce distrug flora intestinal au efecte dimunuate) tetraciclina - Modificarea motilitii intestinale influeneaz absorbia (ex. Metoclopramida prin accelerarea golirii stomacului face ca alcoolul, acidul acetil salicilic, paracetamolul administrate concomitant s se absoarb mai repede(effect imediat).

Farmacologie Lucrri practice

- Interaciunile medicamentoase pot modifica absorbia medicamentelor administrate pe alte ci dect cea oral (ex. Lidocaina + vasoconstrictor Adrenalina se combin pentru a ntrzia preluarea anestezicului de la locul injeciei prelungindu-I efectul local) 2.Interaciunile asupra distribuirii medicamentelor se datoreaz: - modificrii distribuiei regionale a fluxului sangvin - deplasrii de pe proteinele plasmatice, exemple: Propranololul Scade fluxul sangvin hepatic, Micoreaz metabolizarea lidocainei, deci crete riscul de reacii toxice Deplaseaz ADO ccrescndu-le efectul Poate fi deplasat de la locul de fixare pe esuturi de chinidin, verapamil, nifedipin, mrind concentraia sa plasmatic

Acidul acetilsalicilic Digoxina

3. Interaciuni asupra metabilizrii medicamentelor - unele medicamente inhib enzimele metabolizante (cel mai des enzimele microsomale hepatice.