HEMATOPOIEZA

Celulele, inainte de a se definitiva au o serie de etape intermediare. Exista multe etape descrise. Celulele sangvine provin din celulele stem din maduva ematopoietica. Celulele stem nu au pe suprafata lor determinanti antigenici. !e aceea celulele stem sunt folosite pentru a introduce in organism anumite gene care sunt a"sente in diverse maladii. Hematopoie#a este procesul care asigura formarea si reinnoirea continua a celulelor sangelui periferic. In general se pastrea#a un numar relativ constant de celule circulante iar ematopie#a permite si a$ustarea necesitatilor organismului de anumite tipuri celulare la un anumit moment dat. Astfel, in emoragii este crescuta sinte#a de ematii, in infectii este crecuta sinte#a de granulocite etc. %ocali#area tesuturilor ematopoietice & la adult este maduva rosie osoasa ' maduva rosie ematopoietica (M)H*. Hematopoie#a este reali#ata mai intai prin procese de multiplicare a celulelor stem si a celulelor precursoare, apoi urmea#a procesele de diferntiere, cand se intrerup divi#iunile iar celulele exprima proteine specifice pe mem"rana iar in final are loc citodia"o#a care consta in eli"erarea celulelor mature in circulatie. Hematopoie#a este un proces autointretinut. Mecanismele de reglare a ematopoie#ei sunt multe si complexe, fiind implicate molecule semnal, factori de crestere etc.

Etapele hematopoiezei
Etapa prenatala Exista mai multe locuri+ ,etapa me#o"lastica (me#enc imala, pre epatica* care durea#a in perioada %-&%. de viata intrauterina (I./.*. Hematopoie#a are loc in insulele sangvine din peretele sacului vitelin. Apar primii precursori ai celulelor liniei rosii, care au doua particularitati+ sunt nucleate si contin H" 0o1er & em"rinara (2343*. ,etapa epatosplenica+ se suprapune partial peste prima etapa, durand %3&%5 I./. %a un anumit moment este cea mai importanta (in %6&%7 I./.* dupa care scade ca importanta datorita etapei mieloide. In %.& %6 apar granulocitele iar in %7 apar limfocitele. Precursorii liniei rosii au H"8 (fetala* &23 93. Productia de H"8 scade treptat, la nastere fiind de 3: din totalul de H" pentru ca mai tar#iu sa dispara. ,etapa mieloida & de"ute#a semnificativ la sfarsitul %. & inceputul %6 I./. Ea creste ca importanta in a doua $umatate a sarcinii. Precursorii liniei rosii au H"A (adult &23 ;3*. Conceptia actuala asupra hematopoiezei -. Celula stem are capacitate migratorie asemenea limfocitelor, care au origine in M)H si se gasesc in tran#it in sangele periferic. !intr&o celula stem re#ulta -<<< de celule din sangele periferic. 3. Celula stem pluripotenta are morfologia necunoscuta. Ar fi asemanatoare monocitului sau limfocitului. .. Celulele stem circulante pot coloni#a+ a$ung din maduva osoasa in splina sau ficat care devin locuri de ematopoie#a extramedulara. 6. Celula stem sta la originea tuturor liniilor ematopoietice. Celula stem pluripotenta repre#inta o populatie de celule nediferentiate, capa"ile de diferentiere in toate liniile ematopoietice. 7. Celulele stem au capacitatea de autoreinnoire. !aca o celula stem se divide, se formea#a doua celule identice. /na o inlocuiste pe cea de provenienta, inactiva functional iar cealalta proliferea#a dand nastere elementelor figurate. Cu cat sunt mai nediferentiate, cu atat celulele au capacitate mai mare de

autoreinnoire. !escoperirea celulelor stem s&a facut la soareci, folosind celule marcate. =&a descoperit ca existau celule ce repopulau ficatul sau splina la soarecii iradiati. =&a o"servat ca exitau colonii de celule ce erau formate de o singura celula de origine. Aceste celule ce determinau colonii au fost numite unitati formatoare de colonii (celulele stem sunt deci colon> forming units & C8/*. Exista multi factori de regla$ ce orientea#a ematopoie#a spre o linie celulara. =pre exemplu eritropoietina orientea#a spre linia rosie, granulopoietina duce la formarea de granulocite iar trom"opoietina duce la formarea de plac ete. Cantitati crescute de eritropoietina duc la stimularea puternica a productiei de eritrocite. !eci, mecanismele de control al divi#iunii si diferentierii celulelor stem sunt multe si complexe.

Nomenclatura celulelor stem

Celulele stem ce determina liniile au grad de potentialitate diferit. =pre exemplu unele celule stem pot determina toate liniile (sunt totipotente* si au viata mai lunga si capacitate de autoreinnoire crescuta. Alte celule sunt pluripotente & formea#a mai multe linii dar nu toate, altele sunt "ipotente formea#a 3 linii iar altele sunt unipotente, formand o singura linie. =e considera ca prin divi#iunea celulei totipotente scade potentialitatea celulei, re#ultand o celula stem pluripotenta. !incolo de maduva spinarii exista doar celula precursoare care si&au pierdut capacitatea de reinnoire, fiind capa"ile doar de diferentiere. Criterii morfologice generale pentru liniile celulare =e permite astfel incadrarea unei celule intr&o linie celulara si plasarea intr&un anumit stadiu. Aceste criterii sunt+ -. marimea celulalor+ cu cat celula este mai tanara, cu atat este mai mare. 3. cu cat nucleul este mai mare cu atat celula este mai tanara .. cu cat raportul nucleu ? citoplasma este mai mare cu atat celula este mai tanara 6. cu cat materialul nuclear este mai eucromatic (mai putin condensat* cu atat celula este mai tanara. Aceasta se explica prin faptul ca o celula tanara transcrie cat mai multe gene pentru a le traduce in proteine. 7. Cu cat in citoplasma sunt mai multi ri"o#omi si )E cu atat celula este mai tanara. %a MO citoplasma este cu atat mai "a#ofila cu cat celula este mai tanara, datorita pre#entei unui numar mare de poliri"o#omi* @. Cu cat celula are mai multi nucleoli cu ata ea este mai tanara. Aumarul acestora poate varia+ -,3& 7 B. Existenta produsilor caracteristici unei linii celulare+ granule (dupa forma, dimensiunea si afinitatea tinctoriala aacestora se poate sta"ili carei linii granulocitare ii apartine celula*. In linia rosie, acumularea H" in citoplasma determina aparitia acidofiliei. Pe masura inaintarii pe linia celulara scade volumul celulei, scade volumul nucleului care devine mai compact (se transcrie un numar mai redus de gene pentru proteinele specifice*, scade numarul de organite, "a#ofilia citoplasmei se atenuea#a. Astfel+ ,"last ' celula tanara ,cit ' celula evoluata ,meta ' dupa ,pro ' inainte Exemplu+ In linia rosie, initial citoplasma este "a#ofila iar in final este acidofila. In etapa intermediara coexista acidofilia si "a#ofilia celula fiind policromatofila.

In maduva tre"uie sa existe un raport fix intre precursorii unei anumite linii.

Seria rosie - eritropoieza

Celula stem proeritroblast eritroblast bazofil eritroblast policromatofil eritroblast acidofil eritrocit. In linia rosie nucleul este rotund. Cantitatea de ARN scade pe parcursul evolutiei datorita scaderii sintezei proteice. Proeritroblastul ,!iametru 3<&37C m ,Aucleu ocupa D<: din volumul celulr, este eucromatic, pre#inta mai multi nucleoli ,Citoplasma este intens "a#ofila Eritroblastul bazofil ,!iametru -@&-DCm ,Aucleu necondensat, uneori se vad nucleoli, alteori nuE uneori pre#inta alou perinuclear ,Citoplasma mai putin intens "a#ofila Eritroblastul policromatofil ,!iametru -7Cm ,Aucleu destul de condensat ( eterocromatina a"undenta* ,Citoplasma isi modifica nuanta+ exista putini ri"o#omi si apare H" in citoplasma, deci coexista acidofilia si "a#ofilia. %a ME se o"serva ca numarul de organite scade foarte mult. Eritroblast ortocromatofil (aceeasi nuanta cu celula adulta - acidofil) ,!iametru -<&-3Cm ,Aucleu condensat la maxim (exista doar eterocromatina*, nu are nucleoli ,Citoplasma contine o cantitate crescuta de H" care ii determina acidofilia. %a ME se o"serva eliminarea celor mai multe dintre organite. In stadiul final celulele expul#ea#a nucleul, mem"rana celulara se reface si se formea#a reticulocitul. Reticulocitul ,!iametru BCm ,Aucleu & nu exista ,Citoplasma este diferita de cea a ematiilor adulte prin pre#enta catorva resturi de organite Ele raman -3&6D de ore in circulatie dupa care sunt eliminate. =e evidentia#a cu o coloratie speciala & al"astru de Crecil stralucitor. )eticulocitele repre#inta -: din elementele circulante. /n numar crescut de reticulocite arata o anemie. Pentru seria rosie, maduva nu este un compartiment de depo#it, toatee elementele liniei rosii fiind eli"erate in circulatie, spre deose"ire de celulele granulocitare ce pot stocate in maduva atunci cand organismul le necesita. In maduva, raportul intre precursorii liniei rosii si precursorii linie granulocitarea este invers fata de formula leucocitara, in maduva existande de .&6 ori mai multi precursori ai granulocitelor decat ai eritrocitelor. Aucleii eliminati de eritro"lasti sunt fagocitati de macrofagele din M)H. !e aceea exista o asociere intre ematopoie#a si aceste macrofage. Timpul necesar este de 3< de ore pentru primele etape, pentru ca ultimele etape sa se desfasoare lent.

Seria granulocitara
Celula stem mieloblast promielocit mielocit (neutrofil, eozinofil sau bazofil) metamielocit (neutrofil, eozinofil sau bazofil) granulocit nesegmentat granulocit segmentat. Mieloblast ,!iametru 3<Cm ,Aucleu mare, usor indentat sau oval, isi modifica conturul, are cromatina laxa si multi nucleoli raportul nucleu?citoplasma ' 6 + -, ,Citoplasma este putina, are tenta "a#ofila si nu are granule. Proeritro"lastul seamana cu mielo"lastul. Promielocitul ,!iametru -<&3<Cm ,Aucleu scade in volum, este compact, se o"serva cativa nucleoli ,Citoplasma este mai multa (volumul celular fiind constant* si se detectea#a primele granulatii (granulele primare, nespecifice, a#urofile* De la acest punct mai departe cele trei linii granulocitare se diferentiaza, dupa cum urmeaza Mielocitul neutrofil ,!iametru -DCm (celula isi reduce volumul* ,Aucleul se compacti#ea#a mult, are forma ovala, uneori rotundE materialul nuclear este granulat, eterocromatic, uneori pre#inta nucleoli, alteori nuE raportul nucleu ? citoplasma este 3 + pana la - + -. ,Citoplasma are nuanta tran#itorie intre "a#ofil si acidofil (al"astru & rosu*E pre#inta am"ele tipuri de granulatii Metamielocitul neutrofil ,!iametru -3&-DCm (volum relativ constant* ,Aucleul & conturul sau prefigurea#a forma nucleului la neutrofilul segemntat (potcoava*, are eterocromatina, nu exista nucleoli, raportul nucleu ? citoplasma este - +,Citoplasma isi modifica afinitatea tinctorial (unele sunt tran#itorii iar altele au citoplasam acidofila)! apar granulele specifice, secundare. Neutrofilele nesegmentate ,!iametru este mai mic, pana la -@Cm ,Aucleu in "anda sau su" forma de potcoava, nesegmentat ,Citoplasma este la fel ca la neutrofilul adult !in neutrofilul nesegmentat se formea#a neutrofilul segmentat si uneori neutrofilul ipersegmentat. Mielocitul eozinofil ,!iametru -DCm ,Aucleu & forma sa prefigurea#a forma nucleului viitoarei celuleE sinte#a proteinelor incepe sa scada, cromatin este mai agregata, uneori are nucleoli, alteori nuE raportul nucleu ? citoplasma este 3 + - sau - + -. ,Citoplasma are culoare tran#itorie (al"astru&rosiatic*E granulele sunt eo#inofile Metamielocitul eozinofil ,!iametru -DCm ,Aucleu are forma precis conturata (potcava, rinic i*, cromatina este mai compactaE scade raportul nucleu ? citoplasma pana la - + "Citoplasma este acidofila, granulele sunt numeroase cantitativ Eozinofilul nesegmentat (tanar) ,!iametru -@Cm ,Aucleu cu forma de potcoava, raportul nucleu ? citoplasma este - + "Citoplasma este identica cu cea a eozinofilului matur

Mielocitul bazofil ,!iametru -DCm ,Aucleu oval sau indentat, cromatina usor impac etata, raportul nucleu ? citoplasma este 3 + pana la - + ,Citoplasma are tenta al"astruie, moderata cantitativ si apar granule specifice, intens colorate Metamielocitul "a#ofil ,!iametru -DCm ,Aucleu in forma de potcoava, cromatina intens colorata, nucleolii nu se vadE scade usor raportul nucleu ? citoplasma ,Citoplasma are tenta al"astruie si granule specifice in numar mare Fa#ofilul tanar nesegmentat Are toate caaracteristicile "a#ofilului adult mai putin forma nucleului care este alungita, nesegmentata.

Seria monocitara
Celula stem monoblast monocit tanar monocit adult Monoblastul ,!iametru -3&3<Cm (se pastrea#a pe toata seria* ,Aucleu este rotund, oval, usor plicaturat, compactat, volumul sau sca#and de&a lungul liniei monocitareE raportul nucleu ? citoplasma este 6 + -. ,Citoplasma este "a#ofila, nu se vad granulatii Monocitul tanar ,!iametru -3&3<Cm ,Aucleu cu forma si aspect apropiat de cel adult (plicaturat cu cromatina dispusa in ta"la de sa *, nucleolul finnd uneori pre#entE raportul nucleu ? citoplasma . + - pana la 3 + ,Citoplasma devine a"undenta datorita compactarii nucleului, are tenta "a#ofila, exista granule fine, azurofile, vizibile la limita de rezolutie a #$.

Seria limfocitara
Celula stem limfoblast limfocit tanar limfocit adult Au toate etapele de diferentiere au loc in M)H, unele limfocite diferentiindu&se si in timus. Limfoblastele ,!iametru 3<Cm (celula mare* ,Aucleu este mai putin compactat, pre#inta -&3 nucleoliE se pastrea#a raportul nucleu ? citoplasma de 6 + - pe toata linia (caracteristica a limfocitelor* ,Citoplasma este putina si "a#ofilaE nu se vad granule citoplasmatice Limfocitul tanar ,!iametru 5&-DCm (dupa populatia careia ii apartin d.p.d.v morfologic & mari, intermediare, mici* ,Aucleu este dens, fixea#a o cantitate mare de colorant "a#ic, are rar nucleoli "Citoplasma % nu se identifica prezenta granulelor

Seria trombocitara (plachetara)

Celula stem megacarioblast promegacariocit megacariocit trombocitogen trombocite. Precursorii au talie foarte foarte mare, iar diametrul lor creste pe masura ce se apropie de fa#a finala. Aucleul este foarte mare si creste in dimensiuni de&a lungul liniei deoarece precursorii isi multiplica numarul de cromo#omi fara divi#iune. =e o"tin celule cu grad inalt de ploidie. Megacarioblastul ,!iametru 7<Cm ,Aucleu cu mai multi nucleoli, cromatina este putin compactataE raportul nucleu ? citoplasma este de 6 + ,Citoplasma este "a#ofila Promegacariocitul ,!iametru D<Cm ,Aucleu cu cromatina mai compacata dar oricum laxa, raportul nucleu ? citoplasma varia#a de la 6 + - pana la - + ,Citoplasma cu mici granule a#urofile Megacariocitul trombocitogen ,!iametru pana la -@<Cm ,Aucleu lo"ulat, intens impac etat, colorat "a#ic, fara nucleoliE raportul nucleu ? citoplasma varia#a de la - + - pan la - + -3 Citoplasma are o tenta palid al"astruie cu granule a#urofile distri"ite uniform %a sfarsitul perioadei de diferentiere megacario"lastele se atasea#a la peretele vascular, mem"rana lor emite prelungiri plicaturate, trec prin peretele vascular iar fluxul snagvin detasea#a din citoplasma megacariocitului plac ete. Pre#enta acestor celule este evidentiata prin frotiu de M)H. Exista un raport considerat normal intre precursori care constituie mielograma (medulograma*. ,- mmc M)H contine B<.<<< & -<<.<<< de cariocite. ,granulocite+ neutrofile 7<&5.: eo#inofile -&B: "a#ofile & rare ,eritrocite & -.&37,7: & la -<< de granulocite ,limfocite -&-< : & la -<< de granulocite ,monocite, plasmocite, istiocite & .&-<: & la -<< de granulocite ,megacariocite -&DG & la -<< de granulocite Aceste valori sunt varia"ile.